Download Anais Genética para Todos
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21 a 25 de Julho de 2014 UFPR - Curitiba - PR www.cig.ufpr.br
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21 a 25 de Julho de 2014 UFPR - Curitiba - PR
www.cig.ufpr.br
1
ÍNDICE – ÁREAS
A1 - GENÉTICA E EVOLUÇÃO HUMANA ....................................................................................... 2
A2 - GENÉTICA, EVOLUÇÃO E MELHORAMENTO VEGETAL E MICRORGANISMOS .............. 27
A3 - GENÉTICA EVOLUÇÃO E MELHORAMENTO ANIMAL........................................................ 37
A4 - MUTAGENESE ........................................................................................................................ 47
A5 - GENÔMICA E BIOINFORMÁTICA .......................................................................................... 58
A6 - GENÉTICA NA ESCOLA......................................................................................................... 60
2
A1 - GENÉTICA E EVOLUÇÃO HUMANA
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AÇÃO DO HEXAHIDROXITRIFENILENO NO PROCESSO DE AUTOFAGIA EM CÉLULAS
DE GLIOBASTOMA HUMANO
Otávio Martins Cruz ¹, José Lucas Malosti Teodoro Rodrigues¹, Monique Meyenberg Cunha de Pádua¹,
Guilhermina Rodrigues Noleto 1, Herbert Winnischofer ² , Gláucia Regina Martinez¹, Sheila Maria
Brochado Winnischofer¹
1. Universidade Federal do Paraná – Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular
Laboratório de Oxidações Biológicas
2. Universidade Federal do Paraná – Departamento de Química
O glioblastoma multiforme refere-se a forma mais agressiva dos cânceres do sistema nervoso central, fato corroborado
pelos altos índices de mortalidade. Este cenário revela a ineficiência da terapêutica atual que é baseada no uso do
quimioterápico temozolomida seguido de radioterapia. Dessa forma, faz-se necessário elucidar processos celulares
envolvidos na resistência das células de glioma aos tratamentos atuais. O objetivo deste trabalho é avaliar a ação do
hexahidroxitrifenileno (HTF) no processo de autofagia em células da linhagem U87MG. A viabilidade das células foi
avaliada pelo método de MTT nas doses de 10 e 25µM nos tempos de 12, 24 e 48h. Observou-se que no tempo de 12h o
HTF não diminuiu a viabilidade celular em nenhuma das doses. No tempo de 24h, observou-se que a dose de 25µM
reduz em 22% a viabilidade das células U87MG, enquanto no tempo de 48h na dose de 10µM a redução foi de 37% e de
57% na dose de 25µM. A avaliação das proteínas LC3 I e II, marcadoras da autofagia foi realizada por western blotting.
No tempo de 12 horas observou-se aumento na expressão dessas proteínas. Em 24 horas foi possível observar uma
diminuição na expressão de LC3 I e II, sendo que no tempo de 48h na dose de 25µM essa diminuição foi ainda mais
evidente. Esses dados sugerem que a autofagia pode desempenhar um papel promotor de tumor na linhagem U87MG,
sendo necessárias mais investigações para caracterizar o papel desse processo celular na resistência das células de glioma
às terapêuticas anticâncer.
Palavras – chave: Glioma, Hexahidroxitrifenileno, Autofagia
Financiamento: CNPq, Fundação Araucária, INCT-Processos Redox em Biomedicina.
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ANÁLISE DE ASSOCIAÇÃO DO GENE MASP2 DO SISTEMA COMPLEMENTO COM O PÊNFIGO
FOLIÁCEO.
Tamyres Mingorance Carvalho¹’², Márcia H. Beltrame¹’², Iara J. T. Messias-Reason², Maria Luiza E.
Petzl-Erler¹, Angelica B. W. Boldt¹’².
1. Laboratório de Genética Molecular Humana, UFPR.
2.Laboratório de Imunopatologia Molecular, Hospital de Clínicas, UFPR; [email protected]
Pênfigo foliáceo (PF) é uma desordem autoimune endêmica no Brasil,caracterizada pela deposição de
autoanticorpos anti-desmogleína-1, capazes de ativar o sistema complemento. A via das lectinas do
complemento pode ser iniciada pelo reconhecimento de padrões de açúcares por MBL ou ficolinas, que se
associam a MASP-1 e MASP-2. Em estudo anterior do nosso grupo, observou-se uma tendência à
associação positiva entre baixas concentrações de MASP-2 e o PF. Para avaliar uma possível associação
entre o polimorfismo do gene MASP2 e o PF, foram genotipados 90 pacientes e 262 controles, sendo os
pacientes e 95 dos controles de Campo Grande (MS). Foram investigados os polimorfismos rs2273344
(g.7164A>G)e rs9430347 (g.7441G>A) nos introns 4 e 5, respectivamente, por meio de PCR sequência-
específica. Concentrações séricas de MASP-2 foram previamente determinadas por TRIFMA ou ELISA
em um subgrupo dos pacientes econtroles. Adistribuição genotípica apresentou-se em equilíbrio de Hardy
e Weinberg somente para controles. Houve associação positiva entre a doença e homozigotos GA/GA
(OR=5,83 [IC95%=1,58-21,45], p=0,008). Este genótipo está associado com concentrações mais elevadas
de MASP-2 nos controles (medianas 572 ng/ml, comparado com 441 ng/ml em AG/GA e 314 ng/ml em
AG/AG, p=0,005). Como esperado pelo estudo anterior, as concentrações de MASP-2 foram inferiores
nos pacientes, quando comparadas aos controles (240 ng/ml vs. 310 ng/ml, respectivamente, p=0,0002),
podendo refletir um consumo elevado da proteína na ativação do complemento. Nossos resultados levam-
nos a sugerir que polimorfismos intrônicos deMASP2 podem modular a concentração sérica da proteína e
a susceptibilidade ao pênfigo foliáceo.
Palavras–chave: pênfigo foliáceo; MASP2; via das lectinas do complemento.
Financiamento: Fundação Araucária e UFPR – TN.
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Análise do Polimorfismo do Receptor II de TGFB (rs3087465) em mulheres infectadas pelo
Papilomavírus Humano (HPV)
Guilherme Cesar Martelossi Cebinelli ¹, Stephanie Badaró Garcia ¹, Nathalia Tatakihara ¹, Michelle Mota
Sena ¹, Ana Paula Lombardi Pereira ¹, Nádia Calvo Martins Okuyama ¹, Kleber Paiva Trugilo ¹, Luis
Fernando Lasaro Mangieri ¹, Maria Angelica Ehara Watanabe ¹, Karen Brajão de Oliveira ¹.
1. Departamento de Ciências Patológicas, Universidade Estadual de Londrina;
O câncer cervical é uma doença multifatorial, caracterizada por uma ativação exacerbada e manutenção
de vias inflamatórias. O principal fator do desenvolvimento do câncer cervical é a infecção pelo HPV que
promove um aumento do TGFB promovendo um pior prognóstico por inibir a resposta imune via Tregs.
Os efeitos do TGFB são mediados por dois receptores TGFBRI e TGFBRII, cuja expressão desregulada
tem sido descrita em diversos tumores. Desta forma a presença do polimorfismo pode alterar o equilíbrio
do microambiente tumoral favorecendo ou prejudicando o desenvolvimento tumoral. O objetivo deste
estudo foi investigar a frequência genotípica do TGFBRII em mulheres infectadas pelo HPV na
população de Londrina e associá-las a presença do polimorfismo com as características
sociodemográficas das mulheres. Foram testadas 117 mulheres, das quais 43,59% apresentaram o HPV.
Destas 35 tiveram seu genótipo para o TGFBRII avaliado pela técnica de PCR-RFLP. A frequência do
alelo A foi de 32,8% e do G 67,2%. Dentre as mulheres avaliadas para o polimorfismo 14,3%
apresentaram o genótipo AA, 37,1% AG e 48,6% GG. Apresentaram idade média de 32,69 ± 12,86, com
média de início da atividade sexual aos 16,03 ± 2,32 anos. Contudo os genótipos não estiveram
associados às características sociodemográficas. Concluímos que a distribuição genotípica e alélica do
TGFBRII de nossa população está de acordo com outras relatadas na literatura. Contudo é necessário
ampliar o estudo para as mulheres não portadoras do vírus, a fim de compararmos as alterações
citopatológicas e clínicas das mesmas de acordo com a distribuição genotípica.
Palavras – chave: (HPV; TGFBRII; polimorfismo)
Financiamento: PPSUS, Fundação Araucária, CNPq.
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ANÁLISE DO POLIMORFISMO GENÉTICO DO FATOR DE TRANSCRIÇÃO FOXP3 EM
PACIENTES PORTADORAS DE CÂNCER DE MAMA SUBTIPO TRIPLO NEGATIVO
Felipe Campos Almeida1, Leandra Fiori Lopes
2, Julie Massayo Maeda Oda
3, Patricia Midori Murobushi
Ozawa1, Bruna Karina Banin Hirata
1, Glauco Akelinghton Freire Vitiello
1, Thiago Cezar Fujita
4, Cintya
Mayumi Ishibayashi1, Roberta Losi Guembarovski
1, Carolina Batista Ariza
1, Karen Mayumi Suzuki
1,
Flávia Luiza Dias1, Marina Okuyama Kihima
1, Maria Angelica Ehara Watanabe
1.
1Universidade Estadual de Londrina (UEL), Londrina, PR
2Faculdades Integradas de Ourinhos (FIO), Ourinhos, SP
3Universidade Federal de Mato Grosso do Sul (UFMS), Três Lagoas, MS
4Centro Universitário Filadélfia (UNIFIL), Londrina, PR
Resumo:
Estudos envolvendo câncer de mama triplo-negativo são de fundamental importância clínica frente à falta
de opções terapêuticas. A detecção da expressão do fator de transcrição FOXP3 (forkhead transcription
factor 3) em células tumorais ou em células T regulatórias pode ser um importante fator prognóstico para
pacientes com esta neoplasia. Polimorfismos no gene FOXP3 podem alterar sua expressão ou a atividade
da proteína, podendo ter implicações em processos tumorais, incluindo o de mama. Dentro deste
contexto, este trabalho teve como objetivo analisar o polimorfismo genético (rs3761548) no FOXP3, que
consiste em uma troca de base única C/A, em 42 pacientes com câncer de mama e em 115 controles,
livres de neoplasia, através da técnica de PCR alelo-específica. O estudo caso-controle para o gene
FOXP3 indicou que pacientes com genótipo homozigoto AA possuem uma suscetibilidade quase 4 vezes
maior para o desenvolvimento do câncer de mama triplo negativo (OR = 3,78, IC 95 % = 1,02-14,06 ).
Não foram observados resultados significativos quando esta mutação foi analisada em relação aos
parâmetros prognósticos: tamanho de tumor, comprometimento de linfonodos e grau nuclear. Assim
sendo, frente a positiva associação observada entre uma mutação polimórfica no gene FOXP3 e o subtipo
tumoral de câncer de mama triplo-negativo, os resultados do presente estudo são sugestivos de que este
fator de transcrição pode ter um envolvimento na patogênse mamária, o que deverá ser validado em
estudos futuros envolvendo um maior número de amostras.
Palavras-chave: FOXP3; câncer de mama; triplo-negativo.
Suporte financeiro: CAPES, CNPq, Fundação Araucária, PROPPG/UEL.
7
ANÁLISE DOS POLIMORFISMOS rs13086740 e rs2016846 DO GENE MME EM PACIENTES
COM A DOENÇA DE ALZHEIMER
Patricia Fernanda Rocha Dias¹, Daiane Simão-Silva1, Gleyse Freire Bono¹, Nalini Drieli Josviak
1, Meire
Silva Batistela1, Mauro Roberto Piovezan
3, Ricardo K.M. de Souza², Lupe Furtado-Alle
1, Ricardo
Lehtonen R. de Souza1
1. Universidade Federal do Paraná. Laboratório de Polimorfismos e Ligação;
2. Instituto de Neurologia de Curitiba;
3. Hospital de Clínicas da UFPR.
e-mail do apresentador: [email protected]
A doença de Alzheimer (DA) caracteriza-se pela perda progressiva de memória e de outras funções
cognitivas, ao ponto de interferir nas atividades cotidianas do indivíduo acometido. Patologicamente
observa-se o acúmulo da proteína tau hiperfosforilada formando emaranhados neurofibrilares e o
amontoamento extracelular da proteína beta amilóide (Aβ) na forma de placas. A neprilisina,
glicoproteína codificada pelo gene MME (Membrane Metallo-endopeptidase), localizado no cromossomo
3q25.1-q25.2, é uma das principais enzimas que atuam na degradação da Aβ. Este trabalho teve como
objetivo verificar a relação entre os polimorfismos rs13086740 e rs2016846 do gene MME e a doença de
Alzheimer através de um estudo caso e controle. Para isso, foram genotipados 115 pacientes
caracterizados para a DA e 123 controles idosos (CI). A genotipagem dos SNP’s (rs13086740,
rs2016846) foram realizadas por TaqMan (Applied Biosystems). A análise estatística do Qui-quadrado e
de significância (p) foram realizadas com o programa StatView 5.0. Diferentemente do esperado, não
foram observadas diferenças estatísticas entre as frequências alélicas e genotípicas do grupo controle e
DA para os dois polimorfismos (p>0,05). Devido ao papel regulatório da neprilisina na deposição das
placas senis, principalmente nas regiões de hipocampo e giro temporal, não se descarta a hipótese que
alterações em outras regiões do gene MME possam interferir na expressão gênica e contribuir para baixos
níveis da atividade enzimática.
Palavras – chave: Doença de Alzheimer; neprisilina; MME.
Financiamento: CAPES, CNPQ
8
ASPECTOS CLÍNICO-MOLECULARES DA INFECÇÃO POR ADENOVÍRUS EM
PACIENTES PEDIÁTRICOS
Elenice Stroparo¹, Kárita Cláudia Freitas Lidani², Cristina R. Cruz3, Maria do Carmo Debur
4, Luine R.
Vidal4, Meri B. Nogueira
4, Sergio M. de Almeida
4, Luciane A. Pereira
4, Indianara Rotta
4, Sonia Mara
Raboni4
1. Programa de Pós-Graduação em Saúde da Criança e do Adolescente, Universidade Federal do Paraná
(UFPR), Curitiba (PR).
2. Laboratório de Imunopatologia Molecular. Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná
(HC/UFPR), Dpto. de Patologia Médica, Curitiba (PR); [email protected]
3. Departamento de Pediatria, Universidade Federal do Paraná (UFPR), Curitiba (PR).
4. Laboratório de Virologia, Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (HC/UFPR),
Curitiba (PR)
As infecções respiratórias agudas por Adenovírus (AdV) vem sendo uma das principais causas de
mortalidade em crianças menores de cinco anos. Nesse sentido, objetivamos caracterizar clínica e
geneticamente isolados de AdV humanos em pacientes pediátricos do Hospital de Clínicas da
Universidade Federal do Paraná (1996-2008). O DNA genômico foi extraído a partir de 31 amostras de
aspirado de nasofaringe, empregando tiocianato de guanidina, com posterior subtipagem viral por
sequenciamento do gene VA-RNA (RNA associado a Vírus). A partir das seqüências obtidas, foi
construída uma árvore filogenética por máxima verossimilhança e inferência Bayesiana. Os dados
clínicos dos pacientes foram obtidos dos prontuários médicos. Os subgêneros encontrados foram B:1,
B:2, C e D. Foram obtidas 31 sequências para o gene VA-RNA, das quais, 19 representam sequências
consenso entre ambas as fitas do DNA; enquanto para as demais, apenas uma das fitas apresentou
condições para análise. Amostras identificadas para o mesmo grupo viral apresentaram grande variação
nos valores de divergência genética, com os altos índices nos subgêneros B:1 tipo 3 e B:1 sorotipo 7. A
incidência do AdV foi maior em crianças com idade inferior a dois anos, sendo observados,
principalmente, sintomas como taquipneia, esforço respiratório, febre, taquicardia e tosse. Do total de
pacientes hospitalizados, doze (36%) evoluíram para o óbito, sendo os subgêneros B:1 e C os mais
presentes entre os pacientes da UTI e que foram a óbito, porém não houve correlação entre o subtipo viral
e a severidade da doença para as amostras analisadas.
Palavras – chave: Adenovírus humanos; Filogenia; Infecção respiratória.
Financiamento: CAPES/CNPq
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ASSOCIAÇÃO DO GENE MBL2 COM O PÊNFIGO FOLIÁCEO
Luana CarolineOliveira1, 2
,Dayane F. Schmidt1,2
,Maria Luiza Petzl-Erler¹, Iara J. T. Messias-Reason²,
Angelica B. W. Boldt1, 2
.
1.Laboratório de Genética Molecular Humana, Departamento de Genética, UFPR.
2. Laboratório de Imunopatologia Molecular, Hospital de Clínicas, UFPR.
e-mail: [email protected]
O pênfigo foliáceo (PF) é uma doença autoimune endêmica no Brasil, caracterizada pela presença de
autoanticorpos, anti-desmogleína-1, capazes de ativar o sistema complemento. Ocomplementotambém
pode ser ativado pelo reconhecimento de padrões de açúcares pela lectina ligante de manose (MBL). Em
estudo anterior do nosso grupo, observou-se uma tendência à susceptibilidade ao PF em indivíduos com
níveis mais elevados de MBL,determinados por ensaio imunofluorimétrico (TRIFMA). A fim de verificar
se há associação entre o polimorfismo gênico de MBL2 com o PF, genotipou-se79 pacientes e 321
controles, sendo os pacientes e 51 dos controles, de Campo Grande (MS). Foram investigados os
polimorfismos rs11003125 (g.273G>C ou H/L) e rs7095891 (g.826C>T ou P/Q), na região promotora e
região não traduzida do exon 1, respectivamente, por meio de PCR sequência-específica, e determinados
três haplótipos: HP, LP e LQ. Além das mediçõs por TRIFMA, foram avaliados 43 controles cujas
concentrações séricas de MBLforam previamente medidas por imunoadsorbância enzimática (ELISA).A
distribuição genotípica apresentou-se em equilíbrio de Hardy e Weinberg em ambos os grupos. Houve
associação positiva entre o haplótipo HP e adoença (p=0,03, OR=1,53 [95%CI=1,06-2,21]).Este
haplótipo está associado com concentrações superiores de MBL em 54 pacientes e 94 controles(média de
1306 vs. 481 ng/mLe 1713 vs. 840ng/mLrespectivamente,comparado aindivíduos que não apresentam
HP). Contudo, as concentrações não diferiram entre os grupos.Estes resultados, ainda que preliminares,
levam-nos a sugerir um papel desta proteína na susceptibilidade à doença.
Palavras–chave: Pênfigo foliáceo; MBL2; sistema complemento
Financiamento: Fundação Araucária e UFPR – TN.
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ASSOCIAÇÃO ENTRE TABAGISMO, HAPLÓTIPOS HLA-A,-B,-DR E GENES DE
RECEPTORES OLFATÓRIOS
Leonardo Leite Ferraz de Campos¹, João Carlos Marques Magalhães ²
1. Graduando do curso de Ciências Biológicas da UFPR,
2. UFPR; e-mail do apresentador
O hábito tabagista parece estar geneticamente associado a genes de receptores olfatórios. Um
grupo destes genes encontra-se em forte desequilíbrio de ligação com a região HLA. O presente trabalho
tem por objetivo investigar a frequência de haplótipos HLA e sua relação com o tabagismo em uma
amostra da população paranaense. A amostra (n = 74144; fumantes = 13019; não-fumantes = 61125)
provém do banco de dados de doadores voluntários de células tronco hematopoiéticas do LIGH
(Laboratório de Imunogenética e Histocompatibilidade da UFPR), previamente genotipado para os loci
HLA-A, -B, -DR em baixa/média resolução pela técnica SSO. As frequências haplotípicas foram
estimadas pelo método da maximização de expectativas. A análise de associação foi feita por odds ratio
para cada haplótipo. A fim de evitar artefatos estatísticos, novas análises foram realizadas dividindo-se a
população por etnia e sexo, buscando associações consistentes em todos os subgrupos. Dos 14540
haplótipos encontrados, 188 apresentaram odds ratio significativo nos dois sexos, sendo 18 associações
positivas (mais frequentes em fumantes) e 170, associações negativas (mais frequentes em não fumantes).
Além do haplótipo já conhecido, apenas o haplótipo HLA-A24-B7-DR1 apresentou associação
consistente em todos os subgrupos. Os odds ratios (or) e intervalos de confiança (IC) para o total da
amostra foram: homens, or = 1,618; IC = [1 – 2,59]; mulheres, or = 1,712; IC = [1,13 – 2,59]. Este é o
segundo haplótipo HLA possivelmente associado ao tabagismo e também está em associação positiva,
podendo ser um fator de risco na aquisição do hábito.
Palavras – chave: Tabagismo; HLA; Receptores Olfatórios
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ESTUDO DE ASSOCIAÇÃO COM VARIANTE DO GENEADIPOQ EM ADOLESCENTES
OBESOS SUBMETIDOS A EXERCÍCIOS FÍSICOS AERÓBIOS E ORIENTAÇÃO
NUTRICIONAL.
Luciana Lange Bassani¹, Neiva Leite ², Gerusa Eisfeld Milano2 , Fabrício Cieslak
2, Ricardo Lehtonen
Rodrigues Souza1, Lupe Furtado-Alle
1.
1. Departamento de Genética, Universidade Federal do Paraná;
2. Núcleo de Qualidade de Vida, Departamento de Educação Física, Universidade Federal do
Paraná;[email protected]
A obesidade é uma doença epidêmica que pode levar a sérias complicações. A interação de fatores
genéticos e ambientais determinam a saúde e regulam várias funções metabólicas. Este trabalho teve
como objetivo investigar a associação entre obesidade juvenil, incluindo diferenças na resposta à
atividade física e SNP rs1501299 do gene ADIPOQ. Adolescentes com excesso de peso (n=117, 10-16
anos)participantes de um projeto de 12 semanas de exercícios físicos e orientação nutricional tiveram o
DNA genotipados para o polimorfismo rs1501299 do gene ADIPOQ, previamente já relacionado com
obesidade. Após as 12 semanas, ocorreu redução significativa (p<0,05) para as variáveis índice de massa
corporal escore-Z (IMC-escore Z), circunferência abdominal (CA), frequência cardíaca em repouso (FC
rep), porcentagem de gordura corporal (%GC), massa corporal gorda (MG), triglicerídeos (TG), glucose
após 120 min (GLU120), insulina em jejum (INS0), insulina após 120 min (INS120), Homeostasis Model
Assessment (HOMA-IR) e frequência caridíaca máxima (FC máx). As variáveis massa corporal magra
(MM), colesterol HDL (HDL-C), Quantitative Insulin Sensivity Check Index (QUICKI), consumo de
oxigênio pico (VO2 pico) e consumo de oxigênio absoluto (VO2 abs) sofreram aumento significativo.
Após análise de regressão logística foi encontrado que o alelo T276 atuou como fator de risco
independente na redução de CA, INS0 e HOMA-IR. Conclui – se que 12 semanas de exercícios físicos
foram suficientes para melhora na adiposidade, sensibilidade à insulina, aptidão cardiorrespiratória e
perfil lipídico em adolescentes caucasianos obesos. Além disso, o alelo T276 do polimorfismo rs1501299
mostrou estar associado com a obesidade e sensibilidade à insulina.
Palavras–chave: rs1501299; obesidade; adolescentes.
Financiamento: CAPES.
12
ESTUDO DE ASSOCIAÇÃO ENTRE AS MUTAÇÕES C660X DO GENE LDLR, R3500Q DO
GENE APOB E VARIANTES DO GENE APOE E DISLIPIDEMIAS.
Caroline Cardozo Gasparin ¹, Ricardo Lehtonen Rodrigues de Souza 1, Lilian Pereira Ferrari
2, Lupe
Furtado Alle¹
1. Laboratório de Polimorfismos e Ligação, Universidade Federal do Paraná – UFPR;
2. Faculdades Integradas do Brasil - Unibrasil; [email protected]
As dislipidemias constituem fatores de risco para Doença Arterial Coronariana (DAC), que representa um
importante problema de saúde pública. Muitos genes influenciam os níveis lipêmicos, tais como LDLR,
APOE e APOB. Na maioria das populações estudadas o alelo ε4 do gene APOE relaciona-se com altos
níveis de LDL-Colesterol (LDL-C). Há ainda a mutação R3500Q do gene APOB, a qual foi identificada
como sendo a causa do Defeito Familiar da APOB-100 (DFB-100). Já a mutação C660X do gene LDLR, é
uma das principais alterações genéticas que leva à Hipercolesterolemia Familiar (HF). Visto a relevância
do assunto objetivou-se verificar a existência de associação entre a mutação C660X, dos alelos do gene
APOE e da mutação R3500Q e dislipidemias. A metodologia seguiu extração de DNA por salting-out,
genotipagem por PCR-RFLP e por Taqman. Foram analisados 214 indivíduos e a mutação C660X foi
investigada em apenas 72 das 214 amostras, as quais se caracterizavam por altos níveis de lipídios, mas
nenhuma apresentou a alteração. As frequências dos alelos ε2, ε3 e ε4 foram respectivamente
9,25±0,4625; 70,5±3,525 e 20,25%±1,401, enquanto que a frequência da mutação R3500Q foi de
4,46%±1,00. Encontrou-se uma associação significativa entre a mutação R3500Q e aumentos dos níveis
de Colesterol Total (CT), sendo tal alteração genética um fator de risco para níveis elevados de CT
independente de gênero e idade. O alelo ε4 foi mais frequente em indivíduos com níveis mais altos de CT
e LDL-C, já o alelo ε2 apresentou maior frequência em indivíduos com níveis maiores de HDL-C.
Palavras – chave: APOB; APOE; Dislipidemias.
Financiamento: Reestruturação e Expansão das Universidades Federais - REUNI.
13
ESTUDO DE ASSOCIAÇÃO ENTRE O GENE SLITRIK3 E PACIENTES COM A DOENÇA DE
ALZHEIMER
Nalini Drieli Josviak 1, Daiane Simão-Silva¹, Meire da Silva Batistela ¹, Patrícia Dias¹, Gleyse Freire
Bono¹, Ricardo K.M. de Souza², Mauro R. Piovezan3, Lupe Furtado-Alle
1, Ricardo L. de Souza
1
1. Universidade Federal do Paraná. Laboratório de Polimorfismos e Ligação;
2. Instituto de Neurologia de Curitiba;
3. Hospital de Clínicas de Curitiba;
e-mail do apresentador: [email protected]
A doença de Alzheimer é a demência neurodegenerativa mais comum em idosos, afetando
globalmente mais de 25 milhões de pessoas. O gene SLITRIK3 está localizado no cromossomo 3q26.2 e
faz parte de uma família de genes neurais que controlam o crescimento de neuritos. Neuritos distróficos
(DNs), são encontrados em torno das placas amilóides e estão estreitamente associados com os
emaranhados neurofibrilares, comuns em pacientes com a doença de Alzheimer. O objetivo deste estudo
foi verificar se existe associação entre a Doença de Alzheimer e o tag-SNP rs17449213 do gene
SLITRIK3 em amostras caso-controles. Foram genotipados 112 pacientes com Alzheimer e 122 Idosos
(Idade média = 77.06) cognitivamente saudáveis através do kit TaqMan SNP Genotyping, Applied
Biosystems, provenientes do Hospital de Clínicas de Curitiba e do Instituto de Neurologia de Curitiba. As
frequências genotípicas e alélicas do SNP rs17449213 foram estimadas e comparadas entre casos e
controles e não foi encontrada diferença significativa entre eles (p=0,5487). As frequências alélicas
encontradas (G=0,913; A=0,086) foram semelhantes as descritas em populações caucasianas pelo projeto
HapMap-CEU (G=0,924; A=0,076). Este foi o primeiro trabalho de associação do gene SLITRIK3 com a
Doença de Alzheimer. Conclui-se que o SNP rs17449213 não está associado com a Doença de
Alzheimer, sendo encorajado estudos futuros com demais SNPs desta região em um número maior de
amostras.
Palavras – chave: Doença de Alzheimer; SLITRIK3, tag-SNPs.
Financiamento: Capes, CNPq.
14
Avaliação de danos no DNA pela técnica Ensaio Cometa em pacientes obesos submetidos à cirurgia
bariátrica
Liposki, DM1; Almeida, ER2; Biolchi, M1; Paludo, E1; Oliveira, A1; Steffens, E1; Weiss, Phe1; Goetz, ER2,
Vogel, CIG1, 2
1 Universidade do Estado de Santa Catarina, Centro de Ciências Agroveterinárias, CAV-UDESC, Lages, SC
2 Universidade do Planalto Catarinense, UNIPLAC, Lages, SC
carla.vogel @ udesc.br
Palavras-chave: obesidade, cirurgia bariátrica, genotoxicidade, teste do cometa
A obesidade é um problema de saúde em todo o mundo. É uma doença complexa causada por fatores genéticos e
não genéticos. A obesidade é caracterizada pelo acúmulo de gordura corporal resultante de desequilíbrio energético
prolongado. Além disso, a obesidade está associada com um estado de baixo nível de inflamação crônica no tecido
adiposo, o que poderia levar a um aumento na frequência de danos ao DNA. Para avaliar os níveis de danos no
DNA em indivíduos obesos foram analisados 13 indivíduos (10 mulheres) submetidos à cirurgia bariátrica no
Hospital Geral e Maternidade Tereza Ramos, em Lages, SC. O peso corporal médio dos pacientes antes da
intervenção cirúrgica foi de 122,1 kg, com IMC = 43,67; idade variando entre 26 e 55 anos de idade.
Primeiramente, foi realizada coleta de sangue previamente á cirurgia bariátrica (denominada T0) e o ensaio do
cometa alcalino foi realizado. Após a cirurgia bariátrica, os pacientes precisavam voltar para a rotina de avaliação
clínica e sangue foi coletado nos seguintes períodos: nove dias depois da cirurgia (T1), 30 dias após a cirurgia (T2)
e 90 dias após a cirurgia (T3). Foram analisadas 200 células/indivíduo. Os níveis de danos no DNA foram
analisados utilizando o teste estatístico de análise de variânciaKruskal-Wallis. O score de dano ao DNA foi 0,808
em T0, 1,0 em T1, T2 em 0,952 e 1,35 em T3; não foram encontradas diferenças estatísticas nos diferentes períodos
(p = 0,427). Nossos dados sugerem que não há aumento ou diminuição dos níveis de danos no DNA em indivíduos
obesos submetidos à cirurgia bariátrica.
Apoio financeiro: UDESC
15
EXPRESSÃO DE CD1D EM PÊNFIGO FOLIÁCEO
Sara Cristina Lobo Alves ¹, Maria Luiza Petzl-Erler¹.
1. Laboratório de Genética Molecular Humana-UFPR, [email protected]
O pênfigo foliáceo (PF) é uma doença autoimune da pele na qual há a formação de autoanticorpos contra
a desmogleína 1, proteína importante na adesão entre queratinócitos. O PF se caracteriza pelo
desprendimento da camada superior do epitélio, com formação de bolhas e erosões na pele. Como a
maioria das doenças autoimunes, o pênfigo é uma doença complexa na qual atuam fatores ambientais e
genéticos. O gene CD1D codifica a glicoproteína CD1d que participa da apresentação de antígenos
glicolipídicos para células T natural killer (NKT). Ele é expresso principalmente em células
apresentadoras de antígenos como monócitos, células dendríticas e células B e também em células T,
sendo que já foi reportada superexpressão em células T CD4+ de pacientes de pênfigo. O objetivo do
presente trabalho foi comparar a expressão de CD1D em monócitos, em nível de RNAm, entre pacientes
de pênfigo foliáceo e controles. Nossos resultados demonstraram que CD1D está subexpresso em
pacientes com lesão (P = 0,0079; diferença de expressão – DE = 0,44) e sem lesão (P = 0,0028; DE =
0,30) em relação aos indivíduos controle. Por meio desses resultados concluímos que a expressão de
CD1D está alterada em pênfigo foliáceo, o que nos leva a sugerir que haja participação de células NKT e
antígenos glicolipídicos na patogênese do pênfigo. O papel de CD1D e sua expressão em nível de RNA e
proteína pode ser foco de estudos futuros tanto em pênfigo quanto em outras doenças autoimunes.
Palavras-chave: pênfigo foliáceo, expressão gênica, CD1D.
Financiamento: CAPES; CNPq
16
HLA-DMA: ESTUDO DE ASSOCIAÇÃO COM O PÊNFIGO FOLIÁCEO ENDÊMICO
Eleonora Paulini¹, Maria Luiza Petzl-Erler²
1 Universidade Federal do Paraná, Departamento de Genética, Laboratório de Genética Molecular
Humana
2 Professora associada da Universidade Federal do Paraná, Departamento de Genética, Laboratório de
Genética Molecular Humana
O MHC (Major Histocompatibility Complex) humano é um complexo gênico localizado no braço curto
do cromossomo seis. Nele são encontrados genes cujos produtos proteicos desempenham importantes
funções no contexto da resposta imune. HLA-DMA está localizado na região de classe II do MHC e é
responsável por codificar a cadeia alfa da molécula HLA-DM. Tal molécula regula a apresentação de
antígenos exógenos a linfócitos TCD4+, tendo, portanto, um papel central no controle da imunidade
adaptativa. Alguns estudos anteriores reportaram associações fortes entre certos alelos de HLA-DMA e
doenças autoimunes, ao passo que outros não replicaram as mesmas associações em amostras
populacionais pertencentes a grupos étnicos distintos. Este estudo teve como objetivo verificar se os
diferentes alelos e/ou genótipos de HLA-DMA conferem susceptibilidade diferencial ao pênfigo foliáceo
endêmico (PFE), uma doença autoimune da epiderme, em uma amostra miscigenada da população
brasileira. Um total de 135 indivíduos com PFE e 120 controles foram genotipados. A genotipagem se
deu através do sequenciamento do exon 3 de HLA-DMA. Não houve diferenças estatisticamente
significativas entre as frequências alélicas e genotípicas de HLA-DMA entre o grupo de pacientes de PFE
e a amostra controle. Entretanto, uma tendência a um efeito protetor foi encontrada para o alelo HLA-
DMA*01:03 (OR= 0,28; p= 0,06). O aumento do tamanho amostral nos permitirá verificar se a
significância estatística será ou não atingida. Além disso, duas variantes genéticas (154T>C e 180C>T)
que podem caracterizar novos alelos de HLA-DMA foram encontradas. Estas, entretanto, requerem uma
validação posterior.
Palavras – chave: HLA; pênfigo,
Financiamento: CNPq, Fundação Araucária
17
INFLUÊNCIA DO POLIMORFISMO ALA16VAL DO GENE DA SUPERÓXIDO DISMUTASE
DEPENDENTE DE MANGANÊS (SOD2) NA ATIVIDADE ANTIOXIDANTE DO
RESVERATROL EM LINFÓCITOS HUMANOS
Felipe Rogalski 3,4
, Dianni de Menezes Capeleto 1,4
, Fernanda Barbisan 1,4
, Cibele Teixeira
2,4, Verônica
Farina Azzolin 1,4
, Jéssica de Rosso Motta 5, Ivana Beatrice Mânica da Cruz
1,4
1. Programa de Pós-graduação em Farmacologia - Universidade Federal de Santa Maria (UFSM)
2. Curso de Farmácia - Centro de Ciências da Saúde- Universidade Federal de Santa Maria (UFSM)
3. Curso de Biologia - Centro de Ciências Naturais e Exatas - Universidade Federal de Santa Maria
(UFSM)
4. Laboratório de Biogenômica - Universidade Federal de Santa Maria (UFSM)
Introdução: O resveratrol é uma importante molécula antifúngica, antioxidante e anti-inflamatória que
também retarda a senescência celular. Entretanto, existem poucos estudos avaliando se os efeitos
produzidos pelo resveratrol podem ser influenciados por variações genéticas individuais. Seres humanos
apresentam um polimorfismo na enzima SOD2 (Ala16Val) que afeta a eficiência desta enzima. O
genótipo AA apresenta maior eficiência enzimática e o VV menor eficiência. Os dois genótipos
homozigóticos causam um desbalanço oxidativo estando associados a doenças crônicas. Assim, este
estudo buscou avaliar se o resveratrol afetaria os níveis de espécies ativas de oxigênio (EAOs) de células
mononucleares periféricas do sangue (CMPS) portadoras de diferentes genótipos Ala16Val-SOD2.
Métodos: CMPS foram obtidas e isoladas de indivíduos saudáveis portadores de diferentes genótipos da
SOD2. As células foram cultivadas em condições controladas e tratadas com 0, 2, 5 e 10μM de
resveratrol. Os níveis de EAOs foram fluorimetricamente determinados (ensaio DCFH-DA) depois de
24h e 72h e comparados por análise estatística de variância seguida de teste de Dunnet. Resultados: Os
níveis de EAOs em células expostas ao resveratrol variaram conforme o genótipo da SOD2. Enquanto
CMPS-AA não apresentaram diferenças entre o grupo controle e tratado, as CMPS-VV apresentaram um
aumento de 12% nos níveis de EAOs após 24h de exposição. Por outro lado, as CMPS-AV diminuíram
15-20% os níveis de EAOs nas concentrações de 5 e 10µM. Conclusão: O estudo sugere que a ação
antioxidante do resveratrol não é irrestrita, mas depende da potencial interação com o sistema
antioxidante endógeno, em especial o gene da SOD2.
Palavras-chaves: espécies ativas de oxigênio; Ala16Val-SOD2; genótipo
Financiamento: CNPq, CAPES, FAPERGS
18
Padrão das colinesterases AChE e BChE na doença de Alzheimer em nível plasmático.
Daiane Priscila Simão-Silva¹, Gleyse Freire Bono1, Patrícia Fernanda Rocha Dias¹, Meire Batistela¹,
Nalini Drieli Josviak¹, Lupe Alle-Furtado¹, Ricardo Krause M. de Souza2, Mauro Piovezan
3, Ricardo L.
R. de Souza¹,
1. Universidade Federal do Paraná – UFPR, Departamento de Genética; Laboratório de Polimorfismos e
Ligação.
2. Instituto de Neurologia de Curitiba – INC, Ambulatório de Desordens da Memória e Comportamento.
3. Hospital de Clínicas – UFPR, Ambulatório de Disfunção Cognitiva.
A Doença de Alzheimer (DA) é caracterizada pela formação de emaranhados neurofibrilares (NFTs)
intraneuronais e placas β-amilóides (Aβ) extracelulares. Além destas alterações estruturais há uma
mudança significante das colinesterases, com redução na atividade da Acetilcolinesterase (AChE) e
aumento na atividade da Butirilcolinesterase (BChE) na via colinérgica cerebral. Este trabalho teve por
objetivo verificar os níveis de atividade da BChE e AChE no plasma em 112 pacientes com a doença de
Alzheimer e 118 idosos saudáveis visando caracterizar o perfil das colinesterases em nível periférico. A
atividade enzimática da BChE e AChE foi mensurada pelo método ELISA (Ensaio de Imunoabsorção
Ligado a Enzima) sanduíche. Kolmogorov-Smirnov foi utilizado para testar a normalidade da distribuição
das variáveis e a comparação entre as médias foi realizada pelo teste de Mann-Whitney. A atividade da
BChE foi reduzida nos pacientes com DA (DA = 1,43 nmol/min/mL ± 0,68; CI = 1,71 nmol/min/mL ±
0,66) enquanto a atividade da AChE foi aumentada (DA = 4,21 nmol/min/mL ± 1,31; CI = 3,81
nmol/min/mL ± 1,33). Houve correlação positiva entre o aumento da atividade da AChE e diminuição da
BChE (DA: ρ = 0,51; p = 7,09e-09
). Este padrão de atividade é o oposto do observado no tecido cerebral e
parece estar afetado principalmente pelo próprio percurso da doença. Poucos trabalhos têm descrito o que
ocorre com os níveis colinérgicos no nível periférico, sendo a identificação de um padrão de atividade
colinérgica uma importante informação para compreensão do estado homeostático como um todo nos
pacientes com demência.
Palavras – chave: Butirilcolinesterase; Acetilcolinesterase; Doença de Alzheimer.
Financiamento: Capes.
19
PAPEL DA SINVASTATINA NO PROCESSO AUTOFÁGICO EM CÉLULAS DEMELANOMA
HUMANO
Carolina Simões Pires Ribeiro¹, Otávio Martins Cruz 1, Sheila Maria Brochado Winnischofer².
1. Universidade Federal do Paraná – Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular
Laboratório de Oxidações Biológicas
2. Professora Adjunta do Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular da Universidade
Federal do Paraná
Fatores genéticos, fenotípicos e ambientais estão envolvidos na susceptibilidade ao melanoma. Este
câncer é responsável por 80% das mortes por câncer de pele sendo considerado um dos tipos mais
agressivos e com alta resistência ao tratamento. Esses aspectos enfatizam a necessidade da busca por
novas terapias mais efetivas. Dados prévios obtidos no grupo mostram que a sinvastatina induz parada de
proliferação em células de melanoma metastático humano, sendo capaz de induzir o fenótipo de
senescência. Tendo em vista este cenário, o objetivo deste trabalho é avaliar a capacidade da sinvastatina
em modular o processo de autofagia em células de melanoma da linhagem WM9. A viabilidade celular
foi avaliada pelo método de Cristal Violeta. As células foram tratadas com diferentes concentrações de
sinvastatina (0,25µmol/L e 1µmol/L) no tempo de 72 horas. Foi observada redução de 24% na viabilidade
das células WM9 quando tratadas com sinvastatina 1µmol/L. A avaliação da autofagia foi realizada a
partir da técnica de Western Blotting. Observou-se que as proteínas LC3 I e II, principais marcadoras do
processo autofágico, tiveram sua expressão aumentada tanto na dose de 0,25µmol/L quanto na de
1µmol/L em relação ao controle. Esses dados evidenciam a necessidade da compreensão do processo
autofágico nas células WM9 tratadas com sinvastatina, uma vez que a caracterização de novos alvos
moleculares torna-se relevante na busca por uma terapêutica mais eficaz no tratamento do melanoma.
Palavras – chave: melanoma; autofagia; sinvastatina.
Financiamento: CAPES, CNPq, Fundação Araucária e INCT-Processos Redox em Biomedicina.
20
Polimorfismo genético do fator de transcrição FOXP3: marcador promissor na patogênese do
Tumor de Wilms.
Patricia Midori Murobushi Ozawa¹, Carolina Batista Ariza¹, Carlos Eduardo Coral de Oliveira¹, Glauco
Akelinghton Freire Vitiello¹, Felipe Campos de Almeida¹, Cintya Mayumi Ishibashi2, Roberta Losi
Guembarovski¹, Thiago Cezar Fujita2, Alda Losi Guembarovski¹, Karen Mayumi Suzuki¹, Bruna Karina
Banin Hirata¹, Vânia Darc de Castro¹, Maria Angelica Ehara Watanabe¹
1. Universidade Estadual de Londrina, UEL, Londrina, PR.
O tumor de Wilms (nefroblastoma) é uma neoplasia renal rara que acomete 1 a cada 10 mil crianças,
especialmente abaixo de 6 anos, sendo igualmente distribuída entre os gêneros. O entendimento do
mecanismo molecular envolvido no desenvolvimento do tumor de Wilms tem sido um grande desafio.
Sabe-se que o FOXP3, conhecido como marcador de células T regulatórias (Tregs), também pode ser
expresso em células tumorais, sendo associado a pior sobrevida. É conhecido que polimorfismos
genéticos de base única (SNPs) na região promotora podem influenciar na expressão de genes. Neste
contexto, o objetivo deste estudo foi investigar os polimorfismos rs3761548 e rs2232365 do gene FOXP3
e sua relação com a susceptibilidade ao tumor de Wilms. Foram analisados 19 pacientes e 79 indivíduos
saudáveis livres desta neoplasia através da técnica de PCR alelo específico. O polimorfismo rs3761548
não apresentou associação com o desenvolvimento do TW (OR = 1,418; 95%CI 0,6037- 3,361;
p = 0,5142). Porém a presença do alelo mutato do polimorfismo rs2232365 confere proteção
desenvolvimento do TW (OR 0,16; 95%CI = 0,0405-0,5811, p = 0,0045). Portanto, sugere-se que o
polimorfismo rs2232365 pode ser considerado um candidato promissor na investigação relacionada à
patogênese do tumor de Wilms.
Palavras – chave: tumores pediátricos; nefroblastoma; fator de transcrição.
Financiamento: CAPES, CNPq, Fundação Araucária, Fundo Estadual para a Infância e Adolescência,
Secretaria da Família e Desenvolvimento Social, PROPPG/UEL.
21
POLIMORFISMOS DE MASP2 E CONCENTRAÇÕES DA PROTEÍNA MASP-2 E O RISCO DE
FEBRE REUMÁTICA E CARDIOPATIA REUMÁTICA CRÔNICA
Sandra Jeremias dos Santos Catarino ¹, Angelica Beate Winter Boldt ², Marcia Holsbach Beltrame ¹,
Hellen Chris Weinschutz Mendes¹, Iara Jose de Messias-Reason 1
1. Laboratório de Imunopatologia, Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (HC-UFPR),
Curitiba, PR.
2. Departamento de Genética Molecular Humana, Universidade Federal do Paraná (UFPR), Curitiba, PR.
MASP-2 é uma proteína-chave na ativação da via das lectinas do complemento. Diversos polimorfismos
do gene MASP2 estão associados com concentrações séricas ou grau de atividade funcional de MASP-2.
Neste trabalho, investigamos uma possível associação entre concentrações séricas e polimorfismos de
MASP2 com a suscetibilidade à febre reumática (FR) e a cardiopatia reumática crônica (CRC). Foram
haplotipados 11 polimorfismos de MASP2 utilizando PCR multiplex sequência-específica em 145
pacientes com história de FR (103 CRC e 42 sem acometimento cardíaco [FRo]) e 290 controles
saudáveis. As concentrações de MASP-2 foram determinadas por ELISA em 145 pacientes e 145
controles. Os polimorfismos p.377A e p.439H, associados à baixa produção de MASP-2, foram
negativamente associados à FRo (P=0,02, OR=0,36) e CRC (P=0,02, OR=0,25). Em contraste, haplótipos
com quatro polimorfismos, localizados do intron 9 ao exon 12 (CDVR) e associados a concentrações
intermediárias de MASP-2, aumentaram a suscetibilidade a CRC (P=0,02, OR=4,9). Apesar disso, as
concentrações de MASP-2 foram mais baixas nos pacientes, do que nos controles, provavelmente devido
ao consumo da proteína pela ativação da via das lectinas (medianas 253 vs. 321 ng/ml respectivamente,
P<0,0001). Os SNPs rs2273344 (g.7164A>G) e rs9430347 (g.7441G>A) foram associados com a
modulação das concentrações de MASP-2 em pacientes e controles. Os indivíduos com o haplótipo GA
apresentaram maiores concentrações de MASP-2 do que os homozigotos AG/AG e as concentrações de
MASP-2 nos indivíduos GA/GA foram menores nos pacientes do que nos controles. Estes resultados
sugerem que os polimorfismos baixo-produtores de MASP2 estão associados com proteção a Febre
reumática.
Palavras – chave: Febre reumática; MASP-2; Polimorfismos de MASP2
Financiamento: CAPES; Fundação Araucária.
22
POLIMORFISMOS DO GENE MASP1 E ASSOCIAÇÃO COM A HANSENÍASE
Hellen Chris Weinschutz Mendes¹, Amanda Lameck Pinho²Angelica B. Winter Boldt¹ ², Iara J. T.
Messias-Reason¹
1. Laboratório de Imunopatologia Molecular, Hospital das Clínicas, UFPR.
2.Laboratório de Genética Molecular Humana, Departamento de Genética, UFPR.
A hanseníase é causada porMycobacterium leprae, que infecta macrófagos e células Schwann do
hospedeiro. A lectina ligante de manose (MBL)e ficolinas (FCNs)reconhecem padrões de açúcares e
resíduos acetilados, respectivamente, emuma ampla variedade de patógenos. Por meio das serina
proteases associadas a MBL,MASP-1 e MASP-2, ambas iniciam a via das lectinas do sistema
complemento.O gene MASP1codifica MASP-1 e duas proteínas que bloqueiam sua ativação:MASP-3 e a
forma não-enzimática MAp44. A susceptibilidade àhanseníase já foi associadaa polimorfismos dos
genesMASP2, MBL2, FCN1 e FCN2assim comoaos níveis séricos das respectivas proteínas.Neste
estudo,identificamos polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) do gene MASP1 (rs7609662 e
rs13064994 no intron 01 e rs72549262 e rs1109452 no exon 12) por PCR sequência-específica multiplex
e quantificamos as proteínas MASP-1, MASP-3 e MAp44 no soro de 95 pacientes e 82 controles,
porensaio imunofluorimétrico TRIFMA. Foi encontrada uma associação entre o genótipo G/A de
rs7609662 no intron01,sem o genótipo T/T de rs1109452 no exon 12, e susceptibilidade à hanseníase
(OR=2,43 [IC95%=1,12-5,30],p=0,027). Houve também uma associação com o
genótipoheterozigotoGT/AC do intron 1 (G/A em rs7609662 e T/C em rs13064994) e baixos níveis de
MAp44 em pacientes (p=0,005). As concentrações de MAp44 e MASP-3, porém não de MASP-1,
também foram inferiores nos pacientes (p<0,005). Embora estes resultados ainda sejam preliminares,
levam-nos a sugerir que o gene MASP1 e os seus produtos reguladores apresentam um papel importante
na modulação da susceptibilidade à hanseníase.
Palavras–chave: Hanseníase; Sistema Complemento; SNP
Financiamento: CAPES e CNPq
23
POLIMORFISMOS DO GENE TACI PODEM ESTAR ASSOCIADOS AO PÊNFIGO
FOLIÁCEO ENDÊMICO
Liana Alves de Oliveira ¹, Maria Luiza Petzl-Erler 1
1. Laboratório de Genética Molecular Humana – UFPR; [email protected]
O Pênfigo Foliáceo Endêmico (PFE), ou fogo selvagem, é uma doença autoimune bolhosa da pele que
ocorre de forma endêmica em algumas regiões do Brasil. Polimorfismos de alguns genes, inclusive do
gene BAFF, estão associados à susceptibilidade diferencial ao PFE. TACI, também chamado
TNFRSF13B, codifica um receptor para as moléculas BAFF e APRIL, coestimuladoras de células B. Está
localizado em 17p11.2 e possui 5 éxons. Com o objetivo de avaliar a existência de associação com
susceptibilidade diferencial ao PFE, foram analisados 6 SNPs no promotor e em íntrons do gene TACI,
em 115 pacientes de PFE e em 100 indivíduos sem a doença (controles). As genotipagens foram feitas
utilizando Sequenom MassARRAY iPLEX e foram calculadas as frequências alélicas, genotípicas e
haplotípicas. As frequências alélicas de dois SNPs, rs11078360 e rs8082017, localizados no íntron 1 de
TACI, diferiram significativamente entre pacientes e controles, com odds ratio (OR) de 0,43 e 0,39,
respectivamente. Estes SNPs estão em forte desequilíbrio de ligação (r2 > 0,95) e o haplótipo AC
(frequência de 13% em controles e 6% em pacientes) também está associado com susceptibilidade
diminuída à doença (OR=0,41; P=0,0115). Estes polimorfismos no íntron 1 poderiam ter uma função
reguladora, influenciando, por exemplo, a expressão de diferentes isoformas. Embora a associação de
polimorfismos dos receptores de BAFF com o PFE ainda precisa ser mais amplamente estudada, este
trabalho aponta para uma possível associação.
Palavras – chave: TACI; autoimunidade; Pênfigo Foliáceo.
Financiamento: CAPES, CNPq, Fundação Araucária
24
POLIMORFISMOS GENÉTICOS DA NQO1, GSTT1 E GSTM1 EM CRIANÇAS
PORTADORAS DE LEUCEMIA LINFÓIDE AGUDA
Carlos Hiroji Hiroki¹, Carlos Eduardo Coral de Oliveira1, Marla Karine Amarante¹, Aparecida de Lourdes
Perim¹, Nathalia de Sousa Pereira1, Leticia Madureira Pacholak
1, Felipe Campos de Almeida
1, Diego
Lima Petenuci1, Maria Angelica Ehara Watanabe
1
1. Laboratório de Imunologia e Genoma, Universidade Estadual de Londrina, [email protected]
A Leucemia Linfoide Aguda (LLA) é responsável por 72% das leucemias pediátricas, com origem em
alterações genéticas que geram um bloqueio na diferenciação de células precursoras de linfócitos B e T,
que se proliferam pela medula óssea. Enzimas metabolizadoras de xenobióticos, como a família das
NADPH Quinona Oxiredutase (NQO1) e a classe das Glutationa – S – Transferase (GST), têm sido
estudadas como possíveis fatores de risco e prognósticos em certos tipos de câncer. Assim, esse estudo
teve como objetivo avaliar a frequência e a associação dos polimorfismos nos genes da NQO1 e das
GSTT1 e GSTM1 em pacientes portadores da LLA e controles livres da neoplasia. A análise dos
polimorfismos foi realizada por PCR RFLP (NQO1) e Multiplex (GSTT1 e GSTM1) a partir do DNA
obtido de leucócitos do sangue periférico. Análise estatística foi feita por Odds Ratio, com intervalo de
confiança de 95%. Para a NQO1, a comparação das frequências genotípicas do grupo com LLA (CC:
54,05%; CT: 39,19%; TT: 6,76%) e do grupo controle (CC: 51,28%; CT: 41,03%; TT: 7,69%) não
demonstraram associação com o risco de LLA. A presença da variante com perda de função para a
enzima GSTT1 foi observada em 23,17% em LLA e 32,5% em crianças livres de neoplasia, enquanto
para GSTM1 a frequência foi 53,66% em LLA e 47,5% em crianças livres de neoplasia. Nosso estudo
não revelou associação dos polimorfismos estudados e o risco de LLA, indicando a ausência de efeito
destas variantes na suscetibilidade desta neoplasia.
Palavras – chave: NADPH Quinona Oxiredutase 1, Glutationa – S – Transferase, LLA.
Financiamento: Fundação Araucária, CNPQ, CAPES, Fundo Estadual para a Infância e Adolescência,
Secretaria da Família e Desenvolvimento Social
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SUSCEPTIBILIDADE AO PÊNFIGO FOLIÁCEO E POLIMORFISMOS
DO GENE CD33
Carolina Maciel Camargo1,2
, Ticiana Della Justina Farias1, Pedro Henrique Cruz¹, Bruno Piovezan¹,
Maria Luiza Petzl-Erler¹
1. Laboratório de Genética Molecular Humana, Departamento de Genética, Universidade Federal do
Paraná
O gene CD33 codifica um receptor celular que modula a proliferação e diferenciação de leucócitos. Neste
trabalho investigamos a relação de polimorfismos do gene CD33 com pênfigo foliáceo (PF), uma doença
autoimune da pele endêmica no Brasil, através de um estudo de associação caso-controle. Foram
genotipados 268 pacientes e 208 controles para os polimorfismos de um único nucleotídeo (SNP)
rs2455069, rs11882250 e rs1803254 através da plataforma SNPlex (Applied Biosystems). Dois dos três
SNPs analisados para CD33 se mostraram associados ao PF. A presença do alelo G do rs2455069 está
associada com menor susceptibilidade à doença em eurobrasileiros (OR (odds ratio)=0,449; P=0,001),
sugerindo que este alelo confere proteção ao PF nesse estrato populacional, tanto em homozigose quanto
em heterozigose. Por outro lado, a frequência de indivíduos com o alelo C nos genótipos CG ou CC do
SNP rs1803254 está aumentada em pacientes na amostra total e em eurobrasileiros (OR=1,767; P=0,008 e
OR=2,596; P=2x10-4
, respectivamente). O haplótipo do CD33 que apresenta o alelo A para o SNP
rs2455069, T para o rs11882250 e C para o rs1803254 também está associado com maior susceptibilidade
ao PF (OR=1,570; P=0,004). Os resultados desse estudo levam-nos a concluir que polimorfismos do gene
CD33 têm influência na patogênese do PF.
Palavras–chave: CD33; pênfigo foliáceo; associação genética.
Financiamento: CAPES, CNPq e Fundação Araucária
26
VARIANTES ALÉLICAS NOS GENES FOXP3 E TGFβ1 COMO MARCADORES DE
SUSCETIBILIDADE EM NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS.
Glauco Akelinghton Freire Vitiello¹, Patricia Midori Murobushi Ozawa1, Carlos Hiroji Hiroki
1, Felipe
Campos de Almeida1, Mayara Tiemi Enokida
1, Carlos Eduardo Coral de Oliveira
1, Cintya Mayumi
Ishibashi1, Letícia Madureira Pacholak
1, Roberta Losi Guembarovski
1, Maria Angelica Ehara Watanabe
1
1. Laboratório de Estudos e Aplicações de Polimorfismos de DNA, Departamento de Ciências
Patológicas, Centro de Ciências Biológicas, Universidade Estadual de Londrina, Londrina, PR, Brasil;
O fator de transformação e crescimento β1 (TGF-β1) regula negativamente a hematopoese normal e
neoplásica, e, no contexto imunológico, promove exaustão de células T efetoras e geração de células T
regulatórias (Tregs), deletérias no câncer, através da indução da expressão do fator de transcrição FOXP3.
O polimorfismo rs18000470 (C>T) promove a alteração Pro>Leu no peptídeo sinal do TGFβ1 e diminui
sua secreção; enquanto o polimorfismo rs2232365 (A>G) do íntron-1 do gene FOXP3 tem sido associado
a diversas doenças autoimunes, sugerindo sua participação no desenvolvimento e/ou função de Tregs.
Assim, o presente estudo teve como objetivo investigar a participação desses polimorfismos na
suscetibilidade a neoplasias hematológicas (NHs). Os polimorfismos foram analisados a partir do DNA
do sangue periférico de 43 pacientes portadores de NHs (31 mulheres e 12 homens) e de 142 indivíduos
livres de neoplasia (118 mulheres e 24 homens) por PCR alelo-específica. A análise estatística foi
realizada através da Odds Ratio (OR) ao nível de significância de 5%. Nossos resultados demonstraram
uma associação positiva entre o genótipo TT do TGFβ1 e a suscetibilidade às NHs (OR = 4,07; IC95% =
1,94 – 8,52). Não foi observada associação alguma para o FOXP3 isoladamente. Entretanto, a análise
combinada dos dois polimorfismos revelou uma associação positiva para os genótipos TT (TGFβ1) e GG
(FOXP3) na amostra total (OR = 4,00; IC95% = 1,54 – 10,41) e nos indivíduos do sexo feminino (OR =
3,81; IC95% = 1,18 – 12,31). Assim, nossos resultados indicam marcadores promissores a serem
investigados em relação ao desenvolvimento de NHs.
Palavras – chave: Neoplasias Hematológicas; TGF-β; FOXP3.
Financiamento: CNPq, CAPES, Fundação Araucária, PROPPG/UEL..
27
A2 - GENÉTICA, EVOLUÇÃO E MELHORAMENTO VEGETAL E
MICRORGANISMOS
28
ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DO Staphylococcus aureus SENSÍVEL E RESISTENTE A
ANTIMICROBIANOS PELAS FOLHAS DE Cenostigma cf. macrophyllum (Leguminosae).
SANTOS, M. C. S. G.¹*; SOUZA, É. P.² ; ANDRADE, C.M.F..¹ ; SILVA, K. O.¹ ; YATSUDA, R.¹
1.Laboratório de Fisiologia e Farmacologia, Instituto Multidisciplinar de Saúde da Universidade Federal
da Bahia, Vitória da Conquista, Brasil.
2.Laboratório de Fisiologia e Farmacologia, Instituto Multidisciplinar de Saúde da Universidade Federal
da Bahia, Vitória da Conquista, Brasil; *e-mail: [email protected]
O mau uso de antimicrobianos tem exigido por novos compostos capazes de eliminar esses patógenos
e/ou seus fatores de virulência. Esse trabalho analisou in vitro a propriedade antimicrobiana do extrato
etanólico das folhas da Cenostigma cf. macrophyllum (CMF) sobre Staphylococcus aureus sensível e
resistente antimicrobianos. A CMF foi avaliada em testes de microdiluição de concentração inibitória
mínima (CIM) e a concentração bactericida mínima (CBM), e no ensaio de inibição do biofilme por
marcação por cristal violeta. Os dois primeiros testes foram realizados com uma cepa padrão sensível,
uma cepa padrão resistente a oxacilina e um isolado clínico 16A resistente a oxacilina confirmado pelo
teste de antibiograma e que possui o gene mecA. Como controle positivo, utilizou-se BHI caldo (CIM e
CBM) ou TSB + Glicose1% (Biofilme), inóculo e etanol a 10%. Para o biofilme foram testadas duas
últimas cepas. A análise estatística foi realizada por teste ANOVA de uma via, abordagem paramétrica,
seguida pelo teste de comparação múltipla de Dunnett, com p <0,05. A CMF apresentou atividade
bacteriostática sobre os microrganismos avaliados e foi capaz de inibir a formação do biofilme, mais
eficazmente para a cepa ATCC 43300 INCQS 00306, com resultados estatisticamente significantes.
Conclui-se que a CMF obteve atividade anti-MRSA.
Palavras – chave: Staphylococcus aureus; Cenostigma cf. macrophyllum; MRSA.
Financiamento: PET, CNPq, FAPESB - PPSUS, PIBIC.
29
Compatibilidade vegetativa entre isolados de Phyllosticta citricarpa.
Lisandra Santos Ferreira Maba ¹, Andre Servienski¹, Rodrigo Aluízio¹, Chirlei Glienke ¹ , Lygia Vitória
Galli-Terasawa¹, Vanessa Kava-Cordeiro¹
1.LabGeM, Laboratório de Genética de Microrganismos; Departamento de Genética, UFPR.
Vários pesquisadores têm se dedicado ao estudo de mecanismos de recombinação de fungos
fitopatogênicos, especialmente o ciclo sexual, pois muitas vezes este faz parte do processo de
patogenicidade. Neste contexto, enquadra-se o fungo Phyllosticta citricarpa, causador da Mancha Preta
dos Citros, considerada a pior doença fúngica que acomete quase todas as variedades cítricas com
importância econômica. Apesar do ciclo sexual deste fungo ser reconhecido como parte do processo de
patogenicidade, em laboratório ainda não há relatos da indução da fase sexuada. Para evidenciar este
processo é preciso avaliar a compatibilidade vegetativa entre isolados fúngicos. Neste trabalho foi feito
um ensaio de compatibilidade entre 40 isolados de P. citricarpa. Os isolados foram inoculados em placas
de Petri com BDA, arranjados em todas as combinações possíveis para uma seleção dos pares mais
promissores. Após crescimento por 30 dias em BOD a 28ºC, a existência ou não de contato entre as
colônias foi observada. Entre alguns isolados não houve contato, existindo, aparentemente, um
antagonismo entre elas. Para análises morfológicas e moleculares posteriores foram selecionados os pares
de isolados que apresentaram compatibilidade entre as colônias. Estes pares de isolados foram inoculados
em diferentes meios de cultura, com suplementos como biotina, reconhecido como indutor do ciclo sexual
para alguns fungos. Após 45 dias de cultura, foram observadas estruturas modificadas no ponto de
encontro das colônias, porém estas não correspondem ao asco maduro, como observado em campo.
Podem ser estruturas primárias do asco, porém ainda não foi possível confirmar esta hipótese.
Palavras – chave: Ciclo sexual; compatibilidade vegetativa; Mancha Preta dos Citros.
Financiamento: CAPES
30
COMPORTAMENTO DE COLIFORMES TERMOTOLERANTES FRENTE A PRESENÇA DE
ÁCIDO PERACÉTICO
Tafael Lucas Pereira¹, Francielli Casanova Monteiro², Juliana Vitoria Messias Bittencourt³
1. Universidade Tecnológica Federal do Paraná – Campus Ponta Grossa- PR¹²³
2. [email protected] ¹
O Coliformes termotolerante é um indicativo higiênico sanitário e de higiene pessoal, pode ter um grande
impacto socioeconômico devido à doença, despesas médicas, perda de produtividade. O ácido peracético
é um forte oxidante que danifica o sistema enzimático causando a destruição do micro-organismo. O
objetivo do estudo é avaliar a ação de Coliformes termotolerantes presentes em peças bovinas após a
aplicação do ácido peracético. O estudo partiu da coleta da amostra, contaminação, incubação, sanitização
e a análise. A amostra escolhida é o “patinho” bovino, a contaminação foi realizada em cultura de
Coliformes termotolerantes, concentração de Log 10³ de bactérias/mL, para as contagens foram utilizadas
diluições (10-1 a 10-5), a incubação a 35°C/24-48 horas. A sanitização foi realizado com a imersão da
peça em concentração de 1%, o tempo de 10 segundos. As análises foram realizadas em 3 tratamento, o
primeiro não passou pela contaminação e sanitização, o segundo tratamento foi apenas sanitizado, e o
tratamento três houve apenas a contaminação, o tratamento quatro houve ambos os procedimentos. Os
resultados obtidos para o primeiro tratamento de 2,0 x10² UFC/g, para o segundo tratamento < 1,0x 10¹
UFC/g e o terceiro tratamento apresentou 1,7 x 105 UFC/g, o resultado do quarto tratamento foi a redução
da contaminação para 1,0 x 10² UFC/g. Verificamos com o estudo que em ambos os procedimentos com a
aplicação do sanitizante houve a diminuição da carga de coliformes termotolerantes, a diminuição
máxima verificada é 3 Log, destacando que o terceiro tratamento apresentava acima do permitido pela
legislação.
Palavras – chave: Coliformes termotolerantes; ácido peracético; ação microbiológica.
Financiamento:
31
ESTUDO DO DESENVOLVIMENTO VEGETATIVO DA LINHAGEM CLB3 E SEUS
SEGREGANTES EM Aspergillus nidulans
Raíssa Benan Zara ¹, Amanda da Silva Ribeiro ¹, Carmem Lucia de Mello Sartori Cardoso da Rocha¹
1. Departamento de Biotecnologia, Genética e Biologia Celular, Universidade Estadual de Maringá –
Avenida Colombo, 5790, Bloco H67, Jardim Universitário, CEP 87020-900, Maringá – PR, Brasil;
No fungo filamentoso Aspergillus nidulans os núcleos haploides e diploides podem estar presentes em
todas as fases do ciclo de vida. Assim, pode-se obter linhagens diploides para estudo do desenvolvimento
ou para mapeamento genético. Este trabalho propõe-se a mapear genes para marcas morfológicas em
Aspergillus nidulans. Para isto, foram analisados segregantes do diploide CLB3//MSE quanto à coloração
do micélio e desenvolvimento anormal da colônia. Os segregantes normais e mutantes foram analisados
quanto aos marcadores da linhagem mestra. Não foi encontrado o alelo principal para coloração do
micélio. No entanto, os segregantes de micélio marrom apresentaram predominantemente os alelos met–
(25 segregantes) da linhagem mutante CLB3 em relação ao alelo normal met+ (6). Da mesma forma, os
alelos mutantes nic+ e ribo+ estavam presentes em grande parte dos fungos de micélio marrom. Estes
resultados sugerem que existem genes nos cromossomos IV, VII e VIII da linhagem CLB3 que, quando
presentes nos segregantes, contribuem para o desenvolvimento anormal da colônia e pigmento marrom no
micélio.
Palavras – chave: Emericella (=Aspergillus) nidulans; mutantes morfológicos; ciclo vegetativo.
Financiamento: UEM
32
IDENTIFICAÇÃO E PURIFICAÇÃO DE LIPASE PROVENIENTE DE BIBLIOTECA
METAGENÔMICA DE SEDIMENTOS DE MANGUE.
Emylle Santos Cavalcante¹, Ana Carolina dos Santos Gonçalves¹; Rachel Passos Rezende¹.
1.Universidade Estadual de Santa Cruz, Centro de Biotecnologia e Genética; Ilhéus, Bahia; email do
apresentador: [email protected]
A metagenômica aborda a análise estrutural e funcional de genomas microbianos coletivos
presentes numa dada amostra ambiental, através de técnicas independentes de cultivo, sendo metagenoma
o conjunto de genomas em uma determinada amostra ambiental, esta técnica vem sendo amplamente
utilizada para obtenção de novos genes e biocatalizadores, que dificilmente seriam obtidos através do
cultivo tradicional de microrganismos. Utilizando os reagentes do kit PowerMax Soil DNA Isolation
Kit (MO BIO Laboratories), a partir de amostras de sedimento de mangue, o DNA metagenômico foi
extraído e este foi empregado na construção de uma biblioteca metagenômica, através do kit
CopyControl™ HTP Fosmid Library Production da EPICENTRE, onde foram obtidos 1824 clones
contendo insertos com cerca de 40 kb, inseridos em vetor Escherichia coli. Os clones provenientes da
biblioteca foram submetidos a ensaios laboratoriais em meio sólido Luria Bertani acrescido de 1%
Tributirina, buscando colônias que apresentassem halo de hidrólise para detecção de atividade hidrolítica
para lipases. Foram encontrados 7 clones positivos, o clone positivo com maior halo de degradação foi
submetido a testes confirmativos de degradação do substrato tributirina, pré-purificação por salting out,
seguido de diálise, análises por SDS-PAGE, para analisar o perfil proteico secretado. Os resultados
obtidos nas análises realizadas indicam a presença de uma enzima lipídica, que após caracterização
bioquímica, poderá ser aplicada na biotecnologia, além da posterior detecção do gene responsável pela
expressão enzimática por sequenciamento genético.
Palavras – chave: Metagenômica, Lipase, Mangue.
Financiamento: Cnpq, CAPES, UESC
33
Isolados do fungo endofítico do gênero Muscodor no Brasil: caracterização e taxonomia
Pena, LC¹, Servienski, A1; Muehlmann-Fisher, JM; Savi, D; Galli-Terasawa, LV1; Glienke, C1;
Kava-Cordeiro, V1.
1. Universidade Federal do Paraná, Curitiba, Paraná. Departamento de Genética
Fungos endofíticos habitam o interior das plantas em alguma fase do seu ciclo de vida, sem causar
sintomas. O gênero Muscodor, descrito em 2001, destaca-se entre os endofíticos por apresentar grande
potencial para o controle biológico por produzir compostos voláteis com ação antimicrobiana. Apesar da
importância deste fungo, isolados deste gênero são de difícil obtenção. Em 2013 foi identificado o
primeiro fungo deste gênero no Brasil isolado de
Citrus sinensis (LGMF1254) a partir de uma coleção de 1141 isolados fúngicos endofíticos de laranjeira.
Como este fungo inibe o crescimento de vários microrganismos porém não de fungos do próprio gênero,
este isolado foi utilizado para selecionar novos isolados de Muscodor. Com esta estratégia foi obtido um
novo isolado de aroeira Schinus terebinthifolius (LGMF1255). Estes isolados foram caracterizados por
Microscopia Eletrônica de Varredura e não foram observadas estruturas de reprodução, como já relatado para todos
os isolados deste gênero. Foram observadas estruturas denominadas como cauliflower-like, descritas para
algumas espécies de Muscodor. Na análise taxonômica, os isolados LGMF1254 e LGMF1255
apresentaram identidade absoluta no sequenciamento da região ITS com M. sutura e M. vitigenus. Após o
sequenciamento do gene rpb2 não foi possível diferenciar os isolados LGMF1254 e LGMF1255, porém
estes apresentaram diferenças quando comparados com a mesma sequência de M. sutura. A sequência do
gene rpb2 de M. vitigenus não está disponível. Na análise dos resultados, estes primeiros isolados
identificados no Brasil receberam a denominação de Muscodor vitigenus latu sensu, pois M. vitigenus é a
espécie mais antiga descrita neste clado.
Palavras – chave: Muscodor; Microscopia eletrônica de varredura, sequenciamento de região ITS
Financiamento: CAPES
34
OTIMIZAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE MARCADORES MICROSSATÉLITES PARA
Ocotea porosa (NEES & MART.) BARROSO (LAURACEAE)
Pâmela Eduarda Maass 1, Ricardo Bittencourt
2
1. Acadêmica do Curso de Ciências Biológicas, Universidade Regional de Blumenau (FURB). Rua Antônio da Veiga, 140. 89012-900 Blumenau, SC 2. Professor do Departamento de Ciências Naturais. Universidade Regional de Blumenau (FURB). Rua
Antônio da Veiga, 140. 89012-900 Blumenau, SC; [email protected]
Durante décadas a Floresta Ombrófila Mista catarinense foi explorada observando-se apenas critérios
econômicos, e hoje possui 24,4% de sua área original. Como consequência desta exploração a Ocotea
porosa (imbuia) figura em três listas de espécies ameaçadas. Os marcadores moleculares têm sido
ferramentas bastante adequadas no monitoramento e avaliação das consequências genéticas da
fragmentação florestal. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo otimizar e caracterizar primers
microssatélites específicos para O. porosa. Após a fase de otimização dos marcadores foram genotipados,
através de eletroforese em gel de poliacrilamida, indivíduos de duas populações. A diversidade genética
foi caracterizada para o número total de alelos nos loci, porcentagem de loci polimórficos, número médio
de alelos por locus, número efetivo de alelos por locus, heterozigosidade observada e heterozigosidade
esperada, bem como o índice de fixação e o desequilíbrio de ligação entre os pares de loci. Dos 19 loci
testados, seis apresentaram produtos nítidos de amplificação, sendo um deles monomórfico. Foram
detectados um total de 21 alelos, com uma média de 3,5 alelos por locus, além de três alelos exclusivos e
oito raros. Ambas as populações apresentaram alta diversidade genética, porém os valores de
heterozigosidade observada foram baixos, resultando em altos índices de fixação. Não houve
desequilíbrio de ligação detectado entre os pares de loci. Os dados gerados apontam para a necessidade de
políticas públicas que favoreçam a ampliação da conectividade entre fragmentos florestais. Os
marcadores microssatélites específicos para O. porosa disponibilizarão ferramentas moleculares
informativas para viabilizar futuras pesquisas de conservação genética para esta espécie.
Palavras-chave: Imbuia, SSR, fragmentação florestal.
35
PRODUÇÃO DE SEMENTES MELHORADAS DE Cedrela fissilis Vell. PARA RESTAURAÇÃO
FLORESTAL
Andrea Chizzotti Cusatis¹; Angela Cristina Ikeda¹; Jessica Priscila Tosato¹; Antonio Rioyei Higa¹
1. Laboratório de Genética e Melhoramento Florestal – LAMEF/DECIF, Universidade Federal do
Paraná; [email protected]
O Novo Código Florestal Brasileiro (Lei nº 12.651 de 2012) determina a restauração de 21 milhões de
hectares nas propriedades rurais até 2032. Uma das estratégias que viabilize economicamente e
potencialize a restauração destas, é a formação de Pomares de Sementes por Mudas (PSM) de espécies
nativas. Cedrela fissilis, por exemplo, é uma espécie rara, de madeira nobre, sob risco de extinção.
Considerada, portanto um recurso genético prioritário a ser manejado e conservado. Assim, um teste com
35 progênies, com 30 blocos com uma árvore por parcela, foi instalado em dezembro de 2012, no campus
do Jardim Botânico da Universidade Federal do Paraná, Curitiba – PR, visando a produção melhorada de
sementes para restauração florestal de cedro-rosa. Os parâmetros genéticos foram estimados utilizando a
máxima verossimilhança restrita (REML) e a seleção estimada pela melhor predição linear não viciada
(BLUP). A sobrevivência entre progênies no primeiro mês de idade variou de 57 a 97%. O tamanho
efetivo da população remanescente (Ne) estimado foi de 123,79, suficiente para conservação genética de
alelos de baixa frequência na população (1 a 6%). A acurácia (Ac) da seleção precoce foi estimada em
0,596 e a herdabilidade média de progênies (h2) em 0,36 para sobrevivência. As vinte e cinco famílias
selecionadas para compor o PSM podem produzir sementes melhoradas com ganho de 6,5% na
sobrevivência. O Ne estimado de 14 indica a necessidade de composição com outras matrizes para formar
o lote de sementes destinado à restauração da variabilidade da população de cedro-rosa.
Palavras-chave: Meliaceae; domesticação; cedro-rosa.
Financiamento: CAPES e Battistella Florestal
36
SCRENING FUNCIONAL DE BIBLIOTECA METAGENÔMICA DE CORAL PARA
ATIVIDADE CELULOLÍTICA.
Suzana Rodrigues de Moura ¹, Fernanda Maria Oliveira Sousa ¹, Rachel Passos Rezende ¹
1. Universidade Estadual de Santa Cruz, Centro de Biotecnologia e Genética; Ilhéus, Bahia; email do
apresentador: [email protected]
As enzimas são ferramentas com grande aplicação biotecnológica e despertam o interesse de
diversos setores da indústria. Existem várias classes de enzimas, e as hidrolases são as mais pesquisadas
devido a sua versatilidade. Dentre as hidrolases, a celulase foi escolhida como alvo deste estudo. Elas são
aplicadas na indústria têxtil, de alimentos, de papel, dentre outras. É sabido que os microrganismos são
uma fonte natural de enzimas, entretanto, menos de 1% dos microrganismos presentes no ambiente são
cultiváveis. Desta forma, é importante a utilização de metodologias independentes de cultivo que
possibilitem explorar toda essa diversidade. Neste contexto, as análises metagenômicas, análise genômica
independente de cultivo, se destacam por permitirem um acesso a microrganismos não cultiváveis
explorando o seu potencial biotecnológico. Sendo assim, o presente trabalho objetivou o screening
funcional da biblioteca metagenômica de coral, a partir de 36000 clones. Os ensaios foram realizados a
partir do cultivo dos clones em placas com meio LA contendo 0,2% de carboximetilcelulose, 0,02% de L-
arabinose e cloranfenicol (12,5 µg mL-1
). As placas foram incubadas a 37 °C, durante 7 dias.
Posteriormente, foi feita a coloração com uma solução aquosa de Vermelho Congo 0,1%, durante 10
minutos e lavagem com uma solução de NaCl 1 M. Como resultado 23 clones apresentaram halo e foram
considerados positivos para atividade celulolítica. Devido ao excelente potêncial biotecnológico desses
clones pretende-se realizar uma caracterização funcional e análise proteica para estudo de uma possível
futura aplicação industrial.
Palavras - chave: Celulase; Metagenômica; Coral.
Financiamento: Cnpq, CAPES, UESC
37
A3 - GENÉTICA EVOLUÇÃO E MELHORAMENTO ANIMAL
38
ASPECTOS GENÉTICOS DO COMPRIMENTO CORPORAL E CARACTERÍSTICAS
REPRODUTIVAS DE RAINHAS Apis mellifera L. (HYMENOPTERA: APIDAE)
AFRICANIZADAS
Jackelinny Ravanelli Martins ¹, Fabiana Martins Costa Maia ¹, Elias Nunes Martins ¹ , Michele Potrich ²,
Fábio Camargo Abdalla ³, Daniela Andresa Lino Lourenço 4, Carla de Fátima Kuczmarski
5, Felipe Tadeu
Diniz 5, Gleice Diandra Maia
5, Luiz Henrique Tirelli
6, Raisa Larcher Fantin
5, Vinícius Cantazini
Martins 7
1. Programa de Pós-Graduação em Zootecnia, Universidade Tecnológica Federal do Paraná - Câmpus
Dois Vizinhos; e-mail: [email protected]
2. Departamento de Ciências Biológicas, Universidade Tecnológica Federal do Paraná - Câmpus Dois
Vizinhos.
3. Laboratório de Biologia Estrutural e Funcional, Universidade Federal de São Carlos - Câmpus de
Sorocaba/SP.
4. Pós-Doutoranda, University of Georgia/ Athens, Georgia - Estados Unidos da América.
5. Graduação em Zootecnia, Universidade Tecnológica Federal do Paraná - Câmpus Dois Vizinhos.
6. Bolsista PIBIC Ensino Médio, Universidade Tecnológica Federal do Paraná - Câmpus Dois Vizinhos.
7. Graduação em Engenharia Florestal, Universidade Tecnológica Federal do Paraná - Câmpus Dois
Vizinhos.
Foram estimados parâmetros genéticos para comprimento corporal, peso, diâmetro e volume de
espermateca de rainhas Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae) africanizadas. Os dados analisados se
referem às medidas do comprimento corporal de 102 rainhas, peso de espermateca de 830 rainhas e
diâmetro e volume de espermateca de 813 rainhas, totalizando 1133 animais na matriz de parentesco. Os
efeitos fixos considerados foram família, época e mini-recria e os efeitos aleatórios, o genético aditivo e o
resíduo. As análises foram realizadas por meio da inferência Bayesiana utilizando o modelo animal.
Foram realizadas análises unicarater e bicarater para todas as características. Em análise unicarater, a
proporção da variância genética aditiva foi responsável por mais de 50% da variância fenotípica total e as
herdabilidades apresentaram estimativas de magnitudes médias a altas para todas as características, sendo
0,80 para comprimento corporal, 0,62 para peso de espermateca, 0,55 para diâmetro de espermateca e
0,64 para volume de espermateca. A maior correlação genética foi entre comprimento corporal e peso de
espermateca de 0,31. Todas as características avaliadas em análise unicarater apresentam potencial de
seleção. As correlações genéticas entre o comprimento corporal da rainha à emergência e características
de espermateca são determinadas, em parte, pelo mesmo conjunto de genes, indicando que essas
associações podem ser utilizadas em programas de melhoramento genético, visando o maior potencial
reprodutivo de rainhas A. mellifera africanizadas.
Palavras – chave: correlação genética; herdabilidade; tamanho de rainha
39
CARACTERIZAÇÃO CROMOSSÔMICA EM UMA ESPÉCIE DE Rineloricaria
(ACTINOPTERYGII: SILURIFORMES: LORICARIIDAE) DA BACIA DO RIO URUGUAI
Larissa Glugoski¹*, Cleberson C. Primo¹, Roberto F. Artoni¹, Mara C. Almeida¹, Marcelo R. Vicari¹,
Viviane Nogaroto¹
¹Departamento de Biologia Estrutural, Molecular e Genética, Universidade Estadual de Ponta Grossa,
Ponta Grossa-PR, Brasil; *e-mail: [email protected]
Peixes da ordem Siluriformes são os mais diversos. Quanto à evolução cromossômica há dificuldades em
se estabelecer relações filogenéticas, considerando a extensa variabilidade cariotípica predominante tanto
em nível de famílias, quanto de gêneros e espécies. A família Loricariidae é extremamente numerosa e
diversa. Nesta família, Loricariinae apresenta uma grande variação do número diploide (36 - 70),
geralmente decorrentes de fusões e fissões cromossômicas. Desta forma, este trabalho teve como objetivo
caracterizar citogeneticamente uma espécie de Rineloricaria (Loricariinae) do trecho superior da bacia do
rio Uruguai para averiguação dos mecanismos evolutivos envolvidos na variação do número diploide
(2n). Os exemplares de Rineloricaria ainda não identificados ao nível específico, denominados de
Rineloricaria sp., foram coletados no rio Uruguai e seus afluentes em São Carlos-SC. Estes espécimes
possuem 2n = 54 cromossomos, considerado primitivo para Loricariidae, e fórmula cariotípica
8m+22sm+24a. A heterocromatina foi localizada preferencialmente na região pericentromérica dos
cromossomos e, em alguns cromossomos, em localização terminal, condição comum a cariótipos ditos
conservados na família. Os sítios de rDNA foram localizados por fluorescence in situ hibridization
(FISH). O rDNA 18S apresentou um único par marcado, enquanto o rDNA 5S apresentou inúmeras
marcações em regiões proximais de alguns cromossomos. Os dados cromossômicos obtidos para
Rineloricaria sp. do trecho superior do rio Uruguai são característicos de cariótipos ditos conservados em
Loricariidae. Estes resultados serão úteis para a visualização dos mecanismos de rearranjos
cromossômicos encontrados em espécies de Loricariinae com cariótipos extremamente diversos,
contribuindo com o entendimento da diversificação de espécies.
Palavras – chave: evolução cromossômica, FISH, rDNAs.
Financiamento: CNPq
40
CITOGENÉTICA COMPARATIVA EM DUAS ESPÉCIES DO GÊNERO HYPSIBOAS
(HYLIDAE)
Juliana Carneiro Michaliszyn1*
, Laura Winkelmann1, Dalisson Chaves
1, Fabiane Fortes
1, Rafael Bueno
Noleto1
1.
Colegiado de Biologia, Universidade Estadual do Paraná, campus União da Vitória;
O gênero Hypsiboas (Hylidae) com cerca de 75 espécies, foi reavaliado a partir do gênero Hyla, separado
atualmente em sete grandes grupos amplamente distribuídos em florestas tropicais. Para a maioria das
espécies não há informações sobre o cariótipo, marcador este que pode melhor descrever as espécies,
ajudar em incertezas taxonômicas e construir cenários evolutivos mais consistentes. Neste estudo, uma
análise de citogenética convencional foi realizada para investigar o cariótipo de H. bischoffi e H. faber
oriundas da Mata Atlântica paranaense. Um padrão bastante conservado foi encontrado, com ambas
espécies apresentando 2n=24 cromossomos metacêntricos e submetacêntricos (NF=48), embora com
diferentes fórmulas cariotípicas, reflexo das usuais inversões pericêntricas na modelagem de cariótipos
em Anura. Regiões heterocromáticas foram distribuídas preferencialmente em regiões pericentroméricas e
os genes rDNA 45S foram localizados por nitrato de prata nos braços longos do par 10 e par 11 de H.
bischoffi e H. faber, respectivamente. Apesar destas espécies serem de grupos taxonômicos irmãos, i.e. H.
pulchellus e H. faber, são comuns variações inter- e intraespecíficas envolvendo, sobretudo os genes
ribossômicos, cujo caráter dinâmico pode estar relacionado à translocações bem como a atividade de
elementos de transposição. Dada a importância de marcadores cromossômicos na caracterização de
unidades evolutivas e frente a diversidade de complementos cromossômicos em Hylidae, mais estudos,
cobrindo maiores áreas de amostragem de diferentes regiões, são necessários para melhor compreender as
transformações cariotípicas dentro do grupo.
Palavras – chave: cariótipo; Hylidae; rDNA
Financiamento: Fundação Araucária
41
CONSTRUÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE BIBLIOTECA DE DNA REPETIVIVO EM
PARODONTIDAE (ACTINOPTERYGII: CHARACIFORMES): UMA ABORDAGEM
GENÔMICA E EVOLUTIVA RELACIONADA A DEGENERAÇÃO DO CROMOSSOMO
SEXUAL W
Michelle Orane Schemberger1, Jordana Inácio Nascimento Oliveira
2, Viviane Nogaroto
2, Mara Cristina
Almeida2, Roberto Ferreira Artoni
2 Marta Margarete Cestari
1, Orlando Moreira-Filho
3, Marcelo Ricardo
Vicari1
1. Programa de Pós-Graduação em Genética, Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas,
Departamento de Genética. Centro Politécnico, Jardim das Américas, 81531-990, Caixa-Postal: 19071, Curitiba,
Paraná, Brasil.
2. Departamento de Biologia Estrutural, Molecular e Genética, Programa de Pós-Graduação em Biologia Evolutiva,
Universidade Estadual de Ponta Grossa, Av. Carlos Cavalcanti, 4748, 84030-900, Ponta Grossa, Paraná, Brasil;
3. Departamento de Genética e Evolução, Universidade Federal de São Carlos, Rodovia Washington Luís Km 235,
São Carlos-SP, 13565-905, Brasil.
O DNA repetitivo compõe uma grande fração genômica em eucariotos e incluem os microssatélites,
minissatélites, satélites e elementos transponíveis. O estudo destas sequências é importante para o
entendimento acerca da regulação gênica, diferenciação do cromossomo sexual e evolução cariotípica.
Em Parodontidae somente foram isoladas e mapeadas por hibridação in situ fluorescente (FISH) as
sequências de DNAs repetitivos WAp, pPh2004 e DNA ribossomal (DNAr). Desta forma, o objetivo
deste estudo foi construir e caracterizar uma biblioteca de DNA repetitivo através da técnica de cinética
de reassociação (Cot-1) para compreensão desta fração genômica em Parodontidae. Assim, foram isolados
40 clones, dos quais 17 mostraram similaridade com sequências de DNA repetitivo incluindo DNA
satélite, minissatélite, microssatélite e elementos transponíveis de Classe I e II. Além disso, os resultados
do mapeamento utilizando FISH revelaram a presença de um DNA satélite, do elemento Helitron e de
sequências degeneradas LINE (elementos de sequências interespaçadas longas), SINE (elementos de
sequências interespaçadas pequenas) e Tc1-mariner sobre cromossomos sexuais. Alguns clones
apresentaram sinais dispersos na FISH, outros não foram detectados, enquanto que o DNAr 5S foi
detectado em um par autossômico. Desta maneira, os resultados deste estudo demonstraram que
algumas das sequências obtidas estão ligadas a degeneração molecular do cromossomo W. Além disso, a
localização desses elementos nos cromossomos é de suma importância para o entendimento da sua função
e evolução organização no genoma. Em conclusão os dados apontam uma intensiva invasão dos
elementos transponíveis ocorrido durante o processo de diferenciação do cromossomo W em
Parodontidae.
Palavras – chave: citogenética, DNA satélite, elementos transponíveis.
Financiamento: CNPq (Conselho Nacional de Desenvolmento Científico e Tecnológico), CAPES (Coordenação de
Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior), SETI (Secretaria de Ciência e Tecnologia do Estado do Paraná),
42
Fundação Araucária ( Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná) e
FAPESP (Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo).
Frequências genotípicas de um SNP no gene IBSP em duas populações de galinha doméstica
PETRY, B. 1,2
, IBELLI, A. M. G. 3, PEIXOTO, J. O.
3 , FORNARI, M.
3, LEDUR, M. C.
3
1. Universidade do Oeste de Santa Catarina, campus Joaçaba/SC.
2. Bolsista PIBIC/CNPq na Embrapa Suínos e Aves, Concórdia/SC.
3. Embrapa Suínos e Aves, Concórdia/SC.
A sialoproteína óssea (IBSP) é uma das mais abundantes encontradas nos ossos, constituindo cerca de
10% de suas proteínas não colagenosas. É uma glicoproteína ácida sintetizada por diferentes tipos de
células ósseas, como osteoblastos, osteócitos e osteoclastos. Por fazer parte diretamente do metabolismo
ósseo, seu mau funcionamento pode levar a imperfeições ósseas severas, pois acredita-se que esse gene
seja o principal responsável pela ligação entre osteoblastos e osteoclastos à matriz celular durante a
remodelação dos mesmos. Diante disso, o estudo teve como objetivo avaliar a freqüência de um SNP no
gene IBSP na população de frangos de corte TT e na população F2 (TCTC) da Embrapa Suínos e Aves.
Foram extraídos os DNAs de 1269 animais da população TT e 937 da população F2 utilizando DNAzol®.
As amostras de DNA foram genotipadas pela técnica de PCR-RFLP utilizando-se a enzima de restrição
HpaII, que reconhece uma mutação de A>G. Após a genotipagem, as freqüências genotípicas observadas
na população F2 (TCTC) foram: AG 551 (58,8%), GG 253 (27%), AA 133 (14,2%). Para a população
TT, as freqüências encontradas foram: AA 873 (68,79%), AG 371 (29,24%) e GG 25 (1,97%). As duas
populações não estão em equilíbrio de Hardy-Weinberg (p>0,05). Além disso, pode-se observar que a
seleção praticada na população TT favoreceu o aumento da frequência do alelo A, sendo este SNP um
ótimo candidato à análise de associação.
Palavras – chave: sialoproteína óssea; integridade óssea; Gallus gallus.
Financiamento: Projeto MP2 Embrapa (02.10.60300-04), CNPq (481755/2007-1).
43
Identidade citogenética dos pequenos mamíferos não-voadores (Roedores) da Floresta Nacional de
Piraí do Sul, Paraná, Brasil
Valéria Bumiller Bini¹; Angela Cristina dos Santos Forstner²; Iris Hass¹
1.Universidade Federal do Paraná [email protected]; [email protected]
2. Universidade Federal do Paraná; Fundação Araucária [email protected]
Os roedores sulamericanos pertencem a família Cricetidae e a ordem Rodentia, apresentam uma
alta plasticidade genética que reflete em uma grande importância evolutiva, como é evidenciado na sua
grande capacidade de se adaptar a diferentes ambientes. Neste trabalho foram coletados roedores na
Floresta Nacional do Piraí do Sul, Paraná - Brasil, com o intuito de identificar corretamente as espécies de
pequenos mamíferos não-voadores da região. Dessa forma o objetivo do trabalho é analisar e caracterizar
os cariótipos e verificar se há correspondência do número e forma cromossômica das espécies
encontradas com a descrita na literatura. Foram analisados 36 exemplares de roedores através da
preparação mitótica direta da medula óssea para obtenção de cromossomos metafásicos. A partir deste
material procedemos às técnicas citogenéticas de coloração comum (Giemsa) e o bandeamento C,
material que está na fase de análise. Na sequência serão aplicadas as técnicas de banda G. Os cariótipos
em coloração comum foram analisados, com no mínimo dez metáfases de cada protocolo, e serão
realizadas capturas de imagem das três melhores metáfases, das quais serão montados cariogramas para a
identificação das espécies através do programa BandView/FISHView. Até o momento foi identificado,
através da análise das preparações em coloração comum, a ocorrência para região: 15 roedores da espécie
Akodon montensis com 2n=24 e 25; 4 da espécie Brucepattersonius sp com 2n=52; 4 da espécie
Nectomys sp. com 2n=56; 2 da espécie Thaptomys nigrita com 2n=52 e 5 da espécie Oligoryzomys
nigripes com 2n=62. A análise ainda não foi concluída.
Palavras-chave: cariótipo; roedores; citogenética.
Apoio Financeiro: Fundação Araucária e UFPR.
44
Identidade citogenética dos pequenos mamíferos não-voadores (Roedores) do
Parque Estadual Rio da Onça, Matinhos, Paraná, Brasil
Evelize Majeski¹, João Felipe Coimbra Brosin²
1. Universidade Federal do Paraná – Curitiba - Brasil;
2. Universidade Federal do Paraná – Curitiba – Brasi;
[email protected]/[email protected]
Os roedores são animais de ampla distribuição geográfica, conseguindo se adaptar bem a ambientes
diversificados desde climas quentes até ambientes de clima mais frio. Nesse estudo foram analisados doze
exemplares de roedores coletados no Parque Estadual Rio da Onça, Matinhos – Paraná. O objetivo do
trabalho é caracterizar citogeneticamente os exemplares de roedores da Família Cricetidae, ocorrentes no
Parque, através de bandeamento C e G, além de coloração comum (Giemsa) e verificar a ocorrência de
diferentes citótipos entre as espécies do mesmo gênero. Para obtenção das metáfases a serem analisadas
realizou-se nos indivíduos preparação direta da medula óssea. Houve montagem e análise das lâminas em
coloração comum de doze exemplares, sendo que as melhores metáfases de cada material foram
capturadas através de uma câmera VDS-CCD acoplada ao microscópio para posterior montagem do
cariótipo com auxílio do programa BandView/FISHView. Os resultados preliminares indicam a
ocorrência de 4 gêneros: Akodon (montensis> 2n = 24 a 26); Euriorizomys (2n = 34 a 54)Nectomys
(2n=40 a 56); Oligorizomys (2n=62 a 70);
Palavras – chave: Cariótipo; Metáfases; Roedores;
Financiamento: CNPq
45
PROSPECÇÃO DE SNPs NO GENE COL1A2 E FREQUÊNCIA GENOTÍPICA DE UM
POLIMORFISMO COL1A2A>G EM UMA LINHAGEM DE FRANGOS DE CORTE
MARCHESI, J. A. P. ¹, IBELLI, A. M. G.², GRUPIONI, N. V.³, ZANELLA, R.², LEDUR, M. C. ²,
PEIXOTO, J. O.²
1. Universidade do Contestado, Concórdia, Santa Catarina, Brasil;
2. Embrapa Suínos e Aves, Concórdia, Santa Catarina, Brasil;
3. Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Jaboticabal, São Paulo, Brasil;
Descrito como atuante em processos metabólicos envolvidos na ossificação, o gene COL1A2 (collagen,
type I, alpha 2) pode ser considerado como candidato à associação com caraterísticas ósseas de frangos de
corte. Assim, objetivou-se prospectar polimorfismos no gene COL1A2 e genotipar um SNP, verificando
sua frequência genotípica em uma população de frangos de corte. Para a busca de SNPs, duas regiões do
gene foram sequenciadas em 15 animais. O sequenciamento foi realizado em sequenciador ABI3130xl
Genetic Analyzer (Applied Biosystems). Os resultados foram analisados no programa
Phred/Phrap/Consed/PolyPhred para verificação da qualidade, montagem das sequências e análise dos
polimorfismos. Do total de 23 SNPs identificados, realizou-se a genotipagem do SNP COL1A2A>G pela
técnica de PCR-RFLP, utilizando a enzima de restrição HpaI. Foram genotipados 1134 animais de uma
linhagem paterna de frangos de corte (TT), obtendo-se as frequências genotípicas e verificando se a
população estava em equilíbrio de Hardy-Weinberg (HW). Dos parentais da população, observou-se 5
(5,0%) animais com genótipo AA, 40 heterozigotos (39,6%) e 56 com genótipo GG (55,4%). Do total de
animais genotipados, 141 (12,4%) apresentaram o genótipo AA, 393 (34,7%) o AG e 600 (52,9%) o GG,
evidenciando que a seleção praticada nesta população tem aumentado a frequência do genótipo GG desse
SNP. Na análise de qui-quadrado, observou-se que para esse SNP a população não se encontra em
equilíbrio de HW (p<0,05). O SNP COL1A2A>G está segregando na população TT e é um forte
candidato para futuras análises de associação com características ósseas em frangos de corte.
Palavras – chave: gene candidato; integridade óssea; frango de corte.
Financiamento: Projeto MP2 Embrapa (02.10.60300-04), CNPq (481755/2007-1). RZ é bolsista
BJT/CNPq (373167/2012-1).
46
Uso do código de barras genético (DNA BARCODE) como ferramenta no estudo de diversidade e
identificação molecular de peixes de igarapés do sistema de drenagem do rio amazonas da reserva
florestal Adolpho Ducke/MANAUS/AM.
Silva, A. S¹, Meliciano, N. V1, Colatreli, O. P
2
1. Universidade Federal do Amazonas
2. Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia
Abordagens taxonômicas moleculares como a do DNA barcoding, vem sendo utilizadas com
sucesso, sendo uma técnica interessante para determinação de faunas pouco estudadas, como a ictiofauna
amazônica que tem somente 40% das espécies conhecidas, das quais 2000 espécies encontram-se em
igarapés, refletindo a carência de estudos nesse ecossistema. Diante do exposto, o presente trabalho
propôs, amostrar igarapés da reserva Adolpho Ducke (Manaus/AM), pertencente ao INPA que faz parte
do programa PPBio, e fazer uma caracterização genético/molecular dessas amostras. Os espécimes
coletados foram triados e identificados morfologicamente e uma amostra de tecido foi retirada para
extração de DNA, amplificação e sequenciamento do gene da COI. As sequências editadas foram
submetidas à identificação molecular, por meio de recursos de bioinformática, como as ferramentas de
identificação e busca disponíveis no portal BOLD (www.barcodinglife.org). Como resultado, foram
coletados de 361, representando 23 espécies diferentes, dentre as quais, onze foram identificadas
molecularmente e todos os exemplares já se encontram devidamente tombados na Coleção
Ictiológica/INPA e Coleção de Tecidos/UFAM. O fragmento gerado possui o total de 586 pb, dos quais
329 são conservados, 257 variáveis e 256 foram parcimoniosamente informativos. As identificações
moleculares presente no BOLD foram congruentes com a maioria das identificações feitas a priori, mas
foi informativa na resolução de ambiguidades morfológicas, apresentando uma alta similaridade (>99%)
frente à consulta nos dados online. Embora o fragmento gerado não seja o tamanho padronizado pela
técnica (648pb), este se mostrou um comprimento adequado para este trabalho, sendo todos os
fragmentos gerados depositados no sistema BOLD.
Palavras – chave: Genética; DNA Barcode; Igarapés.
Financiamento: FAPEAM
47
A4 - MUTAGENESE
48
ALTERAÇÕES MUTAGÊNICAS DECORRENTES DOS POLUENTES ATMOSFÉRICOS EM
SOROCABA - SP UTILIZANDO O BIOENSAIO EM PELOS ESTAMINAIS DE
TRADESCANTIA (TRAD-SH)
Camila Harumi Hatamura¹, Vilma Palazetti de Almeida¹, Andrea Nunes Vaz Pedroso2
1. Faculdade de Ciências Médicas e da Saúde, PUC-SP (Campus Sorocaba),
2. Núcleo de Pesquisa em Ecologia, Instituto de Botânica. [email protected]
Os grandes centros urbanos são prejudicados pela poluição ambiental que causa danos à saúde dos seres
vivos e aos materiais. Sorocaba, quarta cidade mais populosa do interior paulista, apresenta diferentes
tipos de indústrias emitindo diversos poluentes. Os efeitos ocasionados pela poluição podem ser
observados em plantas com potencial bioindicador. O bioensaio do pelo estaminal de Tradescantia (Trad-
SH) detecta alterações genéticas causadas por agentes genotóxicos, onde as células do pelo estaminal são
heterozigóticas para a cor, sendo, azul (dominante) e rosa (recessiva), portanto o objetivo deste estudo foi
verificar o possível efeito dos poluentes aéreos, de diferentes fontes poluidoras, no município de
Sorocaba, utilizando-se o bioensaio Trad-SH, com inflorescências de Tradescantia clone KU-20.
Floreiras foram expostas em três locais no município de Sorocaba de julho a outubro de 2013, (1)
telemétrica da CETESB, (2) Terminal São Paulo próximo a região central e (3) Parque Natural Chico
Mendes, localizado fora do perímetro urbano, material de referência. Semanalmente foram feitas coletas
das flores abertas onde os pelos estaminais foram analisados em estereomicroscópio Leica com luz
refletida de baixo para cima. Os resultados apresentaram diferenças significativas quando comparados os
locais Parque Natural Chico Mendes e telemétrica da CETESB e também correlação positiva para MP10,
NO2 e umidade relativa. O presente trabalho mostrou-se eficiente e diferenciou espacialmente o efeito
genotóxico dos poluentes.
Palavras – chave: Biomonitoramento; Poluição Atmosférica; KU-20.
49
AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIGENOTÓXICA E ANTIOXIDANTE DO EXTRATO DE
Vochysia divergens EM CÉLULAS V79.
Mendes SA, Oliveira PF, Acésio NO, Silva MR, Soares MA, Januário AH, Tavares DC
Universidade de Franca, Franca, São Paulo, Brasil
A espécie Vochysia divergens (Vochysiaceae), popularmente conhecida como “cambará”, é uma árvore
muito encontrada nos solos úmidos do Pantanal Mato-grossense. Esta planta é utilizada na medicina
popular contra infecções respiratórias, distúrbios digestivos e asma. Tendo em vista seu uso terapêutico, o
presente estudo teve como objetivo avaliar o potencial antigenotóxico do extrato das partes aéreas de V.
divergens em fibroblastos de pulmão de hamster Chinês (células V79) pelo teste do micronúcleo. A
citotoxicidade foi avaliada pelo índice de divisão nuclear (IDN). Além disso, também foi avaliado o
potencial antioxidante do extrato de V. divergens pelo método de sequestro do radical 2,2-difenil-1-picril-
hidrazila (DPPH). Para a avaliação da antigenotoxicidade foram testadas as concentrações de 20, 40 e 80
µg/mL associadas ao mutágeno metil metanosulfonato (MMS). Também foram incluídos grupos
controles negativo (sem tratamento), positivo (MMS) e solvente (dimetilsulfóxido, 1%). Para avaliação da
atividade antioxidante as concentrações testadas variaram de 66,7 a 1,67 µg/ml e utilizou-se o ácido
gálico como controle positivo. Os resultados obtidos pelo teste do micronúcleo mostraram que houve uma
redução significativa na frequência de micronúcleos nas concentrações testadas, quando comparadas ao
controle positivo. Os resultados também apontam uma capacidade antioxidante do extrato, observa-se
uma resposta dose-dependente com máximo de inibição de 92,6% para maior concentração. Assim, nas
condições experimentais utilizadas, os resultados apresentados mostraram que o extrato de V. divergens
possui atividade antigenotóxica e antioxidante.
Palavras – chave: Vochysia divergens; teste do micronúcleo; antigenotoxicidade; DPPH.
Suporte Financeiro: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP, Brasil
2013/25318-3).
50
AVALIAÇÀO DA ATIVIDADE CITOTÓXICA DO COMPOSTO FENÓLICO ZINGERONA,
EM CÉLULAS DE HEPATOMA HUMANO (HepG2/C3A)
YOSHIMOTO, M.¹, FERNANDES, L.M.1, BUZO, M.G.
1, VICENTINI, V.E.P.¹
1. Departamento de Biotecnologia, Genética e Biologia Celular, Universidade Estadual de Maringá, PR,
Brasil; e-mail: [email protected]
O gengibre (Zingiber officinale) é uma planta muito conhecida por seu sabor picante e odor levemente
cítrico. O rizoma é a parte mais utilizada do gengibre, sendo amplamente difundida nos setores
alimentícios, industriais e na medicina popular. As propriedades terapêuticas do gengibre são resultantes
da ação de diversas substâncias, principalmente do óleo essencial, que contém, entre outras substâncias, a
Zingerona. A Zingerona desempenha um papel importante em várias respostas funcionais de mamíferos,
aumentando os efeitos anti-inflamatórios, antioxidantes e anticancerígenos. Este trabalho teve como
objetivo avaliar a atividade citotóxica do composto fenólico Zingerona, por meio do teste do MTT, em
células de hepatoma humano (HepG2/C3A). Para o teste do MTT, as placas de cultura foram tratadas
com cinco diferentes concentrações de Zingerona (50, 75, 100, 125 e 150 µg/mL), uma concentração de
metil-metanossulfonato (MMS) e um Controle (DMEM, suplementado com 10% de SBF e 1% de etanol
100%) por 24 e 48 horas. A leitura foi realizada em leitor de microplacas a 550 nm. Os resultados do teste
do MTT demonstraram que não houve diferença, estatisticamente significativa, entre os tratamentos com
a Zingerona e o Controle em ambos os tempos. Desta forma, pode-se observar que o composto fenólico
Zingerona, presente no gengibre, não apresenta atividade citotóxica, indicando um uso seguro para os
indivíduos que o consomem.
Palavras – chave: Ensaio do MTT; Gengibre; Câncer.
Financiamento: CAPES
51
AVALIAÇÃO DA CITOTOXICIDADE IN VITRO, DO FITOTERÁPICO JOÃO DA COSTA©
EM CÉLULAS HepG2/C3A
LUCIO, F. T. ¹, ALMEIDA, I. V.1, VICENTINI, V. E. P. ¹
1. DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGIA, GENÉTICA E BIOLOGIA CELULAR, Universidade
Estadual de Maringá, Paraná, Brasil, [email protected].
O medicamento João da Costa e Associações©
é um fitoterápico utilizado há 36 anos pela população
brasileira para tratar a dismenorreia, afecções e/ou inflamações ginecológicas, mas pouco explorado pela
comunidade científica. Por ser um medicamento de uso oral, é absorvido no intestino e segue pelo sistema
circulatório para o fígado, onde é metabolizado, podendo auxiliar no tratamento de patologias neste
órgão, indispensável à homeostase de qualquer organismo. Seu preparo é feito pela decocção de cinco
plantas, Abútua (Chondrodendron platiphyllum Miers), Agoniada (Plumeria lancifolia Muller), Alecrim
(Rosmarinus officinalis Linné), Algodoeiro (Gossypium herbaceum Linné) e Erva Santa (Enchiste peltata
Vell), as quais apresentam inúmeras propriedades farmacologicamente ativas. O objetivo deste estudo foi
avaliar a citotoxicidade desse medicamento, pelo teste do MTT, em células tumorais de hepatoma
humano (HepG2/C3A). Para isso, foram avaliadas cinco concentrações (1, 2, 4, 20 e 40 µl/mL de meio de
cultura), do medicamento comercial e do seu extrato etanólico, nos tempos de 24 e 48 horas, sendo a
leitura realizada em leitor de microplacas à 550 nm. Os resultados mostraram que tanto o medicamento
quanto seu extrato etanólico, nas condições apresentadas neste estudo, não se mostraram citotóxicos, em
nível de atividade mitocondrial, uma vez que não houve diferença, estatisticamente significativa, para a
absorbância entre os grupos controle e tratamentos, pelo teste de Dunnett. Mais estudos devem ser
desenvolvidos com este medicamento e seu extrato etanólico para garantir o seu consumo de forma
segura.
Palavras – chave: ensaio do MTT; hepatocarcinoma humano; extrato etanólico.
52
AVALIAÇÃO DA GENOTOXICIDADE DAS NANOPARTÍCULAS DE DIÓXIDO DE TITÂNIO
(TiO2) E CHUMBO INORGÂNICO (PbII) EM Hoplias intermedius (ERYTHRINIDAE) APÓS
EXPOSIÇÃO HÍDRICA.
Ana Carolina Dagostim¹, Tatiane Klingelfus2, Gustavo Souza Santos
3, Laercio Dante Stein Piancini
2,
Gabrieli Limberger Galvan3, Taynah Vicari ², Marta Margarete Cestari
2
1 Ciências Biológicas, Universidade Federal do Paraná, Curitiba, PR. [email protected]
2 Programa Pós-Graduação em Genética, Departamento de Genética, Universidade Federal do Paraná,
Curitiba, PR.
3 Programa Pós-Graduação em Ecologia e Conservação, Universidade Federal do Paraná, Curitiba, PR.
A industrialização dos últimos dois séculos, juntamente com o crescimento populacional e os avanços
tecnológicos, traz consigo a síntese de novos compostos químicos que, ao interatuar com os organismos e
causar alterações tanto neles como nas populações, comunidades e ecossistemas tornam-se poluentes. Os
nanomateriais são fabricados com intuito de portarem características físico-químicas únicas como, alta
reatividade química e alta capacidade de penetração. O dióxido de titânio (TiO2) possui capacidade de
adsorver metais tóxicos reduzindo a disponibilidade destes na água, enquanto o chumbo (PbII) possui
capacidade de mimetizar elementos essenciais do organismo, causando alterações nas atividades
fisiológicas da célula. Segundo a resolução 357/2005 do CONAMA a concentração de PbII permitida
para águas destinadas a irrigação de culturas, consumo humano e dessedentação de animais é 0,033mg/L.
Sendo assim, este trabalho investigou a genotoxicidade das nanopartículas de TiO2 e PbII assim como a
sua associação em tecido sanguíneo de Hoplias intermedius através do Teste de Micronúcleo Písceo e
alterações morfológicas nucleares. Os peixes foram submetidos à contaminação hídrica aguda nas
concentrações de 0,033 mg/L de PbII, 100mg/L de NpTiO2 e a associação dos dois contaminantes,
juntamente com um grupo controle negativo e um grupo controle positivo tratado com 5 µg/g de MMS,
totalizando 5 grupos e 75 peixes. Não foram observadas diferenças estatísticas entre os grupos analisados
(p=0,9253). Outros testes mais sensíveis serão realizados, mas, por hora, observamos que a concentração
de chumbo permitida pelo CONAMA, assim como a concentração de NpTiO2, não causaram danos
detectáveis no DNA através do teste empregado.
Palavras – chave: Teste do Micronúcleo Písceo, Eritrócitos, Traírão
Financiamento: PIBIC/CNPQ; Estação de Hidrobiologia e Psicicultura de FURNAS (MG).
53
AVALIAÇÃO DA GENOTOXICIDADE DOS GLICOALCALOIDES SOLAMARGINA E
SOLASONINA E DE SUA INFLUÊNCIA SOBRE OS DANOS CROMOSSÔMICOS INDUZIDOS
POR DIFERENTES MUTÁGENOS
Heloiza D. Nicolella1, Carla C. Munari
1, Pollyanna F. Oliveira
1, Jairo K. Bastos
2, Denise C. Tavares
1
¹Universidade de Franca, Franca, São Paulo, Brasil
²Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, São
Paulo, Brasil
A América da Sul revela uma vasta diversidade ecológica e fitoterápica, atraindo indústrias
farmacêuticas. Dentre as inúmeras espécies encontradas nessa variedade natural, estão as espécies do
gênero Solanum, que apresentam diversas atividades biológicas, como hipotensiva, hepatoprotetora,
antiurolitíase e antialérgica. Nas espécies desse gênero, são encontrados os glicoalcaloides solamargina
(SM) e solasonina (SS), destacando-se por sua relevante atividade antitumoral. O presente estudo
objetivou avaliar a possível genotoxicidade destes glicoalcaloides e a sua influência sobre os danos no
DNA induzidos por diferentes mutágenos, em fibroblastos de pulmão de hamster Chinês (células V79),
utilizando o teste do micronúcleo. Para a avaliação da genotoxicidade, as culturas foram tratadas com 1,7;
3,5 e 7,1 µg/mL de SM e 3,6; 7,2 e 14,4 µg/mL de SS. Estas concentrações foram combinadas com os
mutágenos etoposídeo (VP16 – 1 µg/mL) e camptotecina (CPT – 43 µg/mL). Foram incluídos grupos
controles negativo (sem tratamento), solvente (dimetilsulfóxido – DMSO, 1%) e positivos (VP16 e CPT).
A citotoxicidade dos tratamentos foi avaliada por meio do índice de divisão nuclear (IDN). Os resultados
obtidos mostram que as culturas celulares tratadas com SM e SS apresentaram frequências de
micronúcleos que não diferiram daquelas observadas pelas culturas do grupo controle negativo. Ainda, as
freqüências de micronúcleos observadas nas culturas tratadas com os glicoalcaloides combinados com os
mutágenos não foram significativamente diferentes daquelas observadas nos tratamentos isolados com os
mutágenos. Assim, sob as condições experimentais utilizadas, a SM e a SS não apresentaram efeito
genotóxico e não influenciaram a freqüência de danos cromossômicos induzidos por VP16 e CPT.
Palavras-chave: Solamargina; Solasonina; micronúcleo
Financiamento: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP, Brasil, Processo nº
2013/22769-4).
54
ESTUDO DA CITOTOXICIDADE IN VITRO, DA PLANTA MEDICINAL ALOE VERA (Aloe
barbadensis MILLER) EM CÉLULAS HepG2-C3A
Ana Clara Canesin de Almeida¹, Igor Vivian de Almeida¹, Veronica Elisa Pimenta Vicentini¹.
1. Universidade Estadual de Maringá, Departamento de Biotecnologia, Genética e Biologia Celular,
Laboratório de Mutagênese e Monitoramento Ambiental; [email protected]
Desde civilizações antigas, o hábito de usar plantas medicinais na medicina popular vem sendo praticado.
O importante reconhecimento das características farmacológicas dessas plantas intensificou o seu uso,
tanto para a prevenção quanto para a cura de doenças. Muitas plantas medicinais já foram caracterizadas
quanto aos seus componentes químicos e farmacológicos, e testadas em distintos sistemas-teste para
avaliar seu possível potencial citotóxico, genotóxico, mutagênico ou até mesmo antimutagênico. A Aloe
barbadensis Miller, conhecida popularmente como Aloe vera ou Babosa, apresenta diversos benefícios,
tais como, cicatrizante, anti-inflamatória, laxativa, hidratante, antienvelhecimento, antitumoral e antiviral.
O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade desta planta in vitro, pelo teste do MTT, em células
tumorais de hepatoma humano (HepG2-C3A). Para isso, a mucilagem da planta foi raspada e triturada,
sendo avaliadas dez concentrações (10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 e 100 µL/mL de meio de cultura), no
tempo de 24 horas, sendo a leitura realizada em leitor de microplacas (550nm). Os resultados mostraram
que a Aloe vera, nas condições apresentadas neste trabalho, não foi citotóxica em nível de atividade
mitocondrial, uma vez que não houve diferença estatisticamente significativa para a absorbância entre os
grupos controle e tratamentos, pelo teste de Dunnett (α=0,05). Mais estudos podem ser desenvolvidos
com esta planta para caracterizar alguma possível atividade citotóxica, identificando assim, mais um
benefício desta planta cujo uso é amplamente difundido na medicina popular brasileira.
Palavras-chave: babosa, fitoterapia, hepatocarcinoma humano; MTT.
Financiamento: CNPq
55
INDUÇÃO DE ABERRAÇÕES CROMOSSÔMICAS E MICRONUCLEOS EM CÉLULAS DE
Allium cepa EXPOSTAS À FRAÇÃO SOLÚVEL DA GASOLINA
Gabrieli Limberger Galvan ¹, Jéssica Natalia Loyola ¹, Daniela Morais Leme 2, Marta Margarete Cestari ¹
1. Laboratório de Citogenética Animal e Mutagênse Ambiental, Universidade Federal do Paraná
(UFPR), Centro Politécnico, Jardim das Américas, CEP: 81531990, Curitiba, PR, Brasil.
2. Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP-USP), Departamento de Análises
Clínicas Toxicológia e Bromatologia. Monte Alegre, CEP: 14040903, Ribeirão Preto, SP, Brasil;
A fração solúvel da gasolina (FSG) é uma mistura de compostos tóxicos, entre os mais perigosos estão o
benzeno e vários hidrocarbonetos policíclicos aromáticos considerados potencialmente carcinogênicos.
Desta forma, o presente estudo objetivou avaliar os efeitos genotóxicos de baixas concentrações da FSG
utilizando o sistema de teste Allium cepa. As sementes de A. cepa foram germinadas em placas de petri
por cinco dias a 25°C, nos seguintes meios: controle negativo (água destilada); controle positivo (metil
metanosulfonato 10 mg.L-1
); e na FSG nas concentrações de 1,5%; 3,0% e 15,0%. Foi avaliado o índice
mitótico; frequência de anomalias nucleares (AN); aberrações cromossômicas (AC) e micronúcleos (MN)
em células meristemáticas. Os tratamentos não alteraram o índice mitótico e a frequência de AN. Foi
observado aumento na frequência de MN nas concentrações de 3,0% e 15,0% da FSG e indução de AC
no tratamento com a FSG15%. Em relação ao total de alterações (AN, MN e AC), todos os tratamentos
diferiram do controle negativo, sendo considerados genotóxicos. Os resultados indicam que os
compostos solubilizados presentes na fração solúvel da gasolina, mesmo que em baixas concentrações
induzem severas alterações no material genético, colocando em risco à saúde dos organismos expostos
pelo potencial aneugênico e clastogênico.
Palavras – chave: genotoxicidade; mutagênese; hidrocarbonetos.
Financiamento: CAPES
56
Indução de anomalias nucleares e alterações hematológicas em Astyanax altiparanae (CHARACIDAE)
expostos à Fração Solúvel da Gasolina
Lirola, J. R. 1
; Felisbino, K. 1
; Galvan, G. L.2; Ferreira, D. M.
1; Yamamoto, C. I.
3, Cestari, M.M.
1.
1. Departamento de Genética, Universidade Federal do Paraná (UFPR), Centro Politécnico,
Jardim das Américas, CEP: 81531990, Curitiba, Paraná, Brasil.
2. Programa de Pós-Graduação em Ecologia e Conservação, Universidade Federal do Paraná
(UFPR), Centro Politécnico, Jardim das Américas, CEP: 81531990, Curitiba, Paraná, Brasil.
3. Laboratório de Combustíveis Automotores da UFPR. Departamento de Engenharia Química,
Centro Politécnico, Jardim das Américas, CEP: 81531990, Curitiba, Paraná, Brasil
A gasolina é uma mistura de hidrocarbonetos tóxicos com potencial de impacto nos ambientes aquáticos
através de derramamentos acidentais e outras fontes de contaminação. Desta forma, foi avaliado os efeitos
da exposição à Fração Solúvel da Gasolina (FSG) em peixes da espécie Astyanax altiparanae através do
Teste do Micronúcleo Písceo em eritrócitos e da análise da freqüência de leucócitos e trombócitos. Os
animais foram submetidos a tratamentos com a FSG (1,5%) sendo: exposição aguda de 96 horas,
subcrônica de 15 dias e a períodos de depuração de 15, 30 e 60 dias, além do controle negativo e de um
tratamento com organismos parasitados com Ichthyophthirius multifiliis. Não houve indução de
micronúcleos, no entanto foi observado aumento na freqüência da alteração nuclear do tipo blebbed e no
total de anomalias nucleares no tratamento subcrônico, sendo reduzida nos períodos de depuração. Foi
observada indução da freqüência total de células (leucócitos e trombócitos) nos organismos parasitados e
expostos à FSG por 15 dias, com normalização nos períodos de depuração. A exposição à FSG alterou a
freqüência de leucócitos, principalmente de linfócitos com a mesma magnitude dos organismos
parasitados. A freqüência de trombócitos foi induzida na exposição subcrônica com sucessivo aumento
nos grupos de depuração. A exposição à FSG induziu genotoxicidade através da indução de anomalias
nucleares em eritrócitos, alteração na freqüência de trombócitos que atuam na coagulação sanguínea e
aumento no total de leucócitos indicando ativação do sistema imunológico.
Palavras – chave: genotoxicidade; hematologia; leucócitos.
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INVESTIGAÇÃO DO POTENCIAL CITOTÓXICO DO FLAVONOIDE NARINGINA, EM
CÉLULAS DE HEPATOMA HUMANO (HepG2/C3A).
FERNANDES, L.M.¹; BUZO, M.G.1; YOSHIMOTO, M.¹; VICENTINI, V.E.P.¹
1. Departamento de Biotecnologia, Genética e Biologia Celular, Universidade Estadual de Maringá, PR,
Brasil; e-mail: [email protected]
Os flavonoides são compostos de origem vegetal, utilizados na indústria como corantes, aromatizantes e
flavorizantes. A Naringina é um flavonoide, da classe das flavanonas, presente em muitos vegetais,
principalmente em frutas cítricas, sendo responsável pelo seu sabor amargo. Ela possui conhecidas ações
antioxidantes e anti-inflamatórias. Dessa forma, é importante compreender melhor os efeitos causados por
esse composto, pois o ser humano está exposto a muitos vegetais que contém este flavonoide. Portanto, o
objetivo deste trabalho foi investigar o possível potencial citotóxico do flavonoide Naringina, por meio do
teste do MTT, em células de hepatoma humano (HepG2/C3A). Para o teste do MTT, as culturas foram
tratadas com seis concentrações de Naringina (5, 50, 100, 150, 200 e 250µM/mL), uma concentração de
metil-metanossulfonato (MMS) (100µM/mL), e um Controle (DMEM, suplementado com 10% de SBF),
por 24 e 48 horas. A leitura foi realizada em leitor de microplacas à 550nm. Os resultados do teste MTT
não apresentaram diferenças, estatisticamente significativas, entre os tratamentos com a Naringina e o
Controle, demonstrando que o composto não foi citotóxico em nenhuma das concentrações testadas.
Assim, foi observado que o flavonoide Naringina, presente em pequenas concentrações em frutos cítricos
consumidos frequentemente pela população, não apresenta atividade citotóxica, o que provavelmente,
pode contribuir para uma melhora da qualidade de vida daqueles que o consomem.
Palavras – chave: Ensaio do MTT; Agentes Carcinogênicos; Cultura de Células.
Financiamento: Fundação Araucária.
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A5 - GENÔMICA E BIOINFORMÁTICA
59
ANÁLISE DO GENE TOLL-LIKE RECEPTOR 3 – TLR3
NOS NAVEGADORES GENÔMICOS E GENÉTICOS
Angelo Bannack¹, Daniel Nicola Martinez¹, Gustavo Arthur Reis Schneider¹, Jessica Gabriele Santos¹,
Luis Antonio Momm Duarte¹, Luisa Arias Zendim¹, Angelica B. W. Boldt¹,2.
1. Curso de Graduação em Medicina, UFPR.
2. Laboratório de Genética Molecular Humana, Departamento de Genética, UFPR. [email protected]
Os receptores do tipo Toll são uma família de proteínas responsáveis por reconhecer padrões moleculares
associados a patógenos. O TLR3 reconhece o RNA de fita dupla e induz diversos eventos intracelulares
responsáveis pela imunidade antiviral inata. A fim de compilar e analisar a qualidade das informações a
respeito deste gene na rede virtual, buscou-se reunir o conhecimento disponível em navegadores
genômicos e genéticos, tais como Online Mendelian Inheritance in Man (OMIM), Ensembl (projeto
conjunto do European Bioinformatics Institute e Wellcome Trust Sanger Institute), NCBI (National
Center for Biotechnology Information), Biogps, Genecards, Protein Atlas, Human Protein Reference
Database (HPRD), dentre outros. As informações foram agrupadas em um dos três tópicos seguintes: (1)
Estrutura, (2) Expressão e (3) Polimorfismo do gene; e comparadas ao conhecimento obtido em artigos
científicos. A estrutura de TLR3 é representada de forma similar no NCBI (identificador 7098) e no
Ensembl (ENSG00000164342). Segundo o Ensembl, há 5 mRNAs do TLR3, dos quais 3 são capazes de
expressar proteínas, embora somente uma isoforma seja apresentada pelo HPRD. O mRNA é expresso de
forma ubíqua (Biogps, Genecards), porém a proteína não foi identificada em todos os tecidos investigados
(Proteinatlas). Há 2833 variantes listadas no Ensembl e 744 no Single Nucleotide Polymorphism
Database (NCBI). As informações obtidas pelos artigos científicos foram mais similares ao OMIM,
apesar da defasagem na sua atualização. Logo, as principais inconsistências foram encontradas para a
expressão e o polimorfismo deste gene. Nestes quesitos, o Ensembl parece ser o navegador com as
informações mais confiáveis.
Palavras – chave: Receptores do tipo Toll, imunidade antiviral inata, HIV
60
A6 - GENÉTICA NA ESCOLA
61
A CONSTRUÇÃO DO DISCURSO CIENTÍFICO NA BIOLOGIA NO FINAL DO SÉCULO XIX
– RELATO DE UMA EXPERIÊNCIA
Fernanda Cássia dos Santos¹, Fernanda Pacheco Fernandes ²*, André Felipe Klassen³*
1. Universidade Federal do Paraná, departamento de História;
2. Universidade Federal do Paraná, departamento de Genética;
3. Faculdade Teológica Batista do Paraná.
* Fundação Menonita – Colégio Erasto Gaertner
Na prática escolar, disciplinas como História e Biologia são geralmente vistas como totalmente separadas.
No entanto, o conhecimento em si não é necessariamente fragmentado, como a divisão das disciplinas
escolares sugere. A prática transdisciplinar pode oferecer caminhos para que os alunos encontrem sentido
em determinados conteúdos, que vistos de forma isolada, não seriam significativos para eles. Neste
sentido, propomos uma compreensão do modo como os discursos científicos são produzidos
historicamente pelas sociedades, com o objetivo de demonstrar as relações possíveis entre História e
Biologia. Assim, neste relato de experiência tratamos do contexto do século XIX e do discurso científico
sobre a Eugenia produzido nesse período. O século XIX é caracterizado pela emergência do discurso
científico como forma privilegiada para analisar a sociedade. Foram desenvolvidas teorias tidas como
científicas sobre uma base racista que classificava os seres humanos em níveis diferentes de evolução a
partir de sua raça. Tais teorias contribuíram para o surgimento da Eugenia (ciência que estuda o
melhoramento racial) e do Darwinismo Social. Esse discurso Eugênico foi apropriado pela ciência
Nazista, que transformou o discurso científico numa das bases de seu projeto político-social. Após a 2ª
Guerra Mundial, essas teorias caíram em descrédito e recentemente as pesquisas no campo da Genética
demonstram que há mais variação genética entre pessoas da mesma etnia do que entre grupos étnicos
diferentes. No Ensino Médio, o trabalho com esses conteúdos permitiu uma discussão crítica a respeito da
produção do próprio discurso científico e sua historicidade.
Palavras–chave: Darwinismo Social; História da Ciência; Transdisciplinaridade
62
CONSOLIDANDO O DOGMA CENTRAL DA GENÉTICA MOLECULAR: A EXPERIÊNCIA
DA MEDICINA VETERINÁRIA.
Ana Luiza S. Reis ¹, Victor H. G. Barbosa ¹, Tainara C. Michelotti ¹, Angelica B. W. Boldt 1, 2
1. Curso de Medicina Veterinária, UFPR.
2. Laboratório de Genética Molecular Humana, Departamento de Genética, UFPR; [email protected].
Em busca de uma forma de consolidar o conhecimento obtido nas aulas em torno do Dogma Central da
Genética Molecular na Medicina Veterinária, sugeriu-se a execução de um trabalho composto pela
simulação da sequência de um gene com diferentes mutações, sua replicação, transcrição e tradução. O
gene deve conter um promotor com TATAbox, dois exons com regiões não traduzidas (UTR) e um
intron. A replicação da fita 5’-3’ gera a fita 3’-5’ codificadora. Esta é transcrita em um mRNA sem o
intron, contendo as regiões UTR, CAP (7 metil guanosina) e cauda poli-A. Este mRNA é traduzido em
uma proteína, iniciando com metionina. A seguir, são simuladas mutações na fita 5’-3’ e suas possíveis
consequências ao nível de qualidade e abundância do mRNA e da proteína. Ao longo do exercício, os
alunos perceberam que, embora a sequência do gene propriamente dito esteja na fita 3’-5’, a fita 5’-3’ do
DNA apresenta a mesma sequência que o mRNA (exceto pela presença de timina, promotor e intron).
Discutiram a importância das regiões UTR através da correção de erros, como a sua exclusão do mRNA
maduro. Observaram que o impacto de mutações nas regiões codificadoras geralmente é muito maior, que
o nas não codificadoras, permitindo reflexões sobre o papel da seleção purificadora e dos mecanismos de
reparo. Por meio deste exercício de criatividade (cada aluno elaborou sua própria sequência), foi possível,
portanto, consolidar a definição molecular de um gene codificador de proteína, conceitos de mutagênese,
mecanismos de reparo e regulação de expressão gênica.
Palavras – chave: genética molecular; gene; mutação.
Financiamento: PID – UFPR.
63
“Descobrindo as Ervilhas de Mendel”
Laís Fernanda Oya Silva1
1. Universidade Federal do Paraná
Conteúdos de genética necessitam de conhecimentos consolidados em diferentes áreas como a biologia
celular, molecular e, inclusive, matemática. É uma das áreas na qual os alunos, tanto de ensino médio
quanto de superior, têm maior dificuldade no aprendizado, principalmente quando o tema é a segregação
alélica (Primeira Lei de Mendel). Como ferramenta foi desenvolvida uma atividade chamada de
“Descobrindo as Ervilhas de Mendel”. Este material tem como objetivos: ser um apoio aos professores
para consolidar conceitos (alelos, genes, cromossomos, segregação, genótipo, fenótipo), demonstrar
visualmente a dinâmica da Primeira lei de Mendel, apresentar a variabilidade na produção de gametas e
no pareamento dos cromossomos homólogos na formação do zigoto. O material consiste em bolas de
isopor caracterizadas com os fenótipos de ervilhas amarelas e verdes “recheadas”, conforme o fenótipo,
com cromossomos confeccionados de massa de biscuit nas cores azul, vermelho e roxo (Parental-1,
Parental-2 e Descendentes, respectivamente), com faixas brancas (Centrômero), amarelas (Alelo
Dominante) e verdes (Alelo Recessivo). Na proporção de 3:1, conforme a Primeira Lei de Mendel, as
ervilhas foram inseridas em pacotes identificados (Parental-1, Parental-2 e descendentes). A atividade
propõe sortear ervilhas dos pacotes Parentais, fazer a identificação de seus fenótipos e, ao abri-las montar
os possíveis genótipos dos descentes deste cruzamento através dos cromossomos. Posteriormente, faz-se
o sorteio do descendente, deve-se então questionar os alunos se a ervilha sorteada pode ter como parentais
as ervilhas sorteadas anteriormente, fenotípica e genotipicamente. Todos estes dados devem ser anotados
em uma tabela, juntamente com cálculos de frequências fenotípicas e genotípicas.
Palavras – chave: segregação alélica, matéria didático, Primeira Lei de Mendel.
64
DO MENOR PARA O MAIOR, JCLIC - UMA FERRAMENTA DE ENSINO-APRENDIZAGEM
Ana Rita Bloch Martins¹
Aluna especializanda do Curso de Genética para Professores do ensino Médio da Universidade
Federal do Paraná, UFPR
Resumo
O presente trabalho destina-se ao aprendizado de genética de forma significativa, utilizando-se do
software de autoria de uso livre – JClic, como instrumento lúdico ao aprendizado. Esta atividade aborda
conteúdos que envolvem a ação genética na formação e manutenção do organismo humano, deixando
também, uma vasta caminhada ao pensar em outros organismos vivos . Trata-se de uma atividade didática
criada pelo educador, “conduzindo” a interpretação dos conteúdos pelo aluno que “brincando” com os
seguintes jogos: completar palavras, jogo de memória, relacionar palavras e figuras, quebra-cabeças entre
outros. Entendemos que o lúdico ( jogo ) conduzirá o educando na apropriação dos conhecimentos de
forma significativa, referentes à constituição da célula animal, à síntese protéica, a estrutura do DNA, até
constituição dos caracteres hereditários, sendo os subsunçores alicerces para o conhecimento principal
para a iniciação à genética, levando-os a pensar como esses caracteres se perpetuam de geração a geração,
e a importância dos estudos de Mendel, fazendo a interpretação de suas Leis. Os jogos foram planejados
dentro do diagrama V, facilitando ao educando melhor compreensão a respeito da genética.
Palavras – chave: 1.Genes 2. Cromossomos 3. Mendel
65
FUNDAMENTOS TEÓRICOS E METODOLÓGICOS PARA O ENSINO DE GENÉTICA NA
EDUCAÇÃO BÁSICA
CARVALHO, Patrícia Acioli¹; VIERO, Márcia Regina²; VIERO, Márcia Regina; NEJM, Guilherme de
Moraes3; SANTIAGO, MIRANDA, Adenise Alves de
4.
1. Secretaria de Estado da Educação do Paraná.
2. Secretaria de Estado da Educação do Paraná. [email protected].
3. Secretaria de Estado da Educação do Paraná.
4. Secretaria de Estado da Educação do Paraná.
O presente trabalho foi desenvolvido com professores da disciplina de Biologia da Rede Estadual de
Ensino do Paraná, nos eventos de formação continuada, no primeiro semestre de 2013. Participaram deste
evento professores que atuam nos Núcleos Regionais de Educação das Áreas Metropolitanas Norte e Sul.
Esta proposta partiu da necessidade permanente de discussão e reflexão sobre a prática docente,
encaminhamentos teóricos e metodológicos, bem como metodologias diferenciadas para o
desenvolvimento do conteúdo básico transmissão das características hereditárias. Fundamentou-se nos
princípios pedagógicos contidos na Diretriz Curricular Orientadora da Educação Básica do Estado do
Paraná- Biologia, que propõe o método da prática social, em que os conhecimentos prévios dos
educandos se articulam com o saber elaborado, na perspectiva de uma apropriação da concepção de
ciência como atividade humana.
Palavras – chave: Metodologias; Prática social; Genética.
66
GEA - Genes e Ambientes
Benn Richard Alle¹, Iris Hass¹, Fernanda Pacheco Fernandes ¹, Fabiana Antunes de Andrade¹, Lupe
Furtado-Alle¹
1. Universidade Federal do Paraná, Departamento de Genética.
O jogo GEA - Genes e Ambientes, foi desenvolvido como o objetivo de contribuir para a superação das
dificuldades encontradas no ensino e na aprendizagem de genética e evolução. Esta atividade oferece uma
estratégia que integra teoria e prática proporcionando aos professores um novo recurso didático que se
adéqua ao espaço e ao tempo disponível em sala de aula. A atividade proposta promove a discussão e
reforça a compreensão de termos como: gene, alelo, genótipo, fenótipo, homozigose, heterozigose,
interações alélicas como a dominância, recessividade e co-dominância, interações gênicas, seleção natural
e mutação. O GEA mostra, de forma lúdica, o efeito da seleção natural em uma população, por meio de
simulações de interações entre genótipo, fenótipos e o meio ambiente. Esta atividade é indicada para o
ensino médio e cursos de graduação das áreas biológicas e da saúde. A duração da atividade é de,
aproximadamente, 40 minutos.
Palavras – chave: (Seleção Natural; Jogos; Genética)
67
O USO DE MODELOS DIDÁTICOS NO ENSINO DO SISTEMA ABO
Camila Begui do Nascimento¹, Tayonara Georgianne Neppel²
1. Universidade Estadual do Oeste do Paraná, Jardim Universitário, Rua Universitária, 1619, Cascavel-
PR.
E-mail: [email protected]
O uso de modelos está intimamente ligado à formulação de hipóteses e conceitos no estudo da Biologia.
Uma vez que o modelo está vinculado à tradução do real para o visual, é de extrema importância o uso de
modelos didáticos no ensino de genética na escola, tanto quanto no estudo científico, trazendo para os
alunos uma forma palpável e concreta no intuito deles “verem as coisas acontecendo”. Neste sentido, foi
realizado um estudo com duas turmas de terceiro ano do ensino médio, em uma escola estadual de
Cascavel- PR, para avaliar a contribuição do modelo didático sobre Sistema ABO no ensino-
aprendizagem de Genética. Assim, foram utilizados materiais como: bolas de isopor 5 cm de diâmetro,
arame 1 mm, durepoxi e tinta de diversas cores, para representar hemácias e suas proteínas que expressam
o tipo sanguíneo, linfócitos que produzem os anticorpos e macrófagos que atacam células e organismos
estranhos ao nosso corpo. Portanto, em uma turma o conteúdo foi exposto segundo métodos tradicionais,
onde os principais recursos foram o quadro e o giz. Já na outra turma o modelo serviu de apoio visual
para a formulação de conceitos durante todo o processo. Verificou-se que 100% dos alunos aprovaram o
uso do modelo e afirmaram que ele facilita significativamente o ensino-aprendizagem do sistema ABO,
sendo que 30,76% dos alunos tiveram um acerto de 100%, 38,46% deles acertaram 50% das questões e
30,76% deles não souberam ou não responderam. Já para a turma na qual não foi utilizado o modelo
durante o processo 8,33% dos alunos acertaram 100% do questionário, 33,33% acertaram 50% das
questões e 58,33% deles não souberam ou não responderam. Conclui-se que, o maior número de acertos
foi da turma em que foi trabalhada com o modelo didático, caracterizando melhor assimilação do
conteúdo no processo de ensino-aprendizagem no conteúdo de Sistema ABO.
Palavras-chave: Genética na Escola; Ensino-aprendizagem; Sistema ABO.
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PROBLAMATIZAÇÃO DAS IDEIAS DOS ALUNOS SOBRE O TEMA DNA
Josiane Ladelfo¹, Maria de Lourdes Barreto Bisol² e Cassiano Pamplona Lisboa¹
1. Instituto Federal de Educação Ciência e Tecnologia do Rio Grande do Sul (IFRS) – Câmpus Porto
Alegre;
2. Colégio Estadual de Ensino Médio Júlio de Castilhos; [email protected]
Este é um relato do estudo das ideias prévias de alunos do ensino médio sobre o tema DNA e, a partir
deste, a problematização das idéias onde se percebeu maior dificuldade de entendimento com uma
atividade experimental. O ensino com base nas ideias prévias está ligado às compreensões construtivistas
de ensino-aprendizagem, entendendo que as concepções que os alunos formulam em meios informais de
ensino podem ser usadas como base de problematização para (re)construção do conhecimento. Neste
sentido, foi elaborado e aplicado um questionário a turmas do primeiro ano para identificar as ideias dos
alunos sobre o que é o DNA, onde está localizado e quais seres possuem. Ao analisar as respostas,
percebeu-se influencia da mídia, sobre o que é DNA, e do senso comum quanto à localização, os alunos
acreditam que o DNA está apenas no sangue. Outro ponto relevante identificado, é que os alunos têm
dificuldade em entender que o DNA está em todos os seres vivos, pois a maioria dos alunos associa a
presença do mesmo apenas em humanos e/ou animais. Buscando problematizar essas ideias, e
complementar as aulas teóricas, foi elaborado um roteiro prático trazendo novamente essas questões,
porém formuladas de forma a fazer os alunos pensarem a partir do experimento, que consistiu na extração
de moléculas de DNA de células animais (mucosa bucal) e vegetais (morangos). Ao realizar essa
atividade, os alunos aos poucos reformularam suas ideias sobre a localização do DNA, sua constituição e
ampliando a discussão para sua presença em todos os seres vivos.
Palavras – chave: Ideias Prévias; problematização; (re)construção do conhecimento.
Financiamento: PIBID (Programa Institucional de Bolsas de Iniciação a Docência) da Capes
(Coordenação de Aperfeiçoamento do Pessoal do Ensino Superior).
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RELATO DE CASO: FEIRA DE CIÊNCIAS DE GENÉTICA
Lívia Blanche Mathieu Graf1, Benn Richard Alle2, Fernanda Pacheco3, Iris Hass4 e Lupe Furtado-Alle5
1. Professores e pesquisadores vinculados a Universidade Federal do Paraná (UFPR)
2. UFPR campus Politécnico : Bairro Jardim das Américas, Curitiba, PR.
Devido à grande dificuldade do docente de ensinar genética aos alunos, materiais alternativos são bem
vindos. Ensinar genética é algo que deve ser cuidadoso, pois, pela sua complexidade a chance de atingir
uma porção mínima da turma é alta. Então como fazer com que os alunos tornem esse aprendizado
significativo? A resposta é simples: fazendo com que o estudo se torne mais concreto por meio de
atividades práticas e estimulantes, conseguindo assim atingir uma parte significativa da turma, o que é o
maior desafio dos professores. Um dos objetivos deste trabalho foi justamente esse, atingir o maior
número de alunos no ensino de genética, tendo em vista que a genética faz parte do seu dia a dia. Uma das
estratégias foi tentar transpor outras matérias, mesmo em pequena escala, neste ensino. Durante um
bimestre, os alunos, sempre em equipes, responderam perguntas e cumpriram desafios, como por
exemplo, construir uma molécula de DNA, descobrir porque o experimento da Dolly não deu certo e
como Gregor Mendel se tornou tão importante. No bimestre em questão os alunos fizeram apresentações
sobre algumas questões atuais como: Engenharia genética; inseminação in vitro; Transgênicos; Terapia
gênica e projeto genoma humano. Ao final, os alunos se organizaram e promoveram uma mini feira de
ciências incluindo cinco temas principais: Descoberta e função do DNA; Genes e suas características;
Clonagem de mamíferos (Dolly); Transgênicos; Josef Mengele e suas experiências e Gregor Mendel. Por
meio dessas atividades, conseguiram demonstrar para outras pessoas o que aprenderam sobre genética e
como ela é importante em nossas vidas.
Palavras-chave: Genética; Educação;Feira de genética.
70
SIMULAÇÃO DO PROCESSO DE SELEÇÃO NATURAL EM SALA DE AULA
Fernanda Pacheco Fernandes 1, Benn Richard Alle¹, Iris Hass¹, Lívia Blanche Mathieu Graf, Lupe
Furtado-Alle¹
1. Universidade Federal do Paraná, departamento de Genética
Darwin e Wallace formularam a teoria da Seleção Natural influenciados pelas ideias de Thomas Malthus,
a partir de suas observações do que ocorria nas populações humanas, em que o crescimento populacional
dava-se de forma bem mais rápida do que a produção de alimentos, sendo assim, conforme suas
previsões, se não houvesse um controle populacional, não haveria alimentos para todos, o que ocasionaria
fome, competições e mortes. Darwin e Wallace observaram que na natureza, os organismos também se
multiplicam em taxas maiores do que os recursos disponíveis, porém suas populações encontram-se em
equilíbrio, concluíram, portanto, que aqueles que apresentam características mais vantajosas para
competir por esses recursos, teriam maior possibilidade de sobreviver e se reproduzir, os favoravelmente
selecionados passariam essas características aos seus descendentes. Na década de 1970, o casal de
pesquisadores Rosemary e Peter Grant estudou aves nas ilhas Galápagos, as conhecidas como tentilhões
de Darwin e puderam observar que conforme mudavam as características ambientais, alterando
consequentemente a disponibilidade de alguns tipos de sementes, era possível quantificar as modificações
que ocorriam nos pássaros nas gerações seguintes quanto ao fenótipo dos descendentes. Foi a partir
dessas observações que esse experimento foi elaborado, com o objetivo de simular a seleção natural das
aves em relação à disponibilidade de recursos alimentares e às suas características morfológicas. Para
realizar a simulação, foram utilizados diferentes instrumentos, como prendedores de roupa, pinças de tirar
sobrancelha e pinça grande, sementes de tamanhos variados, relógio para marcação do tempo e uma
bandeja. Além da forma e tamanho dos instrumentos, é incluída a variação na cor, que não influencia na
captura de sementes nesta simulação, representa o potencial efeito da deriva genética. Foram formados
grupos de seis alunos e diferentes instrumentos foram distribuídos entre eles, representando os diferentes
tipos de bicos das aves. A bandeja contendo as sementes de diferentes tamanhos, representa a quantidade
e a variedade de alimento disponível na ilha. Foram dados 30 segundos para os alunos coletarem o
máximo de sementes que conseguissem, o aluno que não coletou nenhuma semente nesse tempo, com seu
respectivo instrumento, foi eliminado. Cada 30 segundos representou uma geração, e quem não conseguir
coletar, morreu e não conseguiu deixar descendentes. Ao final, é possível observar quais seriam os
“bicos” mais favoráveis para competir por alimentos naquela ilha e consequentemente os indivíduos que
conseguiram se alimentar e deixar descendentes. Esse experimento foi adaptado de um livro do ensino
médio (Ser Protagonista vol. 3 do Ensino Médio- Editora SM) e realizado em sala, como o objetivo de
fazer os alunos compreenderem o processo de seleção natural, observando a sobrevivência e reprodução
em taxas diferenciais de indivíduos com as características mais favoráveis.
Palavras–chave: simulação, seleção natural, competição, recursos, características favoráveis.
71
USO DE NAVEGADORES GENÔMICOS E GENÉTICOS
EM TRABALHOS DE GRADUAÇÃO DA MEDICINA
Victoria Waydzik ¹, Nathalia Crosewski ¹, Fernanda del Castanhel ¹, Doroty Felisberto ¹, Angelica B. W.
Boldt 1, 2
1. Curso de Medicina, UFPR.
2. Laboratório de Genética Molecular Humana, Departamento de Genética, UFPR;
O ensino de Genética Molecular a estudantes de Medicina lança um dos principais fundamentos da
Medicina Personalizada. Para levar os estudantes a responder questões clinicamente relevantes nesta
disciplina, propôs-se a execução de uma atividade com genes cujos produtos apresentam relevância
imunológica, farmacológica e/ou oncológica. Com o auxílio de navegadores genômicos e genéticos, cada
membro de uma equipe de 4 pessoas foi responsável por abordar um dos seguintes tópicos: (1) Estrutura
do gene (nome oficial e sinônimos; localização cromossômica; descrição estrutural e árvore filogenética
com genes ortólogos e parálogos); (2) Expressão do gene (diferentes transcritos e isoformas de proteína,
níveis de expressão em diferentes tecidos e sob diferentes circunstâncias, função da proteína); (3)
Polimorfismo do gene (principais variantes gênicas, sua localização, frequências alélicas, associação com
fenótipos, métodos de detecção); (4) Artigo científico. Os principais links (incluindo um artigo de revisão
para fundamentação do trabalho) são oferecidos aos alunos, partindo do Online Mendelian Inheritance in
Man para o Ensembl, Biogps, Genecards, Single Nucleotide Polymorphism Database, Protein Atlas,
Protein Database, Genome-wide Association Studies Central Database, dentre outros. Até o momento,
foram analisados 33 genes envolvidos na resposta imune, nove genes envolvidos na gênese e progressão
tumoral e nove, de regulação metabólica. As notas dos trabalhos foram significativamente superiores aos
da prova nos três bimestres avaliados, com um acréscimo em torno de 20% (P<0.0001). Sugere-se que
esta experiência possa ser replicada em outros cursos, e que as informações compiladas sejam reunidas
em um banco de dados de livre acesso.
Palavras – chave: navegadores genômicos; gene; navegadores genéticos.
Financiamento: PID - UFPR.
