Efeitos Morfofuncionais do AVE 0991 em Corações Isolados de Ratos Tratados com Isoproterenol
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Efeitos Morfofuncionais do AVE 0991 em Corações
Isolados de Ratos Tratados com Isoproterenol
Aluna: Thauana Luiza de OliveiraOrientador: Prof. Dr. Anderson José
Ferreira
PAD-MorfologiaLaboratório de Biologia do Desenvolvimento
Introdução
Angiotensinogen
Angiotensin I
Angiotensin II Angiotensin-(1-7)
Angiotensin III
Angiotensin IV
Angiotensin-(1-9)
Renin
ACEChymase
ACE 2
ACE, NEP PEP, NEP
ACE2, PEP, PCP
AMP
AMP
Angiotensin-(1-5)
ACE
RENIN-ANGIOTENSIN SYSTEM
ANGANG--(1(1--7)7)
FacilitaçãoFacilitação do do BarorreflexoBarorreflexoLiberaçãoLiberação de AVPde AVPModulaçãoModulação do do tonotono simpáticosimpático
AntiAnti--proliferativaproliferativaAntiAnti--arritmogênicaarritmogênica
VasodilataçãoVasodilatação periféricaperiféricaPotenciaçãoPotenciação dada BKBKEfeitoEfeito liberadorliberador de NOde NOEfeitoEfeito liberadorliberador dede prostaglandinasprostaglandinasAntiAnti--proliferativaproliferativaAntiAnti--angiogênicaangiogênica
AumentoAumento do do fluxofluxo sangüíneosangüíneo renalrenalEfeitoEfeito variávelvariável nana reabsorçãoreabsorção de Nade Na++
AntiAnti--diuréticadiurética ouou natriuréticanatriurética((espécieespécie animal/ animal/ modelomodelo experimental/experimental/anestesiaanestesia))
ATAT22MasMasAA--779779
DD--ProPro77--AngAng--(1(1--7)7)AVE 0991AVE 0991
AVE 0991
Agonista não-peptídico do receptor Mas da ANG-(1-7);
Estimula liberação de NO pelas células endoteliais de aorta bovina e compete com a 125I-ANG-(1-7) pela ligação ao receptor Mas (Wiemer et al., 2002);
AVE 0991 Efeito similar ao da ANG-(1-7) em
camundongos que receberam sobrecarga hídrica e liberação de NO por células CHO que expressam o receptor Mas (Pinheiro et al.,
2004); Estimula a liberação de NO e promove
vasodilatação dependente do endotélio em segmentos de aorta de camundongos, e essas ações são completamente abolidas por antagonistas do receptor Mas ou por sua deleção (Lemos et al., 2005).
IsoproterenolUm modelo de hipertrofia e
insuficiência cardíaca
Agonista β-adrenérgico não-seletivo: vasodilatação periférica e aumento da freqüência cardíaca;
Aumento do consumo de oxigênio predispõe o coração a danos isquêmicos (Grimm et al., 1998);
Edema, infiltrado celular e fibrose: déficit de contratilidade (Beznak et al., 1963);
Acentuada necrose dos cardiomiócitos: insuficiência cardíaca (Grimm et al., 1998).
ObjetivosObjetivo geral :• Estudar os efeitos morfofuncionais do
AVE 0991 em corações isolados de ratos tratados com isoproterenol.
Objetivos específicos :• Determinar os efeitos do agonista do
receptor Mas da ANG-(1-7), AVE 0991, na função cardíaca de ratos tratados com isoproterenol.
• Avaliar o papel do NO na ação do AVE 0991 na função cardíaca de ratos tratados com o isoproterenol.
• Analisar qualitativamente o colágeno perivascular e intersticial em ventrículo esquerdo de corações de ratos controle, tratados com isoproterenol e com isoproterenol + AVE 0991 utilizando -se a coloração Picro Sírius;
• Analisar qualitativamente o colágeno perivascular e intersticial em ventrículo esquerdo de corações de ratos controle, tratados com isoproterenol e com isoproterenol + AVE 0991 utilizando-se a coloração Tricrômico de Masson;
Metodologia
Salina0,1 ml/Kg
i.p.
Água0,5 ml
gavagem
Isoproterenol2,0 mg/Kg
i.p.
AVE 09911,0 mg/Kg
gavagem
Grupo 1
n=9 X X
Grupo 2
n=5 X X
Grupo 3
n=5 X X
Salina0,1 ml/
Kg
i.p.
Água0,5 ml
gavagem
Isoproterenol2,0 mg/Kg
i.p.
AVE 0991
1,0 mg/Kg
gavagem
L-NAME10 mg/Kg
gavagem
Grupo 4
n=8X X X
Grupo 5
n=5X X X
Sistema de Perfusão
Registros
• Tensão máxima e tensão mínima
• dT/dt máxima e dT/dt mínima
• Pressão de Perfusão
• Freqüência Cardíaca
Transdutor de Pressão
Transdutor de Força
Resultados
EFEITOS FUNCIONAIS DO AVE 0991 EM CORAÇÕES ISOLADOS DE RATOS
TRATADOS COM ISOPROTERENOL
Tensão Máxima
0 10 20 30 400
5
10
15
ControleIsoproterenol
Isoproterenol + AVE 0991AVE 0991
***
*#
***
min
gram
as (
g)
* p<0,05, **p<0,001 e ***p<0,0001 (comparado ao
controle); # p<0,001 (comparado ao isoproterenol).
Tensão Mínima
0 10 20 30 400.4
0.8
1.2
ControleIsoproterenol
Isoproterenol + AVE 0991AVE 0991
*****
min
gra
mas
(g
)
**p<0,001 e ***p<0,0001
(comparado ao controle)
dT/dt Máxima
0 10 20 30 400
50
100
150
200
250
ControleIsoproterenol
Isoproterenol + AVE 0991
****
AVE 0991
#
***
min
gra
mas
/seg
* p<0,05 e ***p<0,0001
(comparado ao controle); #
p<0,001 (comparado ao isoproterenol)
dT/dt Mínima
0 10 20 30 400
50
100
150
200
250
ControleIsoproterenol
Isoproterenol + AVE 0991AVE 0991
***
****#
min
gra
mas
/seg
* p<0,05 e ***p<0,0001
(comparado ao controle); #
p<0,001 (comparado ao isoproterenol)
Pressão de Perfusão
0 5 10 15 20 25 30 350
25
50
75
100
ControleIsoproterenol
Isoproterenol + AVE 0991AVE 0991
****#
min
mm
Hg
* p<0,001 ,**p<0,0001 (comparado ao controle); # p<0,05 (comparado ao isoproterenol)
Freqüência Cardíaca
0 10 20 30 40100
150
200
250
ControleIsoproterenol
Isoproterenol + AVE 0991AVE 0991
*#
min
bp
m
* p<0,0001 (Controle comparado ao isoproterenol) e # p<0,05 (Controle comparado ao Isoproterenol + AVE 0991)
PAPEL DO ÓXIDO NÍTRICO NOS EFEITOS FUNCIONAIS AVE 0991 EM CORAÇÕES ISOLADOS DE
RATOS TRATADOS COM
ISOPROTERENOL
Tensão Máxima
0 10 20 30 400
5
10
15
ControleL-NAMEIsoproterenolIsoproterenol+AVE0991Isoproterenol+AVE0991+L-NAME
***
****
**
min
gra
mas
(g
)
***p<0,0001 (comparado ao
controle); **p<0,001 (comparado ao
isoproterenol), *p<0,01 (comparado ao
isoproterenol + AVE 0991)
Tensão Mínima
0 10 20 30 400.6
0.7
0.8
0.9
1.0
1.1
ControleL-NAMEIsoproterenolIsoproterenol+AVE0991Isoproterenol+AVE0991+L-NAME
***
#
min
gra
mas
(g
)
***p<0,0001 (comparado ao controle) e #p<0,05 (comparado ao isoproterenol + AVE 0991)
dT/dt Máxima
0 10 20 30 400
50
100
150
200
250
L-NAMEControle
IsoproterenolIsoproterenol+AVE0991Isoproterenol+AVE0991+L-NAME
***
***
#
*
min
gra
mas
/seg
***p<0,0001 (comparado ao controle); *p<0,001 (comparado ao isoproterenol); #p<0,001 (comparado ao isoproterenol + AVE 0991)
dT/dt Mínima
0 10 20 30 4050
100
150
200
ControleL-NAMEIsoproterenolIsoproterenol+AVE0991Isoproterenol+AVE0991+L-NAME
***
*
***
##
min
gra
mas
/seg
***p<0,0001 (comparado ao controle); *p<0,001
(comparado ao isoproterenol) e
##p<0,0001 (comparado ao isoproterenol + AVE
0991)
Pressão de Perfusão
0 10 20 30 4020
45
70
95
120
ControleL-NAMEIsoproterenolIsoproterenol+AVE0991Isoproterenol+AVE0991+L-NAME
***
***#
min
mm
Hg
***p<0,0001 e **p<0,001
(comparado ao controle); *p<0,05
(comparado ao isoproterenol);
#p<0,0001(comparado ao isoproterenol +
AVE 0991)
Freqüência Cardíaca
0 10 20 30 40180
200
220
240
ControleL-NAMEIsoproterenolIsoproterenol+AVE0991Isoproterenol+AVE0991+L-NAME
****
min
bp
m
***p<0,0001 e
* p<0,05 (comparado ao
controle)
ANÁLISE QUALITATIVA DO COLÁGENO PERIVASCULAR
EM VENTRÍCULO ESQUERDO DE CORAÇÕES DE RATOS
Fotomicrografias evidenciando colágeno perivascular de ventrículo esquerdo de ratos controle (A), isoproterenol (B) e isoproterenol + AVE 0991 (C). Coloração: Picro Sírius. Aumento de 40x.
A B
C
Fotomicrografias evidenciando colágeno perivascular de ventrículo esquerdo de ratos controle (A), isoproterenol (B) e isoproterenol + AVE 0991(C). Coloração: Tricrômico de Masson. Aumento de 10x.
A B
C
ANÁLISE QUALITATIVA DO COLÁGENO INTERSTICIAL EM VENTRÍCULO ESQUERDO DE
CORAÇÕES DE RATOS
Fotomicrografias evidenciando colágeno intersticial do ventrículo esquerdo de rato controle (A), isoproterenol (B) e isoproterenol + AVE 0991 (C). Coloração: Tricrômico de Masson. Aumento de 40x.
A B
C
Conclusões
O AVE 0991 apresentou efeito cardioprotetor, atenuando a insuficiência cardíaca induzida pelo isoproterenol. Essa ação foi independente do NO.
O efeito vascular do AVE 0991 em vasos de corações de ratos tratados com isoproterenol foi dependente da liberação de NO.
O AVE 0991 exerceu atividade anti-fibrótica em corações de ratos tratados com o isoproterenol.
Muito Obrigada!