Fundamentos de diluição

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DILUIES Os mtodos de laboratrio nos quais uma quantidade de uma substncia adicionada a outra para reduzir a concentrao de uma das substncias so conhecidos como diluies.

IMPORTANTE: Uma diluio uma expresso de concentrao, no de volume. Expressa de outra forma, uma diluio indica a quantidade relativa de substncias em uma soluo. Quando a palavra diluio usada, ela deve significar o nmero de partes que foram diludas em um nmero total de partes. Em outras palavras, uma diluio deve significar o volume de concentrado no volume total da soluo final. O menor nmero corresponde ao nmero de partes da substncia que est sendo diluda; o maior nmero refere-se ao nmero total de partes da soluo final. Considere as seguintes frases: Faa uma diluio 1 para 10 de soro em salina. Faa uma diluio 1 em 10 de soro em salina. Faa uma diluio 1 para 10 de soro com salina. Faa uma diluio 1/10 de soro com salina. Faa uma diluio 1:10 de soro usando salina. Faa uma diluio de 1 parte de soro e 9 partes de salina. Faa uma diluio de 1 parte de soro para 9 partes de salina. Qual a diferena entre essas frases? Nenhuma! Todas significam exatamente a mesma coisa. ENTO: Diluir acrescentar solvente a uma soluo mantendo-se inalteradas as quantidades de soluto existentes. D= V soluto V soluto + V solvente 1 parte de soro + 9 partes de salina 10 partes de soluo final O significado difere quando usamos a palavra razo. Os nmeros passam a se referir aos materiais da razo, que podem ser escritos de diversas formas: 1:9 1 para 9 1/9 1

No importa como a razo escrita, a ordem dos nmeros deve corresponder ordem das substncias s quais a razo se refere. Ex: Uma razo de soro para salina 1:9 igual a uma razo salina para soro 9:1, o que a mesma coisa que uma diluio de 1:10 de soro com salina. TTULO a concentrao de uma soluo determinada por titulao. a menor quantidade ou concentrao que produzia um efeito particular ou produto. O ttulo a recproca da diluio. Ento, em uma reao de pesquisa de anticorpos positiva na diluio e e negativa na diluio 1/8 e 1/16, o ttulo 4. Ex: Dilua 2 mL de soro com 28 mL de salina. Deve-se somar 28 mL de salina em 2 mL de soro. Ento, o volume total da soluo final 30 mL. 2 mL de soro + 28 mL de salina 30 mL de soluo final A diluio desta soluo seria 2 em 30. No entanto, diluies so geralmente propostas como 1 para algum nmero. Para converter uma diluio 2:30 em uma diluio de 1 em algo, s montar um problema de razo-proporo: 2 est para 30 assim como 1 est para X. 2/30 = 1/X 2X=30 X=15 - a diluio soro em salina 2:30 ou 1:15

A razo desta soluo seria 2: 28. No entanto, diluies so geralmente propostas como 1 para algum nmero. Para converter uma diluio 2:28 em uma diluio de 1 em algo, s montar um problema de razo-proporo: 2 est para 28 assim como 1 est para X. 2/28 = 1/X 2X=28 X=14 - a razo soro em salina 2:28 ou 1:14 ou ento, uma razo salina em soro 14:1 Para diluies seriadas, ao se calcular a concentrao, necessrio multiplicar a concentrao original pela 1 diluio, a seguir pela segunda diluio, esta pela terceira diluio e assim por diante, at que a diluio final seja conhecida. Ex: Uma soluo de NaOH 2 M diluda 1/5 e 1/10. Determine a concentrao de cada uma das 3 solues. soluo 1 de NaOH: 2M soluo 1/5 de NaOH: 2M x 1/5 = 0,4M soluo 1/10 de NaOH: 2M x 1/5 x 1/10 = 0,04M ENTO: Para que diluir em reaes imunolgicas? Para diminuir a concentrao de anticorpos inespecficos. Para determinar uma concentrao de anticorpos em testes semi-quantitativos ttulo.

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EXERCCIOS: 1. Faa 250 mL de uma diluio 1:10 de soro em salina. 2. Faa 45 mL de uma diluio 1:15 de soro em salina. 3. Faa 33 mL de uma diluio 1:22 de soro em salina. 4. Faa 4 mL de uma diluio 1:8 de soro em salina. 5. Faa 7,5 mL de uma diluio 1:150 de soro em salina 6. Determine a quantidade de soro em 40 mL de uma diluio 1:5 de soro em salina. 7. Quanto de uma diluio de 1:32 de urina com gua destilada poderia ser feita com 2 mL de urina? 8. Uma diluio 1/10 de uma substncia diluda 3/5, rediluda 2/15 e diluda mais uma vez . Qual a concentrao final? 9. Uma soluo 3% diluda 2/30. Qual a concentrao resultante? 10. Uma soluo que contm 70 mg/dL diluda 1/10 e de novo 2/20. Qual a concentrao final? 11. A alquota de 0,2 mL de soro do paciente adicionada a 0,8 mL de salina. Transferese 0,5 mL para um tubo 2 que possui 0,5 mL de salina. Este procedimento feito at o tubo 10. As diluies foram utilizadas para testar um anticorpo de um agente infeccioso. Do tubo 1 ao 8, a reao foi positiva para o anticorpo testado. Qual o ttulo que deve ser apresentado ao anticorpo? 12. Em uma srie de 8 tubos, coloque 0,9 mL de soluo fisiolgica no 1 tubo e 0,5 mL de soluo fisiolgica nos tubos restantes. Adicione 0,1 mL de soro ao 1 tubo, misture e coloque 0,5 mL dessa soluo no tubo subseqente e repita o processo at o ltimo tubo. Despreze o ltimo 0,5 mL. Para cafa tubo adicione 0,5 mL de antgeno. A partir disso, responda: a) b) c) a) b) c) Qual a diluio de cada tubo antes de adicionar o antgeno? Qual a quantidade de soro presente nos dois primeiros tubos aps a transferncia? Qual pe a diluio em cada tubo aps a adio do antgeno? 0,3 mL de soro sanguneo com 4,2 mL de soluo fisiolgica. 0,5 mL de soro sanguneo com 3 mL de soluo fisiolgica. 0,2 mL de soro sanguneo com 6,2 mL de soluo fisiolgica.

13. Quais diluies representam as misturas abaixo?

14. Em vrios tubos numerados de 1 a 5, pipetou-se 3X mL de gua em cada um deles. No tubo n 1 pipetou-se X mL de azul de metileno e homogeneizou-se esta soluo. Pipetou-se do tubo n 1 X mL e passou-se para o tubo n 2. Este procedimento foi feito at o 5 tubo. Qual o volume de todos os tubos se X=2 e as respectivas diluies? Se X=10, qual o volume final de todos os tubos e as respectivas diluies? 15. Esquematize a diluio de 5 mL de azul de metileno diludo a 1/4000. 3

16. Esquematize a preparao de 50 mL de uma soluo tampo fosfato a 1/2000. O tampo foi fornecido pelo fabricante a uma diluio 1/10. 17. Pipetou-se 500 L se um soluto em tubo de ensaio e acrescentou-se 4,5 mL de solvente. Qual a diluio? 18. Pipetou-se 200 L se um soluto em tubo de ensaio e acrescentou-se 9,8 mL de solvente. Qual a diluio? 19. Num laboratrio de Virologia, foi diludo 200 L de soro diludo a 1:4. Porm, a diluio correta seria 1:10. Como fazer essa correo? 20. Em uma reao imunoenzimtica, foi colocado 0,1 mL de soro, 0,8 mL de diluente e 0,1 mL de conjugado. Que volume de soro existe no volume final e qual a diluio deste soro? 21. Uma soluo estoque de cido oxlico 1/100 est disponvel no laboratrio de qumica. Como o laboratorista prepararia 6 mL de cido oxlico 1/150? 22. Fazer uma diluio seriada de razo 2 a partir de uma soluo de azul de metileno em gua. Usar uma bateria de 5 tubos. O volume em cada tubo deve ser 4 mL. 23. Fazer uma diluio seriada de razo 10 a partir de uma soluo de azul de metileno em gua. Usar uma bateria de 8 tubos. O volume em cada tubo deve ser 4,5 mL. 24. Fazer uma diluio seriada de razo 5 a partir de uma soluo de azul de metileno em gua. Usar uma bateria de 5 tubos. O volume em cada tubo deve ser 3 mL. 25. Fazer uma diluio seriada de razo 2 a partir de uma soluo de azul de metileno diludo em gua at a diluio 1/64. O volume em cada tubo deve ser 0,7 mL. 26. Fazer uma diluio seriada de razo 2 a partir de uma soluo de azul de metileno diludo 1/16 em gua at a diluio 1/512. O volume em cada tubo deve ser 1,6 mL. 27. Fazer uma diluio seriada de razo 3 a partir de uma soluo de azul de metileno diludo 1/3 em gua at a diluio 1/81. O volume em cada tubo deve ser 0,2 mL. 28. Fazer uma diluio seriada de razo 3 a partir de uma soluo de azul de metileno diludo 1/62 em gua at a diluio 1/162. O volume em cada tubo deve ser 0,4 mL. 29. Fazer uma diluio seriada de razo 5 a partir de uma soluo de azul de metileno diludo 1/10 em gua at a diluio 1/250. O volume em cada tubo deve ser 1,6 mL. 30. Fazer uma diluio seriada de razo 10 a partir de uma soluo de azul de metileno diludo 1/20 em gua at a diluio 1/20000. O volume em cada tubo deve ser 3,6 mL. 31. Em vrios tubos numerados de 1 a 6, pipetou-se 0,5 mL de tampo em todos eles. No 1 tubo pipetou-se 500 L de azul de metileno e homogeneizou-se. Transferiu-se do tubo n 1 para o tubo n 2, 500 L. Este procedimento foi realizado at o 6 tubo. Sabendo-se que no houve perda de volume, responda. a) Qual o volume de todos os tubos e as respectivas diluies? b) Qual o volume e as respectivas diluies de todos os tubos se fosse pipetado 3,5 mL de tampo.

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