Aula Prtica Mtodos Instrumentais de Anlises

Professora: Alunos:

Manaus/Amazonas.Setembro/2014

INTRODUOA espectrofotometria o mtodo de anlise ptico mais usado nas investigaes biolgicas e fsico-qumicas. O espectrofotmetro um instrumento que permite comparar a radiao absorvida ou transmitida por uma soluo que contm uma quantidade desconhecida de soluto, e uma quantidade conhecida da mesma substncia. Todas as substncias podem absorver energia radiante, mesmo o vidro que parece completamente transparente absorve comprimentos de ondas que pertencem ao espectro visvel.A espectrofotometria um mtodo analtico que baseia-se na interao (absoro ou emisso) da matria com a energia radiante, ou seja, radiao eletromagntica quando os eltrons se movimentam entre nveis energticos. A absoro da radiao luminosa acontece nos comprimentos de onda entre o ultravioleta e o infravermelho no espectro da radiao eletromagntica. Um espectrofotmetro um aparelho que faz passar um feixe de luz monocromtica atravs de uma soluo, e mede a quantidade de luz que foi absorvida e a luz transmitida por essa soluo. Usando um prisma, o aparelho separa a luz em feixes com diferentes comprimentos de onda. O espectrofotmetro permite saber que quantidade de luz absorvida a cada comprimento de onda. As substncias tm diferentes padres de absoro, a espectrofotometria permite identificar substncias com base no espectro da substancia. Permite tambm quantific-las, uma vez que a quantidade de luz absorvida est relacionada com a concentrao da substncia.

OBJETIVOA aula prtica teve como principal objetivo demonstrar o uso do equipamento e anlise do espectrofotmetro e o preparo das solues padro e a soluo denominada como branco, ambas realizadas em laboratrio da aula do presente estudo, e as comparaes de nanmetro com o comprimento de onda.

METODOLOGIAOs materiais utilizados foram: gua destilada, reagente de biureto, protenas totais, duas cubetas, papel para limpeza de cubetas, amostras de solues de cores diferentes e espectrofotmetro.O procedimento realizado na aula foi fazer um tubo chamado de branco contendo 1,5 mL de gua destilada e mais 2,5 mL de reagente de biureto. Outro tubo denominado de padro contendo 0,5 mL de padro de protenas totais mais 1 mL de gua destilada e mais 2,5 mL de reagente de biureto. Aps observar uma mudana na colorao, os tubos foram agitados e incubados, aps 15 minutos a 35C. Aps retirar da incubao a colorao o tubo branco para o tubo padro foi bem visvel, aps essa etapa foi levado ao espectrofotmetro e lido a absorbncia dos tubos, teste de comprimento de onda, usando o branco em todas as medies.

RESULTADOSAps conhecer o espectrofotmetro e as solues preparadas, foi realizada a limpeza das cubetas e colocado em duas outras cubetas os reagentes e iniciado a leitura colocando o branco em todas as medies. As medies feitas foram em nanmetros: 400, 450, 500 e 600, e comparado ao comprimento de onda analisado pelo espectrofotmetro. Como ser demonstrado no grfico a seguir:

CONCLUSOO trabalho tornou possvel um maior aprendizado do funcionamento do espectrofotmetro, alm da preparao de solues para leitura a partir de uma soluo padro, e a soluo branca que lido a cada medio para no alterar o resultado analisado, como tambm a diluio em nanmetros para se tornar possvel a leitura no aparelho.REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

SECA, Ana. Espectrofotometria. Disponvel em: . Acesso em: 23 Setembro. 2014.EWING, Galen Wood. Mtodos Instrumentais de anlise qumica. So Paulo: Editora Edgard Blucher, v.1, 1972.