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MALDI-TOF Aletheia Souza, MV., MSc. Doutoranda Arlindo Moura, PhD. Orientador Programa de Pós –Graduação em Zootecnia Departamento de Zootecnia

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MALDI-TOFAletheia Souza, MV., MSc.

Doutoranda

Arlindo Moura, PhD.Orientador

Programa de Pós –Graduação em ZootecniaDepartamento de Zootecnia

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O que é MALDI-ToF??

É um método de ionização da amostra

a ser submetida a espectrometria de

massa.

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Espectrometria de MassaFerramenta analítica para determinação da massa molecular

Acurácia de 0,01%

Detecta massa entre 4 – 40.000 Da

Aplicação

Biotecnologia

Farmácia

Clínica

Ambiental

Geológica

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Espectrometria de Massa

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MALDI TOF

Matrix-Assisted

Laser

Desorption/Ionizati

on-Time of Flight

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MALDI TOFAmostras

Termolábeis

Compostos orgânicos não voláteis

Proteínas

Peptídeos

Glicoproteínas

Oligossacarídeos

Oligonucleotídeos

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Mecanismo de ação do Maldi Tof

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Preparo da amostra Dissolução em ácido trifluoroacético (TFA -10pmol/µl)

1-2 µlÁcido sinapínico (proteína)Ac. Alfa-4-ciano-hidroxicinamico (peptídeo)

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Mecanismo de ação do Maldi Tof

1.Etapa: Ionização

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Mecanismo de ação do Maldi Tof

2. Etapa: Análise do tempo de

vôo

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Os íons são separados de acordo com a relação massa/carga (m/z)

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Mecanismo de ação do Maldi Tof

3. Etapa: Detecção dos íons

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Tipos de detectores:

•Multiplicador de elétrons

• Multiplicador de luz

•Placa de microcanais

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Dados fornecidos pelo detector

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Em resumo....

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Gel 2D

Spot selecionado digerido com tripsina

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Eletroforese-2D de proteínas do plasma seminal de ovinos Santa Inês identificadas por Maldi Tof – Parte da

dissertação de João Paulo A. Rego