ELETROFORESE

Discente: Fabiano S. SilvaOrientadora: Priscila

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Roteiro

• Introdução• Definição• Mecanismo• Principais reagentes• Referências

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Introdução

• A técnica de separação eletroforese foi desenvolvida pelo químico sueco Arne Tiselius para o estudo de proteínas em soro.

• O efeito eletroforético tem como base a teoria de Debye Hückel Onsager, onde esta teoria de dissociação eletrolítica aceita o fato de as partículas carregadas moverem-se sob a influência de forças eletrostáticas para um eletrodo de carga oposta quando é aplicada uma diferença de potencial em uma solução contendo eletrólitos.

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Definição

• O fenômeno denominado eletroforese é definido como sendo a migração de espécies carregadas eletricamente, que ocorre quando as mesmas são dissolvidas ou suspensas em um eletrólito, através do qual uma corrente elétrica é aplicada.

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Gel

Mecanismo

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Macromoléculas +

Macromoléculas -

+

-

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+

-

400 mg

300 mg

200 mg

100 mg

Macromoléculas +

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Principais Reagentes

• Solução tampão ionizada

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Solução tampão ionizada

• O sistema tampão usado consiste em duas partes: o tampão do gel usado na preparação do gel e o tampão do tanque, ou cuba eletrolítica, na qual se encontram os eletrodos (ânodo e cátodo). Nos tampões dos tanques e do gel, a corrente elétrica é conduzida por íons, e nos eletrodos, por elétrons. Na presença de um sistema tampão adequado, a hidrólise da água, que se dá na superfície dos eletrodos, permite a troca entre elétrons e íons.

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Principais Reagentes

• Solução tampão ionizada

• Gel

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Gel

Gel de agaroseGel de Poliacrilamida

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DNA e RNA DNA, RNA e proteínas

Gel

concentração

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Principais Reagentes

• Solução tampão ionizada

• Gel

• Corantes

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Corantes

• Azul de bromofenol

• Brometo de etídeo

• Coomasie blue

• Nitrato de prata

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Brometo de etídeo

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Referências

• Wilson & Walker. Principles and Techniques of Biochemistry and Molecular Biology, 7ed. Page 399;

• QUEIROZ, Sonia, Eletroforese Capilar, Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química 2001;

• www.biomedicinabrasil.com/2010/10/eletroforese.html• http://www.cnpt.embrapa.br/biblio/p_do06_2.htm• http://www.infoescola.com/bioquimica/eletroforese/• <<acessados em 20/07/2015>>