Aula 1. Histologia e seus métodos de estudo

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Histologia e seus métodos de estudo A histologia estuda as células e o material extracelular que constitui os tecidos do corpo; O uso dos diferentes tipos de microscópios ampliou consideravelmente o campo de estudo da histologia.

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Histologia e seus métodos de estudo

A histologia estuda as células e o material extracelular que constitui os tecidos do corpo;

O uso dos diferentes tipos de microscópios ampliou consideravelmente o campo de estudo da histologia.

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Como são feitas as lâminas histológicas

Os objetos a serem observados são muito delgados,precisam ser reduzido a cortes finos, estes cortes são feitos por um equipamento denominado micrótomo, mas antes de serem cortados os tecidos devem passar por uma série de tratamentos.

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Etapas para produção de lâmina permanente

Fixação:em fixador simples ou em mistura fixadora (líquido de Bouin, Helly etc.) Preserva a morfologia e a composição dos tecidos.

Desidatração: em álcool de concentrações crescentes, remove a água dos tecidos.

Clareamento: em benzol, xilol ou toluol solventes do álcool e da parafina, embeber a peça em substância miscível com parafina.

Impregnação: pela parafina fundida geralmente realizada em estufa a 60º c.

Inclusão: a peça é colocada num molde retangular contendo parafina fundida.

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Tipos de corante

A maioria dos tecidos é incolor, o que torna difícil sua observação ao microscópio óptico, devido isso foram introduzidos métodos para coloração de tecidos;

Os componentes que se coram com corantes básicos são chamados basófios, sendo chamados de acidófilos os que se ligam a corantes ácidos.

Corantes usados: azul-de-toluidina, azul-de-tolueno e hematoxilina (básicos),orange G, a eosina e a fucsina ácida (ácidos)

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Lâminas

Figura1:Laminas coradas com diferentes corantes

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Tipos de microscópios (óptico)

Considera-se no microscópio a parte mecânica e a parte óptica:

*Parte óptica: condensador, objetiva e ocular;

*Parte mecânica: platina, filtro, condensador, espelho macrometrico e micrometrico, charriot, revólver

Microscópio óptico

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O microscópio eletrônico tem alta resolução e as imagens obtidas mostram uma riqueza de detalhes surpreendentes.

Os elétrons são produzidos graças ao aquecimento no vácuo de um filamento, o catódio, que então emite elétrons.

Microscópio eletrônicode transmissão

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Microscópio eletrônico de varredura

O microscópio eletrônico de varredura (MEV) é um equipamento capaz de produzir imagens de alta ampliação (até 300.000 x) e resolução. As imagens fornecidas pelo MEV possuem um caráter virtual, pois o que é visualizado no monitor do aparelho é a transcodificação da energia emitida pelos elétrons, ao contrário da radiação de luz a qual estamos habitualmente acostumados.

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MICROSCÓPIO DE FLUORESCÊNCIA CONFOCAL

A microscopia de imunofluorescência tem suas limitações, uma delas é a superposição de imagens O microscópio de fluorescência confocal evita esse problema permitindo a visualização da imagem muito mais precisa.

Aqui as células são submetidas a compostos fluorescentes e as imagens são derivadas da luz excitatória de um feixe de laser que serão registradas por uma câmara de vídeo e armazenadas em um computador.

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Microscópio de polarização

O microscópio de polarização é semelhante a microscópio de luz, acrescido de dois prismas ou dois discos polaróides, que permitem estudar certos aspectos da organização molecular dos constituintes celulares.

Ao atravessar a célula o feixe de luz pode passar por estruturas cristalinas ou moléculas alongadas e paralelas