Padrões, calibradores e amostras controle. Padrões Primários Obtidos de produtos químicos...

Padrões, calibradores e Padrões, calibradores e amostras controleamostras controle

Padrões PrimáriosPadrões Primários

Obtidos de produtos químicos altamente Obtidos de produtos químicos altamente purificados que podem ser pesados ou purificados que podem ser pesados ou medidos diretamentemedidos diretamente

Solução cuja concentração seja conhecida de maneira exata

Padrões primáriosPadrões primários

A solução é geralmente aquosa;A solução é geralmente aquosa; Alto grau de pureza: 99,98%Alto grau de pureza: 99,98% Alta estabilidade: não podem decompor Alta estabilidade: não podem decompor

com aquecimento e não podem ser com aquecimento e não podem ser higroscópicos;higroscópicos;

Composição definida;Composição definida; Usados para calibração de métodos.Usados para calibração de métodos.

Padrões secundáriosPadrões secundários

São preparados a partir de padrões São preparados a partir de padrões primários;primários;

Sua concentração é obtida através de Sua concentração é obtida através de métodos calibrados com um padrão métodos calibrados com um padrão primário.primário.

Laboratórios clínicos:Laboratórios clínicos: Padrões de Padrões de Referência Certificados (SRMs) do Referência Certificados (SRMs) do National Institute of Standards and National Institute of Standards and Technology (NIST).Technology (NIST).

Calibradores protéicosCalibradores protéicos

Possuem uma matriz protéica e a Possuem uma matriz protéica e a concentração dos analitos é conhecida e concentração dos analitos é conhecida e definida.definida.

São padrões secundários;São padrões secundários; Limitações matriz protéica respostas Limitações matriz protéica respostas

diferentes em diferentes métodos.diferentes em diferentes métodos. O ideal é usar soros frescos congelados e O ideal é usar soros frescos congelados e

padronizados (materiais mais próximos padronizados (materiais mais próximos química e fisicamente dos soros de química e fisicamente dos soros de pacientes)pacientes)

Amostras controleAmostras controle

Empregadas exclusivamente para fins de Empregadas exclusivamente para fins de Controle da Qualidade e não devem ser usadas Controle da Qualidade e não devem ser usadas para calibração.para calibração.

Não possuem concentração de analitos Não possuem concentração de analitos exatamente conhecida média e faixa de exatamente conhecida média e faixa de variação permitida.variação permitida.

Servem para monitorar a precisão através da Servem para monitorar a precisão através da reprodutibilidade das leituras.reprodutibilidade das leituras.

BPLC o ideal é que o laboratório trabalhe BPLC o ideal é que o laboratório trabalhe com 2 controles em níveis diferentes de com 2 controles em níveis diferentes de concentração (normal e patológico).concentração (normal e patológico).

Amostras controleAmostras controle

Disponíveis nas formas liofilizada ou Disponíveis nas formas liofilizada ou congelada.congelada.

Limitações: efeito da matriz respostas Limitações: efeito da matriz respostas diferentes para os diversos métodos de diferentes para os diversos métodos de ensaio.ensaio.

Água reagente no laboratório Água reagente no laboratório clínicoclínico

Água de grau reagente (água pura);Água de grau reagente (água pura);

Processos de purificação: destilação e Processos de purificação: destilação e deionização (+ usado atualmente).deionização (+ usado atualmente).

Especificações da NCCLS para Especificações da NCCLS para água com grau reagenteágua com grau reagente

Tipo ITipo I Tipo IIaTipo IIa Tipo IIbTipo IIb Tipo IIITipo III

BactériasBactérias

(UFC/mL)(UFC/mL)

<10<10 1010 100100 --

pHpH NDND NDND NMNM 5,0-8,05,0-8,0

CondutividadeCondutividade

(Megaohm/cm)(Megaohm/cm)

1010 1,01,0 1,01,0 0,10,1

Silicatos – mg/LSilicatos – mg/L 0,050,05 0,10,1 0,10,1 1,01,0

PartículasPartículas <0,02 <0,02 µmµm NDND NDND NDND

Substâncias Substâncias

orgânicasorgânicas

~ 0~ 0 NDND NDND NDND

Parâmetros estabelecidosParâmetros estabelecidos

1.1. UFC/mL:UFC/mL: usar cultura quantitativa usar cultura quantitativa2.2. pH:pH: potenciômetro ou tiras potenciômetro ou tiras3.3. Condutividade:Condutividade: condutivímetro condutivímetro4.4. Silicatos:Silicatos: fazer prova em branco para fazer prova em branco para

dosagem do fósforo;dosagem do fósforo;5.5. Partículas:Partículas: filtrar em poro 0,2 filtrar em poro 0,2 µmµm6.6. Substâncias orgânicas:Substâncias orgânicas: avaliar avaliar

redução do permanganato; não redução do permanganato; não armazenar a água purificada.armazenar a água purificada.

Aplicações da água de grau Aplicações da água de grau reagentereagente

Tipo ITipo I Tipo IIaTipo IIa Tipo IIbTipo IIb Tipo IIITipo III

Dosagem de Dosagem de traços de traços de elementoselementos

EnzimologiaEnzimologia

Testes gerais Testes gerais de laboratóriode laboratório

Corantes e Corantes e coloraçõescolorações

Preparação de Preparação de meios de culturameios de cultura

Testes que Testes que requeiram requeiram máxima máxima

precisão e precisão e exatidãoexatidão

Microbiologia Microbiologia (sistemas não (sistemas não esterilizados)esterilizados)

Microbiologia Microbiologia (sistemas não (sistemas não esterilizados)esterilizados)

Limpeza geral Limpeza geral da vidrariada vidraria

Preparação de Preparação de calibradores e calibradores e

controlescontroles

Reagentes sem Reagentes sem preservativospreservativos

Reagentes sem Reagentes sem preservativospreservativos

Procedimentos Procedimentos qualitativosqualitativos

Procedimentos para preparação da Procedimentos para preparação da água com grau reagenteágua com grau reagente

1.1. FiltraçãoFiltração:: Pré-filtros:Pré-filtros: algodão ou vidro, removem algodão ou vidro, removem

98% das partículas98% das partículas Carvão ativado:Carvão ativado: remoção de matéria remoção de matéria

orgânica e cloroorgânica e cloro Filtro sub-mícron:Filtro sub-mícron: último estágio do último estágio do

sistema de purificação. Remove todas as sistema de purificação. Remove todas as partículas ou microrganismos maiores partículas ou microrganismos maiores que 0,2 que 0,2 µm.µm.


2. 2. Destilação:Destilação: Remoção de impurezas não voláteis;Remoção de impurezas não voláteis; Ebulição vigorosa origina contaminação Ebulição vigorosa origina contaminação

do destilado com sódio, potássio, do destilado com sódio, potássio, manganês, sulfatos, carbonatos.manganês, sulfatos, carbonatos.

Grande gasto de energiaGrande gasto de energia


3. 3. DeionizaçãoDeionização Remoção dos sais ionizados por meio de Remoção dos sais ionizados por meio de

troca iônica.troca iônica. Baixo custo de manutenção e pouco Baixo custo de manutenção e pouco

consumo de energia elétrica.consumo de energia elétrica. As colunas de troca iônica podem ser As colunas de troca iônica podem ser

regeneradas.regeneradas.

As colunas podem conter trocadores de As colunas podem conter trocadores de cátions, de ânions ou ambos (cátions, de ânions ou ambos (Resina Resina Trocadora de Leito MistoTrocadora de Leito Misto).).

Reação típica da resina trocadora de cátionsReação típica da resina trocadora de cátions

(RSO(RSO33)H + Na)H + Na+ + (RSO (RSO33)Na + H)Na + H++

Reação típica da resina trocadora de ânions:Reação típica da resina trocadora de ânions:

(RNR(RNR33)OH + Cl)OH + Cl-- (RNR (RNR33)Cl + OH)Cl + OH--


4. 4. Osmose ReversaOsmose Reversa Consiste na passagem da água por uma

membrana filtro molecular. Remoção de 95 a 97% das substâncias

orgânicas, bactérias e outras substâncias particuladas.

Remoção de 90 a 97% dos minerais dissolvidos e ionizados.

Eficiência dos Processos de Eficiência dos Processos de Purificação da ÁguaPurificação da ÁguaSólidos Sólidos

IonizadosIonizados

Gases Gases IonizadosIonizados

Matéria Matéria OrgânicaOrgânica

BactériasBactérias PartículasPartículas

DestilaçãoDestilação E/BE/B PP BB EE EE

DeionizaçãoDeionização EE EE PP PP PP

OsmoseOsmose

ReversaReversa

BB PP BB EE EE

Carvão Carvão

ativadoativado

PP PP E/BE/B PP PP

E = Excelente B = Bom P = Pobre

Sistema eficiente e de baixo custo Sistema eficiente e de baixo custo para uso no LACpara uso no LAC

1.1. Filtro inicial para reter partículas e Filtro inicial para reter partículas e bactéria;bactéria;

2.2. Filtro de carvão ativado para eliminar Filtro de carvão ativado para eliminar matéria orgânica;matéria orgânica;

3.3. Sistema deionizador de leito misto para Sistema deionizador de leito misto para reter íons.reter íons.

Recipientes para depositar água Recipientes para depositar água reagentereagente

MetálicosMetálicos:: aço, titânio ou pintura metálica. Cuidado para que não haja aço, titânio ou pintura metálica. Cuidado para que não haja transferência de traços de metal para a água.transferência de traços de metal para a água.

Não metálicosNão metálicos:: polipropileno, polietileno, fluoropolímeros (Teflon® ), e polipropileno, polietileno, fluoropolímeros (Teflon® ), e mais comumente, o PVC®.mais comumente, o PVC®.

O NCCLS não recomenda depositar água reagente tipo I ou II , em O NCCLS não recomenda depositar água reagente tipo I ou II , em frascos de PVC. Traços de contaminantes orgânicos e metálicos são frascos de PVC. Traços de contaminantes orgânicos e metálicos são extraídos pela água do PVC. É recomendado utilizar frascos de extraídos pela água do PVC. É recomendado utilizar frascos de fluoropolímeros.fluoropolímeros.

De vidrosDe vidros:: são inaceitáveis para estocar água reagente, pois são inaceitáveis para estocar água reagente, pois transferem traços de chumbo, boro, sódio, arsênico e sílica, para a água transferem traços de chumbo, boro, sódio, arsênico e sílica, para a água reagente depositada.reagente depositada.

NNenhuma água reagente deve permanecer muito tempo estocada, enhuma água reagente deve permanecer muito tempo estocada, pois todos os recipientes tendem a transferir algo para a mesma e pois todos os recipientes tendem a transferir algo para a mesma e causar contaminação bacteriana.causar contaminação bacteriana.

Controle de Qualidade da Água Controle de Qualidade da Água ReagenteReagente

Cloro erros de até 25% na dosagem Cloro erros de até 25% na dosagem de cloretos.de cloretos.

Metais ativam ou inibem várias Metais ativam ou inibem várias reações e podem interferir nas dosagens reações e podem interferir nas dosagens enzimáticas ou nas reações que utilizam enzimáticas ou nas reações que utilizam enzimas. enzimas.

NaNa+ + (1mg/L) (1mg/L) 4,3 mEq/L na dosagem 4,3 mEq/L na dosagem do íon.do íon.

KK+ + (1mg/L) 2,5 mEq/L na dosagem do (1mg/L) 2,5 mEq/L na dosagem do íon.íon.


-- Determinação da resistividade ou condutância: Determinação da resistividade ou condutância: diariamente.diariamente.

-- Teste de esterilidade, com contagem de Teste de esterilidade, com contagem de colônias: semanalmente (água tipo I).colônias: semanalmente (água tipo I).

-- Determinação do pH a 25° C: quando Determinação do pH a 25° C: quando necessário. Contaminação com matéria necessário. Contaminação com matéria orgânica ou bactérias: alcalinidade da água.orgânica ou bactérias: alcalinidade da água.

-- Determinação da contaminação por Determinação da contaminação por substâncias orgânicas: quando necessário.substâncias orgânicas: quando necessário.

-- Determinação da sílica solúvel, como SiO Determinação da sílica solúvel, como SiO2:2: quando necessário.quando necessário.


os registros que devem ser realizados os registros que devem ser realizados com referência ao controle da qualidade com referência ao controle da qualidade da água reagente, assim como a da água reagente, assim como a periodicidade dos mesmos. periodicidade dos mesmos.

Água Mili-QÁgua Mili-Q

Sistema de ultrapurificação de água (MiliporeSistema de ultrapurificação de água (Milipore®) ®)

Compõe-se de uma série de estágios de purificação:Compõe-se de uma série de estágios de purificação: Contaminantes orgânicos

fotooxidação (irradiando-se a água com luz UV)

formação de O3 a partir do O2 dissolvido

oxidação de compostos orgânicos dissolvidos, convertendo-os CO2 o qual juntamente com ácido carbônico, íons carbonato e bicarbonato é removido

por resinas de troca iônica, também existentes no sistema.

Água tipo I

Gera OH-

Destruição de DNA (remoção de bactérias)

Água Mili-QÁgua Mili-Q

Espectrometria Absorção atómica Emissão atómica.

Voltametria. Monit. TOC

HPLC, IC, GC, Análise de TOC,

Electroforese capilar,

ToxicologiaMonit. TOC

Culturas de células

vegetais, ElectroforeseMonit. TOC

Culturas de células animais e vegetais,

Genómica, Proteómica. Monit. TOC

Analise elementar de traços (PPT, PPQ) ICP-MS,Monit. TOC

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