Água e Sais No Leite

Unopar - Mestrado do Leite 11/04/2015

Qumica e Bioqumica dos Constituintes do Leite 1

QUMICA E BIOQUMICA DOS CONSTITUINTES DO LEITE

Prof Dr Joice Sifuentes dos Santos

[email protected]

UNIVERSIDADE NORTE DO PARAN

MESTRADO EM CINCIA E TECNOLOGIA DELEITE E DERIVADOS

Composio do Leite

Componente %

gua 87,3%

Extrato seco total 12,7%

Gordura 3,6%

Extrato seco desengordurado 9,2%

Protenas 3,3%

Lactose 4,9%

Minerais 0,9%

Vitaminas

Enzimas

Pigmentos

Gases dissolvidos

Leite de vaca

Composio do leite

Soluo inica

Disperso coloidalMinerais

Lactose e albumina

Casena e fosfatos

Gordura

Disperso verdadeira

Disperso coloidal

Emulso

GUA

1. gua

Constituinte mais importante e mais abundante dosalimentos.

Componente de grande importncia paraarmazenamento dos alimentos.

Nutricionalmente, a gua contida nos alimentos no to importante

Alimento % gua

Leite fluido 88 90

Queijo Minas frescal ~ 60

Iogurte natural 85

Doce de leite 15 40

Leite em p 3,5 4

1.1 Importncia da gua

Essencial para a vida;

Constitui de 70-95% do peso da maioria das formasde vida. a fase contnua dos seres vivos e dosalimentos;

Estabiliza a TC dos seres vivos e do ambiente;

Transporta nutrientes e resduos;

Meio onde as reaes ocorrem, e reagente demuitas destas reaes;

Participa da conformao e estabiliza a estrutura debiopolmeros;

nica substncia abundante nos 3 estados damatria.



1.2 Importncia da gua nos alimentos

Influencia na estrutura, textura, caractersticas

organolpticas dos alimentos decisivo para

aceitabilidade dos alimentos;

Conservao (deteriorao microbiolgica ou

enzimtica).

2. Propriedades fsicas da gua

Propriedade fsica Valor

Ponto de fuso 0C a 101,3 kPa

Ponto de ebulio 100C a 101,3 kPa

Calor de fuso a 0C 80 kcal/g

Calor de vaporizao 540 kcal/g

Tenso superficial 0,0756 N/m a 0C

Capacidade calorfica 4,217 kJ/kg/K a 0C

Densidade da gua 0,999 g/cm3 a 0C

Densidade do gelo 0,917 g/cm3 a 0C

2.1 Estrutura e propriedades fsico-qumicas

2 tomos de H e 1 tomo de O (PM= 18);

2 pares de e compartilhados;

2 pares de e no compartilhados;

Solvente polar;

Estrutura tetradrica(ngulo HOH 104,5);

Pode formar pontes de H com outras 4 molculas de gua vizinhas;

Molcula da gua forma dipolo eltrico.

2.2 Molcula de gua

Cada molcula de guapode formar 4 pontes deHidrognio com outrasmolculas.

2.3 Estados fsicos da gua

VAPOR GUA LQUIDA GUA SLIDA

Molculas afastadas, raras pontes de H;

contedo de energia alto, praticamente

todas as molculas esto livres.

Formao de agregados com molculas livres

entre os mesmos, algumas pontes de H, contedo de energia

mais baixo.

Molculas fixas noretculo cristalino,

distncias 1,2 ; todas as pontes de H possveis esto

formadas. Contedo de energia baixo.

Nenhuma molcula livre.

Estrutura amorfa

vs.

Estrutura cristalina



2.4 Interaes gua-soluto

Substncias hidroflicasLigaes dipolo-dipolo ou on dipolo

Substncias hidrofbicas

Formao de micelas

Substncias eletrolticas

2.4 Interaes gua-soluto

A presena de solutos na gua modifica aspropriedades coligativas das solues:

do ponto de congelamento;

do ponto de ebulio;

da presso de vapor.

3. gua nos produtos lcteos

Elevada porcentagem de gua no correspondesempre ao maior desenvolvimento de micro-organismos ou maior velocidade de reaesqumicas;

Secagem da gua ocorre em 2 etapas de energia;

Existncia de molculas de gua no congelvel.

gua com diferentes propriedades e distribuio nos alimentos

3.1 Classificao da gua quanto ao grau de ligao

gua constitucional

Faz parte da estrutura qumica do alimento.

No removida durante a secagem.

gua de hidratao de sais e protenas.

gua vicinal

Ligada a grupamentos mais hidroflicos.

Difcil de ser removida.

Disponvel para reaes qumicas.

3.1 Classificao da gua quanto ao grau de ligao

gua multicapa

Interage com a gua vicinal ou comgrupamentos menos hidroflicos.

Mais facilmente removida que a gua vicinal.

gua livre

No sofre atrao dos constituintes do alimento.

3.1 Tipos de gua



3.1 Tipos de gua 4. Atividade de gua

Interao da gua com os outros componentes doalimento

Estado energtico da gua em um sistemaalimentar

Tendncia de escape das molculas Disponibilidade de agir como solvente e participar

de reaes qumicas e bioqumicas do alimento eno desenvolvimento de micro-organismos.

Aa= PP0

0 < Aa < 1gua puraAa = 1

4.1 Aa de produtos lcteos

Alimento Atividade de gua

Leite fluido 0,995

Leite evaporado 0,986

Leite condensado 0,97

Leite em p desnatado, 4,5% de gua 0,20

Leite em p desnatado, 3% de gua 0,10

Leite em p desnatado, 1,5% de gua 0,02

Manteiga 0,92

Queijo 0,94-0,98

Doce de leite 0,81

4.2 Fatores que influenciam a Aa

Composio do alimentoConstituintes qumicos imobilizam parcialmente

a gua

Temperatura

Atividade de gua com da temperatura

Ponto de congelamento

capacidade de evaporao reatividade qumica

Aa

Temperatura exerce maior influncia

4.2 Fatores que influenciam a Aa

Figura: Relao entre temperatura e atividade de gua dealimentos.

Ponto Crioscpico

5. Soro da gua

Soro do vapor de gua para ou a partir de umalimento depende da presso de vapor exercidapela gua no alimento.

p= presso de vapor do alimento

p0= presso de vapor da atmosfera

p < p0 Absoro (at ocorrer o equilbrio)

p > p0 Dessoro (at ocorrer o equilbrio)



5. Soro da gua

Soro de gua em produtos lcteos (assimcomo outros alimentos)

Depende dos constituintes no gordurosos

Protena Lactose

5. Isotermas de soro

a curva que indica, no equilbrio e para umadeterminada temperatura, a quantidade de guaretida ou perdida por um alimento em funo daumidade relativa da atmosfera que o rodeia.

Maioria: forma sigmide

Dois processos:

Dessoro (desidratao)

Absoro (hidratao)

Figura: Histerese de uma isoterma de soro.

5.1 Isotermas de soro Histerese

Figura: Isoterma de soro de gua de alimento combaixa umidade

5.2 Isotermas de soro

5.3 Importncia das isotermas

Processos de concentrao e desidratao;

Avaliao da estabilidade dos alimentos;

Previso do comportamento de alimentos emdiferentes UR;

Previso do efeito da variao de TC sobre aAa de um alimento em uma embalagemimpermevel.

6. Mtodos de avaliao da atividade de gua em alimentos

Mtodo instrumental

Aqualab

Utiliza o princpio do ponto de orvalho emespelho encapsulado.

A amostra colocada no equipamento,formado por uma cmara com um espelho deao inoxidvel que repetidamente resfriadae aquecida, enquanto o orvalho se forma e dissipado. O instrumento possui umaventoinha, que circula o ar e acelera oequilibrio da pressao de vapor. Quando oorvalho formado, o equipamente mede aTC e Aa da amostra, comparando comvalores posteriores at valor constante.




Avaliao atravs da Presso de vapor

Em um recipientehermeticamente fechado, oalimento com umidadeconhecida mantido at oequilbrio a uma dada TC,avaliando-se a presso devapor originada com auxlio deum manmetro ou higrmetro


Ganho ou perda de umidade

O alimento, com peso conhecido, colocado emrecipientes fechados, contendo solues salinassaturadas ou H2SO4 em diferentes concentraes,gerando ambientes com Aa conhecidas. O alimento pesado diversas vezes, at atingir o equilbrio. Osresultados so interpolados em grficos e a Aa calculada.

Soluo saturada

Aa

LiCl 0,11

MgCl2 0,33

K2CO3 0,43

Mg(NO3)2 0,55

NaBr 0,57

NaC 0,75

SnCl2 0,84

KCl 0,86

BaCl2 0,92


Ganho ou perda de umidade

Aa da amostra

Aa

g/g de amostra

7. Alimentos segundo sua atividade de gua

Alimentos com alto teor de umidade (Aa > 0,85) Tecidos, fluidos, disperses, gis;

Leite, doce de leite, manteiga, carnes, ovos.

Alimentos de umidade intermediria (0,65 < Aa < 0,85) gua no facilmente removida;

Alimentos so estveis qumica e microbiologicamente;

Doces de frutas, gelias, produtos de panificao.

Alimentos secos ou de baixa umidade (Aa < 0,60)

Estveis, facilmente armazenveis;

Propriedades fsicas alteradas em Umidades Relativas elevadas;

Leite em p, feijes, farinhas.

Principal alterao ocrescimento de micro-organismos.

S expressiva aoxidao de lipdios

8.Alteraes durante o processamento 8.Alteraes durante o processamento ou estocagem de alimentos

Atributo Alterao

Textura Perda de solubilidade

Perda da capacidade de reteno de gua

Endurecimento

Amaciamento

Flavor Desenvolvimento de rancidez

Sabor cozido ou caramelizado

Outros off-flavors

Flavors desejveis

Cor Escurecimento

Branqueamento

Desenvolvimento de cores indesejveis

Desenvolvimento de cores desejveis

Valor nutricional Perda, degradao ou alterao da biodisponibilidade de nutrientes

Segurana Gerao de substncias txicas

Desenvolvimento de substncias protetoras

Inativao de substncias txicas

8. Atividade de gua e estabilidade de produtos lcteos

Mudanas qumicas:

Reao de Maillard,

Oxidao dos lipdeos,

Perda de vitaminas,

Estabilidade de pigmentos,

Desnaturao de protenas.

Mudanas fsicas:

Cristalizao da lactose

Mudanas microbiolgicas:

Desenvolvimento de bactrias, bolores eleveduras.



8. Atividade de gua e estabilidade de alimentos


Atividade de gua

Reao

< 0,86 Limita o desenvolvimento de bactrias patognicas

< 0,60 Estabilidade microbiolgica

> 0,40 Atividade enzimtica possvel

~ 0,22 Oxidao lipdica mnima

0,22 > Aa > 0,80 Reao de Maillard

< 0,22 Oxidao lipdica aumenta


8.1 Oxidao de lipdios

Uma das principais reaes de deteriorao dealimentos com contedos baixos e mdios deumidade;

Pode acontecer mesmo com Aa entre 0 e 0,2.

cido graxo insaturado

Radical livre

Luz, Calor O2

Perxido

+



Conseqncias indesejveis:

Destruio de pigmentos naturais;

Destruio de corantes adicionados;

Produo de off flavour em vegetais e cereais, mesmocongelados prejuzos na qualidade sensorial;

Destruio de vitaminas A e E, e seus precursores;

Destruio de cidos graxos essenciais, como linolico elinolnico;

Diminuio do valor nutricional de protenas e efeitosobre a textura de alimentos proticos.


Alimentos desidratados apresentam mximaestabilidade quando armazenados em URprxima a camada monomolecular de gua.

Modo de ao da gua sobre a oxidao:

Atua sobre os radicais livres presentes nos alimentos ou formados na primeira fase da oxidao;

Atua sobre os perxidos lipdicos que se originam ao mesmo tempo;

Atuam sobre os metais traos que catalisam a oxidao.



8.1 Oxidao de lipdios 8.2 Escurecimento no enzimtico

O leite o nico alimento rico em protenas quecontm grandes quantidades de acar redutor.

8.2 Escurecimento no enzimtico

Acar redutor

Aminocido

+Calor

Melanoidinas


Conseqncias desejveis:

Produo de cor e sabor caractersticos;

Po, doce de leite, carne assada.

Conseqncias indesejveis:

Produtos de reao tornam o alimento noaceitvel;

Perda de protenas;

Perda de lisina aa essencial;

Leite em p, leite condensado.


Velocidade mxima Aa 0,5-0,7

gua produto da reao!

Aa mais elevadas velocidade diminui

Temperatura

Dissoluo e difuso de substncias reativas

Energia de ativao ao Aa

8.3 Reaes enzimticas

Velocidade aumenta com da Aa

Exceo: lipases.

Branqueamento catalase e peroxidase (indicadores)

Ateno: produtos congelados.



8.4 Desenvolvimento de micro-organismos

Observado em Aa relativamente elevadas;

Aa 0,8.

Alimentos duros e crocantes

Tenro e mido;Entortam ao aplicar fora;Fcil mastigao;Endurecem se expostos a baixa umidade

Devem ter baixa Aa;Quebram ao aplicar fora;So crocantes e sonoros;Amaciam ao serem expostos a umidade



8.5 Textura dos alimentos

Solues para manter a textura:

Manter a atividade de gua entre os limitescrticos para as caractersticas de texturadesejada.

Prevenir a migrao da gua entre osmulticomponentes.

Embalagem

Adio de soluto

Sal

Acar

Remoo de gua

Desidratao

Congelamento

Aa

Modificao da Atividade de gua do Alimento

9. Controle da Atividade de gua para Conservao de alimentos

Ao Aa, velocidade de:

Pode continuar ocorrendo:

Para impedir:

Oxidao de lipdeos

Reao de Maillard

Reaes enzimticasDesenvolvimento de microrganismos

Oxidao de lipdeosReao de Maillard

exposio a luz exposio ao oxignio

adio de SO2


Inibe o desenvolvimento de micro-organismos;

Algumas enzimas podem ser inativadas

Pode continuar ocorrendo reaes enzimticas

Para impedir

Lipases

branqueamento


Sacarose, NaCl.

presso osmtica do meio Aa

Doce de leite, doces de frutas, geleias.

Charque, bacalhau.

Impede o desenvolvimento de micro-organismos.

Pode ocorrer: oxidao dos lipdeos.

SAIS



1. Sais

Principais sais do leite:

Fosfatos, citratos, cloretos, sulfatos, carbonatose bicarbonatos de Na, K, Ca e Mg.

Outros elementos so encontrados emconcentraes trao:

Cu, Fe, Zi, I

Fosfato de ClcioCa3O8P2

Carbonato de sdio

Na2CO3Citrato de Clcio

Ca3(C6H5O7) 2 Sulfato de clcio

CaSO4

Bicarbonato de sdio

NaHCO3

2. Mtodo de anlise

Contedo mineral dos alimentos determinadopelas cinzas preparadas pelo aquecimento daamostra a 500-600C em uma mufla por cerca de4h para oxidar a matria orgnica.

As cinzas no representam os sais como presentesno alimento:

A cinza uma mistura de carbonatos e xidos doselementos presentes no alimento;

P e S de protenas e lipdeos esto presentes nascinzas, enquanto ons orgnicos como citrato, soperdidos durante a incinerao;

A temperatura empregada pode vaporizar certoselementos volteis, como Na e K.

2.1 Composio dos sais do leite

O contedo de cinzas do leite permanecerelativamente constante a 0,7-0,8%.

Concentrao relativa dos vrios ons podevariar consideravelmente.

Leite humano cinzas ~ 0,2%

Concentraes dos constituintes salinos do leite (mg/L)

Concentraes dos constituintes salinos do leite (mg/L)

Constituinte Contedo mdio

Intervalo usual

Extremos reportados

Sdio 500 300 600 110 1150

Potssio 1450 1350 1550 1150 2000

Clcio 1200 1000 1400 650 2650

Magnsio 130 100 150 20 230

Fsforo (total) 950 750 1100 470 1440

Fsforo (inorgnico) 750

Cloreto 1000 800 - 1400 540 2420

Sulfato 100

Carbonato 200

Citrato (cido ctrico) 1750

Leites anormais: colostro, leite de lactao muito tardia, ou leite de vacas com infeco masttica

Constituinte Leite humano

Leite de vaca

Constituinte Leite humano

Leite de vaca

Sdio (mg) 150 500 Iodo (g) 70 260

Potssio (mg) 600 1500 Fluoreto (g) 77 -

Cloreto (mg) 430 950 Selnio (g) 14 -

Clcio (mg) 350 1200 Cobalto (g) 12 1

Magnsio (mg) 28 120 Cromo (g) 40 10

Fsforo (mg) 145 950 Molibidnio (g) 8 73

Ferro (g) 760 500 Nquel (g) 25 25

Zinco (g) 2950 3500 Silicone (g) 700 2600

Cobre (g) 390 200 Vandio (g) 7 -

Magnsio (g) 12 30 Arsnico (g) 50 45

Composio mineral (mg ou g/L) de leite maduro humano ou leite bovino

Composio mineral (mg ou g/L) de leite maduro humano ou leite bovino

Todos os principais e vrios ons apresentam maiores concentraes no leite bovino do que no leite humano



3. Minerais do leite

Fe baixa [ ] no leite de muitas espcies.Ligado a lactoferrina, transferrina, xantinaoxidase e um pouco a caseinas.

Zn a maioria est ligada a caseina, um poucoa lactoferrina.

Cu ligado a caseinas, -lactoglobulina,lactoferrina e um pouco a membranas lipdicas.

Mn associado a membranas lipdicas.

Co parte essencial da vitamina B12.

3. Minerais do leite

Contribuem para:

Capacidade tamponante do leite

Manuteno do pH do leite

Fora inica do leite

Presso osmtica do leite.

4. Fatores que influenciam a composio de sais no leite

A composio dos sais no leite influenciada pordiversos fatores, como:

Raa;

Individualidade da vaca ;

Estgio da lactao;

Alimentao;

Infeco masttica;

Estao do ano.

4.1 Raa das vacas

Leite de vacas Jersey geralmente contm maisclcio e fsforo que outras raas

Concentrao de sdio e cloretos geralmente menor.


Jersey Holandesa


4.2 Estgio da lactao

Ca [ ] no comeo e no final da lactao

P tendncia a [ ] ao longo da lactao



Na e Cl - no comeo da lactao, seguido por umarpida , ento aumentando gradualmente at ofinal, quando ocorre um rpido





K - gradualmente ao longo da lactao

Citrato influncia a distribuio de Ca, apresentavariao sazonal, mais influenciada pelaalimentao do que pelo estgio de lactao.


4.3 Infeco do bere

O leite de vacas com mastite contm deslidos totais, especialmente lactose, e nveisde Na e Cl.

[ ] diretamente relacionadas

ons Na+ e Cl- vem do sangue para compensar osmoticamente

a diminuio na sntese de lactose ou vice versa.


4.4 Alimentao

A alimentao tem relativamente pouco efeitona [ ] da maioria dos elementos no leite, pois oesqueleto serve como um reservatrio deminerais.

Citrato - no leite em dietas com muitadeficincia em forragem

Fenmero Ultrecht leite com pouca estabilidade ao calor


4.4 Alimentao

Pequenas mudanas na concentrao de saisdo leite, especialmente Ca, P inorgnico ecitrato, tem um efeito muito significante nascaractersticas de processamento do leite, o quepode ser alterado pelo nvel e tipo dealimentao.

5. Caractersticas dos sais do leite

Os sais complexos do leite apresentamtamanhos que variam entre sais ultrafiltrveis,incluindo ons livres e ons complexos, e sais detamanho coloidal.

Alguns dos de tamanho coloidal, participam daestrutura das micelas de casena.


Componente Mdia (mg/100 mL)

Ultrafiltrvel (%)

Coloidal(%)

Clcio total 121 33 67

on de clcio 8 100 0

Magnsio 12,5 64 36

Citrato 181 94 6

Fsforo inorgnico

65 55 45

Sdio 60 96 4

Potssio 144 94 6

Cloreto 108 100 0




Ca2+ e Mg2+ - ocorrem principalmente comocomplexos, incluindo grandes quantidades decitrato de Ca e citrato de Mg

As espcies coloidais dos sais do leite ligam-seas protenas do leite, tanto como ons individuaisquanto como estruturas complexas, nas micelasde casena.

Essas interaes afetam a estabilidade e afuncionalidade das protenas do leite os saisdo leite desempenham papel importante naspropriedades dos produtos lcteos.

6. Partio dos sais do leite entre as fases coloidal e solvel

Alguns dos sais do leite (cloretos, sais de Na eK) so suficientemente solveis para estarempresente quase inteiramente na fase dissolvida.

Outros (fosfato de Ca) tem maior concentraodo que pode ser mantido em soluo no pHnormal do leite.

Existem parcialmente na formasolvel e parcialmente na formainsolvel/coloidal associado comcasena.

6. Partio dos sais do leite entre as fases coloidal e solvel

A linha divisria entre solvel e coloidal umpouco arbitrria.

Posio exata depende muito domtodo usado para realizar aseparao.

Separao no difcil, pois ossais insolveis ocorremprincipalmente associados amicelas de caseina coloida.

6.1 Mtodos usados para separar fases coloidal e solvel

Dilise

Ultrafiltrao

Centrifugao a alta velocidade

Coagulao

O mtodo usado no deve promover mudanasno equilbrio entre as duas fases.

Evitar mudanas de:pH ( pH dissolve Ca3O8P2)Temperatura ( TC dissolve Ca3O8P2)


Ultrafiltrao

Membranas de celofane ou polissulfona a 20Ce presso transmembrana de 100 kPa.

[ ] de citrato e clcio so um pouco menores.


Dilise

Pequeno volume de gua contra pelo menos 50vezes o volume de leite (clorofrmio ou azidacomo conservante) a 20C/48h.

Processo de separao mais satisfatrio.

Temperatura determinante.



7. Fosfato de clcio coloidal

Parte dos sais do leite esto presentes em ousobre as micelas de casena partculascoloidais.

Sais no dissolvidos fosfato de clcio coloidalou micelar.

Inclui outros componentes: K, Na, Mg e citrato.

Quantidade = 7 g/100 g de casena seca.

Casena carregada negativamente no pH doleite, associada a ons positivos.

7. Fosfato de clcio coloidal

8. Aspectos nutricionais

Fosfato de clcio necessrio para ocrescimento e manuteno dos ossos.

Pouco hidrossolvel difcil alcanar altasconcentraes em sistemas aquosos como oleite.


Mecanismos para sobrepor a baixahidrossolubilidade:

1. Leite bovino tem alta concentrao de casena,que pode acomodar grandes quantidades defosfato de clcio no dissolvido, formando asmicelas de casena.

2. Parte do fosfato est esterificado, se mantendonas micelas de casena ou em soluo


Leite e produtos lcteos so uma importantefonte de clcio para humanos.

O Ca desses produtos bem absorvido.

A taxa molar Ca/P igual a 0,9 no leite,considerada alta comparada a outros alimentos.

Benfico para pessoas predispostas a osteoporose


Parte do Ca no absorvida

Gastroenterites podem ser significativamentealiviadas.

Diminui o risco de cncer de coln em ratos eprovavelmente em humanos.

Permanece no intestino como fosfato declcio amorfo sobre o qual diversoscompostos solveis podem ser absorvidos.

Induo de efeitos benficos.




Leite uma boa fonte de muitos outrosminerais, como elementos traos,especialmente Zn.

Contm pouco Fe, o que auxilia na reduo docrescimento de bactrias patognicas nointestino de bezerros jovens.

Elementos trao txicos (Cd, Hg e Pb)dificilmente so detectados em leite emconcentraes no seguras.

9. Mudanas nos sais

Sais do leite esto em equilbrio dinmico.

Mudanas nas condies externas do leitecausam alteraes neste equilbrio.

Soluo Entre soluo e fosfatos coloidal

Entre soluo e protenas

9.1 Acidez

pH pode ser alterado como resultado deadies, por concentrao ou aquecimento doleite.

Fermentao microbiana da lactose a cidoltico de importncia.

A queda do pH causa uma dissoluo parcial dofosfato coloidal, e diminuio da carga negativade protenas.

pH [Ca2+]

Bactrias cido lticas quebram citrato [Ca2+]

9.2 Tratamento trmico

Aquecimento mudana mais importante que o Ca e fosfato dissolvidos se tornamsuperssaturados e parcialmente associadoscom as micelas casena.

Ca 2+ + H2PO4 - CaHPO4 + H+

O leite se torna mais cido.

A reao lenta e ocorre em uma estreita faixade TC. 80C qualquer aumento em TCtem pequeno efeito

9.3 Concentrao

Concentrao do leite por evaporao de guacausa diversas mudanas, mas deve serconsiderado que o aquecimento tambm estenvolvido.

pH 0,3 para concentrao 2:1

0,5 para concentrao 3:1

Principal causa de mudana formao defosfato de clcio adicional nas micelas decasena.

Referncias Bibliogrficas

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