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  • 8/10/2019 Relatrio de QB

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    I

    UNIVERSIDADE FEDERAL DO MARANHO

    CENTRO DE CINCIAS EXATAS E TECNOLOGIA

    DEPARTAMENTO DE QUMICA

    DISCIPLINA:QUMICA BIOLGICA

    RELATRIO 05CARACTERIZAO DE CARBOIDRATOS

    SO LUIS-MA2014

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    II

    EIRILANY MESQUITA DA SILVA

    RELATRIO 05

    CARACTERIZAO DE CARBOIDRATOS

    SO LUS-MA

    2014

    Relatrio apresentado disciplinade Qumica Biolgica do curso deQumica Bacharelado comorequisito parcial para obteno de

    nota sob orientao dosprofessores: Joselene e Celcione.

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    1. INTRODUO

    Os carboidratos so molculas orgnicas mais abundantes na natureza,conhecidos tambm como

    poliidroxialdedos ou poliidroxicetonas,ou substncias que liberam tais compostos por hidrolise

    (CHAMPE et al, 2009 ; MARZZOCO, 2007).O termo carboidrato denota hidratos de

    carbono,designao oriunda da frmula geral (CH2O)napresentada pela maioria dessas molculas, estes

    podem ser divididos em trs classes principais de acordo com o numero de ligaes glicosdicas.

    Monossacardeos:

    So carboidratos simples.Exemplo:Manose um monossacardeo convertida em manose-6-fosfato pela

    hexocinase que isomerizada pela enzima fosfomanose isomerase fosfomanose isomerase formando a

    frutose-6-fosfato que prossegue no metabolismo glicoltico (VIEIRA, 2011).

    Principais monossacardeos:

    Frutose: Presentena maioria das frutas e tambm no mel. Sua principal funo fornecer energia para ocorpo humano.

    Glicose: Tambm possui funo energtica. Encontrado tambm no mel e nas frutas.

    Galactose:presente na lactose (acar do leite). Fornece energia para o corpo humano.

    Ribose: compem a estrutura do RNA (cido ribonuclico).

    Oligossacardeos

    So polmeros compostos de resduos de monossacardeos unidos por ligaes

    hemiacetlicas,denominadas ligaes glicosdios em numero que variam de duas at aproximadamente

    dez unidade (FRANCISCO JR., 2008; RODRIGUES & SANTOS, 2011).

    Exemplos: Maltose que constituda de duas glicoses, encontradas em alguns vegetais.

    A sacarose sintetizada nos vegetais a partir da UDP-glicose sendo a frutose-6-fosfato unida UDP-

    glicose pela ao da enzimasacarose-6-fosfato-sintase, formando a sacarose-6-fosfato que tem seu Pi

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    removido pela enzima sacarose-6-fosfatase disponibilizando a sacarose no citoplasma dos vegetais

    (VIEIRA, 2011).E os polissacardeos so molculas maiores, formadas por vrios monossacardeos

    reunidos (SILVA-JNIOR & SASSON, 2005)

    Exemplo: Amido um polissacardeo de reserva da clula vegetal, formado por molculas de glicose

    ligadas entre si atravs de numerosas ligaes alfa (1,4) e poucas ligaes alfa (1,6), ou "pontos de

    ramificao" da cadeia sua molcula muito linear, e forma hlice em soluo aquosa (LEHNINGER,

    et al 2006).

    Os carboidratos,que compreendem os acares,so moleculas orgnicas constituidas por

    carbono,hidrognio e oxignio,sendo as principais substncias produzidas pelas plantas durante o

    processo de fotossntese.Costuman ser usados pelas clulas tanto animais quanto vegetais,como

    combustvel (SILVA-JNIOR & SASSON, 2005).

    Nas estruturas cclicas dos monossacardeos os tomos de carbono anomrico(C1 na aldoses e C2 nas

    cetose)so susceptveis de oxidao por varios agentes oxidantes contendo ons cpricos (Cu2+),como as

    solues de Fehling ou Benedict.Assim,os monossacardeos com tomos de carbono anomricos

    livres,so designados acares redutores,os envolvidos por ligaes glicosdicas so chamados de

    acares no redutores (MOTTA, 2011).

    Uma das propriedades qumicas apresentadas pelos carboidratos capacidade de participar de processos

    de xido-reduo das solues que contm ctions matlicos como o cobre,podendo ser perceptvel esse

    proceso pela alterao na cor da soluo.

    Uma das principais funes desses processos oxidativos transformar os metais em estado adequado

    para o emprego como componentes emm reagente analticos.

    O Cu2+,de caracterstica cor azul anil quando em soluo alcalina,ao ser reduzidos estequiometricamente

    a Cu2+proporciona ao meio de reao um precipitado vermelho-tijolo;este o fundamento qumico do

    reagente conhecido como licor de Fehling o mtodo de Lane-Eynon baseia-se no fato de que os sais

    cpricos,em soluo tartria alcalina(soluo de Fehling),podem ser reduzidos a quente por aldoses ou

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    cetoses transformando-se em sais cuprosos vermelhos,que se precipitam,perdendo sua cor azul

    primitiva.O tartarato, ao unir-se ao cobre, forma um complexo solvel, impedindo a formao de

    hidrxido cprico insolvel que teria lugar se existisse cobre livre na soluo alcalina. Como critrio de

    positividade da reao verifica-se a formao de xido cuproso vermelho tijolo, que precipita (IAL,

    1976; BOBBIO & BOBBIO, 1995 apud ROCHA, 2012).Dissacardeos:

    So carboidratos ditos glicosdeos, pois so formados a partir da ligao de 2 monossacardeos atravs

    de ligaes especiais denominadosLigaes glicosdicas.A ligao glicosdicas ocorre entre o carbono

    anomrico de um monossacardeo e qualquer outro carbono do monossacardeo seguinte,atravs de suas

    hidroxilas e com sada de uma molcula de gua.

    Polissacarideos

    So carboidratos complexos,macromolculares formadas por milhares de unidades monossacardeos

    unidas em cadeias longas ramificadas ou lineares.

    Os polissacardeos mais importantes so:

    Amido: armazenamento energtico

    Glicognio

    Celulose

    Reao de Fehling

    um teste para acares redutores,o grupo carbonila oxidado carboxxila e o on metlico

    reduzido.Os glicdios que contm um grupo aldedo ou cetona potencialmente livre existem em soluo

    aquosa em equilbrio com uma forma enodiol, que um agente redutor ativo. Em meio ligeiramente

    alcalino esta forma favorecida e a sua presena assegura a reduo de ons cobre II a cobre I com a

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    formao de hidrxido cuproso que, por aquecimento, se converte em xido cuproso, um composto

    insolvel de cor vermelha que precipita. Para manter os ons cobre II em soluo em meio alcalino o

    reagente de Fehling contm um agente complexante, o on tartarato.

    Reaes com Lugol

    Tanto no amido como no glicognio, a cadeia polissacardica assume a forma helicoidal,em decorrncia

    do grande nmero de unidades de glucose ligadas por ligaes do tipo (1_4). Devido a essa

    caracterstica estrutural, ambos os polissacardeos formam complexos de coordenao com o iodeto,

    presente na soluo de lugol. Entretanto, a cor do complexo formado geralmente azul para o amido e

    avermelhada para o glicognio. A cor varia de acordo com a quantidade de polissacardeo que assume,

    quando em soluo, a conformao de hlice.Quando se aquece a soluo de amido,a estrutura

    helicoidal se desfaz,consequentemente,no mais possvel a formao do complexo entre o amido e o

    iodeto.Ao resfriar a soluo,o amido recupera a sua forma helicoidal.O amido no pode ser detectado

    pelos testes de reduo,porque dispe de um numero muito reduzido de resduos de glicose livre,para

    determinao da atividade redutora.Na estrutura do amido,a cadeia linear constituda por resduos de

    glicose ligados entre si por ligaes (1,4), enquanto na cadeia ramificada ocorrem ligaes (1,4) e (1,6).

    A cadeia linear (amilose) solvel e a cadeia ramificada (amilopectina), insolvel. Na presena de

    iodo,o amido forma um complexo de cor azulada, de composio incerta. Esse complexo se desfaz sob

    aquecimento, perdendo a cor azul, mas refeito quando resfriado.

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    2.OBJETIVO

    Ao final da prtica o aluno dever ser capaz de executar testes para o reconhecimento de

    carboidratos.

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    3 .MATERIAL UTILIZADOS:

    3.1 Vidrarias e outros utenslios

    Tubos de ensaio

    Pipetas graduadas

    Pipetas Pasteur plsticos

    Bqueres

    Copos de plsticos

    Basto de vidro

    Esptula

    Proveta

    3.2 Reagentes

    Solues de carboidratos a 1%(glicose,amido,sacarose e maltose);

    Soluo de Lugol (iodo a 5% em iodeto de potssio a 10%);

    Reagente de Fehling

    Carbonato anidro a 10%

    Sulfato Cprico pentahidratado a 1,73%

    Leite

    Amido de milho

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    4.PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL

    4.1 Teste de Fehling

    Os monossacardeos podem ser oxidados por agentes oxidantes suaves como ons frricos(Fe3+) e

    cprico (Cu 2+).O grupo carbonilico oxidado a cido carboxlico.Estes acares so chamados de

    acares redutores.Essa propriedade til na anlise de monossacardeos e dissacardeos.O reagente de

    Benedict utilizado geralmente no lugar da soluo de Fehling para detectar a presena de acar

    redutor na urina e detectar uma possvel diabete.A presena de acares redutores confere colorao

    castanha no teste de Benedict devido a reao de reduo do on Cu 2+.

    Soluo A: Soluo aquosa de CuSO4. 5H2O

    Soluo B: Soluo aquosa Sal de Rochelle + NaOH

    Reao: CuSO4+ 2 NaOH Cu(OH)2+ Na2SO4

    Procedimento:

    Colocou-se em dois tubos de ensaio 5 ml (2,5 ml da soluo A + 2,5 ml da soluo B)de soluo de

    Fehling,identificou os tubos em A e B.Aqueceu-se brandamente ate a ebulio.Em outro tubo colocou-

    se 0,1g do carboidrato e 2 ml de gua destilada e misturou-se o conteudo dos dois tubos de ensaio e

    aqueceu-se brandamente por 2 min.Se o acar for redutor a soluo a colorao ficar vermelho-tijolo.

    4.2 Teste de Iodo para deteco de Amido

    O amido um polissacardeo de reserva energtica de plantas.Ele formado por dois tipos de polmerosde glicose:amilose e amilopectina.A amilose consiste de uma cadeia longa,no ramificada de resduos

    de glicose( 14) que interage com o iodo,formando um complexo de colorao azul escura violcea.

    Soluo de Lugol: Soluo aquosa de I2+ KI

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    Procedimento:

    Colocou-se em 5 tubos de ensaio 1,0 ml da soluocontendo carboidratos.Preparou-se um tubo-

    controle(negativo) usando 1 ml de guae preparou um tubo-controle( positivo) usando 1 ml do acar

    redutor padro(glicose).

    Adicionou-se a cada tubo de ensaio umas gotas de Lugol,e observou-se o aparecimento da cor azul

    violcea Anotou-se no roteiro os resultados positivos(+) ou negativos(-) para os tubos que continham e

    que no continham amido,respectivamente.Tomou-se apenas o tubo com a soluo de amido/iodo

    aqueceu-se e observou-se;resfriou-se o tubo observou-se novamente.

    4.3 Deteco de Amido em Alimentos

    O amido um polissacardeo de reserva energtica de plantas.Desta forma podemos detectar a presena

    do amido em diferentes alimentos de origem vegetal.

    Alguns produtores de leite costumam adulterar seus produtos adicionando gua e para disfarar a

    diluio o leite adulterado tambm com amido de milho.Assim,o consumidor pode identificar se o leite foi adulterado com amido adicionando algumas gotas de

    iodo ao produto.

    Procedimento:

    Preparou-se um tubo-controle(positivo) usando 1 ml de amido padro,e prepaou tambm um tubo-

    controle(negativo) usando 1 ml de gua.Colocou-se em uma placa de Petri ou bquer diferentes

    alimentos:leite e leite com amido.Pingou-se uma gota diretamente nas amostras e nos tubos-

    controles.Comparou-se a colorao obtida nas amostras com a obtida nos controles.

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    4.4 Hidrlise Enzimtica do Amido

    Os oligassacardeos e polissacardeos so formados por unidades de monossacardeos unidos por ligao

    O-glicosdica.Estas ligaes podem ser hidrolisadas pela quebra da ligao O-glicosdica liberando os

    monossacardeos que os compem.

    Procedimentos:

    Colocou-se 1 ml de soluo de amido em dois copos plsticos;recolheu-se um pouco de saliva em um

    copo;esperou-se 30 min e pingou-se uma gota de iodo em cada tubo e observou-se e anotou-se.

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    XII

    RESULTADOS E DISCUSSO

    Teste de Fehling:

    No teste,o cobre presente na soluo reduzido pela ao do acares redutores.A extremidade redutora

    do acar reduz o on cprico-trtaro de sodio potssio a tartro de sodio potssio e xido cuproso.Este

    composto se precipita em soluo dando origem a colorao avermelhada caracteristica.A glicose

    exemplo caracterstico de glcidios mais simples carcterizado corretamente pela sua capacidade que

    pode ser facilmente observada atraves da mudana de cor de indicadores de oxirreduo.A soluo

    inicialmente de colorao azul-escuro foi colocado para aquecer e esperado o aquecimento,com o

    aumento da temperatura a soluoadquirido a cor vermelho-tijolo.

    A sacarose por ser um dissacardeo,noglicose.Isso acontece uma vez que os grupos funcionais

    encontados na molecula esto ocupadas na ligao glicosdicas. A soluo inicialmente de colorao

    azul-escuro foi colocado no aquecimento e esperado uns minutos,com o aumento da temperatura no

    houve a formao de precipitado vermelho-tijolommas a soluo permaneceu azul-escuro.

    Teste de Iodo para deteco de Amido

    A reao foi negativas para os tubos 1(glicose),2(gua),4(maltose) e 5(sacarose) onde obteve-se uma

    colorao amarelo-claro.No tubo 3 (amido),a reao deu positiva onde a soluo inicialmente tornou-se

    azul e com o aquecimento tornou-se amarelo-claro e aps o resfriamento voltou a cor azul .O amido

    formado pela combinao de amilose e amilopectina.Sabe-se que o Lugol a base de iodo e capaz de

    interagir com a amilose (polmero linear de milhares de resduos de glicose). Ocorre uma interao fraca

    entre a amilose e iodo. Esta interao resultante do alojamento do iodo do reagente, dentro da cadeira

    do polissacardeo.

    O amilose ento perde sua estrutura espiral quando fornecido o aquecimento a amostra (as interaes

    fracas so rompidas).Sendo assim, o iodo ento liberado do interior da amilose e o complexo passa a

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    adquirir colorao transparente. Quando a amostra resfriada, a forma aspiral da amilose retorna, ou

    seja, as interaes fracas so reconstitudas e a colorao azul novamente observada na amostra.

    Deteco de amido em alimentos

    No leite,est presente a glicose,aminocidos e h lpidios.No experimento ,o tubo que continha a

    amostra adulterada por amido,surgiu uma colorao roxa,indicando a contaminao atravs da formao

    de complexo de amido e iodo.No tubo com amostra sem contaminao no apresentou colorao.Este

    teste feito por que o amido um recontituiente da densidade.

    Em adulterao,a adio do amido serve para alterar a densidade do leite diludo,possibilitando a

    fraude.Essa tcnica se baseia na propriedade das molculas de amilose e amilopectina(2 polmeros

    constituintes do amido) sem sofrerem alteraes de complexao,com formao de compostos

    coloridos.Quando se coloca Lugol na soluo,esta apresenta colorao azul intensa ,desenvolvida pela

    ocluso(aprisionamento) do iodo nas cadeias lineares da amilose(3 e 4).

    Hidrolise enzimtica do amido

    Os oligossacardeos e polissacardeos so formados por unidades de monossacardeos unidos por

    ligao O-glicosdica.Estas ligaes podem ser hidrolisadas pela quebra da ligao O-glicosdica

    liberando os monossacardeos que os compem.

    No teste,em relao ao iodo,observou-se que com o passar do tempo de reao de hisrlise,aps adio

    do Lugol,e sem precipitado(tempo de 30 min).O copo contendo uma soluo de saliva e amido

    primeiramente foi pensado que este reagiria com o Lugol j que o amido tambm um

    polissacardeo.Portanto,a saliva possui a enzima citada acima que acelera a degradao do amido em

    glicose,restando assim o tubo esta e o Lugol;no havendo reaes entre eles.Contudo o copo com amido

    no reagiu com o Lugol.

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    CONCLUSO

    Conclui-se que atravs de testes qualitativos e conhecendo as estruturas dos carboidratos assim como

    suas classificaes e funes foi possvel identificar os acares.Portanto os testes executados nesta

    prtica so de fundamental importncia para a bioqumica visto que permitir reconhecer tais

    carboidratos tambmpodem constatar a organizao dos carboidratos , as etapas do processo de

    hidrlise em alguns oligossacardeos e polissacardeos, mostrou-se tambm como suas propriedades

    podem variar de acordo com o meio reacional, como se comporta um carboidrato redutor e no reduto.

    Entao constatou-se que essa prtica teve grande importncia para a assimilao e complemento dos

    assuntos aprendidos nas aulas tericas.

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    REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

    CHAMPE, P.C; HARVEY, R.A. Bioqumica ilustrada. 2 ed. Porto Alegre: Artmed, 1994.

    LEHNINGER, A.L.; NELSON, D.L.; COX, M.M. Princpios de Bioqumica. 2. ed. So Paulo:Sarvier, 2000. 839p.

    MARZZOCO, Anita., TORRES, Bayardo Baptista. Bioqumica Bsica. 2ed. Rio de Janeiro,1999.

    Acesso em 30 de nov. de2014.

    Acesso em 30 de nov. de 2014.

    Acesso em 30 denov. de 2014.