Influência do genótipo no potencial regenerativo de feijão-caupi cultivado in vitro
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Influência do genótipo no potencial regenerativo de feijão-caupi cultivado
in vitro
Dra. Laureen Michelle Houllou-KidoLab. Genética Molecular - UFPE
Cultura de tecidos no gênero Vigna• V. radiata, V. mungo, V. vexillata, V. sinensis,
etc
• Tecidos vegetais– Cotilédones– Eixo embrionário– Ápices caulinares– Folhas jovens
• Recalcitrância
Dados gerais
• Quantidade de fitorregulador (BAP, TDZ)– 2 a 35 mg.L-1
• Percentual de regeneração– De 1 a 52%
• Número de plantas por explante– De 1 a 12 / explante
Cultivares testadas
• IPA 206• IPA 207• IT 85F• BR 14 Mulato• Guariba
Taxas de regeneração
IPA 206 Cotilédone 65% Eixo Emb. 70%
IPA 207 Cotilédone 40% Eixo Emb. 35%
BR 14 Mulato Cotilédone 5% Eixo Emb. 10%
Demais Cotilédone 0% Eixo Emb. 0%
Indução de regeneração
• Fitorregulador: – BAP ou TDZ (sugestão – tratamento durante
15 dias com 15 mg.L-1 de BAP com posterior transferência para meio zero)
• β-arabinogalactan (efeito estimulatório da regeneração via cotilédone)
Necessidade de fitorregulador• IPA 206 e IPA 207
– Regeneração ocorre na ausência de fitorregulador
– BAP acelera o processo regenerativo e estimula a regeneração.
• Demais cultivares testadas– Necessitam de um estímulo (BAP) para iniciar
a regeneração
• Hipóteses:
– Diferença nas quantidades endógenas de fitorregulador
– Diferença na quantidade dos receptores na membrana celular (Células responsivas)
Características indicadoras de potencial regenerativo
• Intumescimento do tecido
• Alteração da coloração– Parcial ou total
Regeneração via cotilédones
• Início– Com aproximadamente três semanas
• Região do explante– Área em que foi retirado o embrião
Regeneração via cotilédones
IPA 206IT85F
Regeneração de meristema
Diferentes momentos da regeneração in vitro de feijão-caupi a partir de cotilédones
Cotilédone
Organogênese direta
Organogênese indireta
• Regeneração via cotilédones
– Associada a restos da epiderme do embrião
– Observada, na maioria dos casos, em apenas um dos cotilédones
Regeneração via eixo embrionário
• Início– Com aproximadamente quatro semanas
• Região do explante– Próxima a região do meristema apical
(polaridade da regeneração)
Meristemas
Organogênese direta
IPA206
IPA207
Eixo embrionário
Indução de calos organogênicos
• Ambos explantes respondem ao 2,4 –D
• Resposta também é cultivar específica
• Coloração esverdeada do calo indica potencial regenerativo
• Efeito do NaCl
Indução de calos
IPA 206
Aclimatação
• Baixa taxa de sobrevivência (20%)
• Alternativa – alteração do hormônio para indução do
desenvolvimento do sistema radicular– Alteração do substrato utilizado na
aclimatação
Desenvolvimento in vivo das plantas regeneradas
• Todas as plantas produziram flores e sementes (não afetou a fertilidade)
• Variação somaclonal – Novas características (porte, precocidade)
• Características variantes são herdáveis (S2).
Agradecimento
• UFPE• EMBRAPA
• IPA• UPE
• FACEPE• BNB
• FINEP