Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

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Inativação e preservação dos vírus

Inativação e preservação dos vírus

Agentes físicos e químicosAgentes físicos e químicos

Finalidade:

inativação vírus em programas de

desinfecção

inativar vírus em vacinas

preservar vírus em amostras

Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos

Temperatura:

Destruição 50oC-60oC / 30’ desnaturação proteíca;

Vírus icosaédricos + estáveis a 37oC;

Vírus envelopados + termolábeis a 37oC.

Vírus desnudos

Vírus envelopados

Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos

Temperatura:

Calor úmido

Fervura

Autoclavação

Pasteurização.

Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos

Temperatura: Calor seco

Bico Bunsen Defumaç

ão

Estufa

IncineraçãoVassoura de

fogo

Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos

Radiações:

Inativaçãodesnaturação do ácido nucléico;

Radiações ionizantes

Raio X Raio gama

Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos

Radiações não -ionizantes

Luz UV

Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos

pH:

Estabilidade entre pH de 5,0 a 9,0;

Enterovírus (exceção) resistem pH 2,0 – 3,0 inativação por ácidos fortes

Inativação ácidos fracos = hidróxido de Na álcalis = hipoclorito de Na

Inativação por agentes químicosInativação por agentes químicos

Agentes químicos:

Utilizaçãodesinfetantes produção de vacinas inativadas;

Ação depende tipo vírustempo de exposição concentraçãopresença ou não de matéria orgânica.

Agentes químicos utilizados na inativação viral

Tipos Ação Exemplos

agentes oxidantes oxidação de grupos sulfidrila hipoclorito de sódio, tintura de iodo

agentes alcalinizantes

atravessam a camada protéica e inativam o ácido nucléico

formaldeído, glutaraldeído

agentes proteolíticos

desnaturam a camada protéica

álcoóis,fenóis

agentes desnaturantes

desnaturam o ácido nucléico -propiolactona, acetiletilamina

Inativação por agentes químicosInativação por agentes químicos

Inativação por agentes químicosInativação por agentes químicos

Detergentes não iônicos:

Ação desnaturam lipídeos do envelope;

Triton X-100, Nonidet P40Tween 20

Detergentes não-iônicos

Inativação por agentes químicosInativação por agentes químicos

Detergentes iônicos:

Ação desnaturam lipídeos e podem romper protéinas

Tipos :

aniônicos, catiônicos

aniônicos Aniônicos (-)

Catiônicos (+)

Ex: derivados quaternários da amônia, lisol (cloridrato benzalcônico) deoxicolato de sódio, éter, clorofórmio

Preservação viralPreservação viral

Temperatura:

Ambiente (18 - 22oC) viabilidade viral por dias;

4oC viabilidade viral por semanas;

-20oC / - 70oC ou menos sobrevivência por meses ou anos

Congelamento e descongelamento ou perda da infecciosidade viral.

Preservação viralPreservação viral

Sais:

Sais (1 mol/L) estabilidade de muitos vírus:

Estabilidade viral produção de vacinas sais

potência duração de semanas a T.A.

MgCl2 picornavírus, reovírus

– MgSO4 ortomixovírus e paramixovírus

Na2SO4 herpesvírus

CaCl2 rotavírus

Preservação viralPreservação viral

Liofilização:

Consiste na retirada total de água;

Preservação

4oC / TA

Preservação viralPreservação viral

Glicerol:Álcool polihídrico

Soro fetal bovino:

Componente nutritivo (proteínas e

aminoácidos) tempo da preservação

viral.

Meio cultura celular