AULA PRÁTICA DE BIOQUÍMICA. PIPETAGENS FUNÇÃO DAS PIPETAS Pipeta - é um pequeno tubo de vidro...
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AULA PRÁTICA DE BIOQUÍMICA
PIPETAGEN
S
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PIPETAGENS
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FUNÇÃO DAS PIPETAS
Pipeta - é um pequeno tubo de vidro ou plástico usado para transferir quantidades passíveis de medição de um recipiente para outro.
O cientista francês Louis Pasteur desenvolveu uma variedade de pipetas, muitas das quais são utilizadas até hoje -- ainda que pipetas mais modernas sejam mais confiáveis e precisas.
Pipetas são utilizadas em diversas práticas científicas, geralmente quando é preciso transferir menos de 100 ml de uma solução.
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Pipeta Pasteur
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Tipos de Pipetas Pipetas volumétricas
Feitas para transferir volumes específicos, as pipetas volumétricas lembram simples tubos de vidro.
Usar um instrumento como esse envolve mergulhá-lo em uma solução e colocar um dedo sobre a extremidade de fora ou apertar uma pera de borracha para extrair o valor especificado.
Quantidades diferentes de solução, geralmente entre 1 e 100 ml, requerem pipetas volumétricas de tamanhos diferentes.
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Pipeta volumétrica
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Tipos de Pipetas Pipetas graduadas
Pipetas graduadas são calibradas em pequenas divisões para proporcionar uma melhor precisão e permitir que sejam demarcadas quantidades tão pequenas quanto um microlitro (um milionésimo de um litro).
Enquanto algumas pipetas graduadas usam tanto o método do dedo quanto o da pera para extrair líquido, micropipetas automáticas trazem maior precisão. Micropipetas usam um êmbolo ajustável, marcado com uma faixa entre os volumes mínimo e máximo, que deve ser demarcada com a quantidade necessária.
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Pipetas graduadas
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Uso da Pipeta Independente do tipo de pipeta, usá-las
requer cuidado. Para prevenir dano à pipeta ao extrair uma
solução, coloque o instrumento a 5 mm da borda do recipiente. Uma vez que o volume ou medida desejados estejam contidos na pipeta, um toque gentil no lado do béquer da solução removerá o excesso de gotas.
Quando transferir a solução, coloque a pipeta em um ângulo de 10º a 20º e, lentamente, deixe o líquido escorrer. Mais uma vez, um toque suave deve ajudar a remover as gotas extras.
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Micropipetas Para medir rigorosamente volumes pequenos. Coloque a ponta na micropipeta (tem de
escolher a ponta certa). Pressione o êmbolo até à 1ª posição e mergulhe no líquido a pipetar.
Aspire de modo controlado (se for demasiado rápido, poderão entrar bolhas de ar e a quantidade medida pode estar errada).
Pressione o êmbolo até á 2ª posição para expelir todo o líquido.
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Micropipetas
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Cuidados Gerais Usar uma pipeta para cada reagente, a fim de evitar
contaminações entre um líquido e outro. Evitar a troca de rolhas entre os reagentes. Conferir os volumes desejados e cada pipeta a ser utilizada. Não devolver a solução pipetada para o frasco estoque. Antes de introduzir as pipetas nas soluções, verificar se estão
realmente limpas e, se as ponteiras, estão bem encaixadas. Visualizar e confrontar os meniscos nas pipetas graduadas e
volumétricas. Ao pipetar soluções cujo frasco contém depósito de soluto,
introduzir a pipeta no sobrenadante. Utilizar sempre pipetas e ponteiras secas.