hiperplasia prostatica con androgenos y estrogenos

Influencia del valerato de estradiol sobre la inducción de Hiperplasia Prostática benigna con enantato de testosterona en

Rattus rattus var. albinus.

UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELOUNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUDFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICACARRERA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

INFLUENCIA DEL VALERATO DE ESTRADIOL SOBRE LA INDUCCIÓN DE HIPERPLASIA PROSTÁTICA BENIGNA CON ENANTATO DE

TESTOSTERONA EN Rattus rattus var. albinus.

TESISPARA OPTAR EL TITULO PROFESIONAL

DE QUÍMICO FARMACEÚTICO

AUTORES: Bach. SILVA SALDAÑA, José AlcibiadesBach. GALLARDO ORTIZ, Rodolfo Efraín

ASESORES: Q.F. Jéssica Bardales Valdivia

BLGO. Homero Bazán Zurita

CO-ASESOR: Q.F. Julio Víctor Campos Florián

CAJAMARCA – PERÚ

Bach. GALLARDO ORTIZ, Rodolfo Efraín Bach. SILVA SALDAÑA, José Alcibiades 1



2011

DEDICATORIAEsta tesis, si bien ha requerido de esfuerzo y mucha dedicación por parte de los autores y su director de tesis, no hubiese sido posible su finalización sin la cooperación desinteresada de todas y cada una de las personas que a continuación citaré y muchas de las cuales han sido un soporte muy fuerte en momentos de angustia y desesperación.

Primero y antes que nada, dar gracias a Dios, por estar conmigo en cada paso que doy, por fortalecer mi corazón e iluminar mi mente y por haber puesto en mi camino a aquellas personas que han sido mi soporte y compañía durante todo el periodo de estudio.

Agradecer hoy y siempre a mi familia, a mis padres Juan y Bernardita por su apoyo en todos estos años, a mis abuelitos Rodolfo y Trinidad que desde el cielo me dan su bendición, a mis hermanos Juan Carlos, Aldo y Freddy, porque el ánimo, apoyo y alegría que me brindan me dan la fortaleza necesaria para seguir adelante.

A Jessica, por ser la persona que ha compartido el mayor tiempo a mi lado, porque en su compañía las cosas malas se convierten en buenas, la tristeza se transforma en alegría y la soledad no existe.

EFRAÍN

DEDICATORIA

Me gustaría dedicar esta Tesis a toda mi familia, compañeros de trabajo y de estudios.




Para mis padres Clemente y Valentina, por su comprensión y ayuda en momentos malos y menos malos. Me han enseñado a encarar las adversidades sin perder nunca la dignidad ni desfallecer en el intento. Me han dado todo lo que soy como persona, mis valores, mis principios, mi perseverancia y mi empeño, y todo ello con una gran dosis de amor.

A la Dra. María Valencia por haber confiado en mi y haberme animado a emprender el camino a esta meta lograda, con su apoyo incondicional y sus consejos.

JOSÉ

AGRADECIMIENTO

Damos gracias a Dios por estar con nosotros a cada paso que dimos, por fortalecer nuestro corazón e iluminar nuestra mente.

Debemos agradecer de manera especial y sincera a nuestros asesores la Q.F. Jéssica Bardales Valdivia, por su apoyo y confianza en nuestro trabajo y su capacidad para guiar nuestras ideas, al Blgo. Homero Bazán Zurita que nos apoyó en todo momento con su gran aporte profesional.




A nuestro co-asesor el Q.F. Julio Campos Florián, quien nos incentivó para llevar a cabo el desarrollo de esta investigación.

A nuestros profesores quienes nos formaron con sus conocimientos para ser profesionales y grandes seres humanos.

A nuestra querida Universidad Privada Antonio Guillermo Urrelo y a la Facultad de Farmacia y Bioquímica.

EFRAÍN Y JOSÉ

ÍNDICE

DEDICATORIA iAGRADECIMIENTO iiÍNDICE iiiRESUMEN ivABSTRACT vI. INTRODUCCIÓN 1II. MATERIAL Y MÈTODOS 7

2.1 MATERIAL 7a. Material de Vidrio 7b.Reactivos y fármacos 7c. Equipos y aparatos 8




d.Otros 82.2 MÉTODO

2.2.1. Inducción de Hiperplasia Prostática Benigna en Rattus rattus var. albinus 82.2.2. Comprobación del modelo experimental en Rattus rattus var. albinus 92.2.3. Análisis estadístico 10

III. RESULTADOS 11IV. DISCUSIÓN 18V. CONCLUSIONES 22VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 23ANEXOS 26

RESUMEN

La razón del presente trabajo de investigación fue determinar la influencia del

valerato de estradiol sobre la inducción de Hiperplasia Prostática Benigna con

enantato de testosterona en Rattus rattus var. albinus.

Los animales de experimentación fueron distribuidos aleatoriamente en cuatro

grupos de seis especímenes cada uno.

El primer grupo se le administró 1 mL de SSF (solución salina fisiológica) por vía

subcutánea (VSC), al segundo grupo (Grupo Andrógeno) se le administró

enantato de testosterona a dosis de 14mg/kg por VSC, al tercer grupo (Grupo Estrógeno) se le administró valerato de estradiol a dosis de 1mg/kg por VSC, se




repitió la administración a los 5 días, al cuarto grupo (Grupo Andrógeno + Estrógeno) se le administró enantato de testosterona a dosis de 14mg/kg y

valerato de estradiol a dosis de 1mg/kg ambos por VSC.

Después de haber administrado los tratamientos respectivos en cada grupo, se

sacrificaron a todos los especímenes mediante administración intramuscular de

Halatal® a la dosis de 50mg/kg. Se extrajo la próstata y la vesícula seminal de cada

animal, e inmediatamente se los pesó. Las muestras representativas de cada grupo

fueron colocadas en frascos de vidrio conteniendo formol al 10% y posteriormente

se les realizó un examen anátomo-patológico.

Según lo anterior, concluimos que el valerato de estradiol favorece la inducción de

Hiperplasia Prostática Benigna con enantato de testosterona en Rattus rattus var.

albinus.

Palabras claves: Valerato de Estradiol, Hiperplasia Prostática Benigna, Enantato

De Testosterona, Rattus rattus var. albinus

ABSTRACT

The reason of the present work of investigation was to determine the influence of

the estradiol valerate on the induction of Benign Hyperplasia Prostatic with

testosterone enantate in Rattus rattus var. albinus.

The animals of experimentation were distributed randomly in four groups of six

specimens each one.

The first group managed the affairs 1 mL of SSF (saline physiological solution) for

subcutaneous route (SCR), to the second group (Androgen Group) managed the

affairs him testosterone enantate to dose of 14mg/kg for SCR, to the third group




(Estrogen Group) one administered him estradiol valerate to dose of 1mg/kg for

SCR, the administration repeated itself to 5 days, to the fourth group (Androgen +

Oestrogen Group) one administered him testosterone enantate to dose of 14mg/kg

and estradiol valerate to dose of 1mg/kg both for VSC.

After having administered the respective treatments in every group, they sacrificed

themselves to all the specimens by means of Halatal's intramuscular administration

to the dose of 50mg/kg. There was extracted the prostate and the seminal bladder

of every animal, and immediately they were weighed. The representative samples of

every group were placed in glass flasks containing formaldehyde to 10 % and later

they an anatomy-pathological examination was realized.

According to the previous thing, we conclude that the estradiol valerate favors the

induction of Benign Hyperplasia Prostatic with testosterone enantate in Rattus rattus

var. albinus.

Key words: Estradiol Valerate, Benign Hyperplasia Prostatic, Testosterone

Enantate, Rattus rattus var. albinus

JURADO DICTAMINADOR

----------------------------------------------------------BLGO. GARAY MONTAÑEZ Héctor

PRESIDENTE




-------------------------------------------------Q.F. BARDALES VALDIVIA Jéssica

MIEMBRO

-------------------------------------------------Q.F. SILVA ARAUJO Alex

MIEMBRO

I. INTRODUCIÓN

La Hiperplasia Prostática Benigna (HPB) es uno de los problemas de salud

pública con mayor incidencia en la población, es la primera causa de consulta en

los servicios de urología y constituye la segunda causa de ingreso para intervención

quirúrgica. Afecta al 50% de varones mayores de 50 años y su incidencia aumenta

progresivamente con la edad. Sus causas más corrientes son el envejecimiento y la

presencia de andrógenos.1,2,8

Datos recientes estiman una prevalencia histológica que va del 8% en sujetos

de 40 años, 30% en sujetos de más de 69 años y 90% a partir de los 804. Además




se ha encontrado que desde los 30 años de edad ya se encuentran

manifestaciones histológicas hasta en un 10%2.

El desarrollo de la HPB comienza alrededor de la cuarta década de la vida con

un fenómeno focal, a partir de la quinta década se produce un incremento global y

rápido del volumen debido a un aumento de las células del tejido fibromuscular y

glandular 2,3. Esta hiperplasia ocasiona irritación y obstrucción de la uretra, además

de interferir con el funcionamiento urinario normal y provocar síntomas de orinado

frecuente, vaciamiento incompleto y la necesidad de orinar frecuentemente durante

la noche.9

Durante la última década el estudio de la HPB se ha sometido a un estricto rigor

científico, se ha avanzado en el conocimiento de su historia natural, los

conocimientos básicos se han aplicado en el estudio de la transformación

hiperplásica benigna, como son la importancia de las hormonas androgénicas y no

androgénicas, papel de los factores de crecimiento y su relación con la

angiogénesis, células neuroendrocrinas y apoptosis5,6,7.

La glándula prostática, al igual que otras del organismo, experimenta

variaciones fisiológicas en sus características estructurales y funcionales a lo largo

de la vida. En el aumento o disminución del volumen y número de los diferentes

tipos celulares que componen estos órganos se implican mecanismos de control

celular variados y complejos. 3,10

En esta glándula se distinguen grandes grupos celulares, a saber, las células

epiteliales, las neuroendocrinas y las globalmente denominadas estromales. Las

epiteliales son células secretoras que proceden de la proliferación y diferenciación

de las denominadas células madre próximas a la membrana basal. Distintos

trabajos experimentales sugieren que la estructura y función de estas células está

regulada, en gran manera, por el estímulo androgénico, pero sin embargo, no es

ésta la única señal que las modula. Las células basales poseen un metabolismo

basal importante con una alta tasa de transporte molecular por su citoplasma, lo

que indica su marcado estado de activación con distintas vías interaccionando en

su regulación.11,12




Las células neuroendocrinas, también localizadas en el epitelio, se clasifican en

función de las moléculas que preferentemente secretan. Las que contienen

serotonina y hormona estimulante del tiroides son las predominantes, aunque

también existen otras que producen serotonina y somatostatina. En la actualidad,

se sabe que el número de moléculas sintetizadas y secretadas por estas células es

mucho más elevado. 11,12

En el estroma, existen diferentes tipos celulares, entre los que predominan las

células musculares lisas, los fibroblastos, las neuroendocrinas, los linfocitos y

monocitos, células endoteliales, etc. Estas células en mayor o menor medida

secretan citocinas de carácter funcional, y algunas como el músculo liso o el

fibroblasto, también moléculas estructurales que constituyen la matriz del tejido.

Estas moléculas constituyen el entramado en el que se fijan las células ya que

establecen múltiples interacciones con moléculas de la superficie de la membrana

citoplasmática, así, las fibronectinas, fibras de colágeno, laminas, proteoglicanos

interaccionan con sus ligandos, como son las integrinas, las moléculas de adhesión,

etc. Debe señalarse que algunas de estas proteínas estructurales, como las

lamininas, también son secretadas por las células epiteliales.9,13

El crecimiento prostático está influenciado por un número considerable de

hormonas y factores. Entre estos podemos mencionar los factores endocrinos

(andrógenos, estrógenos, prolactina, insulina); señales neuroendocrinas

(serotonina, noradrenalina); factores paracrinos (factor de crecimiento de

fibroblastos: FGF y factor de crecimiento epidérmico: EGF, autocrinos (factor de

motilidad autocrino) e intracrinos, así como factores de la matriz extracelular, los

que establecen contacto directo con la membrana basal a través de integrinas y

moléculas de adhesión como los glicosaminoglicanos. También están involucradas

las interacciones célula-célula en la regulación del crecimiento glandular. 9,13

Varios autores mencionan que los estrógenos, sinérgicamente con los

andrógenos, estimulan el estroma prostático, ya que aumentan el número de

receptores de andrógenos y favorecen la producción de dihidrotestosterona (DHT) y




colágeno, a la vez que favorecen la apoptosis. Sin embargo no está completamente

esclarecido. 13,14

Diversos modelos experimentales han demostrado que la insulina influye en el

crecimiento glandular y ejerce efecto permisivo sobre la acción androgénica en este

tejido. A su vez se ha señalado la presencia de factores de crecimiento similares a

la insulina ("insulin-like growth factors", IGF) en sus dos isoformas: IGF-I e IGF-II.9,15

La prolactina (PRL) es otro factor no esteroideo que regula el crecimiento,

desarrollo y diferenciación de la próstata, esta ejerce su efecto de manera

independiente a los andrógenos. En los hombres los niveles séricos de PRL

aumentan con la edad, indicando que el papel de la PRL en el desarrollo de la HBP

incrementa su importancia con el aumento de la edad. Se ha demostrado que las

acciones proliferativas de la PRL se miden por un mecanismo de transducción de

señales a través de los receptores de PRL. También otros investigadores sugieren

que la PRL en sinergismo con los andrógenos promueve el crecimiento y la

proliferación de las células prostáticas.9,13,15

En la actualidad se consideran factores hereditarios, ambientales y

hormonales en el desarrollo y aparición de la HPB. Se ha observado que los

antecedentes familiares constituyen un factor de riesgo importante para el

desarrollo de la enfermedad, de hecho la HPB puede ser inducida genéticamente

en ratones transgénicos mediante activación del gen Int-28. Entre los factores

ambientales se ha prestado atención a la dieta, destacan los fitoestrógenos.16,17

El balance estrógenos-andrógenos desempeña un papel importante, se

sabe que el cociente estrógenos/dihidrotestosterona (DHT) aumenta con la edad.

Este metabolito de la testosterona, la DHT, es necesario para el crecimiento y

mantenimiento de la actividad funcional de la próstata, así como para el desarrollo

de la HPB. La DHT se origina localmente a partir de la testosterona por medio de la

enzima 5 α-reductasa. La inhibición de esta enzima disminuye la acción de la DHT

sobre la próstata, pero anula los efectos sistémicos de la testosterona sobre el

crecimiento musculoesquelético, la espermatogénesis y la libido. La DHT también

posee propiedades inmunosupresoras específicas al inhibir la interleucina 4, la




interleucina 5 y el interferón gamma, mientras que los andrógenos anabólicos

tienen propiedades inmunoestimuladoras.14,18

Sin embargo existen algunas paradojas, como el hecho de que a mayor

edad suele descender el valor de andrógenos, incluyendo la DHT. Como

mencionamos anteriormente es justamente a mayor edad en donde encontramos

mayor incidencia de HPB15, mientras que los niveles de estrógeno permanecen

altos durante el proceso de envejecimiento. Los andrógenos y estrógenos son

considerados por actuar sinérgicamente en la estimulación celular durante la HPB.

Brinker hace referencia a varios estudios en los cuales se documenta que los

estrógenos tienen un papel significativo en la HPB a través de las interacciones

epiteliales-estromales.13,14

La testosterona es el principal andrógeno natural producido en las células de

Leydig de los testículos, en algunos tejidos ésta actúa directamente, mientras que

en otros primero se convierte en dihidrotestosterona, un derivado más potente. La

testosterona puede ser convertida en 17 –β estradiol. Después de la fijación al

receptor específico de andrógeno, la testosterona y la dihidrotestosterona se

localizan en los núcleos de las células banco para alterar la transcripción del

gen.18,19

Las funciones de la testosterona son diversas y dependen del tejido

involucrado, sobre el aparato genital masculino estimula el desarrollo de órganos

genitales externos y de la próstata. Al igual que los estrógenos, la testosterona en la

sangre está fija en gran parte a la proteína transportadora, globulina fijadora de

hormona sexual. Con el propósito de retrasar la absorción y prolongar la duración

de la acción, las testosteronas se han convertido a ésteres que son menos polares,

así por ejemplo el éster enantato es efecto por periodos de hasta tres semanas. 9,18,19

Los receptores estrogénicos (ER), como miembros de la superfamilia de

receptores nucleares, tienen estructura modular. Se han identificado las isoformas α

(ERα) y β (ERβ), que se distinguen por presentar diferencias en su secuencia de

aminoácidos. Estos receptores presentan 96% de homología de sus aminoácidos




constituyentes, aunque no es una regla aplicable a todas las regiones del receptor,

ya que la región de unión al ADN (DBD) es la que más similitud presenta, mientras

que la región de unión al ligando (LBD) sólo presenta un 53% de similitud.16,20

En el plasma los estrógenos penetran a sus células blanco en los tejidos

llamados “clásicos”, que se encuentran en el útero, glándula mamaria, placenta,

hígado, sistema nervioso central, sistema cardiovascular y hueso. Las células

blanco de estos tejidos presentan abundantes ERα. Existen otros tejidos

considerados “no clásicos”, en los que la presencia de ERα es relativamente menor,

pero que contienen cantidades significativamente mayores de ERβ. Entre estos

últimos se incluyen próstata, ovarios, testículos, glándula pineal, glándula tiroides,

paratiroides, suprarrenales y páncreas, vesícula biliar, piel, tracto urinario, tejido

linfoide, tejido eritroide, pulmón, epitelio intestinal, y algunas regiones del cerebro,

como el hipotálamo, cerebelo y lóbulo olfatorio. El tejido muscular estriado es

único, puesto que en él se expresa de manera elevada el ERβ y está casi ausente

el ERα. 17,20,21

En células de la línea celular identificada en la American Type Cell Cultural

Collection como T47D originada a partir de un tumor mamario, así como en

diferentes tejidos como el prostático y el epitelio de la glándula mamaria, los

estrógenos actúan en presencia del ERα como agonista, favoreciendo la

proliferación de los tejidos. El ERβ actúa de manera antagonista, inhibiendo la

proliferación del tejido, por lo que una misma hormona produce efectos opuestos,

dependiendo del receptor al que se una.17,20,21

Los ER son receptores nucleares que modulan la trascripción por su unión

específica a secuencias del genoma, así como a co-represores y co-activadores,

para regular la acción del complejo de la ARN polimerasa. Los efectos moduladores

de los ER sobre la trascripción se llevan a cabo en una serie secuencial de eventos.

La unión de los ER con los estrógenos induce cambios en la conformación del

receptor, que le permite al mismo tiempo disociarse de un complejo co-represor y

unirse con un complejo co-activador, lo cual le confiere la actividad de trascripción

de genes que contienen elementos de respuesta a los estrógenos (ERE). Por el




contrario, en ausencia de estrógenos, los ER se asocian con los co-represores que

inhiben la actividad de trascripción. 16,17,20

Los métodos farmacológicos constituyen herramientas muy valiosas a la

hora de encontrar actividad biológica en ciertas sustancias, las mismas que luego

de validar su efecto pueden constituirse en potenciales fármacos que servirían, con

un adecuado uso, para el manejo de enfermedades mejorando en última instancia

la calidad de vida de la población.22

Por todo lo mencionado, nos planteamos la siguiente interrogante:

¿Cuál es la influencia del valerato de estradiol sobre la inducción de Hiperplasia

Prostática Benigna con enantato de testosterona en Rattus rattus var. albinus?

Ante lo cual postulamos:

El valerato de estradiol favorece la inducción de Hiperplasia Prostática Benigna con


Para contrastar la hipótesis formulada se siguió un diseño experimental clásico

realizándose la inducción de hiperplasia prostática benigna con testosterona,

estradiol o testosterona más estradiol, según grupos de estudio.

En el presente trabajo de investigación, nos planteamos determinar la influencia del

valerato de estradiol sobre la inducción de Hiperplasia Prostática Benigna con


II. MATERIAL Y MÉTODOS

2.1. MATERIALES




2.1.1. Material Biológico

Animales de experimentación:

Se emplearon 24 especímenes machos de Rattus rattus var. albinus

adquiridos del Bioterio de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la

Universidad Nacional de Trujillo (UNT) de la ciudad de Trujillo, con 132,5 g de

peso y 3 meses de edad en promedio, todos se mantuvieron con alimentación

balanceada y en las mismas condiciones ambientales.

2.1.2. Material de Laboratorioa.Material de Vidrio:

– 01 Vaso de precipitación de 250 mL

– 01 Vaso de precipitación de 500 mL

– 01 Matraz 500 mL

– 01 Pipeta de 10 mL

– 01 Pipeta de 1mL

– 01 Probeta de 50 mL

– 02 lunas de reloj

– 01 embudo

– 01 bagueta

b.Reactivos y fármacos:

– Agua destilada

– Testoviron® (enantato de testosterona) 250mg/mL

– Halatal®

– Estrovet®

– Fenilbutazona

– Formol al 10%

– Alcohol yodado

– Violeta de Genciana 1%




– Cloruro de sodio 0,9%

c.Equipos y aparatos:

– Balanza analítica

– Estufa

– Refrigerador

– Cocina eléctrica

– Procesador de muestras

– Microscopio

– Micrótomo

d.Otros:

– Guantes estériles

– Jeringas hipodérmicas

– Algodón

– Cámara digital

– Alimento balanceado para ratas

– Detergente

– Jabón desinfectante

– Gasa

– Frascos de vidrio

– Desinfectantes

– Bolsas plásticas

2.2. MÉTODOS

2.2.1. Inducción de Hiperplasia Prostática Benigna en Rattus rattus var. albinus23,24

Para el presente estudio se trabajó con cuatro grupos, cada uno constituidos

por 6 especímenes de Rattus rattus var. albinus

Distribución de los grupos:




Grupo SSF: Se le administró 0.2 mL de SSF solución salina

fisiológica por vía subcutánea (VSC). Después de 15 días todos los

especímenes fueron sacrificados para extraerles la próstata y la

vesícula seminal, luego se midieron los pesos.

Grupo Andrógeno: Se les orquiectomizó, luego de una semana

de recuperación se administró enantato de testosterona a dosis de

14mg/kg por VSC. Después de 15 días todos los especímenes

fueron sacrificados para extraerles la próstata y la vesícula

seminal, luego se midieron los pesos.

Grupo Estrógeno: Se les orquiectomizó, luego de una semana de

recuperación se administró valerato de estradiol a dosis de 1mg/kg

por VSC, se repitió la administración a los 5 días. Después de 15

días contados a partir de la primera dosificación, todos los

especímenes fueron sacrificados para extraerles la próstata y la

vesícula seminal, luego se midieron los pesos.

Grupo Andrógeno + Estrógeno: Se les orquiectomizó, luego de

una semana de recuperación se administró enantato de

testosterona a dosis de 14mg/kg por y valerato de estradiol a dosis

de 1mg/kg ambos por VSC, se repitió la administración de valerato

de estradiol a los 5 días. Después de 15 días contados a partir de

la primera dosificación todos los especímenes fueron sacrificados

para extraerles la próstata y la vesícula seminal, luego se midieron

los pesos.

2.2.2. Comprobación del modelo experimental en Rattus rattus var. albinus

Después de haber administrado los tratamientos respectivos en cada grupo, se

sacrificaron a todos los especímenes mediante administración intraperitoneal

de Halatal® a la dosis de 50mg/kg. Se extrajo la próstata y la vesícula seminal

de cada animal, e inmediatamente se los pesó. Las muestras fueron colocadas




en frascos de vidrio conteniendo formol al 10% para posteriormente realizar

un examen anátomo-patológico.

2.2.3. Análisis estadístico

Los resultados obtenidos se procesaron empleando el programa SPSS,

versión 19,0, reportándose tablas con estadísticas resumen para cada grupo:

media aritmética y desviación estándar. La influencia del valerato de estradiol

fue analizado empleando el ANOVA, posteriormente se realizó la prueba HSD

de Tukey para determinar si el efecto es real.




III.RESULTADOS

Cuadro Nº 01: Medias y desviación estándar de los pesos de las próstatas y vesícula seminal en los grupos de estudio. Los grupos SSF, Andrógeno y Estrógeno recibieron NaCl 0.9%, enantato de

testosterona y valerato de estradiol respectivamente. El grupo andrógeno +

estrógeno recibió enantato de testosterona más valerato de estradiol.

Parámetros SSF Andrógeno Estrógeno Andrógeno +

Estrógeno

Próstata (g)

0,112±0,02 0,467±0,103# 0,122±0,019* 0,650±0,383#,+

Vesícula

seminal (g) 0,23±0,05 1,52±0,31# 0,19±0,02* 1,37±0,12#,+

#p<0,05 comparado con el grupo SSF.

*p<0,05 comparado con el grupo Andrógeno.+p<0,05 comparado con el grupo Estrógeno.

Grafico Nº 01: Pesos de las próstatas según grupos de estudio.

SSF Andrógeno Estrógeno Andr+Estróg0.000

0.100

0.200

0.300

0.400

0.500

0.600

0.700


*p<0,05 comparado con el grupo Andrógeno.


#

*

#,+



+p<0,05 comparado con el grupo Estrógeno.

Grafico Nº 02: Pesos de las vesículas seminales según grupos de estudio.

SSF Andrógeno Estrógeno Andr+Estróg0.000

0.200

0.400

0.600

0.800

1.000

1.200

1.400

1.600


*p<0,05 comparado con el grupo Andrógeno.+p<0,05 comparado con el grupo Estrógeno.


*

#

#,+



IMÁGENES REPRESENTATIVAS DEL ESTUDIO ANATOMO-PATOLÓGICO DE LAS PRÓSTATAS, SEGÚN GRUPOS DE ESTUDIO

Grupo SSF:

Figura 01. Próstata de rata. Grupo de glándulas tubuloalveolares compuestas

individuales. Aspecto aparentemente normal mostrando el típico de aspecto lobular.

Escasas concreciones prostáticas. H&E (x10x)




Figura 02. Próstata de rata. Detalle de glándula tubuloalveolares en la que se

muestra el típico epitelio cilíndrico seudoestratificado con células de aspecto

prismático (flecha) rodeadas de tejido muscular liso (*) H&E (x40)

Grupo Andrógeno:Figura 03. Próstata de rata. Detalle del epitelio de revestimiento alveolar en

hiperplasia glandular de la parte diseminada de la próstata de rata. Se observa

perfil epitelial irregular, con yemas papilares dentro de la luz alveolar. (H & E x10)




Figura 04. Próstata de rata. Detalles del epitelio de revestimiento alveolar de

hiperplasia glandular de la parte diseminada de la próstata de rata. Epitelio alveolar

estratificado con incremento de la altura epitelial tipo cilíndrico. (H & E x40)

Grupo Estrógeno:Figura 05. Próstata ratas. Superior central: grupo de glándulas contenidas en tejido

conectivo muscular típico y característico. H&E (x40)




Figura 06. Próstata de rata. Estructura glandular con ausencia de proliferación

epitelial, presencia de vasos sanguíneos y tejido conectivo. (H&E x40)

Grupo Andrógeno + Estrógeno:Figura 07. Próstata de rata. Glándula túbulo alveolar rodeada de abundante

musculatura lisa y fibras colágenas entrecruzadas. (H&E x10)




Figura 08. Próstata de rata. Glándulas túbuloalveolares. Hiperplasia (*), las

interdigitaciones reducen la luz tubular. (H&E x40)




IV.DISCUSIÓN

La hiperplasia benigna de próstata agrupa una constelación de acontecimientos

que hacen referencia al incremento del tamaño glandular de patogenia no bien

definida y carácter no neoplásico caracterizado histológicamente por un proceso de

naturaleza hiperplásica que incluye múltiples elementos celulares y moleculares.

La relación directa entre la HPB y la acción de la testosterona es conocida18, sin

embargo actualmente se admite un parcial desconocimiento en la etiopatogenia de

esta enfermedad9,15, además el papel de los mecanismos implicados todavía no han

sido identificados con carácter definitivo12. Por tanto la importancia práctica del

estudio del proceso de crecimiento y desarrollo de la próstata se desprende de su

propia dificultad.

Por otro lado, contar con un modelo experimental de HPB que asemeje la

historia natural de esta patología nos otorgaría menos incertidumbre al momento de

extrapolar resultados obtenidos en modelos animales de acciones de drogas con

potencial efecto terapéutico en la referida dolencia.




Bustamante, Campos y col.24 indujeron hiperplasia en ratas albinas con

enantato de testosterona, ellos reportan aumento del epitelio cilíndrico glandular,

así como tejido conjuntivo fibroso. Milián, Vásquez y col25. también hacen uso del

andrógeno y obtienen resultados similares.

En el cuadro N°01 se puede observar que los pesos promedio de las próstatas

del grupo Andrógeno son mayores a los del grupo SSF (p<0.05). El examen

histopatológico del grupo SSF revela la arquitectura normal de las glándulas

prostáticas, es notorio el epitelio cilíndrico seudoetratificado por la disposición de

los núcleos a diversas alturas. El citoplasma aparece claro e inestructurado que

indicaría la presencia de gránulos de secreción. Mientras que en las próstatas del

grupo Andrógeno se determinó que el enantato de testosterona tiene efecto

moderado en provocar hiperplasia prostática benigna al observar un incremento en

la altura epitelial y por consiguiente una reducción en la luz de las glándulas

tubuloalveolares.

La testosterona administrada por vía parenteral se absorbe lentamente, el éster

enantato es hidrolizado liberando testosterona libre en los sitios de inyección. En la

próstata, así como en otros tejidos, se convierte en Dihidrotestosterona (DHT) por

acción de la 5α-reductasa, en estos tejidos las DTH es el andrógeno dominante.26

Tanto la testosterona como la DHT se unen a receptores intracelulares específicos

de aproximadamente 120 KDa, la DTH se une en un sitio del receptor cerca de un

grupo carboxilo terminal. El complejo receptor - esteriode se activa y es

transportado al núcleo celular uniéndose a una región reactiva en el ADN, con esto

se aumenta la actividad de la ARN polimerasa y la formación de ARNm con lo que

se estimula la síntesis de proteínas celulares.24,26 Por consiguiente, la acción de la

testosterona es proliferativa y al mismo tiempo secretora.

Se ha demostrado que las células estromales y las epiteliales presentan

receptores de testosterona, sin embargo en cultivos de células epiteliales aisladas

se ha observado que los andrógenos no tienen efecto mitogénico, mientras que en

las estromales sí. Los andrógenos en las células estromales inducen la liberación

de un factor de crecimiento denominado FGF-b que posteriormente ha sido




denominado PrGF (factor de crecimiento prostático), este y otros factores son la

causa de que la célula pueda pasar de la fase de reposo G0 a la primera fase de la

mitosisG1.14,15

Los pesos de las próstatas de los especímenes del grupo Estrógeno (cuadro

Nº01) no difieren significativamente de los pesos del grupo SSF (p>0.05), igual

comportamiento se observa con las vesículas seminales. De los dos tipos de

receptores estrogénicos, ERα y ERβ, el receptor predominante en el tejido

prostático es el ER- β, mientras que el ERα favorece la proliferación celular, el ER-

β actúa de manera antagonista inhibiendo la proliferación de tejido. Estos

receptores presentan una homología estructural del 96% y su ligando endógeno es

el 17β-estradiol.16,17

Según el cuadro Nº01, gráficos Nº 01 y 02 los pesos de las próstatas y

vesículas seminales son los que presentan mayor peso. Del mismo modo en las

Figuras 07 y 08 se observa hiperplasia constante en epitelio así como en el

contenido del estroma al incremento de las fibras musculares lisas y conectivas.

La testosterona es un crítico mediador del crecimiento prostático, se localiza

principalmente en células del estroma y en células epiteliales. En ambos tipos de

células, enlaza los receptores de andrógenos nucleares y las señales de la

transcripción genética para la formación de determinados factores de crecimiento

que son mitogénicos a las células del epitelio y del estroma.10,19

El Factor de Crecimiento de Fibroblastos- b (FGF-b) denominado por Jabobs

como Factor de Crecimiento Prostático (PrGF) es el principal factor de crecimiento

involucrado en el crecimiento prostático, éste induciría la proliferación de células

prostáticas mesenquimales y a través de un Factor de Crecimiento Epitelial (EGF)

induciría la proliferación del epitelio circundante.15,21

Otro factor de crecimiento involucrado es el TGF-β (Factor de Crecimiento

Trasnformador Beta), no está muy esclarecido el papel que juega este factor en el

crecimiento prostático, pero se sabe que el TGF-β1 inhibe la mitosis en células

prostáticas, mientras que los andrógenos inhiben la expresión de TGF-β1, por lo




que la testosterona tendría además, una acción indirecta para estimular la

proliferación celular.15,27

Paradójicamente el TGF β estimula la expresión de ARNm para FGF-b, por lo

que su efecto puede ser difuso. Por otro lado, en la castración aumentan los niveles

de TGF β, (arjona) siendo importante entonces la orquiectomización en modelos

animales de HPB.9,27

Tanto andrógenos como estrógenos deben estar presentes para producir una

hiperplasia/hipertrofia significativa. Perros viejos con HPB han demostrado que

secretan 40% menos testosterona, 15% menos de 5 alpha-dHT y 60% más

estradiol que los perros normales. Esta alterada relación estrógeno-andrógeno

sensibiliza la próstata de manera que los estrógenos priman. Los estrógenos

pueden aumentar el número de los receptores de andrógenos en el tejido prostático

y pueden formar metabolitos con actividad de radicales libres que dañan el tejido

prostático alterando su respuesta a la DHT28.

Investigaciones realizadas en Suecia revelan que un metabolito de la DHT, 3β-

androstanediol, tiene todas las características del ligando natural para el receptor

estrogénico β (ER- β). La DHT por acción de la 3β-hidroxiesteroide deshidrogenasa

da lugar al 3β-androstanediol. Este último a través del ER- β modula la

diferenciación celular en el tejido prostático.29

Nuestros hallazgos nos permiten tener una mejor aproximación del rol que

desempeñan los estrógenos en el tejido prostático, actuarían como sensibilizadores

o facilitadores de la acción de los andrógenos. Quedaría por dilucidar el efecto de

sustancias con actividad estrogénica, sobretodo las presentes en la alimentación y

las medioambientales30, sobre la ocurrencia de HPB en la población y así adicionar

un punto de control más en la prevención de esta enfermedad. Además, en los

modelos farmacológicos para inducir HPB debería utilizarse nuestra pauta,

andrógeno más estrógeno, pues se consigue mayor grado de hiperplasia.




V. CONCLUSIONES

– El valerato de estradiol favorece la inducción de Hiperplasia Prostática

Benigna con enantato de testosterona en Rattus rattus var. albinus.




VI.REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Lozano J. Diagnóstico y tratamiento de la hiperplasia benigna. Offarm. Vol

22(5). 2003.

2. Unda M, et al. Características sociosanitarias y diagnósticas del paciente

prostático en España a finales del siglo XX. Actas Urol Esp. 25(3), 200-206.

2006.

3. Resel L. Hiperplasia Benigna de Próstata. Bases diagnósticas y

terapéuticas. Ed. Enar. Madrid. 1993.

4. Rosas M. Hiperplasia Benigna de Próstata. Síntomas, diagnóstico y

estrategia terapéutica. Offarm. 25(8). 2006.

5. Girman C. Natural history of prostatism: relationship among symptoms,

prostate volumen and peak uninary flow rate. J Urol. 153, 1510-1515.1995.

6. Guess H. Benign prostatic hyperplasia: Antecedents and natural history.

Epidemiol Rev. 14, 131-153. 1992

7. Di Silvero F. Etiopatología, aspectos novedosos en HPB. En Vicente J.

acción Médica. Barcelona. 2001. 21-39.

8. Bellma A. Evaluación del extracto lipofílico de Cucurbita pepo L. sobre la

hiperplasia prostática inducida por andrógenos. Rev Cubana Plant Med v.11

n.2 Ciudad de la Habana abr.-jun. 2006.

9. Rodríguez M, Baluja I. Patologías benignas de la próstata: prostatitis e

hiperplasia benigna. Rev Biomed 2007; 18:47-59.

http://www.uady.mx/sitios/biomedic/revbiomed/pdf/rb071816.pdf

10. Sandhu J. Therapeutic options in the treatment of benign prostatic

hyperplasia. Patient Preference and Adherence 2009:3 213–223.

www.dovepress.com

11. Monsef N, Soller M. HIF1α iforms in benign and malignant prostate tissue

and their correlation to neuroendocrine differentiation. BMC Cancer 2010,

10:385.

http://www.biomedcentral.com/1471-2407/10/385


http://www.dovepress.com/

http://www.uady.mx/sitios/biomedic/revbiomed/pdf/rb071816.pdf



12. Johnson A, O'Connell M y col. Androgenic dependence of exophytic tumor

growth in a transgenic mouse model of bladder cancer: a role for

thrombospondin-1. BMC Urology 2008, 8:7.


13. Bankhoff H, Remberger K. Morphogenetic concepts of normal and abnormal

growth in the human prostate. Symposium 16: Advances in prostate

pathology. Rev Esp Patol. 1999; Vol. 32, N 53.

14. Lopez A. Benign and malignant stromal lesions of the prostate. Symposium

16: Advances in prostate pathology. Rev Esp Patol. 1999; Vol. 32, N 03.

15. Fernandez M, Pereira I. Hiperplasia Benigna de Próstata: una afección de

elevada prevalencia en el paciente de edad avanzada. Rev Esp Geriatr

Gerontol. 2008; 43(1):44-51.

16. Jeng Y, Kochukov M y col. Membrane estrogen receptor-α-mediated

nongenomic actions of phytoestrogens in GH3/B6/F10 pituitary tumor cells.

Journal of Molecular Signaling 2009, 4:2.

http://www.jmolecularsignaling.com/content/4/1/2

17. Pérez J, Aguilar A y col. Los fitoestrógenos y el efecto de su consumo en

diferentes órganos y sistemas de animales domésticos. Agricultura Técnica

(Chile). 67(3): 325-331.

18. Bain J. The many faces of testosterone. Clinical Interventions in Aging

2007:2(4) 567–576.

19. Rossi M, Roumeguère T. Silodosin in the treatment of benign prostatic

hyperplasia. Drug Design, Development and Therapy 2010:4 291–297.

www.dovepress.com

20. Crasto Ch. Hydrophobicity profiles in G protein-coupled receptor

transmembrane helical domains. Journal of Receptor, Ligand and Channel

Research 2010:3 123–133.

www.dovepress.com

21. Gruber C, Schugguel W, y col. Production and actions of estrogens. N Engl J

Med, Vol. 346, No. 5. January 31, 2002.

www.nejm.org

22. Campos J. Efecto hipolipidémico del decocto de las hojas de Artocarpus

altilis “árbol del pan” en Rattus rattus var. albinus con hiperlipidemia

inducida. Tesis para optar el grado de Maestro en Ciencias UNC. 2010.


http://www.nejm.org/



http://www.jmolecularsignaling.com/content/4/1/2




23. CYTED. Programa Iberoamericano de Ciencia y Tecnología para el

desarrollo. Manual de técnicas de investigación. 1995.

24. Bustamante F, Campos J y col. Efecto del extracto acuoso de la raíz de

Gynerium sagittatum (Aublet) P. Beauv “caña brava” sobre la inducción de

hiperplasia prostática benigna en Rattus rattus var. albinus. Jornadas de

Investigación Facultad de Farmacia y Bioquímica. UNT 2010.

25. Milián, Vásquez y col. Validación histológica de un posible modelo de

hiperplasia nodular prostática inducido con enantato de testosterona

(100mg/mL). Rev. chil. cienc. méd. biol;15(1):5-13, 2005.

http://bases.bireme.br/cgi-bin

26. Katzung B. Farmacología Básica y Clínica. 9a ed. Ed. Manual Moderno

S.A. México 2005. p.662.

27. Eikenberry S, Nagy J. The evolutionary impact of androgen levels on

prostate cancer in a multi-scale mathematical model. Biology Direct 2010,

5:24

http://www.biology-direct.com/content/5/1/24

28. Thibaut J, Santander J y col. Estudio comparativo de la próstata en perros

mediante ecografía transrectal y transabdominal. rch Med Vet 41, 61-66

(2009).

http://www.scielo.cl/scielo.

29. Imamov O, Lopatkin N y col. Estrogen Receptor b in Prostate Cancer. N

Engl J Med 351;26. December 23, 2004

www.nejm.org

30. Serrano N, Fernández M. Disruptores endocrinos. El caso particular de los

xenobioticos estrogenicos I. Estrogenos naturales. Rev. Salud Ambient

2001;1(1): 6-11

http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/cd29/disruptores2.pdf


http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/cd29/disruptores2.pdf

http://www.nejm.org/

http://www.scielo.cl/scielo

http://www.biology-direct.com/content/5/1/24

http://bases.bireme.br/cgi-bin



ANEXOS




ANEXO 01: ANÁLISIS ESTADÍSTICO DE LOS PESOS DE LAS PRÓSTATAS Y VESÍCULAS SEMINALES

Cuadro Nº02: Análisis de varianza para los pesos de las próstatas en los grupos de estudio

ANOVASuma de cuadrados gl Media cuadrática F Sig.

Inter-grupos 1.2716 3 0.42386667 10.69965081 S

Intra-grupos 0.7923 20 0.039615

Total 2.0639 23

gran

media

0.3375

intergrupo

s MSA

1.27155 0.4287

intragrupo

s MSE

0.7923 0.0396




COMPARACIONES MÚLTIPLES

GRUPO A GRUPO B

DIFERENCIA

MEDIASSIGNIFI

HSD Tukey

1

2 -0.3550 S

0.251845191

3 -0.0100 NS

4 -0.5383 S

2

1 0.3550 S

3 0.3450 S

4 -0.1833 NS

3

1 0.0100 NS

2 -0.3450 S

4 -0.5283 S

4

1 0.5383 S

2 0.1833 NS

3 0.5283 S

Cuadro Nº03 : Análisis de varianza para los pesos de las vesículas seminales en los grupos de estudio

ANOVA

Suma de cuadrados gl Media cuadrática F Sig.




Inter-grupos 9.1888 3 3.06293333 106.1675332 S

Intra-grupos 0.5770 20 0.02885

Total 9.7658 23

gran media

0.8254

intergrupos MSA

9.1888458

3 3.0629

intragrupos MSE

0.57695 0.02885

COMPARACIONES MÚLTIPLES

GRUPO A GRUPO B

DIFERENCIA

MEDIASSIGNIFICANCIA

HSD Tukey

1

2 -1.2833 S

0.214960655

3 0.0483 NS

4 -1.1333 S

2

1 1.2833 S

3 1.3317 S

4 0.1500 NS

3

1 -0.0483 NS

2 -1.3317 S

4 -1.1817 S

4

1 1.1333 S

2 -0.1500 NS

3 1.1817 S




ANEXO 02: PANEL FOTOGRÁFICO

a. ORQUIECTOMIZACIÓN DE LOS ESPECÍMENES




b. EXTRACCIÓN DE LAS PRÓSTATAS Y VESÍCULAS SEMINALES




Laminas montadas de las próstatas


hiperplasia prostatica con androgenos y estrogenos

Science

Transcript of hiperplasia prostatica con androgenos y estrogenos