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Recebido para publicação em 14/08/2007Aceito para publicação em 20/12/2007

Ação antimicrobiana de extratos de plantas medicinais sobre espéciesfitopatogênicas de fungos do gênero Colletotrichum

SILVA, M.B.1*; NICOLI, A.

1; COSTA, A.S.V.

1; BRASILEIRO, B.G.

1; JAMAL, C.M.

1; SILVA, C.A.

1; PAULA JÚNIOR,

T.J.2; TEIXEIRA, H.

2

1UNIVALE, Rua Israel Pinheiro 2000, 35020-220 - Governador Valadares, MG;

2EPAMIG-CTZM, Vila Giannetti 47,

36570-000 - Viçosa, MG; *mbarreto@univale.br

RESUMO: A demanda por produtos agrícolas com baixo nível residual de pesticidas é cada vezmaior. Princípios ativos derivados de metabólitos secundários presentes em extratos de plantasmedicinais podem inibir o desenvolvimento de organismos fitopatogênicos. Este trabalho verificouo efeito in vitro de extratos das plantas medicinais Costus pisonis (“cana-de-macaco”), Achilleamillefolium (“mil-folhas”) e Pelctranthus barbatus (“boldo-da-terra”) no crescimento micelial dosfungos Colletotrichum musae (isolado de banana), Colletotrichum gloeosporioides (isolado demamão), C. gloeosporioides (isolado de cacau) e Colletotrichum lindemuthianum (isolado defeijão). Todos os extratos apresentaram algum efeito fungitóxico sobre o crescimento micelialdos fungos. O extrato de folhas de C. barbatus reduziu o crescimento micelial de C. musae, C.gloeosporiodes (mamão), C. gloeosporiodes (cacau) e C. lindemuthianum em 82, 49, 47 e 53%,respectivamente.

Palavras-chave: controle alternativo, antracnose, metabólitos secundários

ABSTRACT: Antimicrobial action of medicinal plant extracts on phytopathogenic speciesof Colletotrichum fungus. Agricultural products with low levels of pesticide residues have beenincreasingly required by consumers. Active ingredients derived from secondary metabolites andpresent in medicinal plant extracts can inhibit the development of plant pathogens. The objectiveof this work was to verify the in vitro effect of extracts from the medicinal plants Costus pisonis,Achillea millefolium and Plectranthus barbatus on the mycelial growth of Colletotrichum musae(isolated from banana), Colletotrichum gloeosporioides (isolated from papaya), C. gloeosporioides(isolated from cacao) and Colletotrichum lindemuthianum (isolated from bean). All extracts hadan inhibitory effect on the fungi mycelial growth. Plectranthus barbatus leaf extract reduced themycelial growth of C. musae, C. gloeosporiodes (papaya), C. gloeosporiodes (cacao) and C.lindemuthianum by 82, 49, 47 and 53%, respectively.

Key words: alternative control, anthracnose, secondary metabolites

INTRODUÇÃOO uso indiscriminado e sem

acompanhamento de defensivos agrícolasindustrializados tem induzido o surgimento depopulações resistentes de patógenos de plantas,fazendo com que os agricultores aumentem, por suaconta, a dose dos produtos utilizados, como forma demanter sob controle as doenças e a viabilidadeeconômica da produção. Conseqüentemente, odesenvolvimento de produtos agrícolas com baixo nívelresidual de pesticidas é cada vez mais demandado.

O uso de produtos derivados da indústriaquímica no controle de doenças na agriculturamoderna tem sido amplamente questionado pelasociedade, em decorrência dos efeitos adversoscausados por estes (Koepf et al., 1986; Paula Jr. etal., 2006). Dentre estes efeitos é possível enumerara poluição da água e do ar, a contaminação dealimentos, o aumento da resistência de patógenosaos produtos e os seus efeitos sobre as plantas, osanimais e o homem (Souza, 1998). O principal

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problema na utilização de agrotóxicos está ligado,porém, ao fato de esses produtos serem, muitasvezes, aplicados em doses excessivas ou de formainadequada. Além disso, o desenvolvimento deprodutos sintéticos para controlar doenças éprocedimento trabalhoso e de custo elevado por causados vários testes que são, geralmente, requeridos,como eficácia, seletividade, toxicologia e impacto aoambiente (McLaren, 1986).

Extratos de plantas medicinais têm sidoutilizados com sucesso no controle de fungosfitopatogênicos (Silva et al., 2006). Metabólitossecundários de plantas são considerados escóriasou produtos finais do seu metabolismo e têmimportância para as plantas que os sintetizam. Umadas funções dessas substâncias é fornecer proteçãoàs plantas contra o ataque de organismospatogênicos (Whittaker & Fenny, 1971; Swain, 1977;McLaren, 1986; Wink, 1988; Taiz & Zeiger, 1991).Tem sido verificado que a maioria dos extratos deplantas apresenta propriedades antifúngicas(Pordesimo & Ilag, 1976; Moore & Atkins, 1977;Alfenas et al., 1982; Rai & Tripathi, 1984).

Espécies de plantas medicinais têm, em suacomposição química, substâncias biologicamenteativas que provocam no organismo humano reaçõesque podem variar da cura ao abrandamento da doença.Diversas espécies têm sido também testadas para ocontrole de fitopatógenos. Cruz et al. (1998) verificaramque o tratamento de sementes de soja com extratoaquoso de manjericão (Ocimum basilicum), lavanda(Lavandula officinalis), capim-limão (Cymbopongoncitratus) e eucalipto (Eucaliptus citriodora) reduziusignificativamente a incidência de Penicillium sp. ede Aspergillus sp. Em sementes. Silva et al. (1999)verificaram que o extrato de quebra-pedra (Phyllanthusniruri) inibiu a germinação de Fusarium oxysporum. Aatividade nematicida do extrato aquoso de alho (Alliumsativum) contra o nematóide-das-galhas do cafeeiro,Meloydogine exigua, foi comprovada por Silva et al.(1999).

Alguns metabólitos isolados ou mesmofrações de extratos também apresentam atividadeantifúngica. O óleo essencial de cambará (Lantanaaculeata) apresentou atividade contra Aspergillusflavus, Aspergillus fumigatus, Aspergillus niger, F.oxysporum, Microspermum gypsum, Penicilliumdigitatum, Penicillium notatum e Rhizophus stolonifer(Saxena & Sharma, 1999). Tetranortriterpenóidesisolados de cedro australiano (Toona ciliata), neem(Azadirachta indica) e cidra (Citrus medica)apresentaram atividade contra Puccinia arachidis(Govindachari et al., 2000).

O presente trabalho verificou o efeito in vitrodo extrato bruto de algumas espécies de plantasmedicinais no crescimento micelial dos fungosfitopatogênicos Colletotrichum musae (Berk. & M.A.

Curtis) Arx (isolado de banana; anamorfo: Glomerella),Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz. & Sacc.(isolado de mamão; anamorfo: Glomerella cingulata),C. gloeosporioides (Penz.) Penz. & Sacc. (isoladode cacau; anamorfo: G. cingulata) e Colletotrichumlindemuthianum (Sacc. & Magnus) Briosi & Cavara(isolado de feijão; anamorfo: Glomerella).

MATERIAL E MÉTODOPlantas de cana-de-macaco (Costus pisonis

Lindl., Zingiberaceae), mil-folhas (Achillea millefoliumL., Asteraceae) e boldo-da-terra [Plectranthusbarbatus (Andr.) Benth, Limiaceae] foram coletadase do horto de plantas medicinais da UNIVALE, emseguida, submetidas à secagem em temperaturaambiente. Os extratos destas plantas foram obtidospor maceração, utilizando-se como solvente o etanol.Posteriormente foram secos foram obtidos pelaeliminação do etanol por evaporação a vácuo eidentificados no banco de extratos do Bioplanta, grupode pesquisa em Plantas Medicinais da UNIVALE, sobos respectivos códigos: Bio40, Bio38 e Bio32.

A partir de folhas e de caules de C. pisonis,A. millefolium e de P. barbatus foi extraído 1 g deextrato etanólico, que foi diluído em 5 mL do solventeorgânico dimetilsulfóxido (DMSO). Visando obter umaconcentração final de 2.000 µL L-1, após repouso poruma hora, 0,5 mL do extrato de cada planta medicinalfoi dissolvido em DMSO e vertido em frascoErlenmeyer contendo 50 mL de BDA, previamenteautoclavado, cuja temperatura encontrava-se em48°C. Em seguida, o extrato bruto foi homogeneizadono meio de cultura e vertido em placas de Petri. Quatrohoras depois, discos de micélio de 0,7 cm de diâmetrodos fungos C. musae, C. gloeosporioides (mamão),C. gloeosporioides (cacau) e C. lindemuthianum,cultivados por sete dias em meio BDA (200 g debatata, 20 g de dextrose e 15-20 g de ágar), foramcolocados no centro das placas, e mantidos a 25-30ºC. O crescimento radial médio do micélio foiavaliado em intervalos de 24h, até um total de 120hapós a repicagem dos fungos (Dhingra & Sinclair,1985). Utilizou-se o delineamento experimentalinteiramente casualizado, em que cada tratamentofoi repetido cinco vezes. Placas de Petri sem extratovegetal contendo meio BDA acrescido do solventeDMSO (testemunha A) e apenas com BDA(testemunha B) serviram como controles. Para testara confiabilidade dos resultados, o ensaio foi repetidoduas vezes. Após análise de variância, o crescimentoradial médio de cada tratamento foi comparado peloTeste de Tukey, a 5% de probabilidade.

RESULTADO E DISCUSSÃOTodos os extratos avaliados apresentaram

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TABELA 1. Efeito de extratos vegetais brutos de Costus pisonis, Achillea millefolium e Coleus barbatus no crescimento micelial médio (cm) de Colletotrichummusae (isolado de banana), Colletotrichum gloeosporioides (isolado de mamão), C. gloeosporioides (isolado de cacau) e Colletotrichum lindemuthianum (isoladode feijão).

1 Valores médios acumulados após 120 h de incubação a 25-30oC.2 Médias seguidas das mesmas letras nas colunas não diferem estatisticamente entre si pelo Teste de Tukey (5%).3 Valores entre parênteses referem-se à sensibilidade média de inibição do crescimento micelial dos fungos (%) pelos extratos vegetais em relação à testemunha A(placas sem extrato vegetal contendo meio BDA + solvente orgânico DMSO) ou B (placas sem extrato vegetal contendo apenas meio BDA).

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efeitos fungitóxicos variáveis sobre o crescimentomicelial das espécies de Colletotrichum spp. (Tabela 1).

Os resultados obtidos em placas sem extratovegetal contendo BDA + DMSO (testemunha A) foramcomparados com os obtidos em placas contendoapenas BDA (testemunha B) e observou-se que osolvente orgânico DMSO inibiu o crescimento dosfungos na concentração utilizada. Dessa forma, aavaliação do potencial de controle de cada extrato foifeita considerando-se a testemunha A.

Os extratos provenientes de folhas e decaules de P. barbatus apresentaram o maior potencialfungitóxico comparado aos extratos das outrasespécies testadas. Ambos os extratos de C. barbatusinibiram de forma similar o crescimento micelial deC. gloeosporioides isolado de mamão, bem como deC. musae e C. lindemuthianum; entretanto, o extratoproveniente de folhas apresentou maior efeito inibidorem C. gloeosporioides isolado de cacau do que aqueleproveniente apenas da maceração de caules daplanta. Comparado às testemunhas A e B, ocrescimento de C. gloeosporioides (cacau) foi inibidotanto pelo extrato de C. pisonis quanto de A.millefolium. Por outro lado, apenas o extrato de A.millefolium apresentou efeito inibidor no crescimentomicelial de C. musae.

C. musae foi a espécie que apresentou maiorsensibilidade média aos compostos testados. Seucrescimento em meio BDA contendo extrato de folhasde P. barbatus sofreu inibição de 83 e 81%,comparando-se, respectivamente, às testemunhas Ae B (Tabela 1).

Neste trabalho foram utilizados apenas osextratos brutos das plantas testadas. Em estudosfuturos, caso sejam utilizadas frações biologicamenteativas, é possível que haja a potencialização do efeitofungitóxico dos extratos, especialmente com relaçãoa C. barbatus. Além da necessidade de demonstraro potencial fungitóxico in vivo, estudos adicionaisdeverão incluir a caracterização química dosprincípios ativos dos extratos dessas espécies.

CONCLUSÃOExtratos das plantas medicinais Costus

pisonis (“cana-de-macaco”), Achillea millefolium (“mil-folhas”) e Plectranthus barbatus (“boldo-da-terra”)foram capazes de inibir o crescimento micelial defungos fitopatogênicos do gênero Colletotrichum. Oextrato de folhas de P. barbatus reduziu o crescimentomicelial de C. musae, C. gloeosporiodes (isolado demamão), C. gloeosporiodes (isolado de cacau) e C.lindemuthianum em 82, 49, 47 e 53%, respectivamente.

AGRADECIMENTOOs autores agradecem ao apoio da

FAPEMIG (Belo Horizonte, MG). T.J. Paula Júnior ébolsista do CNPq.

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