Metodologia no Imunodiagnóstico Coleta, conservação e remessa do material. Interpretação dos resultados.

Acurácia Concordância entre o resultado obtido e o “resultado real” Método de referência

Precisão Concordância entre várias repetições do teste. Reprodutibilidade/ Repetibilidade

Acurácia

Sem acurácia

Com precisão mas sem acurácia

Precisão e Acurácia

Pode um animal saudável ter um resultado anormal? Intervalo de

referência

SENSIBILIDADE A sensibilidade de um teste é definida pela

proporção de animais com a doença de interesse que têm o resultado do teste positivo. Indica quão bom é o teste para identificar os indivíduos doentes.Porcentagem de resultados positivos em pacientes com a doença

Uma sensbilidade de 95% significa que 95% dos pacientes com a doença serão identificados e que 5% dos pacientes terão um resultado “falso negativo”.

ESPECIFICIDADE A especificidade de um teste é a proporção

de animais sem a doença que tem o teste negativo. Indica quão bom é o teste para identificar os indivíduos  não doentes

Porcentagem de resultados negativos em pacientes sem a doença.

Uma especificidade de 95% significa que…. falso positivo.

Sensibilidade e Especificidade

DoençaPresente Ausente Total

Teste

Pos AVerdadeiro positivo

BFalso positivo

a+b

Neg CFalso negativo

DVerdadeiro negativo

c+d

Total a+c b+d

Sensibilidade= A/ (A+C)

Especificidade= D/ (B+D)

Sensível Específico

Necessário para o diagnóstico de doença potencialmente grave

Particularmente necessário quando um resultado falso positivo pode ser muito lesivo

Afastar doenças em fase inicial do diagnóstico

Confirmar um diagnóstico sugerido por outros dados

Obs: os testes sensíveis também são úteis no rastreamento (screening)

Ponto de Corte (Cut-off) Normalmente, existe uma sobreposição parcial entre os

resultados obtidos em pacientes positivos e negativos em testes quantitativos.

A escolha do ponto de corte é essencial para definição da sensibilidade e especificidade

a) Se a principal preocupação é evitar resultado falso-positivo (o resultado do teste pode indicar um tratamento arriscado para o paciente), então o ponto de corte deve objetivar o máximo de especificidade.

b) Se a preocupação maior é evitar resultado falso-negativo (um doente fica sem tratamento), então o ponto de corte deve objetivar o máximo de sensibilidade.

Teste sem sobreposição

Teste com sobreposição

ELISA

Western blot

Bandas no Western blot indicam contra que proteínas existem anticorpos no soro testado

Partícula latexPartícula latex

Aglutinação Latex

Antígenos Antígenos

Anticorpos ligam ao antígeno adsorvido no látex

positive: agglutination

Imunocromatografiaou

teste de migração lateral

HIV Antigen

Control

AmostraAmostraDo soroDo soro Conjugado

Linha doLinha doCControle

Linha doLinha doTesteTeste

IgG anticorpos Antígeno conjugado a ouro coloidal

Anticorpo anti-IgGAntígeno

Princípio: migração lateral

•Amostra migra através da membrana e anticorpos (se presentes) ligam-se ao antígeno-conjugado formando uma banda visível

Leitura

Negativo (linha controle)

Positivo