Universidade Federal do Rio GrandeDisciplina de Bioquímica Industrial

Prof. Dr. Carlos André Veiga BurkertMSc. Elisane Odriosolla dos Santos

Bruno Loureiro Ladeira (Doutorando)

Aula Prática: Determinação do teor de lipídeos pelo método de Soxhlet

1. INTRODUÇÃO

Em sua implementação clássica, a amostra é colocada em um frasco extrator

que é gradualmente preenchido com solvente proveniente de um balão de destilação.

Quando o líquido atinge o nível de transbordamento, um sifão aspira o soluto dissolvido

no solvente e descarrega de volta no balão de destilação, realizando assim a extração

dos lipídeos da amostra para o solvente. Esta operação é repetida até a extração ser

completa.

A extração Soxhlet convencional apresenta algumas vantagens: a amostra é

posta em contato repetidamente com porções frescas de solvente extrator, o que facilita

o deslocamento do equilíbrio. Além disso, o sistema mantém-se em uma temperatura

relativamente elevada pelo efeito do calor aplicado no balão de destilação. Ainda, a

extração Soxhlet é uma metodologia muito simples que requer equipamentos básicos de

baixo custo e pouco treinamento.

As desvantagens mais graves de extração de Soxhlet, em comparação a

outras técnicas para a preparação da amostra sólida, são o longo tempo necessário para a

extração e a grande quantidade de solvente desperdiçado. As amostras são geralmente

extraídas no ponto de ebulição do solvente ao longo de períodos longos, o que pode

resultar em decomposição térmica de compostos termolábeis. Além disso, um

dispositivo de Soxhlet convencional não fornece nenhuma agitação, o que ajudaria a

acelerar o processo.

2. OBJETIVO

Determinar lipídeos através do método de Soxhlet em uma amostra.

3. MATERIAIS E MÉTODOS

3.1. Procedimento

Secar em estufa a 100ºC por 30 min uma cápsula extratora. Esfriar em

dessecador. Pesar. Secar, também, um pouco de algodão.

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Na mesma ocasião, pesar com precisão de 5 a 10 g de material em análise,

finamente divido por moagem, para dentro da cápsula.

Secar em estufa a 95-100ºC (material granífero) ou 100-102ºC (carnes) até

peso constante.

O balão extrator Soxhlet, contendo pérolas de vidro, deve ser seco em estufa

a 100ºC por 1 h e depois pesado até peso constante, após esfriamento em dessecador.

Tapar o cartucho com algodão e introduzir no aparelho extrator. Juntar 150

mL de éter de petróleo ou hexano. Montar o aparelho conforme Figura 1.

Extrair durante 4 a 6 h (4-5 gotas de condensado por segundo).

Desligar o aquecedor. Deixar esfriar. Fechar a água.

Retirar o balão do extrator e colocá-lo em banho maria quente até

evaporação do solvente residual. Colocar o balão em estufa a 10-102ºC, durante 1 h.

Esfriar o balão em dessecador e pesar até peso constante.

3.2. Expressão dos Resultados

Expressar o resultado em % de lipídeos totais, calculada sobre base úmida e

seca, destacando esta particularidade. Indicar os cálculos e comparar com os dados

disponíveis na literatura.

Figura 1: Extrator convencional de Soxhlet.

4. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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REGULY, J. C. Introdução à analítica e à tecnologia dos carboidratos,

lipídios, proteínas e enzimas. 2. ed. Pelotas: Editora Universitária/UFPel,

2009.

CASTRO, M.D.L.; PRIEGO-CAPOTE, F. Soxhlet extraction: past and

present panacea. Journal of Chromatography A, v. 1217, p. 2383–2389, 2010.

PERGUNTAS

1. Defina rancificação hidrolítica e oxidativa. Quais os mecanismos para atenuá-

las?

2. Alguns alimentos lipídicos, como o azeite de oliva, apresentam-se deteriorados

rapidamente após exposição ao ar quando em temperatura ambiente, enquanto outros,

como a manteiga, demoram um tempo maior para apresentam este efeito. Explicar a

afirmativa, descrevendo bioquímicamente o que ocorre com estes alimentos.

3. Ácidos graxos essenciais. O que são? Qual sua importância?

4. A tabela abaixo mostra a composição obtida, em termos de ácidos graxos, para

algumas marcas comerciais de óleos vegetais. A partir de uma análise comparativa das

composições, faça considerações a respeito das propriedades, vantagens ou

desvantagens destes óleos, sobretudo no que diz respeito às características nutricionais.

Ácido Graxo

Oliva Girassol Soja Canola Milho

C16:0 10,06 5,89 11,47 4,92 13,12C16:1 0,73 - - - -C18:0 2,62 3,48 3,68 2,46 2,40C18:1 75,80 25,61 23,51 59,08 34,52C18:2 10,81 64,27 54,49 21,99 49,63C18:3 - - 6,84 6,40 -C20:0 - - - 2,50 0,66C20:1 - - - 1,63 -C22:0 - 0,76 - - -C22:1 - - - 1,05 -

5. O que são ácidos graxos Omega 3 e Omega 6? Qual sua importância?

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6. Quais as etapas fundamentais da extração e refino de um óleo vegetal? Relacione

a etapa/operação e a(s) propriedade(s) dos lipídeos envolvidos. A lecitina pode causar

perdas durante a neutralização de um óleo vegetal? Explique.

7. Durante a preparação industrial do molho Béarnaise, gemas de ovo são

incorporadas em manteiga derretida a fim de estabilizar o molho e evitar a separação de

uma fase oleosa. Aproximadamente 33% da gema de um ovo são lipídeos, dos quais ao

redor de 67% são triacilgliceróis, 28% são constituídos por lecitinas, cefalinas,

lisofosfatildilcolinas (isto é, lecitinas com apenas um resíduo de ácido graxo) e

esfingomielinas, e o restante é principalmente colesterol. Explicar porque isto funciona.

8. Os pontos de fusão de ácidos graxos de 18 carbonos são: ácido esteárico, 69,60C;

ácido oleico, 13,40C; ácido linoleico, -50C; ácido linolênico, -110C. Qual o aspecto

estrutural relacionado ao ponto de fusão? Explique. Qual a diferença entre óleos e

gorduras e sua relação com a composição em ácidos graxos? O que é azeite?

9. Como se formam as gorduras trans? Quais as alternativas, em termos de

processo industrial, a fim de prevenir a sua formação?

10. Se o éter de petróleo ou o éter etílico não extraem apenas as gorduras e os óleos

dos substratos naturais, mas os lipídeos de uma maneira mais ampla, como se justifica

tal método de extração para análise de gorduras e óleos em alimentos ou outros

substratos, naturais ou modificados?

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