Diagnostico laboratorial em alergia.pdf

Dr. Carlos LojaHSE - SBAI - SOPERJDr. Carlos Loja

HSE - SBAI - SOPERJ

DiagnDiagnóóstico stico Laboratorial Laboratorial em Alergiaem Alergia

Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico “In Vivo”

Diagnóstico “In Vitro”

Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico “In Vivo”

Diagnóstico “In Vitro”

Diagnóstico com testes específicosDiagnDiagnóóstico com testes especstico com testes especííficosficos

Indicações principais:♦ Confirma o diagnóstico clínico♦ Diferencia patologias alérgicas de outras

patologias♦ Descobre novos alérgenos não suspeitados

anteriormente♦ Orienta o tratamento♦ Teste cutâneo isolado não é diagnóstico,

correlacionar com história clínica

Indicações principais:♦ Confirma o diagnóstico clínico♦ Diferencia patologias alérgicas de outras

patologias♦ Descobre novos alérgenos não suspeitados

anteriormente♦ Orienta o tratamento♦ Teste cutâneo isolado não é diagnóstico,

correlacionar com história clínica

Testes CutâneosTestes CutâneosClassificação♦Epicutâneo - Teste contato (Patch)

Ex.: hipersensibilidade imediata e tardia

♦Percutâneo - Prick / PunturaEx.: Hipersensibilidade imediata

♦Intracutâneo - IntradérmicoEx.: Hipersensibilidade imediata e

tardia

Classificação♦Epicutâneo - Teste contato (Patch)

Ex.: hipersensibilidade imediata e tardia

♦Percutâneo - Prick / PunturaEx.: Hipersensibilidade imediata

♦Intracutâneo - IntradérmicoEx.: Hipersensibilidade imediata e

tardia Turkeltaub PC - Rastogi SC, Baer H et al - JACI 1982; 70(5):342-52.

DiagnDiagnóóstico com Testes Especstico com Testes Especííficosficos

Teste Puntura (Prick)♦É o mais conveniente e convincente método

screening para detectar IgE-específica para diferentes alérgenos

♦É mais específico que o I. D. embora menos sensível

♦O teste I. D. deve ser considerado quando a história clínica de exposição é forte e o Prick teste é negativo

♦Deve-se utilizar extratos já padronizados se possível.

Teste Puntura (Prick)♦É o mais conveniente e convincente método

screening para detectar IgE-específica para diferentes alérgenos

♦É mais específico que o I. D. embora menos sensível

♦O teste I. D. deve ser considerado quando a história clínica de exposição é forte e o Prick teste é negativo

♦Deve-se utilizar extratos já padronizados se possível.

Testes CutâneosTestes Cutâneos

Turkeltaub PC, Rastogi SC, Baer H et al - JACI 1982; 70(5):342-52.Turkeltaub PC, Rastogi SC, Baer H et al - JACI 1982; 70(5):342-52.

Extratos para diagnósticoFDA - Unidades BAU (Bioequivalent Allergy Units)

Quantidade do extrato alergênico para fins diagnóstico, que causa resposta eritematosa, para teste I. D. igual ao somatório ortogonal do diâmetro de 50mm em um painel conhecido de indivíduos contrôles conhecidos.

Extratos para diagnósticoFDA - Unidades BAU (Bioequivalent Allergy Units)

Quantidade do extrato alergênico para fins diagnóstico, que causa resposta eritematosa, para teste I. D. igual ao somatório ortogonal do diâmetro de 50mm em um painel conhecido de indivíduos contrôles conhecidos.

Testes CutâneosTestes Cutâneos

Turkeltaub PC - Diagn Testing of Allerg Dis, Vol 15 N York; Nalcelbekker, 2000, 53.Turkeltaub PC - Diagn Testing of Allerg Dis, Vol 15 N York; Nalcelbekker, 2000, 53.

Reação imediataPápulaResultado da liberação de histamina pelos mastócitos e ligação com os receptores de histamina na microcirculação, resultando no aumento da permeabilidade dos vasos.EritemaResultado de vasodilatação neurogênicaObs.: Estes resultados são comparados ao contrôle negativo (diluente) e ao contrôle positivo (histamina padronizada).

Reação imediataPápulaResultado da liberação de histamina pelos mastócitos e ligação com os receptores de histamina na microcirculação, resultando no aumento da permeabilidade dos vasos.EritemaResultado de vasodilatação neurogênicaObs.: Estes resultados são comparados ao contrôle negativo (diluente) e ao contrôle positivo (histamina padronizada).

Testes Cutâneos Testes Cutâneos -- MultitesteMultiteste

Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial

IgE – Sensibilidade ao TesteIgE – Sensibilidade ao Teste

AceitávelAceitávelAceitável♦Inaláveis

Desnecessário(Falso +)

AceitávelAceitável♦Alimentos

DesnecessárioPreferênciaInadequado♦Reações sistêmicas♦Látex

PreferênciaInsuficienteComplementar com I. D.

♦Reações sistêmicas♦Veneno inseto♦Drogas

“In vivo”Intradérmico

(I. D.)

“In vivo”Prick (PK)

“In vitro”RAST

Antígenos

Symposium # 3704 - Lab. Meth. For Allerg - Specif. IgE Ab. Goth A. A. A. A. I. Meeting - Denver, CO – 2003.Robert G. Hamilton, PhD – Johns Hopkins Univ.

Symposium # 3704 - Lab. Meth. For Allerg - Specif. IgE Ab. Goth A. A. A. A. I. Meeting - Denver, CO – 2003.Robert G. Hamilton, PhD – Johns Hopkins Univ.

DiagnDiagnóóstico com Testes Especstico com Testes Especííficosficos

Considerações gerais♦Deve ser realizado por especialistas♦Pode ser realizado em qualquer idade♦Não aplicar o teste sem condições cutâneas

adequadas♦Suspender medicações, se possível, que

alteram o resultado♦Saber avaliar e tratar reações sistêmicas♦Ter medicações e instrumentos apropriados

para tal.

Considerações gerais♦Deve ser realizado por especialistas♦Pode ser realizado em qualquer idade♦Não aplicar o teste sem condições cutâneas

adequadas♦Suspender medicações, se possível, que

alteram o resultado♦Saber avaliar e tratar reações sistêmicas♦Ter medicações e instrumentos apropriados

para tal.

DiagnDiagnóóstico com Testes Especstico com Testes EspecííficosficosReações anafiláticas / anafilactóides raramente acontecem e estão relacionadas a:♦Teste intradérmico (ID), sem ser realizado o Prick

antes♦Alérgenos que causam anafilaxia

Ex.: crustáceos - amendoim - látex - drogas venenos de insetos

♦Número excessivo de testes em um mesmo momento

♦Utilização de medicações que possam facilitar tais reações indesejáveis

Reações anafiláticas / anafilactóides raramente acontecem e estão relacionadas a:♦Teste intradérmico (ID), sem ser realizado o Prick

antes♦Alérgenos que causam anafilaxia

Ex.: crustáceos - amendoim - látex - drogas venenos de insetos

♦Número excessivo de testes em um mesmo momento

♦Utilização de medicações que possam facilitar tais reações indesejáveis

♦ Os procedimentos realizados somente em locais onde hajam equipamentos para ressuscitação de emergência e pessoal treinado, sob supervisão direta do médico.

♦ Os procedimentos realizados somente em locais onde hajam equipamentos para ressuscitação de emergência e pessoal treinado, sob supervisão direta do médico.

♦ O paciente deve permanecer sob observação por 20 a 30 minutos após o procedimento.

♦ O paciente deve permanecer sob observação por 20 a 30 minutos após o procedimento.

♦ Pessoal preparado para: ajuste da dose dos alérgenos para minimizar reações; reconhecimento e tratamento das reações locais; reconhecimento e tratamento das reações sistêmicas e preparo em RCP básica (Ressuscitação Cardiopulmonar).

♦ Pessoal preparado para: ajuste da dose dos alérgenos para minimizar reações; reconhecimento e tratamento das reações locais; reconhecimento e tratamento das reações sistêmicas e preparo em RCP básica (Ressuscitação Cardiopulmonar).

RecomendaRecomendaçções para atendimento de ões para atendimento de reareaçções adversas Iões adversas I

RecomendaRecomendaçções para atendimento de ões para atendimento de reareaçções adversas IIões adversas II

♦ Procedimentos invasivos: laringoscopia direta, cardioversão, traqueotomia, injeção intracardíaca de medicamentos:

♦ Procedimentos invasivos: laringoscopia direta, cardioversão, traqueotomia, injeção intracardíaca de medicamentos:

♦ Após qualquer procedimento e estabilização do paciente, encaminha-lo imediatamente ao um serviço de atendimento de emergência.

♦ Após qualquer procedimento e estabilização do paciente, encaminha-lo imediatamente ao um serviço de atendimento de emergência.

♦ Pela raridade da necessidade desses procedimentos e o risco de serem efetuados em condições não-ideais, não é necessário que estejam imediatamente disponíveis.

♦ Pela raridade da necessidade desses procedimentos e o risco de serem efetuados em condições não-ideais, não é necessário que estejam imediatamente disponíveis.

1. Estetoscópio e esfigmomanômetro.2. Torniquetes, seringas, agulhas hipodérmicas

e agulhas de grosso calibre (14).3. Epinefrina aquosa ( HCl 1:1.000 ).4. Ambú e/ou oxigênio.5. Equipamento para fluidoterapia endovenosa.6. Material para intubação.7. Anti-histamínico injetável.8. Corticosteróides intravenosos.9. Agentes vasopressores.

1. Estetoscópio e esfigmomanômetro.2. Torniquetes, seringas, agulhas hipodérmicas

e agulhas de grosso calibre (14).3. Epinefrina aquosa ( HCl 1:1.000 ).4. Ambú e/ou oxigênio.5. Equipamento para fluidoterapia endovenosa.6. Material para intubação.7. Anti-histamínico injetável.8. Corticosteróides intravenosos.9. Agentes vasopressores.

Equipamentos recomendados para atendimento de reações adversasEquipamentos recomendados para Equipamentos recomendados para atendimento de reaatendimento de reaçções adversasões adversas

DiagnDiagnóóstico Laboratorialstico Laboratorial““In VivoIn Vivo””

Prick Prick TestTest

ObjetivosObjetivos

♦♦ AvaliaAvaliaçção de diferentesão de diferentes puntorespuntores

♦♦ AvaliaAvaliaçção de extratos padronizados e não ão de extratos padronizados e não padronizados de alpadronizados de aléérgenos inalrgenos inalááveisveis

Objetivos1. Comparar a reatividade por Prick Test de extratos alergênicos padronizados em Unidades de Massa ou Unidades Biológicas com os não padronizados, dosados em PNU/ml.

Objetivos1. Comparar a reatividade por Prick Test de extratos alergênicos padronizados em Unidades de Massa ou Unidades Biológicas com os não padronizados, dosados em PNU/ml.2. Comparar a reatividade por Prick Test com extratos padronizados em Unidades de Massa ou Unidades Biológicas, de três diferentes puntores: ALK Lancet (Dinamarca); Duotip (EUA) ePuntor ALKO (Brasil).

2. Comparar a reatividade por Prick Test com extratos padronizados em Unidades de Massa ou Unidades Biológicas, de três diferentes puntores: ALK Lancet (Dinamarca); Duotip (EUA) ePuntor ALKO (Brasil).

Avaliação do Prick TestAvaliaAvaliaçção do Prick ão do Prick TestTest

Critérios de inclusão:Pacientes de ambos os sexos, idades entre 10 e 65 anos, alérgicos aos aeroalérgenos.Critérios de exclusão:Pacientes sob uso de medicação anti-histamínica ou outra que possa interferir nas reações, não alérgicos, portadores de imunodeficiência ou infecções vigentes.

Critérios de inclusão:Pacientes de ambos os sexos, idades entre 10 e 65 anos, alérgicos aos aeroalérgenos.Critérios de exclusão:Pacientes sob uso de medicação anti-histamínica ou outra que possa interferir nas reações, não alérgicos, portadores de imunodeficiência ou infecções vigentes.


Critérios de leitura:Controles - 15 minutos Alérgenos - 20 minutos.

Reação positiva: pápula maior do que 3mm e maior do que a pápula do controle negativo – CN.Resultado pela medida em milímetros do diâmetro da pápula formada pelo teste.Os resultados obtidos são anotados no formulário do teste.

Critérios de leitura:Controles - 15 minutos Alérgenos - 20 minutos.

Reação positiva: pápula maior do que 3mm e maior do que a pápula do controle negativo – CN.Resultado pela medida em milímetros do diâmetro da pápula formada pelo teste.Os resultados obtidos são anotados no formulário do teste.


Análise da sensibilidade do Prick test com diferentes puntoresAnAnáálise da sensibilidade do Pricklise da sensibilidade do Prick test test com diferentescom diferentes puntorespuntores

0

2

4

6

8

0

2

4

6

8

ALK-LancetALK-Lancet DUOTIPDUOTIP ALKOALKO

p<0,01p<0,01

Prick test com diferentes puntoresHistamina Base 10 mg/ml

Prick test com diferentes puntoresHistamina Base 10 mg/ml

Pápu

la -

Øm

édio

mm

Pápu

la -

Øm

édio

mm

PuntoresPuntores

n=10n=10

Prick test com diferentes puntoresPrickPrick testtest com diferentescom diferentes puntorespuntores

0

2

4

6

8

10

0

2

4

6

8

10

Dermatophagoides pteronyssinusPrick test

Dermatophagoides pteronyssinusPrick test

Padronizado60 µg Der p 100 BU/ml

ALK-ABELLÓLt: UO945

Padronizado60 µg Der p 100 BU/ml

ALK-ABELLÓLt: UO945

Não Padronizado 50.000 PNU/mlFDA Allergenic

Lt: 04BB00050


Lt: 04BB00050

Pápu

la-Ø

méd

iom

m

Pápu

la-Ø

méd

iom

m

n=10n=10

p<0,01

0

2

4

6

8

10

0

2

4

6

8

10

Blomia tropicalisPrick test

Blomia tropicalisPrick test

Padronizado100 BU/ml

ALK-ABELLÓLt: T2013

Padronizado100 BU/ml

ALK-ABELLÓLt: T2013


Lt: 04BB0059


Lt: 04BB0059

Pápu

la-Ø

méd

iom

m

Pápu

la-Ø

méd

iom

m

n=10n=10

p<0,01p<0,01

1. Cp

2. Cn

3. Dp

4. Bt

5. Gato

6. Cão

1. Cp

2. Cn

3. Dp

4. Bt

5. Gato

6. Cão

Prick test Padronizado (P) X Não Padronizado (NP)

Prick test Padronizado (P) X Não Padronizado (NP)

ALERGIADiagnóstico laboratorial

Teste “IN VITRO”♦ IgE Total♦ IgEEspecífica♦ IgG4 Específica♦ Histamina Liberada♦ Sulfitoleucotrieno Ag - Específico♦ Proteínas granulares dos eosinófilos♦ Triptase dos mastócitos ♦ Citoquinas do TH2

Teste “IN VITRO”♦ IgE Total♦ IgEEspecífica♦ IgG4 Específica♦ Histamina Liberada♦ Sulfitoleucotrieno Ag - Específico♦ Proteínas granulares dos eosinófilos♦ Triptase dos mastócitos ♦ Citoquinas do TH2

Sensibilidade =Positivo s verd adeiros

Positivos verd adeiro s + Nega tivos falsosX 1 0 0

E specif icidade =N egativos verdadeiros

N egativos verdadeiros + Pos itivos falsosX 1 0 0

E fic iência =Positivos verd adeiro s + Nega tivos verdad eiros

Total de p ositivos + To tal de negativosX 1 0 0

Índices de Performance Diagnóstica de um Teste


IgE sérica total♦ Não reflete a produção total♦ Não reflete a sua fixação nos receptores

específicos tissulares♦ Níveis elevados não são patognomônicos de

atopia♦ Há pacientes alérgicos com níveis normais♦ Há variações nestes níveis na dependência

de estímulos antigênicos♦ Modificações dos níveis pela imunoterapia♦ Cálculo para aplicação de anti-IgE

IgE sérica total♦ Não reflete a produção total♦ Não reflete a sua fixação nos receptores

específicos tissulares♦ Níveis elevados não são patognomônicos de

atopia♦ Há pacientes alérgicos com níveis normais♦ Há variações nestes níveis na dependência

de estímulos antigênicos♦ Modificações dos níveis pela imunoterapia♦ Cálculo para aplicação de anti-IgE


IgE sérica específica

♦ Inalantes

♦ Drogas

♦ Alimentos

♦ Venenos de insetos

♦ Substâncias ocupacionais

IgE sérica específica

♦ Inalantes

♦ Drogas

♦ Alimentos

♦ Venenos de insetos

♦ Substâncias ocupacionais

IgE Específica – CAP SystemIgE Específica – CAP SystemPharmacia

CAP System vs Prick TestCAP System vs Prick Test

IgE EspecíficaIgE Específica


Indicações para realizar o RAST

♦ Dermografismo importante

♦ Doença cutânea (D. A.)

♦ Não poder retirar anti-histaminico

♦ Reações atípicas para alimentos

Indicações para realizar o RAST

♦ Dermografismo importante

♦ Doença cutânea (D. A.)

♦ Não poder retirar anti-histaminico

♦ Reações atípicas para alimentos

Diagnóstico da Alergia AlimentarEspectro de patologias induzidas por alimentos

IgE mediadaIgE mediada

Não IgE mediadaNão IgE mediada

Mistura de IgE e Não IgE mediadaMistura de IgE e Não IgE mediada

Hipersensibilidade imediata (anafilaxia; Hipersensibilidade imediata (anafilaxia; dermatite atdermatite atóópica; urticpica; urticáária; asma)ria; asma)SSííndrome da alergia oralndrome da alergia oral

Esofagite Esofagite esonofesonofíílica lica alaléérgica rgica Gastrite Gastrite esonofesonofíílica lica alaléérgicargicaGastroenterite Gastroenterite esonofesonofíílica lica alaléérgicargica

Enterocolite Enterocolite proteica proteica alimentaralimentarProctite proteica Proctite proteica alimentaralimentarEnteropatia proteica Enteropatia proteica alimentaralimentarDoenDoençça cela celííacaaca

Sampson HA, Anderson JA – J Pediatr Gastro Nutrit 2000; 30:S87-94.

Testes Subjetivos na Alergia Alimentar “in vivo”

Testes Subjetivos na Alergia Alimentar “in vivo”

Diário da dieta: barato e chama a atenção do paciente do que está ingerindo. Desvantagens: pouca adesão.Dieta de eliminação: Não tem custo e é um modo de diagnóstico e tratamento. Desvantagens: Não pode ser usado em crises graves ou raras, susceptível a viés pelo paciente ou médico, é difícil se os suspeitos são numerosos e adesão duvidosa.

Diário da dieta: barato e chama a atenção do paciente do que está ingerindo. Desvantagens: pouca adesão.Dieta de eliminação: Não tem custo e é um modo de diagnóstico e tratamento. Desvantagens: Não pode ser usado em crises graves ou raras, susceptível a viés pelo paciente ou médico, é difícil se os suspeitos são numerosos e adesão duvidosa.

Testes Objetivos na Alergia Alimentar “in vivo”

Testes de puntura (Prick test):Extratos comerciaisPossíveis ocorrências:

Falta de disponibilidadeFalsos negativos ou positivos Alergeno só presente no alimentoInstabilidade do alérgeno (frutas e legumes)

Direcionamento para outras avaliações, e para o teste de provocação.

Testes de puntura (Prick test):Extratos comerciaisPossíveis ocorrências:

Falta de disponibilidadeFalsos negativos ou positivos Alergeno só presente no alimentoInstabilidade do alérgeno (frutas e legumes)

Direcionamento para outras avaliações, e para o teste de provocação.

Teste de Puntura na Alergia Alimentar “in vivo”

Vantagens: Simples, barato, resultados imediatos e seguro

Desvantagens: Reação sistêmica (remota) Dificultado por eczemas, dermografismo, etc.Alterado por certas medicações: Ex.: antihistamínicos, antidepressivos

tricíclicos, etc.

Vantagens: Simples, barato, resultados imediatos e seguro

Desvantagens: Reação sistêmica (remota) Dificultado por eczemas, dermografismo, etc.Alterado por certas medicações: Ex.: antihistamínicos, antidepressivos

tricíclicos, etc.

Performance do Prick Test vs DBPCFC

Sampson HA; Ho DG - – JACI 1997; 100:44-51.

RAST na alergia alimentarRAST na alergia alimentar

Vantagem: seguroDesvantagem:

Custo, Demora do resultado, Falta do alérgeno específico

Vantagem: seguroDesvantagem:

Custo, Demora do resultado, Falta do alérgeno específico

Testes Objetivos na Alergia Alimentar “in vitro”

CAP SystemCAP SystemImunocap:

Resultados em kUA/L de IgE específicaValores preditivos positivo e negativo de 90% e 95% para ovo, leite, amendoim e peixe Prevê reações futuras Valores confiáveis mesmo em pacientes não atópicos.

(JACI 100:444, 1998 e 107:891-6, 2001).

Imunocap:Resultados em kUA/L de IgE específicaValores preditivos positivo e negativo de 90% e 95% para ovo, leite, amendoim e peixe Prevê reações futuras Valores confiáveis mesmo em pacientes não atópicos.

(JACI 100:444, 1998 e 107:891-6, 2001).


Performance do Cap Systemcom cutoff = 0,35 KUA/L (idade média= 5,2 anos)

Sampson HA; Ho DG – JACI, 1997; 100:44-51.

Outros marcadores na alergia alimentarOutros marcadores na alergia alimentarHistamina:

Metabolização rápida (pouca utilidade)Triptase:

Dosagem ideal: 1 a 2 horas após a ingestão ou 30-60 min após o inicio da reação. Diminui em 30-90 min. Beta-triptase armazenada nos grânulos é o marcador da ativação do mastócito. Tolera congelamento, mesmo em crises graves não se eleva muito.

Histamina:Metabolização rápida (pouca utilidade)

Triptase:Dosagem ideal: 1 a 2 horas após a ingestão ou 30-60 min após o inicio da reação. Diminui em 30-90 min. Beta-triptase armazenada nos grânulos é o marcador da ativação do mastócito. Tolera congelamento, mesmo em crises graves não se eleva muito.


Sampson HA – JACI 1999; 103:981.

Diagnóstico da Alergia AlimentarVisão geral

Obrigado


Na prática da alergia clínica♦ Hemograma VHS♦ Proteína C reativa♦ Imunoglobulinas - IgG – A – M – E (total / específica)♦ Subclasses de IgGs. (Estudo funcional)♦ Estudo do complemento (CH50 – C3 – C4 – INHC1E)♦ Estudo da fagocitose (NBT)♦ Exame de urina♦ Estudo radiológico♦ Estudo imagem abdominal (Asplenia)♦ Testes cutâneos

♦Hipersensibilidade imediata♦Hipersensibilidade tardia

Na prática da alergia clínica♦ Hemograma VHS♦ Proteína C reativa♦ Imunoglobulinas - IgG – A – M – E (total / específica)♦ Subclasses de IgGs. (Estudo funcional)♦ Estudo do complemento (CH50 – C3 – C4 – INHC1E)♦ Estudo da fagocitose (NBT)♦ Exame de urina♦ Estudo radiológico♦ Estudo imagem abdominal (Asplenia)♦ Testes cutâneos

♦Hipersensibilidade imediata♦Hipersensibilidade tardia


Linfócitos - Testes Funcionais

Linfócito B♦ Dosagem de imunoglobulinas e subclasses ♦ Anticorpos naturais

(Ex.: Isohemaglutininas, heterófilos)♦ Resposta pós-vacinal

(Ex.: tétano, Pneumovax, etc)♦ Secreção de imunoglobulinas

(Ex.: Elispot) - Estuda citocina e imunoglobulina individual secretada pelo linfócito


Linfócito B♦ Dosagem de imunoglobulinas e subclasses ♦ Anticorpos naturais

(Ex.: Isohemaglutininas, heterófilos)♦ Resposta pós-vacinal

(Ex.: tétano, Pneumovax, etc)♦ Secreção de imunoglobulinas

(Ex.: Elispot) - Estuda citocina e imunoglobulina individual secretada pelo linfócito



Linfócito T – Que finalidade?

♦ Determinar competência em infecções recorrentes

♦Avaliar hipersensibilidades Tipo IV (CMI)

♦Monitorar efeitos supressivos de drogas ou

doenças (Ex.: HIV)


Linfócito T – Que finalidade?

♦ Determinar competência em infecções recorrentes

♦Avaliar hipersensibilidades Tipo IV (CMI)

♦Monitorar efeitos supressivos de drogas ou

doenças (Ex.: HIV)


Linfócitos - Testes FuncionaisLinfócito T - Testes “in vivo”

Testes cutâneos (DTH) - usados para:

♦Determinar se o paciente já teve contato prévio com a infecção ou vacinaçãoEx.: PPD

♦Determinar incapacidade (anergia) ou hipersensibilidade de resposta para antígenos de memória (Recall Ag)

(SK/DN, Candidina, Tricofitina, Tuberculina, etc)♦Avaliação para testes de contato - D. contato

(DNCB)

Linfócitos - Testes FuncionaisLinfócito T - Testes “in vivo”

Testes cutâneos (DTH) - usados para:

♦Determinar se o paciente já teve contato prévio com a infecção ou vacinaçãoEx.: PPD

♦Determinar incapacidade (anergia) ou hipersensibilidade de resposta para antígenos de memória (Recall Ag)

(SK/DN, Candidina, Tricofitina, Tuberculina, etc)♦Avaliação para testes de contato - D. contato

(DNCB)

Teste intradérmico

Hipersensibilidade Tardia

(Recall Ag.)

Teste intradérmico

Hipersensibilidade Tardia

(Recall Ag.)

Diagnóstico Laboratorial “in vivo”Diagnóstico Laboratorial “in vivo”



Linfócito T – “in vitro” e “ex- vivo”

Finalidades:

A - Avaliação das subpopulações

B - Avaliação da proliferação / ativação para

mitógenos e Ag. Memória (Recall Ag.)


Linfócito T – “in vitro” e “ex- vivo”

Finalidades:

A - Avaliação das subpopulações

B - Avaliação da proliferação / ativação para

mitógenos e Ag. Memória (Recall Ag.)


Linfócitos - Testes FuncionaisLinfócito T – “in vitro” e “ex- vivo”

Métodos Avançados:

♦Teste de proliferação linfocitária (LPA) com

incorporação da timidina tritiada

♦Citometria de fluxo para citocinas intra-celulares

Determina número e percentagem de células respondedoras


Métodos Avançados:

♦Teste de proliferação linfocitária (LPA) com

incorporação da timidina tritiada

♦Citometria de fluxo para citocinas intra-celulares

Determina número e percentagem de células respondedoras



Métodos Avançados:♦Monitorar ativação recente (Ex.: Cylex kit) –

Monitorização de imunosupressão de transplanteGeração de ATP


Métodos Avançados:♦Monitorar ativação recente (Ex.: Cylex kit) –

Monitorização de imunosupressão de transplanteGeração de ATP



Métodos Avançados:♦Medida “Ex-vivo” de produção de citocinas

Ex.: Quantiferon TB Test


Métodos Avançados:♦Medida “Ex-vivo” de produção de citocinas

Ex.: Quantiferon TB Test



Linfócito T – “in vitro” e “ex- vivo” - Métodos Avançados

♦ Elispot

♦ CTL por liberação de cromio (MHC – restrito)

♦Detecção de CTL por ensaio de tetramero

♦ Citotoxicidade NK e ADCC (MHC – não restrito)


Linfócito T – “in vitro” e “ex- vivo” - Métodos Avançados

♦ Elispot

♦ CTL por liberação de cromio (MHC – restrito)

♦Detecção de CTL por ensaio de tetramero

♦ Citotoxicidade NK e ADCC (MHC – não restrito)

Diagnóstico Laboratorial

Métodos celulares avançados:

♦Ausência de estandartização dos métodos

♦Estabilidade do sangue quando enviada para o laboratório especializado

♦Materiais de referência de difícil acesso

♦Outros?

Métodos celulares avançados:

♦Ausência de estandartização dos métodos

♦Estabilidade do sangue quando enviada para o laboratório especializado

♦Materiais de referência de difícil acesso

♦Outros?

Diagnostico laboratorial em alergia.pdf

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