Biossensores Microbianos e suas Aplicações Ambientais Ambientais

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Biossensores Microbianos e suas Aplicações Ambientais FIOCRUZ – Brazil Ambientais Paulo R G Barrocas Paulo R. G. Barrocas [email protected] Departamento de Saneamento e Saúde Ambiental Departamento de Saneamento e Saúde Ambiental Escola Nacional de Saúde Pública – FIOCRUZ

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Biossensores Microbianos e suas Aplicações

Ambientais

FIOCRUZ – Brazil

Ambientais

Paulo R G BarrocasPaulo R. G. [email protected]

Departamento de Saneamento e Saúde AmbientalDepartamento de Saneamento e Saúde AmbientalEscola Nacional de Saúde Pública – FIOCRUZ

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BiossensoresDefinição, Princípios, Características &

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ç , p ,Classificações dos Biossensores

Bi Mi bi DNA R bi tBiossensores Microbianos:DNA Recombinante, Genes de Resistência e Sinalizadores

Biossensor para estudo da biodisponibilidade do Hg

Aplicações dos Biossensores & Biossensores Comerciais disponíveisp

Perspectivas Futuras dos Biossensores

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BiossensoresFIOCRUZ – Brazil Paulo R.G. Barrocas

Produção Acadêmica sobre Biossensores a partir da década de 1980Simpósio nos EUA em 1984Simpósio nos EUA em 1984 Periódico: Biosensor and Bioeletronics em 1985

3Barrocas et al., 2008

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Biossensores

Nova Abordagem: Biossensores

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Nova Abordagem: Biossensores

Definição:ç

“Biossensor é um sistema integrado e independente,

contendo um elemento biológico, responsável pela

detecção do analito, em contato direto com um

elemento transdutor o qual converte a reaçãoelemento transdutor, o qual converte a reação

biológica em um sinal mensurável”4Rodriguez-Mozaz et al., 2005

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Biossensores

Princípio dos Biossensores:

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Princípio dos Biossensores:

5Nakamura & Karube, 2003

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Biossensores

Características e Vantagens dos Biossensores

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Características e Vantagens dos Biossensores

6Rodriguez-Mozaz

et al., 2004

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BiossensoresClassificação dos

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çBiossensores:

Método de Conversão doConversão do Sinal

Elemento Biológico deBiológico de Detecção

7Rodriguez-Mozaz et al., 2004

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Biossensores

Princípio dos Biossensores Microbianos:

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Princípio dos Biossensores Microbianos:

8Köhler et al., 2000

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BiossensoresConstrução do

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Biossensor Microbiano: Tecnologia do DNATecnologia do DNA Recombinante Gene Sinalizador Promotor do Gene Promotor do Gene

de Resistência

Ramanathan et al., 1994

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BiossensoresMecanismos

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Genéticos de ResistênciaResistência Bacteriana a

Metais:

Silver, 1988

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BiossensoresGenes de Sinalização de Biossensores Microbianos:FIOCRUZ – Brazil Paulo R.G. Barrocas

Bioluminescência é conveniente: análises in vivo e reutilizáveis

Relação direta como o Metabolismo Celular: Biodisponibilidade

Köhler et al., 2000

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BiossensoresExemplos: Biossensores MicrobianosFIOCRUZ – Brazil Paulo R.G. Barrocas

Específicos

Genéricos Genéricos (ex: toxidade)

12Köhler et al., 2000

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Biossensoresg p )

Cl total (mM) Hg species (%)H (OH) o H (Cl) o H (Cl) H (Cl) 2

Exemplo: Biossensor de HgFIOCRUZ – Brazil Paulo R.G. Barrocas

Hg(OH)2o Hg(Cl)2

o Hg(Cl)3- Hg(Cl)4

2-

0.005 99.8 0.20.1 61.1 38.71 1.6 97.6 0.8

Complexos neutros de Hg sãomais Biodisponíveis que

300 100 )

100 40 31.8 28.3150 26.4 31.5 42

p qcomplexos aniônicos

200

250

300

708090100

ecie

s (%

)

100

150

200

RLU

30405060

ral H

g sp

0

50

1 0E 03 1 0E 02 1 0E 01 1 0E 00 1 0E 01 1 0E 02 1 0E 030102030

Neu

t

1.0E-03 1.0E-02 1.0E-01 1.0E+00 1.0E+01 1.0E+02 1.0E+03Chloride (mM)

0.2 nM Hg(II) 0.4 nM Hg(II) 0.6 nM Hg(II) Model

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BiossensoresÁreas de Aplicações dos Biossensores:

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p ç

Clínica

Alimentos

A bi t l Ambiental Monitoramento/Screeningg

Avaliação da Biodisponibilidade

A li ã d Ef it /T i id d

Avaliação de Risco Ambiental Avaliação do Efeito/Toxicidade

Exemplos: DBO, Fenol, Fosfato, Metais e Pesticidas

Risco Ambiental

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BiossensoresExemplos da Aplicação de Biossensores a

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Amostras Ambientais:

Rodriguez-Mozaz et al., 2005

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BiossensoresBiossensores Comerciais existentes no mercado:

FIOCRUZ – Brazil Paulo R.G. Barrocas

Rodriguez-Mozaz et al., 2005

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BiossensoresBiossensores Comerciais existentes no

FIOCRUZ – Brazil Paulo R.G. Barrocas

mercado:

RIANA RIANA

17Rodriguez-Mozaz

et al., 2005

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BiossensoresPerspectivas Futuras dos Biossensores:FIOCRUZ – Brazil Paulo R.G. Barrocas

Aperfeiçoamento das Tecnologias dos Transdutores Nanotecnologia & Miniaturização

Matrizes Multi-sensores

Desenvolvimento de Novos Bioelementos Biomateriais desenvolvidos por Engenharia Genética

Materiais Sintéticos

Aperfeiçoamento das Técnicas de Construção Imobilização

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BiossensoresPerspectivas Futuras dos Biossensores:

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Desenvolvimento de novos Biossensores para a Análise de Contaminantes Emergentes;g ;

Ferramenta para avaliação rápida de amostras ambientais in loco;ambientais in loco;

Possível uso na biorremediação de áreas contaminadas;

Aumento do número de Patentes e de SistemasAumento do número de Patentes e de Sistemas Comerciais no mercado;

Desenvolvimento de Estações AnalíticasDesenvolvimento de Estações Analíticas Autônomas Integradas Remotamente.

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P l R G B

20Mudanças Climáticas

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