Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da...

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UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO FACULDADE DE MEDICINA VETERINÁRIA E ZOOTECNIA DEPARTAMENTO DE NUTRIÇÃO E PRODUÇÃO ANIMAL MAITÊ VIDAL MENDONÇA Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados Pirassununga 2018

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UNIVERSIDADE DE SAtildeO PAULO

FACULDADE DE MEDICINA VETERINAacuteRIA E ZOOTECNIA

DEPARTAMENTO DE NUTRICcedilAtildeO E PRODUCcedilAtildeO ANIMAL

MAITEcirc VIDAL MENDONCcedilA

Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados

Pirassununga

2018

Autorizo a reproduccedilatildeo parcial ou total desta obra para fins acadecircmicos desde que citada a fonte

DADOS INTERNACIONAIS DE CATALOGACcedilAtildeO NA PUBLICACcedilAtildeO

(Biblioteca Virginie Buff DrsquoAacutepice da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo)

Ficha catalograacutefica elaborada pela bibliotecaacuteria Maria Aparecida Laet CRB 5673-8 da FMVZUSP

T 3671 Mendonccedila Maitecirc Vidal FMVZ Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitotildees

desmamados Maitecirc Vidal Mendonccedila ndash 2018 69 f il

Dissertaccedilatildeo (Mestrado) ndash Universidade de Satildeo Paulo Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal Pirassununga 2018

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal

Aacuterea de concentraccedilatildeo Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal

Orientadora Profa Dra Simone Maria Massami Kitamura Martins

1 Incidecircncia de diarreia 2 Oacutexido de zinco 3 Reduccedilatildeo de niacuteveis 4 Suiacutenos 5 Sulfato de cobre I Tiacutetulo

FOLHA DE AVALIACcedilAtildeO

Autor (a) MENDONCcedilA Maitecirc Vidal

Tiacutetulo Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitotildees

desmamados

Data ________ _________ __________

Banca Examinadora

Prof(a) Dr(a)____________________________________________________________

Instituiccedilatildeo _______________________________________________________________

Julgamento ______________________________________________________________

Prof(a) Dr(a)____________________________________________________________

Instituiccedilatildeo _______________________________________________________________

Julgamento ______________________________________________________________

Prof(a) Dr(a)____________________________________________________________

Instituiccedilatildeo _______________________________________________________________

Julgamento ______________________________________________________________

Dissertaccedilatildeo apresentada ao Programa de Poacutes-

Graduaccedilatildeo em Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal da

Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia

da Universidade de Satildeo Paulo para a obtenccedilatildeo do

tiacutetulo de Mestre em Ciecircncias

DEDICATOacuteRIA

Agrave minha matildee Maria Eunice Barbosa Vidal por ser meu maior orgulho e exemplo

tanto profissional quanto de mulher e de caraacuteter Obrigada por tudo

AGRADECIMENTOS

Agrave professora Simone que me ensinou tudo sobre suinocultura aspectos relacionados agrave

Medicina Veterinaacuteria e tambeacutem relacionados agrave vida Muito obrigada pela dedicaccedilatildeo

paciecircncia ensinamentos companheirismo e cuidado com todos os detalhes da minha vida

acadecircmica Sou e sempre serei muito honrada por ter sido orientada por vocecirc

Ao professor Andreacute Furugen pela oportunidade e confianccedila desde o iniacutecio quando o

procurei para ser aluna de Praacutetica Profissionalizante Muito obrigada pelos ensinamentos

conselhos bom humor e exemplo de esforccedilo e profissionalismo

Ao meu irmatildeo Giovani por natildeo ser apenas um irmatildeo mas sim meu melhor amigo

sempre presente com paciecircncia conselhos e bom humor Vocecirc e nossa matildee satildeo meus

tesouros amo muito vocecircs

Ao Paulo de Tarso por estar sempre presente em nossas vidas e por ser quem vocecirc eacute

uma pessoa iluminada

Ao Ricardo pela compreensatildeo da minha ausecircncia em vaacuterios momentos apoio

confianccedila companheirismo e amor

Aos poacutes-graduandos do Nuacutecleo de Pesquisa em Suiacutenos pela ajuda essencial na

execuccedilatildeo desse projeto pela amizade e bons momentos de conviacutevio Ana Paula Bruno

Cristian Denis Diego Flaacutevia Gisele Mariana e Marina

Aos meus amigos de infacircncia que sempre me acompanham Adriana Beatriz Caacutessio e

Jeanne Obrigada por fazerem parte da minha vida mesmo distantes fisicamente sempre

presentes com boas vibraccedilotildees e nas lembranccedilas

Agrave Universidade de Satildeo Paulo (USP) Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia

(FMVZ) e ao Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pela

oportunidade uacutenica de muito aprendizado

Agrave Trouw Nutrition pelo auxiacutelio financeiro agrave pesquisa

Agrave concessatildeo da bolsa de mestrado pelo CNPq (Processo 1372032016-0) e pela

CAPES

RESUMO

MENDONCcedilA M V Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados [Effects of the association of different copper and zinc sources in the

diet of weaned piglets] 2018 69 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) ndash Faculdade de

Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Pirassununga 2018

Inicialmente o presente estudo objetivou avaliar os efeitos de diferentes fontes de cobre e

zinco na dieta de leitotildees desmamados Poreacutem houve a necessidade de utilizar as mesmas

fontes e alterar apenas os niacuteveis de inclusatildeo desses minerais o que justifica o tiacutetulo (que natildeo

pocircde ser substituiacutedo posteriormente) Os leitotildees receacutem-desmamados apresentam reduzida

digestibilidade de nutrientes pela falta de maturidade do sistema digestoacuterio frente agrave dieta

soacutelida levando agrave reduccedilatildeo na absorccedilatildeo dos mesmos e consequentemente diarreia e queda no

desempenho Uma das alternativas utilizadas apoacutes o desmame principalmente com a

proibiccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem sido os microminerais

principalmente o zinco (Zn) e o cobre (Cu) Dentre as fontes o oacutexido de zinco (ZnO) e o

sulfato de cobre (CuSO4) satildeo as comumente utilizadas em niacuteveis farmacoloacutegicos 3000 mgkg

e 250 mgkg respectivamente devido ao baixo custo e por melhorar o desempenho a

consistecircncia fecal e a manutenccedilatildeo da integridade intestinal Eacute possiacutevel que leitotildees

suplementados com a associaccedilatildeo de CuSO4 e niacuteveis reduzidos de ZnO na dieta apresentem

desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees

suplementados com maiores niacuteveis e que natildeo ocorra interferecircncia na absorccedilatildeo hepaacutetica de Cu

e na concentraccedilatildeo de Zn na tiacutebia Assim o presente estudo avaliou a associaccedilatildeo entre o

CuSO4 e o ZnO em niacuteveis reduzidos sobre o desempenho a morfometria intestinal a

frequecircncia de dias com diarreia e a concentraccedilatildeo desses minerais no fiacutegado e na tiacutebia de

leitotildees na fase de creche Utilizaram-se 80 leitotildees desmamados aos 21 dias de idade

distribuiacutedos em 2 tratamentos de acordo com as fases Preacute-inicial (21 aos 35 dias) T1 3000

mgkg ZnO + CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 (35 aos 49 dias) T1 2500

mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4 e na Inicial 2 (49 aos 63 dias) T1 e T2 100 mgkg ZnO +

CuSO4 sendo a inclusatildeo de 180 mgkg CuSO4 em todas as fases O delineamento

experimental foi em blocos casualizados sendo a sala e o peso considerados como bloco A

frequecircncia de dias com diarreia foi transformada pela funccedilatildeo arco-seno e as caracteriacutesticas

foram submetidas agrave anaacutelise de variacircncia empregando-se o software SAS (v 93) o niacutevel de

significacircncia considerado foi de 5 Os leitotildees que receberam menor niacutevel de ZnO

apresentaram maior frequecircncia de diarreia dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) contudo o

desempenho a morfometria intestinal e a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado foram semelhantes

entre os tratamentos Infere-se que esse resultado foi obtido pela atuaccedilatildeo do Zn Cu e aos

cuidados paliativos como o fornecimento de soro via oral e antibioticoterapia terapecircutica nos

animais com fezes liacutequidas Conclui-se que os leitotildees que receberam reduzida inclusatildeo ZnO

niacuteveis inferiores a 3000 mgkg associado a 180 mgkg de CuSO4 apresentaram maior

frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias sem prejuiacutezos no desempenho e na

morfometria intestinal sendo possiacutevel a reduccedilatildeo de custos e na poluiccedilatildeo ambiental

Palavras-chave Incidecircncia de diarreia Oacutexido de zinco Reduccedilatildeo de niacuteveis Suiacutenos Sulfato

de cobre

ABSTRACT

MENDONCcedilA M V Effects of the association of different copper and zinc sources in the

diet of weaned piglets [Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados] 2018 69 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) ndash Faculdade de

Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Pirassununga 2018

Initially the present study aimed to evaluate the effects of different sources of copper and zinc

in the diet of weaned piglets However it was necessary to use the same sources and only

change the inclusion levels of these minerals which justifies the title (which couldnrsquot be

replaced later) Newly weaned piglets show reduced nutrients digestibility due to the lack of

maturity of the digestive system to the solid diet leading to a reduction in nutrient absorption

and consequently diarrhea and performance reduction One of the alternatives used after

weaning especially with the reduction of the use of antibiotics as growth promoters is the use

of microminerals mainly zinc (Zn) and copper (Cu) Among the sources zinc oxide (ZnO)

and copper sulfate (CuSO4) are commonly used at pharmacological levels 3000 mgkg and

250 mgkg respectively due to low cost and to improve performance fecal consistency and

maintenance of intestinal integrity It is possible that piglets supplemented with the

association of CuSO4 and ZnO at reduced levels in the diet show performance diarrhea

frequency and intestinal morphology similar to piglets supplemented with higher levels and

that there is no interference on Cu hepatic absorption and Zn concentration in tibia Thus the

present study evaluated the association between CuSO4 and ZnO at reduced levels on

performance intestinal morphology frequency of days with diarrhea and concentration on the

liver and tibia in piglets during the nursery phase A total of 80 piglets were weaned at 21

days of age divided into 2 treatments according to the following phases Pre-starter (21 to 35

days) T1 3000 mgkg ZnO + CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Starter 1 (35 to 49

days) T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4 and in the Starter 2 (49 to 63 days) T1 and

T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 with inclusion of 180 mgkg of CuSO4 in all phases The

experimental design was in randomized blocks with room and weight considered as blocks

The diarrhea frequency was transformed by the sine function and the characteristics were

submitted to analysis of variance using SAS software (v 93) The level of significance was

5 Piglets receiving lower levels of ZnO had greater diarrhea frequency from 35 to 49 days

of age (P lt 005) however performance intestinal morphology and Cu concentration in the

liver were similar between treatments Infers that this result was obtained by Zn Cu and

palliative care such as oral serum supply and therapeutic antibiotic therapy in animals with

liquid feces It is conclude that the piglets that received reduced ZnO inclusion levels below

3000 mgkg associated with 180 mgkg of CuSO4 showed higher frequency of days with

diarrhea from 35 to 49 days with no impairment in performance and intestinal morphology

enabling possible the reduction of costs and environmental pollution

Keywords Copper sulfate Diarrhea incidence Reduction of levels Swine Zinc oxide

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos

(FMVZ-USP) 33

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal 36

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees 36

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal 37

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta (verde) do

jejuno 39

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta 40

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado 41

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia 41

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade 45

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental 34

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias 44

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

46

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas 47

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias

de idade 48

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 16

2 REVISAtildeO DE LITERATURA 19

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 19

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 20

221 Cobre 20

222 Zinco 23

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 26

3 HIPOacuteTESES 29

4 OBJETIVOS 31

5 MATERIAL E MEacuteTODOS 33

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS 33

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR 34

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES 35

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 36

55 MORFOMETRIA INTESTINAL 37

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 39

561 Dieta 39

562 Fiacutegado e Tiacutebia 40

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA 42

6 RESULTADOS 44

61 DESEMPENHO 44

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 45

63 MORFOMETRIA INTESTINAL 46

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO 47

641 Dietas 47

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia 47

7 DISCUSSAtildeO 50

71 DESEMPENHO 50

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 52

73 MORFOMETRIA INTESTINAL 53

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA 56

8 CONCLUSOtildeES 59

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 61

REFEREcircNCIAS 63

INTRODUCcedilAtildeO

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 2: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Autorizo a reproduccedilatildeo parcial ou total desta obra para fins acadecircmicos desde que citada a fonte

DADOS INTERNACIONAIS DE CATALOGACcedilAtildeO NA PUBLICACcedilAtildeO

(Biblioteca Virginie Buff DrsquoAacutepice da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo)

Ficha catalograacutefica elaborada pela bibliotecaacuteria Maria Aparecida Laet CRB 5673-8 da FMVZUSP

T 3671 Mendonccedila Maitecirc Vidal FMVZ Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitotildees

desmamados Maitecirc Vidal Mendonccedila ndash 2018 69 f il

Dissertaccedilatildeo (Mestrado) ndash Universidade de Satildeo Paulo Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal Pirassununga 2018

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal

Aacuterea de concentraccedilatildeo Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal

Orientadora Profa Dra Simone Maria Massami Kitamura Martins

1 Incidecircncia de diarreia 2 Oacutexido de zinco 3 Reduccedilatildeo de niacuteveis 4 Suiacutenos 5 Sulfato de cobre I Tiacutetulo

FOLHA DE AVALIACcedilAtildeO

Autor (a) MENDONCcedilA Maitecirc Vidal

Tiacutetulo Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitotildees

desmamados

Data ________ _________ __________

Banca Examinadora

Prof(a) Dr(a)____________________________________________________________

Instituiccedilatildeo _______________________________________________________________

Julgamento ______________________________________________________________

Prof(a) Dr(a)____________________________________________________________

Instituiccedilatildeo _______________________________________________________________

Julgamento ______________________________________________________________

Prof(a) Dr(a)____________________________________________________________

Instituiccedilatildeo _______________________________________________________________

Julgamento ______________________________________________________________

Dissertaccedilatildeo apresentada ao Programa de Poacutes-

Graduaccedilatildeo em Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal da

Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia

da Universidade de Satildeo Paulo para a obtenccedilatildeo do

tiacutetulo de Mestre em Ciecircncias

DEDICATOacuteRIA

Agrave minha matildee Maria Eunice Barbosa Vidal por ser meu maior orgulho e exemplo

tanto profissional quanto de mulher e de caraacuteter Obrigada por tudo

AGRADECIMENTOS

Agrave professora Simone que me ensinou tudo sobre suinocultura aspectos relacionados agrave

Medicina Veterinaacuteria e tambeacutem relacionados agrave vida Muito obrigada pela dedicaccedilatildeo

paciecircncia ensinamentos companheirismo e cuidado com todos os detalhes da minha vida

acadecircmica Sou e sempre serei muito honrada por ter sido orientada por vocecirc

Ao professor Andreacute Furugen pela oportunidade e confianccedila desde o iniacutecio quando o

procurei para ser aluna de Praacutetica Profissionalizante Muito obrigada pelos ensinamentos

conselhos bom humor e exemplo de esforccedilo e profissionalismo

Ao meu irmatildeo Giovani por natildeo ser apenas um irmatildeo mas sim meu melhor amigo

sempre presente com paciecircncia conselhos e bom humor Vocecirc e nossa matildee satildeo meus

tesouros amo muito vocecircs

Ao Paulo de Tarso por estar sempre presente em nossas vidas e por ser quem vocecirc eacute

uma pessoa iluminada

Ao Ricardo pela compreensatildeo da minha ausecircncia em vaacuterios momentos apoio

confianccedila companheirismo e amor

Aos poacutes-graduandos do Nuacutecleo de Pesquisa em Suiacutenos pela ajuda essencial na

execuccedilatildeo desse projeto pela amizade e bons momentos de conviacutevio Ana Paula Bruno

Cristian Denis Diego Flaacutevia Gisele Mariana e Marina

Aos meus amigos de infacircncia que sempre me acompanham Adriana Beatriz Caacutessio e

Jeanne Obrigada por fazerem parte da minha vida mesmo distantes fisicamente sempre

presentes com boas vibraccedilotildees e nas lembranccedilas

Agrave Universidade de Satildeo Paulo (USP) Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia

(FMVZ) e ao Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pela

oportunidade uacutenica de muito aprendizado

Agrave Trouw Nutrition pelo auxiacutelio financeiro agrave pesquisa

Agrave concessatildeo da bolsa de mestrado pelo CNPq (Processo 1372032016-0) e pela

CAPES

RESUMO

MENDONCcedilA M V Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados [Effects of the association of different copper and zinc sources in the

diet of weaned piglets] 2018 69 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) ndash Faculdade de

Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Pirassununga 2018

Inicialmente o presente estudo objetivou avaliar os efeitos de diferentes fontes de cobre e

zinco na dieta de leitotildees desmamados Poreacutem houve a necessidade de utilizar as mesmas

fontes e alterar apenas os niacuteveis de inclusatildeo desses minerais o que justifica o tiacutetulo (que natildeo

pocircde ser substituiacutedo posteriormente) Os leitotildees receacutem-desmamados apresentam reduzida

digestibilidade de nutrientes pela falta de maturidade do sistema digestoacuterio frente agrave dieta

soacutelida levando agrave reduccedilatildeo na absorccedilatildeo dos mesmos e consequentemente diarreia e queda no

desempenho Uma das alternativas utilizadas apoacutes o desmame principalmente com a

proibiccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem sido os microminerais

principalmente o zinco (Zn) e o cobre (Cu) Dentre as fontes o oacutexido de zinco (ZnO) e o

sulfato de cobre (CuSO4) satildeo as comumente utilizadas em niacuteveis farmacoloacutegicos 3000 mgkg

e 250 mgkg respectivamente devido ao baixo custo e por melhorar o desempenho a

consistecircncia fecal e a manutenccedilatildeo da integridade intestinal Eacute possiacutevel que leitotildees

suplementados com a associaccedilatildeo de CuSO4 e niacuteveis reduzidos de ZnO na dieta apresentem

desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees

suplementados com maiores niacuteveis e que natildeo ocorra interferecircncia na absorccedilatildeo hepaacutetica de Cu

e na concentraccedilatildeo de Zn na tiacutebia Assim o presente estudo avaliou a associaccedilatildeo entre o

CuSO4 e o ZnO em niacuteveis reduzidos sobre o desempenho a morfometria intestinal a

frequecircncia de dias com diarreia e a concentraccedilatildeo desses minerais no fiacutegado e na tiacutebia de

leitotildees na fase de creche Utilizaram-se 80 leitotildees desmamados aos 21 dias de idade

distribuiacutedos em 2 tratamentos de acordo com as fases Preacute-inicial (21 aos 35 dias) T1 3000

mgkg ZnO + CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 (35 aos 49 dias) T1 2500

mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4 e na Inicial 2 (49 aos 63 dias) T1 e T2 100 mgkg ZnO +

CuSO4 sendo a inclusatildeo de 180 mgkg CuSO4 em todas as fases O delineamento

experimental foi em blocos casualizados sendo a sala e o peso considerados como bloco A

frequecircncia de dias com diarreia foi transformada pela funccedilatildeo arco-seno e as caracteriacutesticas

foram submetidas agrave anaacutelise de variacircncia empregando-se o software SAS (v 93) o niacutevel de

significacircncia considerado foi de 5 Os leitotildees que receberam menor niacutevel de ZnO

apresentaram maior frequecircncia de diarreia dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) contudo o

desempenho a morfometria intestinal e a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado foram semelhantes

entre os tratamentos Infere-se que esse resultado foi obtido pela atuaccedilatildeo do Zn Cu e aos

cuidados paliativos como o fornecimento de soro via oral e antibioticoterapia terapecircutica nos

animais com fezes liacutequidas Conclui-se que os leitotildees que receberam reduzida inclusatildeo ZnO

niacuteveis inferiores a 3000 mgkg associado a 180 mgkg de CuSO4 apresentaram maior

frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias sem prejuiacutezos no desempenho e na

morfometria intestinal sendo possiacutevel a reduccedilatildeo de custos e na poluiccedilatildeo ambiental

Palavras-chave Incidecircncia de diarreia Oacutexido de zinco Reduccedilatildeo de niacuteveis Suiacutenos Sulfato

de cobre

ABSTRACT

MENDONCcedilA M V Effects of the association of different copper and zinc sources in the

diet of weaned piglets [Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados] 2018 69 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) ndash Faculdade de

Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Pirassununga 2018

Initially the present study aimed to evaluate the effects of different sources of copper and zinc

in the diet of weaned piglets However it was necessary to use the same sources and only

change the inclusion levels of these minerals which justifies the title (which couldnrsquot be

replaced later) Newly weaned piglets show reduced nutrients digestibility due to the lack of

maturity of the digestive system to the solid diet leading to a reduction in nutrient absorption

and consequently diarrhea and performance reduction One of the alternatives used after

weaning especially with the reduction of the use of antibiotics as growth promoters is the use

of microminerals mainly zinc (Zn) and copper (Cu) Among the sources zinc oxide (ZnO)

and copper sulfate (CuSO4) are commonly used at pharmacological levels 3000 mgkg and

250 mgkg respectively due to low cost and to improve performance fecal consistency and

maintenance of intestinal integrity It is possible that piglets supplemented with the

association of CuSO4 and ZnO at reduced levels in the diet show performance diarrhea

frequency and intestinal morphology similar to piglets supplemented with higher levels and

that there is no interference on Cu hepatic absorption and Zn concentration in tibia Thus the

present study evaluated the association between CuSO4 and ZnO at reduced levels on

performance intestinal morphology frequency of days with diarrhea and concentration on the

liver and tibia in piglets during the nursery phase A total of 80 piglets were weaned at 21

days of age divided into 2 treatments according to the following phases Pre-starter (21 to 35

days) T1 3000 mgkg ZnO + CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Starter 1 (35 to 49

days) T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4 and in the Starter 2 (49 to 63 days) T1 and

T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 with inclusion of 180 mgkg of CuSO4 in all phases The

experimental design was in randomized blocks with room and weight considered as blocks

The diarrhea frequency was transformed by the sine function and the characteristics were

submitted to analysis of variance using SAS software (v 93) The level of significance was

5 Piglets receiving lower levels of ZnO had greater diarrhea frequency from 35 to 49 days

of age (P lt 005) however performance intestinal morphology and Cu concentration in the

liver were similar between treatments Infers that this result was obtained by Zn Cu and

palliative care such as oral serum supply and therapeutic antibiotic therapy in animals with

liquid feces It is conclude that the piglets that received reduced ZnO inclusion levels below

3000 mgkg associated with 180 mgkg of CuSO4 showed higher frequency of days with

diarrhea from 35 to 49 days with no impairment in performance and intestinal morphology

enabling possible the reduction of costs and environmental pollution

Keywords Copper sulfate Diarrhea incidence Reduction of levels Swine Zinc oxide

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos

(FMVZ-USP) 33

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal 36

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees 36

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal 37

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta (verde) do

jejuno 39

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta 40

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado 41

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia 41

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade 45

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental 34

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias 44

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

46

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas 47

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias

de idade 48

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 16

2 REVISAtildeO DE LITERATURA 19

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 19

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 20

221 Cobre 20

222 Zinco 23

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 26

3 HIPOacuteTESES 29

4 OBJETIVOS 31

5 MATERIAL E MEacuteTODOS 33

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS 33

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR 34

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES 35

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 36

55 MORFOMETRIA INTESTINAL 37

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 39

561 Dieta 39

562 Fiacutegado e Tiacutebia 40

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA 42

6 RESULTADOS 44

61 DESEMPENHO 44

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 45

63 MORFOMETRIA INTESTINAL 46

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO 47

641 Dietas 47

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia 47

7 DISCUSSAtildeO 50

71 DESEMPENHO 50

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 52

73 MORFOMETRIA INTESTINAL 53

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA 56

8 CONCLUSOtildeES 59

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 61

REFEREcircNCIAS 63

INTRODUCcedilAtildeO

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

REFEREcircNCIAS

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Page 3: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

FOLHA DE AVALIACcedilAtildeO

Autor (a) MENDONCcedilA Maitecirc Vidal

Tiacutetulo Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitotildees

desmamados

Data ________ _________ __________

Banca Examinadora

Prof(a) Dr(a)____________________________________________________________

Instituiccedilatildeo _______________________________________________________________

Julgamento ______________________________________________________________

Prof(a) Dr(a)____________________________________________________________

Instituiccedilatildeo _______________________________________________________________

Julgamento ______________________________________________________________

Prof(a) Dr(a)____________________________________________________________

Instituiccedilatildeo _______________________________________________________________

Julgamento ______________________________________________________________

Dissertaccedilatildeo apresentada ao Programa de Poacutes-

Graduaccedilatildeo em Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal da

Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia

da Universidade de Satildeo Paulo para a obtenccedilatildeo do

tiacutetulo de Mestre em Ciecircncias

DEDICATOacuteRIA

Agrave minha matildee Maria Eunice Barbosa Vidal por ser meu maior orgulho e exemplo

tanto profissional quanto de mulher e de caraacuteter Obrigada por tudo

AGRADECIMENTOS

Agrave professora Simone que me ensinou tudo sobre suinocultura aspectos relacionados agrave

Medicina Veterinaacuteria e tambeacutem relacionados agrave vida Muito obrigada pela dedicaccedilatildeo

paciecircncia ensinamentos companheirismo e cuidado com todos os detalhes da minha vida

acadecircmica Sou e sempre serei muito honrada por ter sido orientada por vocecirc

Ao professor Andreacute Furugen pela oportunidade e confianccedila desde o iniacutecio quando o

procurei para ser aluna de Praacutetica Profissionalizante Muito obrigada pelos ensinamentos

conselhos bom humor e exemplo de esforccedilo e profissionalismo

Ao meu irmatildeo Giovani por natildeo ser apenas um irmatildeo mas sim meu melhor amigo

sempre presente com paciecircncia conselhos e bom humor Vocecirc e nossa matildee satildeo meus

tesouros amo muito vocecircs

Ao Paulo de Tarso por estar sempre presente em nossas vidas e por ser quem vocecirc eacute

uma pessoa iluminada

Ao Ricardo pela compreensatildeo da minha ausecircncia em vaacuterios momentos apoio

confianccedila companheirismo e amor

Aos poacutes-graduandos do Nuacutecleo de Pesquisa em Suiacutenos pela ajuda essencial na

execuccedilatildeo desse projeto pela amizade e bons momentos de conviacutevio Ana Paula Bruno

Cristian Denis Diego Flaacutevia Gisele Mariana e Marina

Aos meus amigos de infacircncia que sempre me acompanham Adriana Beatriz Caacutessio e

Jeanne Obrigada por fazerem parte da minha vida mesmo distantes fisicamente sempre

presentes com boas vibraccedilotildees e nas lembranccedilas

Agrave Universidade de Satildeo Paulo (USP) Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia

(FMVZ) e ao Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pela

oportunidade uacutenica de muito aprendizado

Agrave Trouw Nutrition pelo auxiacutelio financeiro agrave pesquisa

Agrave concessatildeo da bolsa de mestrado pelo CNPq (Processo 1372032016-0) e pela

CAPES

RESUMO

MENDONCcedilA M V Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados [Effects of the association of different copper and zinc sources in the

diet of weaned piglets] 2018 69 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) ndash Faculdade de

Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Pirassununga 2018

Inicialmente o presente estudo objetivou avaliar os efeitos de diferentes fontes de cobre e

zinco na dieta de leitotildees desmamados Poreacutem houve a necessidade de utilizar as mesmas

fontes e alterar apenas os niacuteveis de inclusatildeo desses minerais o que justifica o tiacutetulo (que natildeo

pocircde ser substituiacutedo posteriormente) Os leitotildees receacutem-desmamados apresentam reduzida

digestibilidade de nutrientes pela falta de maturidade do sistema digestoacuterio frente agrave dieta

soacutelida levando agrave reduccedilatildeo na absorccedilatildeo dos mesmos e consequentemente diarreia e queda no

desempenho Uma das alternativas utilizadas apoacutes o desmame principalmente com a

proibiccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem sido os microminerais

principalmente o zinco (Zn) e o cobre (Cu) Dentre as fontes o oacutexido de zinco (ZnO) e o

sulfato de cobre (CuSO4) satildeo as comumente utilizadas em niacuteveis farmacoloacutegicos 3000 mgkg

e 250 mgkg respectivamente devido ao baixo custo e por melhorar o desempenho a

consistecircncia fecal e a manutenccedilatildeo da integridade intestinal Eacute possiacutevel que leitotildees

suplementados com a associaccedilatildeo de CuSO4 e niacuteveis reduzidos de ZnO na dieta apresentem

desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees

suplementados com maiores niacuteveis e que natildeo ocorra interferecircncia na absorccedilatildeo hepaacutetica de Cu

e na concentraccedilatildeo de Zn na tiacutebia Assim o presente estudo avaliou a associaccedilatildeo entre o

CuSO4 e o ZnO em niacuteveis reduzidos sobre o desempenho a morfometria intestinal a

frequecircncia de dias com diarreia e a concentraccedilatildeo desses minerais no fiacutegado e na tiacutebia de

leitotildees na fase de creche Utilizaram-se 80 leitotildees desmamados aos 21 dias de idade

distribuiacutedos em 2 tratamentos de acordo com as fases Preacute-inicial (21 aos 35 dias) T1 3000

mgkg ZnO + CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 (35 aos 49 dias) T1 2500

mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4 e na Inicial 2 (49 aos 63 dias) T1 e T2 100 mgkg ZnO +

CuSO4 sendo a inclusatildeo de 180 mgkg CuSO4 em todas as fases O delineamento

experimental foi em blocos casualizados sendo a sala e o peso considerados como bloco A

frequecircncia de dias com diarreia foi transformada pela funccedilatildeo arco-seno e as caracteriacutesticas

foram submetidas agrave anaacutelise de variacircncia empregando-se o software SAS (v 93) o niacutevel de

significacircncia considerado foi de 5 Os leitotildees que receberam menor niacutevel de ZnO

apresentaram maior frequecircncia de diarreia dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) contudo o

desempenho a morfometria intestinal e a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado foram semelhantes

entre os tratamentos Infere-se que esse resultado foi obtido pela atuaccedilatildeo do Zn Cu e aos

cuidados paliativos como o fornecimento de soro via oral e antibioticoterapia terapecircutica nos

animais com fezes liacutequidas Conclui-se que os leitotildees que receberam reduzida inclusatildeo ZnO

niacuteveis inferiores a 3000 mgkg associado a 180 mgkg de CuSO4 apresentaram maior

frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias sem prejuiacutezos no desempenho e na

morfometria intestinal sendo possiacutevel a reduccedilatildeo de custos e na poluiccedilatildeo ambiental

Palavras-chave Incidecircncia de diarreia Oacutexido de zinco Reduccedilatildeo de niacuteveis Suiacutenos Sulfato

de cobre

ABSTRACT

MENDONCcedilA M V Effects of the association of different copper and zinc sources in the

diet of weaned piglets [Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados] 2018 69 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) ndash Faculdade de

Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Pirassununga 2018

Initially the present study aimed to evaluate the effects of different sources of copper and zinc

in the diet of weaned piglets However it was necessary to use the same sources and only

change the inclusion levels of these minerals which justifies the title (which couldnrsquot be

replaced later) Newly weaned piglets show reduced nutrients digestibility due to the lack of

maturity of the digestive system to the solid diet leading to a reduction in nutrient absorption

and consequently diarrhea and performance reduction One of the alternatives used after

weaning especially with the reduction of the use of antibiotics as growth promoters is the use

of microminerals mainly zinc (Zn) and copper (Cu) Among the sources zinc oxide (ZnO)

and copper sulfate (CuSO4) are commonly used at pharmacological levels 3000 mgkg and

250 mgkg respectively due to low cost and to improve performance fecal consistency and

maintenance of intestinal integrity It is possible that piglets supplemented with the

association of CuSO4 and ZnO at reduced levels in the diet show performance diarrhea

frequency and intestinal morphology similar to piglets supplemented with higher levels and

that there is no interference on Cu hepatic absorption and Zn concentration in tibia Thus the

present study evaluated the association between CuSO4 and ZnO at reduced levels on

performance intestinal morphology frequency of days with diarrhea and concentration on the

liver and tibia in piglets during the nursery phase A total of 80 piglets were weaned at 21

days of age divided into 2 treatments according to the following phases Pre-starter (21 to 35

days) T1 3000 mgkg ZnO + CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Starter 1 (35 to 49

days) T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4 and in the Starter 2 (49 to 63 days) T1 and

T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 with inclusion of 180 mgkg of CuSO4 in all phases The

experimental design was in randomized blocks with room and weight considered as blocks

The diarrhea frequency was transformed by the sine function and the characteristics were

submitted to analysis of variance using SAS software (v 93) The level of significance was

5 Piglets receiving lower levels of ZnO had greater diarrhea frequency from 35 to 49 days

of age (P lt 005) however performance intestinal morphology and Cu concentration in the

liver were similar between treatments Infers that this result was obtained by Zn Cu and

palliative care such as oral serum supply and therapeutic antibiotic therapy in animals with

liquid feces It is conclude that the piglets that received reduced ZnO inclusion levels below

3000 mgkg associated with 180 mgkg of CuSO4 showed higher frequency of days with

diarrhea from 35 to 49 days with no impairment in performance and intestinal morphology

enabling possible the reduction of costs and environmental pollution

Keywords Copper sulfate Diarrhea incidence Reduction of levels Swine Zinc oxide

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos

(FMVZ-USP) 33

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal 36

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees 36

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal 37

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta (verde) do

jejuno 39

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta 40

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado 41

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia 41

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade 45

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental 34

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias 44

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

46

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas 47

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias

de idade 48

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 16

2 REVISAtildeO DE LITERATURA 19

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 19

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 20

221 Cobre 20

222 Zinco 23

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 26

3 HIPOacuteTESES 29

4 OBJETIVOS 31

5 MATERIAL E MEacuteTODOS 33

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS 33

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR 34

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES 35

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 36

55 MORFOMETRIA INTESTINAL 37

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 39

561 Dieta 39

562 Fiacutegado e Tiacutebia 40

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA 42

6 RESULTADOS 44

61 DESEMPENHO 44

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 45

63 MORFOMETRIA INTESTINAL 46

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO 47

641 Dietas 47

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia 47

7 DISCUSSAtildeO 50

71 DESEMPENHO 50

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 52

73 MORFOMETRIA INTESTINAL 53

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA 56

8 CONCLUSOtildeES 59

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 61

REFEREcircNCIAS 63

INTRODUCcedilAtildeO

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 4: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

DEDICATOacuteRIA

Agrave minha matildee Maria Eunice Barbosa Vidal por ser meu maior orgulho e exemplo

tanto profissional quanto de mulher e de caraacuteter Obrigada por tudo

AGRADECIMENTOS

Agrave professora Simone que me ensinou tudo sobre suinocultura aspectos relacionados agrave

Medicina Veterinaacuteria e tambeacutem relacionados agrave vida Muito obrigada pela dedicaccedilatildeo

paciecircncia ensinamentos companheirismo e cuidado com todos os detalhes da minha vida

acadecircmica Sou e sempre serei muito honrada por ter sido orientada por vocecirc

Ao professor Andreacute Furugen pela oportunidade e confianccedila desde o iniacutecio quando o

procurei para ser aluna de Praacutetica Profissionalizante Muito obrigada pelos ensinamentos

conselhos bom humor e exemplo de esforccedilo e profissionalismo

Ao meu irmatildeo Giovani por natildeo ser apenas um irmatildeo mas sim meu melhor amigo

sempre presente com paciecircncia conselhos e bom humor Vocecirc e nossa matildee satildeo meus

tesouros amo muito vocecircs

Ao Paulo de Tarso por estar sempre presente em nossas vidas e por ser quem vocecirc eacute

uma pessoa iluminada

Ao Ricardo pela compreensatildeo da minha ausecircncia em vaacuterios momentos apoio

confianccedila companheirismo e amor

Aos poacutes-graduandos do Nuacutecleo de Pesquisa em Suiacutenos pela ajuda essencial na

execuccedilatildeo desse projeto pela amizade e bons momentos de conviacutevio Ana Paula Bruno

Cristian Denis Diego Flaacutevia Gisele Mariana e Marina

Aos meus amigos de infacircncia que sempre me acompanham Adriana Beatriz Caacutessio e

Jeanne Obrigada por fazerem parte da minha vida mesmo distantes fisicamente sempre

presentes com boas vibraccedilotildees e nas lembranccedilas

Agrave Universidade de Satildeo Paulo (USP) Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia

(FMVZ) e ao Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pela

oportunidade uacutenica de muito aprendizado

Agrave Trouw Nutrition pelo auxiacutelio financeiro agrave pesquisa

Agrave concessatildeo da bolsa de mestrado pelo CNPq (Processo 1372032016-0) e pela

CAPES

RESUMO

MENDONCcedilA M V Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados [Effects of the association of different copper and zinc sources in the

diet of weaned piglets] 2018 69 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) ndash Faculdade de

Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Pirassununga 2018

Inicialmente o presente estudo objetivou avaliar os efeitos de diferentes fontes de cobre e

zinco na dieta de leitotildees desmamados Poreacutem houve a necessidade de utilizar as mesmas

fontes e alterar apenas os niacuteveis de inclusatildeo desses minerais o que justifica o tiacutetulo (que natildeo

pocircde ser substituiacutedo posteriormente) Os leitotildees receacutem-desmamados apresentam reduzida

digestibilidade de nutrientes pela falta de maturidade do sistema digestoacuterio frente agrave dieta

soacutelida levando agrave reduccedilatildeo na absorccedilatildeo dos mesmos e consequentemente diarreia e queda no

desempenho Uma das alternativas utilizadas apoacutes o desmame principalmente com a

proibiccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem sido os microminerais

principalmente o zinco (Zn) e o cobre (Cu) Dentre as fontes o oacutexido de zinco (ZnO) e o

sulfato de cobre (CuSO4) satildeo as comumente utilizadas em niacuteveis farmacoloacutegicos 3000 mgkg

e 250 mgkg respectivamente devido ao baixo custo e por melhorar o desempenho a

consistecircncia fecal e a manutenccedilatildeo da integridade intestinal Eacute possiacutevel que leitotildees

suplementados com a associaccedilatildeo de CuSO4 e niacuteveis reduzidos de ZnO na dieta apresentem

desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees

suplementados com maiores niacuteveis e que natildeo ocorra interferecircncia na absorccedilatildeo hepaacutetica de Cu

e na concentraccedilatildeo de Zn na tiacutebia Assim o presente estudo avaliou a associaccedilatildeo entre o

CuSO4 e o ZnO em niacuteveis reduzidos sobre o desempenho a morfometria intestinal a

frequecircncia de dias com diarreia e a concentraccedilatildeo desses minerais no fiacutegado e na tiacutebia de

leitotildees na fase de creche Utilizaram-se 80 leitotildees desmamados aos 21 dias de idade

distribuiacutedos em 2 tratamentos de acordo com as fases Preacute-inicial (21 aos 35 dias) T1 3000

mgkg ZnO + CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 (35 aos 49 dias) T1 2500

mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4 e na Inicial 2 (49 aos 63 dias) T1 e T2 100 mgkg ZnO +

CuSO4 sendo a inclusatildeo de 180 mgkg CuSO4 em todas as fases O delineamento

experimental foi em blocos casualizados sendo a sala e o peso considerados como bloco A

frequecircncia de dias com diarreia foi transformada pela funccedilatildeo arco-seno e as caracteriacutesticas

foram submetidas agrave anaacutelise de variacircncia empregando-se o software SAS (v 93) o niacutevel de

significacircncia considerado foi de 5 Os leitotildees que receberam menor niacutevel de ZnO

apresentaram maior frequecircncia de diarreia dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) contudo o

desempenho a morfometria intestinal e a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado foram semelhantes

entre os tratamentos Infere-se que esse resultado foi obtido pela atuaccedilatildeo do Zn Cu e aos

cuidados paliativos como o fornecimento de soro via oral e antibioticoterapia terapecircutica nos

animais com fezes liacutequidas Conclui-se que os leitotildees que receberam reduzida inclusatildeo ZnO

niacuteveis inferiores a 3000 mgkg associado a 180 mgkg de CuSO4 apresentaram maior

frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias sem prejuiacutezos no desempenho e na

morfometria intestinal sendo possiacutevel a reduccedilatildeo de custos e na poluiccedilatildeo ambiental

Palavras-chave Incidecircncia de diarreia Oacutexido de zinco Reduccedilatildeo de niacuteveis Suiacutenos Sulfato

de cobre

ABSTRACT

MENDONCcedilA M V Effects of the association of different copper and zinc sources in the

diet of weaned piglets [Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados] 2018 69 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) ndash Faculdade de

Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Pirassununga 2018

Initially the present study aimed to evaluate the effects of different sources of copper and zinc

in the diet of weaned piglets However it was necessary to use the same sources and only

change the inclusion levels of these minerals which justifies the title (which couldnrsquot be

replaced later) Newly weaned piglets show reduced nutrients digestibility due to the lack of

maturity of the digestive system to the solid diet leading to a reduction in nutrient absorption

and consequently diarrhea and performance reduction One of the alternatives used after

weaning especially with the reduction of the use of antibiotics as growth promoters is the use

of microminerals mainly zinc (Zn) and copper (Cu) Among the sources zinc oxide (ZnO)

and copper sulfate (CuSO4) are commonly used at pharmacological levels 3000 mgkg and

250 mgkg respectively due to low cost and to improve performance fecal consistency and

maintenance of intestinal integrity It is possible that piglets supplemented with the

association of CuSO4 and ZnO at reduced levels in the diet show performance diarrhea

frequency and intestinal morphology similar to piglets supplemented with higher levels and

that there is no interference on Cu hepatic absorption and Zn concentration in tibia Thus the

present study evaluated the association between CuSO4 and ZnO at reduced levels on

performance intestinal morphology frequency of days with diarrhea and concentration on the

liver and tibia in piglets during the nursery phase A total of 80 piglets were weaned at 21

days of age divided into 2 treatments according to the following phases Pre-starter (21 to 35

days) T1 3000 mgkg ZnO + CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Starter 1 (35 to 49

days) T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4 and in the Starter 2 (49 to 63 days) T1 and

T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 with inclusion of 180 mgkg of CuSO4 in all phases The

experimental design was in randomized blocks with room and weight considered as blocks

The diarrhea frequency was transformed by the sine function and the characteristics were

submitted to analysis of variance using SAS software (v 93) The level of significance was

5 Piglets receiving lower levels of ZnO had greater diarrhea frequency from 35 to 49 days

of age (P lt 005) however performance intestinal morphology and Cu concentration in the

liver were similar between treatments Infers that this result was obtained by Zn Cu and

palliative care such as oral serum supply and therapeutic antibiotic therapy in animals with

liquid feces It is conclude that the piglets that received reduced ZnO inclusion levels below

3000 mgkg associated with 180 mgkg of CuSO4 showed higher frequency of days with

diarrhea from 35 to 49 days with no impairment in performance and intestinal morphology

enabling possible the reduction of costs and environmental pollution

Keywords Copper sulfate Diarrhea incidence Reduction of levels Swine Zinc oxide

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos

(FMVZ-USP) 33

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal 36

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees 36

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal 37

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta (verde) do

jejuno 39

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta 40

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado 41

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia 41

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade 45

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental 34

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias 44

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

46

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas 47

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias

de idade 48

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 16

2 REVISAtildeO DE LITERATURA 19

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 19

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 20

221 Cobre 20

222 Zinco 23

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 26

3 HIPOacuteTESES 29

4 OBJETIVOS 31

5 MATERIAL E MEacuteTODOS 33

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS 33

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR 34

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES 35

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 36

55 MORFOMETRIA INTESTINAL 37

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 39

561 Dieta 39

562 Fiacutegado e Tiacutebia 40

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA 42

6 RESULTADOS 44

61 DESEMPENHO 44

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 45

63 MORFOMETRIA INTESTINAL 46

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO 47

641 Dietas 47

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia 47

7 DISCUSSAtildeO 50

71 DESEMPENHO 50

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 52

73 MORFOMETRIA INTESTINAL 53

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA 56

8 CONCLUSOtildeES 59

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 61

REFEREcircNCIAS 63

INTRODUCcedilAtildeO

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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and Feed Sci v 18 p 465-477 2009

ZHAO J et al Growth performance and intestinal morphology responses in early weaned

pigs to supplementation of antibiotic-free diets with an organic copper complex and spray-

dried plasma protein in sanitary and nonsanitary environments J Anim Sci v 85 p 1302-

1310 2007

ZHAO J ALLEE G GERLEMANN G MA L GRACIA M I PARKER D

VAZQUEZ-ANON M HARRELL R J Effects of a Chelated Copper as Growth Promoter

on Performance and Carcass Traits in Pigs Asian Australas J Anim Sci v 27 n 7 p

965-973 2014

ZHENG P et al The differences between copper sulfate and tribasic copper chloride on

growth performance redox status deposition in tissues of pigs and excretion in feces Asian-

Australas J Anim Sci v 31 n 6 p 873-880 2018

ZHOU W et al Stimulation of growth by intravenous injection of copper in weanling pigs

J Anim Sci v 72 p 2395-2403 1994

ZHU Y YUN W ZHU W Principal components of analysis of Ca P vitamin D3 Mn and

Zn levels in diets for broilers Chin J of Anim Sci v 33 p 10-15 1997

ZHU D et al Effect of high dietary copper on the expression of hypothalamic appetite

regulators in weanling pigs J AnimFeed Sci v20 p 60ndash70 2011

Page 5: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

AGRADECIMENTOS

Agrave professora Simone que me ensinou tudo sobre suinocultura aspectos relacionados agrave

Medicina Veterinaacuteria e tambeacutem relacionados agrave vida Muito obrigada pela dedicaccedilatildeo

paciecircncia ensinamentos companheirismo e cuidado com todos os detalhes da minha vida

acadecircmica Sou e sempre serei muito honrada por ter sido orientada por vocecirc

Ao professor Andreacute Furugen pela oportunidade e confianccedila desde o iniacutecio quando o

procurei para ser aluna de Praacutetica Profissionalizante Muito obrigada pelos ensinamentos

conselhos bom humor e exemplo de esforccedilo e profissionalismo

Ao meu irmatildeo Giovani por natildeo ser apenas um irmatildeo mas sim meu melhor amigo

sempre presente com paciecircncia conselhos e bom humor Vocecirc e nossa matildee satildeo meus

tesouros amo muito vocecircs

Ao Paulo de Tarso por estar sempre presente em nossas vidas e por ser quem vocecirc eacute

uma pessoa iluminada

Ao Ricardo pela compreensatildeo da minha ausecircncia em vaacuterios momentos apoio

confianccedila companheirismo e amor

Aos poacutes-graduandos do Nuacutecleo de Pesquisa em Suiacutenos pela ajuda essencial na

execuccedilatildeo desse projeto pela amizade e bons momentos de conviacutevio Ana Paula Bruno

Cristian Denis Diego Flaacutevia Gisele Mariana e Marina

Aos meus amigos de infacircncia que sempre me acompanham Adriana Beatriz Caacutessio e

Jeanne Obrigada por fazerem parte da minha vida mesmo distantes fisicamente sempre

presentes com boas vibraccedilotildees e nas lembranccedilas

Agrave Universidade de Satildeo Paulo (USP) Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia

(FMVZ) e ao Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pela

oportunidade uacutenica de muito aprendizado

Agrave Trouw Nutrition pelo auxiacutelio financeiro agrave pesquisa

Agrave concessatildeo da bolsa de mestrado pelo CNPq (Processo 1372032016-0) e pela

CAPES

RESUMO

MENDONCcedilA M V Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados [Effects of the association of different copper and zinc sources in the

diet of weaned piglets] 2018 69 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) ndash Faculdade de

Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Pirassununga 2018

Inicialmente o presente estudo objetivou avaliar os efeitos de diferentes fontes de cobre e

zinco na dieta de leitotildees desmamados Poreacutem houve a necessidade de utilizar as mesmas

fontes e alterar apenas os niacuteveis de inclusatildeo desses minerais o que justifica o tiacutetulo (que natildeo

pocircde ser substituiacutedo posteriormente) Os leitotildees receacutem-desmamados apresentam reduzida

digestibilidade de nutrientes pela falta de maturidade do sistema digestoacuterio frente agrave dieta

soacutelida levando agrave reduccedilatildeo na absorccedilatildeo dos mesmos e consequentemente diarreia e queda no

desempenho Uma das alternativas utilizadas apoacutes o desmame principalmente com a

proibiccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem sido os microminerais

principalmente o zinco (Zn) e o cobre (Cu) Dentre as fontes o oacutexido de zinco (ZnO) e o

sulfato de cobre (CuSO4) satildeo as comumente utilizadas em niacuteveis farmacoloacutegicos 3000 mgkg

e 250 mgkg respectivamente devido ao baixo custo e por melhorar o desempenho a

consistecircncia fecal e a manutenccedilatildeo da integridade intestinal Eacute possiacutevel que leitotildees

suplementados com a associaccedilatildeo de CuSO4 e niacuteveis reduzidos de ZnO na dieta apresentem

desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees

suplementados com maiores niacuteveis e que natildeo ocorra interferecircncia na absorccedilatildeo hepaacutetica de Cu

e na concentraccedilatildeo de Zn na tiacutebia Assim o presente estudo avaliou a associaccedilatildeo entre o

CuSO4 e o ZnO em niacuteveis reduzidos sobre o desempenho a morfometria intestinal a

frequecircncia de dias com diarreia e a concentraccedilatildeo desses minerais no fiacutegado e na tiacutebia de

leitotildees na fase de creche Utilizaram-se 80 leitotildees desmamados aos 21 dias de idade

distribuiacutedos em 2 tratamentos de acordo com as fases Preacute-inicial (21 aos 35 dias) T1 3000

mgkg ZnO + CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 (35 aos 49 dias) T1 2500

mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4 e na Inicial 2 (49 aos 63 dias) T1 e T2 100 mgkg ZnO +

CuSO4 sendo a inclusatildeo de 180 mgkg CuSO4 em todas as fases O delineamento

experimental foi em blocos casualizados sendo a sala e o peso considerados como bloco A

frequecircncia de dias com diarreia foi transformada pela funccedilatildeo arco-seno e as caracteriacutesticas

foram submetidas agrave anaacutelise de variacircncia empregando-se o software SAS (v 93) o niacutevel de

significacircncia considerado foi de 5 Os leitotildees que receberam menor niacutevel de ZnO

apresentaram maior frequecircncia de diarreia dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) contudo o

desempenho a morfometria intestinal e a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado foram semelhantes

entre os tratamentos Infere-se que esse resultado foi obtido pela atuaccedilatildeo do Zn Cu e aos

cuidados paliativos como o fornecimento de soro via oral e antibioticoterapia terapecircutica nos

animais com fezes liacutequidas Conclui-se que os leitotildees que receberam reduzida inclusatildeo ZnO

niacuteveis inferiores a 3000 mgkg associado a 180 mgkg de CuSO4 apresentaram maior

frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias sem prejuiacutezos no desempenho e na

morfometria intestinal sendo possiacutevel a reduccedilatildeo de custos e na poluiccedilatildeo ambiental

Palavras-chave Incidecircncia de diarreia Oacutexido de zinco Reduccedilatildeo de niacuteveis Suiacutenos Sulfato

de cobre

ABSTRACT

MENDONCcedilA M V Effects of the association of different copper and zinc sources in the

diet of weaned piglets [Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados] 2018 69 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) ndash Faculdade de

Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Pirassununga 2018

Initially the present study aimed to evaluate the effects of different sources of copper and zinc

in the diet of weaned piglets However it was necessary to use the same sources and only

change the inclusion levels of these minerals which justifies the title (which couldnrsquot be

replaced later) Newly weaned piglets show reduced nutrients digestibility due to the lack of

maturity of the digestive system to the solid diet leading to a reduction in nutrient absorption

and consequently diarrhea and performance reduction One of the alternatives used after

weaning especially with the reduction of the use of antibiotics as growth promoters is the use

of microminerals mainly zinc (Zn) and copper (Cu) Among the sources zinc oxide (ZnO)

and copper sulfate (CuSO4) are commonly used at pharmacological levels 3000 mgkg and

250 mgkg respectively due to low cost and to improve performance fecal consistency and

maintenance of intestinal integrity It is possible that piglets supplemented with the

association of CuSO4 and ZnO at reduced levels in the diet show performance diarrhea

frequency and intestinal morphology similar to piglets supplemented with higher levels and

that there is no interference on Cu hepatic absorption and Zn concentration in tibia Thus the

present study evaluated the association between CuSO4 and ZnO at reduced levels on

performance intestinal morphology frequency of days with diarrhea and concentration on the

liver and tibia in piglets during the nursery phase A total of 80 piglets were weaned at 21

days of age divided into 2 treatments according to the following phases Pre-starter (21 to 35

days) T1 3000 mgkg ZnO + CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Starter 1 (35 to 49

days) T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4 and in the Starter 2 (49 to 63 days) T1 and

T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 with inclusion of 180 mgkg of CuSO4 in all phases The

experimental design was in randomized blocks with room and weight considered as blocks

The diarrhea frequency was transformed by the sine function and the characteristics were

submitted to analysis of variance using SAS software (v 93) The level of significance was

5 Piglets receiving lower levels of ZnO had greater diarrhea frequency from 35 to 49 days

of age (P lt 005) however performance intestinal morphology and Cu concentration in the

liver were similar between treatments Infers that this result was obtained by Zn Cu and

palliative care such as oral serum supply and therapeutic antibiotic therapy in animals with

liquid feces It is conclude that the piglets that received reduced ZnO inclusion levels below

3000 mgkg associated with 180 mgkg of CuSO4 showed higher frequency of days with

diarrhea from 35 to 49 days with no impairment in performance and intestinal morphology

enabling possible the reduction of costs and environmental pollution

Keywords Copper sulfate Diarrhea incidence Reduction of levels Swine Zinc oxide

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos

(FMVZ-USP) 33

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal 36

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees 36

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal 37

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta (verde) do

jejuno 39

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta 40

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado 41

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia 41

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade 45

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental 34

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias 44

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

46

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas 47

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias

de idade 48

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 16

2 REVISAtildeO DE LITERATURA 19

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 19

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 20

221 Cobre 20

222 Zinco 23

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 26

3 HIPOacuteTESES 29

4 OBJETIVOS 31

5 MATERIAL E MEacuteTODOS 33

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS 33

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR 34

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES 35

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 36

55 MORFOMETRIA INTESTINAL 37

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 39

561 Dieta 39

562 Fiacutegado e Tiacutebia 40

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA 42

6 RESULTADOS 44

61 DESEMPENHO 44

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 45

63 MORFOMETRIA INTESTINAL 46

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO 47

641 Dietas 47

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia 47

7 DISCUSSAtildeO 50

71 DESEMPENHO 50

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 52

73 MORFOMETRIA INTESTINAL 53

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA 56

8 CONCLUSOtildeES 59

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 61

REFEREcircNCIAS 63

INTRODUCcedilAtildeO

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 6: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

RESUMO

MENDONCcedilA M V Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados [Effects of the association of different copper and zinc sources in the

diet of weaned piglets] 2018 69 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) ndash Faculdade de

Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Pirassununga 2018

Inicialmente o presente estudo objetivou avaliar os efeitos de diferentes fontes de cobre e

zinco na dieta de leitotildees desmamados Poreacutem houve a necessidade de utilizar as mesmas

fontes e alterar apenas os niacuteveis de inclusatildeo desses minerais o que justifica o tiacutetulo (que natildeo

pocircde ser substituiacutedo posteriormente) Os leitotildees receacutem-desmamados apresentam reduzida

digestibilidade de nutrientes pela falta de maturidade do sistema digestoacuterio frente agrave dieta

soacutelida levando agrave reduccedilatildeo na absorccedilatildeo dos mesmos e consequentemente diarreia e queda no

desempenho Uma das alternativas utilizadas apoacutes o desmame principalmente com a

proibiccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem sido os microminerais

principalmente o zinco (Zn) e o cobre (Cu) Dentre as fontes o oacutexido de zinco (ZnO) e o

sulfato de cobre (CuSO4) satildeo as comumente utilizadas em niacuteveis farmacoloacutegicos 3000 mgkg

e 250 mgkg respectivamente devido ao baixo custo e por melhorar o desempenho a

consistecircncia fecal e a manutenccedilatildeo da integridade intestinal Eacute possiacutevel que leitotildees

suplementados com a associaccedilatildeo de CuSO4 e niacuteveis reduzidos de ZnO na dieta apresentem

desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees

suplementados com maiores niacuteveis e que natildeo ocorra interferecircncia na absorccedilatildeo hepaacutetica de Cu

e na concentraccedilatildeo de Zn na tiacutebia Assim o presente estudo avaliou a associaccedilatildeo entre o

CuSO4 e o ZnO em niacuteveis reduzidos sobre o desempenho a morfometria intestinal a

frequecircncia de dias com diarreia e a concentraccedilatildeo desses minerais no fiacutegado e na tiacutebia de

leitotildees na fase de creche Utilizaram-se 80 leitotildees desmamados aos 21 dias de idade

distribuiacutedos em 2 tratamentos de acordo com as fases Preacute-inicial (21 aos 35 dias) T1 3000

mgkg ZnO + CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 (35 aos 49 dias) T1 2500

mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4 e na Inicial 2 (49 aos 63 dias) T1 e T2 100 mgkg ZnO +

CuSO4 sendo a inclusatildeo de 180 mgkg CuSO4 em todas as fases O delineamento

experimental foi em blocos casualizados sendo a sala e o peso considerados como bloco A

frequecircncia de dias com diarreia foi transformada pela funccedilatildeo arco-seno e as caracteriacutesticas

foram submetidas agrave anaacutelise de variacircncia empregando-se o software SAS (v 93) o niacutevel de

significacircncia considerado foi de 5 Os leitotildees que receberam menor niacutevel de ZnO

apresentaram maior frequecircncia de diarreia dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) contudo o

desempenho a morfometria intestinal e a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado foram semelhantes

entre os tratamentos Infere-se que esse resultado foi obtido pela atuaccedilatildeo do Zn Cu e aos

cuidados paliativos como o fornecimento de soro via oral e antibioticoterapia terapecircutica nos

animais com fezes liacutequidas Conclui-se que os leitotildees que receberam reduzida inclusatildeo ZnO

niacuteveis inferiores a 3000 mgkg associado a 180 mgkg de CuSO4 apresentaram maior

frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias sem prejuiacutezos no desempenho e na

morfometria intestinal sendo possiacutevel a reduccedilatildeo de custos e na poluiccedilatildeo ambiental

Palavras-chave Incidecircncia de diarreia Oacutexido de zinco Reduccedilatildeo de niacuteveis Suiacutenos Sulfato

de cobre

ABSTRACT

MENDONCcedilA M V Effects of the association of different copper and zinc sources in the

diet of weaned piglets [Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados] 2018 69 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) ndash Faculdade de

Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Pirassununga 2018

Initially the present study aimed to evaluate the effects of different sources of copper and zinc

in the diet of weaned piglets However it was necessary to use the same sources and only

change the inclusion levels of these minerals which justifies the title (which couldnrsquot be

replaced later) Newly weaned piglets show reduced nutrients digestibility due to the lack of

maturity of the digestive system to the solid diet leading to a reduction in nutrient absorption

and consequently diarrhea and performance reduction One of the alternatives used after

weaning especially with the reduction of the use of antibiotics as growth promoters is the use

of microminerals mainly zinc (Zn) and copper (Cu) Among the sources zinc oxide (ZnO)

and copper sulfate (CuSO4) are commonly used at pharmacological levels 3000 mgkg and

250 mgkg respectively due to low cost and to improve performance fecal consistency and

maintenance of intestinal integrity It is possible that piglets supplemented with the

association of CuSO4 and ZnO at reduced levels in the diet show performance diarrhea

frequency and intestinal morphology similar to piglets supplemented with higher levels and

that there is no interference on Cu hepatic absorption and Zn concentration in tibia Thus the

present study evaluated the association between CuSO4 and ZnO at reduced levels on

performance intestinal morphology frequency of days with diarrhea and concentration on the

liver and tibia in piglets during the nursery phase A total of 80 piglets were weaned at 21

days of age divided into 2 treatments according to the following phases Pre-starter (21 to 35

days) T1 3000 mgkg ZnO + CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Starter 1 (35 to 49

days) T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4 and in the Starter 2 (49 to 63 days) T1 and

T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 with inclusion of 180 mgkg of CuSO4 in all phases The

experimental design was in randomized blocks with room and weight considered as blocks

The diarrhea frequency was transformed by the sine function and the characteristics were

submitted to analysis of variance using SAS software (v 93) The level of significance was

5 Piglets receiving lower levels of ZnO had greater diarrhea frequency from 35 to 49 days

of age (P lt 005) however performance intestinal morphology and Cu concentration in the

liver were similar between treatments Infers that this result was obtained by Zn Cu and

palliative care such as oral serum supply and therapeutic antibiotic therapy in animals with

liquid feces It is conclude that the piglets that received reduced ZnO inclusion levels below

3000 mgkg associated with 180 mgkg of CuSO4 showed higher frequency of days with

diarrhea from 35 to 49 days with no impairment in performance and intestinal morphology

enabling possible the reduction of costs and environmental pollution

Keywords Copper sulfate Diarrhea incidence Reduction of levels Swine Zinc oxide

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos

(FMVZ-USP) 33

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal 36

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees 36

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal 37

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta (verde) do

jejuno 39

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta 40

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado 41

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia 41

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade 45

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental 34

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias 44

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

46

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas 47

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias

de idade 48

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 16

2 REVISAtildeO DE LITERATURA 19

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 19

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 20

221 Cobre 20

222 Zinco 23

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 26

3 HIPOacuteTESES 29

4 OBJETIVOS 31

5 MATERIAL E MEacuteTODOS 33

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS 33

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR 34

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES 35

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 36

55 MORFOMETRIA INTESTINAL 37

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 39

561 Dieta 39

562 Fiacutegado e Tiacutebia 40

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA 42

6 RESULTADOS 44

61 DESEMPENHO 44

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 45

63 MORFOMETRIA INTESTINAL 46

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO 47

641 Dietas 47

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia 47

7 DISCUSSAtildeO 50

71 DESEMPENHO 50

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 52

73 MORFOMETRIA INTESTINAL 53

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA 56

8 CONCLUSOtildeES 59

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 61

REFEREcircNCIAS 63

INTRODUCcedilAtildeO

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 7: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

desempenho a morfometria intestinal e a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado foram semelhantes

entre os tratamentos Infere-se que esse resultado foi obtido pela atuaccedilatildeo do Zn Cu e aos

cuidados paliativos como o fornecimento de soro via oral e antibioticoterapia terapecircutica nos

animais com fezes liacutequidas Conclui-se que os leitotildees que receberam reduzida inclusatildeo ZnO

niacuteveis inferiores a 3000 mgkg associado a 180 mgkg de CuSO4 apresentaram maior

frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias sem prejuiacutezos no desempenho e na

morfometria intestinal sendo possiacutevel a reduccedilatildeo de custos e na poluiccedilatildeo ambiental

Palavras-chave Incidecircncia de diarreia Oacutexido de zinco Reduccedilatildeo de niacuteveis Suiacutenos Sulfato

de cobre

ABSTRACT

MENDONCcedilA M V Effects of the association of different copper and zinc sources in the

diet of weaned piglets [Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados] 2018 69 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) ndash Faculdade de

Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Pirassununga 2018

Initially the present study aimed to evaluate the effects of different sources of copper and zinc

in the diet of weaned piglets However it was necessary to use the same sources and only

change the inclusion levels of these minerals which justifies the title (which couldnrsquot be

replaced later) Newly weaned piglets show reduced nutrients digestibility due to the lack of

maturity of the digestive system to the solid diet leading to a reduction in nutrient absorption

and consequently diarrhea and performance reduction One of the alternatives used after

weaning especially with the reduction of the use of antibiotics as growth promoters is the use

of microminerals mainly zinc (Zn) and copper (Cu) Among the sources zinc oxide (ZnO)

and copper sulfate (CuSO4) are commonly used at pharmacological levels 3000 mgkg and

250 mgkg respectively due to low cost and to improve performance fecal consistency and

maintenance of intestinal integrity It is possible that piglets supplemented with the

association of CuSO4 and ZnO at reduced levels in the diet show performance diarrhea

frequency and intestinal morphology similar to piglets supplemented with higher levels and

that there is no interference on Cu hepatic absorption and Zn concentration in tibia Thus the

present study evaluated the association between CuSO4 and ZnO at reduced levels on

performance intestinal morphology frequency of days with diarrhea and concentration on the

liver and tibia in piglets during the nursery phase A total of 80 piglets were weaned at 21

days of age divided into 2 treatments according to the following phases Pre-starter (21 to 35

days) T1 3000 mgkg ZnO + CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Starter 1 (35 to 49

days) T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4 and in the Starter 2 (49 to 63 days) T1 and

T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 with inclusion of 180 mgkg of CuSO4 in all phases The

experimental design was in randomized blocks with room and weight considered as blocks

The diarrhea frequency was transformed by the sine function and the characteristics were

submitted to analysis of variance using SAS software (v 93) The level of significance was

5 Piglets receiving lower levels of ZnO had greater diarrhea frequency from 35 to 49 days

of age (P lt 005) however performance intestinal morphology and Cu concentration in the

liver were similar between treatments Infers that this result was obtained by Zn Cu and

palliative care such as oral serum supply and therapeutic antibiotic therapy in animals with

liquid feces It is conclude that the piglets that received reduced ZnO inclusion levels below

3000 mgkg associated with 180 mgkg of CuSO4 showed higher frequency of days with

diarrhea from 35 to 49 days with no impairment in performance and intestinal morphology

enabling possible the reduction of costs and environmental pollution

Keywords Copper sulfate Diarrhea incidence Reduction of levels Swine Zinc oxide

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos

(FMVZ-USP) 33

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal 36

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees 36

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal 37

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta (verde) do

jejuno 39

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta 40

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado 41

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia 41

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade 45

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental 34

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias 44

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

46

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas 47

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias

de idade 48

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 16

2 REVISAtildeO DE LITERATURA 19

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 19

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 20

221 Cobre 20

222 Zinco 23

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 26

3 HIPOacuteTESES 29

4 OBJETIVOS 31

5 MATERIAL E MEacuteTODOS 33

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS 33

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR 34

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES 35

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 36

55 MORFOMETRIA INTESTINAL 37

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 39

561 Dieta 39

562 Fiacutegado e Tiacutebia 40

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA 42

6 RESULTADOS 44

61 DESEMPENHO 44

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 45

63 MORFOMETRIA INTESTINAL 46

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO 47

641 Dietas 47

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia 47

7 DISCUSSAtildeO 50

71 DESEMPENHO 50

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 52

73 MORFOMETRIA INTESTINAL 53

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA 56

8 CONCLUSOtildeES 59

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 61

REFEREcircNCIAS 63

INTRODUCcedilAtildeO

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 8: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

ABSTRACT

MENDONCcedilA M V Effects of the association of different copper and zinc sources in the

diet of weaned piglets [Efeitos da associaccedilatildeo de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta

de leitotildees desmamados] 2018 69 f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) ndash Faculdade de

Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Pirassununga 2018

Initially the present study aimed to evaluate the effects of different sources of copper and zinc

in the diet of weaned piglets However it was necessary to use the same sources and only

change the inclusion levels of these minerals which justifies the title (which couldnrsquot be

replaced later) Newly weaned piglets show reduced nutrients digestibility due to the lack of

maturity of the digestive system to the solid diet leading to a reduction in nutrient absorption

and consequently diarrhea and performance reduction One of the alternatives used after

weaning especially with the reduction of the use of antibiotics as growth promoters is the use

of microminerals mainly zinc (Zn) and copper (Cu) Among the sources zinc oxide (ZnO)

and copper sulfate (CuSO4) are commonly used at pharmacological levels 3000 mgkg and

250 mgkg respectively due to low cost and to improve performance fecal consistency and

maintenance of intestinal integrity It is possible that piglets supplemented with the

association of CuSO4 and ZnO at reduced levels in the diet show performance diarrhea

frequency and intestinal morphology similar to piglets supplemented with higher levels and

that there is no interference on Cu hepatic absorption and Zn concentration in tibia Thus the

present study evaluated the association between CuSO4 and ZnO at reduced levels on

performance intestinal morphology frequency of days with diarrhea and concentration on the

liver and tibia in piglets during the nursery phase A total of 80 piglets were weaned at 21

days of age divided into 2 treatments according to the following phases Pre-starter (21 to 35

days) T1 3000 mgkg ZnO + CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Starter 1 (35 to 49

days) T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4 and in the Starter 2 (49 to 63 days) T1 and

T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 with inclusion of 180 mgkg of CuSO4 in all phases The

experimental design was in randomized blocks with room and weight considered as blocks

The diarrhea frequency was transformed by the sine function and the characteristics were

submitted to analysis of variance using SAS software (v 93) The level of significance was

5 Piglets receiving lower levels of ZnO had greater diarrhea frequency from 35 to 49 days

of age (P lt 005) however performance intestinal morphology and Cu concentration in the

liver were similar between treatments Infers that this result was obtained by Zn Cu and

palliative care such as oral serum supply and therapeutic antibiotic therapy in animals with

liquid feces It is conclude that the piglets that received reduced ZnO inclusion levels below

3000 mgkg associated with 180 mgkg of CuSO4 showed higher frequency of days with

diarrhea from 35 to 49 days with no impairment in performance and intestinal morphology

enabling possible the reduction of costs and environmental pollution

Keywords Copper sulfate Diarrhea incidence Reduction of levels Swine Zinc oxide

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos

(FMVZ-USP) 33

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal 36

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees 36

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal 37

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta (verde) do

jejuno 39

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta 40

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado 41

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia 41

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade 45

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental 34

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias 44

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

46

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas 47

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias

de idade 48

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 16

2 REVISAtildeO DE LITERATURA 19

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 19

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 20

221 Cobre 20

222 Zinco 23

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 26

3 HIPOacuteTESES 29

4 OBJETIVOS 31

5 MATERIAL E MEacuteTODOS 33

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS 33

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR 34

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES 35

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 36

55 MORFOMETRIA INTESTINAL 37

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 39

561 Dieta 39

562 Fiacutegado e Tiacutebia 40

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA 42

6 RESULTADOS 44

61 DESEMPENHO 44

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 45

63 MORFOMETRIA INTESTINAL 46

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO 47

641 Dietas 47

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia 47

7 DISCUSSAtildeO 50

71 DESEMPENHO 50

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 52

73 MORFOMETRIA INTESTINAL 53

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA 56

8 CONCLUSOtildeES 59

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 61

REFEREcircNCIAS 63

INTRODUCcedilAtildeO

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 9: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

liquid feces It is conclude that the piglets that received reduced ZnO inclusion levels below

3000 mgkg associated with 180 mgkg of CuSO4 showed higher frequency of days with

diarrhea from 35 to 49 days with no impairment in performance and intestinal morphology

enabling possible the reduction of costs and environmental pollution

Keywords Copper sulfate Diarrhea incidence Reduction of levels Swine Zinc oxide

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos

(FMVZ-USP) 33

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal 36

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees 36

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal 37

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta (verde) do

jejuno 39

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta 40

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado 41

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia 41

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade 45

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental 34

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias 44

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

46

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas 47

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias

de idade 48

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 16

2 REVISAtildeO DE LITERATURA 19

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 19

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 20

221 Cobre 20

222 Zinco 23

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 26

3 HIPOacuteTESES 29

4 OBJETIVOS 31

5 MATERIAL E MEacuteTODOS 33

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS 33

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR 34

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES 35

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 36

55 MORFOMETRIA INTESTINAL 37

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 39

561 Dieta 39

562 Fiacutegado e Tiacutebia 40

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA 42

6 RESULTADOS 44

61 DESEMPENHO 44

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 45

63 MORFOMETRIA INTESTINAL 46

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO 47

641 Dietas 47

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia 47

7 DISCUSSAtildeO 50

71 DESEMPENHO 50

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 52

73 MORFOMETRIA INTESTINAL 53

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA 56

8 CONCLUSOtildeES 59

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 61

REFEREcircNCIAS 63

INTRODUCcedilAtildeO

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 10: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos

(FMVZ-USP) 33

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal 36

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees 36

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal 37

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta (verde) do

jejuno 39

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta 40

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado 41

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia 41

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade 45

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental 34

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias 44

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

46

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas 47

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias

de idade 48

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 16

2 REVISAtildeO DE LITERATURA 19

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 19

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 20

221 Cobre 20

222 Zinco 23

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 26

3 HIPOacuteTESES 29

4 OBJETIVOS 31

5 MATERIAL E MEacuteTODOS 33

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS 33

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR 34

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES 35

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 36

55 MORFOMETRIA INTESTINAL 37

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 39

561 Dieta 39

562 Fiacutegado e Tiacutebia 40

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA 42

6 RESULTADOS 44

61 DESEMPENHO 44

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 45

63 MORFOMETRIA INTESTINAL 46

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO 47

641 Dietas 47

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia 47

7 DISCUSSAtildeO 50

71 DESEMPENHO 50

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 52

73 MORFOMETRIA INTESTINAL 53

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA 56

8 CONCLUSOtildeES 59

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 61

REFEREcircNCIAS 63

INTRODUCcedilAtildeO

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 11: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental 34

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias 44

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

46

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas 47

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias

de idade 48

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 16

2 REVISAtildeO DE LITERATURA 19

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 19

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 20

221 Cobre 20

222 Zinco 23

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 26

3 HIPOacuteTESES 29

4 OBJETIVOS 31

5 MATERIAL E MEacuteTODOS 33

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS 33

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR 34

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES 35

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 36

55 MORFOMETRIA INTESTINAL 37

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 39

561 Dieta 39

562 Fiacutegado e Tiacutebia 40

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA 42

6 RESULTADOS 44

61 DESEMPENHO 44

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 45

63 MORFOMETRIA INTESTINAL 46

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO 47

641 Dietas 47

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia 47

7 DISCUSSAtildeO 50

71 DESEMPENHO 50

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 52

73 MORFOMETRIA INTESTINAL 53

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA 56

8 CONCLUSOtildeES 59

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 61

REFEREcircNCIAS 63

INTRODUCcedilAtildeO

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 12: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 16

2 REVISAtildeO DE LITERATURA 19

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 19

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS 20

221 Cobre 20

222 Zinco 23

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 26

3 HIPOacuteTESES 29

4 OBJETIVOS 31

5 MATERIAL E MEacuteTODOS 33

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS 33

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR 34

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES 35

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 36

55 MORFOMETRIA INTESTINAL 37

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO 39

561 Dieta 39

562 Fiacutegado e Tiacutebia 40

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA 42

6 RESULTADOS 44

61 DESEMPENHO 44

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 45

63 MORFOMETRIA INTESTINAL 46

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO 47

641 Dietas 47

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia 47

7 DISCUSSAtildeO 50

71 DESEMPENHO 50

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 52

73 MORFOMETRIA INTESTINAL 53

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA 56

8 CONCLUSOtildeES 59

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 61

REFEREcircNCIAS 63

INTRODUCcedilAtildeO

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia 47

7 DISCUSSAtildeO 50

71 DESEMPENHO 50

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA 52

73 MORFOMETRIA INTESTINAL 53

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA 56

8 CONCLUSOtildeES 59

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS 61

REFEREcircNCIAS 63

INTRODUCcedilAtildeO

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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INTRODUCcedilAtildeO

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

REFEREcircNCIAS

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Page 15: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Introduccedilatildeo 16

Maitecirc Vidal Mendonccedila

1 INTRODUCcedilAtildeO

O consumo mundial de carne suiacutena aumentou intensamente nas uacuteltimas deacutecadas e sob

uma perspectiva global nota-se um potencial futuro no consumo No Brasil o consumo da

carne suiacutena tem demonstrado crescimento alinhado agrave tendecircncia mundial jaacute que houve

aumento no consumo interno anual de 1040 mil toneladas para 2986 mil toneladas entre os

anos de 1995 e 2015 Esse aumento de 113 em duas deacutecadas foi responsaacutevel por posicionar

o Brasil como o sexto maior consumidor de carne suiacutena no mundo (ABCS 2016)

Para atender essa crescente demanda eacute imprescindiacutevel que as criaccedilotildees de suiacutenos

obtenham melhoras nos iacutendices reprodutivos e produtivos o que se busca por meio do avanccedilo

do manejo melhoramento geneacutetico bem-estar animal condiccedilotildees sanitaacuterias e nutriccedilatildeo Uma

maneira de melhorar o desempenho produtivo da suinocultura eacute a reduccedilatildeo do periacuteodo de

lactaccedilatildeo o que propiciou o aumento no nuacutemero de partos por fecircmea por ano e refletiu no

aumento do nuacutemero de leitotildees desmamados por ano (LIMA MOREacuteS SANCHES 2009)

Independentemente da eacutepoca em que eacute realizado o desmame eacute estressante para os

leitotildees afetando-os tanto socialmente quanto fisiologicamente O baixo consumo de raccedilatildeo e a

mudanccedila brusca do tipo de alimento associados agraves condiccedilotildees gerais de estresse levam ao

desequiliacutebrio na microbiota do trato gastrointestinal e a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

com o aparecimento da diarreia

Uma das alternativas para contornar os baixos iacutendices zooteacutecnicos apoacutes o desmame

principalmente com a reduccedilatildeo do uso de antibioacuteticos como promotores de crescimento tem

sido o uso de microminerais (PLUSKE et al 2002) Dentre os microminerais o cobre (Cu) e

o zinco (Zn) possuem inuacutemeras funccedilotildees bioloacutegicas e quando utilizados em niacuteveis

farmacoloacutegicos entre 150 a 250 mg Cukg e 2500 a 3000 mg Znkg raccedilatildeo os mesmos

possuem accedilatildeo antimicrobiana reduzindo principalmente a incidecircncia de diarreias poacutes-

desmame ocasionada pela baixa digestibilidade de dietas associada agraves alteraccedilotildees no pH

intestinal e ao desequiliacutebrio no sistema imunoloacutegico (BERTOL BRITO 1995)

O zinco eacute utilizado em doses farmacoloacutegicas desde o iniacutecio dos anos 90 (LIMA

2017) e desde a deacutecada de 50 pesquisas jaacute demonstravam a eficiecircncia do sulfato de cobre

como promotor do crescimento em niacuteveis farmacoloacutegicos (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

De acordo com Debski (2016) a associaccedilatildeo de cobre e zinco pode resultar em efeitos

aditivos no desempenho dos leitotildees mas nem sempre esses efeitos satildeo observados nos

estudos E o uso prolongado desses minerais em niacuteveis elevados na dieta promove pressatildeo

seletiva sobre bacteacuterias resistentes a antimicrobianos

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 16: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Introduccedilatildeo 17

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Niacuteveis elevados de oacutexido de zinco podem causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de

outros nutrientes (LEESON SUMMERS 1997) assim como levar agrave poluiccedilatildeo ambiental pelo

excesso dos mesmos nas fezes (CONDEacute et al 2014) e tambeacutem podem acarretar no

desenvolvimento de resistecircncia antimicrobiana (LIMA 2017) e reduzir a expressatildeo de genes

que modificam a resposta imune dos leitotildees (SARGEANT et al 2010)

Nesse contexto cabe destacar a proposta elaborada pelo Comitecirc dos Medicamentos

para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees

desmamados na Uniatildeo Europeia nos proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017)

Assim haacute necessidade de se investigar os efeitos de menores niacuteveis de inclusatildeo de

oacutexido de zinco na dieta e os seus reflexos no desenvolvimento dos leitotildees receacutem-

desmamados

18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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18

REVISAtildeO DE LITERATURA

Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

REFEREcircNCIAS

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Revisatildeo de Literatura 19

Maitecirc Vidal Mendonccedila

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

Nesta sessatildeo encontram-se abordados em toacutepicos os temas que foram base para as

hipoacuteteses deste estudo

21 LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

Apoacutes o desmame os leitotildees sofrem mudanccedilas intestinais fisioloacutegicas microbioloacutegicas

e imunoloacutegicas caracterizando o periacuteodo poacutes-desmame com alta incidecircncia de diarreia e

queda do desempenho devido a fatores estressantes ambientais nutricionais e psicoloacutegicos

(HEO et al 2013)

Dentre os fatores estressantes tem-se a interrupccedilatildeo abrupta da interaccedilatildeo social com a

matildee e a leitegada (HEO et al 2013) mudanccedila de espaccedilo fiacutesico mistura de lotes (LALLES et

al 2004) substituiccedilatildeo do leite da porca que possui fatores intriacutensecos tais como a

imunoglobulina A o fator de crescimento epidermal as poliaminas e a glutamina o consumo

das dietas (PLUSKE HAMPSON WILLIAMS 1997) o tipo de processamento do alimento

e a forma fiacutesica da raccedilatildeo e a imaturidade imunoloacutegica (LI et al 1990)

As alteraccedilotildees do ponto de vista social ambiental e nutricional decorrentes do

desmame resultam em um periacuteodo criacutetico de baixa ingestatildeo de alimento conhecido como

anorexia poacutes-desmame que ocasionam uma queda transitoacuteria na secreccedilatildeo de enzimas

digestivas seguido pela recuperaccedilatildeo (MARION et al 2003) durante o qual a digestibilidade

e absorccedilatildeo de alimentos encontra-se diminuiacuteda Associado a esse processo o estresse

provocado pelo desmame leva ao desequiliacutebrio da microbiota intestinal podendo predispor ao

crescimento exacerbado de bacteacuterias oportunistas que podem produzir enterotoxinas ou se

instalarem nos enteroacutecitos presentes nas vilosidades intestinais prejudicando ainda mais a

digestatildeo e a absorccedilatildeo dos nutrientes levando a hipertonicidade na luz intestinal a retenccedilatildeo de

aacutegua e consequentemente agrave diarreia (LALLES et al 2004)

Segundo Nabuurs et al (1993) a altura das vilosidades atinge um patamar mais baixo

entre 3 e 4 dias apoacutes o desmame se restabelecendo entre 11 a 14 dias Os efeitos da anorexia

poacutes-desmame sobre a secreccedilatildeo de enzimas digestivas e a morfometria do epiteacutelio intestinal

satildeo multifatoriais e incluem privaccedilatildeo de substratos luminais para o crescimento das ceacutelulas

da mucosa epitelial e reduccedilatildeo da expressatildeo de fatores de crescimento para os oacutergatildeos

digestivos tais como o peptiacutedeo semelhante ao glucagon 2 o fator semelhante a insulina I

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 19: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Revisatildeo de Literatura 20

Maitecirc Vidal Mendonccedila

(IGF-I) (VENTE-SPREEUWENBERG BEYNEN 2003) e a colecistoquinina (MONTAGNE

et al 2007) Assim a digestibilidade e a absorccedilatildeo de nutrientes encontram-se diminuiacutedas

nessa primeira fase apoacutes o desmame Por conseguinte todas essas alteraccedilotildees a que leitotildees satildeo

submetidos ao desmame aliadas agrave falta de maturidade do sistema digestoacuterio destes animais

frente agrave nova dieta soacutelida causam diminuiccedilatildeo na ingestatildeo e absorccedilatildeo dos alimentos e

inevitavelmente queda no desempenho (LALLES et al 2004)

Ressalta-se ainda que as alteraccedilotildees adversas da morfologia intestinal incluam reduccedilatildeo

da altura e aumento da largura das vilosidades aumento da profundidade de cripta e reduccedilatildeo

da capacidade de absorccedilatildeo e da atividade das enzimas digestivas da borda em escova Com

isso a infecccedilatildeo bacteriana geralmente acompanha a fase do desmame dos leitotildees limitando o

crescimento (McCRACKEN et al 1999 MA et al 2015)

Com relaccedilatildeo agrave infecccedilatildeo bacteriana ocorre aumento da adesatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

agrave camada mucosa devido agrave falta de imunidade ativa e os danos na integridade intestinal

ocasionando a siacutendrome da diarreia poacutes-desmame e queda no desempenho Dentre as

bacteacuterias a Escherichia coli aleacutem de ser habitante natural do trato gastrointestinal tambeacutem eacute

usualmente associada agraves diarreias poacutes-desmame sendo a cepa E coli enteropatogecircnica a mais

frequente (ARANTES et al 2005) Esta bacteacuteria determina seacuterio impacto agrave suinocultura por

se envolver no desenvolvimento das diarreias poacutes-desmame associadas agrave maacute absorccedilatildeo de

nutrientes (SILVA et al 2015)

Portanto intervenccedilotildees dieteacuteticas como a inclusatildeo de microminerais que minimizem

os prejuiacutezos causados pela siacutendrome diarreica e queda do desempenho na fase do desmame se

tornam essenciais no sistema de produccedilatildeo de suiacutenos

22 FUNCcedilOtildeES DO COBRE E ZINCO EM LEITOtildeES RECEacuteM-DESMAMADOS

221 Cobre

Os minerais constituem parte importante do organismo animal representando de 28 a

32 do peso vivo dos suiacutenos (BERTECHINI 2004) e satildeo elementos inorgacircnicos necessaacuterios

para manutenccedilatildeo crescimento e reproduccedilatildeo dos suiacutenos (LIU et al 2018) A suplementaccedilatildeo

mineral aumentou nos uacuteltimos anos por diversos motivos dentre eles o melhoramento

geneacutetico que tornou os animais mais exigentes nutricionalmente devido ao ganho de peso

acelerado e ao maior tamanho de leitegada reduccedilatildeo no uso de farinhas de origem animal em

Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

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Revisatildeo de Literatura 21

Maitecirc Vidal Mendonccedila

decorrecircncia de problemas sanitaacuterios e as utilizaccedilotildees de raccedilotildees agrave base de ingredientes vegetais

pobre em minerais (REGINA BERTECHINI 2010)

Eacute difiacutecil determinar as exigecircncias de minerais e muitas estimativas levam em

consideraccedilatildeo o niacutevel miacutenimo exigido para suprir um sintoma de deficiecircncia e natildeo

necessariamente com o intuito de promover a produtividade ou aumentar a imunidade

(CLOSE 2003) Contudo os niacuteveis dieteacuteticos de cobre normalmente satildeo suficientes para

atender a exigecircncia nutricional dos leitotildees sendo descritos na literatura valores de 4 a 6

mgkg (NRC 1998) 5 a 6 mgkg (NRC 2012) e 680 a 1298 mgkg (ROSTAGNO et al

2017)

O cobre em niacuteveis nutricionais eacute importante por atuar na reproduccedilatildeo no crescimento

no desenvolvimento oacutesseo e de tecidos conectivos na pigmentaccedilatildeo dos pelos latilde e plumas nas

diferentes espeacutecies animais na formaccedilatildeo do sangue e na formaccedilatildeo de uma seacuterie de enzimas

cuacutepricas (UNDERWOOD SUTTLE 1999 GATTAacuteS BARBOSA 2004) Nos animais

monogaacutestricos em geral o cobre eacute pouco absorvido em torno de 15 ndash 30 do ingerido nos

animais jovens e 5 ndash 10 nos animais adultos sendo no duodeno o principal sitio de absorccedilatildeo

(MCDOWEL 1992) A absorccedilatildeo de cobre ocorre primariamente no duodeno e na porccedilatildeo

anterior do jejuno e pode ser armazenado em pequenas concentraccedilotildees nos diferentes tecidos

como os rins o coraccedilatildeo e o ceacuterebro sendo o principal oacutergatildeo armazenador o fiacutegado na forma

de metaloproteiacutena (REGINA BERTECHINI 2010) tornando o oacutergatildeo um indicador

altamente sensiacutevel para determinar a biodisponibilidade de cobre entre as vaacuterias fontes do

mineral (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

Na alimentaccedilatildeo animal o cobre pode ser encontrado na forma inorgacircnica como

carbonato de cobre oacutexido de cobre sulfato de cobre sulfato de cobre penta hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) cloreto de cobre tribaacutesico (SHELTON et al 2011) sendo

o sulfato de cobre penta hidratado o mais utilizado no Brasil por ser considerado padratildeo e

com maior disponibilidade (GATTAacuteS BARBOSA 2004)

Haacute mais de 40 anos este elemento vem sendo estudado como promotor do

crescimento principalmente em leitotildees receacutem-desmamados pois quando incluiacutedo em niacuteveis

farmacoloacutegicos de 125 a 250 mgkg estimula o crescimento (DEBSKI 2016) sendo descrito

por Edmonds e Baker (1986) que o excesso de cobre 650 mgkg resulta em prejuiacutezo no

ganho de peso e na conversatildeo alimentar O cobre pode causar toxicidade quando adicionado agrave

dieta por extensos periacuteodos e em niacuteveis maiores que 250 mgkg no qual o acuacutemulo excessivo

de cobre no fiacutegado e outros oacutergatildeos vitais ocasionam icteriacutecia e niacuteveis reduzidos de

hemoglobina (NRC 2012) A dose mais utilizada em estudos com cobre eacute a de 250 mgkg jaacute

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 21: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Revisatildeo de Literatura 22

Maitecirc Vidal Mendonccedila

que nessa dosagem o cobre parece modificar a composiccedilatildeo da populaccedilatildeo bacteriana no trato

gastrointestinal (DEBSKI 2016)

O mecanismo de accedilatildeo pelo qual os efeitos beneacuteficos da suplementaccedilatildeo do cobre em

niacuteveis farmacoloacutegicos ocorrem ainda eacute incerto (NRC 2012 MA et al 2015) Uma possiacutevel

explicaccedilatildeo seria o efeito antimicrobiano com reduccedilatildeo na carga microbiana e nos respectivos

metaboacutelitos produzidos no intestino permitindo deste modo o maior aproveitamento dos

nutrientes (JENSEN 2016) E tambeacutem atuaccedilatildeo como agente antibacteriano ao modificar

quantitativamente algumas populaccedilotildees bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al

2014) Outros autores afirmam que a accedilatildeo poderia estar relacionada ao efeito sistecircmico no

qual a injeccedilatildeo intravenosa de cobre estimula o crescimento dos leitotildees desmamados

possivelmente ao causar impacto na populaccedilatildeo de bacteacuterias no luacutemen semelhante agrave

suplementaccedilatildeo dieteacutetica (ZHOU et al 1994 ZHAO et al 2014) Estudos desenvolvidos por

Li et al (2008) demonstraram que o cobre parece estimular o apetite promovendo aumento

na concentraccedilatildeo de neuropeptiacutedeo Y (NPY) e na expressatildeo de RNA mensageiro de NPY em

niacutevel hipotalacircmico em suiacutenos suplementados com 125 e 250 mgkg em comparaccedilatildeo a 10

mgkg de sulfato de cobre na dieta e consequentemente eleva o desempenho dos animais

Em concordacircncia Zhu et al (2011) obtiveram aumento da ingestatildeo de raccedilatildeo ao

suplementarem a dieta de leitotildees desmamados por 21 dias com 250 mgkg de sulfato de cobre

devido ao aumento dos niacuteveis de expressatildeo de RNAm de NPY no hipotaacutelamo

Outro efeito da adiccedilatildeo do cobre eacute a melhora da consistecircncia fecal dos leitotildees

desmamados que pode ser mediado por um efeito na atividade enzimaacutetica e na digestibilidade

dos nutrientes (LUO DOVE 1996) Em estudo de Bikker Jongbloed e Baal (2016) leitotildees

suplementados com 160 mgkg de sulfato de cobre durante o periacuteodo de creche obtiveram

melhora do desempenho e da consistecircncia fecal A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um

efeito relevante por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de

crescimento ou de uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

De acordo com Ma et al (2015) o uso de cobre em niacuteveis elevados pode inibir

coliformes e possiacuteveis agentes patogecircnicos (HOslashJBERG et al 2005) pode contribuir na

melhoria da sauacutede intestinal ao aumentar a altura das vilosidades e reduzir a profundidade da

cripta e consequentemente a proporccedilatildeo vilosidade cripta no duodeno e no jejuno (ZHAO et

al 2007) Podendo dessa maneira especular que o cobre atua como agente antibacteriano

mas tambeacutem modifica a morfologia intestinal para melhorar a sauacutede intestinal

Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Revisatildeo de Literatura 23

Maitecirc Vidal Mendonccedila

222 Zinco

A exigecircncia nutricional de zinco para leitotildees na fase de creche segundo o NRC (1998

2012) eacute de 80 a 100 mgkg e de acordo com Rostagno et al (2017) eacute de 616 a 1174 mgkg

O zinco eacute um nutriente essencial que desempenha inuacutemeras funccedilotildees em vaacuterias atividades

enzimaacuteticas no metabolismo de lipiacutedios e glicose (LI et al 2016) O zinco tambeacutem estaacute

envolvido no metabolismo das proteiacutenas dos carboidratos dos nucleotiacutedeos e da vitamina A

sendo necessaacuterio na calcificaccedilatildeo dos ossos e no desenvolvimento do sistema imunoloacutegico

(YAGUumlE 2009) e tambeacutem na produccedilatildeo e secreccedilatildeo de hormocircnios de crescimento insulina e

hormocircnios sexuais (LI et al 2016) E ainda o zinco participa da regulaccedilatildeo do apetite que

pode envolver a expressatildeo gecircnica sendo observado em leitotildees deficientes em zinco o

aumento na expressatildeo gecircnica de colecistoquinina no intestino levando a reduccedilatildeo no consumo

(FURLAN POZZA 2014) e aumento na secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica responsaacutevel por

estimular o apetite (ZHANG GUO 2008) E tambeacutem o zinco atua sinergicamente com o

mineral manganecircs na mineralizaccedilatildeo oacutessea (PACHECO 2012 CARDONA 2014)

Existem muitos fatores que podem influenciar a absorccedilatildeo de zinco podendo ser

considerados ativadores ou inibidores deste processo Entre os ativadores da absorccedilatildeo estatildeo o

aacutecido picoliacutenico secretado pelo pacircncreas a vitamina B6 que aumenta a secreccedilatildeo de aacutecido

picoliacutenico o citrato e aminoaacutecidos como glicina histidina lisina e metionina No grupo dos

inibidores da absorccedilatildeo estatildeo os aacutecidos oxaacutelico e fiacutetico os taninos a fibra o selecircnio o ferro o

cobre e o caacutelcio em quantidades elevadas A eficiecircncia do processo de absorccedilatildeo estaacute entre 15

a 40 Portanto o zinco eacute pouco absorvido sendo excretado em grande proporccedilatildeo pelas fezes

(KIEFER 2005) Os niacuteveis de zinco nos ossos e as taxas de absorccedilatildeo pelo fiacutegado mostram-se

como criteacuterios confiaacuteveis para estimar a biodisponibilidade relativa do zinco de acordo com o

que foi adicionado na dieta (AMMERMAN BAKER LEWIS 1995)

A toxicidade do zinco depende da fonte niacutevel da dieta duraccedilatildeo da alimentaccedilatildeo e dos

niacuteveis de outros minerais na dieta O niacutevel alimentar maacuteximo toleraacutevel para suiacutenos foi

estabelecido em 1000 mgkg com exceccedilatildeo do oacutexido de zinco que pode ser incluiacutedo em niacuteveis

mais elevados durante vaacuterias semanas (NRC 2012) O zinco pode ser encontrado nas formas

de oacutexido de zinco carbonato de zinco sulfato de zinco sulfato de zinco penta-hidratado

(REGINA BERTECHINI 2010) e cloreto de zinco tetrabaacutesico (ZHANG GUO 2007)

O uso do zinco na forma inorgacircnica de oacutexido de zinco eacute comum em sistemas de

criaccedilatildeo de suiacutenos como melhorador de desempenho devido ao baixo custo e por ser eficiente

no controle da diarreia poacutes desmame (MUNIZ et al 2010)

Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

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Revisatildeo de Literatura 24

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Altas concentraccedilotildees de oacutexido de zinco reduzem a incidecircncia de diarreia melhora o

desempenho dos leitotildees e tambeacutem desenvolve melhor capacidade de resistecircncia a doenccedilas

(BORAH PAUL 2018) Segundo os autores o uso do zinco na dieta aumenta o desempenho

dos animais ao ativar os vaacuterios sistemas enzimaacuteticos essenciais para a divisatildeo e proliferaccedilatildeo

celular

De acordo com Carlson Hill e Link (1999) agrave medida que se eleva a concentraccedilatildeo de

zinco na dieta aumenta a quantidade de zinco ligado agrave metalotioneiacutena intestinal proteiacutena

envolvida na homeostase desse mineral e nas alteraccedilotildees fisioloacutegicas do trato gastrointestinal

podendo resultar em aumento da absorccedilatildeo dos nutrientes e alteraccedilatildeo da morfologia do

intestino podendo dessa forma ser um possiacutevel mecanismo de accedilatildeo responsaacutevel pelo

aumento do desempenho dos leitotildees desmamados suplementados com doses farmacoloacutegicas

de zinco

O mecanismo de accedilatildeo do zinco contra a diarreia ainda natildeo eacute bem compreendido Eacute

provaacutevel que a adiccedilatildeo do zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos afete natildeo soacute a morfologia intestinal

mas tambeacutem os mecanismos de defesa do hospedeiro (DEBSKY 2016) Tambeacutem foi

verificado efeito na diminuiccedilatildeo da diarreia associado agrave reduccedilatildeo da permeabilidade intestinal

(ZHANG GUO 2009) e inibiccedilatildeo eou reduccedilatildeo da atividade da E coli ao interagir com iacuteons

de zinco (ARANTES et al 2005)

E eacute possiacutevel que a absorccedilatildeo de zinco no intestino possa ocorrer por difusatildeo passiva e

indiretamente eleve a funccedilatildeo de barreira intestinal como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio

Aleacutem disso a metalotioneiacutena induzida pelo acuacutemulo de zinco no tecido intestinal tambeacutem

pode proteger o tecido do dano oxidativo (CHAI et al 2014) e a suplementaccedilatildeo com oacutexido de

zinco pode estabilizar a flora intestinal e manter a alta diversidade de coliformes ocasionando

competiccedilatildeo ativa para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999)

De acordo com Debski (2016) apenas altas doses farmacoloacutegicas (2000-3000 mgkg)

de oacutexido de zinco satildeo eficientes para o tratamento da diarreia demonstrado por Chai et al

(2014) ao suplementar a dieta com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e obter melhora na

consistecircncia fecal e maiores pesos corporais nos leitotildees em comparaccedilatildeo aos niacuteveis meacutedio e

baixo de zinco 1500 e 50 mgkg respectivamente

O oacutexido de zinco pode ser adicionado em substituiccedilatildeo aos antibioacuteticos utilizados como

promotores de crescimento em leitotildees desmamados Poreacutem a inclusatildeo de altas doses de oacutexido

de zinco na dieta de suiacutenos causa aumento da excreccedilatildeo de zinco nos dejetos ocasionando

preocupante ameaccedila ao meio ambiente (HEO et al 2013) Aleacutem de levar agrave poluiccedilatildeo

ambiental pelo excesso de minerais eliminados nas fezes (CONDEacute et al 2014) tambeacutem

Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Revisatildeo de Literatura 25

Maitecirc Vidal Mendonccedila

deve-se destacar que os niacuteveis elevados de minerais podem causar competiccedilatildeo entre si e

causar reduccedilatildeo da biodisponibilidade de outros nutrientes na dieta e no animal (LEESON

SUMMERS 1997)

O zinco tende a se acumular no solo e pode causar grave poluiccedilatildeo ambiental

especialmente em aacutereas de criaccedilotildees intensivas de suiacutenos jaacute que se trata de um metal pesado

A preocupaccedilatildeo ambiental se relaciona com os lenccediloacuteis freaacuteticos drenagem e escoamento para

aacuteguas superficiais e por fim acuacutemulo na camada superficial do solo em concentraccedilotildees

potencialmente toacutexicas para os organismos habitantes (DEBSKI 2016) Segundo Milani

(2016) 60 a 80 da quantidade oacutexido de zinco ingerida eacute excretada Entatildeo quanto maior a

quantidade de zinco consumida maior a excreccedilatildeo de zinco nos dejetos suiacutenos

Soma-se a isso outro fator agravante que eacute a possiblidade de aumento da resistecircncia de

alguns microrganismos quando expostos por periacuteodos prolongados a doses farmacoloacutegicas de

zinco Isso ocorre devido aos minerais proporcionarem pressatildeo seletiva sobre bacteacuterias

resistentes a antimicrobianos como eacute o caso do Staphylococcus aureus resistente agrave meticilina

(MRSA) (SLIFIERZ FRIENDSHIP WEESE 2014 DEBSKI 2016) Quanto ao MRSA

embora raramente seja um patoacutegeno clinicamente relevante em suiacutenos sua transmissatildeo para

seres humanos pode representar riscos para a sauacutede (CASEY et al 2013) por ser causador de

infecccedilotildees cutacircneas e de tecidos moles pneumonia e bacteremia (SLIFIERZ FRIENDSHIP

WEESE 2014) E ainda destaca-se a importacircncia por dar enfoque agrave preocupaccedilatildeo com genes

metalo-resistentes em bacteacuterias gram-negativas que eacute o caso da E coli demonstrando a

necessidade de mais pesquisas no futuro proacuteximo (MAVROMICHALIS 2011)

Como relatado anteriormente um dos agentes patogecircnicos mais importantes em

leitotildees desmamados eacute a E coli que se caracteriza pelas cepas multirresistentes aos

antimicrobianos Em estudo de Bednorz et al (2013) foi observado maior diversidade de

clones de E coli em animais suplementados com zinco em comparaccedilatildeo ao controle

comprovando o risco do uso de altos niacuteveis de oacutexido de zinco Lima (2017) verificou que a

exposiccedilatildeo a 2500 mgkg de oacutexido de zinco por quatro semanas aumentou a resistecircncia de

alguns microrganismos inclusive a E coli multirresistente em leitotildees (BEDNORZ et al

2013)

Os fatores acima descritos motivaram a legislaccedilatildeo europeia a atender apenas agraves

exigecircncias nutricionais dos animais limitando a adiccedilatildeo de oacutexido de zinco em apenas 150 mg

de Znkg de raccedilatildeo (MILANI 2016) E atualmente com a crescente preocupaccedilatildeo foi

elaborada a proposta pelo Comitecirc dos Medicamentos para Uso Veterinaacuterio (CVMP) de banir

o uso farmacoloacutegico do oacutexido de zinco em leitotildees desmamados na Uniatildeo Europeia nos

Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Revisatildeo de Literatura 26

Maitecirc Vidal Mendonccedila

proacuteximos anos (WILCOCK et al 2017) Nesse contexto destaca-se a necessidade de

medidas imediatas de inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores aos comumente

praticados

23 ASSOCIACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

O oacutexido de zinco permanece como uma fonte mineral importante por possuir melhor

valor econocircmico e eficiecircncia sendo vaacutelido buscar como possiacutevel alternativa a inclusatildeo de

menores niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta de leitotildees receacutem-desmamados

Eacute possiacutevel que a associaccedilatildeo de menores niacuteveis de oacutexido de zinco com o sulfato de

cobre seja uma boa alternativa jaacute que ambos atuam como promotores de crescimento devido

agraves suas atividades antimicrobianas semelhantes agraves dos antibioacuteticos na medida em que a

microbiota intestinal eacute alterada para reduzir a perda de nutrientes da fermentaccedilatildeo e suprimir

os agentes patogecircnicos intestinais (YAZDANKHAH RUDI BERNHOFT 2014)

Ressalta-se que a distribuiccedilatildeo do cobre no fiacutegado eacute susceptiacutevel as mudanccedilas na

quantidade de zinco nos suiacutenos (BREMNER 1976) jaacute que o zinco dieteacutetico estimula a

produccedilatildeo de metalotioneiacutena e essa proteiacutena por sua vez tem maior afinidade pelo cobre Uma

vez que a metalotioneiacutena estaacute conjugada ao cobre o mineral natildeo eacute liberado na corrente

sanguiacutenea e eacute eliminado nas fezes reduzindo as reservas de cobre no organismo (SILVA

2015)

Diante disso os resultados da associaccedilatildeo de zinco e cobre satildeo contraditoacuterios Smith et

al (1997) mostraram que animais suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco

apresentaram as maiores taxas de ganho de peso mas natildeo foi observado efeito aditivo com a

suplementaccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre Resultados semelhantes foram observados

por Hill et al (2000) ao suplementarem com 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

obtiveram melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na eficiecircncia alimentar E a

adiccedilatildeo de 250 mgkg de sulfato de cobre tambeacutem estimulou o crescimento entretanto a

combinaccedilatildeo dos dois minerais natildeo resultou em resposta sineacutergica no crescimento

Em contrapartida Namkung et al (2006) observaram que a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de

oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato de cobre agrave dieta melhorou o desempenho

durante as duas primeiras semanas apoacutes o desmame Tambeacutem Peacuterez et al (2011)

demonstraram que nos 4 experimentos realizados houve efeito aditivo no desempenho dos

leitotildees desmamados ao associarem cobre e zinco (3000 mgkg de oacutexido de zinco associado

tanto ao sulfato de cobre quanto ao complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg)

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

REFEREcircNCIAS

ABCS - Associaccedilatildeo Brasileira dos Criadores de Suiacutenos Mapeamento da Suinocultura

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Page 26: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Revisatildeo de Literatura 27

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Os autores discutem que os efeitos aditivos do zinco e do cobre ocorrem por meio da soma de

seus efeitos como promotores de crescimento atuaccedilatildeo de ambos no intestino ao disponibilizar

mais nutrientes para o organismo modo de accedilatildeo sistecircmico do cobre aumento da estabilidade

intestinal e reduccedilatildeo de bacteacuterias patogecircnicas

Por outro lado Hoslashjberg et al (2005) natildeo obtiveram efeito significativos ao avaliarem

os efeitos da inclusatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco e sulfato de cobre provavelmente

devido a necessidade de avaliar os efeitos dos minerais no desempenho com nuacutemero amostral

maior (8 leitotildees por tratamento) Hedemann et al (2006) ao associarem esses minerais na

dieta de leitotildees receacutem-desmamados natildeo observaram efeito no ganho de peso com niacuteveis de

oacutexido de zinco - 100 e 2500 mgkg - e 175 mgkg de sulfato de cobre provavelmente devido

ao fato de usar gaiola metaboacutelica os animais natildeo tiveram socializaccedilatildeo e tambeacutem houve

reduzida exposiccedilatildeo agrave infecccedilatildeo o que possivelmente pode ter reduzido as repostas aos niacuteveis

destes minerais

28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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28

HIPOacuteTESES

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 28: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Hipoacuteteses 29

Maitecirc Vidal Mendonccedila

3 HIPOacuteTESES

Diante do exposto e baseado nos resultados advindos da literatura foram sugeridas as

seguintes hipoacuteteses

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de oacutexido

de zinco apresentam desempenho frequecircncia de dias com diarreia e morfometria

intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com niacuteveis praticados comercialmente

dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia de leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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30

OBJETIVOS

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

REFEREcircNCIAS

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Page 30: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Objetivos 31

Maitecirc Vidal Mendonccedila

4 OBJETIVOS

Com base na literatura apresentada e nas hipoacuteteses estabelecidas o presente estudo

buscou alcanccedilar os seguintes objetivos

a) averiguar se a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores niacuteveis de oacutexido de zinco na

dieta manteacutem semelhante o desempenho de leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

b) avaliar se a frequecircncia de dias com diarreia eacute semelhante nos leitotildees que receberam sulfato

de cobre associado ao menor niacutevel de oacutexido de zinco na dieta em comparaccedilatildeo aos que

receberam niacuteveis elevados dos 21 aos 63 dias de idade

c) determinar se os leitotildees que receberam a associaccedilatildeo do sulfato de cobre com menores

niacuteveis de oacutexido de zinco na dieta apresentam integridade intestinal semelhante aos animais

que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis superiores na avaliaccedilatildeo da

morfometria intestinal

d) verificar se o fornecimento do sulfato de cobre associado com menores niacuteveis de oacutexido de

zinco na dieta reduz a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado de zinco e manganecircs na tiacutebia de

leitotildees aos 63 dias de idade

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 31: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

32

MATERIAL E MEacuteTODOS

Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Material e Meacutetodos 33

Maitecirc Vidal Mendonccedila

5 MATERIAL E MEacuteTODOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas as metodologias empregadas para a execuccedilatildeo do presente

trabalho e que por sua vez contribuiacuteram para o alcance do objetivo e posicionamento diante das

hipoacuteteses previamente apresentadas

51 LOCAL INSTALACcedilOtildeES E ANIMAIS

O estudo foi desenvolvido no Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (LPS) do

Departamento de Nutriccedilatildeo e Produccedilatildeo Animal (VNP) pertencentes agrave Faculdade de Medicina

Veterinaacuteria e Zootecnia da Universidade de Satildeo Paulo (FMVZ-USP) Campus Pirassununga

Os leitotildees foram alojados na unidade de creche constituiacuteda de 2 salas idecircnticas com 16 gaiolas

de alvenaria suspensas com piso parcialmente ripado metragem de 140 m25 leitotildees

composto de comedouro semiautomaacutetico e bebedouro tipo chupeta

O aquecimento das salas durante as primeiras semanas de alojamento foi realizado por

meio de lacircmpadas infravermelhas (Figura 1) visando garantir o conforto teacutermico dos leitotildees

Durante todo o periacuteodo experimental a temperatura maacutexima miacutenima e ambiente das salas

foram registradas com auxiacutelio de termo higrocircmetro digital (Incotermreg)

Figura 1 ndash Alojamento dos leitotildees na sala de creche do Laboratoacuterio de Pesquisa em Suiacutenos (FMVZ-

USP)

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Material e Meacutetodos 34

Maitecirc Vidal Mendonccedila

52 DISTRIBUICcedilAtildeO DOS ANIMAIS NOS TRATAMENTOS E MANEJO ALIMENTAR

Os 80 leitotildees receacutem-desmamados aos 21 dias de idade foram blocados pelo peso e

distribuiacutedos em 2 tratamentos sendo 8 repeticcedilotildees por tratamento com 5 leitotildees cada Os

tratamentos consistiram na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre em todas as fases As

dietas experimentais foram isoproteicas e isoenergeacuteticas e seguiram as recomendaccedilotildees de

Rostagno et al (2017) de acordo com as diferentes fases Preacute-inicial T1 3000 mgkg ZnO +

CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + CuSO4 Inicial 1 T1 2500 mgkg ZnO + CuSO4 T2 CuSO4

(sem inclusatildeo de ZnO) e na Inicial 2 T1 e T2 100 mgkg ZnO + CuSO4 (Tabela 1)

Durante a creche foram fornecidas as seguintes raccedilotildees Preacute-Inicial dos 21 aos 35 dias

de idade Inicial 1 dos 36 aos 49 dias de idade e Inicial 2 dos 50 aos 63 dias de idade A

formulaccedilatildeo dessas dietas foi semelhante para todos os tratamentos (Tabela 1) e fornecida ad

libitum

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Continua)

Ingredientes Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

T1 T2 T1 T2 T1 T2

Milho 37553 37616 44616 44928 63916 63916

Farelo de soja 12000 12000 200 200 320 320

Concentrado1 50000 50000 350 350 - -

Nuacutecleo2 - - - - 40 40

Oacutexido de zinco3 375 312 312 - 012 012

Sulfato de cobre pentahidratado4 072 072 072 072 072 072

Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000

Niacuteveis nutricionais calculados

Energia metabolizaacutevel (Kcalkg) 3450 3450 3380 3380 3200 3200

Energia digestiacutevel (Kcalkg) 3610 3610 3560 3560 3360 3360

Proteiacutena bruta () 203 203 21 21 20 20

Extrato eteacutereo () 330 330 32 32 30 30

Cinzas () 506 506 45 45 62 62

Caacutelcio () 105 105 078 078 082 082

Foacutesforo () 108 108 087 087 065 065

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 34: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Material e Meacutetodos 35

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 1 ndash Dietas fornecidas aos leitotildees durante o periacuteodo experimental (Conclusatildeo)

Foacutesforo disponiacutevel () 090 090 068 068 043 043

Soacutedio () 033 033 024 024 022 022

Cobre (mgkg) 180 180 180 180 180 180

Zinco (mgkg) 3000 2500 2500 - 100 100

Lisina () 16 16 15 15 115 115

Metionina () 053 053 048 048 0378 0378

Metionina + Cisteiacutena () 089 089 085 085 07 07

Treonina () 107 107 1 1 079 079

Triptofano () 028 028 028 028 027 027

Lactose () 125 125 88 88 - -

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

1

Concentrado BRSUI Flexreg (niacuteveis por quilo de produto) umidade (130000mgkg) proteiacutena bruta (190000mgkg)

extrato eteacutereo (23000mgkg) fibra bruta (16100mgkg) mateacuteria mineral (99600mgkg) caacutelcio (13340mgkg)

foacutesforo (8200mgkg) fluacuteor (82mgkg) soacutedio (6700mgkg) metionina (6000mgkg) lisina (20000mgkg) treonina

(13100mgkg) carnitina (230mgkg) nucleotiacutedeos (2124mgkg) colina (1100 mgkg) cobalto (1mgkg) ferro

(200mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (1125mgkg) vitamina A (9375mgkg) vitamina D3

(16875gkg) vitamina E (1258125mgkg) vitamina K3 (75mgkg) vitamina B1 (625mgkg) vitamina B2

(15mgkg) vitamina B6 (75 mgkg) vitamina B12 (75mgkg) niacina (875mgkg) aacutecido pantotecircnico (50mgkg)

aacutecido foacutelico (75mgkg) biotina (0875mgkg) aacutecido ciacutetrico (4416305mgkg) formiato de caacutelcio (1599mgkg)

propionato de caacutelcio (15785mgkg) aacutecido foacutermico (785509mgkg) aacutecido fosfoacuterico (428145mgkg) butirato de

soacutedio (1250mgkg) endo-14-beta xilanose (6227times10-18

mgkg) 6-fitase (4151times10-18

mgkg) halquinol (300mgkg)

2Nuacutecleo BRSUI Nucleus Initialreg (niacuteveis por quilo de produto) caacutelcio (155000mgkg) foacutesforo (36000mgkg) fluacuteor

(360mgkg) soacutedio (48000mgkg) metionina (980mgkg) lisina (15500mgkg) treonina (985mgkg) colina

(800mgkg) cobalto (10mgkg) ferro (2000mgkg) iodo (25mgkg) manganecircs (875mgkg) selecircnio (11250mgkg)

vitamina A (75000mgkg) vitamina D3 (1250mgkg) vitamina E (41875mgkg) vitamina K3 (55mgkg) vitamina

B1 (50mgkg) vitamina B2 (112500mgkg) vitamina B6 (62500mgkg) vitamina B12 (625mgkg) niacina

(750mgkg) aacutecido pantotecircnico (450mgkg) aacutecido foacutelico (62500mgkg) biotina (6250mgkg) BHT (2500mgkg)

6-fitase (4151times10 -17) endo-14- beta xilanase (4670times10 -14 mgkg) colistina (1000mgkg)

3 Oacutexido de zinco SULreg (80 de Zinco)

4 Sulfato de cobre pentahidratado Microsalreg (25 de Cobre)

53 AVALIACcedilAtildeO DO DESEMPENHO DOS LEITOtildeES

Averiguou-se o peso aos 21 35 49 e 63 dias de idade bem como o ganho de peso

meacutedio diaacuterio (GPMD) o consumo de raccedilatildeo meacutedio diaacuterio (CRMD) e a conversatildeo alimentar

(CA) nos periacuteodos compreendidos entre as trocas das dietas conforme o fluxograma

apresentado na figura 2

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

REFEREcircNCIAS

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Page 35: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Material e Meacutetodos 36

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 2 ndash Esquema experimental das avaliaccedilotildees de desempenho e escore fecal

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

54 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

O escore fecal foi observado diariamente dos 21 aos 63 dias de idade e classificado

em 1 = fezes soacutelidas - normal 2 = fezes menos consistentes que normal - pastosa e 3 = fezes

liacutequidas - diarreia severa (Figura 3) A classificaccedilatildeo levou em consideraccedilatildeo quando dois ou

mais animais da mesma baia apresentavam o maior escore Posteriormente esse escore foi

transformado em frequecircncia de dias com diarreia considerando diarreia a somatoacuteria dos

escores 2 e 3 As frequecircncias foram transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e

Kronka (1989)

Figura 3 ndash Escore fecal dos leitotildees

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

1= fezes normais 2 = fezes pastosas 3 = fezes liacutequidas (ciacuterculo vermelho)

1 2 3

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 36: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Material e Meacutetodos 37

Maitecirc Vidal Mendonccedila

55 MORFOMETRIA INTESTINAL

Aos 63 dias de idade 8 animais de cada tratamento foram insensibilizados por meio de

eletronarcose com choque eleacutetrico de alta voltagem e baixa amperagem seguido por sangria

de no miacutenimo trecircs minutos para a coleta do intestino no abatedouro escola da Universidade de

Satildeo Paulo em Pirassununga-SP Foram colhidas amostras de aproximadamente trecircs

centiacutemetros de comprimento do duodeno jejuno e iacuteleo A porccedilatildeo do duodeno foi coletada

aproximadamente a cinco centiacutemetros do piloro a porccedilatildeo do jejuno foi coletada a cerca de 20

centiacutemetros de distacircncia da prega duodenocoacutelica e o iacuteleo foi coletado a 5 centiacutemetros da

junccedilatildeo ileocecal As amostras foram seccionadas lavadas delicadamente com aacutegua corrente

na sequecircncia foram imediatamente estendidas e mergulhadas em soluccedilatildeo de formaldeiacutedo a

10 conforme a figura 4 Apoacutes 24 horas os fragmentos foram transferidos para uma soluccedilatildeo

de aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL processo que inicia a fixaccedilatildeo das amostras (FERRIN 2015)

Figura 4 ndash Amostras para avaliaccedilatildeo da morfometria intestinal

A B

C D

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 37: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Material e Meacutetodos 38

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Secccedilatildeo da porccedilatildeo intestinal B) Amostra estendida para posterior lavagem (figura C) D) Amostras

de duodeno jejuno e iacuteleo armazenadas em formaldeiacutedo a 10

Apoacutes a fixaccedilatildeo os fragmentos foram incluiacutedos em blocos de parafina sendo

mergulhados sequencialmente nas seguintes soluccedilotildees aacutelcool etiacutelico a 70ordm GL aacutelcool etiacutelico a

90ordm GL aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II xilol I xilol II parafina I e parafina II

permanecendo uma hora em cada uma destas soluccedilotildees Apoacutes a inclusatildeo os blocos foram

resfriados por 24 horas em freezer a -20ordm C e entatildeo o corte foi realizado com cinco

micrometros de espessura com auxiacutelio de microacutetomo Os cortes foram acomodados em

lacircminas para microscopia e encaminhadas a estufa onde permaneceram a aproximadamente

60ordm C por duas horas para a remoccedilatildeo do excesso de parafina

Para a coloraccedilatildeo os cortes foram desparafinados e desidratados permanecendo por 10

minutos em xilol I e em seguida mais 10 minutos em xilol II e entatildeo foram mergulhados em

aacutelcool etiacutelico 95ordm GL aacutelcool etiacutelico 70ordm GL e aacutegua permanecendo por trecircs minutos em cada

uma destas soluccedilotildees nesta ordem A coloraccedilatildeo dos cortes foi realizada na sequecircncia para

tanto estes foram mergulhados em hematoxilina por dois minutos e em seguida em eosina por

45 segundos apoacutes este processo foram lavados em aacutegua corrente por dez minutos para

remoccedilatildeo do excesso dos pigmentos

Para a montagem das lacircminas os cortes jaacute corados foram desidratados sendo

mergulhados nesta ordem por aproximadamente dez segundos em aacutelcool etiacutelico 95ordm GL

aacutelcool absoluto I aacutelcool absoluto II soluccedilatildeo aacutelcool etiacutelico absoluto e xilol na proporccedilatildeo 11

xilol diafanizador e entatildeo os mesmos foram mergulhados em xilol montaacutevel As lacircminas e

seus respectivos cortes foram retirados do xilol montaacutevel realizou-se a secagem do excesso

de xilol do verso das lacircminas e entatildeo as lamiacutenulas foram colocadas sobre os cortes (PEKAS

1986)

Os cortes foram examinados sob microscopia de luz com o auxiacutelio de um microscoacutepio

Nikon modelo Eclipse Ni-U 80ireg (Nikon Instruments Inc Melville NY) acoplado a cacircmara

Nikon DigitalSight DS RI1reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) e para documentaccedilatildeo das

imagens e mensuraccedilatildeo dos paracircmetros analisados foi utilizado o software NIS Elements AR 4

1301reg (Nikon Instruments Inc Melville NY) As anaacutelises foram realizadas sob um aumento

de 100x (Figura 5)

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 38: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Material e Meacutetodos 39

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 5 ndash Mensuraccedilatildeo da altura de vilosidade (vermelho) e profundidade de cripta

(verde) do jejuno

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Foram efetuadas dez medidas de altura de vilosidade (AV) e dez medidas de

profundidade de cripta (PC) para cada seguimento coletado o que possibilitou a obtenccedilatildeo da

relaccedilatildeo (AVPC) Para as mediccedilotildees utilizou-se somente vilosidades iacutentegras que foram

medidas em sequecircncia procurou-se medir a profundidade de cripta proacuteximas a estas

vilosidades A medida de altura de vilosidade foi tomada a partir da regiatildeo basal que coincide

com a porccedilatildeo superior das criptas percorrendo a vilosidade longitudinalmente ateacute o aacutepice As

criptas foram mensuradas da base ateacute a regiatildeo de transiccedilatildeo cripta-vilosidade

56 CONCENTRACcedilAtildeO DE COBRE E ZINCO

561 Dieta

Amostras das mateacuterias primas e dietas experimentais fornecidas aos animais durante

as fases preacute-inicial inicial 1 e inicial 2 foram analisadas para determinar a concentraccedilatildeo dos

minerais cobre manganecircs e zinco presentes na dieta por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida

(ZHENG et al 2018) e espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES) (MEacuteTODOS2013)

As amostras foram descongeladas e pesadas em plusmn 1 grama de acordo com o tratamento e fase

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

REFEREcircNCIAS

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Page 39: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Material e Meacutetodos 40

Maitecirc Vidal Mendonccedila

em tubos de ensaio Posteriormente foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3 ml de aacutecido

percloacuterico para a digestatildeo (Figura 6) E entatildeo os tubos foram aquecidos de 50deg a 210deg C e as

amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos de 25 ml (MEacuteTODOS2013)

Figura 6 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise dos minerais na dieta

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Separaccedilatildeo da amostra para anaacutelise B) Amostra de raccedilatildeo com a adiccedilatildeo de 3 ml de aacutecido percloacuterico

para soluccedilatildeo mineral via uacutemida

562 Fiacutegado e Tiacutebia

Apoacutes o abate dos animais tambeacutem foram colhidas amostras de fiacutegado e tiacutebia As

amostras de lobo hepaacutetico lateral direito e tiacutebia direita foram identificadas acondicionadas em

sacos plaacutesticos e mantidas no freezer -80degC As anaacutelises de fiacutegado avaliaram a concentraccedilatildeo

de cobre por meio de soluccedilatildeo mineral via uacutemida As amostras foram descongeladas e

seccionadas em pequenas porccedilotildees identificadas (Figura 7 A) Os fragmentos de fiacutegado foram

pesados em tubos de ensaio (plusmn 2 g) e em seguida foi feita adiccedilatildeo de 5 ml de aacutecido niacutetrico e 3

ml de aacutecido percloacuterico para a digestatildeo (ZHENG et al 2018) Posteriormente os tubos foram

aquecidos de 50deg a 210deg C (Figura 7 B) e as amostras transferidas para balotildees volumeacutetricos

de 25 ml para anaacutelise do cobre por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-OES)

(MEacuteTODOS2013)

A B

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

REFEREcircNCIAS

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Page 40: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Material e Meacutetodos 41

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Figura 7 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial de cobre no fiacutegado

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fiacutegado seccionado em pequenas porccedilotildees para posterior pesagem e digestatildeo via uacutemida B) Amostras

de fiacutegado em aquecimento de 50deg a 210deg C

Jaacute a anaacutelise da tiacutebia avaliou concentraccedilatildeo dos minerais zinco e manganecircs por meio da

soluccedilatildeo mineral via seca no qual as amostras foram descongeladas para pesagem dos

fragmentos oacutesseos As amostras foram colocadas na mufla a 550deg durante 4 horas para

secagem Logo apoacutes adicionou-se 20 ml de aacutecido cloriacutedrico (HCl 11) durante 20 minutos

conforme a figura 8 entatildeo as misturas foram despejadas em balotildees volumeacutetricos de 50 ml por

meio de funil com papel filtro Por fim as amostras foram homogeneizadas e as anaacutelises dos

minerais zinco e manganecircs foram determinadas por espectrometria de emissatildeo oacuteptica (ICP-

OES) (MEacuteTODOS2013)

Figura 8 ndash Metodologia utilizada para anaacutelise laboratorial dos minerais na tiacutebia

Fonte MENDONCcedilA M V (2017)

A) Fragmentos de tiacutebia descongelados B) Amostras de tiacutebia na mufla C) Apoacutes retirada da mufla D)

Adiccedilatildeo de 20 ml de aacutecido cloriacutedrico por 20 minutos

B A

A B C D

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

REFEREcircNCIAS

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Page 41: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Material e Meacutetodos 42

Maitecirc Vidal Mendonccedila

57 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA

Os dados obtidos foram analisados com preacutevia verificaccedilatildeo da normalidade dos

resiacuteduos e homogeneidade das variacircncias O delineamento foi em blocos casualizados sendo

a sala e o peso considerados como bloco Os dados foram submetidos agrave anaacutelise de variacircncia

(PROC MIXED) empregando-se o programa SAS (v 93) As frequecircncias foram

transformadas em arco seno de acordo com Banzatto e Kronka (1989) Os efeitos de

tratamento e de dias foram analisados pelo PDIFF e o niacutevel de significacircncia considerado foi

de 5 Todos os valores foram expressos em meacutedia plusmn desvio-padratildeo

43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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43

RESULTADOS

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 43: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Resultados 44

Maitecirc Vidal Mendonccedila

6 RESULTADOS

Nesta sessatildeo estatildeo descritas os resultados encontrados no presente trabalho

61 DESEMPENHO

O desempenho (peso GPMD CRMD e CA) dos leitotildees natildeo foi influenciado pelos

tratamentos nos dias avaliados (P gt 005) assim como tambeacutem natildeo houve efeito de

tratamento (P gt 005) em nenhuma das caracteriacutesticas analisadas Ao longo dos dias os

leitotildees independentemente do tratamento apresentaram aumento nas caracteriacutesticas de

desempenho (P lt 005 Tabela 2)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobianos durante o periacuteodo

experimental natildeo foi observado diferenccedila significativa no desempenho entre os animais dos

tratamentos 1 e 2

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Continua)

Item Tratamento

Meacutedias1

Probabilidades

T1 T2 Tratamento Dias TratamentoDias

Peso (kg)

Dia 21 569plusmn110 569plusmn109 568plusmn103d

07678 lt0001 09554 Dia 35 829plusmn143 850plusmn167 836plusmn152

c

Dia 49 1467plusmn181 1481plusmn239 1470plusmn219b

Dia 63 2309plusmn279 2334plusmn315 2319plusmn286a

GPMD (gd)

21-35 019plusmn003 020plusmn006 019plusmn005c

05475 lt0001 08104 35-49 047plusmn005 047plusmn007 047plusmn007b

49-63 057plusmn005 059plusmn006 058plusmn005a

21-63 038plusmn004 039plusmn006 039plusmn005

CRMD (gd)

21-35 026plusmn004 028plusmn008 027plusmn007c

08529 lt0001 08014 35-49 072plusmn009 070plusmn012 072plusmn011b

49-63 107plusmn007 108plusmn014 108plusmn011a

21-63 081plusmn005 080plusmn008 082plusmn007

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 44: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Resultados 45

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 2 ndash Desempenho dos leitotildees dos 21 aos 63 dias (Conclusatildeo)

CA

21-35 140plusmn014 140plusmn013 141plusmn013c

06704 lt0001 09501 35-49 153plusmn010 151plusmn015 153plusmn014b

49-63 191plusmn012 183plusmn016 187plusmn014a

21-63 056plusmn009 043plusmn019 047plusmn017

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

sup1 Meacutedias dos dias abcd

Letras minuacutesculas diferentes na mesma coluna diferem entre si (PDIFF P lt 005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

62 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Os leitotildees que natildeo receberam zinco na dieta apresentaram maior frequecircncia de diarreia

dos 35 aos 49 dias de idade (P lt 005) sendo observado no periacuteodo anterior maior frequecircncia

de fezes normais No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo sendo

detectadas diferenccedilas (Figura 9)

Ao desconsiderarmos os animais medicados com antimicrobiano durante o periacuteodo

experimental foi observada incidecircncia de diarreia de 4250 nos animais do tratamento 1 e

de 8750 nos animais do tratamento 2

Figura 9 ndash Frequecircncia de diarreia () dos leitotildees dos 21 aos 63 dias de idade

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 45: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Resultados 46

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

ab

Letras minuacutesculas diferentes no mesmo periacuteodo diferem entre si (PDIFF P lt

005)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO

+ 180 mgkg CuSO4 Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100 mgkg ZnO + 180 mgkg

CuSO4

63 MORFOMETRIA INTESTINAL

As caracteriacutesticas de morfometria intestinal (altura das vilosidades profundidade das

criptas e na relaccedilatildeo altura das vilosidades profundidade das criptas) nos segmentos duodeno

jejuno e iacuteleo natildeo foram influenciadas pelos minerais que os leitotildees receberam na dieta (P gt

005 Tabela 3)

Tabela 3 ndash Morfometria intestinal do duodeno jejuno e iacuteleo dos leitotildees aos 63 dias de idade

Item Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Duodeno (microm)

PC 48540plusmn2596 44292plusmn7993 07025

AV 35668plusmn13771 40257plusmn6375 06637

AVPC 074plusmn033 091plusmn011 04425

Jejuno (microm)

PC 34786plusmn1590 41633plusmn13986 05457

AV 33835plusmn9487 39493plusmn10593 05285

AVPC 097plusmn027 101plusmn033 07202

Iacuteleo (microm)

PC 26741plusmn3956 29967plusmn6789 04143

AV 28695plusmn7798 35144plusmn5742 02591

AVPC 110plusmn034 119plusmn019 05564

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

PC = profundidade da cripta AV = altura da vilosidade AVPC = relaccedilatildeo altura da

vilosidadeprofundidade da cripta

Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Resultados 47

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

64 DISPONIBILIDADE DE COBRE E ZINCO

Os minerais cobre e zinco fornecidos aos leitotildees foram analisados nas amostras das

dietas nas fezes na tiacutebia e no fiacutegado

641 Dietas

Os niacuteveis dos minerais cobre e zinco obtidos nas anaacutelises das amostras da dieta

fornecida aos leitotildees foram semelhantes aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados (Tabela 4)

Tabela 4 ndash Niacuteveis dos minerais presentes nas amostras das dietas

Preacute-inicial Inicial 1 Inicial 2

Niacuteveis (mgkg) T1 T2 T1 T2 T1 T2

Cobre 16114 17036 14797 1555 18068 17180

Zinco 268275 22985 2183 4736 16817 17013

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

642 Concentraccedilatildeo dos Minerais no Fiacutegado e na Tiacutebia

Aos 63 dias de idade verificou-se no fiacutegado dos leitotildees concentraccedilotildees semelhantes do

mineral cobre (P gt 005) conforme demonstrado na tabela 5

Na mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs na tiacutebia aos 63 dias de idade verificou-se

concentraccedilotildees semelhantes entre os tratamentos (P gt 005) Contudo na mensuraccedilatildeo de zinco

na tiacutebia aos 63 dias houve efeito significativo de tratamento (P = 00007 Tabela 5) indicando

maior concentraccedilatildeo de zinco no tratamento 1

Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

REFEREcircNCIAS

ABCS - Associaccedilatildeo Brasileira dos Criadores de Suiacutenos Mapeamento da Suinocultura

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Resultados 48

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Tabela 5 ndash Concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado manganecircs e zinco na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de

idade

Item (mgkg) Tratamento Probabilidade

T1 T2 Tratamento

Fiacutegado

Cobre 2936plusmn626 2816plusmn1703 09744

Tiacutebia

Manganecircs 443plusmn221 434plusmn265 09887

Zinco 10720plusmn2760 5818plusmn1630 00007

Fonte MENDONCcedilA M V (2018)

Preacute-inicial = T1 3000 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

Inicial 1 = T1 2500 mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4 T2 180 mgkg CuSO4 Inicial 2 = T1 e T2 100

mgkg ZnO + 180 mgkg CuSO4

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 48: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

49

DISCUSSAtildeO

Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Discussatildeo 50

Maitecirc Vidal Mendonccedila

7 DISCUSSAtildeO

Nesta sessatildeo encontram-se abordados os resultados obtidos no presente estudo e a discussatildeo

dos mesmos de acordo com a literatura

71 DESEMPENHO

No presente estudo o desempenho (peso ganho de peso meacutedio diaacuterio consumo de

raccedilatildeo meacutedio diaacuterio e conversatildeo alimentar) dos leitotildees foi semelhante entre os tratamentos

sendo verificado aumento nessas caracteriacutesticas com o avanccedilar da idade demonstrando

desenvolvimento considerado normal para os leitotildees Aleacutem disso foi observado maior

frequecircncia de dias com diarreia para os animais do tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco

dos 35 aos 49 dias entretanto mesmo com essa maior frequecircncia os animais foram capazes

de manter o desempenho e a morfometria intestinal semelhante aos animais que receberam

niacuteveis elevados de oacutexido de zinco na dieta

A adiccedilatildeo do zinco e do cobre em niacuteveis farmacoloacutegicos na dieta de leitotildees

desmamados eacute responsaacutevel por melhorar o desempenho uma vez que disponibilizam mais

nutrientes para o hospedeiro (HILL et al 2000 PEacuteREZ et al 2011 SHELTON et al 2011)

estimulam o apetite por meio do aumento da secreccedilatildeo de grelina gaacutestrica causado pelo zinco

(ZHANG GUO 2008) e do aumento da concentraccedilatildeo do neuropeptiacutedeo Y estimulado pelo

cobre (LI et al 2008) aleacutem de ambos atuarem no controle da diarreia ocasionada por micro-

organismos oportunistas principalmente apoacutes o desmame sendo uma ferramenta eficiente e

econocircmica comumente aplicada na produccedilatildeo de suiacutenos (HILL et al 2000)

Resultados contraacuterios aos obtidos no presente estudo foram relatados por Namkung et

al (2006) no qual o desempenho dos leitotildees foi melhorado nas duas primeiras semanas apoacutes

o desmame com a adiccedilatildeo de 3000 mgkg de oacutexido de zinco associado a 250 mgkg de sulfato

de cobre na dieta Peacuterez et al (2011) tambeacutem verificaram melhora no desempenho dos leitotildees

ao associarem oacutexido de zinco (3000 mgkg) e cobre independente da fonte (sulfato de cobre

ou complexo cobre-aminoaacutecidos em 100 250 ou 315 mgkg) Estes autores citam que esses

minerais podem exercer efeito aditivo sendo observado no intestino maior disponibilidade de

nutrientes para o organismo devido ao aumento da estabilidade intestinal e a reduccedilatildeo de

bacteacuterias patogecircnicas

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 50: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Discussatildeo 51

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Resultados similares ao presente estudo foram descritos por Hoslashjberg et al (2005) e

Hedemann et al (2006) no qual os leitotildees desmamados natildeo apresentaram melhora no

desempenho quando suplementados com niacuteveis de oacutexido de zinco (100 ou 2500 mgkg)

associado ao sulfato de cobre (0 ou 175 mgkg) Hill et al (2000) ao suplementarem a dieta

com a associaccedilatildeo de 3000 mgkg oacutexido de zinco e 250 mgkg de sulfato de cobre verificaram

melhora no ganho de peso no consumo de raccedilatildeo e na conversatildeo alimentar (P lt 005) dos

leitotildees desmamados que receberam somente 3000 mgkg de oacutexido de zinco durante 28 dias

sendo relatado resultados intermediaacuterios para o sulfato de cobre Do mesmo modo o oacutexido de

zinco proporcionou maior GPMD CRMD e peso meacutedio aos 42 dias ao ser incluiacutedo em 3000

mgkg na dieta possivelmente devido ao efeito inibitoacuterio do zinco sobre a E coli (BERTOL

BRITO 1995)

No presente estudo apesar dos resultados da conversatildeo alimentar natildeo terem sido

estatisticamente diferentes foi possiacutevel observar que dos 35 aos 49 dias de idade os leitotildees do

tratamento 2 foram mais eficientes no aproveitamento do alimento em 13 em comparaccedilatildeo

aos animais do tratamento 1 E no periacuteodo dos 49 aos 63 dias os leitotildees do tratamento 2

foram 44 mais eficientes no aproveitamento da dieta que os animais do tratamento 1

Demonstrando dessa forma que provavelmente os leitotildees aproveitaram os nutrientes da dieta

ingerida mesmo apoacutes apresentarem periacuteodo de intensa diarreia na fase inicial 1 (35 aos 49

dias)

Niacuteveis crescentes de oacutexido de zinco (2250 e 3000 mgkg) promoveram aumento linear

no consumo de raccedilatildeo e no ganho de peso dos leitotildees dos 21 aos 35 dias de idade (VITOacuteRIA

2011) demonstrando que a inclusatildeo de zinco em niacuteveis menores jaacute proporciona desempenho

adequado aos animais No nosso estudo a adiccedilatildeo de 2500 mgkg de oacutexido de zinco resultou

em desempenho semelhante aos animais suplementados com 3000 mgkg em todos os

periacuteodos avaliados demonstrando a possibilidade de reduccedilatildeo nos niacuteveis de inclusatildeo

Shelton et al (2011) relataram que o desempenho foi melhor (P gt 005) quando o

oacutexido de zinco foi fornecido na primeira semana poacutes-desmame (0 a 14 dias) e o sulfato de

cobre mais tardiamente (14 a 42 dias poacutes-desmame) em comparaccedilatildeo a ambos fornecidos

durante todo o periacuteodo Poucas pesquisas foram realizadas relacionadas a transiccedilatildeo da

suplementaccedilatildeo na fase inicial 1 de zinco para o fornecimento de cobre na fase final de creche

(inicial 2) Vale ressaltar que neste estudo o cobre foi mantido durante todo o periacuteodo

experimental mas o zinco na fase inicial 1 dos 35 aos 49 dias foi retirado e na fase

subsequente foi fornecido em niacutevel nutricional (100 mgkg) sendo os resultados similares aos

obtidos por Shelton et al (2011)

Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Discussatildeo 52

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) No presente estudo foi

observado que a suplementaccedilatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre ao longo do periacuteodo

experimental foi capaz de manter o desempenho similar sendo o mesmo relatado por Zhu et

al (2011) em que a utilizaccedilatildeo de 175 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees

desmamados aos 28 dias foi eficiente no ganho de peso diaacuterio e na conversatildeo alimentar

sendo possiacutevel suplementar a dieta com esses niacuteveis de sulfato de cobre

Deste modo eacute possiacutevel sugerir reduccedilatildeo dos niacuteveis de inclusatildeo de oacutexido de zinco e a

inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de cobre na dieta de leitotildees desmamados possibilitando a

reduccedilatildeo da poluiccedilatildeo ambiental e de resistecircncia antimicrobiana problemas citados no estudo

de Debski (2016) E ainda atraveacutes dos resultados apresentados eacute possiacutevel sugerir mais

estudos com a suplementaccedilatildeo da dieta dos leitotildees desmamados com oacutexido de zinco na

primeira semana e de sulfato de cobre nas uacuteltimas duas semanas jaacute que essa mudanccedila dos

regimes minerais pode reduzir o custo da dieta e reduzir a excreccedilatildeo de zinco e cobre nos

dejetos (SHELTON et al 2011)

72 FREQUEcircNCIA DE DIAS COM DIARREIA

Na avaliaccedilatildeo da frequecircncia de dias com diarreia dos 35 aos 49 dias os animais do

tratamento sem inclusatildeo de oacutexido de zinco apresentaram 61 dos dias com diarreia em

comparaccedilatildeo a 19 nos animais suplementados com 2500 mgkg de oacutexido de zinco e 180

mgkg de sulfato de cobre Natildeo houve mortalidade no periacuteodo estudado pois os animais com

fezes liacutequidas (diarreia) foram hidratados e os eletroacutelitos repostos por meio de soro via oral

aleacutem de terem sido medicados No periacuteodo subsequente houve a recuperaccedilatildeo dos animais natildeo

sendo detectadas diferenccedilas

Zhang e Guo (2007) verificaram reduccedilatildeo dos escores fecais e da consistecircncia fecal (P

lt 001) a medida que elevaram os niacuteveis de suplementaccedilatildeo de zinco acima de 1500 mgkg

independente da fonte (oacutexido de zinco e cloreto de zinco tetrabaacutesico) para leitotildees desmamados

aos 27 dias confirmando que niacuteveis elevados de zinco dieteacutetico reduzem a incidecircncia e a

gravidade da diarreia e melhoram a consistecircncia fecal apoacutes o desmame Segundo os autores o

oacutexido de zinco elevado reduz a incidecircncia de diarreia ao estabilizar a microbiota intestinal e

manter a alta diversidade de coliformes fecais poacutes-desmame ocasionando competiccedilatildeo ativa

para colonizar os receptores de cepas diarreicas (KATOULI et al 1999) e

consequentemente melhora o desempenho dos animais

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 52: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Discussatildeo 53

Maitecirc Vidal Mendonccedila

Segundo Ou et al (2007) a suplementaccedilatildeo com altos niacuteveis de zinco (3000 mgkg)

reduz quantitativamente os mastoacutecitos do epiteacutelio intestinal e assim ocorre reduccedilatildeo na

liberaccedilatildeo de histamina ocasionando queda no seu efeito indutor da secreccedilatildeo de aacutegua e cloro

pelo epiteacutelio intestinal diminuindo a incidecircncia de diarreia Tanto a combinaccedilatildeo de 3000

mgkg de oacutexido de zinco com 250 mgkg de sulfato de cobre na dieta quanto a avaliaccedilatildeo

individual desses minerais resultaram em fezes mais consistentes em leitotildees desmamados aos

22 dias de idade (HILL et al 2000) E os animais que consumiram dietas com maiores niacuteveis

de oacutexido de zinco obtiveram melhores resultados na consistecircncia das fezes e no ganho de peso

(VITOacuteRIA 2011)

Entretanto apesar da importacircncia do elevado niacutevel de oacutexido de zinco e do seu efeito

na frequecircncia de dias com diarreia no presente estudo o tratamento sem a adiccedilatildeo do oacutexido de

zinco e com maior frequecircncia de diarreia (35 aos 49 dias) natildeo interferiu no desempenho dos

animais provavelmente houve recuperaccedilatildeo dos animais na fase subsequente dos 49 aos 63

dias devido agrave atuaccedilatildeo do mineral cobre

A adiccedilatildeo de cobre tambeacutem reduz a incidecircncia de diarreia ao reduzir as populaccedilotildees

bacterianas gram positivas no intestino (ZHAO et al 2014) Segundo Hoslashjberg et al (2005)

175 mgkg de sulfato de cobre ateacute o 14ordm dia poacutes-desmame foi responsaacutevel por reduzir o

nuacutemero de coliformes suprimir patoacutegenos especiacuteficos e induzir a resistecircncia do animal agrave

invasatildeo e adesatildeo de patoacutegenos A ocorrecircncia de fezes menos pastosas eacute um efeito relevante

por possibilitar a reduccedilatildeo do uso de antimicrobianos como promotores de crescimento ou de

uso terapecircutico (BIKKER JONGBLOED BAAL 2016)

Aleacutem disso pode-se sugerir tambeacutem que a associaccedilatildeo dos minerais zinco e cobre dos

21 aos 35 dias foi eficaz em manter o desempenho desses animais nos periacuteodos subsequentes

devido a um efeito transportador ou efeito de armazenamento (SMITH et al 1997) Jaacute que

ambos (cobre e zinco) podem ter atuaccedilatildeo antimicrobiana na microbiota intestinal reduzir o

nuacutemero de coliformes (NAMKUNG et al 2006) melhorar a sauacutede intestinal e

consequentemente favorecer a integridade intestinal que pode afetar a digestatildeo e absorccedilatildeo de

nutrientes em suiacutenos desmamados e consequentemente o desempenho dos animais

73 MORFOMETRIA INTESTINAL

Segundo Hampson (1986) apoacutes o desmame ocorrem mudanccedilas estruturais no intestino

delgado que aparentemente envolvem uma transiccedilatildeo repentina na produccedilatildeo celular As

vilosidades diminuem ceacutelulas ficam menos absorventes e a maturidade relativa dessas ceacutelulas

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Page 53: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Discussatildeo 54

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tambeacutem diminui devido agraves taxas de produccedilatildeo aparentemente mais raacutepidas assim essas

mudanccedilas refletem em atividades enzimaacuteticas reduzidas na borda em escova Os resultados

dessas mudanccedilas repentinas satildeo uma reduccedilatildeo temporaacuteria na capacidade das vilosidades para

absorver e digerir os nutrientes e a ocorrecircncia de atrofia das vilosidades e hiperplasia de

cripta no intestino de leitotildees apoacutes o desmame (LI et al 2001)

No presente estudo independente do tratamento que os leitotildees receberam durante o

periacuteodo experimental aos 63 dias os animais apresentaram valores similares para altura de

vilosidade profundidade de cripta e relaccedilatildeo entre altura e profundidade nos fragmentos de

duodeno jejuno e iacuteleo Como os leitotildees foram eutanasiados aos 63 dias idade possiacuteveis

alteraccedilotildees nessa caracteriacutestica poderiam ter sido detectadas se tivessem sido coletadas

amostras aos 49 dias logo apoacutes a fase em que se verificou a maior frequecircncia de dias com

diarreia mas para natildeo reduzir o nuacutemero de leitotildees por tratamento foi escolhido realizar ao

teacutermino do estudo

Pelo fato de natildeo ter sido observada diferenccedilas entre os tratamentos acredita-se que

possa ter ocorrido uma recuperaccedilatildeo do epiteacutelio intestinal no periacuteodo subsequente ou seja dos

50 aos 63 dias como relatado por Nabuurs et al (1993) e Vente-Spreeuwenberg e Beynen

(2003) Ou ainda que os minerais fornecidos em periacuteodos anteriores agrave eutanaacutesia podem ter

favorecido essa recuperaccedilatildeo (T1 quanto o T2 da fase preacute-inicial 3000 e 2500 mgkg

respectivamente com oacutexido de zinco e 180 mgkg de sulfato de cobre)

A adiccedilatildeo do oacutexido de zinco pode resultar em melhor digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes

com potencial melhora do desempenho ao promover processos de reparaccedilatildeo tecidual no

intestino delgado e estimular a siacutentese de enzimas digestivas (HEDEMANN JENSEN

POULSEN 2006) poreacutem nesse estudo natildeo houve efeito da suplementaccedilatildeo de zinco na altura

das vilosidades Um dos pontos abordados para este resultado foi de que provavelmente tenha

ocorrido um aumento da altura das vilosidades a partir do 5ordm dia poacutes-desmame Em estudo de

Hampson (1986) para avaliar a sequecircncia de alteraccedilotildees da mucosa intestinal de leitotildees

desmamados verificou-se reduccedilotildees entre 20 e 35 na altura da vilosidade apoacutes 24 horas poacutes-

desmame Essa reduccedilatildeo na altura das vilosidades continuou ateacute cerca de cinco dias poacutes-

desmame e nos dias seguintes houve recuperaccedilatildeo gradual do intestino delgado devido a um

equiliacutebrio nas taxas de produccedilatildeo e perda celular Assim os autores justificam haver a

possibilidade de que a anaacutelise da integridade intestinal tenha ocorrido depois que as condiccedilotildees

intestinais se estabilizaram (HEDEMANN JENSEN POULSEN 2006)

Contudo o oacutexido de zinco tambeacutem pode atuar elevando a funccedilatildeo da barreira intestinal

como mecanismo de proteccedilatildeo do epiteacutelio e que a metalotioneiacutena induzida pelo zinco proteja o

Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

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Discussatildeo 55

Maitecirc Vidal Mendonccedila

tecido de dano oxidativo (CHAI et al 2014) Assim o efeito positivo da suplementaccedilatildeo

dieteacutetica de oacutexido de zinco pode estar relacionado ao melhor desenvolvimento morfoloacutegico e

funcional da mucosa intestinal

Nos resultados encontrados por Li et al (2001) foi demonstrado que leitotildees

suplementados com 3000 mgkg de oacutexido de zinco apresentaram maior espessura de mucosa e

maior altura de vilosidade do que os animais do grupo controle (sem adiccedilatildeo de oacutexido de

zinco) Os autores relataram que as alteraccedilotildees morfoloacutegicas no epiteacutelio do intestino delgado

dos animais suplementados com oacutexido de zinco foram responsaacuteveis por tornarem os animais

mais preparados para o periacuteodo de creche jaacute que o alto niacutevel de oacutexido de zinco dieteacutetico foi

importante para a morfologia da mucosa intestinal

O cobre por sua vez atua colaborando no desenvolvimento da morfologia intestinal

pela accedilatildeo antimicrobiana e reduccedilatildeo do nuacutemero de coliformes consequentemente afeta a

digestatildeo e absorccedilatildeo de nutrientes nos leitotildees desmamados (NAMKUNG et al 2006) e

melhora a sauacutede intestinal e o desempenho dos leitotildees

Em estudo de Zhao et al (2007) a adiccedilatildeo de 200 mgkg de complexo cobre-proteiacutena

durante periacuteodo experimental de 35 dias diminuiu a profundidade da cripta e elevou (P lt

005) a relaccedilatildeo altura da vilosidade profundidade de cripta (AVPC) no duodeno e jejuno

sendo sugerido que o estiacutemulo do crescimento com elevado niacuteveis de cobre dieteacutetico pode em

parte estar relacionada ao seu impacto no intestino jaacute que o aumento da AVPC equivale a

uma aacuterea de maior absorccedilatildeo e com menos ceacutelulas epiteliais recrutadas para a renovaccedilatildeo

celular favorecendo a absorccedilatildeo de nutrientes para o aumento do desempenho

Aleacutem disso o sulfato de cobre tem maior eficaacutecia quando adicionado nos niacuteveis entre

200 e 250 mgkg (CROMWELL 2001 SHELTON et al 2011) A adiccedilatildeo de 250 mgkg de

sulfato de cobre pode alterar a taxa de renovaccedilatildeo celular e ocasionar reduccedilatildeo na quantidade de

energia necessaacuteria para manter o trato gastrointestinal resultando em elevada quantidade de

energia disponiacutevel para o ganho de peso corporal (RADECKI et al 1992)

Apesar dos resultados do presente estudo natildeo terem sido significativos foi possiacutevel

observar aumento de 187 na relaccedilatildeo AVPC no duodeno nos animais do tratamento 2 em

comparaccedilatildeo aos do tratamento 1 Tambeacutem houve aumento da AVPC nas porccedilotildees do jejuno e

iacuteleo em 4 e 75 respectivamente nos leitotildees do tratamento 2 provavelmente devido agrave

atuaccedilatildeo do zinco e cobre

Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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Discussatildeo 56

Maitecirc Vidal Mendonccedila

74 CONCENTRACcedilAtildeO DOS MINERAIS NA DIETA FIacuteGADO E TIacuteBIA

Os valores das concentraccedilotildees dos minerais zinco e cobre encontrados na dieta

ocorreram dentro do esperado pois foram proacuteximos aos niacuteveis de inclusatildeo utilizados

Em relaccedilatildeo agrave concentraccedilatildeo dos minerais nos tecidos segundo Miles e Henry (2000)

ldquobiodisponibilidaderdquo se refere ao grau em que um nutriente ingerido de uma determinada

fonte eacute absorvido de maneira que fique ldquodisponiacutevelrdquo agrave niacutevel tecidual e natildeo somente niacutevel

dieteacutetico Alguns oacutergatildeos satildeo ldquoalvosrdquo para avaliaccedilatildeo da biodisponibilidade das concentraccedilotildees

de microminerais dentre eles o fiacutegado eacute utilizado tradicionalmente para mensuraccedilatildeo da

biodisponibilidade de cobre (PASTORELLI et al 2014)

A concentraccedilatildeo do mineral cobre no fiacutegado dos leitotildees aos 63 dias de idade foi

semelhante entre os tratamentos jaacute que os niacuteveis utilizados foram os mesmos entre os

tratamentos Os valores de cobre hepaacutetico numericamente semelhantes entre os tratamentos

indicam que a absorccedilatildeo do mineral foi semelhante na inclusatildeo de 180 mgkg de sulfato de

cobre Acredita-se que natildeo houve interferecircncia do mineral zinco na absorccedilatildeo hepaacutetica de

cobre jaacute que mesmo com a adiccedilatildeo de diferentes niacuteveis de oacutexido de zinco nos tratamentos natildeo

houve diferenccedila entre os tratamentos para a concentraccedilatildeo de cobre no fiacutegado

O principal efeito da adiccedilatildeo de zinco em excesso na dieta eacute a induccedilatildeo da deficiecircncia de

cobre no organismo Isso ocorre porque o zinco em niacuteveis farmacoloacutegicos proporciona

aumento da siacutentese proteica de metalotioneiacutena responsaacutevel por aumentar a capacidade de

armazenamento de zinco no fiacutegado e intestino As metalotioneiacutenas das ceacutelulas intestinais e

hepaacuteticas satildeo responsaacuteveis pela manutenccedilatildeo da homeostase do zinco por elevarem a

capacidade dos enteroacutecitos de armazenar esse mineral e assim reduzirem o acuacutemulo de zinco

no plasma Contudo as metalotioneiacutenas possuem alta afinidade de ligaccedilatildeo ao cobre e com o

aumento da siacutentese de metalotioneiacutena em resposta agrave sobrecarga dieteacutetica de zinco haveraacute

tambeacutem maior armazenamento de cobre nos enteroacutecitos disponibilizando menos cobre para o

organismo podendo ocasionar deficiecircncia do mesmo (GAUDREacute 2016)

Quanto a deposiccedilatildeo de minerais na tiacutebia como resposta a suplementaccedilatildeo na dieta

ressalta-se que eacute um paracircmetro bastante utilizado (PACHECO 2012) Os ossos representam o

principal local de armazenamento do zinco no corpo e eacute importante verificar as reservas

oacutesseas de zinco pois se espera que com o aumento da concentraccedilatildeo de zinco ocorra aumento

do desempenho reprodutivo e da funccedilatildeo imunoloacutegica (WEDEKIND et al 1994) De acordo

Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

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Discussatildeo 57

Maitecirc Vidal Mendonccedila

com Miles e Henry (2000) dentre os tecidos examinados para biodisponibilidade do zinco os

ossos satildeo os mais sensiacuteveis ao zinco dieteacutetico

Zhang e Guo (2007) verificaram maiores concentraccedilotildees de zinco no metacarpo nos

animais que receberam inclusatildeo de altos niacuteveis de zinco na dieta e tambeacutem houve respostas

lineares (P lt 0001) nas concentraccedilotildees de zinco devido agrave suplementaccedilatildeo dieteacutetica com oacutexido

de zinco A concentraccedilatildeo de zinco oacutesseo tambeacutem aumentou linearmente (P lt 001) em estudo

realizado com leitotildees na fase crescimento ao adicionarem 0 5 10 20 40 e 80 mgkg de zinco

na forma de ZnSO4H2O (sulfato de zinco monohidratado) (WEDEKIND et al 1994) No

presente estudo foi verificado efeito significativo de tratamento indicando maior

concentraccedilatildeo de zinco no tratamento em que houve maior suplementaccedilatildeo desse mineral em

todo o periacuteodo experimental (5600 mgkg no tratamento 1) em comparaccedilatildeo aos 2600 mgkg

incluiacutedos nas dietas do tratamento 2 no periacuteodo experimental sendo os resultados similares

aos obtidos pelos autores citados acima

No presente estudo aleacutem da avaliaccedilatildeo da concentraccedilatildeo de zinco na tiacutebia tambeacutem foi

realizada a mensuraccedilatildeo do mineral manganecircs devido agrave participaccedilatildeo na mineralizaccedilatildeo oacutessea

(PACHECO 2012 CARDONA 2014) aleacutem da tiacutebia ser o tecido com maior sensibilidade de

deposiccedilatildeo de manganecircs em funccedilatildeo dos niacuteveis ingeridos (REGINA BERTECHINI 2010)

Natildeo foram encontrados efeitos significativos de tratamento na tiacutebia para o manganecircs O

manganecircs exerce efeito sineacutergico na concentraccedilatildeo de zinco nos ossos sendo relatado que

houve maior retenccedilatildeo de zinco no osso de frangos de corte (P lt 005) quando houve a

inclusatildeo de Mn na dieta (ZHU YUN ZHU 1997 apud SUNDER et al 2006)

Em estudo de Wong-Valle et al (1989) a anaacutelise de Mn no osso foi um meacutetodo

adequado para estimar a biodisponibilidade relativa de fontes de Mn em ovinos concordando

com resultados obtidos na pesquisa com frangos de corte em que a tiacutebia mostrou-se um

paracircmetro adequado e bastante utilizado para avaliaccedilatildeo da deposiccedilatildeo de minerais em resposta

a suplementaccedilatildeo dieteacutetica (PACHECO 2012)

58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

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Referecircncias 63

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58

CONCLUSOtildeES

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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965-973 2014

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growth performance redox status deposition in tissues of pigs and excretion in feces Asian-

Australas J Anim Sci v 31 n 6 p 873-880 2018

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Zn levels in diets for broilers Chin J of Anim Sci v 33 p 10-15 1997

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regulators in weanling pigs J AnimFeed Sci v20 p 60ndash70 2011

Page 58: Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e ... · RESUMO MENDONÇA, M. V. Efeitos da associação de diferentes fontes de cobre e zinco na dieta de leitões desmamados.

Conclusotildees 59

Maitecirc Vidal Mendonccedila

8 CONCLUSOtildeES

Diante dos resultados obtidos conclui-se que

a) os leitotildees suplementados com a associaccedilatildeo do sulfato de cobre e menores niacuteveis de

oacutexido de zinco apresentaram desempenho frequecircncia de dias com diarreia (exceto dos

35 aos 49 dias) e morfometria intestinal semelhantes aos leitotildees suplementados com

niacuteveis praticados comercialmente dos 21 aos 63 dias de idade

b) os niacuteveis de zinco associados ao sulfato de cobre natildeo interferem na absorccedilatildeo de cobre

hepaacutetico e na concentraccedilatildeo de zinco e manganecircs na tiacutebia dos leitotildees aos 63 dias de idade

em comparaccedilatildeo aos animais que foram alimentados com oacutexido de zinco em niacuteveis

superiores

60

CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

Maitecirc Vidal Mendonccedila

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61

9 CONSIDERACcedilOtildeES FINAIS

Diante dos resultados e discussatildeo pode-se considerar que

De maneira geral eacute possiacutevel sugerir a inclusatildeo do oacutexido de zinco em niacuteveis inferiores

a 3000 mgkg associado a inclusatildeo do sulfato de cobre em 180 mgkg

Quanto a possibilidade de adicionar o oacutexido de zinco nos primeiros 14 dias poacutes-

desmame e o sulfato de cobre durante os 28 dias finais do periacuteodo de creche necessita de

mais estudos Embora os resultados obtidos para o desempenho e a morfometria intestinal

tenham demonstrado semelhanccedilas entre os tratamentos podendo resultar em reduccedilatildeo dos

custos da dieta poluiccedilatildeo ambiental e resistecircncia aos antimicrobianos

E apenas a modificaccedilatildeo no manejo nutricional com a inclusatildeo desses minerais natildeo vai

solucionar todos os problemas encontrados na creche em sistemas intensivos de produccedilatildeo de

suiacutenos mas o controle de outros fatores associados como a amplitude teacutermica a umidade e

ventilaccedilatildeo na aplicaccedilatildeo do manejo sanitaacuterio com medidas de biosseguridade vazio sanitaacuterio

vacinaccedilotildees entre outros no fornecimento do bem-estar animal e nos cuidados veterinaacuterios

como a hidrataccedilatildeo dos animais e uso de antibioacuteticos em niacuteveis terapecircuticos

62

REFEREcircNCIAS

Referecircncias 63

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