INQUÉRITO LABORATORIAL PARA AVALIAÇÃO DA CAPACIDADE DE DETECÇÃO DE PATÓGENOS DAS DOENÇAS...

INQUÉRITO LABORATORIAL PARA AVALIAÇÃO DA CAPACIDADE DE DETECÇÃO

DE PATÓGENOS DAS DOENÇAS TRANSMITIDAS POR ALIMENTOS

ELIANE MARTINS LANCEROTTO

MÔNICA TILLI REIS PESSOA CONDE

WILSON MANSHO

Coordenação: Almério de Castro Gomes - FSP/USP

Margarida M. M. B. Almeida - FSP/USP

José Cássio de Moraes - CVE/SES-SP

Maria Bernadete P. Eduardo - CVE/SES-SP

Curso de Especialização em Epidemiologia Aplicada às Doenças Transmitidas por Alimentos - FSP/USP e CVE/SES-SP

INQUÉRITO LABORATORIAL 1.Introdução e Justificativa

No mundo todo, o processo de urbanização e transição demográfica associado a um acelerado processo de industrialização e desenvolvimento tecnológico,vem gerando mudanças na estrutura alimentar e no perfil de doenças da população.

( WHO , 1997 )

INQUÉRITO LABORATORIAL 1. Introdução e Justificativa

Nova preocupação com segurança alimentar e com as doenças emergentes e reemergentes transmitidas por alimentos

Sistema de vigilância epidemiológica apresentando subnotificações que dificultam o dimensionamento do problema no Brasil


Desconhecimento dos profissionais de saúde sobre a importância da notificação e solicitação de exames

Papel do laboratório como elo entre as doenças da população, os profissionais de saúde e a vigilância epidemiológica na pirâmide de detecção de doenças


O laboratório é de vital importância para esclarecimento e determinação da fonte e patógeno responsáveis pelos surtos

Em termos de efetividade do laboratório nada é mais importante do que a seleção, coleta, transporte , armazenagem e uso de correta técnica de análise das amostras


Dificuldades enfrentadas em relação a tecnologias ainda não disponíveis no Brasil para todos os laboratórios, visando confirmação e ligação de casos esporádicos fazendo parte de um mesmo surto


AS INDICAÇÕES DE EXAMESAS INDICAÇÕES DE EXAMES Falta de preocupação nas solicitações

médicas em especificar a suspeita clínica e epidemiológica para direcionar o laboratório na pesquisa de determinados agentes


Os requisitos para a coleta:

a)Parasitas: recomendado o uso do preservante para manter a integridade dos parasitas

b)Bactérias: fezes frescas em meio de transporte ou somente em frasco seco

c) Vírus : frasco seco


Os requisitos para a armazenagem:

a) Bactérias: quando no meio de transporte estocagem a 4oC

b) Vírus : podem ser transportadas e armazenadas a uma temperatura de 4oC e se houver necessidade podem ser congeladas


Técnicas laboratoriais para bactérias:

Salmonella : meios mais seletivos seriam : SS, XLD e Hektoen. Para surtos seriam verde brilhante e sulfato de bismuto.

Quando a amostra não apresentar boas características usa-se caldo de enriquecimento ( selenito ou GN)


Ténicas laboratoriais para bactérias:

Shigella: os meios são XLD, SS. O meio TSI ( triple sugar iron ) é mais específico

Yersinia : ágar Mac Conkey dando-se um tempo adicional de 24 horas a temperatura ambiente ou CIN (Cefsulodin-igarsan-novobiocin )


Técnicas laboratoriais para bactérias :

Campylobacter : ágar - sangue - Campy em microaerofilia, ágar Mac Conkey,azul-eosina-metileno ainda meio de seletividade moderados : Hektoen e XLD.

E.coli O157H7: Mac Conkey Sorbitol


Técnicas laboratoriais para bactérias:

Vibrio: isolamento primário ágar- Mac

Conkey ou Mac Conkey Sorbitol ou TCBS (mais seletivo)


Técnicas laboratoriais para vírus:

Rotavírus: Métodos como prova imunológica enzimática e aglutinação por látex. Ainda ME, PCR, PAGE e outros


Técnicas laboratoriais para parasitas

Direta ou Wet Mount

Concentração

Coloração


OS CRITÉRIOS DE RECUSAOS CRITÉRIOS DE RECUSA - não rotuladas, sem identificação - tempo e transporte inadequados - recipiente inadequado - amostra não adequada em relação ao

exame pedido - amostras duplicadas


O ESTUDO DE REFERÊNCIAO ESTUDO DE REFERÊNCIA Estudo do CDC, de 1997, onde foram

pesquisados 230 laboratórios: 100% realizavam testes rotineiramente para

Salmonella, Shigella e Campylobacter 50% realizavam testes rotineiros para E.coli

O157:H7 30% para Yersinia 19% para Vibrio

INQUÉRITO LABORATORIAL 2. Objetivos da Investigação

2.1.Geral conhecer as tendências da freqüência de

isolamento dos patógenos através de um estudo nos laboratórios de análises clínicas que processam fezes

2.2. Específicos verificar a rotina de detecção de patógenos conhecer os tipos de testes e técnicas

laboratoriais

INQUÉRITO LABORATORIAL 3. Material e Métodos

3.1. Tipo de Estudo Estudo descritivo de laboratórios clínicos

que processam fezes para detecção de bactérias, vírus e parasitas


3.2. População de Estudo De um universo de 2400 laboratórios do Estado

de São Paulo Foram selecionados 800 - total de laboratórios

em São Paulo, Marília e Botucatu 376 Laboratórios processavam fezes Botucatu : 4 Marília : 8 São Paulo (Capital) : 77 laboratórios na áreas de

vigilância sentinela


3.2. População de Estudo Foram estudados 37 laboratórios em 3

cidades do Estado de São Paulo : São Paulo (capital), Botucatu e Marília.

Áreas geográficas correspondentes às áreas de implantação da Vigilância Ativa das DTA do CVE/SES-SP

Período do estudo - Julho a Setembro de 2000


3.2. População de Estudo Em São Paulo foram estudados 100% dos

laboratórios públicos ( 2 ) e ligados a universidades ( 2 ), grandes redes de laboratórios privados ( 3 ) e uma amostra dos demais privados ( 18 ) nas áreas de vigilância calculada pelo EPI-INFO programa Csample

Nas cidades de Botucatu e Marília foram estudados 100% dos laboratórios ( 4 e 8 respectivamente)


3.3. Fonte de Informação dos dados coletados

Cadastro de laboratórios do CREMESP Cadastro de Laboratórios das Vigilâncias

Sanitárias das DIR XIV-Marília e DIR XI-Botucatu

Questionário aplicado aos técnicos de laboratório

INQUÉRITO LABORATORIAL3. Material e Métodos

3.4. Tipo de Análise Desenvolvida3.4.1. Tratamento dos dados

Os dados obtidos através do questionário foram analisados e tratados estatisticamente pelo programa Csample.

Tabelas e gráficos foram elaborados para construir o perfil destes laboratórios


3.4. Tipo de Análise Desenvolvida

3.4.2. Questionário - perguntas e variáveis

Questionário elaborado com base em estudos do CDC/Atlanta/USA, adaptado e validado para nossa realidade através de entrevistas com técnicos de referência de laboratórios padrão, contendo 62 perguntas.


Exemplos de perguntas - “A E.coli O157:H7 faz parte da sua rotina de

exames de fezes ? [ ] Sim [ ] Não”

“Em quantas amostras fecais foram feitas culturas para Shigella em seu laboratório no ano de 1999?

____________”


Exemplos de perguntas - “Quando é feita a análise para E.coli O157: H7 qual o

meio de cultura/ágar que seu laboratório usa rotineiramente:

a) ágar Mac Conkey Sorbitolb) ágar Mac Conkey Sorbitol CTc) ágar Mac Conkey d) ágar Raibowe) caldo de enriquecimentof) outros , descreva_________________”

INQUÉRITO LABORATORIAL4. Resultados

Serão apresentados a seguir os resultados de nossa pesquisa através de análise de gráficos construídos com todos os dados obtidos nos questionários


Distribuição dos Laboratórios por cidade e categorias.

56%

11%

19%

3%

3%8%São Paulo Privados

São Paulo Públicos e Ligados asUniversidadesMarília Privados

Marília Públicos e LigadosLigados as UniversidadesBotucatu Privados

Botucatu Públicos e Ligados asUniversidades


Distribuição dos Laboratórios de São Paulo por categorias.

84%

16%

São Paulo Privados

São Paulo Públicos e Ligados asUniversidades


Distribuição dos Laboratórios de Marília por categorias.

87%

13%

Marília Privados

Marília Públicos e LigadosLigados as Universidades


Distribuição dos Laboratórios de Botucatu por categorias.

75%

25%

Botucatu Privados

Botucatu Públicos e Ligadosas Universidades

Percentual médio de laboratórios que recebem amostras para pesquisa de

bactérias nas cidades de São Paulo, Marília e Botucatu.

0,00%

10,00%

20,00%

30,00%

40,00%

50,00%

60,00%

70,00%

80,00%

90,00%

100,00%S

alm

on

ella

Sh

ige

lla

Ca

mp

ylo

ba

cte

r

E.c

oli

O1

57

H7

Vib

rio

Ye

rsin

ia

Bacterias

Percentual de recebimento de amostras para exames de bactérias em cada cidade no ano de

1999.

0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

1

Botucatu Marilia São Paulo 1* São Paulo**

Salmonella

Shigella

Campylobacter

E.coli O 157 H7

Vibrio

Yersinia

*São Paulo1-amostra de laboratórios privados **São Paulo-Laboratórios Públicos, grandes privados e universitários

Percentual de laboratórios que realizam rotineiramente exames para bactérias.

0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

90%

100%


Salmonella

Shigella

Campylobacter

E.coli O 157 H7

Vibrio

Yersinia


Porcentagem média de laboratórios que realizam exames de bactérias no próprio laboratório ou

envia para outros laboratórios

0,00%

10,00%

20,00%

30,00%

40,00%

50,00%

60,00%

70,00%

80,00%

90,00%

100,00%S

alm

onella

Shig

ella

Cam

pyl

obact

er

E.C

oli

O157 H

7

Vib

rio

Yers

inia

Em outros lab.

No proprio lab.

Porcentagem de laboratórios que utilizam meios de cultura para identificação de E.coli O 157 H7.

0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

90%

100%


Ágar MacConkeySorbitol (SMAC e CT)

SMAC+CT+OUTROS

OUTROS

*São Paulo1-amostra de laboratórios privados

**São Paulo-Laboratórios Públicos, grandes privados e universitários

Porcentagem de Laboratórios que utilizam meios de cultura para identificação de Vibrio.

0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

90%

100%

BOTUCATU MARILIA SÃO PAULO 1 * SÃO PAULO **

TCBS

TCBS eOUTROS

OUTROS

*São Paulo1-amostra de laboratórios privados

**São Paulo-Laboratórios Públicos, grandes privados e universitários

Porcentagem média de recebimento de exames para parasitas

0,00%

10,00%

20,00%

30,00%

40,00%

50,00%

60,00%

Criptosporidium Isospora Ciclospora Microsporidium

PARASITAS

Porcentagem de realização de exames de parasitas nos laboratórios das cidades.

0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

90%

100%


Criptosporidium

Isospora

Ciclospora

Microsporidium


Porcentagem média de laboratórios que testam vírus em relação as cidades

0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

90%



INQUÉRITO LABORATORIAL5. Conclusões

Salmonela e Shigella são as bactérias mais implicadas nos surtos esclarecidos provavelmente por serem as mais pesquisadas, e por fazerem parte da rotina da maioria dos laboratórios.

Campylobacter e Yersinia não são bactérias que fazem parte da rotina dos laboratórios sendo estas bactérias implicadas raramente em surtos por este motivo, pois não são bactérias pesquisadas rotineiramente


Vibrio cholerae - somente é pesquisado em São Paulo quando há uma suspeita clínica ou quando o médico solicita especificamente não fazendo parte da rotina de nenhum laboratório pesquisado.

Vírus - em São Paulo a grande maioria pesquisa somente o Rotavírus , sendo que somente um laboratório em São Paulo pesquisa Norwalk, Norwalk-like e Adenovírus.


Em relação aos parasitas os mais pesquisados são o Cryptosporidium e o Isospora mesmo assim na sua grande maioria quando é solicitado , portanto ficando restrito ao pedido, talvez seja outro motivo para tantos surtos sem respostas.

O Microsporidium e a Ciclospora são mais raramente pesquisados

Casos notificados de Janeiro a Agosto/2000 - CVE

INQUÉRITO LABORATORIAL

7.Simulando - Salmonella

228 casos

Casos estimados-40%da população

Casos atendidos- 32.7%solicitam exames

Casos do laboratório-90.9% são rotina251 casos

768 casos

1920 casos

Agradecimentos

Faculdade de Saúde Pública da Universidade de São Paulo

Centro de Vigilância Epidemiológica do Estado de São Paulo

Instituto Adolfo Lutz

Agradecimentos

Todos os laboratórios que participaram da nossa pesquisa

Agradecimentos especiais aos técnicos do Instituto Adolfo Lutz que colaboraram com sugestões para o questionário

“ OBSTÁCULOS E PROBLEMAS SÃO PARTE DA NOSSA VIDA.

O SUCESSO ACONTECE QUANDO VEMOS OS NOSSOS PROBLEMAS COMO FONTE

POTENCIAL DE DESPERTAR OPORTUNIDADES DE SE PRATICAR A PACIÊNCIA , APRENDER, E TER A CORAGEM DE MUDAR O QUE PRECISA

SER MUDADO”

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