Efeitos biológicos de extratos de Pleurotus sajor-caju e ...

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Efeitos biológicos de extratos de Pleurotus sajor-caju e Lentinula edodes em cultivo de células tumorais Mikaela L. Melo 1 ; Tiane C. Finimundy 1 ; Aldo P. Dillon 2 ; João A. P. Henriques 1 ; Mariana Roesch -Ely 1 1 Laboratório de Genômica, Proteômica e Reparo de DNA, 2 Laboratório de Enzimas e Biomassas, IB UCS. Sigla do Projeto: Cogumelos_Tumores As propriedades medicinais dos cogumelos do filo basidiomicetos que incluem os gêneros Pleurotus sp. e Lentinula sp., têm despertado grande interesse da comunidade científica por possuírem ação antitumoral in vivo e in vitro. Os mecanismos de ação ainda são incertos, entretanto a visualização direta de morte celular através do tratamento com extratos aquosos de P. sajor- caju e L. edodes em cultura de células de carcinoma de laringe (HEp-2) mostram citotoxicidade frente a esta linhagem. Objetivos Este trabalho teve como objetivo investigar os efeitos biológicos dos cogumelos Pleurotus sajor-caju e Lentinula edodes frente a linhagens tumorais e avaliar as características morfológicas sugestivas de morte celular pela coloração de Giemsa. Plaqueamento 24h O meio foi retirado, adicionado PBS, logo após as células foram tripsinizadas, seguido de novo meio e contagem em câmara de Neubauer. Tratamento 24h Depois de retirado o meio, foi aplicado as concentrações dos extratos já delimitadas e após foi incubado à 37º por 24h. Giemsa As células foram lavadas com PBS, fixadas com metanol, coradas com Giemsa e por fim, lavadas com água destilada. Agradecimentos Materiais e Métodos Referências Bibliográficas MATTILA, P.; et al. Contents of vitamins, mineral elements, and phenolic compounds in cultivated mushrooms. Journal of Agricultural and Food Chemistry, Washington, v. 49, n. 5, p. 2343-2348. mai. 2001. FINIMUNDY, T.C.; et al. Aqueous extracts of Lentinula edodes and Pleurotus sajor-caju exhibit high antioxidant capability and promising in vitro antitumor activity. Nutrition Research. 2013;33(1):76-84. NERSESYAN, A.; et al. Effect of staining procedures on the results of micronucleus assays with exfoliated oral mucosa cells. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 2006; 15:1835-1840. DOLAN, M.; et al. The role of the Giemsa stain in cytogenetics. Biotech Histochem 2011; 86:94-97. YUKAWA, H.; et al. Direct cytotoxicity of Lentinula edodes mycelia extract on human hepatocellular carcinoma cell line. Biol Pharm Bull. 2012;35(7):1014-1021. Introdução Resultados e Discussões Conclusões Os resultados indicam que os dois cogumelos apresentam um efeito citotóxico na célula tumoral testada, embora se necessite de estudos complementares com outras técnicas para comprovar o tipo de morte celular ocorrida. O extrato de P. sajor-caju, na maior concentração (1%) testada, gerou perda da aderência celular, condensação nuclear e fragmentos apoptóticos (Fig. 1C). L. edodes também mostrou morte celular com o aumento da concentração do extrato, como pode ser observado na Fig.1 E. A B C D E Fig. 1: Análise morfológica de células Hep-2 com coloração de Giemsa: A- controle; B,C- Pleurotus sajor-caju (0,1%, 1%); D,E- Lentinula edodes (0,08%, 0,5%). As setas indicam morte celular.

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Efeitos biológicos de extratos de Pleurotus sajor-caju e

Lentinula edodes em cultivo de células tumorais

Mikaela L. Melo1; Tiane C. Finimundy1; Aldo P. Dillon2; João A. P. Henriques1; Mariana Roesch-Ely1

1Laboratório de Genômica, Proteômica e Reparo de DNA, 2Laboratório de Enzimas e Biomassas, IB – UCS.

Sigla do Projeto: Cogumelos_Tumores

As propriedades medicinais dos cogumelos do filo

basidiomicetos que incluem os gêneros Pleurotus sp. e

Lentinula sp., têm despertado grande interesse da

comunidade científica por possuírem ação antitumoral in

vivo e in vitro. Os mecanismos de ação ainda são

incertos, entretanto a visualização direta de morte celular

através do tratamento com extratos aquosos de P. sajor-

caju e L. edodes em cultura de células de carcinoma de

laringe (HEp-2) mostram citotoxicidade frente a esta

linhagem.

ObjetivosEste trabalho teve como objetivo investigar os

efeitos biológicos dos cogumelos Pleurotus sajor-caju

e Lentinula edodes frente a linhagens tumorais e

avaliar as características morfológicas sugestivas de

morte celular pela coloração de Giemsa.

Plaqueamento 24h

O meio foi retirado,

adicionado PBS, logo após as

células foram tripsinizadas,

seguido de novo meio e

contagem em câmara de

Neubauer.

Tratamento 24h

Depois de retirado o meio, foi

aplicado as concentrações dos

extratos já delimitadas e após

foi incubado à 37º por 24h.

Giemsa

As células foram lavadas com

PBS, fixadas com metanol,

coradas com Giemsa e por fim,

lavadas com água destilada.

Agradecimentos

Materiais e Métodos

Referências Bibliográficas

• MATTILA, P.; et al. Contents of vitamins, mineral elements, and phenolic compounds in cultivated mushrooms. Journal of Agricultural and Food

Chemistry, Washington, v. 49, n. 5, p. 2343-2348. mai. 2001.

• FINIMUNDY, T.C.; et al. Aqueous extracts of Lentinula edodes and Pleurotus sajor-caju exhibit high antioxidant capability and promising in vitro

antitumor activity. Nutrition Research. 2013;33(1):76-84.

• NERSESYAN, A.; et al. Effect of staining procedures on the results of micronucleus assays with exfoliated oral mucosa cells. Cancer Epidemiol

Biomarkers Prev 2006; 15:1835-1840.

• DOLAN, M.; et al. The role of the Giemsa stain in cytogenetics. Biotech Histochem 2011; 86:94-97.

• YUKAWA, H.; et al. Direct cytotoxicity of Lentinula edodes mycelia extract on human hepatocellular carcinoma cell line. Biol Pharm Bull.

2012;35(7):1014-1021.

Introdução Resultados e Discussões

Conclusões

Os resultados indicam que os dois cogumelos

apresentam um efeito citotóxico na célula tumoral

testada, embora se necessite de estudos

complementares com outras técnicas para

comprovar o tipo de morte celular ocorrida.

O extrato de P. sajor-caju, na maior concentração

(1%) testada, gerou perda da aderência celular,

condensação nuclear e fragmentos apoptóticos

(Fig. 1C). L. edodes também mostrou morte

celular com o aumento da concentração do

extrato, como pode ser observado na Fig.1 E.

A

B C

D E

Fig. 1: Análise morfológica de células Hep-2 com coloração de Giemsa:

A- controle; B,C- Pleurotus sajor-caju (0,1%, 1%); D,E- Lentinula edodes

(0,08%, 0,5%). As setas indicam morte celular.