Post on 07-Apr-2016
O segredo da Vida...
Watson e Crick
A=T C=G
DNA se replica
Originando duas moléculas filhas iguais.
Como copia...
Replicação de DNA
Ligação fosfodiester
A reação de polimerização é feita pela DNA polimerase e necessita de nucleotídeos trifosfatos, uma extremidade “primer” ou iniciadora, que possui a hidroxila 3’ livre e um molde ou “template” para ser copiado.
“Bolha” de replicação
Replicação unidirecionalgera fragmentos:Fragmentos de Okazaki
DNA polimerase I tem função editorial
Seqüenciamento de DNA
Princípios
Reação com ddNTP
Produtos da reação
Leitura da seqüência
Genoma de S. cerevisae
Drosophila melanogasterCaenorhabditis elegans
Terminado em 2000
6200 genes12.147.813 nucleotídios
Fluxo da informação
Transcrição
RNA polimerase é a enzima responsável pela transcrição
Sítios de reconhecimento
Tradução necessita de adaptador
Que funciona pela complementariedade
Complementariedade
Estrutura do DNA
Complementariedade
Ligação cooperativa
quando rompida o efeito é
marcante.
Estrutura da água
Pontes de hidrogênio
no
. de
bol
has
Temperatura oC
Evaporação de água
?
no
. de
bol
has
Temperatura oC
Evaporação de água
curva de transição
Estrutura do DNA
Complementariedade
% d
esna
tura
ção
Temperatura oC
T’m
Desnaturação de DNA
Conteúdo de CG
% d
esna
tura
ção
Temperatura oC
T’m
Desnaturação de DNA
Desnaturação em função do conteúdo de GC
%C
G
T’m
Hibridação
Calor ou pH = desnaturação
Reassociação
Temperatura e força iônica
Reassociação depende da concentração das seqüências
% r
eass
ocia
ção
Cot
A velocidade de reassociação depende da complexidade do DNA
% r
eass
ocia
ção
Cot
Três classes de seqüências de DNA
Cot
% r
eass
ocia
ção