SOROPREVALÊNCIA DA INFECÇÃO PELO T. GONDII EM PATOS DE ... · Dados Internacionais de...

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Gabriel de Lima Nunes SOROPREVALÊNCIA DA INFECÇÃO PELO T. GONDII EM PATOS DE CORTE EM FEIRAS LIVRES NO MUNICÍPIO DE BELÉM-PA Belém 2016 Universidade do Estado do Pará Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós-Graduação Centro de Ciências Naturais e Tecnologia Pós-Graduação em Ciências Ambientais Mestrado

Transcript of SOROPREVALÊNCIA DA INFECÇÃO PELO T. GONDII EM PATOS DE ... · Dados Internacionais de...

Gabriel de Lima Nunes

SOROPREVALEcircNCIA DA INFECCcedilAtildeO PELO T GONDII EM PATOS DE CORTE EM FEIRAS

LIVRES NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM-PA

Beleacutem 2016

Universidade do Estado do Paraacute

Proacute-Reitoria de Pesquisa e Poacutes-Graduaccedilatildeo

Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado

Gabriel de Lima Nunes

SOROPREVALEcircNCIA DA INFECCcedilAtildeO PELO T GONDII EM PATOS DE CORTE EM FEIRAS

LIVRES NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM-PA

Dissertaccedilatildeo apresentada como requisito parcial para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de mestre em Ciecircncias Ambientais no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais Universidade do Estado do Paraacute Orientador(a) Profa Dra Cleacutea Nazareacute Carneiro Bichara Co-Orientador Prof Dr Ediclei Lima do Carmo

Beleacutem 2016

Dados Internacionais de Catalogaccedilatildeo-na-Publicaccedilatildeo (CIP)

N972s

Nunes Gabriel de Lima

Soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T Gondii em patos de corte em feiras livres no municiacutepio de Beleacutem-Pa Gabriel de Lima Nunes orientador Cleacutea Nazareacute Carneiro Bichara co-orientador Ediclei Lima do Carmo ndash 2016

55 f il 30 cm Disertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias Ambientais) ndash Universidade do

Estado do Paraacute Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais Beleacutem 2016

1 Toxoplasma gondi 2 Soroprevalecircncia 3 HAI 4 Patos-Amazocircnia I

Bichara Cleacutea Nazareacute Carneiro orient II Carmo Ediclei Lima do co-orient III Tiacutetulo

CDD ndash 22 ed 63659798115

Catalogado por Fellipe Borges de Oliveira

CRB-11100

Gabriel de Lima Nunes

Soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos de corte em feiras livres no municiacutepio de Beleacutem-Pa

Dissertaccedilatildeo apresentada como requisito parcial para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de mestre em ciecircncias ambientais no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais no Programa Universidade do Estado do Paraacute

Data de aprovaccedilatildeo18032016 Banca examinadora _______________________________ - Orientadora Profa Cleacutea Nazareacute Carneiro Bichara Doutora em Biologia dos Agentes Infecciosos e Parasitaacuterios ICBUFPA Universidade do Estado do Paraacute

_______________________________ - Avaliador Prof Nelson Antocircnio Bailatildeo Ribeiro Doutor em Geneacutetica e Biologia Molecular UFPA Universidade do Estado do Paraacute _______________________________ - Avaliadora Profa Socircnia Claudia de Almeida pinto Doutora em Doenccedilas Tropicais NMTUFPA Universidade do Estado do Paraacute

_______________________________ - Avaliadora Profa Ilma Pastana Ferreira Doutora em Enfermagem UFRJ Universidade do Estado do Paraacute

_______________________________ - Suplente Prof Robson Joseacute de Souza Domingues Doutor em Ciecircncias Bioloacutegicas Anatomia Botucatu UNESP Universidade do Estado do Paraacute

Dedico este trabalho a minha famiacutelia

e a todos os meus amigos que

sempre me apoiaram e nunca

deixaram de acreditar em mim

mesmo quando eu mesmo duvidava

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus por cada dia em que acordo e pela vida que me foi

concedida A minha famiacutelia Patricia Dalmir Marcelo Saulo Juliana Iacutecaro

Isadora Ciacutecero Simpliacutecio e Edylle Landy por tudo que fizeram por mim e por

sempre estarem ao meu lado A minha namorada Edriacutecia Albuquerque pela

companhia e compreensatildeo nesse periacuteodo de minha vida A minha Orientadora

Cleacutea Bichara pelo tempo empreendido comigo pela paciecircncia e ensinamentos

Ao Instituto Evandro ChagasSVS na pessoa do Dr Ediclei Lima do Carmo e sua

equipe pelo apoio e realizaccedilatildeo dos exames laboratoriais Por todos os meus

amigos e colegas de mestrado o tempo que passei com vocecircs seraacute guardado

para sempre em minha memoacuteria Aos meus professores e mestres que tive no

decorrer dessa estrada E por meus amigos que contribuiacuteram direto ou

indiretamente nessa jornada em especial Lisandra Blanco Bruna Martins

Fellipe Borges Adriana Adriele e Carol Novais

ldquoEducaccedilatildeo natildeo transforma o mundo

Educaccedilatildeo muda pessoas

Pessoas transformam o mundordquo

(Paulo Freire)

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em humanos e animais em geral tendem a apresentar taxas altas reflexo das condiccedilotildees ambientais e epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem o desenvolvimento e disseminaccedilatildeo do parasito No estado do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos No entanto outro grupo de aves os patos (Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria da regiatildeo apesar do consumo natildeo ser tatildeo elevado estando restrito a determinados periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais do estado principalmente sob o sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo O presente estudo teve como objetivo estimar a soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Foram avaliados 172 patos de ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais no estado (Castanhal Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) onde estavam submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e quantitativa para anticorpos anti-T gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A soroprevalecircncia obtida foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica em o sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os sistemas as quais as aves foram criadas Este foi o primeiro registro da soroprevalecircncia de toxoplasmose em patos no estado do Paraacute A soroprevalecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (IHA) qualitative and quantitative for anti-T gondii using a cut off dilution of

116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence IHA ducks Amazon Region

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL 11

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL 31

2 ARTIGO ndash Formatado de acordo com as normas da Revista de 37 Veterinaacuteria e Zootecnia

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM 37 PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMO 37

ABSTRACT 38

RESUMEN 38

21 INTRODUCcedilAtildeO 39

22 MATERIAL E MEacuteTODOS 41

23 RESULTADOS 43

24 DISCUSSAtildeO 44

25 CONCLUSOtildeES 47

REFEREcircNCIAS 48

3 CONCLUSAtildeO GERAL 52

ANEXOS 53

APENDICE 1 56

11

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL

Toxoplasma gondii e a toxoplasmose

A toxoplasmose eacute uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii

protozoaacuterio de pouca especificidade parasitaacuteria cosmopolita pertencente ao filo

Apicomplexa subclasse cocciacutedea eacute um parasito intracelular obrigatoacuterio com

ciclo heteroxecircnico e cuja maior distribuiccedilatildeo respeita as condiccedilotildees geograacuteficas e

culturais

Teve seus primeiros casos registrados em roedores (gundi) da Aacutefrica do

Norte e em coelhos no Brasil ambos em 1908 e o primeiro caso associado a

humanos em 1927 por Janku na Tchecoslovaacutequia (FRENKEL BERMUDEZ

2009) Wolf Cowen e Paige em 1939 descreveram a infecccedilatildeo congecircnita e

esclareceram o papel do Toxoplasma como patoacutegeno humano (BICHARA et al

2013) Seus estudos foram aprofundados a partir da deacutecada de 1970 quando se

tomou conhecimento da distribuiccedilatildeo geograacutefica do T gondii (KAWAZOE 2005)

Este protozoaacuterio acomete todos os animais de sangue quente entre os

quais o homem e as aves E esta relaccedilatildeo parasita-hospedeiro resulta em um

processo infeccioso geralmente assintomaacutetico com algumas exceccedilotildees de casos

graves em grupos hiacutegidos e em imunodeprimidos Segundo Meireles (2001) por

ser uma doenccedila de curso benigno muita das vezes passa desapercebida

excetuando-se os grupos de risco a maioria dos pacientes natildeo recebe

terapecircutica especifica

Entre os animais satildeo os feliacutedeos seus uacutenicos hospedeiros definitivos a

que se tem conhecimento onde ocorre o ciclo sexuado do parasito no epiteacutelio

intestinal tendo como produto a forma infectante do parasita os oocistos os

quais satildeo eliminados pelas fezes a partir de duas a trecircs semanas apoacutes a

infecccedilatildeo com o periacuteodo de eliminaccedilatildeo variando geralmente de 7 a 20 dias

sendo os felinos jovens mais suscetiacuteveis agrave infecccedilatildeo toxoplasmaacutetica e tambeacutem os

principais eliminadores de oocisto no ambiente Uma vez excretados no

ambiente os oocistos necessitam de no miacutenimo 24 horas para esporulaccedilatildeo se

tornando infectantes

12

O parasito apresenta durante o ciclo bioloacutegico trecircs formas evolutivas

infectantes satildeo elas os taquizoiacutetas (encontrados em diversos tecidos e fluidos

corporais) os bradizoiacutetas (contidos em cistos teciduais presentes em carnes e

viacutesceras de organismos infectados) e esporozoiacutetas (contidos em oocistos

esporulados) que satildeo infecciosas para ambos os hospedeiros intermediaacuterios e

definitivos existindo entretanto diferenccedilas quanto a infectividade de cada uma

dessas formas Embora os taquizoiacutetas se multipliquem rapidamente (KAWAZOE

2005 TENTER 2009 BARBOSA et al 2014) natildeo sobrevivem fora do organismo

de seu hospedeiro sendo normalmente destruiacutedo por secreccedilotildees gaacutestricas Satildeo

responsaacuteveis pela parasitemia inclusive representam as formas pelas quais o T

gondii por transmissatildeo placentaacuteria atinge o feto em parte de mulheres graacutevidas

infectadas (JONES DUBEY 2014)

Os taquizoiacutetos satildeo estaacutegios caracteriacutesticos da fase aguda da infecccedilatildeo e

os bradizoiacutetos embora sejam estaacutegios semelhantes aos taquizoiacutetas dividem-se

lentamente durante a fase crocircnica da infecccedilatildeo no interior de cistos teciduais que

apresentam tamanhos variados que podem ir de 5 a 100 micrometros de

diacircmetro apresentando parede celular fina e elaacutestica Uma vez instalado nos

diferentes tecidos pode permanecer latente sem causa qualquer dano ao longo

de toda a vida do hospedeiro (BICHARA et al 2013)

Observa-se que devido a infecccedilatildeo por T gondii natildeo se limitar agrave presenccedila

de uma determinada espeacutecie de hospedeiro o seu ciclo de vida pode continuar

indefinidamente por transmissatildeo de cistos teciduais entre hospedeiros

intermediaacuterios (mesmo na ausecircncia de hospedeiros definitivos) e tambeacutem pela

transmissatildeo de oocistos entre hospedeiros definitivos Estando entatildeo envolvidos

vaacuterias possibilidades como via de infecccedilatildeo oral tanto por haacutebitos de

carnivorismo assim como ingestatildeo de vegetais e aacuteguas contaminadas por

oocistos (TENTER 2009)

Principais aspectos epidemioloacutegicos

A toxoplasmose possui uma ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica sendo uma

das zoonoses mais difundidas no mundo apresentando uma alta taxa de

prevalecircncia chegando a atingir mais de 60 da populaccedilatildeo em determinados

paiacuteses (KAWAZOE 2005) Aleacutem disso estima-se que cerca de um terccedilo da

13

populaccedilatildeo mundial jaacute tenha sido infectado (KIM WEISS 2008

PUVANESUARAN et al 2013)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da

toxoplasmose pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um

mesmo paiacutes Poreacutem em geral eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e

subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude que oferecem melhores

condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer viaacuteveis e

infectantes no solo prolongadamente (ROBERT-GANGNEUX DARDEacute 2012)

As causas para variaccedilatildeo de sua disseminaccedilatildeo em diferentes aacutereas geograacuteficas

de um paiacutes ainda natildeo satildeo totalmente conhecidas (JONES DUBEY 2014)

Segundo Frenkel e Bermudez (2009) no Brasil a prevalecircncia de anticorpos

na populaccedilatildeo adulta varia entre 50 e 80 com iacutendices mais elevados em alguns

estados do Norte e do Sul do paiacutes sendo que a incidecircncia aumenta com a idade

Boacuteia et al (2008) verificou que em uma comunidade indiacutegena no Amazonas a

infecccedilatildeo aumentava conforme a faixa etaacuteria chegando a atingir 957 (4446)

em maiores de 50 anos

Os seres humanos podem adquirir a toxoplasmose principalmente por

ingestatildeo de oocistos do solo ingestatildeo de cistos em carne crua ou mal cozida e

infecccedilatildeo transplacentaacuteria (FRENKEL BERMUDEZ 2009) Aleacutem destes satildeo

relatados casos de transmissatildeo pela amamentaccedilatildeo materna durante a fase

aguda transplantes de oacutergatildeos transfusotildees de sangue e derivados e acidentes

laboratoriais (JONES DUBEY 2014)

Para Tenter et al (2000) as vias de transmissatildeo variam de acordo com

haacutebitos culturais e alimentares nas diferentes populaccedilotildees Estes tem observado

que o parasito desenvolveu vaacuterias rotas potenciais de vias de transmissatildeo dentro

e entre espeacutecies hospedeiras no decorrer de sua evoluccedilatildeo mas nem todas as

rotas possiacuteveis de infecccedilatildeo satildeo importantes do ponto de vista da sauacutede puacuteblica

(TENTER 2009)

Grupos profissionais como trabalhadores dos matadouros talhos e

caccediladores tambeacutem podem ser infectados durante a evisceraccedilatildeo e manipulaccedilatildeo

da carne (TENTER 2009) Vetores mecacircnicos como moscas e baratas tambeacutem

satildeo importantes disseminadores de oocistos no ambiente pois podem

eventualmente carrear tais formas de desenvolvimento em suas patas

(KAWAZOE 2005)

14

Embora taquizoiacutetas jaacute tenham sido encontrados em secircmen de machos de

cabras ovelhas e do homem os riscos de transmissatildeo sexual do T gondii satildeo

baixiacutessimos Tambeacutem foi encontrado na saliva mas natildeo existem evidencias de

sua transmissatildeo por beijo embora em contato com a face podem penetrar a

coacuternea e a mucosa bucal (JONES DUBEY 2014)

Para Meireles (2001) existem vaacuterios fatores que influenciam na

epidemiologia da infecccedilatildeo por T gondii como o tipo de manejo e produccedilatildeo dos

animais criteacuterios de higiene em criatoacuterios de animais abatedouros

processamento e tecnologia de alimentos densidade populacional de gatos ou

felinos selvagens condiccedilotildees ambientais como temperatura umidade e

ventilaccedilatildeo que influenciam na esporulaccedilatildeo dos oocistos e os haacutebitos

alimentares diferentes de animais e pessoas

Conforme a Agencia Francesa de Seguranccedila Sanitaacuteria dos Alimentos

(AFSSA 2005 apud BARBOSA 2010) a principal forma de infecccedilatildeo pode variar

muito entre diferentes localidades na Franccedila eacute relatada uma das mais altas

prevalecircncias do mundo cerca de 85 que estaacute intimamente ligado ao haacutebito de

consumir carne crua ou mal cozida enquanto nos paiacuteses da Ameacuterica Central

estaacute relacionada a presenccedila de uma grande quantidade de gatos abandonados

que liberam oocistos no ambiente

Para alguns autores cerca de 30 a 63 das infecccedilotildees ocorrem por

ingestatildeo de alimentos contaminados e 6 a 17 decorrem da contaminaccedilatildeo do

solo (MONTANtildeO et al 2010) observaccedilotildees respaldadas por Kim e Weiss (2008)

que citam a ingestatildeo oral de cistos de tecido contendo bradizoiacutetos como a forma

mais comum de adquirir toxoplasmose Conforme Tenter (2009) surtos de

toxoplasmose aguda em seres humanos em vaacuterias regiotildees do mundo tecircm sido

associados a uma ampla variedade de alimentos de origem animal

Cavalcante et al (2006) ao estudar a infecccedilatildeo por T gondii em populaccedilotildees

rurais no estado de Rondocircnia encontrou como principais fatores associados a

prevalecircncia de anticorpos na regiatildeo o consumo de vegetais cultivados em casa

e beber aacutegua de poccedilos

Um aspecto importante eacute a falta de indiacutecios que levem a suspeitar de

infecccedilatildeo por T gondii em animais de produccedilatildeo visto que a presenccedila de cistos

teciduais de T gondii natildeo eacute visiacutevel a olho nu natildeo sendo detectaacuteveis na inspeccedilatildeo

post-mortem que eacute realizada nos frigoriacuteficos o que permite que carnes que

15

estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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33

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34

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36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

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33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

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51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

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Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

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36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

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37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

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moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

Gabriel de Lima Nunes

SOROPREVALEcircNCIA DA INFECCcedilAtildeO PELO T GONDII EM PATOS DE CORTE EM FEIRAS

LIVRES NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM-PA

Dissertaccedilatildeo apresentada como requisito parcial para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de mestre em Ciecircncias Ambientais no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais Universidade do Estado do Paraacute Orientador(a) Profa Dra Cleacutea Nazareacute Carneiro Bichara Co-Orientador Prof Dr Ediclei Lima do Carmo

Beleacutem 2016

Dados Internacionais de Catalogaccedilatildeo-na-Publicaccedilatildeo (CIP)

N972s

Nunes Gabriel de Lima

Soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T Gondii em patos de corte em feiras livres no municiacutepio de Beleacutem-Pa Gabriel de Lima Nunes orientador Cleacutea Nazareacute Carneiro Bichara co-orientador Ediclei Lima do Carmo ndash 2016

55 f il 30 cm Disertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias Ambientais) ndash Universidade do

Estado do Paraacute Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais Beleacutem 2016

1 Toxoplasma gondi 2 Soroprevalecircncia 3 HAI 4 Patos-Amazocircnia I

Bichara Cleacutea Nazareacute Carneiro orient II Carmo Ediclei Lima do co-orient III Tiacutetulo

CDD ndash 22 ed 63659798115

Catalogado por Fellipe Borges de Oliveira

CRB-11100

Gabriel de Lima Nunes

Soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos de corte em feiras livres no municiacutepio de Beleacutem-Pa

Dissertaccedilatildeo apresentada como requisito parcial para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de mestre em ciecircncias ambientais no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais no Programa Universidade do Estado do Paraacute

Data de aprovaccedilatildeo18032016 Banca examinadora _______________________________ - Orientadora Profa Cleacutea Nazareacute Carneiro Bichara Doutora em Biologia dos Agentes Infecciosos e Parasitaacuterios ICBUFPA Universidade do Estado do Paraacute

_______________________________ - Avaliador Prof Nelson Antocircnio Bailatildeo Ribeiro Doutor em Geneacutetica e Biologia Molecular UFPA Universidade do Estado do Paraacute _______________________________ - Avaliadora Profa Socircnia Claudia de Almeida pinto Doutora em Doenccedilas Tropicais NMTUFPA Universidade do Estado do Paraacute

_______________________________ - Avaliadora Profa Ilma Pastana Ferreira Doutora em Enfermagem UFRJ Universidade do Estado do Paraacute

_______________________________ - Suplente Prof Robson Joseacute de Souza Domingues Doutor em Ciecircncias Bioloacutegicas Anatomia Botucatu UNESP Universidade do Estado do Paraacute

Dedico este trabalho a minha famiacutelia

e a todos os meus amigos que

sempre me apoiaram e nunca

deixaram de acreditar em mim

mesmo quando eu mesmo duvidava

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus por cada dia em que acordo e pela vida que me foi

concedida A minha famiacutelia Patricia Dalmir Marcelo Saulo Juliana Iacutecaro

Isadora Ciacutecero Simpliacutecio e Edylle Landy por tudo que fizeram por mim e por

sempre estarem ao meu lado A minha namorada Edriacutecia Albuquerque pela

companhia e compreensatildeo nesse periacuteodo de minha vida A minha Orientadora

Cleacutea Bichara pelo tempo empreendido comigo pela paciecircncia e ensinamentos

Ao Instituto Evandro ChagasSVS na pessoa do Dr Ediclei Lima do Carmo e sua

equipe pelo apoio e realizaccedilatildeo dos exames laboratoriais Por todos os meus

amigos e colegas de mestrado o tempo que passei com vocecircs seraacute guardado

para sempre em minha memoacuteria Aos meus professores e mestres que tive no

decorrer dessa estrada E por meus amigos que contribuiacuteram direto ou

indiretamente nessa jornada em especial Lisandra Blanco Bruna Martins

Fellipe Borges Adriana Adriele e Carol Novais

ldquoEducaccedilatildeo natildeo transforma o mundo

Educaccedilatildeo muda pessoas

Pessoas transformam o mundordquo

(Paulo Freire)

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em humanos e animais em geral tendem a apresentar taxas altas reflexo das condiccedilotildees ambientais e epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem o desenvolvimento e disseminaccedilatildeo do parasito No estado do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos No entanto outro grupo de aves os patos (Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria da regiatildeo apesar do consumo natildeo ser tatildeo elevado estando restrito a determinados periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais do estado principalmente sob o sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo O presente estudo teve como objetivo estimar a soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Foram avaliados 172 patos de ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais no estado (Castanhal Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) onde estavam submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e quantitativa para anticorpos anti-T gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A soroprevalecircncia obtida foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica em o sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os sistemas as quais as aves foram criadas Este foi o primeiro registro da soroprevalecircncia de toxoplasmose em patos no estado do Paraacute A soroprevalecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (IHA) qualitative and quantitative for anti-T gondii using a cut off dilution of

116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence IHA ducks Amazon Region

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL 11

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL 31

2 ARTIGO ndash Formatado de acordo com as normas da Revista de 37 Veterinaacuteria e Zootecnia

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM 37 PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMO 37

ABSTRACT 38

RESUMEN 38

21 INTRODUCcedilAtildeO 39

22 MATERIAL E MEacuteTODOS 41

23 RESULTADOS 43

24 DISCUSSAtildeO 44

25 CONCLUSOtildeES 47

REFEREcircNCIAS 48

3 CONCLUSAtildeO GERAL 52

ANEXOS 53

APENDICE 1 56

11

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL

Toxoplasma gondii e a toxoplasmose

A toxoplasmose eacute uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii

protozoaacuterio de pouca especificidade parasitaacuteria cosmopolita pertencente ao filo

Apicomplexa subclasse cocciacutedea eacute um parasito intracelular obrigatoacuterio com

ciclo heteroxecircnico e cuja maior distribuiccedilatildeo respeita as condiccedilotildees geograacuteficas e

culturais

Teve seus primeiros casos registrados em roedores (gundi) da Aacutefrica do

Norte e em coelhos no Brasil ambos em 1908 e o primeiro caso associado a

humanos em 1927 por Janku na Tchecoslovaacutequia (FRENKEL BERMUDEZ

2009) Wolf Cowen e Paige em 1939 descreveram a infecccedilatildeo congecircnita e

esclareceram o papel do Toxoplasma como patoacutegeno humano (BICHARA et al

2013) Seus estudos foram aprofundados a partir da deacutecada de 1970 quando se

tomou conhecimento da distribuiccedilatildeo geograacutefica do T gondii (KAWAZOE 2005)

Este protozoaacuterio acomete todos os animais de sangue quente entre os

quais o homem e as aves E esta relaccedilatildeo parasita-hospedeiro resulta em um

processo infeccioso geralmente assintomaacutetico com algumas exceccedilotildees de casos

graves em grupos hiacutegidos e em imunodeprimidos Segundo Meireles (2001) por

ser uma doenccedila de curso benigno muita das vezes passa desapercebida

excetuando-se os grupos de risco a maioria dos pacientes natildeo recebe

terapecircutica especifica

Entre os animais satildeo os feliacutedeos seus uacutenicos hospedeiros definitivos a

que se tem conhecimento onde ocorre o ciclo sexuado do parasito no epiteacutelio

intestinal tendo como produto a forma infectante do parasita os oocistos os

quais satildeo eliminados pelas fezes a partir de duas a trecircs semanas apoacutes a

infecccedilatildeo com o periacuteodo de eliminaccedilatildeo variando geralmente de 7 a 20 dias

sendo os felinos jovens mais suscetiacuteveis agrave infecccedilatildeo toxoplasmaacutetica e tambeacutem os

principais eliminadores de oocisto no ambiente Uma vez excretados no

ambiente os oocistos necessitam de no miacutenimo 24 horas para esporulaccedilatildeo se

tornando infectantes

12

O parasito apresenta durante o ciclo bioloacutegico trecircs formas evolutivas

infectantes satildeo elas os taquizoiacutetas (encontrados em diversos tecidos e fluidos

corporais) os bradizoiacutetas (contidos em cistos teciduais presentes em carnes e

viacutesceras de organismos infectados) e esporozoiacutetas (contidos em oocistos

esporulados) que satildeo infecciosas para ambos os hospedeiros intermediaacuterios e

definitivos existindo entretanto diferenccedilas quanto a infectividade de cada uma

dessas formas Embora os taquizoiacutetas se multipliquem rapidamente (KAWAZOE

2005 TENTER 2009 BARBOSA et al 2014) natildeo sobrevivem fora do organismo

de seu hospedeiro sendo normalmente destruiacutedo por secreccedilotildees gaacutestricas Satildeo

responsaacuteveis pela parasitemia inclusive representam as formas pelas quais o T

gondii por transmissatildeo placentaacuteria atinge o feto em parte de mulheres graacutevidas

infectadas (JONES DUBEY 2014)

Os taquizoiacutetos satildeo estaacutegios caracteriacutesticos da fase aguda da infecccedilatildeo e

os bradizoiacutetos embora sejam estaacutegios semelhantes aos taquizoiacutetas dividem-se

lentamente durante a fase crocircnica da infecccedilatildeo no interior de cistos teciduais que

apresentam tamanhos variados que podem ir de 5 a 100 micrometros de

diacircmetro apresentando parede celular fina e elaacutestica Uma vez instalado nos

diferentes tecidos pode permanecer latente sem causa qualquer dano ao longo

de toda a vida do hospedeiro (BICHARA et al 2013)

Observa-se que devido a infecccedilatildeo por T gondii natildeo se limitar agrave presenccedila

de uma determinada espeacutecie de hospedeiro o seu ciclo de vida pode continuar

indefinidamente por transmissatildeo de cistos teciduais entre hospedeiros

intermediaacuterios (mesmo na ausecircncia de hospedeiros definitivos) e tambeacutem pela

transmissatildeo de oocistos entre hospedeiros definitivos Estando entatildeo envolvidos

vaacuterias possibilidades como via de infecccedilatildeo oral tanto por haacutebitos de

carnivorismo assim como ingestatildeo de vegetais e aacuteguas contaminadas por

oocistos (TENTER 2009)

Principais aspectos epidemioloacutegicos

A toxoplasmose possui uma ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica sendo uma

das zoonoses mais difundidas no mundo apresentando uma alta taxa de

prevalecircncia chegando a atingir mais de 60 da populaccedilatildeo em determinados

paiacuteses (KAWAZOE 2005) Aleacutem disso estima-se que cerca de um terccedilo da

13

populaccedilatildeo mundial jaacute tenha sido infectado (KIM WEISS 2008

PUVANESUARAN et al 2013)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da

toxoplasmose pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um

mesmo paiacutes Poreacutem em geral eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e

subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude que oferecem melhores

condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer viaacuteveis e

infectantes no solo prolongadamente (ROBERT-GANGNEUX DARDEacute 2012)

As causas para variaccedilatildeo de sua disseminaccedilatildeo em diferentes aacutereas geograacuteficas

de um paiacutes ainda natildeo satildeo totalmente conhecidas (JONES DUBEY 2014)

Segundo Frenkel e Bermudez (2009) no Brasil a prevalecircncia de anticorpos

na populaccedilatildeo adulta varia entre 50 e 80 com iacutendices mais elevados em alguns

estados do Norte e do Sul do paiacutes sendo que a incidecircncia aumenta com a idade

Boacuteia et al (2008) verificou que em uma comunidade indiacutegena no Amazonas a

infecccedilatildeo aumentava conforme a faixa etaacuteria chegando a atingir 957 (4446)

em maiores de 50 anos

Os seres humanos podem adquirir a toxoplasmose principalmente por

ingestatildeo de oocistos do solo ingestatildeo de cistos em carne crua ou mal cozida e

infecccedilatildeo transplacentaacuteria (FRENKEL BERMUDEZ 2009) Aleacutem destes satildeo

relatados casos de transmissatildeo pela amamentaccedilatildeo materna durante a fase

aguda transplantes de oacutergatildeos transfusotildees de sangue e derivados e acidentes

laboratoriais (JONES DUBEY 2014)

Para Tenter et al (2000) as vias de transmissatildeo variam de acordo com

haacutebitos culturais e alimentares nas diferentes populaccedilotildees Estes tem observado

que o parasito desenvolveu vaacuterias rotas potenciais de vias de transmissatildeo dentro

e entre espeacutecies hospedeiras no decorrer de sua evoluccedilatildeo mas nem todas as

rotas possiacuteveis de infecccedilatildeo satildeo importantes do ponto de vista da sauacutede puacuteblica

(TENTER 2009)

Grupos profissionais como trabalhadores dos matadouros talhos e

caccediladores tambeacutem podem ser infectados durante a evisceraccedilatildeo e manipulaccedilatildeo

da carne (TENTER 2009) Vetores mecacircnicos como moscas e baratas tambeacutem

satildeo importantes disseminadores de oocistos no ambiente pois podem

eventualmente carrear tais formas de desenvolvimento em suas patas

(KAWAZOE 2005)

14

Embora taquizoiacutetas jaacute tenham sido encontrados em secircmen de machos de

cabras ovelhas e do homem os riscos de transmissatildeo sexual do T gondii satildeo

baixiacutessimos Tambeacutem foi encontrado na saliva mas natildeo existem evidencias de

sua transmissatildeo por beijo embora em contato com a face podem penetrar a

coacuternea e a mucosa bucal (JONES DUBEY 2014)

Para Meireles (2001) existem vaacuterios fatores que influenciam na

epidemiologia da infecccedilatildeo por T gondii como o tipo de manejo e produccedilatildeo dos

animais criteacuterios de higiene em criatoacuterios de animais abatedouros

processamento e tecnologia de alimentos densidade populacional de gatos ou

felinos selvagens condiccedilotildees ambientais como temperatura umidade e

ventilaccedilatildeo que influenciam na esporulaccedilatildeo dos oocistos e os haacutebitos

alimentares diferentes de animais e pessoas

Conforme a Agencia Francesa de Seguranccedila Sanitaacuteria dos Alimentos

(AFSSA 2005 apud BARBOSA 2010) a principal forma de infecccedilatildeo pode variar

muito entre diferentes localidades na Franccedila eacute relatada uma das mais altas

prevalecircncias do mundo cerca de 85 que estaacute intimamente ligado ao haacutebito de

consumir carne crua ou mal cozida enquanto nos paiacuteses da Ameacuterica Central

estaacute relacionada a presenccedila de uma grande quantidade de gatos abandonados

que liberam oocistos no ambiente

Para alguns autores cerca de 30 a 63 das infecccedilotildees ocorrem por

ingestatildeo de alimentos contaminados e 6 a 17 decorrem da contaminaccedilatildeo do

solo (MONTANtildeO et al 2010) observaccedilotildees respaldadas por Kim e Weiss (2008)

que citam a ingestatildeo oral de cistos de tecido contendo bradizoiacutetos como a forma

mais comum de adquirir toxoplasmose Conforme Tenter (2009) surtos de

toxoplasmose aguda em seres humanos em vaacuterias regiotildees do mundo tecircm sido

associados a uma ampla variedade de alimentos de origem animal

Cavalcante et al (2006) ao estudar a infecccedilatildeo por T gondii em populaccedilotildees

rurais no estado de Rondocircnia encontrou como principais fatores associados a

prevalecircncia de anticorpos na regiatildeo o consumo de vegetais cultivados em casa

e beber aacutegua de poccedilos

Um aspecto importante eacute a falta de indiacutecios que levem a suspeitar de

infecccedilatildeo por T gondii em animais de produccedilatildeo visto que a presenccedila de cistos

teciduais de T gondii natildeo eacute visiacutevel a olho nu natildeo sendo detectaacuteveis na inspeccedilatildeo

post-mortem que eacute realizada nos frigoriacuteficos o que permite que carnes que

15

estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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33

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34

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36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

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Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

Dados Internacionais de Catalogaccedilatildeo-na-Publicaccedilatildeo (CIP)

N972s

Nunes Gabriel de Lima

Soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T Gondii em patos de corte em feiras livres no municiacutepio de Beleacutem-Pa Gabriel de Lima Nunes orientador Cleacutea Nazareacute Carneiro Bichara co-orientador Ediclei Lima do Carmo ndash 2016

55 f il 30 cm Disertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias Ambientais) ndash Universidade do

Estado do Paraacute Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais Beleacutem 2016

1 Toxoplasma gondi 2 Soroprevalecircncia 3 HAI 4 Patos-Amazocircnia I

Bichara Cleacutea Nazareacute Carneiro orient II Carmo Ediclei Lima do co-orient III Tiacutetulo

CDD ndash 22 ed 63659798115

Catalogado por Fellipe Borges de Oliveira

CRB-11100

Gabriel de Lima Nunes

Soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos de corte em feiras livres no municiacutepio de Beleacutem-Pa

Dissertaccedilatildeo apresentada como requisito parcial para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de mestre em ciecircncias ambientais no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais no Programa Universidade do Estado do Paraacute

Data de aprovaccedilatildeo18032016 Banca examinadora _______________________________ - Orientadora Profa Cleacutea Nazareacute Carneiro Bichara Doutora em Biologia dos Agentes Infecciosos e Parasitaacuterios ICBUFPA Universidade do Estado do Paraacute

_______________________________ - Avaliador Prof Nelson Antocircnio Bailatildeo Ribeiro Doutor em Geneacutetica e Biologia Molecular UFPA Universidade do Estado do Paraacute _______________________________ - Avaliadora Profa Socircnia Claudia de Almeida pinto Doutora em Doenccedilas Tropicais NMTUFPA Universidade do Estado do Paraacute

_______________________________ - Avaliadora Profa Ilma Pastana Ferreira Doutora em Enfermagem UFRJ Universidade do Estado do Paraacute

_______________________________ - Suplente Prof Robson Joseacute de Souza Domingues Doutor em Ciecircncias Bioloacutegicas Anatomia Botucatu UNESP Universidade do Estado do Paraacute

Dedico este trabalho a minha famiacutelia

e a todos os meus amigos que

sempre me apoiaram e nunca

deixaram de acreditar em mim

mesmo quando eu mesmo duvidava

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus por cada dia em que acordo e pela vida que me foi

concedida A minha famiacutelia Patricia Dalmir Marcelo Saulo Juliana Iacutecaro

Isadora Ciacutecero Simpliacutecio e Edylle Landy por tudo que fizeram por mim e por

sempre estarem ao meu lado A minha namorada Edriacutecia Albuquerque pela

companhia e compreensatildeo nesse periacuteodo de minha vida A minha Orientadora

Cleacutea Bichara pelo tempo empreendido comigo pela paciecircncia e ensinamentos

Ao Instituto Evandro ChagasSVS na pessoa do Dr Ediclei Lima do Carmo e sua

equipe pelo apoio e realizaccedilatildeo dos exames laboratoriais Por todos os meus

amigos e colegas de mestrado o tempo que passei com vocecircs seraacute guardado

para sempre em minha memoacuteria Aos meus professores e mestres que tive no

decorrer dessa estrada E por meus amigos que contribuiacuteram direto ou

indiretamente nessa jornada em especial Lisandra Blanco Bruna Martins

Fellipe Borges Adriana Adriele e Carol Novais

ldquoEducaccedilatildeo natildeo transforma o mundo

Educaccedilatildeo muda pessoas

Pessoas transformam o mundordquo

(Paulo Freire)

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em humanos e animais em geral tendem a apresentar taxas altas reflexo das condiccedilotildees ambientais e epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem o desenvolvimento e disseminaccedilatildeo do parasito No estado do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos No entanto outro grupo de aves os patos (Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria da regiatildeo apesar do consumo natildeo ser tatildeo elevado estando restrito a determinados periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais do estado principalmente sob o sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo O presente estudo teve como objetivo estimar a soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Foram avaliados 172 patos de ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais no estado (Castanhal Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) onde estavam submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e quantitativa para anticorpos anti-T gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A soroprevalecircncia obtida foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica em o sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os sistemas as quais as aves foram criadas Este foi o primeiro registro da soroprevalecircncia de toxoplasmose em patos no estado do Paraacute A soroprevalecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (IHA) qualitative and quantitative for anti-T gondii using a cut off dilution of

116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence IHA ducks Amazon Region

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL 11

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL 31

2 ARTIGO ndash Formatado de acordo com as normas da Revista de 37 Veterinaacuteria e Zootecnia

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM 37 PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMO 37

ABSTRACT 38

RESUMEN 38

21 INTRODUCcedilAtildeO 39

22 MATERIAL E MEacuteTODOS 41

23 RESULTADOS 43

24 DISCUSSAtildeO 44

25 CONCLUSOtildeES 47

REFEREcircNCIAS 48

3 CONCLUSAtildeO GERAL 52

ANEXOS 53

APENDICE 1 56

11

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL

Toxoplasma gondii e a toxoplasmose

A toxoplasmose eacute uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii

protozoaacuterio de pouca especificidade parasitaacuteria cosmopolita pertencente ao filo

Apicomplexa subclasse cocciacutedea eacute um parasito intracelular obrigatoacuterio com

ciclo heteroxecircnico e cuja maior distribuiccedilatildeo respeita as condiccedilotildees geograacuteficas e

culturais

Teve seus primeiros casos registrados em roedores (gundi) da Aacutefrica do

Norte e em coelhos no Brasil ambos em 1908 e o primeiro caso associado a

humanos em 1927 por Janku na Tchecoslovaacutequia (FRENKEL BERMUDEZ

2009) Wolf Cowen e Paige em 1939 descreveram a infecccedilatildeo congecircnita e

esclareceram o papel do Toxoplasma como patoacutegeno humano (BICHARA et al

2013) Seus estudos foram aprofundados a partir da deacutecada de 1970 quando se

tomou conhecimento da distribuiccedilatildeo geograacutefica do T gondii (KAWAZOE 2005)

Este protozoaacuterio acomete todos os animais de sangue quente entre os

quais o homem e as aves E esta relaccedilatildeo parasita-hospedeiro resulta em um

processo infeccioso geralmente assintomaacutetico com algumas exceccedilotildees de casos

graves em grupos hiacutegidos e em imunodeprimidos Segundo Meireles (2001) por

ser uma doenccedila de curso benigno muita das vezes passa desapercebida

excetuando-se os grupos de risco a maioria dos pacientes natildeo recebe

terapecircutica especifica

Entre os animais satildeo os feliacutedeos seus uacutenicos hospedeiros definitivos a

que se tem conhecimento onde ocorre o ciclo sexuado do parasito no epiteacutelio

intestinal tendo como produto a forma infectante do parasita os oocistos os

quais satildeo eliminados pelas fezes a partir de duas a trecircs semanas apoacutes a

infecccedilatildeo com o periacuteodo de eliminaccedilatildeo variando geralmente de 7 a 20 dias

sendo os felinos jovens mais suscetiacuteveis agrave infecccedilatildeo toxoplasmaacutetica e tambeacutem os

principais eliminadores de oocisto no ambiente Uma vez excretados no

ambiente os oocistos necessitam de no miacutenimo 24 horas para esporulaccedilatildeo se

tornando infectantes

12

O parasito apresenta durante o ciclo bioloacutegico trecircs formas evolutivas

infectantes satildeo elas os taquizoiacutetas (encontrados em diversos tecidos e fluidos

corporais) os bradizoiacutetas (contidos em cistos teciduais presentes em carnes e

viacutesceras de organismos infectados) e esporozoiacutetas (contidos em oocistos

esporulados) que satildeo infecciosas para ambos os hospedeiros intermediaacuterios e

definitivos existindo entretanto diferenccedilas quanto a infectividade de cada uma

dessas formas Embora os taquizoiacutetas se multipliquem rapidamente (KAWAZOE

2005 TENTER 2009 BARBOSA et al 2014) natildeo sobrevivem fora do organismo

de seu hospedeiro sendo normalmente destruiacutedo por secreccedilotildees gaacutestricas Satildeo

responsaacuteveis pela parasitemia inclusive representam as formas pelas quais o T

gondii por transmissatildeo placentaacuteria atinge o feto em parte de mulheres graacutevidas

infectadas (JONES DUBEY 2014)

Os taquizoiacutetos satildeo estaacutegios caracteriacutesticos da fase aguda da infecccedilatildeo e

os bradizoiacutetos embora sejam estaacutegios semelhantes aos taquizoiacutetas dividem-se

lentamente durante a fase crocircnica da infecccedilatildeo no interior de cistos teciduais que

apresentam tamanhos variados que podem ir de 5 a 100 micrometros de

diacircmetro apresentando parede celular fina e elaacutestica Uma vez instalado nos

diferentes tecidos pode permanecer latente sem causa qualquer dano ao longo

de toda a vida do hospedeiro (BICHARA et al 2013)

Observa-se que devido a infecccedilatildeo por T gondii natildeo se limitar agrave presenccedila

de uma determinada espeacutecie de hospedeiro o seu ciclo de vida pode continuar

indefinidamente por transmissatildeo de cistos teciduais entre hospedeiros

intermediaacuterios (mesmo na ausecircncia de hospedeiros definitivos) e tambeacutem pela

transmissatildeo de oocistos entre hospedeiros definitivos Estando entatildeo envolvidos

vaacuterias possibilidades como via de infecccedilatildeo oral tanto por haacutebitos de

carnivorismo assim como ingestatildeo de vegetais e aacuteguas contaminadas por

oocistos (TENTER 2009)

Principais aspectos epidemioloacutegicos

A toxoplasmose possui uma ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica sendo uma

das zoonoses mais difundidas no mundo apresentando uma alta taxa de

prevalecircncia chegando a atingir mais de 60 da populaccedilatildeo em determinados

paiacuteses (KAWAZOE 2005) Aleacutem disso estima-se que cerca de um terccedilo da

13

populaccedilatildeo mundial jaacute tenha sido infectado (KIM WEISS 2008

PUVANESUARAN et al 2013)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da

toxoplasmose pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um

mesmo paiacutes Poreacutem em geral eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e

subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude que oferecem melhores

condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer viaacuteveis e

infectantes no solo prolongadamente (ROBERT-GANGNEUX DARDEacute 2012)

As causas para variaccedilatildeo de sua disseminaccedilatildeo em diferentes aacutereas geograacuteficas

de um paiacutes ainda natildeo satildeo totalmente conhecidas (JONES DUBEY 2014)

Segundo Frenkel e Bermudez (2009) no Brasil a prevalecircncia de anticorpos

na populaccedilatildeo adulta varia entre 50 e 80 com iacutendices mais elevados em alguns

estados do Norte e do Sul do paiacutes sendo que a incidecircncia aumenta com a idade

Boacuteia et al (2008) verificou que em uma comunidade indiacutegena no Amazonas a

infecccedilatildeo aumentava conforme a faixa etaacuteria chegando a atingir 957 (4446)

em maiores de 50 anos

Os seres humanos podem adquirir a toxoplasmose principalmente por

ingestatildeo de oocistos do solo ingestatildeo de cistos em carne crua ou mal cozida e

infecccedilatildeo transplacentaacuteria (FRENKEL BERMUDEZ 2009) Aleacutem destes satildeo

relatados casos de transmissatildeo pela amamentaccedilatildeo materna durante a fase

aguda transplantes de oacutergatildeos transfusotildees de sangue e derivados e acidentes

laboratoriais (JONES DUBEY 2014)

Para Tenter et al (2000) as vias de transmissatildeo variam de acordo com

haacutebitos culturais e alimentares nas diferentes populaccedilotildees Estes tem observado

que o parasito desenvolveu vaacuterias rotas potenciais de vias de transmissatildeo dentro

e entre espeacutecies hospedeiras no decorrer de sua evoluccedilatildeo mas nem todas as

rotas possiacuteveis de infecccedilatildeo satildeo importantes do ponto de vista da sauacutede puacuteblica

(TENTER 2009)

Grupos profissionais como trabalhadores dos matadouros talhos e

caccediladores tambeacutem podem ser infectados durante a evisceraccedilatildeo e manipulaccedilatildeo

da carne (TENTER 2009) Vetores mecacircnicos como moscas e baratas tambeacutem

satildeo importantes disseminadores de oocistos no ambiente pois podem

eventualmente carrear tais formas de desenvolvimento em suas patas

(KAWAZOE 2005)

14

Embora taquizoiacutetas jaacute tenham sido encontrados em secircmen de machos de

cabras ovelhas e do homem os riscos de transmissatildeo sexual do T gondii satildeo

baixiacutessimos Tambeacutem foi encontrado na saliva mas natildeo existem evidencias de

sua transmissatildeo por beijo embora em contato com a face podem penetrar a

coacuternea e a mucosa bucal (JONES DUBEY 2014)

Para Meireles (2001) existem vaacuterios fatores que influenciam na

epidemiologia da infecccedilatildeo por T gondii como o tipo de manejo e produccedilatildeo dos

animais criteacuterios de higiene em criatoacuterios de animais abatedouros

processamento e tecnologia de alimentos densidade populacional de gatos ou

felinos selvagens condiccedilotildees ambientais como temperatura umidade e

ventilaccedilatildeo que influenciam na esporulaccedilatildeo dos oocistos e os haacutebitos

alimentares diferentes de animais e pessoas

Conforme a Agencia Francesa de Seguranccedila Sanitaacuteria dos Alimentos

(AFSSA 2005 apud BARBOSA 2010) a principal forma de infecccedilatildeo pode variar

muito entre diferentes localidades na Franccedila eacute relatada uma das mais altas

prevalecircncias do mundo cerca de 85 que estaacute intimamente ligado ao haacutebito de

consumir carne crua ou mal cozida enquanto nos paiacuteses da Ameacuterica Central

estaacute relacionada a presenccedila de uma grande quantidade de gatos abandonados

que liberam oocistos no ambiente

Para alguns autores cerca de 30 a 63 das infecccedilotildees ocorrem por

ingestatildeo de alimentos contaminados e 6 a 17 decorrem da contaminaccedilatildeo do

solo (MONTANtildeO et al 2010) observaccedilotildees respaldadas por Kim e Weiss (2008)

que citam a ingestatildeo oral de cistos de tecido contendo bradizoiacutetos como a forma

mais comum de adquirir toxoplasmose Conforme Tenter (2009) surtos de

toxoplasmose aguda em seres humanos em vaacuterias regiotildees do mundo tecircm sido

associados a uma ampla variedade de alimentos de origem animal

Cavalcante et al (2006) ao estudar a infecccedilatildeo por T gondii em populaccedilotildees

rurais no estado de Rondocircnia encontrou como principais fatores associados a

prevalecircncia de anticorpos na regiatildeo o consumo de vegetais cultivados em casa

e beber aacutegua de poccedilos

Um aspecto importante eacute a falta de indiacutecios que levem a suspeitar de

infecccedilatildeo por T gondii em animais de produccedilatildeo visto que a presenccedila de cistos

teciduais de T gondii natildeo eacute visiacutevel a olho nu natildeo sendo detectaacuteveis na inspeccedilatildeo

post-mortem que eacute realizada nos frigoriacuteficos o que permite que carnes que

15

estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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33

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35

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36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

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Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

Gabriel de Lima Nunes

Soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos de corte em feiras livres no municiacutepio de Beleacutem-Pa

Dissertaccedilatildeo apresentada como requisito parcial para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de mestre em ciecircncias ambientais no Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais no Programa Universidade do Estado do Paraacute

Data de aprovaccedilatildeo18032016 Banca examinadora _______________________________ - Orientadora Profa Cleacutea Nazareacute Carneiro Bichara Doutora em Biologia dos Agentes Infecciosos e Parasitaacuterios ICBUFPA Universidade do Estado do Paraacute

_______________________________ - Avaliador Prof Nelson Antocircnio Bailatildeo Ribeiro Doutor em Geneacutetica e Biologia Molecular UFPA Universidade do Estado do Paraacute _______________________________ - Avaliadora Profa Socircnia Claudia de Almeida pinto Doutora em Doenccedilas Tropicais NMTUFPA Universidade do Estado do Paraacute

_______________________________ - Avaliadora Profa Ilma Pastana Ferreira Doutora em Enfermagem UFRJ Universidade do Estado do Paraacute

_______________________________ - Suplente Prof Robson Joseacute de Souza Domingues Doutor em Ciecircncias Bioloacutegicas Anatomia Botucatu UNESP Universidade do Estado do Paraacute

Dedico este trabalho a minha famiacutelia

e a todos os meus amigos que

sempre me apoiaram e nunca

deixaram de acreditar em mim

mesmo quando eu mesmo duvidava

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus por cada dia em que acordo e pela vida que me foi

concedida A minha famiacutelia Patricia Dalmir Marcelo Saulo Juliana Iacutecaro

Isadora Ciacutecero Simpliacutecio e Edylle Landy por tudo que fizeram por mim e por

sempre estarem ao meu lado A minha namorada Edriacutecia Albuquerque pela

companhia e compreensatildeo nesse periacuteodo de minha vida A minha Orientadora

Cleacutea Bichara pelo tempo empreendido comigo pela paciecircncia e ensinamentos

Ao Instituto Evandro ChagasSVS na pessoa do Dr Ediclei Lima do Carmo e sua

equipe pelo apoio e realizaccedilatildeo dos exames laboratoriais Por todos os meus

amigos e colegas de mestrado o tempo que passei com vocecircs seraacute guardado

para sempre em minha memoacuteria Aos meus professores e mestres que tive no

decorrer dessa estrada E por meus amigos que contribuiacuteram direto ou

indiretamente nessa jornada em especial Lisandra Blanco Bruna Martins

Fellipe Borges Adriana Adriele e Carol Novais

ldquoEducaccedilatildeo natildeo transforma o mundo

Educaccedilatildeo muda pessoas

Pessoas transformam o mundordquo

(Paulo Freire)

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em humanos e animais em geral tendem a apresentar taxas altas reflexo das condiccedilotildees ambientais e epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem o desenvolvimento e disseminaccedilatildeo do parasito No estado do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos No entanto outro grupo de aves os patos (Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria da regiatildeo apesar do consumo natildeo ser tatildeo elevado estando restrito a determinados periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais do estado principalmente sob o sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo O presente estudo teve como objetivo estimar a soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Foram avaliados 172 patos de ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais no estado (Castanhal Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) onde estavam submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e quantitativa para anticorpos anti-T gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A soroprevalecircncia obtida foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica em o sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os sistemas as quais as aves foram criadas Este foi o primeiro registro da soroprevalecircncia de toxoplasmose em patos no estado do Paraacute A soroprevalecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (IHA) qualitative and quantitative for anti-T gondii using a cut off dilution of

116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence IHA ducks Amazon Region

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL 11

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL 31

2 ARTIGO ndash Formatado de acordo com as normas da Revista de 37 Veterinaacuteria e Zootecnia

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM 37 PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMO 37

ABSTRACT 38

RESUMEN 38

21 INTRODUCcedilAtildeO 39

22 MATERIAL E MEacuteTODOS 41

23 RESULTADOS 43

24 DISCUSSAtildeO 44

25 CONCLUSOtildeES 47

REFEREcircNCIAS 48

3 CONCLUSAtildeO GERAL 52

ANEXOS 53

APENDICE 1 56

11

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL

Toxoplasma gondii e a toxoplasmose

A toxoplasmose eacute uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii

protozoaacuterio de pouca especificidade parasitaacuteria cosmopolita pertencente ao filo

Apicomplexa subclasse cocciacutedea eacute um parasito intracelular obrigatoacuterio com

ciclo heteroxecircnico e cuja maior distribuiccedilatildeo respeita as condiccedilotildees geograacuteficas e

culturais

Teve seus primeiros casos registrados em roedores (gundi) da Aacutefrica do

Norte e em coelhos no Brasil ambos em 1908 e o primeiro caso associado a

humanos em 1927 por Janku na Tchecoslovaacutequia (FRENKEL BERMUDEZ

2009) Wolf Cowen e Paige em 1939 descreveram a infecccedilatildeo congecircnita e

esclareceram o papel do Toxoplasma como patoacutegeno humano (BICHARA et al

2013) Seus estudos foram aprofundados a partir da deacutecada de 1970 quando se

tomou conhecimento da distribuiccedilatildeo geograacutefica do T gondii (KAWAZOE 2005)

Este protozoaacuterio acomete todos os animais de sangue quente entre os

quais o homem e as aves E esta relaccedilatildeo parasita-hospedeiro resulta em um

processo infeccioso geralmente assintomaacutetico com algumas exceccedilotildees de casos

graves em grupos hiacutegidos e em imunodeprimidos Segundo Meireles (2001) por

ser uma doenccedila de curso benigno muita das vezes passa desapercebida

excetuando-se os grupos de risco a maioria dos pacientes natildeo recebe

terapecircutica especifica

Entre os animais satildeo os feliacutedeos seus uacutenicos hospedeiros definitivos a

que se tem conhecimento onde ocorre o ciclo sexuado do parasito no epiteacutelio

intestinal tendo como produto a forma infectante do parasita os oocistos os

quais satildeo eliminados pelas fezes a partir de duas a trecircs semanas apoacutes a

infecccedilatildeo com o periacuteodo de eliminaccedilatildeo variando geralmente de 7 a 20 dias

sendo os felinos jovens mais suscetiacuteveis agrave infecccedilatildeo toxoplasmaacutetica e tambeacutem os

principais eliminadores de oocisto no ambiente Uma vez excretados no

ambiente os oocistos necessitam de no miacutenimo 24 horas para esporulaccedilatildeo se

tornando infectantes

12

O parasito apresenta durante o ciclo bioloacutegico trecircs formas evolutivas

infectantes satildeo elas os taquizoiacutetas (encontrados em diversos tecidos e fluidos

corporais) os bradizoiacutetas (contidos em cistos teciduais presentes em carnes e

viacutesceras de organismos infectados) e esporozoiacutetas (contidos em oocistos

esporulados) que satildeo infecciosas para ambos os hospedeiros intermediaacuterios e

definitivos existindo entretanto diferenccedilas quanto a infectividade de cada uma

dessas formas Embora os taquizoiacutetas se multipliquem rapidamente (KAWAZOE

2005 TENTER 2009 BARBOSA et al 2014) natildeo sobrevivem fora do organismo

de seu hospedeiro sendo normalmente destruiacutedo por secreccedilotildees gaacutestricas Satildeo

responsaacuteveis pela parasitemia inclusive representam as formas pelas quais o T

gondii por transmissatildeo placentaacuteria atinge o feto em parte de mulheres graacutevidas

infectadas (JONES DUBEY 2014)

Os taquizoiacutetos satildeo estaacutegios caracteriacutesticos da fase aguda da infecccedilatildeo e

os bradizoiacutetos embora sejam estaacutegios semelhantes aos taquizoiacutetas dividem-se

lentamente durante a fase crocircnica da infecccedilatildeo no interior de cistos teciduais que

apresentam tamanhos variados que podem ir de 5 a 100 micrometros de

diacircmetro apresentando parede celular fina e elaacutestica Uma vez instalado nos

diferentes tecidos pode permanecer latente sem causa qualquer dano ao longo

de toda a vida do hospedeiro (BICHARA et al 2013)

Observa-se que devido a infecccedilatildeo por T gondii natildeo se limitar agrave presenccedila

de uma determinada espeacutecie de hospedeiro o seu ciclo de vida pode continuar

indefinidamente por transmissatildeo de cistos teciduais entre hospedeiros

intermediaacuterios (mesmo na ausecircncia de hospedeiros definitivos) e tambeacutem pela

transmissatildeo de oocistos entre hospedeiros definitivos Estando entatildeo envolvidos

vaacuterias possibilidades como via de infecccedilatildeo oral tanto por haacutebitos de

carnivorismo assim como ingestatildeo de vegetais e aacuteguas contaminadas por

oocistos (TENTER 2009)

Principais aspectos epidemioloacutegicos

A toxoplasmose possui uma ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica sendo uma

das zoonoses mais difundidas no mundo apresentando uma alta taxa de

prevalecircncia chegando a atingir mais de 60 da populaccedilatildeo em determinados

paiacuteses (KAWAZOE 2005) Aleacutem disso estima-se que cerca de um terccedilo da

13

populaccedilatildeo mundial jaacute tenha sido infectado (KIM WEISS 2008

PUVANESUARAN et al 2013)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da

toxoplasmose pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um

mesmo paiacutes Poreacutem em geral eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e

subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude que oferecem melhores

condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer viaacuteveis e

infectantes no solo prolongadamente (ROBERT-GANGNEUX DARDEacute 2012)

As causas para variaccedilatildeo de sua disseminaccedilatildeo em diferentes aacutereas geograacuteficas

de um paiacutes ainda natildeo satildeo totalmente conhecidas (JONES DUBEY 2014)

Segundo Frenkel e Bermudez (2009) no Brasil a prevalecircncia de anticorpos

na populaccedilatildeo adulta varia entre 50 e 80 com iacutendices mais elevados em alguns

estados do Norte e do Sul do paiacutes sendo que a incidecircncia aumenta com a idade

Boacuteia et al (2008) verificou que em uma comunidade indiacutegena no Amazonas a

infecccedilatildeo aumentava conforme a faixa etaacuteria chegando a atingir 957 (4446)

em maiores de 50 anos

Os seres humanos podem adquirir a toxoplasmose principalmente por

ingestatildeo de oocistos do solo ingestatildeo de cistos em carne crua ou mal cozida e

infecccedilatildeo transplacentaacuteria (FRENKEL BERMUDEZ 2009) Aleacutem destes satildeo

relatados casos de transmissatildeo pela amamentaccedilatildeo materna durante a fase

aguda transplantes de oacutergatildeos transfusotildees de sangue e derivados e acidentes

laboratoriais (JONES DUBEY 2014)

Para Tenter et al (2000) as vias de transmissatildeo variam de acordo com

haacutebitos culturais e alimentares nas diferentes populaccedilotildees Estes tem observado

que o parasito desenvolveu vaacuterias rotas potenciais de vias de transmissatildeo dentro

e entre espeacutecies hospedeiras no decorrer de sua evoluccedilatildeo mas nem todas as

rotas possiacuteveis de infecccedilatildeo satildeo importantes do ponto de vista da sauacutede puacuteblica

(TENTER 2009)

Grupos profissionais como trabalhadores dos matadouros talhos e

caccediladores tambeacutem podem ser infectados durante a evisceraccedilatildeo e manipulaccedilatildeo

da carne (TENTER 2009) Vetores mecacircnicos como moscas e baratas tambeacutem

satildeo importantes disseminadores de oocistos no ambiente pois podem

eventualmente carrear tais formas de desenvolvimento em suas patas

(KAWAZOE 2005)

14

Embora taquizoiacutetas jaacute tenham sido encontrados em secircmen de machos de

cabras ovelhas e do homem os riscos de transmissatildeo sexual do T gondii satildeo

baixiacutessimos Tambeacutem foi encontrado na saliva mas natildeo existem evidencias de

sua transmissatildeo por beijo embora em contato com a face podem penetrar a

coacuternea e a mucosa bucal (JONES DUBEY 2014)

Para Meireles (2001) existem vaacuterios fatores que influenciam na

epidemiologia da infecccedilatildeo por T gondii como o tipo de manejo e produccedilatildeo dos

animais criteacuterios de higiene em criatoacuterios de animais abatedouros

processamento e tecnologia de alimentos densidade populacional de gatos ou

felinos selvagens condiccedilotildees ambientais como temperatura umidade e

ventilaccedilatildeo que influenciam na esporulaccedilatildeo dos oocistos e os haacutebitos

alimentares diferentes de animais e pessoas

Conforme a Agencia Francesa de Seguranccedila Sanitaacuteria dos Alimentos

(AFSSA 2005 apud BARBOSA 2010) a principal forma de infecccedilatildeo pode variar

muito entre diferentes localidades na Franccedila eacute relatada uma das mais altas

prevalecircncias do mundo cerca de 85 que estaacute intimamente ligado ao haacutebito de

consumir carne crua ou mal cozida enquanto nos paiacuteses da Ameacuterica Central

estaacute relacionada a presenccedila de uma grande quantidade de gatos abandonados

que liberam oocistos no ambiente

Para alguns autores cerca de 30 a 63 das infecccedilotildees ocorrem por

ingestatildeo de alimentos contaminados e 6 a 17 decorrem da contaminaccedilatildeo do

solo (MONTANtildeO et al 2010) observaccedilotildees respaldadas por Kim e Weiss (2008)

que citam a ingestatildeo oral de cistos de tecido contendo bradizoiacutetos como a forma

mais comum de adquirir toxoplasmose Conforme Tenter (2009) surtos de

toxoplasmose aguda em seres humanos em vaacuterias regiotildees do mundo tecircm sido

associados a uma ampla variedade de alimentos de origem animal

Cavalcante et al (2006) ao estudar a infecccedilatildeo por T gondii em populaccedilotildees

rurais no estado de Rondocircnia encontrou como principais fatores associados a

prevalecircncia de anticorpos na regiatildeo o consumo de vegetais cultivados em casa

e beber aacutegua de poccedilos

Um aspecto importante eacute a falta de indiacutecios que levem a suspeitar de

infecccedilatildeo por T gondii em animais de produccedilatildeo visto que a presenccedila de cistos

teciduais de T gondii natildeo eacute visiacutevel a olho nu natildeo sendo detectaacuteveis na inspeccedilatildeo

post-mortem que eacute realizada nos frigoriacuteficos o que permite que carnes que

15

estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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33

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VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

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United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

Dedico este trabalho a minha famiacutelia

e a todos os meus amigos que

sempre me apoiaram e nunca

deixaram de acreditar em mim

mesmo quando eu mesmo duvidava

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus por cada dia em que acordo e pela vida que me foi

concedida A minha famiacutelia Patricia Dalmir Marcelo Saulo Juliana Iacutecaro

Isadora Ciacutecero Simpliacutecio e Edylle Landy por tudo que fizeram por mim e por

sempre estarem ao meu lado A minha namorada Edriacutecia Albuquerque pela

companhia e compreensatildeo nesse periacuteodo de minha vida A minha Orientadora

Cleacutea Bichara pelo tempo empreendido comigo pela paciecircncia e ensinamentos

Ao Instituto Evandro ChagasSVS na pessoa do Dr Ediclei Lima do Carmo e sua

equipe pelo apoio e realizaccedilatildeo dos exames laboratoriais Por todos os meus

amigos e colegas de mestrado o tempo que passei com vocecircs seraacute guardado

para sempre em minha memoacuteria Aos meus professores e mestres que tive no

decorrer dessa estrada E por meus amigos que contribuiacuteram direto ou

indiretamente nessa jornada em especial Lisandra Blanco Bruna Martins

Fellipe Borges Adriana Adriele e Carol Novais

ldquoEducaccedilatildeo natildeo transforma o mundo

Educaccedilatildeo muda pessoas

Pessoas transformam o mundordquo

(Paulo Freire)

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em humanos e animais em geral tendem a apresentar taxas altas reflexo das condiccedilotildees ambientais e epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem o desenvolvimento e disseminaccedilatildeo do parasito No estado do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos No entanto outro grupo de aves os patos (Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria da regiatildeo apesar do consumo natildeo ser tatildeo elevado estando restrito a determinados periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais do estado principalmente sob o sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo O presente estudo teve como objetivo estimar a soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Foram avaliados 172 patos de ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais no estado (Castanhal Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) onde estavam submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e quantitativa para anticorpos anti-T gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A soroprevalecircncia obtida foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica em o sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os sistemas as quais as aves foram criadas Este foi o primeiro registro da soroprevalecircncia de toxoplasmose em patos no estado do Paraacute A soroprevalecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (IHA) qualitative and quantitative for anti-T gondii using a cut off dilution of

116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence IHA ducks Amazon Region

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL 11

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL 31

2 ARTIGO ndash Formatado de acordo com as normas da Revista de 37 Veterinaacuteria e Zootecnia

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM 37 PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMO 37

ABSTRACT 38

RESUMEN 38

21 INTRODUCcedilAtildeO 39

22 MATERIAL E MEacuteTODOS 41

23 RESULTADOS 43

24 DISCUSSAtildeO 44

25 CONCLUSOtildeES 47

REFEREcircNCIAS 48

3 CONCLUSAtildeO GERAL 52

ANEXOS 53

APENDICE 1 56

11

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL

Toxoplasma gondii e a toxoplasmose

A toxoplasmose eacute uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii

protozoaacuterio de pouca especificidade parasitaacuteria cosmopolita pertencente ao filo

Apicomplexa subclasse cocciacutedea eacute um parasito intracelular obrigatoacuterio com

ciclo heteroxecircnico e cuja maior distribuiccedilatildeo respeita as condiccedilotildees geograacuteficas e

culturais

Teve seus primeiros casos registrados em roedores (gundi) da Aacutefrica do

Norte e em coelhos no Brasil ambos em 1908 e o primeiro caso associado a

humanos em 1927 por Janku na Tchecoslovaacutequia (FRENKEL BERMUDEZ

2009) Wolf Cowen e Paige em 1939 descreveram a infecccedilatildeo congecircnita e

esclareceram o papel do Toxoplasma como patoacutegeno humano (BICHARA et al

2013) Seus estudos foram aprofundados a partir da deacutecada de 1970 quando se

tomou conhecimento da distribuiccedilatildeo geograacutefica do T gondii (KAWAZOE 2005)

Este protozoaacuterio acomete todos os animais de sangue quente entre os

quais o homem e as aves E esta relaccedilatildeo parasita-hospedeiro resulta em um

processo infeccioso geralmente assintomaacutetico com algumas exceccedilotildees de casos

graves em grupos hiacutegidos e em imunodeprimidos Segundo Meireles (2001) por

ser uma doenccedila de curso benigno muita das vezes passa desapercebida

excetuando-se os grupos de risco a maioria dos pacientes natildeo recebe

terapecircutica especifica

Entre os animais satildeo os feliacutedeos seus uacutenicos hospedeiros definitivos a

que se tem conhecimento onde ocorre o ciclo sexuado do parasito no epiteacutelio

intestinal tendo como produto a forma infectante do parasita os oocistos os

quais satildeo eliminados pelas fezes a partir de duas a trecircs semanas apoacutes a

infecccedilatildeo com o periacuteodo de eliminaccedilatildeo variando geralmente de 7 a 20 dias

sendo os felinos jovens mais suscetiacuteveis agrave infecccedilatildeo toxoplasmaacutetica e tambeacutem os

principais eliminadores de oocisto no ambiente Uma vez excretados no

ambiente os oocistos necessitam de no miacutenimo 24 horas para esporulaccedilatildeo se

tornando infectantes

12

O parasito apresenta durante o ciclo bioloacutegico trecircs formas evolutivas

infectantes satildeo elas os taquizoiacutetas (encontrados em diversos tecidos e fluidos

corporais) os bradizoiacutetas (contidos em cistos teciduais presentes em carnes e

viacutesceras de organismos infectados) e esporozoiacutetas (contidos em oocistos

esporulados) que satildeo infecciosas para ambos os hospedeiros intermediaacuterios e

definitivos existindo entretanto diferenccedilas quanto a infectividade de cada uma

dessas formas Embora os taquizoiacutetas se multipliquem rapidamente (KAWAZOE

2005 TENTER 2009 BARBOSA et al 2014) natildeo sobrevivem fora do organismo

de seu hospedeiro sendo normalmente destruiacutedo por secreccedilotildees gaacutestricas Satildeo

responsaacuteveis pela parasitemia inclusive representam as formas pelas quais o T

gondii por transmissatildeo placentaacuteria atinge o feto em parte de mulheres graacutevidas

infectadas (JONES DUBEY 2014)

Os taquizoiacutetos satildeo estaacutegios caracteriacutesticos da fase aguda da infecccedilatildeo e

os bradizoiacutetos embora sejam estaacutegios semelhantes aos taquizoiacutetas dividem-se

lentamente durante a fase crocircnica da infecccedilatildeo no interior de cistos teciduais que

apresentam tamanhos variados que podem ir de 5 a 100 micrometros de

diacircmetro apresentando parede celular fina e elaacutestica Uma vez instalado nos

diferentes tecidos pode permanecer latente sem causa qualquer dano ao longo

de toda a vida do hospedeiro (BICHARA et al 2013)

Observa-se que devido a infecccedilatildeo por T gondii natildeo se limitar agrave presenccedila

de uma determinada espeacutecie de hospedeiro o seu ciclo de vida pode continuar

indefinidamente por transmissatildeo de cistos teciduais entre hospedeiros

intermediaacuterios (mesmo na ausecircncia de hospedeiros definitivos) e tambeacutem pela

transmissatildeo de oocistos entre hospedeiros definitivos Estando entatildeo envolvidos

vaacuterias possibilidades como via de infecccedilatildeo oral tanto por haacutebitos de

carnivorismo assim como ingestatildeo de vegetais e aacuteguas contaminadas por

oocistos (TENTER 2009)

Principais aspectos epidemioloacutegicos

A toxoplasmose possui uma ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica sendo uma

das zoonoses mais difundidas no mundo apresentando uma alta taxa de

prevalecircncia chegando a atingir mais de 60 da populaccedilatildeo em determinados

paiacuteses (KAWAZOE 2005) Aleacutem disso estima-se que cerca de um terccedilo da

13

populaccedilatildeo mundial jaacute tenha sido infectado (KIM WEISS 2008

PUVANESUARAN et al 2013)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da

toxoplasmose pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um

mesmo paiacutes Poreacutem em geral eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e

subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude que oferecem melhores

condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer viaacuteveis e

infectantes no solo prolongadamente (ROBERT-GANGNEUX DARDEacute 2012)

As causas para variaccedilatildeo de sua disseminaccedilatildeo em diferentes aacutereas geograacuteficas

de um paiacutes ainda natildeo satildeo totalmente conhecidas (JONES DUBEY 2014)

Segundo Frenkel e Bermudez (2009) no Brasil a prevalecircncia de anticorpos

na populaccedilatildeo adulta varia entre 50 e 80 com iacutendices mais elevados em alguns

estados do Norte e do Sul do paiacutes sendo que a incidecircncia aumenta com a idade

Boacuteia et al (2008) verificou que em uma comunidade indiacutegena no Amazonas a

infecccedilatildeo aumentava conforme a faixa etaacuteria chegando a atingir 957 (4446)

em maiores de 50 anos

Os seres humanos podem adquirir a toxoplasmose principalmente por

ingestatildeo de oocistos do solo ingestatildeo de cistos em carne crua ou mal cozida e

infecccedilatildeo transplacentaacuteria (FRENKEL BERMUDEZ 2009) Aleacutem destes satildeo

relatados casos de transmissatildeo pela amamentaccedilatildeo materna durante a fase

aguda transplantes de oacutergatildeos transfusotildees de sangue e derivados e acidentes

laboratoriais (JONES DUBEY 2014)

Para Tenter et al (2000) as vias de transmissatildeo variam de acordo com

haacutebitos culturais e alimentares nas diferentes populaccedilotildees Estes tem observado

que o parasito desenvolveu vaacuterias rotas potenciais de vias de transmissatildeo dentro

e entre espeacutecies hospedeiras no decorrer de sua evoluccedilatildeo mas nem todas as

rotas possiacuteveis de infecccedilatildeo satildeo importantes do ponto de vista da sauacutede puacuteblica

(TENTER 2009)

Grupos profissionais como trabalhadores dos matadouros talhos e

caccediladores tambeacutem podem ser infectados durante a evisceraccedilatildeo e manipulaccedilatildeo

da carne (TENTER 2009) Vetores mecacircnicos como moscas e baratas tambeacutem

satildeo importantes disseminadores de oocistos no ambiente pois podem

eventualmente carrear tais formas de desenvolvimento em suas patas

(KAWAZOE 2005)

14

Embora taquizoiacutetas jaacute tenham sido encontrados em secircmen de machos de

cabras ovelhas e do homem os riscos de transmissatildeo sexual do T gondii satildeo

baixiacutessimos Tambeacutem foi encontrado na saliva mas natildeo existem evidencias de

sua transmissatildeo por beijo embora em contato com a face podem penetrar a

coacuternea e a mucosa bucal (JONES DUBEY 2014)

Para Meireles (2001) existem vaacuterios fatores que influenciam na

epidemiologia da infecccedilatildeo por T gondii como o tipo de manejo e produccedilatildeo dos

animais criteacuterios de higiene em criatoacuterios de animais abatedouros

processamento e tecnologia de alimentos densidade populacional de gatos ou

felinos selvagens condiccedilotildees ambientais como temperatura umidade e

ventilaccedilatildeo que influenciam na esporulaccedilatildeo dos oocistos e os haacutebitos

alimentares diferentes de animais e pessoas

Conforme a Agencia Francesa de Seguranccedila Sanitaacuteria dos Alimentos

(AFSSA 2005 apud BARBOSA 2010) a principal forma de infecccedilatildeo pode variar

muito entre diferentes localidades na Franccedila eacute relatada uma das mais altas

prevalecircncias do mundo cerca de 85 que estaacute intimamente ligado ao haacutebito de

consumir carne crua ou mal cozida enquanto nos paiacuteses da Ameacuterica Central

estaacute relacionada a presenccedila de uma grande quantidade de gatos abandonados

que liberam oocistos no ambiente

Para alguns autores cerca de 30 a 63 das infecccedilotildees ocorrem por

ingestatildeo de alimentos contaminados e 6 a 17 decorrem da contaminaccedilatildeo do

solo (MONTANtildeO et al 2010) observaccedilotildees respaldadas por Kim e Weiss (2008)

que citam a ingestatildeo oral de cistos de tecido contendo bradizoiacutetos como a forma

mais comum de adquirir toxoplasmose Conforme Tenter (2009) surtos de

toxoplasmose aguda em seres humanos em vaacuterias regiotildees do mundo tecircm sido

associados a uma ampla variedade de alimentos de origem animal

Cavalcante et al (2006) ao estudar a infecccedilatildeo por T gondii em populaccedilotildees

rurais no estado de Rondocircnia encontrou como principais fatores associados a

prevalecircncia de anticorpos na regiatildeo o consumo de vegetais cultivados em casa

e beber aacutegua de poccedilos

Um aspecto importante eacute a falta de indiacutecios que levem a suspeitar de

infecccedilatildeo por T gondii em animais de produccedilatildeo visto que a presenccedila de cistos

teciduais de T gondii natildeo eacute visiacutevel a olho nu natildeo sendo detectaacuteveis na inspeccedilatildeo

post-mortem que eacute realizada nos frigoriacuteficos o que permite que carnes que

15

estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus por cada dia em que acordo e pela vida que me foi

concedida A minha famiacutelia Patricia Dalmir Marcelo Saulo Juliana Iacutecaro

Isadora Ciacutecero Simpliacutecio e Edylle Landy por tudo que fizeram por mim e por

sempre estarem ao meu lado A minha namorada Edriacutecia Albuquerque pela

companhia e compreensatildeo nesse periacuteodo de minha vida A minha Orientadora

Cleacutea Bichara pelo tempo empreendido comigo pela paciecircncia e ensinamentos

Ao Instituto Evandro ChagasSVS na pessoa do Dr Ediclei Lima do Carmo e sua

equipe pelo apoio e realizaccedilatildeo dos exames laboratoriais Por todos os meus

amigos e colegas de mestrado o tempo que passei com vocecircs seraacute guardado

para sempre em minha memoacuteria Aos meus professores e mestres que tive no

decorrer dessa estrada E por meus amigos que contribuiacuteram direto ou

indiretamente nessa jornada em especial Lisandra Blanco Bruna Martins

Fellipe Borges Adriana Adriele e Carol Novais

ldquoEducaccedilatildeo natildeo transforma o mundo

Educaccedilatildeo muda pessoas

Pessoas transformam o mundordquo

(Paulo Freire)

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em humanos e animais em geral tendem a apresentar taxas altas reflexo das condiccedilotildees ambientais e epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem o desenvolvimento e disseminaccedilatildeo do parasito No estado do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos No entanto outro grupo de aves os patos (Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria da regiatildeo apesar do consumo natildeo ser tatildeo elevado estando restrito a determinados periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais do estado principalmente sob o sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo O presente estudo teve como objetivo estimar a soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Foram avaliados 172 patos de ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais no estado (Castanhal Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) onde estavam submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e quantitativa para anticorpos anti-T gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A soroprevalecircncia obtida foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica em o sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os sistemas as quais as aves foram criadas Este foi o primeiro registro da soroprevalecircncia de toxoplasmose em patos no estado do Paraacute A soroprevalecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (IHA) qualitative and quantitative for anti-T gondii using a cut off dilution of

116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence IHA ducks Amazon Region

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL 11

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL 31

2 ARTIGO ndash Formatado de acordo com as normas da Revista de 37 Veterinaacuteria e Zootecnia

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM 37 PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMO 37

ABSTRACT 38

RESUMEN 38

21 INTRODUCcedilAtildeO 39

22 MATERIAL E MEacuteTODOS 41

23 RESULTADOS 43

24 DISCUSSAtildeO 44

25 CONCLUSOtildeES 47

REFEREcircNCIAS 48

3 CONCLUSAtildeO GERAL 52

ANEXOS 53

APENDICE 1 56

11

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL

Toxoplasma gondii e a toxoplasmose

A toxoplasmose eacute uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii

protozoaacuterio de pouca especificidade parasitaacuteria cosmopolita pertencente ao filo

Apicomplexa subclasse cocciacutedea eacute um parasito intracelular obrigatoacuterio com

ciclo heteroxecircnico e cuja maior distribuiccedilatildeo respeita as condiccedilotildees geograacuteficas e

culturais

Teve seus primeiros casos registrados em roedores (gundi) da Aacutefrica do

Norte e em coelhos no Brasil ambos em 1908 e o primeiro caso associado a

humanos em 1927 por Janku na Tchecoslovaacutequia (FRENKEL BERMUDEZ

2009) Wolf Cowen e Paige em 1939 descreveram a infecccedilatildeo congecircnita e

esclareceram o papel do Toxoplasma como patoacutegeno humano (BICHARA et al

2013) Seus estudos foram aprofundados a partir da deacutecada de 1970 quando se

tomou conhecimento da distribuiccedilatildeo geograacutefica do T gondii (KAWAZOE 2005)

Este protozoaacuterio acomete todos os animais de sangue quente entre os

quais o homem e as aves E esta relaccedilatildeo parasita-hospedeiro resulta em um

processo infeccioso geralmente assintomaacutetico com algumas exceccedilotildees de casos

graves em grupos hiacutegidos e em imunodeprimidos Segundo Meireles (2001) por

ser uma doenccedila de curso benigno muita das vezes passa desapercebida

excetuando-se os grupos de risco a maioria dos pacientes natildeo recebe

terapecircutica especifica

Entre os animais satildeo os feliacutedeos seus uacutenicos hospedeiros definitivos a

que se tem conhecimento onde ocorre o ciclo sexuado do parasito no epiteacutelio

intestinal tendo como produto a forma infectante do parasita os oocistos os

quais satildeo eliminados pelas fezes a partir de duas a trecircs semanas apoacutes a

infecccedilatildeo com o periacuteodo de eliminaccedilatildeo variando geralmente de 7 a 20 dias

sendo os felinos jovens mais suscetiacuteveis agrave infecccedilatildeo toxoplasmaacutetica e tambeacutem os

principais eliminadores de oocisto no ambiente Uma vez excretados no

ambiente os oocistos necessitam de no miacutenimo 24 horas para esporulaccedilatildeo se

tornando infectantes

12

O parasito apresenta durante o ciclo bioloacutegico trecircs formas evolutivas

infectantes satildeo elas os taquizoiacutetas (encontrados em diversos tecidos e fluidos

corporais) os bradizoiacutetas (contidos em cistos teciduais presentes em carnes e

viacutesceras de organismos infectados) e esporozoiacutetas (contidos em oocistos

esporulados) que satildeo infecciosas para ambos os hospedeiros intermediaacuterios e

definitivos existindo entretanto diferenccedilas quanto a infectividade de cada uma

dessas formas Embora os taquizoiacutetas se multipliquem rapidamente (KAWAZOE

2005 TENTER 2009 BARBOSA et al 2014) natildeo sobrevivem fora do organismo

de seu hospedeiro sendo normalmente destruiacutedo por secreccedilotildees gaacutestricas Satildeo

responsaacuteveis pela parasitemia inclusive representam as formas pelas quais o T

gondii por transmissatildeo placentaacuteria atinge o feto em parte de mulheres graacutevidas

infectadas (JONES DUBEY 2014)

Os taquizoiacutetos satildeo estaacutegios caracteriacutesticos da fase aguda da infecccedilatildeo e

os bradizoiacutetos embora sejam estaacutegios semelhantes aos taquizoiacutetas dividem-se

lentamente durante a fase crocircnica da infecccedilatildeo no interior de cistos teciduais que

apresentam tamanhos variados que podem ir de 5 a 100 micrometros de

diacircmetro apresentando parede celular fina e elaacutestica Uma vez instalado nos

diferentes tecidos pode permanecer latente sem causa qualquer dano ao longo

de toda a vida do hospedeiro (BICHARA et al 2013)

Observa-se que devido a infecccedilatildeo por T gondii natildeo se limitar agrave presenccedila

de uma determinada espeacutecie de hospedeiro o seu ciclo de vida pode continuar

indefinidamente por transmissatildeo de cistos teciduais entre hospedeiros

intermediaacuterios (mesmo na ausecircncia de hospedeiros definitivos) e tambeacutem pela

transmissatildeo de oocistos entre hospedeiros definitivos Estando entatildeo envolvidos

vaacuterias possibilidades como via de infecccedilatildeo oral tanto por haacutebitos de

carnivorismo assim como ingestatildeo de vegetais e aacuteguas contaminadas por

oocistos (TENTER 2009)

Principais aspectos epidemioloacutegicos

A toxoplasmose possui uma ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica sendo uma

das zoonoses mais difundidas no mundo apresentando uma alta taxa de

prevalecircncia chegando a atingir mais de 60 da populaccedilatildeo em determinados

paiacuteses (KAWAZOE 2005) Aleacutem disso estima-se que cerca de um terccedilo da

13

populaccedilatildeo mundial jaacute tenha sido infectado (KIM WEISS 2008

PUVANESUARAN et al 2013)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da

toxoplasmose pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um

mesmo paiacutes Poreacutem em geral eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e

subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude que oferecem melhores

condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer viaacuteveis e

infectantes no solo prolongadamente (ROBERT-GANGNEUX DARDEacute 2012)

As causas para variaccedilatildeo de sua disseminaccedilatildeo em diferentes aacutereas geograacuteficas

de um paiacutes ainda natildeo satildeo totalmente conhecidas (JONES DUBEY 2014)

Segundo Frenkel e Bermudez (2009) no Brasil a prevalecircncia de anticorpos

na populaccedilatildeo adulta varia entre 50 e 80 com iacutendices mais elevados em alguns

estados do Norte e do Sul do paiacutes sendo que a incidecircncia aumenta com a idade

Boacuteia et al (2008) verificou que em uma comunidade indiacutegena no Amazonas a

infecccedilatildeo aumentava conforme a faixa etaacuteria chegando a atingir 957 (4446)

em maiores de 50 anos

Os seres humanos podem adquirir a toxoplasmose principalmente por

ingestatildeo de oocistos do solo ingestatildeo de cistos em carne crua ou mal cozida e

infecccedilatildeo transplacentaacuteria (FRENKEL BERMUDEZ 2009) Aleacutem destes satildeo

relatados casos de transmissatildeo pela amamentaccedilatildeo materna durante a fase

aguda transplantes de oacutergatildeos transfusotildees de sangue e derivados e acidentes

laboratoriais (JONES DUBEY 2014)

Para Tenter et al (2000) as vias de transmissatildeo variam de acordo com

haacutebitos culturais e alimentares nas diferentes populaccedilotildees Estes tem observado

que o parasito desenvolveu vaacuterias rotas potenciais de vias de transmissatildeo dentro

e entre espeacutecies hospedeiras no decorrer de sua evoluccedilatildeo mas nem todas as

rotas possiacuteveis de infecccedilatildeo satildeo importantes do ponto de vista da sauacutede puacuteblica

(TENTER 2009)

Grupos profissionais como trabalhadores dos matadouros talhos e

caccediladores tambeacutem podem ser infectados durante a evisceraccedilatildeo e manipulaccedilatildeo

da carne (TENTER 2009) Vetores mecacircnicos como moscas e baratas tambeacutem

satildeo importantes disseminadores de oocistos no ambiente pois podem

eventualmente carrear tais formas de desenvolvimento em suas patas

(KAWAZOE 2005)

14

Embora taquizoiacutetas jaacute tenham sido encontrados em secircmen de machos de

cabras ovelhas e do homem os riscos de transmissatildeo sexual do T gondii satildeo

baixiacutessimos Tambeacutem foi encontrado na saliva mas natildeo existem evidencias de

sua transmissatildeo por beijo embora em contato com a face podem penetrar a

coacuternea e a mucosa bucal (JONES DUBEY 2014)

Para Meireles (2001) existem vaacuterios fatores que influenciam na

epidemiologia da infecccedilatildeo por T gondii como o tipo de manejo e produccedilatildeo dos

animais criteacuterios de higiene em criatoacuterios de animais abatedouros

processamento e tecnologia de alimentos densidade populacional de gatos ou

felinos selvagens condiccedilotildees ambientais como temperatura umidade e

ventilaccedilatildeo que influenciam na esporulaccedilatildeo dos oocistos e os haacutebitos

alimentares diferentes de animais e pessoas

Conforme a Agencia Francesa de Seguranccedila Sanitaacuteria dos Alimentos

(AFSSA 2005 apud BARBOSA 2010) a principal forma de infecccedilatildeo pode variar

muito entre diferentes localidades na Franccedila eacute relatada uma das mais altas

prevalecircncias do mundo cerca de 85 que estaacute intimamente ligado ao haacutebito de

consumir carne crua ou mal cozida enquanto nos paiacuteses da Ameacuterica Central

estaacute relacionada a presenccedila de uma grande quantidade de gatos abandonados

que liberam oocistos no ambiente

Para alguns autores cerca de 30 a 63 das infecccedilotildees ocorrem por

ingestatildeo de alimentos contaminados e 6 a 17 decorrem da contaminaccedilatildeo do

solo (MONTANtildeO et al 2010) observaccedilotildees respaldadas por Kim e Weiss (2008)

que citam a ingestatildeo oral de cistos de tecido contendo bradizoiacutetos como a forma

mais comum de adquirir toxoplasmose Conforme Tenter (2009) surtos de

toxoplasmose aguda em seres humanos em vaacuterias regiotildees do mundo tecircm sido

associados a uma ampla variedade de alimentos de origem animal

Cavalcante et al (2006) ao estudar a infecccedilatildeo por T gondii em populaccedilotildees

rurais no estado de Rondocircnia encontrou como principais fatores associados a

prevalecircncia de anticorpos na regiatildeo o consumo de vegetais cultivados em casa

e beber aacutegua de poccedilos

Um aspecto importante eacute a falta de indiacutecios que levem a suspeitar de

infecccedilatildeo por T gondii em animais de produccedilatildeo visto que a presenccedila de cistos

teciduais de T gondii natildeo eacute visiacutevel a olho nu natildeo sendo detectaacuteveis na inspeccedilatildeo

post-mortem que eacute realizada nos frigoriacuteficos o que permite que carnes que

15

estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

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MONTANtildeO P Y CRUZ M A ULLMANN L S LANGONI H BIONDO A W Contato com gatos um fator de risco para a toxoplasmose congecircnita Cliacutenica Veterinaacuteria n 86 p 78-84 2010 NETO O J S Perfil soroepidemioloacutegico e detecccedilatildeo molecular de toxoplasma gondii em gallus gallus e columba livia da Regiatildeo Metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes 2013 89f Tese (Ciecircncia Animal) - Universidade Federal de Goiaacutes 2013 PUVANESUARAN V R NOORDIN R VENUGOPAL BALAKRISHNAN V Isolation and Genotyping of Toxoplasma gondii from Free-Range Ducks in Malaysia AVIAN DISEASES 57 2013 p128ndash132 SANTOS M C F Frequecircncias da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipira e frangos de corte em regiotildees dos Estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba 2012 82f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em ciecircncias bioloacutegicas) ndash Universidade Federal do Rio Grande do Norte Centro de Biociecircncias 2012 SANTOS P S ALBUQUERQUE G R SILVA V M F MARTIN A R MARVULO MFV SOUZA S L P RAGOZO AMA NASCIMENTO CC GENNARI S M DUBEY J P SILVA J C R Seroprevalence of Toxoplasma gondii in free-living Amazon River dolphins (Inia geoffrensis) from central Amazon Brazil Veterinary Parasitology v 183 n 1-2 2011 p 171-173 SILVA A V H LANGONI L The detection of Toxoplasma gondii by comparing cytology histopathology bioassay in mice and the polymerase chain reaction (PCR) Veterinary Parasitology v 97 p 191-198 2001 SILVA J B FONSECA A H ANDRADE S J T SILVA A G M OLIVEIRA C M C BARBOSA J D Prevalecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em buacutefalos (Bubalus bubalis) no Estado do Paraacute Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 33 n 5 2013 p581-585 ROBERT-GANGNEUX F DARDEacute M L Epidemiology of and diagnostic strategies for toxoplasmosis Clinical Microbiology Reviews v25 n2 2012 p264-296 TENTER A M HECKEROTH A R WEISS L M Toxoplasma gondii from animals to humans International Journal for Parasitology v30 n 12-13 2000 p1217-1258 TENTER A M Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Memoacuterias do Instituto Oswaldo Cruz v 104 2009 p364-369 VITALIANO S N Infecccedilatildeo experimental em carcaraacutes (Caracara plancus MILLER J F 1777) com Toxoplasma gondii (Amostra ME49) 2007 65f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Medicina Veterinaria) ndash Faculdade de Ciecircncias Agraacuterias e Veterinaacuterias Unesp Jaboticabal

36

VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

ldquoEducaccedilatildeo natildeo transforma o mundo

Educaccedilatildeo muda pessoas

Pessoas transformam o mundordquo

(Paulo Freire)

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em humanos e animais em geral tendem a apresentar taxas altas reflexo das condiccedilotildees ambientais e epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem o desenvolvimento e disseminaccedilatildeo do parasito No estado do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos No entanto outro grupo de aves os patos (Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria da regiatildeo apesar do consumo natildeo ser tatildeo elevado estando restrito a determinados periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais do estado principalmente sob o sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo O presente estudo teve como objetivo estimar a soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Foram avaliados 172 patos de ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais no estado (Castanhal Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) onde estavam submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e quantitativa para anticorpos anti-T gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A soroprevalecircncia obtida foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica em o sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os sistemas as quais as aves foram criadas Este foi o primeiro registro da soroprevalecircncia de toxoplasmose em patos no estado do Paraacute A soroprevalecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (IHA) qualitative and quantitative for anti-T gondii using a cut off dilution of

116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence IHA ducks Amazon Region

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL 11

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL 31

2 ARTIGO ndash Formatado de acordo com as normas da Revista de 37 Veterinaacuteria e Zootecnia

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM 37 PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMO 37

ABSTRACT 38

RESUMEN 38

21 INTRODUCcedilAtildeO 39

22 MATERIAL E MEacuteTODOS 41

23 RESULTADOS 43

24 DISCUSSAtildeO 44

25 CONCLUSOtildeES 47

REFEREcircNCIAS 48

3 CONCLUSAtildeO GERAL 52

ANEXOS 53

APENDICE 1 56

11

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL

Toxoplasma gondii e a toxoplasmose

A toxoplasmose eacute uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii

protozoaacuterio de pouca especificidade parasitaacuteria cosmopolita pertencente ao filo

Apicomplexa subclasse cocciacutedea eacute um parasito intracelular obrigatoacuterio com

ciclo heteroxecircnico e cuja maior distribuiccedilatildeo respeita as condiccedilotildees geograacuteficas e

culturais

Teve seus primeiros casos registrados em roedores (gundi) da Aacutefrica do

Norte e em coelhos no Brasil ambos em 1908 e o primeiro caso associado a

humanos em 1927 por Janku na Tchecoslovaacutequia (FRENKEL BERMUDEZ

2009) Wolf Cowen e Paige em 1939 descreveram a infecccedilatildeo congecircnita e

esclareceram o papel do Toxoplasma como patoacutegeno humano (BICHARA et al

2013) Seus estudos foram aprofundados a partir da deacutecada de 1970 quando se

tomou conhecimento da distribuiccedilatildeo geograacutefica do T gondii (KAWAZOE 2005)

Este protozoaacuterio acomete todos os animais de sangue quente entre os

quais o homem e as aves E esta relaccedilatildeo parasita-hospedeiro resulta em um

processo infeccioso geralmente assintomaacutetico com algumas exceccedilotildees de casos

graves em grupos hiacutegidos e em imunodeprimidos Segundo Meireles (2001) por

ser uma doenccedila de curso benigno muita das vezes passa desapercebida

excetuando-se os grupos de risco a maioria dos pacientes natildeo recebe

terapecircutica especifica

Entre os animais satildeo os feliacutedeos seus uacutenicos hospedeiros definitivos a

que se tem conhecimento onde ocorre o ciclo sexuado do parasito no epiteacutelio

intestinal tendo como produto a forma infectante do parasita os oocistos os

quais satildeo eliminados pelas fezes a partir de duas a trecircs semanas apoacutes a

infecccedilatildeo com o periacuteodo de eliminaccedilatildeo variando geralmente de 7 a 20 dias

sendo os felinos jovens mais suscetiacuteveis agrave infecccedilatildeo toxoplasmaacutetica e tambeacutem os

principais eliminadores de oocisto no ambiente Uma vez excretados no

ambiente os oocistos necessitam de no miacutenimo 24 horas para esporulaccedilatildeo se

tornando infectantes

12

O parasito apresenta durante o ciclo bioloacutegico trecircs formas evolutivas

infectantes satildeo elas os taquizoiacutetas (encontrados em diversos tecidos e fluidos

corporais) os bradizoiacutetas (contidos em cistos teciduais presentes em carnes e

viacutesceras de organismos infectados) e esporozoiacutetas (contidos em oocistos

esporulados) que satildeo infecciosas para ambos os hospedeiros intermediaacuterios e

definitivos existindo entretanto diferenccedilas quanto a infectividade de cada uma

dessas formas Embora os taquizoiacutetas se multipliquem rapidamente (KAWAZOE

2005 TENTER 2009 BARBOSA et al 2014) natildeo sobrevivem fora do organismo

de seu hospedeiro sendo normalmente destruiacutedo por secreccedilotildees gaacutestricas Satildeo

responsaacuteveis pela parasitemia inclusive representam as formas pelas quais o T

gondii por transmissatildeo placentaacuteria atinge o feto em parte de mulheres graacutevidas

infectadas (JONES DUBEY 2014)

Os taquizoiacutetos satildeo estaacutegios caracteriacutesticos da fase aguda da infecccedilatildeo e

os bradizoiacutetos embora sejam estaacutegios semelhantes aos taquizoiacutetas dividem-se

lentamente durante a fase crocircnica da infecccedilatildeo no interior de cistos teciduais que

apresentam tamanhos variados que podem ir de 5 a 100 micrometros de

diacircmetro apresentando parede celular fina e elaacutestica Uma vez instalado nos

diferentes tecidos pode permanecer latente sem causa qualquer dano ao longo

de toda a vida do hospedeiro (BICHARA et al 2013)

Observa-se que devido a infecccedilatildeo por T gondii natildeo se limitar agrave presenccedila

de uma determinada espeacutecie de hospedeiro o seu ciclo de vida pode continuar

indefinidamente por transmissatildeo de cistos teciduais entre hospedeiros

intermediaacuterios (mesmo na ausecircncia de hospedeiros definitivos) e tambeacutem pela

transmissatildeo de oocistos entre hospedeiros definitivos Estando entatildeo envolvidos

vaacuterias possibilidades como via de infecccedilatildeo oral tanto por haacutebitos de

carnivorismo assim como ingestatildeo de vegetais e aacuteguas contaminadas por

oocistos (TENTER 2009)

Principais aspectos epidemioloacutegicos

A toxoplasmose possui uma ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica sendo uma

das zoonoses mais difundidas no mundo apresentando uma alta taxa de

prevalecircncia chegando a atingir mais de 60 da populaccedilatildeo em determinados

paiacuteses (KAWAZOE 2005) Aleacutem disso estima-se que cerca de um terccedilo da

13

populaccedilatildeo mundial jaacute tenha sido infectado (KIM WEISS 2008

PUVANESUARAN et al 2013)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da

toxoplasmose pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um

mesmo paiacutes Poreacutem em geral eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e

subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude que oferecem melhores

condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer viaacuteveis e

infectantes no solo prolongadamente (ROBERT-GANGNEUX DARDEacute 2012)

As causas para variaccedilatildeo de sua disseminaccedilatildeo em diferentes aacutereas geograacuteficas

de um paiacutes ainda natildeo satildeo totalmente conhecidas (JONES DUBEY 2014)

Segundo Frenkel e Bermudez (2009) no Brasil a prevalecircncia de anticorpos

na populaccedilatildeo adulta varia entre 50 e 80 com iacutendices mais elevados em alguns

estados do Norte e do Sul do paiacutes sendo que a incidecircncia aumenta com a idade

Boacuteia et al (2008) verificou que em uma comunidade indiacutegena no Amazonas a

infecccedilatildeo aumentava conforme a faixa etaacuteria chegando a atingir 957 (4446)

em maiores de 50 anos

Os seres humanos podem adquirir a toxoplasmose principalmente por

ingestatildeo de oocistos do solo ingestatildeo de cistos em carne crua ou mal cozida e

infecccedilatildeo transplacentaacuteria (FRENKEL BERMUDEZ 2009) Aleacutem destes satildeo

relatados casos de transmissatildeo pela amamentaccedilatildeo materna durante a fase

aguda transplantes de oacutergatildeos transfusotildees de sangue e derivados e acidentes

laboratoriais (JONES DUBEY 2014)

Para Tenter et al (2000) as vias de transmissatildeo variam de acordo com

haacutebitos culturais e alimentares nas diferentes populaccedilotildees Estes tem observado

que o parasito desenvolveu vaacuterias rotas potenciais de vias de transmissatildeo dentro

e entre espeacutecies hospedeiras no decorrer de sua evoluccedilatildeo mas nem todas as

rotas possiacuteveis de infecccedilatildeo satildeo importantes do ponto de vista da sauacutede puacuteblica

(TENTER 2009)

Grupos profissionais como trabalhadores dos matadouros talhos e

caccediladores tambeacutem podem ser infectados durante a evisceraccedilatildeo e manipulaccedilatildeo

da carne (TENTER 2009) Vetores mecacircnicos como moscas e baratas tambeacutem

satildeo importantes disseminadores de oocistos no ambiente pois podem

eventualmente carrear tais formas de desenvolvimento em suas patas

(KAWAZOE 2005)

14

Embora taquizoiacutetas jaacute tenham sido encontrados em secircmen de machos de

cabras ovelhas e do homem os riscos de transmissatildeo sexual do T gondii satildeo

baixiacutessimos Tambeacutem foi encontrado na saliva mas natildeo existem evidencias de

sua transmissatildeo por beijo embora em contato com a face podem penetrar a

coacuternea e a mucosa bucal (JONES DUBEY 2014)

Para Meireles (2001) existem vaacuterios fatores que influenciam na

epidemiologia da infecccedilatildeo por T gondii como o tipo de manejo e produccedilatildeo dos

animais criteacuterios de higiene em criatoacuterios de animais abatedouros

processamento e tecnologia de alimentos densidade populacional de gatos ou

felinos selvagens condiccedilotildees ambientais como temperatura umidade e

ventilaccedilatildeo que influenciam na esporulaccedilatildeo dos oocistos e os haacutebitos

alimentares diferentes de animais e pessoas

Conforme a Agencia Francesa de Seguranccedila Sanitaacuteria dos Alimentos

(AFSSA 2005 apud BARBOSA 2010) a principal forma de infecccedilatildeo pode variar

muito entre diferentes localidades na Franccedila eacute relatada uma das mais altas

prevalecircncias do mundo cerca de 85 que estaacute intimamente ligado ao haacutebito de

consumir carne crua ou mal cozida enquanto nos paiacuteses da Ameacuterica Central

estaacute relacionada a presenccedila de uma grande quantidade de gatos abandonados

que liberam oocistos no ambiente

Para alguns autores cerca de 30 a 63 das infecccedilotildees ocorrem por

ingestatildeo de alimentos contaminados e 6 a 17 decorrem da contaminaccedilatildeo do

solo (MONTANtildeO et al 2010) observaccedilotildees respaldadas por Kim e Weiss (2008)

que citam a ingestatildeo oral de cistos de tecido contendo bradizoiacutetos como a forma

mais comum de adquirir toxoplasmose Conforme Tenter (2009) surtos de

toxoplasmose aguda em seres humanos em vaacuterias regiotildees do mundo tecircm sido

associados a uma ampla variedade de alimentos de origem animal

Cavalcante et al (2006) ao estudar a infecccedilatildeo por T gondii em populaccedilotildees

rurais no estado de Rondocircnia encontrou como principais fatores associados a

prevalecircncia de anticorpos na regiatildeo o consumo de vegetais cultivados em casa

e beber aacutegua de poccedilos

Um aspecto importante eacute a falta de indiacutecios que levem a suspeitar de

infecccedilatildeo por T gondii em animais de produccedilatildeo visto que a presenccedila de cistos

teciduais de T gondii natildeo eacute visiacutevel a olho nu natildeo sendo detectaacuteveis na inspeccedilatildeo

post-mortem que eacute realizada nos frigoriacuteficos o que permite que carnes que

15

estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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35

MONTANtildeO P Y CRUZ M A ULLMANN L S LANGONI H BIONDO A W Contato com gatos um fator de risco para a toxoplasmose congecircnita Cliacutenica Veterinaacuteria n 86 p 78-84 2010 NETO O J S Perfil soroepidemioloacutegico e detecccedilatildeo molecular de toxoplasma gondii em gallus gallus e columba livia da Regiatildeo Metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes 2013 89f Tese (Ciecircncia Animal) - Universidade Federal de Goiaacutes 2013 PUVANESUARAN V R NOORDIN R VENUGOPAL BALAKRISHNAN V Isolation and Genotyping of Toxoplasma gondii from Free-Range Ducks in Malaysia AVIAN DISEASES 57 2013 p128ndash132 SANTOS M C F Frequecircncias da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipira e frangos de corte em regiotildees dos Estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba 2012 82f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em ciecircncias bioloacutegicas) ndash Universidade Federal do Rio Grande do Norte Centro de Biociecircncias 2012 SANTOS P S ALBUQUERQUE G R SILVA V M F MARTIN A R MARVULO MFV SOUZA S L P RAGOZO AMA NASCIMENTO CC GENNARI S M DUBEY J P SILVA J C R Seroprevalence of Toxoplasma gondii in free-living Amazon River dolphins (Inia geoffrensis) from central Amazon Brazil Veterinary Parasitology v 183 n 1-2 2011 p 171-173 SILVA A V H LANGONI L The detection of Toxoplasma gondii by comparing cytology histopathology bioassay in mice and the polymerase chain reaction (PCR) Veterinary Parasitology v 97 p 191-198 2001 SILVA J B FONSECA A H ANDRADE S J T SILVA A G M OLIVEIRA C M C BARBOSA J D Prevalecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em buacutefalos (Bubalus bubalis) no Estado do Paraacute Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 33 n 5 2013 p581-585 ROBERT-GANGNEUX F DARDEacute M L Epidemiology of and diagnostic strategies for toxoplasmosis Clinical Microbiology Reviews v25 n2 2012 p264-296 TENTER A M HECKEROTH A R WEISS L M Toxoplasma gondii from animals to humans International Journal for Parasitology v30 n 12-13 2000 p1217-1258 TENTER A M Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Memoacuterias do Instituto Oswaldo Cruz v 104 2009 p364-369 VITALIANO S N Infecccedilatildeo experimental em carcaraacutes (Caracara plancus MILLER J F 1777) com Toxoplasma gondii (Amostra ME49) 2007 65f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Medicina Veterinaria) ndash Faculdade de Ciecircncias Agraacuterias e Veterinaacuterias Unesp Jaboticabal

36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em humanos e animais em geral tendem a apresentar taxas altas reflexo das condiccedilotildees ambientais e epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem o desenvolvimento e disseminaccedilatildeo do parasito No estado do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos No entanto outro grupo de aves os patos (Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria da regiatildeo apesar do consumo natildeo ser tatildeo elevado estando restrito a determinados periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais do estado principalmente sob o sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo O presente estudo teve como objetivo estimar a soroprevalecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Foram avaliados 172 patos de ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais no estado (Castanhal Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) onde estavam submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e quantitativa para anticorpos anti-T gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A soroprevalecircncia obtida foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica em o sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os sistemas as quais as aves foram criadas Este foi o primeiro registro da soroprevalecircncia de toxoplasmose em patos no estado do Paraacute A soroprevalecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (IHA) qualitative and quantitative for anti-T gondii using a cut off dilution of

116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence IHA ducks Amazon Region

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL 11

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL 31

2 ARTIGO ndash Formatado de acordo com as normas da Revista de 37 Veterinaacuteria e Zootecnia

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM 37 PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMO 37

ABSTRACT 38

RESUMEN 38

21 INTRODUCcedilAtildeO 39

22 MATERIAL E MEacuteTODOS 41

23 RESULTADOS 43

24 DISCUSSAtildeO 44

25 CONCLUSOtildeES 47

REFEREcircNCIAS 48

3 CONCLUSAtildeO GERAL 52

ANEXOS 53

APENDICE 1 56

11

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL

Toxoplasma gondii e a toxoplasmose

A toxoplasmose eacute uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii

protozoaacuterio de pouca especificidade parasitaacuteria cosmopolita pertencente ao filo

Apicomplexa subclasse cocciacutedea eacute um parasito intracelular obrigatoacuterio com

ciclo heteroxecircnico e cuja maior distribuiccedilatildeo respeita as condiccedilotildees geograacuteficas e

culturais

Teve seus primeiros casos registrados em roedores (gundi) da Aacutefrica do

Norte e em coelhos no Brasil ambos em 1908 e o primeiro caso associado a

humanos em 1927 por Janku na Tchecoslovaacutequia (FRENKEL BERMUDEZ

2009) Wolf Cowen e Paige em 1939 descreveram a infecccedilatildeo congecircnita e

esclareceram o papel do Toxoplasma como patoacutegeno humano (BICHARA et al

2013) Seus estudos foram aprofundados a partir da deacutecada de 1970 quando se

tomou conhecimento da distribuiccedilatildeo geograacutefica do T gondii (KAWAZOE 2005)

Este protozoaacuterio acomete todos os animais de sangue quente entre os

quais o homem e as aves E esta relaccedilatildeo parasita-hospedeiro resulta em um

processo infeccioso geralmente assintomaacutetico com algumas exceccedilotildees de casos

graves em grupos hiacutegidos e em imunodeprimidos Segundo Meireles (2001) por

ser uma doenccedila de curso benigno muita das vezes passa desapercebida

excetuando-se os grupos de risco a maioria dos pacientes natildeo recebe

terapecircutica especifica

Entre os animais satildeo os feliacutedeos seus uacutenicos hospedeiros definitivos a

que se tem conhecimento onde ocorre o ciclo sexuado do parasito no epiteacutelio

intestinal tendo como produto a forma infectante do parasita os oocistos os

quais satildeo eliminados pelas fezes a partir de duas a trecircs semanas apoacutes a

infecccedilatildeo com o periacuteodo de eliminaccedilatildeo variando geralmente de 7 a 20 dias

sendo os felinos jovens mais suscetiacuteveis agrave infecccedilatildeo toxoplasmaacutetica e tambeacutem os

principais eliminadores de oocisto no ambiente Uma vez excretados no

ambiente os oocistos necessitam de no miacutenimo 24 horas para esporulaccedilatildeo se

tornando infectantes

12

O parasito apresenta durante o ciclo bioloacutegico trecircs formas evolutivas

infectantes satildeo elas os taquizoiacutetas (encontrados em diversos tecidos e fluidos

corporais) os bradizoiacutetas (contidos em cistos teciduais presentes em carnes e

viacutesceras de organismos infectados) e esporozoiacutetas (contidos em oocistos

esporulados) que satildeo infecciosas para ambos os hospedeiros intermediaacuterios e

definitivos existindo entretanto diferenccedilas quanto a infectividade de cada uma

dessas formas Embora os taquizoiacutetas se multipliquem rapidamente (KAWAZOE

2005 TENTER 2009 BARBOSA et al 2014) natildeo sobrevivem fora do organismo

de seu hospedeiro sendo normalmente destruiacutedo por secreccedilotildees gaacutestricas Satildeo

responsaacuteveis pela parasitemia inclusive representam as formas pelas quais o T

gondii por transmissatildeo placentaacuteria atinge o feto em parte de mulheres graacutevidas

infectadas (JONES DUBEY 2014)

Os taquizoiacutetos satildeo estaacutegios caracteriacutesticos da fase aguda da infecccedilatildeo e

os bradizoiacutetos embora sejam estaacutegios semelhantes aos taquizoiacutetas dividem-se

lentamente durante a fase crocircnica da infecccedilatildeo no interior de cistos teciduais que

apresentam tamanhos variados que podem ir de 5 a 100 micrometros de

diacircmetro apresentando parede celular fina e elaacutestica Uma vez instalado nos

diferentes tecidos pode permanecer latente sem causa qualquer dano ao longo

de toda a vida do hospedeiro (BICHARA et al 2013)

Observa-se que devido a infecccedilatildeo por T gondii natildeo se limitar agrave presenccedila

de uma determinada espeacutecie de hospedeiro o seu ciclo de vida pode continuar

indefinidamente por transmissatildeo de cistos teciduais entre hospedeiros

intermediaacuterios (mesmo na ausecircncia de hospedeiros definitivos) e tambeacutem pela

transmissatildeo de oocistos entre hospedeiros definitivos Estando entatildeo envolvidos

vaacuterias possibilidades como via de infecccedilatildeo oral tanto por haacutebitos de

carnivorismo assim como ingestatildeo de vegetais e aacuteguas contaminadas por

oocistos (TENTER 2009)

Principais aspectos epidemioloacutegicos

A toxoplasmose possui uma ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica sendo uma

das zoonoses mais difundidas no mundo apresentando uma alta taxa de

prevalecircncia chegando a atingir mais de 60 da populaccedilatildeo em determinados

paiacuteses (KAWAZOE 2005) Aleacutem disso estima-se que cerca de um terccedilo da

13

populaccedilatildeo mundial jaacute tenha sido infectado (KIM WEISS 2008

PUVANESUARAN et al 2013)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da

toxoplasmose pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um

mesmo paiacutes Poreacutem em geral eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e

subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude que oferecem melhores

condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer viaacuteveis e

infectantes no solo prolongadamente (ROBERT-GANGNEUX DARDEacute 2012)

As causas para variaccedilatildeo de sua disseminaccedilatildeo em diferentes aacutereas geograacuteficas

de um paiacutes ainda natildeo satildeo totalmente conhecidas (JONES DUBEY 2014)

Segundo Frenkel e Bermudez (2009) no Brasil a prevalecircncia de anticorpos

na populaccedilatildeo adulta varia entre 50 e 80 com iacutendices mais elevados em alguns

estados do Norte e do Sul do paiacutes sendo que a incidecircncia aumenta com a idade

Boacuteia et al (2008) verificou que em uma comunidade indiacutegena no Amazonas a

infecccedilatildeo aumentava conforme a faixa etaacuteria chegando a atingir 957 (4446)

em maiores de 50 anos

Os seres humanos podem adquirir a toxoplasmose principalmente por

ingestatildeo de oocistos do solo ingestatildeo de cistos em carne crua ou mal cozida e

infecccedilatildeo transplacentaacuteria (FRENKEL BERMUDEZ 2009) Aleacutem destes satildeo

relatados casos de transmissatildeo pela amamentaccedilatildeo materna durante a fase

aguda transplantes de oacutergatildeos transfusotildees de sangue e derivados e acidentes

laboratoriais (JONES DUBEY 2014)

Para Tenter et al (2000) as vias de transmissatildeo variam de acordo com

haacutebitos culturais e alimentares nas diferentes populaccedilotildees Estes tem observado

que o parasito desenvolveu vaacuterias rotas potenciais de vias de transmissatildeo dentro

e entre espeacutecies hospedeiras no decorrer de sua evoluccedilatildeo mas nem todas as

rotas possiacuteveis de infecccedilatildeo satildeo importantes do ponto de vista da sauacutede puacuteblica

(TENTER 2009)

Grupos profissionais como trabalhadores dos matadouros talhos e

caccediladores tambeacutem podem ser infectados durante a evisceraccedilatildeo e manipulaccedilatildeo

da carne (TENTER 2009) Vetores mecacircnicos como moscas e baratas tambeacutem

satildeo importantes disseminadores de oocistos no ambiente pois podem

eventualmente carrear tais formas de desenvolvimento em suas patas

(KAWAZOE 2005)

14

Embora taquizoiacutetas jaacute tenham sido encontrados em secircmen de machos de

cabras ovelhas e do homem os riscos de transmissatildeo sexual do T gondii satildeo

baixiacutessimos Tambeacutem foi encontrado na saliva mas natildeo existem evidencias de

sua transmissatildeo por beijo embora em contato com a face podem penetrar a

coacuternea e a mucosa bucal (JONES DUBEY 2014)

Para Meireles (2001) existem vaacuterios fatores que influenciam na

epidemiologia da infecccedilatildeo por T gondii como o tipo de manejo e produccedilatildeo dos

animais criteacuterios de higiene em criatoacuterios de animais abatedouros

processamento e tecnologia de alimentos densidade populacional de gatos ou

felinos selvagens condiccedilotildees ambientais como temperatura umidade e

ventilaccedilatildeo que influenciam na esporulaccedilatildeo dos oocistos e os haacutebitos

alimentares diferentes de animais e pessoas

Conforme a Agencia Francesa de Seguranccedila Sanitaacuteria dos Alimentos

(AFSSA 2005 apud BARBOSA 2010) a principal forma de infecccedilatildeo pode variar

muito entre diferentes localidades na Franccedila eacute relatada uma das mais altas

prevalecircncias do mundo cerca de 85 que estaacute intimamente ligado ao haacutebito de

consumir carne crua ou mal cozida enquanto nos paiacuteses da Ameacuterica Central

estaacute relacionada a presenccedila de uma grande quantidade de gatos abandonados

que liberam oocistos no ambiente

Para alguns autores cerca de 30 a 63 das infecccedilotildees ocorrem por

ingestatildeo de alimentos contaminados e 6 a 17 decorrem da contaminaccedilatildeo do

solo (MONTANtildeO et al 2010) observaccedilotildees respaldadas por Kim e Weiss (2008)

que citam a ingestatildeo oral de cistos de tecido contendo bradizoiacutetos como a forma

mais comum de adquirir toxoplasmose Conforme Tenter (2009) surtos de

toxoplasmose aguda em seres humanos em vaacuterias regiotildees do mundo tecircm sido

associados a uma ampla variedade de alimentos de origem animal

Cavalcante et al (2006) ao estudar a infecccedilatildeo por T gondii em populaccedilotildees

rurais no estado de Rondocircnia encontrou como principais fatores associados a

prevalecircncia de anticorpos na regiatildeo o consumo de vegetais cultivados em casa

e beber aacutegua de poccedilos

Um aspecto importante eacute a falta de indiacutecios que levem a suspeitar de

infecccedilatildeo por T gondii em animais de produccedilatildeo visto que a presenccedila de cistos

teciduais de T gondii natildeo eacute visiacutevel a olho nu natildeo sendo detectaacuteveis na inspeccedilatildeo

post-mortem que eacute realizada nos frigoriacuteficos o que permite que carnes que

15

estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

a neonatal screening program preliminary results Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical v 45 n 1 2012 p122-124 BICHARA C N C POacuteVOA M M LEAtildeO R N Q LAINSON R CARMO E L Toxoplasmose In LEAtildeO R N Q Medicina Tropical e Infectologia na Amazocircnia Beleacutem Samauna Editorial 2013 p1317-1354 BOacuteIA M N CARVALHO-COSTA F A SODREacute F C PINTO G M T AMENDOEI M R R Seroprevalence of toxoplasma gondii infection among indian people living in Iauareteacute Satildeo Gabriel da Cachoeira Amazonas Brazil Revista do instituto Medicina tropical de Satildeo Paulo v 50 n 1 2008 p17-20 CARMO E L SILVA M C M XAVIER U A M COSTA BO POacuteVOA M M Inqueacuterito soroloacutegico de toxoplasmose em candidatos a transplante renal no Hospital Ofir Loyola Beleacutem Paraacute Brasil Revista Panamericana de Infectologia v 6 n 4 2004 p15-17 CARMO E L VIANA G M R FIGUEREDO J E BICHARA C N C POacuteVOA M M Determinaccedilatildeo do perfil soroloacutegico de toxoplasmose em um grupo de pacientes febris residentes no municiacutepio de Santana Amapaacute Revista Panamericana de Infectologia v 12 n 1 2010a p28-30 CARMO E L POacuteVOA M M MONTEIRO N S MARINHO R R NASCIMENTO J M FREITAS S N BICHARA C N C Surto de toxoplasmose humana no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Revista Pan-Amazocircnica de Sauacutede v1 2010b p61-66 CAVALCANTE G T AGUIAR D M CAMARGO L M A LABRUNA M B ANDRADE H F MEIRELES L R DUBEY J P THULLIEZ P DIAS R A GENNARI S M Seroprevalence of Toxoplasma gondii Antibodies in Humans From Rural Western Amazon Brazil Journal of Parasitology 92(3) 2006 p647-649

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33

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (IHA) qualitative and quantitative for anti-T gondii using a cut off dilution of

116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence IHA ducks Amazon Region

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL 11

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL 31

2 ARTIGO ndash Formatado de acordo com as normas da Revista de 37 Veterinaacuteria e Zootecnia

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM 37 PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMO 37

ABSTRACT 38

RESUMEN 38

21 INTRODUCcedilAtildeO 39

22 MATERIAL E MEacuteTODOS 41

23 RESULTADOS 43

24 DISCUSSAtildeO 44

25 CONCLUSOtildeES 47

REFEREcircNCIAS 48

3 CONCLUSAtildeO GERAL 52

ANEXOS 53

APENDICE 1 56

11

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL

Toxoplasma gondii e a toxoplasmose

A toxoplasmose eacute uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii

protozoaacuterio de pouca especificidade parasitaacuteria cosmopolita pertencente ao filo

Apicomplexa subclasse cocciacutedea eacute um parasito intracelular obrigatoacuterio com

ciclo heteroxecircnico e cuja maior distribuiccedilatildeo respeita as condiccedilotildees geograacuteficas e

culturais

Teve seus primeiros casos registrados em roedores (gundi) da Aacutefrica do

Norte e em coelhos no Brasil ambos em 1908 e o primeiro caso associado a

humanos em 1927 por Janku na Tchecoslovaacutequia (FRENKEL BERMUDEZ

2009) Wolf Cowen e Paige em 1939 descreveram a infecccedilatildeo congecircnita e

esclareceram o papel do Toxoplasma como patoacutegeno humano (BICHARA et al

2013) Seus estudos foram aprofundados a partir da deacutecada de 1970 quando se

tomou conhecimento da distribuiccedilatildeo geograacutefica do T gondii (KAWAZOE 2005)

Este protozoaacuterio acomete todos os animais de sangue quente entre os

quais o homem e as aves E esta relaccedilatildeo parasita-hospedeiro resulta em um

processo infeccioso geralmente assintomaacutetico com algumas exceccedilotildees de casos

graves em grupos hiacutegidos e em imunodeprimidos Segundo Meireles (2001) por

ser uma doenccedila de curso benigno muita das vezes passa desapercebida

excetuando-se os grupos de risco a maioria dos pacientes natildeo recebe

terapecircutica especifica

Entre os animais satildeo os feliacutedeos seus uacutenicos hospedeiros definitivos a

que se tem conhecimento onde ocorre o ciclo sexuado do parasito no epiteacutelio

intestinal tendo como produto a forma infectante do parasita os oocistos os

quais satildeo eliminados pelas fezes a partir de duas a trecircs semanas apoacutes a

infecccedilatildeo com o periacuteodo de eliminaccedilatildeo variando geralmente de 7 a 20 dias

sendo os felinos jovens mais suscetiacuteveis agrave infecccedilatildeo toxoplasmaacutetica e tambeacutem os

principais eliminadores de oocisto no ambiente Uma vez excretados no

ambiente os oocistos necessitam de no miacutenimo 24 horas para esporulaccedilatildeo se

tornando infectantes

12

O parasito apresenta durante o ciclo bioloacutegico trecircs formas evolutivas

infectantes satildeo elas os taquizoiacutetas (encontrados em diversos tecidos e fluidos

corporais) os bradizoiacutetas (contidos em cistos teciduais presentes em carnes e

viacutesceras de organismos infectados) e esporozoiacutetas (contidos em oocistos

esporulados) que satildeo infecciosas para ambos os hospedeiros intermediaacuterios e

definitivos existindo entretanto diferenccedilas quanto a infectividade de cada uma

dessas formas Embora os taquizoiacutetas se multipliquem rapidamente (KAWAZOE

2005 TENTER 2009 BARBOSA et al 2014) natildeo sobrevivem fora do organismo

de seu hospedeiro sendo normalmente destruiacutedo por secreccedilotildees gaacutestricas Satildeo

responsaacuteveis pela parasitemia inclusive representam as formas pelas quais o T

gondii por transmissatildeo placentaacuteria atinge o feto em parte de mulheres graacutevidas

infectadas (JONES DUBEY 2014)

Os taquizoiacutetos satildeo estaacutegios caracteriacutesticos da fase aguda da infecccedilatildeo e

os bradizoiacutetos embora sejam estaacutegios semelhantes aos taquizoiacutetas dividem-se

lentamente durante a fase crocircnica da infecccedilatildeo no interior de cistos teciduais que

apresentam tamanhos variados que podem ir de 5 a 100 micrometros de

diacircmetro apresentando parede celular fina e elaacutestica Uma vez instalado nos

diferentes tecidos pode permanecer latente sem causa qualquer dano ao longo

de toda a vida do hospedeiro (BICHARA et al 2013)

Observa-se que devido a infecccedilatildeo por T gondii natildeo se limitar agrave presenccedila

de uma determinada espeacutecie de hospedeiro o seu ciclo de vida pode continuar

indefinidamente por transmissatildeo de cistos teciduais entre hospedeiros

intermediaacuterios (mesmo na ausecircncia de hospedeiros definitivos) e tambeacutem pela

transmissatildeo de oocistos entre hospedeiros definitivos Estando entatildeo envolvidos

vaacuterias possibilidades como via de infecccedilatildeo oral tanto por haacutebitos de

carnivorismo assim como ingestatildeo de vegetais e aacuteguas contaminadas por

oocistos (TENTER 2009)

Principais aspectos epidemioloacutegicos

A toxoplasmose possui uma ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica sendo uma

das zoonoses mais difundidas no mundo apresentando uma alta taxa de

prevalecircncia chegando a atingir mais de 60 da populaccedilatildeo em determinados

paiacuteses (KAWAZOE 2005) Aleacutem disso estima-se que cerca de um terccedilo da

13

populaccedilatildeo mundial jaacute tenha sido infectado (KIM WEISS 2008

PUVANESUARAN et al 2013)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da

toxoplasmose pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um

mesmo paiacutes Poreacutem em geral eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e

subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude que oferecem melhores

condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer viaacuteveis e

infectantes no solo prolongadamente (ROBERT-GANGNEUX DARDEacute 2012)

As causas para variaccedilatildeo de sua disseminaccedilatildeo em diferentes aacutereas geograacuteficas

de um paiacutes ainda natildeo satildeo totalmente conhecidas (JONES DUBEY 2014)

Segundo Frenkel e Bermudez (2009) no Brasil a prevalecircncia de anticorpos

na populaccedilatildeo adulta varia entre 50 e 80 com iacutendices mais elevados em alguns

estados do Norte e do Sul do paiacutes sendo que a incidecircncia aumenta com a idade

Boacuteia et al (2008) verificou que em uma comunidade indiacutegena no Amazonas a

infecccedilatildeo aumentava conforme a faixa etaacuteria chegando a atingir 957 (4446)

em maiores de 50 anos

Os seres humanos podem adquirir a toxoplasmose principalmente por

ingestatildeo de oocistos do solo ingestatildeo de cistos em carne crua ou mal cozida e

infecccedilatildeo transplacentaacuteria (FRENKEL BERMUDEZ 2009) Aleacutem destes satildeo

relatados casos de transmissatildeo pela amamentaccedilatildeo materna durante a fase

aguda transplantes de oacutergatildeos transfusotildees de sangue e derivados e acidentes

laboratoriais (JONES DUBEY 2014)

Para Tenter et al (2000) as vias de transmissatildeo variam de acordo com

haacutebitos culturais e alimentares nas diferentes populaccedilotildees Estes tem observado

que o parasito desenvolveu vaacuterias rotas potenciais de vias de transmissatildeo dentro

e entre espeacutecies hospedeiras no decorrer de sua evoluccedilatildeo mas nem todas as

rotas possiacuteveis de infecccedilatildeo satildeo importantes do ponto de vista da sauacutede puacuteblica

(TENTER 2009)

Grupos profissionais como trabalhadores dos matadouros talhos e

caccediladores tambeacutem podem ser infectados durante a evisceraccedilatildeo e manipulaccedilatildeo

da carne (TENTER 2009) Vetores mecacircnicos como moscas e baratas tambeacutem

satildeo importantes disseminadores de oocistos no ambiente pois podem

eventualmente carrear tais formas de desenvolvimento em suas patas

(KAWAZOE 2005)

14

Embora taquizoiacutetas jaacute tenham sido encontrados em secircmen de machos de

cabras ovelhas e do homem os riscos de transmissatildeo sexual do T gondii satildeo

baixiacutessimos Tambeacutem foi encontrado na saliva mas natildeo existem evidencias de

sua transmissatildeo por beijo embora em contato com a face podem penetrar a

coacuternea e a mucosa bucal (JONES DUBEY 2014)

Para Meireles (2001) existem vaacuterios fatores que influenciam na

epidemiologia da infecccedilatildeo por T gondii como o tipo de manejo e produccedilatildeo dos

animais criteacuterios de higiene em criatoacuterios de animais abatedouros

processamento e tecnologia de alimentos densidade populacional de gatos ou

felinos selvagens condiccedilotildees ambientais como temperatura umidade e

ventilaccedilatildeo que influenciam na esporulaccedilatildeo dos oocistos e os haacutebitos

alimentares diferentes de animais e pessoas

Conforme a Agencia Francesa de Seguranccedila Sanitaacuteria dos Alimentos

(AFSSA 2005 apud BARBOSA 2010) a principal forma de infecccedilatildeo pode variar

muito entre diferentes localidades na Franccedila eacute relatada uma das mais altas

prevalecircncias do mundo cerca de 85 que estaacute intimamente ligado ao haacutebito de

consumir carne crua ou mal cozida enquanto nos paiacuteses da Ameacuterica Central

estaacute relacionada a presenccedila de uma grande quantidade de gatos abandonados

que liberam oocistos no ambiente

Para alguns autores cerca de 30 a 63 das infecccedilotildees ocorrem por

ingestatildeo de alimentos contaminados e 6 a 17 decorrem da contaminaccedilatildeo do

solo (MONTANtildeO et al 2010) observaccedilotildees respaldadas por Kim e Weiss (2008)

que citam a ingestatildeo oral de cistos de tecido contendo bradizoiacutetos como a forma

mais comum de adquirir toxoplasmose Conforme Tenter (2009) surtos de

toxoplasmose aguda em seres humanos em vaacuterias regiotildees do mundo tecircm sido

associados a uma ampla variedade de alimentos de origem animal

Cavalcante et al (2006) ao estudar a infecccedilatildeo por T gondii em populaccedilotildees

rurais no estado de Rondocircnia encontrou como principais fatores associados a

prevalecircncia de anticorpos na regiatildeo o consumo de vegetais cultivados em casa

e beber aacutegua de poccedilos

Um aspecto importante eacute a falta de indiacutecios que levem a suspeitar de

infecccedilatildeo por T gondii em animais de produccedilatildeo visto que a presenccedila de cistos

teciduais de T gondii natildeo eacute visiacutevel a olho nu natildeo sendo detectaacuteveis na inspeccedilatildeo

post-mortem que eacute realizada nos frigoriacuteficos o que permite que carnes que

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estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

a neonatal screening program preliminary results Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical v 45 n 1 2012 p122-124 BICHARA C N C POacuteVOA M M LEAtildeO R N Q LAINSON R CARMO E L Toxoplasmose In LEAtildeO R N Q Medicina Tropical e Infectologia na Amazocircnia Beleacutem Samauna Editorial 2013 p1317-1354 BOacuteIA M N CARVALHO-COSTA F A SODREacute F C PINTO G M T AMENDOEI M R R Seroprevalence of toxoplasma gondii infection among indian people living in Iauareteacute Satildeo Gabriel da Cachoeira Amazonas Brazil Revista do instituto Medicina tropical de Satildeo Paulo v 50 n 1 2008 p17-20 CARMO E L SILVA M C M XAVIER U A M COSTA BO POacuteVOA M M Inqueacuterito soroloacutegico de toxoplasmose em candidatos a transplante renal no Hospital Ofir Loyola Beleacutem Paraacute Brasil Revista Panamericana de Infectologia v 6 n 4 2004 p15-17 CARMO E L VIANA G M R FIGUEREDO J E BICHARA C N C POacuteVOA M M Determinaccedilatildeo do perfil soroloacutegico de toxoplasmose em um grupo de pacientes febris residentes no municiacutepio de Santana Amapaacute Revista Panamericana de Infectologia v 12 n 1 2010a p28-30 CARMO E L POacuteVOA M M MONTEIRO N S MARINHO R R NASCIMENTO J M FREITAS S N BICHARA C N C Surto de toxoplasmose humana no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Revista Pan-Amazocircnica de Sauacutede v1 2010b p61-66 CAVALCANTE G T AGUIAR D M CAMARGO L M A LABRUNA M B ANDRADE H F MEIRELES L R DUBEY J P THULLIEZ P DIAS R A GENNARI S M Seroprevalence of Toxoplasma gondii Antibodies in Humans From Rural Western Amazon Brazil Journal of Parasitology 92(3) 2006 p647-649

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33

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL 11

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL 31

2 ARTIGO ndash Formatado de acordo com as normas da Revista de 37 Veterinaacuteria e Zootecnia

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM 37 PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMO 37

ABSTRACT 38

RESUMEN 38

21 INTRODUCcedilAtildeO 39

22 MATERIAL E MEacuteTODOS 41

23 RESULTADOS 43

24 DISCUSSAtildeO 44

25 CONCLUSOtildeES 47

REFEREcircNCIAS 48

3 CONCLUSAtildeO GERAL 52

ANEXOS 53

APENDICE 1 56

11

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL

Toxoplasma gondii e a toxoplasmose

A toxoplasmose eacute uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii

protozoaacuterio de pouca especificidade parasitaacuteria cosmopolita pertencente ao filo

Apicomplexa subclasse cocciacutedea eacute um parasito intracelular obrigatoacuterio com

ciclo heteroxecircnico e cuja maior distribuiccedilatildeo respeita as condiccedilotildees geograacuteficas e

culturais

Teve seus primeiros casos registrados em roedores (gundi) da Aacutefrica do

Norte e em coelhos no Brasil ambos em 1908 e o primeiro caso associado a

humanos em 1927 por Janku na Tchecoslovaacutequia (FRENKEL BERMUDEZ

2009) Wolf Cowen e Paige em 1939 descreveram a infecccedilatildeo congecircnita e

esclareceram o papel do Toxoplasma como patoacutegeno humano (BICHARA et al

2013) Seus estudos foram aprofundados a partir da deacutecada de 1970 quando se

tomou conhecimento da distribuiccedilatildeo geograacutefica do T gondii (KAWAZOE 2005)

Este protozoaacuterio acomete todos os animais de sangue quente entre os

quais o homem e as aves E esta relaccedilatildeo parasita-hospedeiro resulta em um

processo infeccioso geralmente assintomaacutetico com algumas exceccedilotildees de casos

graves em grupos hiacutegidos e em imunodeprimidos Segundo Meireles (2001) por

ser uma doenccedila de curso benigno muita das vezes passa desapercebida

excetuando-se os grupos de risco a maioria dos pacientes natildeo recebe

terapecircutica especifica

Entre os animais satildeo os feliacutedeos seus uacutenicos hospedeiros definitivos a

que se tem conhecimento onde ocorre o ciclo sexuado do parasito no epiteacutelio

intestinal tendo como produto a forma infectante do parasita os oocistos os

quais satildeo eliminados pelas fezes a partir de duas a trecircs semanas apoacutes a

infecccedilatildeo com o periacuteodo de eliminaccedilatildeo variando geralmente de 7 a 20 dias

sendo os felinos jovens mais suscetiacuteveis agrave infecccedilatildeo toxoplasmaacutetica e tambeacutem os

principais eliminadores de oocisto no ambiente Uma vez excretados no

ambiente os oocistos necessitam de no miacutenimo 24 horas para esporulaccedilatildeo se

tornando infectantes

12

O parasito apresenta durante o ciclo bioloacutegico trecircs formas evolutivas

infectantes satildeo elas os taquizoiacutetas (encontrados em diversos tecidos e fluidos

corporais) os bradizoiacutetas (contidos em cistos teciduais presentes em carnes e

viacutesceras de organismos infectados) e esporozoiacutetas (contidos em oocistos

esporulados) que satildeo infecciosas para ambos os hospedeiros intermediaacuterios e

definitivos existindo entretanto diferenccedilas quanto a infectividade de cada uma

dessas formas Embora os taquizoiacutetas se multipliquem rapidamente (KAWAZOE

2005 TENTER 2009 BARBOSA et al 2014) natildeo sobrevivem fora do organismo

de seu hospedeiro sendo normalmente destruiacutedo por secreccedilotildees gaacutestricas Satildeo

responsaacuteveis pela parasitemia inclusive representam as formas pelas quais o T

gondii por transmissatildeo placentaacuteria atinge o feto em parte de mulheres graacutevidas

infectadas (JONES DUBEY 2014)

Os taquizoiacutetos satildeo estaacutegios caracteriacutesticos da fase aguda da infecccedilatildeo e

os bradizoiacutetos embora sejam estaacutegios semelhantes aos taquizoiacutetas dividem-se

lentamente durante a fase crocircnica da infecccedilatildeo no interior de cistos teciduais que

apresentam tamanhos variados que podem ir de 5 a 100 micrometros de

diacircmetro apresentando parede celular fina e elaacutestica Uma vez instalado nos

diferentes tecidos pode permanecer latente sem causa qualquer dano ao longo

de toda a vida do hospedeiro (BICHARA et al 2013)

Observa-se que devido a infecccedilatildeo por T gondii natildeo se limitar agrave presenccedila

de uma determinada espeacutecie de hospedeiro o seu ciclo de vida pode continuar

indefinidamente por transmissatildeo de cistos teciduais entre hospedeiros

intermediaacuterios (mesmo na ausecircncia de hospedeiros definitivos) e tambeacutem pela

transmissatildeo de oocistos entre hospedeiros definitivos Estando entatildeo envolvidos

vaacuterias possibilidades como via de infecccedilatildeo oral tanto por haacutebitos de

carnivorismo assim como ingestatildeo de vegetais e aacuteguas contaminadas por

oocistos (TENTER 2009)

Principais aspectos epidemioloacutegicos

A toxoplasmose possui uma ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica sendo uma

das zoonoses mais difundidas no mundo apresentando uma alta taxa de

prevalecircncia chegando a atingir mais de 60 da populaccedilatildeo em determinados

paiacuteses (KAWAZOE 2005) Aleacutem disso estima-se que cerca de um terccedilo da

13

populaccedilatildeo mundial jaacute tenha sido infectado (KIM WEISS 2008

PUVANESUARAN et al 2013)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da

toxoplasmose pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um

mesmo paiacutes Poreacutem em geral eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e

subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude que oferecem melhores

condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer viaacuteveis e

infectantes no solo prolongadamente (ROBERT-GANGNEUX DARDEacute 2012)

As causas para variaccedilatildeo de sua disseminaccedilatildeo em diferentes aacutereas geograacuteficas

de um paiacutes ainda natildeo satildeo totalmente conhecidas (JONES DUBEY 2014)

Segundo Frenkel e Bermudez (2009) no Brasil a prevalecircncia de anticorpos

na populaccedilatildeo adulta varia entre 50 e 80 com iacutendices mais elevados em alguns

estados do Norte e do Sul do paiacutes sendo que a incidecircncia aumenta com a idade

Boacuteia et al (2008) verificou que em uma comunidade indiacutegena no Amazonas a

infecccedilatildeo aumentava conforme a faixa etaacuteria chegando a atingir 957 (4446)

em maiores de 50 anos

Os seres humanos podem adquirir a toxoplasmose principalmente por

ingestatildeo de oocistos do solo ingestatildeo de cistos em carne crua ou mal cozida e

infecccedilatildeo transplacentaacuteria (FRENKEL BERMUDEZ 2009) Aleacutem destes satildeo

relatados casos de transmissatildeo pela amamentaccedilatildeo materna durante a fase

aguda transplantes de oacutergatildeos transfusotildees de sangue e derivados e acidentes

laboratoriais (JONES DUBEY 2014)

Para Tenter et al (2000) as vias de transmissatildeo variam de acordo com

haacutebitos culturais e alimentares nas diferentes populaccedilotildees Estes tem observado

que o parasito desenvolveu vaacuterias rotas potenciais de vias de transmissatildeo dentro

e entre espeacutecies hospedeiras no decorrer de sua evoluccedilatildeo mas nem todas as

rotas possiacuteveis de infecccedilatildeo satildeo importantes do ponto de vista da sauacutede puacuteblica

(TENTER 2009)

Grupos profissionais como trabalhadores dos matadouros talhos e

caccediladores tambeacutem podem ser infectados durante a evisceraccedilatildeo e manipulaccedilatildeo

da carne (TENTER 2009) Vetores mecacircnicos como moscas e baratas tambeacutem

satildeo importantes disseminadores de oocistos no ambiente pois podem

eventualmente carrear tais formas de desenvolvimento em suas patas

(KAWAZOE 2005)

14

Embora taquizoiacutetas jaacute tenham sido encontrados em secircmen de machos de

cabras ovelhas e do homem os riscos de transmissatildeo sexual do T gondii satildeo

baixiacutessimos Tambeacutem foi encontrado na saliva mas natildeo existem evidencias de

sua transmissatildeo por beijo embora em contato com a face podem penetrar a

coacuternea e a mucosa bucal (JONES DUBEY 2014)

Para Meireles (2001) existem vaacuterios fatores que influenciam na

epidemiologia da infecccedilatildeo por T gondii como o tipo de manejo e produccedilatildeo dos

animais criteacuterios de higiene em criatoacuterios de animais abatedouros

processamento e tecnologia de alimentos densidade populacional de gatos ou

felinos selvagens condiccedilotildees ambientais como temperatura umidade e

ventilaccedilatildeo que influenciam na esporulaccedilatildeo dos oocistos e os haacutebitos

alimentares diferentes de animais e pessoas

Conforme a Agencia Francesa de Seguranccedila Sanitaacuteria dos Alimentos

(AFSSA 2005 apud BARBOSA 2010) a principal forma de infecccedilatildeo pode variar

muito entre diferentes localidades na Franccedila eacute relatada uma das mais altas

prevalecircncias do mundo cerca de 85 que estaacute intimamente ligado ao haacutebito de

consumir carne crua ou mal cozida enquanto nos paiacuteses da Ameacuterica Central

estaacute relacionada a presenccedila de uma grande quantidade de gatos abandonados

que liberam oocistos no ambiente

Para alguns autores cerca de 30 a 63 das infecccedilotildees ocorrem por

ingestatildeo de alimentos contaminados e 6 a 17 decorrem da contaminaccedilatildeo do

solo (MONTANtildeO et al 2010) observaccedilotildees respaldadas por Kim e Weiss (2008)

que citam a ingestatildeo oral de cistos de tecido contendo bradizoiacutetos como a forma

mais comum de adquirir toxoplasmose Conforme Tenter (2009) surtos de

toxoplasmose aguda em seres humanos em vaacuterias regiotildees do mundo tecircm sido

associados a uma ampla variedade de alimentos de origem animal

Cavalcante et al (2006) ao estudar a infecccedilatildeo por T gondii em populaccedilotildees

rurais no estado de Rondocircnia encontrou como principais fatores associados a

prevalecircncia de anticorpos na regiatildeo o consumo de vegetais cultivados em casa

e beber aacutegua de poccedilos

Um aspecto importante eacute a falta de indiacutecios que levem a suspeitar de

infecccedilatildeo por T gondii em animais de produccedilatildeo visto que a presenccedila de cistos

teciduais de T gondii natildeo eacute visiacutevel a olho nu natildeo sendo detectaacuteveis na inspeccedilatildeo

post-mortem que eacute realizada nos frigoriacuteficos o que permite que carnes que

15

estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

a neonatal screening program preliminary results Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical v 45 n 1 2012 p122-124 BICHARA C N C POacuteVOA M M LEAtildeO R N Q LAINSON R CARMO E L Toxoplasmose In LEAtildeO R N Q Medicina Tropical e Infectologia na Amazocircnia Beleacutem Samauna Editorial 2013 p1317-1354 BOacuteIA M N CARVALHO-COSTA F A SODREacute F C PINTO G M T AMENDOEI M R R Seroprevalence of toxoplasma gondii infection among indian people living in Iauareteacute Satildeo Gabriel da Cachoeira Amazonas Brazil Revista do instituto Medicina tropical de Satildeo Paulo v 50 n 1 2008 p17-20 CARMO E L SILVA M C M XAVIER U A M COSTA BO POacuteVOA M M Inqueacuterito soroloacutegico de toxoplasmose em candidatos a transplante renal no Hospital Ofir Loyola Beleacutem Paraacute Brasil Revista Panamericana de Infectologia v 6 n 4 2004 p15-17 CARMO E L VIANA G M R FIGUEREDO J E BICHARA C N C POacuteVOA M M Determinaccedilatildeo do perfil soroloacutegico de toxoplasmose em um grupo de pacientes febris residentes no municiacutepio de Santana Amapaacute Revista Panamericana de Infectologia v 12 n 1 2010a p28-30 CARMO E L POacuteVOA M M MONTEIRO N S MARINHO R R NASCIMENTO J M FREITAS S N BICHARA C N C Surto de toxoplasmose humana no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Revista Pan-Amazocircnica de Sauacutede v1 2010b p61-66 CAVALCANTE G T AGUIAR D M CAMARGO L M A LABRUNA M B ANDRADE H F MEIRELES L R DUBEY J P THULLIEZ P DIAS R A GENNARI S M Seroprevalence of Toxoplasma gondii Antibodies in Humans From Rural Western Amazon Brazil Journal of Parasitology 92(3) 2006 p647-649

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35

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36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

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5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

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6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

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Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

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48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

11

1 INTRODUCcedilAtildeO GERAL

Toxoplasma gondii e a toxoplasmose

A toxoplasmose eacute uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii

protozoaacuterio de pouca especificidade parasitaacuteria cosmopolita pertencente ao filo

Apicomplexa subclasse cocciacutedea eacute um parasito intracelular obrigatoacuterio com

ciclo heteroxecircnico e cuja maior distribuiccedilatildeo respeita as condiccedilotildees geograacuteficas e

culturais

Teve seus primeiros casos registrados em roedores (gundi) da Aacutefrica do

Norte e em coelhos no Brasil ambos em 1908 e o primeiro caso associado a

humanos em 1927 por Janku na Tchecoslovaacutequia (FRENKEL BERMUDEZ

2009) Wolf Cowen e Paige em 1939 descreveram a infecccedilatildeo congecircnita e

esclareceram o papel do Toxoplasma como patoacutegeno humano (BICHARA et al

2013) Seus estudos foram aprofundados a partir da deacutecada de 1970 quando se

tomou conhecimento da distribuiccedilatildeo geograacutefica do T gondii (KAWAZOE 2005)

Este protozoaacuterio acomete todos os animais de sangue quente entre os

quais o homem e as aves E esta relaccedilatildeo parasita-hospedeiro resulta em um

processo infeccioso geralmente assintomaacutetico com algumas exceccedilotildees de casos

graves em grupos hiacutegidos e em imunodeprimidos Segundo Meireles (2001) por

ser uma doenccedila de curso benigno muita das vezes passa desapercebida

excetuando-se os grupos de risco a maioria dos pacientes natildeo recebe

terapecircutica especifica

Entre os animais satildeo os feliacutedeos seus uacutenicos hospedeiros definitivos a

que se tem conhecimento onde ocorre o ciclo sexuado do parasito no epiteacutelio

intestinal tendo como produto a forma infectante do parasita os oocistos os

quais satildeo eliminados pelas fezes a partir de duas a trecircs semanas apoacutes a

infecccedilatildeo com o periacuteodo de eliminaccedilatildeo variando geralmente de 7 a 20 dias

sendo os felinos jovens mais suscetiacuteveis agrave infecccedilatildeo toxoplasmaacutetica e tambeacutem os

principais eliminadores de oocisto no ambiente Uma vez excretados no

ambiente os oocistos necessitam de no miacutenimo 24 horas para esporulaccedilatildeo se

tornando infectantes

12

O parasito apresenta durante o ciclo bioloacutegico trecircs formas evolutivas

infectantes satildeo elas os taquizoiacutetas (encontrados em diversos tecidos e fluidos

corporais) os bradizoiacutetas (contidos em cistos teciduais presentes em carnes e

viacutesceras de organismos infectados) e esporozoiacutetas (contidos em oocistos

esporulados) que satildeo infecciosas para ambos os hospedeiros intermediaacuterios e

definitivos existindo entretanto diferenccedilas quanto a infectividade de cada uma

dessas formas Embora os taquizoiacutetas se multipliquem rapidamente (KAWAZOE

2005 TENTER 2009 BARBOSA et al 2014) natildeo sobrevivem fora do organismo

de seu hospedeiro sendo normalmente destruiacutedo por secreccedilotildees gaacutestricas Satildeo

responsaacuteveis pela parasitemia inclusive representam as formas pelas quais o T

gondii por transmissatildeo placentaacuteria atinge o feto em parte de mulheres graacutevidas

infectadas (JONES DUBEY 2014)

Os taquizoiacutetos satildeo estaacutegios caracteriacutesticos da fase aguda da infecccedilatildeo e

os bradizoiacutetos embora sejam estaacutegios semelhantes aos taquizoiacutetas dividem-se

lentamente durante a fase crocircnica da infecccedilatildeo no interior de cistos teciduais que

apresentam tamanhos variados que podem ir de 5 a 100 micrometros de

diacircmetro apresentando parede celular fina e elaacutestica Uma vez instalado nos

diferentes tecidos pode permanecer latente sem causa qualquer dano ao longo

de toda a vida do hospedeiro (BICHARA et al 2013)

Observa-se que devido a infecccedilatildeo por T gondii natildeo se limitar agrave presenccedila

de uma determinada espeacutecie de hospedeiro o seu ciclo de vida pode continuar

indefinidamente por transmissatildeo de cistos teciduais entre hospedeiros

intermediaacuterios (mesmo na ausecircncia de hospedeiros definitivos) e tambeacutem pela

transmissatildeo de oocistos entre hospedeiros definitivos Estando entatildeo envolvidos

vaacuterias possibilidades como via de infecccedilatildeo oral tanto por haacutebitos de

carnivorismo assim como ingestatildeo de vegetais e aacuteguas contaminadas por

oocistos (TENTER 2009)

Principais aspectos epidemioloacutegicos

A toxoplasmose possui uma ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica sendo uma

das zoonoses mais difundidas no mundo apresentando uma alta taxa de

prevalecircncia chegando a atingir mais de 60 da populaccedilatildeo em determinados

paiacuteses (KAWAZOE 2005) Aleacutem disso estima-se que cerca de um terccedilo da

13

populaccedilatildeo mundial jaacute tenha sido infectado (KIM WEISS 2008

PUVANESUARAN et al 2013)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da

toxoplasmose pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um

mesmo paiacutes Poreacutem em geral eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e

subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude que oferecem melhores

condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer viaacuteveis e

infectantes no solo prolongadamente (ROBERT-GANGNEUX DARDEacute 2012)

As causas para variaccedilatildeo de sua disseminaccedilatildeo em diferentes aacutereas geograacuteficas

de um paiacutes ainda natildeo satildeo totalmente conhecidas (JONES DUBEY 2014)

Segundo Frenkel e Bermudez (2009) no Brasil a prevalecircncia de anticorpos

na populaccedilatildeo adulta varia entre 50 e 80 com iacutendices mais elevados em alguns

estados do Norte e do Sul do paiacutes sendo que a incidecircncia aumenta com a idade

Boacuteia et al (2008) verificou que em uma comunidade indiacutegena no Amazonas a

infecccedilatildeo aumentava conforme a faixa etaacuteria chegando a atingir 957 (4446)

em maiores de 50 anos

Os seres humanos podem adquirir a toxoplasmose principalmente por

ingestatildeo de oocistos do solo ingestatildeo de cistos em carne crua ou mal cozida e

infecccedilatildeo transplacentaacuteria (FRENKEL BERMUDEZ 2009) Aleacutem destes satildeo

relatados casos de transmissatildeo pela amamentaccedilatildeo materna durante a fase

aguda transplantes de oacutergatildeos transfusotildees de sangue e derivados e acidentes

laboratoriais (JONES DUBEY 2014)

Para Tenter et al (2000) as vias de transmissatildeo variam de acordo com

haacutebitos culturais e alimentares nas diferentes populaccedilotildees Estes tem observado

que o parasito desenvolveu vaacuterias rotas potenciais de vias de transmissatildeo dentro

e entre espeacutecies hospedeiras no decorrer de sua evoluccedilatildeo mas nem todas as

rotas possiacuteveis de infecccedilatildeo satildeo importantes do ponto de vista da sauacutede puacuteblica

(TENTER 2009)

Grupos profissionais como trabalhadores dos matadouros talhos e

caccediladores tambeacutem podem ser infectados durante a evisceraccedilatildeo e manipulaccedilatildeo

da carne (TENTER 2009) Vetores mecacircnicos como moscas e baratas tambeacutem

satildeo importantes disseminadores de oocistos no ambiente pois podem

eventualmente carrear tais formas de desenvolvimento em suas patas

(KAWAZOE 2005)

14

Embora taquizoiacutetas jaacute tenham sido encontrados em secircmen de machos de

cabras ovelhas e do homem os riscos de transmissatildeo sexual do T gondii satildeo

baixiacutessimos Tambeacutem foi encontrado na saliva mas natildeo existem evidencias de

sua transmissatildeo por beijo embora em contato com a face podem penetrar a

coacuternea e a mucosa bucal (JONES DUBEY 2014)

Para Meireles (2001) existem vaacuterios fatores que influenciam na

epidemiologia da infecccedilatildeo por T gondii como o tipo de manejo e produccedilatildeo dos

animais criteacuterios de higiene em criatoacuterios de animais abatedouros

processamento e tecnologia de alimentos densidade populacional de gatos ou

felinos selvagens condiccedilotildees ambientais como temperatura umidade e

ventilaccedilatildeo que influenciam na esporulaccedilatildeo dos oocistos e os haacutebitos

alimentares diferentes de animais e pessoas

Conforme a Agencia Francesa de Seguranccedila Sanitaacuteria dos Alimentos

(AFSSA 2005 apud BARBOSA 2010) a principal forma de infecccedilatildeo pode variar

muito entre diferentes localidades na Franccedila eacute relatada uma das mais altas

prevalecircncias do mundo cerca de 85 que estaacute intimamente ligado ao haacutebito de

consumir carne crua ou mal cozida enquanto nos paiacuteses da Ameacuterica Central

estaacute relacionada a presenccedila de uma grande quantidade de gatos abandonados

que liberam oocistos no ambiente

Para alguns autores cerca de 30 a 63 das infecccedilotildees ocorrem por

ingestatildeo de alimentos contaminados e 6 a 17 decorrem da contaminaccedilatildeo do

solo (MONTANtildeO et al 2010) observaccedilotildees respaldadas por Kim e Weiss (2008)

que citam a ingestatildeo oral de cistos de tecido contendo bradizoiacutetos como a forma

mais comum de adquirir toxoplasmose Conforme Tenter (2009) surtos de

toxoplasmose aguda em seres humanos em vaacuterias regiotildees do mundo tecircm sido

associados a uma ampla variedade de alimentos de origem animal

Cavalcante et al (2006) ao estudar a infecccedilatildeo por T gondii em populaccedilotildees

rurais no estado de Rondocircnia encontrou como principais fatores associados a

prevalecircncia de anticorpos na regiatildeo o consumo de vegetais cultivados em casa

e beber aacutegua de poccedilos

Um aspecto importante eacute a falta de indiacutecios que levem a suspeitar de

infecccedilatildeo por T gondii em animais de produccedilatildeo visto que a presenccedila de cistos

teciduais de T gondii natildeo eacute visiacutevel a olho nu natildeo sendo detectaacuteveis na inspeccedilatildeo

post-mortem que eacute realizada nos frigoriacuteficos o que permite que carnes que

15

estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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35

MONTANtildeO P Y CRUZ M A ULLMANN L S LANGONI H BIONDO A W Contato com gatos um fator de risco para a toxoplasmose congecircnita Cliacutenica Veterinaacuteria n 86 p 78-84 2010 NETO O J S Perfil soroepidemioloacutegico e detecccedilatildeo molecular de toxoplasma gondii em gallus gallus e columba livia da Regiatildeo Metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes 2013 89f Tese (Ciecircncia Animal) - Universidade Federal de Goiaacutes 2013 PUVANESUARAN V R NOORDIN R VENUGOPAL BALAKRISHNAN V Isolation and Genotyping of Toxoplasma gondii from Free-Range Ducks in Malaysia AVIAN DISEASES 57 2013 p128ndash132 SANTOS M C F Frequecircncias da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipira e frangos de corte em regiotildees dos Estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba 2012 82f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em ciecircncias bioloacutegicas) ndash Universidade Federal do Rio Grande do Norte Centro de Biociecircncias 2012 SANTOS P S ALBUQUERQUE G R SILVA V M F MARTIN A R MARVULO MFV SOUZA S L P RAGOZO AMA NASCIMENTO CC GENNARI S M DUBEY J P SILVA J C R Seroprevalence of Toxoplasma gondii in free-living Amazon River dolphins (Inia geoffrensis) from central Amazon Brazil Veterinary Parasitology v 183 n 1-2 2011 p 171-173 SILVA A V H LANGONI L The detection of Toxoplasma gondii by comparing cytology histopathology bioassay in mice and the polymerase chain reaction (PCR) Veterinary Parasitology v 97 p 191-198 2001 SILVA J B FONSECA A H ANDRADE S J T SILVA A G M OLIVEIRA C M C BARBOSA J D Prevalecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em buacutefalos (Bubalus bubalis) no Estado do Paraacute Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 33 n 5 2013 p581-585 ROBERT-GANGNEUX F DARDEacute M L Epidemiology of and diagnostic strategies for toxoplasmosis Clinical Microbiology Reviews v25 n2 2012 p264-296 TENTER A M HECKEROTH A R WEISS L M Toxoplasma gondii from animals to humans International Journal for Parasitology v30 n 12-13 2000 p1217-1258 TENTER A M Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Memoacuterias do Instituto Oswaldo Cruz v 104 2009 p364-369 VITALIANO S N Infecccedilatildeo experimental em carcaraacutes (Caracara plancus MILLER J F 1777) com Toxoplasma gondii (Amostra ME49) 2007 65f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Medicina Veterinaria) ndash Faculdade de Ciecircncias Agraacuterias e Veterinaacuterias Unesp Jaboticabal

36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

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Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

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6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

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Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

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48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

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13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

12

O parasito apresenta durante o ciclo bioloacutegico trecircs formas evolutivas

infectantes satildeo elas os taquizoiacutetas (encontrados em diversos tecidos e fluidos

corporais) os bradizoiacutetas (contidos em cistos teciduais presentes em carnes e

viacutesceras de organismos infectados) e esporozoiacutetas (contidos em oocistos

esporulados) que satildeo infecciosas para ambos os hospedeiros intermediaacuterios e

definitivos existindo entretanto diferenccedilas quanto a infectividade de cada uma

dessas formas Embora os taquizoiacutetas se multipliquem rapidamente (KAWAZOE

2005 TENTER 2009 BARBOSA et al 2014) natildeo sobrevivem fora do organismo

de seu hospedeiro sendo normalmente destruiacutedo por secreccedilotildees gaacutestricas Satildeo

responsaacuteveis pela parasitemia inclusive representam as formas pelas quais o T

gondii por transmissatildeo placentaacuteria atinge o feto em parte de mulheres graacutevidas

infectadas (JONES DUBEY 2014)

Os taquizoiacutetos satildeo estaacutegios caracteriacutesticos da fase aguda da infecccedilatildeo e

os bradizoiacutetos embora sejam estaacutegios semelhantes aos taquizoiacutetas dividem-se

lentamente durante a fase crocircnica da infecccedilatildeo no interior de cistos teciduais que

apresentam tamanhos variados que podem ir de 5 a 100 micrometros de

diacircmetro apresentando parede celular fina e elaacutestica Uma vez instalado nos

diferentes tecidos pode permanecer latente sem causa qualquer dano ao longo

de toda a vida do hospedeiro (BICHARA et al 2013)

Observa-se que devido a infecccedilatildeo por T gondii natildeo se limitar agrave presenccedila

de uma determinada espeacutecie de hospedeiro o seu ciclo de vida pode continuar

indefinidamente por transmissatildeo de cistos teciduais entre hospedeiros

intermediaacuterios (mesmo na ausecircncia de hospedeiros definitivos) e tambeacutem pela

transmissatildeo de oocistos entre hospedeiros definitivos Estando entatildeo envolvidos

vaacuterias possibilidades como via de infecccedilatildeo oral tanto por haacutebitos de

carnivorismo assim como ingestatildeo de vegetais e aacuteguas contaminadas por

oocistos (TENTER 2009)

Principais aspectos epidemioloacutegicos

A toxoplasmose possui uma ampla distribuiccedilatildeo geograacutefica sendo uma

das zoonoses mais difundidas no mundo apresentando uma alta taxa de

prevalecircncia chegando a atingir mais de 60 da populaccedilatildeo em determinados

paiacuteses (KAWAZOE 2005) Aleacutem disso estima-se que cerca de um terccedilo da

13

populaccedilatildeo mundial jaacute tenha sido infectado (KIM WEISS 2008

PUVANESUARAN et al 2013)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da

toxoplasmose pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um

mesmo paiacutes Poreacutem em geral eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e

subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude que oferecem melhores

condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer viaacuteveis e

infectantes no solo prolongadamente (ROBERT-GANGNEUX DARDEacute 2012)

As causas para variaccedilatildeo de sua disseminaccedilatildeo em diferentes aacutereas geograacuteficas

de um paiacutes ainda natildeo satildeo totalmente conhecidas (JONES DUBEY 2014)

Segundo Frenkel e Bermudez (2009) no Brasil a prevalecircncia de anticorpos

na populaccedilatildeo adulta varia entre 50 e 80 com iacutendices mais elevados em alguns

estados do Norte e do Sul do paiacutes sendo que a incidecircncia aumenta com a idade

Boacuteia et al (2008) verificou que em uma comunidade indiacutegena no Amazonas a

infecccedilatildeo aumentava conforme a faixa etaacuteria chegando a atingir 957 (4446)

em maiores de 50 anos

Os seres humanos podem adquirir a toxoplasmose principalmente por

ingestatildeo de oocistos do solo ingestatildeo de cistos em carne crua ou mal cozida e

infecccedilatildeo transplacentaacuteria (FRENKEL BERMUDEZ 2009) Aleacutem destes satildeo

relatados casos de transmissatildeo pela amamentaccedilatildeo materna durante a fase

aguda transplantes de oacutergatildeos transfusotildees de sangue e derivados e acidentes

laboratoriais (JONES DUBEY 2014)

Para Tenter et al (2000) as vias de transmissatildeo variam de acordo com

haacutebitos culturais e alimentares nas diferentes populaccedilotildees Estes tem observado

que o parasito desenvolveu vaacuterias rotas potenciais de vias de transmissatildeo dentro

e entre espeacutecies hospedeiras no decorrer de sua evoluccedilatildeo mas nem todas as

rotas possiacuteveis de infecccedilatildeo satildeo importantes do ponto de vista da sauacutede puacuteblica

(TENTER 2009)

Grupos profissionais como trabalhadores dos matadouros talhos e

caccediladores tambeacutem podem ser infectados durante a evisceraccedilatildeo e manipulaccedilatildeo

da carne (TENTER 2009) Vetores mecacircnicos como moscas e baratas tambeacutem

satildeo importantes disseminadores de oocistos no ambiente pois podem

eventualmente carrear tais formas de desenvolvimento em suas patas

(KAWAZOE 2005)

14

Embora taquizoiacutetas jaacute tenham sido encontrados em secircmen de machos de

cabras ovelhas e do homem os riscos de transmissatildeo sexual do T gondii satildeo

baixiacutessimos Tambeacutem foi encontrado na saliva mas natildeo existem evidencias de

sua transmissatildeo por beijo embora em contato com a face podem penetrar a

coacuternea e a mucosa bucal (JONES DUBEY 2014)

Para Meireles (2001) existem vaacuterios fatores que influenciam na

epidemiologia da infecccedilatildeo por T gondii como o tipo de manejo e produccedilatildeo dos

animais criteacuterios de higiene em criatoacuterios de animais abatedouros

processamento e tecnologia de alimentos densidade populacional de gatos ou

felinos selvagens condiccedilotildees ambientais como temperatura umidade e

ventilaccedilatildeo que influenciam na esporulaccedilatildeo dos oocistos e os haacutebitos

alimentares diferentes de animais e pessoas

Conforme a Agencia Francesa de Seguranccedila Sanitaacuteria dos Alimentos

(AFSSA 2005 apud BARBOSA 2010) a principal forma de infecccedilatildeo pode variar

muito entre diferentes localidades na Franccedila eacute relatada uma das mais altas

prevalecircncias do mundo cerca de 85 que estaacute intimamente ligado ao haacutebito de

consumir carne crua ou mal cozida enquanto nos paiacuteses da Ameacuterica Central

estaacute relacionada a presenccedila de uma grande quantidade de gatos abandonados

que liberam oocistos no ambiente

Para alguns autores cerca de 30 a 63 das infecccedilotildees ocorrem por

ingestatildeo de alimentos contaminados e 6 a 17 decorrem da contaminaccedilatildeo do

solo (MONTANtildeO et al 2010) observaccedilotildees respaldadas por Kim e Weiss (2008)

que citam a ingestatildeo oral de cistos de tecido contendo bradizoiacutetos como a forma

mais comum de adquirir toxoplasmose Conforme Tenter (2009) surtos de

toxoplasmose aguda em seres humanos em vaacuterias regiotildees do mundo tecircm sido

associados a uma ampla variedade de alimentos de origem animal

Cavalcante et al (2006) ao estudar a infecccedilatildeo por T gondii em populaccedilotildees

rurais no estado de Rondocircnia encontrou como principais fatores associados a

prevalecircncia de anticorpos na regiatildeo o consumo de vegetais cultivados em casa

e beber aacutegua de poccedilos

Um aspecto importante eacute a falta de indiacutecios que levem a suspeitar de

infecccedilatildeo por T gondii em animais de produccedilatildeo visto que a presenccedila de cistos

teciduais de T gondii natildeo eacute visiacutevel a olho nu natildeo sendo detectaacuteveis na inspeccedilatildeo

post-mortem que eacute realizada nos frigoriacuteficos o que permite que carnes que

15

estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

13

populaccedilatildeo mundial jaacute tenha sido infectado (KIM WEISS 2008

PUVANESUARAN et al 2013)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da

toxoplasmose pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um

mesmo paiacutes Poreacutem em geral eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e

subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude que oferecem melhores

condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer viaacuteveis e

infectantes no solo prolongadamente (ROBERT-GANGNEUX DARDEacute 2012)

As causas para variaccedilatildeo de sua disseminaccedilatildeo em diferentes aacutereas geograacuteficas

de um paiacutes ainda natildeo satildeo totalmente conhecidas (JONES DUBEY 2014)

Segundo Frenkel e Bermudez (2009) no Brasil a prevalecircncia de anticorpos

na populaccedilatildeo adulta varia entre 50 e 80 com iacutendices mais elevados em alguns

estados do Norte e do Sul do paiacutes sendo que a incidecircncia aumenta com a idade

Boacuteia et al (2008) verificou que em uma comunidade indiacutegena no Amazonas a

infecccedilatildeo aumentava conforme a faixa etaacuteria chegando a atingir 957 (4446)

em maiores de 50 anos

Os seres humanos podem adquirir a toxoplasmose principalmente por

ingestatildeo de oocistos do solo ingestatildeo de cistos em carne crua ou mal cozida e

infecccedilatildeo transplacentaacuteria (FRENKEL BERMUDEZ 2009) Aleacutem destes satildeo

relatados casos de transmissatildeo pela amamentaccedilatildeo materna durante a fase

aguda transplantes de oacutergatildeos transfusotildees de sangue e derivados e acidentes

laboratoriais (JONES DUBEY 2014)

Para Tenter et al (2000) as vias de transmissatildeo variam de acordo com

haacutebitos culturais e alimentares nas diferentes populaccedilotildees Estes tem observado

que o parasito desenvolveu vaacuterias rotas potenciais de vias de transmissatildeo dentro

e entre espeacutecies hospedeiras no decorrer de sua evoluccedilatildeo mas nem todas as

rotas possiacuteveis de infecccedilatildeo satildeo importantes do ponto de vista da sauacutede puacuteblica

(TENTER 2009)

Grupos profissionais como trabalhadores dos matadouros talhos e

caccediladores tambeacutem podem ser infectados durante a evisceraccedilatildeo e manipulaccedilatildeo

da carne (TENTER 2009) Vetores mecacircnicos como moscas e baratas tambeacutem

satildeo importantes disseminadores de oocistos no ambiente pois podem

eventualmente carrear tais formas de desenvolvimento em suas patas

(KAWAZOE 2005)

14

Embora taquizoiacutetas jaacute tenham sido encontrados em secircmen de machos de

cabras ovelhas e do homem os riscos de transmissatildeo sexual do T gondii satildeo

baixiacutessimos Tambeacutem foi encontrado na saliva mas natildeo existem evidencias de

sua transmissatildeo por beijo embora em contato com a face podem penetrar a

coacuternea e a mucosa bucal (JONES DUBEY 2014)

Para Meireles (2001) existem vaacuterios fatores que influenciam na

epidemiologia da infecccedilatildeo por T gondii como o tipo de manejo e produccedilatildeo dos

animais criteacuterios de higiene em criatoacuterios de animais abatedouros

processamento e tecnologia de alimentos densidade populacional de gatos ou

felinos selvagens condiccedilotildees ambientais como temperatura umidade e

ventilaccedilatildeo que influenciam na esporulaccedilatildeo dos oocistos e os haacutebitos

alimentares diferentes de animais e pessoas

Conforme a Agencia Francesa de Seguranccedila Sanitaacuteria dos Alimentos

(AFSSA 2005 apud BARBOSA 2010) a principal forma de infecccedilatildeo pode variar

muito entre diferentes localidades na Franccedila eacute relatada uma das mais altas

prevalecircncias do mundo cerca de 85 que estaacute intimamente ligado ao haacutebito de

consumir carne crua ou mal cozida enquanto nos paiacuteses da Ameacuterica Central

estaacute relacionada a presenccedila de uma grande quantidade de gatos abandonados

que liberam oocistos no ambiente

Para alguns autores cerca de 30 a 63 das infecccedilotildees ocorrem por

ingestatildeo de alimentos contaminados e 6 a 17 decorrem da contaminaccedilatildeo do

solo (MONTANtildeO et al 2010) observaccedilotildees respaldadas por Kim e Weiss (2008)

que citam a ingestatildeo oral de cistos de tecido contendo bradizoiacutetos como a forma

mais comum de adquirir toxoplasmose Conforme Tenter (2009) surtos de

toxoplasmose aguda em seres humanos em vaacuterias regiotildees do mundo tecircm sido

associados a uma ampla variedade de alimentos de origem animal

Cavalcante et al (2006) ao estudar a infecccedilatildeo por T gondii em populaccedilotildees

rurais no estado de Rondocircnia encontrou como principais fatores associados a

prevalecircncia de anticorpos na regiatildeo o consumo de vegetais cultivados em casa

e beber aacutegua de poccedilos

Um aspecto importante eacute a falta de indiacutecios que levem a suspeitar de

infecccedilatildeo por T gondii em animais de produccedilatildeo visto que a presenccedila de cistos

teciduais de T gondii natildeo eacute visiacutevel a olho nu natildeo sendo detectaacuteveis na inspeccedilatildeo

post-mortem que eacute realizada nos frigoriacuteficos o que permite que carnes que

15

estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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33

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34

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36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

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52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

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ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

14

Embora taquizoiacutetas jaacute tenham sido encontrados em secircmen de machos de

cabras ovelhas e do homem os riscos de transmissatildeo sexual do T gondii satildeo

baixiacutessimos Tambeacutem foi encontrado na saliva mas natildeo existem evidencias de

sua transmissatildeo por beijo embora em contato com a face podem penetrar a

coacuternea e a mucosa bucal (JONES DUBEY 2014)

Para Meireles (2001) existem vaacuterios fatores que influenciam na

epidemiologia da infecccedilatildeo por T gondii como o tipo de manejo e produccedilatildeo dos

animais criteacuterios de higiene em criatoacuterios de animais abatedouros

processamento e tecnologia de alimentos densidade populacional de gatos ou

felinos selvagens condiccedilotildees ambientais como temperatura umidade e

ventilaccedilatildeo que influenciam na esporulaccedilatildeo dos oocistos e os haacutebitos

alimentares diferentes de animais e pessoas

Conforme a Agencia Francesa de Seguranccedila Sanitaacuteria dos Alimentos

(AFSSA 2005 apud BARBOSA 2010) a principal forma de infecccedilatildeo pode variar

muito entre diferentes localidades na Franccedila eacute relatada uma das mais altas

prevalecircncias do mundo cerca de 85 que estaacute intimamente ligado ao haacutebito de

consumir carne crua ou mal cozida enquanto nos paiacuteses da Ameacuterica Central

estaacute relacionada a presenccedila de uma grande quantidade de gatos abandonados

que liberam oocistos no ambiente

Para alguns autores cerca de 30 a 63 das infecccedilotildees ocorrem por

ingestatildeo de alimentos contaminados e 6 a 17 decorrem da contaminaccedilatildeo do

solo (MONTANtildeO et al 2010) observaccedilotildees respaldadas por Kim e Weiss (2008)

que citam a ingestatildeo oral de cistos de tecido contendo bradizoiacutetos como a forma

mais comum de adquirir toxoplasmose Conforme Tenter (2009) surtos de

toxoplasmose aguda em seres humanos em vaacuterias regiotildees do mundo tecircm sido

associados a uma ampla variedade de alimentos de origem animal

Cavalcante et al (2006) ao estudar a infecccedilatildeo por T gondii em populaccedilotildees

rurais no estado de Rondocircnia encontrou como principais fatores associados a

prevalecircncia de anticorpos na regiatildeo o consumo de vegetais cultivados em casa

e beber aacutegua de poccedilos

Um aspecto importante eacute a falta de indiacutecios que levem a suspeitar de

infecccedilatildeo por T gondii em animais de produccedilatildeo visto que a presenccedila de cistos

teciduais de T gondii natildeo eacute visiacutevel a olho nu natildeo sendo detectaacuteveis na inspeccedilatildeo

post-mortem que eacute realizada nos frigoriacuteficos o que permite que carnes que

15

estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

a neonatal screening program preliminary results Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical v 45 n 1 2012 p122-124 BICHARA C N C POacuteVOA M M LEAtildeO R N Q LAINSON R CARMO E L Toxoplasmose In LEAtildeO R N Q Medicina Tropical e Infectologia na Amazocircnia Beleacutem Samauna Editorial 2013 p1317-1354 BOacuteIA M N CARVALHO-COSTA F A SODREacute F C PINTO G M T AMENDOEI M R R Seroprevalence of toxoplasma gondii infection among indian people living in Iauareteacute Satildeo Gabriel da Cachoeira Amazonas Brazil Revista do instituto Medicina tropical de Satildeo Paulo v 50 n 1 2008 p17-20 CARMO E L SILVA M C M XAVIER U A M COSTA BO POacuteVOA M M Inqueacuterito soroloacutegico de toxoplasmose em candidatos a transplante renal no Hospital Ofir Loyola Beleacutem Paraacute Brasil Revista Panamericana de Infectologia v 6 n 4 2004 p15-17 CARMO E L VIANA G M R FIGUEREDO J E BICHARA C N C POacuteVOA M M Determinaccedilatildeo do perfil soroloacutegico de toxoplasmose em um grupo de pacientes febris residentes no municiacutepio de Santana Amapaacute Revista Panamericana de Infectologia v 12 n 1 2010a p28-30 CARMO E L POacuteVOA M M MONTEIRO N S MARINHO R R NASCIMENTO J M FREITAS S N BICHARA C N C Surto de toxoplasmose humana no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Revista Pan-Amazocircnica de Sauacutede v1 2010b p61-66 CAVALCANTE G T AGUIAR D M CAMARGO L M A LABRUNA M B ANDRADE H F MEIRELES L R DUBEY J P THULLIEZ P DIAS R A GENNARI S M Seroprevalence of Toxoplasma gondii Antibodies in Humans From Rural Western Amazon Brazil Journal of Parasitology 92(3) 2006 p647-649

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35

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36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

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4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

15

estejam parasitadas por este protozoaacuterio sejam liberadas para o consumo

humano sem que haja restriccedilotildees Aleacutem disso soma-se o fato de que a infecccedilatildeo

por T gondii eacute assintomaacutetica em diversos animais sem deixar indiacutecios de

manifestaccedilotildees cliacutenicas (SILVA LANGONI 2001 TENTER 2009)

Para Hill e Dubey (2013) apesar de natildeo haver dados consistentes

atualmente que sejam capazes de indicar a fonte de infecccedilatildeo o que natildeo permite

determinar a proporccedilatildeo da populaccedilatildeo humana que se infectou com T gondii por

ingestatildeo de oocistos provenientes do ambiente ou por ingestatildeo de produtos de

origem animal contaminados os dados epidemioloacutegicos sugerem que a ingestatildeo

de carne contaminada mal cozida eacute uma importante fonte de infecccedilatildeo para seres

humanos nos Estados Unidos

Normalmente o consumo das carnes de porco e ovelhas eacute considerado

uma das principais vias de transmissatildeo de origem alimentar para os seres

humanos No entanto eacute possiacutevel reduzir significativamente o risco de infecccedilatildeo

por T gondii em animais utilizando gestatildeo agriacutecola intensiva com medidas

adequadas de higiene confinamento e prevenccedilatildeo

Estudos de prevalecircncia de T gondii em animais produtores de carne em

aacutereas com manejo agriacutecola intensivo demonstram essa reduccedilatildeo como em

muitos paiacuteses da Uniatildeo Europeia onde as prevalecircncias de T gondii em suiacutenos

de engorda se encontram em cerca de lt1 o que reduz a importacircncia desta

como fonte de infecccedilatildeo Tendo em contrapartida a criaccedilatildeo de gado livre bem

como a de ovinos e caprinos mantidos em pastagens que tecircm um risco

aumentado de infecccedilatildeo devido agrave contaminaccedilatildeo do ambiente com oocistos

esporulados (TENTER et al 2000)

Tem se observado a existecircncia de indiacutecios que revelam um decliacutenio na

prevalecircncia e taxa de infecccedilatildeo nos EUA e Europa tendo como possiacuteveis razotildees

a manutenccedilatildeo mais higiecircnica de chiqueiros aumento da produccedilatildeo de carne

congelada e educaccedilatildeo em sauacutede (JONES DUBEY 2014)

Poucos estudos ambientais satildeo relatados muito provavelmente devido a

baixiacutessima sensibilidade provocada pela a baixa prevalecircncia ambiental alta

infectividade e disseminaccedilatildeo do agente por grandes volumes na sua forma de

resistecircncia ambiental Por isso os estudos estatildeo mais voltados a determinaccedilatildeo

soroloacutegica sendo geralmente transversais em populaccedilotildees pequenas e

utilizando teacutecnicas soroloacutegicas com comparaccedilatildeo complexa utilizando na maioria

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

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24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

16

das vezes apenas uma teacutecnica e sem previsatildeo da eacutepoca de infecccedilatildeo

(MEIRELES 2001)

Um dos instrumentos que tem contribuiacutedo na compreensatildeo desta infecccedilatildeo

eacute a soroepidemiologia Tal fato teve iniacutecio em 1948 com o aparecimento da

Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman que permitiu identificar a menor ou maior distribuiccedilatildeo

geograacutefica do T gondii nos diversos ambientes terrestres Segundo Tenter et al

(2000) embora os dados soroepidemioloacutegicos possam natildeo refletir a verdadeira

prevalecircncia da infecccedilatildeo por T gondii nas diversas populaccedilotildees eacute uma ferramenta

importante se interpretada como estimativa ou como meio de comparaccedilatildeo de

prevalecircncia entre populaccedilotildees similares

Conforme afirmam Frenkel e Bermudez (2009) os gatos tem papel

importante na epidemiologia da toxoplasmose uma vez que durante a

primoinfecccedilatildeo eles podem eliminar cerca de centenas de milhares ou milhotildees de

oocistos que em solo uacutemido pode persistir por muitos meses Ainda segundo

os autores cerca de 50 dos gatos no Brasil podem ser comumente

encontrados com anticorpos para a infecccedilatildeo Resultado similar foi encontrado

em felinos no estado de Satildeo Paulo por Meireles (2001) com soropositividade de

40 de 100 amostras testadas pelo ELISA e confirmados por western blotting

Apesar das evidencias soroloacutegicas da toxoplasmose entre animais

selvagens pouco se sabe sobre o papel da vida selvagem na cadeia

epidemioloacutegica e tampouco a suscetibilidade das variadas espeacutecies ao T gondii

No entanto com a expansatildeo de aacutereas ocupadas pela populaccedilatildeo humana

acarretando em perda de habitat para espeacutecies selvagens obrigando-as a

ocupar espaccedilos cada vez menores pode acabar por gerar situaccedilotildees em que

espeacutecies sinantroacutepicas sirvam como uma intersecccedilatildeo entre a vida selvagem e a

populaccedilatildeo humana Esta nova realidade certamente favorece que amostras de

T gondii antes exclusivas da vida selvagem tenham a oportunidade de

colonizar aacutereas urbanas e desta forma favorecendo uma possiacutevel infecccedilatildeo no

homem e em animais domeacutesticos (VITALIANO 2012)

Com base nos resultados obtidos por Meireles (2001) em seu estudo

pode-se inferir que a infecccedilatildeo por T gondii natildeo eacute homogecircnea entre as espeacutecies

mas que todas as espeacutecies estudadas apresentam uma prevalecircncia associada

agrave longevidade e exposiccedilatildeo ambiental

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

a neonatal screening program preliminary results Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical v 45 n 1 2012 p122-124 BICHARA C N C POacuteVOA M M LEAtildeO R N Q LAINSON R CARMO E L Toxoplasmose In LEAtildeO R N Q Medicina Tropical e Infectologia na Amazocircnia Beleacutem Samauna Editorial 2013 p1317-1354 BOacuteIA M N CARVALHO-COSTA F A SODREacute F C PINTO G M T AMENDOEI M R R Seroprevalence of toxoplasma gondii infection among indian people living in Iauareteacute Satildeo Gabriel da Cachoeira Amazonas Brazil Revista do instituto Medicina tropical de Satildeo Paulo v 50 n 1 2008 p17-20 CARMO E L SILVA M C M XAVIER U A M COSTA BO POacuteVOA M M Inqueacuterito soroloacutegico de toxoplasmose em candidatos a transplante renal no Hospital Ofir Loyola Beleacutem Paraacute Brasil Revista Panamericana de Infectologia v 6 n 4 2004 p15-17 CARMO E L VIANA G M R FIGUEREDO J E BICHARA C N C POacuteVOA M M Determinaccedilatildeo do perfil soroloacutegico de toxoplasmose em um grupo de pacientes febris residentes no municiacutepio de Santana Amapaacute Revista Panamericana de Infectologia v 12 n 1 2010a p28-30 CARMO E L POacuteVOA M M MONTEIRO N S MARINHO R R NASCIMENTO J M FREITAS S N BICHARA C N C Surto de toxoplasmose humana no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Revista Pan-Amazocircnica de Sauacutede v1 2010b p61-66 CAVALCANTE G T AGUIAR D M CAMARGO L M A LABRUNA M B ANDRADE H F MEIRELES L R DUBEY J P THULLIEZ P DIAS R A GENNARI S M Seroprevalence of Toxoplasma gondii Antibodies in Humans From Rural Western Amazon Brazil Journal of Parasitology 92(3) 2006 p647-649

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35

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36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

17

Toxoplasmose na Amazocircnia

O clima quente e uacutemido tiacutepico das regiotildees tropicais faz com que a

Amazocircnia brasileira seja um ambiente propicio para infecccedilatildeo por Toxoplasma

gondii pois conforme Jones e Dubey (2014) condiccedilotildees ambientais podem

determinar o grau de disseminaccedilatildeo natural da infecccedilatildeo podendo ser mais

prevalente em climas quentes e aacutereas uacutemidas e de baixa altitude do que em

climas frios aacutereas secas e regiotildees montanhosas

Embora natildeo seja universal este fato pode ser constado na regiatildeo

Amazocircnica por diversos estudos que confirmaram a existecircncia da infecccedilatildeo na

regiatildeo (COSTA 2000 CAVALCANTE et al 2006 BARBOSA 2007 DUBEY et

al 2007 BOacuteIA et al 2008 FERREIRA et al 2009 FREITAS et al 2009 CARMO

et al 2010 CARMO 2011 BICHARA et al 2012 SILVA et al 2013) Sendo que

muitos destes estudos encontraram altos iacutendices de prevalecircncia que a exemplo

do que eacute observado em outras aacutereas a toxoplasmose nas suas diferentes

formas eacute uma infecccedilatildeo bastante frequente com soroprevalecircncia acima de 70

(CARMO et al 2010)

Boia et al (2008) realizou um estudo para estimar a soroprevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii em Lauareteacute uma comunidade indiacutegena multieacutetnica com

graus variados de aculturaccedilatildeo situada na bacia do Alto Rio Negro em Satildeo

Gabriel da Cachoeira Amazonas Brasil Foram coletadas e testados pelo ensaio

imunoenzimaacutetico e imunofluorescecircncia indireta (RIFI) 260 amostras de soro A

prevalecircncia da reatividade foi de 735 (191260) A frequecircncia de infecccedilatildeo entre

os indiviacuteduos com idades entre 10 a 19 anos (64) aponta para um alto niacutevel de

transmissatildeo de T gondii na aacuterea estudada Segundo os autores a concentraccedilatildeo

demograacutefica e a urbanizaccedilatildeo conduzidas sem infraestrutura sanitaacuteria levadas

a cabo na regiatildeo no uacuteltimo seacuteculo podem estar relacionadas agrave alta frequecircncia

de detecccedilatildeo de anticorpos contra T gondii na aacuterea estudada aleacutem de atividades

de caccedila que ainda satildeo muito importantes entre os iacutendios que vivem na regiatildeo

Carmo et al (2004) realizaram investigaccedilatildeo soroloacutegica utilizando o ELISA

em 82 pacientes com insuficiecircncia renal crocircnica de ambos os sexos com idade

entre 11 e 77 anos submetidos a hemodiaacutelise no setor de Nefrologia do Hospital

Ofir Loyola e candidatos a transplante renal objetivando assim determinar o

18

iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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33

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34

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36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

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33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

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transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

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51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

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Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

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APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

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iacutendice de positividade para toxoplasmose O iacutendice de positividade observado

para IgG foi de 8293 (6882) natildeo sendo detectado IgM

Bichara et al (2012) desenvolveram estudo a de incidecircncia da

toxoplasmose congecircnita em um grupo de receacutem-nascidos (RN) pela triagem

neonatal de Beleacutem-PA De 6000 RN encaminhados para investigaccedilatildeo de

doenccedilas geneacuteticas e metaboacutelicas 1000 foram selecionados para triagem de

toxoplasmose congecircnita atraveacutes da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de

sangue colhido em papel de filtro obtendo taxa de 01 Tal fato jaacute colocava o

Paraacute em destaque nacional quanto a toxoplasmose congecircnita atraveacutes da

publicaccedilatildeo do estudo de Neto Amorim e Lago (2010) realizado por triagem para

toxoplasmose em neonatos do Brasil entre os anos de 1995 e 2009 mostrando

uma distribuiccedilatildeo variada entre 2 e 20 casos para cada 10 mil nascidos vivos

nas diferentes regiotildees do paiacutes com a mais alta prevalecircncia nos estados do Paraacute

e Rondocircnia ambos com 20 casos a cada 10 mil nascidos vivos

No municiacutepio de Santana no estado do Amapaacute Carmo et al (2010a)

analisaram o perfil soroloacutegico em 42 pacientes com quadro febril de origem

desconhecida (sendo este o uacutenico sintoma sugestivo de toxoplasmose)

atendidos no Hospital Municipal de Santana os testes demonstraram que 762

dos pacientes apresentaram somente anticorpos da classe IgG e que 119

apresentaram anticorpos IgM aleacutem de IgG Denota-se alta taxa de

soroprevalecircncia para toxoplasmose fato corroborado pelo indicativo de

transmissatildeo ativarecente visto que parte dos pacientes febris possuiacutea perfil

soroloacutegico de infecccedilatildeo agudarecente Todos os pacientes relataram contato

com felinos domeacutesticos no peri eou intradomiciacutelio aleacutem de relatarem possuir o

haacutebito de ingerir constantemente carnes de origem bovina suiacutena e de aves tanto

bem cozida como malpassada na forma de churrasco

Cavalcante et al (2006) testaram 266 soros de seres humanos

provenientes de 71 fazendas no estado de Rondocircnia Amazocircnia ocidental para

anticorpos anti-T gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada e RIFI Os

anticorpos foram detectados em 195 (733) das amostras Das 71 fazendas

visitadas em 69 haviam humanos soropositivos

Carmo et al (2010b) relataram caso de surto de toxoplasmose humana

ocorrido em no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil

onde cinco pacientes com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda (febre

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elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

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Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

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O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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33

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34

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35

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36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

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Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

19

elevada prostraccedilatildeo anorexia emagrecimento e linfadenopatia sobretudo das

cadeias do pescoccedilo) tendo o diagnostico confirmado deu-se iniacutecio a uma

investigaccedilatildeo cliacutenica e soroepidemioloacutegica de toxoplasmose na localidade

havendo em vista o aparecimento de outros casos suspeitos Foram avaliados

186 indiviacuteduos pelo ELISA para IgG e IgM para anti-T gondii Destes 40

indiviacuteduos (215) apresentaram perfil soroloacutegico de toxoplasmose aguda

Estudos com animais domeacutesticos soropositivos para toxoplasmose

tambeacutem satildeo relatados na regiatildeo Amazocircnica Minervino et al (2012) testou pela

RIFI o soro de 325 catildees de 11 aldeias habitadas por grupos eacutetnicos Tapirapeacute e

Karajaacute no sul da Amazocircnia brasileira Foram encontrados anticorpos para T

gondii em 169 (52) catildees Aleacutem da alta prevalecircncia detectado foi observado

que a infecccedilatildeo era mais frequente em catildees mais velhos indicando infecccedilatildeo poacutes-

natal

Costa (2000) investigou a toxoplasmose animal e humana no Parque

Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi (MPEG) testando

sorologicamente 153 animais dos quais 30 eram gatos invasores e os demais

animais silvestres do Parque com 72 de soropositividade A prevalecircncia mais

alta foi verificada entre os primatas natildeo humanos neotropicais 100 (77) Os

testes realizados no grupo de 20 humanos que desempenhavam atividades no

parque detectaram soropositividade em 85 Tambeacutem foram relatados dois

surtos de toxoplasmose aguda diagnosticados em dois grupos de primatas

amazocircnicos seis cuxiuacutes (Chiropotes s chiropotes) e trecircs macacos-barrigudos

indo a oacutebito

Tambeacutem existem registros de infecccedilatildeo por T gondii em mamiacuteferos

aquaacuteticos na Amazocircnia onde sua presenccedila nesses animais pode indicar a

contaminaccedilatildeo do ambiente aquaacutetico onde vivem Delgado et al (2013)

investigaram a presenccedila de anticorpos de Toxoplasma gondii no peixe-boi da

Amazocircnia (Trichechus inunguis) em uma unidade de resgate na regiatildeo norte do

Peru Foram testados 19 peixes-boi sendo detectados anticorpos em 12 (632)

deles o que sugere uma contaminaccedilatildeo por oocistos no ambiente aquaacutetico de

onde vivem esses animais

Santos et al (2011) testou 95 amostras de soro de golfinhos do rio

Amazonas (Inea geoffrensis) ou botos como satildeo mais comumente chamados

regionalmente na Reserva de desenvolvimento Sustentaacutevel Mamirauaacute (RDSM)

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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33

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VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

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Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

20

em Tefeacute Amazonas na Amazocircnia central Anticorpos foram encontrados em 82

(863) dos golfinhos que indica um elevado niacutevel de contaminaccedilatildeo do

ambiente aquaacutetico

Estudos soroloacutegicos desenvolvidos no estado do Paraacute encontraram fortes

indiacutecios da circulaccedilatildeo de T gondii em animais de produccedilatildeo Silva et al (2013)

em estudo de soroprevalecircncia entre buacutefalos (Bubalus bubalis) selecionaram

randomicamente 319 animais de sete municiacutepios da Ilha do Marajoacute e mais 128

bubalinos distribuiacutedos em outros cinco municiacutepios Pela teacutecnica do Ensaio de

Imunoadsorccedilatildeo Enzimaacutetica Indireto (iELISA) e Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia

Indireta (RIFI) obtiveram prevalecircncia respectivamente entre 416 (186447) e

36 (161447) sendo que deste 32 (103319) eram provenientes da Ilha do

Marajoacute e 55 (70128) dos demais municiacutepios

Freitas et al (2009) entre 110 amostras de soros suiacutenos da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem coletadas aleatoriamente em nove locais observaram

50 de positividade aos anticorpos IgG Anti-Tgondii pelo teste de

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) constatando que a carne suiacutena proveniente de

abate clandestino oferece elevado risco sanitaacuterio para a sauacutede humana

Com base nesses estudos constata-se que o T gondii se encontra

amplamente disseminado na regiatildeo Amazocircnica apresentando natildeo soacute

prevalecircncia alta em diversos casos como atingido tanto os animais de espeacutecies

terrestres como aeacutereas e aquaacuteticas tambeacutem

Toxoplasmose em aves

A infecccedilatildeo pelo T gondii jaacute foi demonstrada em vaacuterias espeacutecies de aves

(DUBEY 2002) Segundo Varga (1990 apud COSTA 2000) existem inuacutemeras

publicaccedilotildees sobre a ocorrecircncia da doenccedila em mais de 300 espeacutecies de

mamiacuteferos e mais de 60 espeacutecies de aves Estas se infectam principalmente pela

ingestatildeo de oocistos presentes nos alimentos e no solo (MEIRELES 2001) Ateacute

o momento natildeo se tem conhecimento de nenhuma espeacutecie de ave natildeo

suscetiacutevel a esta infecccedilatildeo

Estudos utilizando infecccedilotildees experimentais por T gondii demonstraram

que a susceptibilidade a infecccedilatildeo parece ser diferente entre as diversas espeacutecies

de aves Havendo relatos de isolamento de T gondii viaacutevel em tecido de

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

21

espeacutecies de aves sem sinais cliacutenicos aleacutem de relatos de toxoplasmose aguda

principalmente surtos entre aves de criaccedilatildeo livre e aves mantidas em cativeiro

(DUBEY 2002)

As aves com destaque para as galinhas satildeo importantes hospedeiros

intermediaacuterios no contexto eco-epidemioloacutegico visto que sua infecccedilatildeo funciona

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental pelo T gondii mediante o haacutebito de

ciscarem e se alimentarem diretamente no solo com faacutecil contato com o oocisto

Dubey et al (2007) optaram pela a galinha caipira como indicadora de

contaminaccedilatildeo do solo com oocistos tendo em vista que a detecccedilatildeo direta de

oocistos em solo eacute tecnicamente difiacutecil

Alguns autores (DUBEY 2002) queriam determinar se o toxoplasma

aviaacuterio era idecircntico ao dos mamiacuteferos uma vez que aves possuem temperaturas

mais elevadas (41degC) em relaccedilatildeo aos mamiacuteferos (37degC) e se as aves eram uma

possiacutevel fonte de infecccedilatildeo Com o desenvolvimento de um teste soroloacutegico

confiaacutevel (o teste do corante) por Sabin e Feldman (1948) foi possiacutevel comparar

sorologicamente a infecccedilatildeo em vaacuterias espeacutecies animais Nos anos de 1950 e

1960 ficou claro que natildeo havia diferenccedilas morfoloacutegicas ou soroloacutegicas entre

isolados de T gondii de hospedeiros aviaacuterios e mamiacuteferos

Vitaliano (2012) avaliou sorologicamente diversas espeacutecies de animais

distribuiacutedas em diferentes regiotildees do Brasil e detectou soropositividade para o

T gondii entre as seguintes espeacutecies de aves seriema (Cariama cristata)

curicaca (Theristicus caudatus) asa-branca (Patagioenas picazuro) pica-pau-

de-banda-branca (Dryocopus lineatus) e coruja-buraqueira (Athene cunicularia)

Costa (2000) detectou anticorpos em grupos de aves silvestres com

haacutebitos alimentares bem distintos no Parque Zoobotacircnico Museu Paraense

Emiacutelio Goeldi 2 harpias (H harpyja) 2 urubu-rei (S papa) 9 araras (Ara sp H

hyacinthinus) 7 mutuns (M mitu P pileatas) e uma ema (Rhea americana)

Vitaliano (2007) infectou experimentalmente cinco carcaraacutes (Caracara

plancus) soronegativas com a amostra ME49 de T gondii com o objetivo de

estudar a suscetibilidade desta espeacutecie de ave As aves foram alimentandas com

roedores Calomys callosus infectados As aves infectadas natildeo apresentaram

sintomas cliacutenicos de toxoplasmose tampouco alteraccedilotildees nos paracircmetros

hematoloacutegicos aleacutem de fraca distribuiccedilatildeo do parasito nos tecidos Todas as aves

infectadas soroconverteram ocorrendo a partir do seacutetimo dia poacutes-infecccedilatildeo

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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33

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36

VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

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7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

22

Na Polocircnia Andrzejewska Linder e Bortoliero (2004) realizaram pesquisa

envolvendo 205 cegonhas jovens e 44 adultas atraveacutes do estudo foi

demonstrado atraveacutes da Reaccedilatildeo de Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

prevalecircncia de 58 e 136 respectivamente

Satildeo diversos os registros de aves domesticas e silvestres soropositivas

tendo sido relatado vaacuterios casos de infecccedilatildeo por T gondii como revisado por

Dubey (2002) em espeacutecies como peneireiro-vulgar (Falco tinnunculus) falcatildeo

americano (Falco sparverius) tartaranhatildeo-rabilongo (Circus macrourus) abutre-

preto (Aegypius monachus) Accedilor (Accipiter gentilis) buacuteteo-de-cauda-

vermelha (Buteo jamaicensis) galeiratildeo-comum (Fulica atra) guincho-comum

(Larus ridibundus) melro-preto (Turdus merula) escrevedeira-amarela

(Emberiza citrinella) dentre inuacutemeras outras espeacutecies de aves Segundo

Vitaliano (2007) dados experimentais indicam que aves predadoras como

corujas e outros rapinantes satildeo resistentes a infecccedilatildeo por T gondii raramente

desenvolvendo sinais cliacutenicos

Para Cong et al (2012) as aves domeacutesticas e de companhia tem um papel

importante a desempenhar na transmissatildeo da toxoplasmose para humanos e

animais tendo em vista que a carne destes animais eacute amplamente consumida

em todo o mundo

Neto (2013) avaliou a situaccedilatildeo epidemioloacutegica do T gondii em aves

domeacutesticas e sinantroacutepicas da regiatildeo metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes Brasil

Foram testadas 450 amostras de aves domeacutesticas (Gallus gallus) atraveacutes do uso

das teacutecnicas de MAT e HAI sendo 150 aves criadas na forma de subsistecircncia

(38 soropositivas) 150 galinhas de postura (113 soropositivas) e 150

frangos de corte (47 soropositivos) Ainda foram avaliadas pelo autor por MAT

e PCR a ocorrecircncia de T gondii em 80 galinhas caipiras vendidas em feiras livres

e 150 pombos (Columba livia) Em relaccedilatildeo as aves vendidas em feiras foram

encontradas 3875 positivas pela MAT e 70 positivos na PCR e quanto aos

pombos foram encontrados 226 de positividade na sorologia e baixa

positividade pela PCR apenas 2 positivos Logo a pesquisa detectou a

presenccedila de infecccedilatildeo em todas as aves e criaccedilotildees analisadas

Observa-se que as criaccedilotildees de galinhas em escala industrial na

transmissatildeo da infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica para seres humanos tem se

demonstrado ser de baixa importacircncia devido ao tipo de manejo e sistemas de

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

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northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

23

criaccedilatildeo que aleacutem de raacutepido natildeo permite o contato com felinos e outras possiacuteveis

fontes de infecccedilatildeo contrastando com a criaccedilatildeo domeacutestica ou extensiva onde os

animais convivem durantes em um mesmo ambiente sujeitos ao contato com

feliacutedeos solo e aacutegua contaminados com oocistos dentre outros fatores

potenciais de infecccedilatildeo (MILLAR et al 2008)

Barbosa (2007) estudou a ocorrecircncia de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte para consumo na regiatildeo metropolitana de Beleacutem Foram

analisadas 300 amostras de soro procedentes de abate tanto de escala

industrial como clandestina Em nenhuma amostra da cota industrial foi

constatada soropositividade no entanto a autora alerta para a necessidade da

adoccedilatildeo de pesquisas soroloacutegicas de rotina desse organismo em qualquer tipo

de abate e no niacutevel de consumo como medida de prevenccedilatildeo ao risco sanitaacuterio

humano

Dubey et al (2007) estudando os genoacutetipos de T gondii no norte (Paraacute) e

sul (Rio Grande do Sul) do Brasil analisaram amostras de 84 galinhas caipiras

criadas livres 34 delas provenientes dos municiacutepios de Castanhal Inhangapi

Marituba Santa Isabel do Paraacute Santareacutem e Terra Alta no estado do Paraacute e 50

de 10 fazendas diferentes dos municiacutepios de Pelotas Capatildeo de Leatildeo Turuccedilu

Canguccedilu e Rio Grande no Rio grande do Sul A soropositividade foi encontrada

em 39 (464) aves destas 20 eram do estado do Paraacute

Como se pode notar foram encontrados resultados bem distintos de

soroprevalecircncia por Barbosa (2007) e Dubey et al (2007) no estado do Paraacute o

que reforccedila que criaccedilotildees extensivas ou de criaccedilatildeo livre geralmente estatildeo mais

suscetiacuteveis a infecccedilatildeo por T gondii

Fato tambeacutem constatado por Santos (2012) ao estudar a frequecircncia de

infecccedilatildeo do protozoaacuterio em galinaacuteceos de diferentes sistemas de criaccedilatildeo

provenientes de mesorregiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba

no nordeste do Brasil Das 200 amostras de frango de corte (provenientes da

Paraiacuteba) em nenhuma foi observada infecccedilatildeo No entanto das 322 amostras de

galinha caipira coletadas de pequenas propriedades rurais de ambos os estados

a frequecircncia de anticorpos IgG anti-T gondii diagnosticados pelas teacutecnicas de

HAI RIFI e ELISA foram respectivamente 373 (12322) 3788 (122322) e

4037 (130322)

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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33

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34

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35

MONTANtildeO P Y CRUZ M A ULLMANN L S LANGONI H BIONDO A W Contato com gatos um fator de risco para a toxoplasmose congecircnita Cliacutenica Veterinaacuteria n 86 p 78-84 2010 NETO O J S Perfil soroepidemioloacutegico e detecccedilatildeo molecular de toxoplasma gondii em gallus gallus e columba livia da Regiatildeo Metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes 2013 89f Tese (Ciecircncia Animal) - Universidade Federal de Goiaacutes 2013 PUVANESUARAN V R NOORDIN R VENUGOPAL BALAKRISHNAN V Isolation and Genotyping of Toxoplasma gondii from Free-Range Ducks in Malaysia AVIAN DISEASES 57 2013 p128ndash132 SANTOS M C F Frequecircncias da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipira e frangos de corte em regiotildees dos Estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba 2012 82f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em ciecircncias bioloacutegicas) ndash Universidade Federal do Rio Grande do Norte Centro de Biociecircncias 2012 SANTOS P S ALBUQUERQUE G R SILVA V M F MARTIN A R MARVULO MFV SOUZA S L P RAGOZO AMA NASCIMENTO CC GENNARI S M DUBEY J P SILVA J C R Seroprevalence of Toxoplasma gondii in free-living Amazon River dolphins (Inia geoffrensis) from central Amazon Brazil Veterinary Parasitology v 183 n 1-2 2011 p 171-173 SILVA A V H LANGONI L The detection of Toxoplasma gondii by comparing cytology histopathology bioassay in mice and the polymerase chain reaction (PCR) Veterinary Parasitology v 97 p 191-198 2001 SILVA J B FONSECA A H ANDRADE S J T SILVA A G M OLIVEIRA C M C BARBOSA J D Prevalecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em buacutefalos (Bubalus bubalis) no Estado do Paraacute Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 33 n 5 2013 p581-585 ROBERT-GANGNEUX F DARDEacute M L Epidemiology of and diagnostic strategies for toxoplasmosis Clinical Microbiology Reviews v25 n2 2012 p264-296 TENTER A M HECKEROTH A R WEISS L M Toxoplasma gondii from animals to humans International Journal for Parasitology v30 n 12-13 2000 p1217-1258 TENTER A M Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Memoacuterias do Instituto Oswaldo Cruz v 104 2009 p364-369 VITALIANO S N Infecccedilatildeo experimental em carcaraacutes (Caracara plancus MILLER J F 1777) com Toxoplasma gondii (Amostra ME49) 2007 65f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Medicina Veterinaria) ndash Faculdade de Ciecircncias Agraacuterias e Veterinaacuterias Unesp Jaboticabal

36

VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

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32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

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33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

24

Millar et al (2012) estudou a ocorrecircncia e os fatores de risco associados

a transmissatildeo de T gondii para frangos criados em diferentes sistemas (caipira

e confinado) para produzir ovos ou carnes No total 810 animais foram

analisados e divididos em dois grupos experimentais de acordo com o propoacutesito

do sistema de produccedilatildeo 460 frangos de corte (Grupo 1) e 350 galinhas

poedeiras (Grupo 2) No Grupo 1 122 (56460) foram positivos enquanto no

Grupo 2 a taxa de positividade foi de 331 (116350) resultado indicando que

pelo menos para as galinhas poedeiras o sistema de produccedilatildeo estaacute diretamente

envolvido na infecccedilatildeo pelo T gondii sendo o grupo mais exposto ao parasito

Embora natildeo tenha sido possiacutevel notar natildeo foi descartada que o sistema de

produccedilatildeo pode ter influenciando a soropositividade dos animais no primeiro

grupo

Eacute importante ressaltar que segundo Neto (2013) embora as

soroprevalecircncias do T gondii em aves de criaccedilatildeo extensiva possam ser

diferentes em regiotildees estudadas essas aves podem ser sentinelas da

contaminaccedilatildeo ambiental e sinalizar o risco de infecccedilatildeo que o proacuteprio ser humano

estaacute exposto ao compartilhar o mesmo ambiente das aves

Segundo Maksimova et al (2011) estudos soroloacutegicos obtidos nas uacuteltimas

deacutecadas sugerem que as infecccedilotildees T gondii em Anseriformes domeacutesticos

podem ocorrer em todo o mundo e natildeo satildeo raros como pode se observar

atraveacutes dos estudos de El-Massry et al (2000) Dubey et al (2003) Baacutertovaacute et al

(2009) Cong et al (2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013) dentre

outros

Para Baacutertovaacute et al (2004) pouca atenccedilatildeo vem sendo dada para a

suscetibilidade do pato domeacutestico bem como de outras aves da famiacutelia dos

anatiacutedeos agrave infecccedilatildeo pelo T gondii havendo inclusive segundo Dubey (2002) e

Baacutertovaacute et al (2004) muitos estudos de soroprevalecircncia anteriores que natildeo satildeo

confiaacuteveis principalmente quando baseados na reaccedilatildeo de Sabin-Feldman por

natildeo ser um teste confiaacutevel para a detecccedilatildeo de anticorpos em numerosas

espeacutecies aviaacuterias

Toxoplasmose em patos

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

a neonatal screening program preliminary results Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical v 45 n 1 2012 p122-124 BICHARA C N C POacuteVOA M M LEAtildeO R N Q LAINSON R CARMO E L Toxoplasmose In LEAtildeO R N Q Medicina Tropical e Infectologia na Amazocircnia Beleacutem Samauna Editorial 2013 p1317-1354 BOacuteIA M N CARVALHO-COSTA F A SODREacute F C PINTO G M T AMENDOEI M R R Seroprevalence of toxoplasma gondii infection among indian people living in Iauareteacute Satildeo Gabriel da Cachoeira Amazonas Brazil Revista do instituto Medicina tropical de Satildeo Paulo v 50 n 1 2008 p17-20 CARMO E L SILVA M C M XAVIER U A M COSTA BO POacuteVOA M M Inqueacuterito soroloacutegico de toxoplasmose em candidatos a transplante renal no Hospital Ofir Loyola Beleacutem Paraacute Brasil Revista Panamericana de Infectologia v 6 n 4 2004 p15-17 CARMO E L VIANA G M R FIGUEREDO J E BICHARA C N C POacuteVOA M M Determinaccedilatildeo do perfil soroloacutegico de toxoplasmose em um grupo de pacientes febris residentes no municiacutepio de Santana Amapaacute Revista Panamericana de Infectologia v 12 n 1 2010a p28-30 CARMO E L POacuteVOA M M MONTEIRO N S MARINHO R R NASCIMENTO J M FREITAS S N BICHARA C N C Surto de toxoplasmose humana no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Revista Pan-Amazocircnica de Sauacutede v1 2010b p61-66 CAVALCANTE G T AGUIAR D M CAMARGO L M A LABRUNA M B ANDRADE H F MEIRELES L R DUBEY J P THULLIEZ P DIAS R A GENNARI S M Seroprevalence of Toxoplasma gondii Antibodies in Humans From Rural Western Amazon Brazil Journal of Parasitology 92(3) 2006 p647-649

CONG W HUANG S ZHOU D XUL M WUL S YAN C ZHAO Q SONG H ZHU X First report of Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in northwest China Parasites amp Vectors 5110 2012 p1-4 COSTA A M Toxoplasmose animal e humana no Parque Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi Beleacutem Paraacute Brasil 2000 99f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Universidade Federal do Paraacute Museu Paraense Emiacutelio Goeldi Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuaacuteria Beleacutem 2000 DELGADO P M PEREA N S DELGADO J P M GARCIA C B MALHEIROS A F DAVILA C R G Detection of infection with Toxoplasma gondii in manatees (Trichechus inunguis) of the peruvian amazona Acta Bioloacutegica Colombiana v 18 n 1 2013 p211- 216

33

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

25

O Cairina moschata ou pato-do-mato como eacute chamado popularmente

tem sua origem no continente americano onde foram domesticados pelos povos

indiacutegenas que deles faziam uma excelente fonte de proteiacutena Sendo

posteriormente levados para a Europa pelos colonizadores tendo sua cultura

difundida por meio dos cruzamentos desenvolvendo assim raccedilas produtivas

frutos do cruzamento industrial (GOIS et al 2012) Durante seu processo de

domesticaccedilatildeo uma ampla variedade de coloraccedilatildeo de sua plumagem foi

produzida sendo que seu tamanho eacute maior que a do pato domeacutestico

No Brasil esta espeacutecie nativa encontra resistecircncias quanto ao seu

consumo apesar de ser largamente difundida no Estado do Paraacute e no Sul do

paiacutes Este comportamento eacute advindo do desconhecimento por parte da

populaccedilatildeo que natildeo reconhece o pato como uma fonte de proteiacutena bem como

dos criadores que subutilizam esses animais pela falta de informaccedilatildeo sobre seu

consideraacutevel potencial produtivo (GOIS et al 2012)

O Cairina moschata eacute uma espeacutecie de ave pertencente a ordem

Anseriformes que conta com cerca de 160 espeacutecies famiacutelia Anatidae Natildeo foram

encontrados trabalhos sobre infecccedilatildeo toxoplaacutesmatica na espeacutecie de pato-do-

mato (Cairina moschata) definida No entanto haacute registros da infecccedilatildeo em outros

anseriformes como relatado por Dubey (2002) onde foram isolados T gondii nas

espeacutecies Aythya ferrina Aythya fuligula Anas acuta Anas strepera Anas

platyrhynchos e Aix sponsa Dentre estaacutes o Anas platyrhynchos tambeacutem

conhecido popularmente como pato-real ou ainda pato domeacutestico eacute o

antecessor da maioria dos patos domesticados atuais aleacutem de fonte alimentar

em vaacuterias regiotildees do mundo havendo estudos sobre o seu papel como fonte de

infecccedilatildeo para T gondii em diferentes localidades do planeta

De acordo com Baacutertovaacute et al (2004) do ponto de vista da seguranccedila

alimentar tem de se considerar que os tecidos mais intensamente infectados em

patos eram os que constituiacuteam o muacutesculo esqueleacutetico e coraccedilatildeo onde foram

detectados maiores niacuteveis de infecccedilatildeo com o ceacuterebro sendo o terceiro mais

infectado conforme os experimentos sendo estes resultados muito similares

com o encontrado em outras aves como no de galinhas No entanto conforme

Tenter (2009) devido ao organotropismo o nuacutemero de cistos teciduais

produzidos em um determinado oacutergatildeo pode variar muito entre diferentes

espeacutecies animais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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33

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35

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36

VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

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49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

26

O pato domeacutestico eacute uma espeacutecie relativamente sensiacutevel para a infeccedilatildeo

por T gondii como constatado por Baacutertovaacute et al (2004) em um experimento para

verificar a suscetibilidade desta ave onde 28 patos soronegativos foram

divididos em sete grupos de quatro tendo posteriormente seis grupos inoculados

por via oral com diferentes doses concentradas de oocistos de T gondii de uma

cepa natildeo virulenta e a partir do seacutetimo dia todos os patos jaacute apresentavam

anticorpos para T gondii detectados pelo teste de imunofluorescecircncia indireta

A infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii satildeo predominantemente subcliacutenica na

maioria das espeacutecies de aves embora em certas espeacutecies como canaacuterios e

pombos a toxoplasmose possa ter um desenvolvimento clinico muitas vezes

grave Satildeo raros os casos registrados de toxoplasmose grave em Anseriformes

tendo relatos de dois gansos (Anseranas semipalmata) criados em cativeiro em

um zooloacutegico que vieram a oacutebito sem sinais cliacutenicos aparente sendo

encontrados T gondii e lesotildees em diversos oacutergatildeos Pneumonia por

toxoplasmose e hepatite foram consideradas a principal causa de morte Houve

relatos tambeacutem de toxoplasmose aguda em dois gansos (um macho e uma

fecircmea) em um zooloacutegico em Maui Havaiacute EUA Natildeo haacute relato de toxoplasmose

cliacutenica em patos selvagens e haacute apenas um relatoacuterio de toxoplasmose cliacutenica em

patos domeacutesticos relatado por Boehringer et al (1962) na argentina (DUBEY

2002)

Muitos inqueacuteritos envolvendo patos de espeacutecies diferentes podem ser

encontrados Ferraroni et al (1980) encontrou positividade de 266 (415) em

amostra de soro de patos (Cairina moschata) no leste e centro leste da Amazocircnia

brasileira

El-Massry et al (2000) realizou inqueacuterito soroloacutegico em Gizeacute no Egito

onde foram coletadas amostras de sangue de 173 perus e 48 patos de fazendas

privadas localizadas nos subuacuterbios e 108 frangos de corte em mercados e

armazenadas agrave temperatura -20degC ateacute serem testados A soroprevalecircncia

encontrada foi alta de 595 em perus 472 em galinhas e 50 em patos

Dubey et al (2003) em um estudo com aves de criaccedilatildeo livre provenientes

de aldeias das zonas rurais das proviacutencias de Menofia e El-Bihera no Egito

constataram soropositividade tanto em galinhas (404) quanto em patos

(157) Observa-se com base nos trabalhos de El-Massry et al (2000) e Dubey

et al (2003) que o Toxoplasma gondii pode infectar representantes de grupos

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

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4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

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6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

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48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

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21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

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and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

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28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

27

bem distintos de aves domesticas aleacutem de grande quantidade de aves silvestres

(DUBEY et al 2002)

Maksimova et al (2011) encontrou uma soroprevalecircncia muito maior em

gansos (252) do que em patos (57) na Baixa Saxocircnia Alemanha o que

contrastou com o experimento de inoculaccedilatildeo de taquizoiacuteto no qual se sugere

que o pato possua uma maior susceptibilidade para uma infecccedilatildeo pelo menos

por esta fase de T gondii Para Baacutertovaacute et al (2004) a susceptibilidade de patos

para a infecccedilatildeo pelo T gondii pode ser comparada com a susceptibilidade em

galinaacuteceos

Puvanesuaran et al (2013) em sua pesquisa obteve a partir de quatro

estados da peniacutensula da Malaacutesia os soros cabeccedilas e coraccedilotildees de 205 patos

dos quais 30 (1463) foram diagnosticados como soropositivos para T gondii

quando testados com o teste de aglutinaccedilatildeo modificada

Yan et al (2009) investigaram a presenccedila de anticorpos anti-T gondii em

aves comerciais na Proviacutencia de Guangdong do sul da China onde foi

constatada soropositividade em 56 (16) de 349 patos 41 (114) de 361

galinhas criadas livres e 10 (41) de 244 galinhas criadas em gaiolas

Resultado similar foi encontrado em Lanzhou noroeste da China por Cong et al

(2012) que encontraram uma soroprevalecircncia de 726 em galinhas 1138

em patos e 1186 em pombos natildeo havendo nesse estudo significacircncia

estatiacutestica entre os animais criados livres e enclausurados (Pgt005)

Na presente revisatildeo bibliograacutefica natildeo foi encontrado nenhum trabalho

relatando casos de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo por T gondii em patos nem em outros

anatiacutedeos no estado do Paraacute No entanto trabalhos envolvendo animais de corte

como Gallus gallus que eacute outra ave domeacutestica de abate eacute comumente utilizada

como indicador de contaminaccedilatildeo ambiental de oocisto e frequentemente

estudada por desempenhar papel importante na epidemiologia da doenccedila com

inuacutemeros trabalhos abordando a temaacutetica

Diagnoacutestico soroloacutegico da toxoplasmose em aves

Devido agraves limitaccedilotildees e dificuldades que satildeo inerentes agraves teacutecnicas

parasitarias de visualizaccedilatildeo direta deste protozoaacuterio os meacutetodos soroloacutegicos satildeo

os mais comumente utilizados para o diagnoacutestico da infecccedilatildeo por T gondii

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

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Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

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da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

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33

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MONTANtildeO P Y CRUZ M A ULLMANN L S LANGONI H BIONDO A W Contato com gatos um fator de risco para a toxoplasmose congecircnita Cliacutenica Veterinaacuteria n 86 p 78-84 2010 NETO O J S Perfil soroepidemioloacutegico e detecccedilatildeo molecular de toxoplasma gondii em gallus gallus e columba livia da Regiatildeo Metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes 2013 89f Tese (Ciecircncia Animal) - Universidade Federal de Goiaacutes 2013 PUVANESUARAN V R NOORDIN R VENUGOPAL BALAKRISHNAN V Isolation and Genotyping of Toxoplasma gondii from Free-Range Ducks in Malaysia AVIAN DISEASES 57 2013 p128ndash132 SANTOS M C F Frequecircncias da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipira e frangos de corte em regiotildees dos Estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba 2012 82f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em ciecircncias bioloacutegicas) ndash Universidade Federal do Rio Grande do Norte Centro de Biociecircncias 2012 SANTOS P S ALBUQUERQUE G R SILVA V M F MARTIN A R MARVULO MFV SOUZA S L P RAGOZO AMA NASCIMENTO CC GENNARI S M DUBEY J P SILVA J C R Seroprevalence of Toxoplasma gondii in free-living Amazon River dolphins (Inia geoffrensis) from central Amazon Brazil Veterinary Parasitology v 183 n 1-2 2011 p 171-173 SILVA A V H LANGONI L The detection of Toxoplasma gondii by comparing cytology histopathology bioassay in mice and the polymerase chain reaction (PCR) Veterinary Parasitology v 97 p 191-198 2001 SILVA J B FONSECA A H ANDRADE S J T SILVA A G M OLIVEIRA C M C BARBOSA J D Prevalecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em buacutefalos (Bubalus bubalis) no Estado do Paraacute Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 33 n 5 2013 p581-585 ROBERT-GANGNEUX F DARDEacute M L Epidemiology of and diagnostic strategies for toxoplasmosis Clinical Microbiology Reviews v25 n2 2012 p264-296 TENTER A M HECKEROTH A R WEISS L M Toxoplasma gondii from animals to humans International Journal for Parasitology v30 n 12-13 2000 p1217-1258 TENTER A M Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Memoacuterias do Instituto Oswaldo Cruz v 104 2009 p364-369 VITALIANO S N Infecccedilatildeo experimental em carcaraacutes (Caracara plancus MILLER J F 1777) com Toxoplasma gondii (Amostra ME49) 2007 65f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Medicina Veterinaria) ndash Faculdade de Ciecircncias Agraacuterias e Veterinaacuterias Unesp Jaboticabal

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VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

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2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

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Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

28

(VITALIANO 2007) Este diagnoacutestico reside na resposta humoral individual seja

em humanos ou em animais atraveacutes da pesquisa de anticorpos anti-T gondii

(MEIRELES 2001)

A pesquisa de anticorpos eacute a forma de diagnostico mais amplamente

difundida e empregada apresentando vantagens por ser mais raacutepida que os

meacutetodos diretos que demandam uma quantidade de tempo mais longa em seus

processos se comparada com o diagnostico indireto algumas vezes

inviabilizando em uso clinico (GRANATO JUNIOR 2014)

O diagnoacutestico soroloacutegico pode ser utilizado independentemente da

presenccedila ou natildeo de sintomatologia sugestiva da toxoplasmose visto que os

testes soroloacutegicos disponiacuteveis podem detectar imunoglobulinas IgA IgE e

principalmente IgG e IgM (BICHARA et al 2013)

Diversos testes soroloacutegicos jaacute foram propostos para detectar a presenccedila

desses anticorpos no homem e em vaacuterias espeacutecies de animais (TENTER et al

2000) O primeiro teste foi a Reaccedilatildeo de Sabin-Feldman (dye-test) utilizada por

muito tempo tanto para diagnoacutestico quanto em inqueacuteritos soroepidemioloacutegicos

sendo considerada ateacute hoje como teste soroloacutegico de referecircncia para a

toxoplasmose No entanto a necessidade de parasitas viaacuteveis a constante

manipulaccedilatildeo de camundongos infectados consistindo em risco para os

laboratoristas entre outros fatores levaram o teste do corante a ceder lugar a

outras teacutecnicas com maior facilidade de execuccedilatildeo (MEIRELES 2001)

Satildeo diversos os trabalhos que utilizam a detecccedilatildeo de anticorpos atraveacutes

de testes soroloacutegicos como ferramenta principal para determinaccedilatildeo de

soroprevalecircncia por infecccedilatildeo do T gondii tais como mostraram El Massry et al

(2000) Dubey et al (2003) Barbosa (2007) Baacutertovaacute et al (2009) Cong et al

(2012) Yang et al (2012) Puvanesuaran et al (2013)

As teacutecnicas empregadas neste estudo tecircm particularidades envolvendo

sensibilidade e especificidade muitas vezes com variaccedilotildees de aplicabilidade e

resultados variando de acordo com as espeacutecies de animais a qual satildeo

empregadas

Observa-se que alguns dos meacutetodos soroloacutegicos mais utilizados em

pesquisas para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii IgG e IgM em aves

atualmente satildeo os de Reaccedilatildeo Imunofluorescecircncia Indireta (RIFI)

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta (HAI) Teste de Aglutinaccedilatildeo em Latex (LAT) Teste de

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

a neonatal screening program preliminary results Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical v 45 n 1 2012 p122-124 BICHARA C N C POacuteVOA M M LEAtildeO R N Q LAINSON R CARMO E L Toxoplasmose In LEAtildeO R N Q Medicina Tropical e Infectologia na Amazocircnia Beleacutem Samauna Editorial 2013 p1317-1354 BOacuteIA M N CARVALHO-COSTA F A SODREacute F C PINTO G M T AMENDOEI M R R Seroprevalence of toxoplasma gondii infection among indian people living in Iauareteacute Satildeo Gabriel da Cachoeira Amazonas Brazil Revista do instituto Medicina tropical de Satildeo Paulo v 50 n 1 2008 p17-20 CARMO E L SILVA M C M XAVIER U A M COSTA BO POacuteVOA M M Inqueacuterito soroloacutegico de toxoplasmose em candidatos a transplante renal no Hospital Ofir Loyola Beleacutem Paraacute Brasil Revista Panamericana de Infectologia v 6 n 4 2004 p15-17 CARMO E L VIANA G M R FIGUEREDO J E BICHARA C N C POacuteVOA M M Determinaccedilatildeo do perfil soroloacutegico de toxoplasmose em um grupo de pacientes febris residentes no municiacutepio de Santana Amapaacute Revista Panamericana de Infectologia v 12 n 1 2010a p28-30 CARMO E L POacuteVOA M M MONTEIRO N S MARINHO R R NASCIMENTO J M FREITAS S N BICHARA C N C Surto de toxoplasmose humana no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Revista Pan-Amazocircnica de Sauacutede v1 2010b p61-66 CAVALCANTE G T AGUIAR D M CAMARGO L M A LABRUNA M B ANDRADE H F MEIRELES L R DUBEY J P THULLIEZ P DIAS R A GENNARI S M Seroprevalence of Toxoplasma gondii Antibodies in Humans From Rural Western Amazon Brazil Journal of Parasitology 92(3) 2006 p647-649

CONG W HUANG S ZHOU D XUL M WUL S YAN C ZHAO Q SONG H ZHU X First report of Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in northwest China Parasites amp Vectors 5110 2012 p1-4 COSTA A M Toxoplasmose animal e humana no Parque Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi Beleacutem Paraacute Brasil 2000 99f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Universidade Federal do Paraacute Museu Paraense Emiacutelio Goeldi Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuaacuteria Beleacutem 2000 DELGADO P M PEREA N S DELGADO J P M GARCIA C B MALHEIROS A F DAVILA C R G Detection of infection with Toxoplasma gondii in manatees (Trichechus inunguis) of the peruvian amazona Acta Bioloacutegica Colombiana v 18 n 1 2013 p211- 216

33

DUBEY J P A review of toxoplasmosis in wild birds Veterinary Parasitology v106 2002 p121-153 DUBEY J P Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus) prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses Public Helath v57 n1 2010b p60-73 DUBEY J P GRAHAM D H DAHL E HILALIC M EL-GHAYSHC A SREEKUMARA C KWOKA O C H SHENA S K LEHMANN T Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii from chickens and ducks from Egypt Veterinary Parasitology 114 2003 p89-95 DUBEY JP SUNDAR N GENNARI SM MINERVINO AH FARIAS NA RUAS JL SANTOS TR CAVALCANTE GT KWOK OC SU C Biologic and genetic comparison of Toxoplasma gondii isolates in free-range chickens from the northern Paraacute state and the southern state Rio Grande do Sul Brazil revealed highly diverse and distinct parasite populations Veterinary parasitology v 143 n2 2007 p182-188 EL-MASSEY A MAHDY O A EL-GHAYSH A DUBEY JP Prevalence of Toxoplasma gondii antibodies in sera of turkeys chickens and ducks from Egypt Journal of Parasitology 86 2000 p627ndash628 GRANATO C F H JUNIOR I J P Diagnoacutestico Laboratorial da Toxoplasmose In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 p127-135 FERREIRA M U HIRAMOTO R M AURELIANO D P SILVA-NUNES M SILVA N S MALAFRONTE R S MUNIZ P T A Community-based Survey of Human Toxoplasmosis in Rural Amazonia Seroprevalence Seroconversion Rate and Associated Risk Factors The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene v 81 n 1 2009 p 171ndash176 FERRARONI J J REED S G SPEER C A Prevalence of Toxoplasma Antibodies in Humans and Various Animals in the Amazon Proceedings of The Helminthological Society of Washington v47 n1 1980 p148-140 FREITAS J A OLIVEIRA J P RAMOS O S ISHIZUKA M M Frequecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em suiacutenos abatidos sem inspeccedilatildeo em Beleacutem Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia v61 n5 2009 p1230-1232 FRENKEL J K BERMUDEZ J E V Toxoplasmose In VERONESI R FOCACCIO R 4ed Tratado de Infectologia Satildeo Paulo Editora Atheneu 2009 p1793-1809 GARDNER I A GREINER M DUBEY J P Statistical evaluation of test accuracy studies for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health 2010 57 82-94

34

GOIS F D ALMEIDA E C J FARIAS FILHO R V SILVA FILHA O L Estudo preliminar sobre o dimorfismo sexual do pato cinza do catoleacute (Cairina moschata) Actas Iberoamericanas de Conservacioacuten Animal v 2 2012 p95-98 HARFOUSH M TAHOON A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol v40 n2 2010 p295-02 HILL D E DUBEY J P Toxoplasma gondii prevalence in farm animals in the United States International Journal for Parasitology n 43 2013 p107ndash113 IBGE - Instituto Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica Cidades Disponiacutevel em lthttpwwwcidadesibgegovbrxtrasperfilphplang=ampcodmun=150140ampsearch=para|belem|infograficos-informacoes-completasgt Acesso em 21 de fev 2015 JONES J L DUBEY J P Epidemiologia da Toxoplasmose In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P117-126 KAWAZOE U Toxoplasma gondii In NEVES D P MELO A L LINARDI P M VITOR R W A Parasitologia Humana 11ed Satildeo Paulo Editora Atheneu 2005 p163-172 KIM K WEISS L M Toxoplasma the next 100 years Microbes and Infection v 10 2008 p978-984 MAKSIMOVA P BUSCHTOumlNSA S HERRMANNA D C CONRATHSA F J GOumlRLICHB K TENTER A M DUBEY J P NAGEL-KOHLD U THOMS B BOumlTCHER L KUumlHNE M SCHARES G Serological survey and risk factors for Toxoplasma gondii in domestic ducks and geese in Lower Saxony Germany Veterinary Parasitology v182 2011 p140-149 MEIRELES L R Estudos das Fontes de Infecccedilatildeo da Toxoplasmose humana em diferentes localidades do estado de Satildeo Paulo 2001 141f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) - USP 2001 MILLAR P R ALVES F M X TEIXEIRA V Q VICENTE R T MENEZES E M SOBREIRO L G PEREIRA V L A P AMENDOEIRA M R R Occurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 32 n3 2012 p 231-236

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35

MONTANtildeO P Y CRUZ M A ULLMANN L S LANGONI H BIONDO A W Contato com gatos um fator de risco para a toxoplasmose congecircnita Cliacutenica Veterinaacuteria n 86 p 78-84 2010 NETO O J S Perfil soroepidemioloacutegico e detecccedilatildeo molecular de toxoplasma gondii em gallus gallus e columba livia da Regiatildeo Metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes 2013 89f Tese (Ciecircncia Animal) - Universidade Federal de Goiaacutes 2013 PUVANESUARAN V R NOORDIN R VENUGOPAL BALAKRISHNAN V Isolation and Genotyping of Toxoplasma gondii from Free-Range Ducks in Malaysia AVIAN DISEASES 57 2013 p128ndash132 SANTOS M C F Frequecircncias da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipira e frangos de corte em regiotildees dos Estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba 2012 82f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em ciecircncias bioloacutegicas) ndash Universidade Federal do Rio Grande do Norte Centro de Biociecircncias 2012 SANTOS P S ALBUQUERQUE G R SILVA V M F MARTIN A R MARVULO MFV SOUZA S L P RAGOZO AMA NASCIMENTO CC GENNARI S M DUBEY J P SILVA J C R Seroprevalence of Toxoplasma gondii in free-living Amazon River dolphins (Inia geoffrensis) from central Amazon Brazil Veterinary Parasitology v 183 n 1-2 2011 p 171-173 SILVA A V H LANGONI L The detection of Toxoplasma gondii by comparing cytology histopathology bioassay in mice and the polymerase chain reaction (PCR) Veterinary Parasitology v 97 p 191-198 2001 SILVA J B FONSECA A H ANDRADE S J T SILVA A G M OLIVEIRA C M C BARBOSA J D Prevalecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em buacutefalos (Bubalus bubalis) no Estado do Paraacute Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 33 n 5 2013 p581-585 ROBERT-GANGNEUX F DARDEacute M L Epidemiology of and diagnostic strategies for toxoplasmosis Clinical Microbiology Reviews v25 n2 2012 p264-296 TENTER A M HECKEROTH A R WEISS L M Toxoplasma gondii from animals to humans International Journal for Parasitology v30 n 12-13 2000 p1217-1258 TENTER A M Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Memoacuterias do Instituto Oswaldo Cruz v 104 2009 p364-369 VITALIANO S N Infecccedilatildeo experimental em carcaraacutes (Caracara plancus MILLER J F 1777) com Toxoplasma gondii (Amostra ME49) 2007 65f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Medicina Veterinaria) ndash Faculdade de Ciecircncias Agraacuterias e Veterinaacuterias Unesp Jaboticabal

36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

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6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

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Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

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11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

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12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

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49

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desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

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14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

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15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

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Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

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China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

29

Aglutinaccedilatildeo Modificado (MAT) e Reaccedilotildees Imunoenzimaacuteticas ou Enzyme Linked

Immunosorbent Assay (ELISA)

As teacutecnicas de LAT assim como as de MAT apresentam alta

sensibilidade e natildeo necessitam de conjugados espeacutecie-especiacuteficos e satildeo muito

utilizados para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii em animais selvagens

(VITALIANO 2007) Sendo que o MAT tem possibilidade de ser utilizado no

diagnoacutestico da toxoplasmose em diversas espeacutecies animais inclusive aves

(DUBEY 2002)

Observa-se que o MAT tem demonstrado ser um excelente meacutetodo de

diagnoacutestico da toxoplasmose em aves devido sua alta sensibilidade sendo

utilizado em grande quantidade de estudos por diversos autores Vale ressaltar

conforme Silva et al (2007 apud NETO 2013) que embora o MAT seja um teste

simples acurado e especifico que detecta principalmente IgG o 2-

mercaptoetanol utilizado no teste acaba por inativar as IgM especificas e

inespeciacuteficas excluindo-as

A reaccedilatildeo de HAI introduzido por Jacobs e Lunde (1957) para o

diagnoacutestico da toxoplasmose trata-se de uma teacutecnica que revela constituintes

citoplasmaacuteticos de origem proteica sendo de faacutecil execuccedilatildeo e fornecendo

resultados em curto prazo de tempo com custo reduzido Apresenta alta

sensibilidade e eacute capaz de detectar anticorpos que persistem por anos mas

aparecem mais tardiamente o que o torna natildeo indicado para diagnostico de

toxoplasmose aguda sendo bastante utilizado em estudos epidemioloacutegicos com

animais domeacutesticos e de produccedilatildeo aleacutem de grande quantidade de aves

silvestres (SANTOS 2012)

O ELISA tem se mostrado altamente sensiacutevel aleacutem de apresentar alta

especificidade como meacutetodo soroloacutegico possibilita trabalhar com diversas

amostras sendo muito utilizado atualmente Se baseia na reaccedilatildeo de soros testes

com antiacutegenos sensibilizados em placas de microtitulaccedilatildeo O anticorpo ligado eacute

demonstrado pela adiccedilatildeo de anti-imunoglobulina marcada com enzima seguido

por ensaio da reaccedilatildeo da enzima com seu substrato A sua maior desvantagem

consiste na necessidade de espectofotocircmetro de placa para leitura objetiva da

reaccedilatildeo (VITALIANO 2007) sendo limitado por apresentar custos elevados

(BARBOSA 2007)

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

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36

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37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

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3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

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4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

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6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

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48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

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21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

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and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

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28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

30

A RIFI eacute um teste amplamente utilizado para o diagnoacutestico da

toxoplasmose no qual satildeo utilizados antiacutegenos que satildeo constituiacutedos por

taquizoiacutetas formolizados fixados em uma lacircmina A utilizaccedilatildeo de conjugados

fluorescentes espeacutecie-especiacuteficos resulta em fluorescecircncia do parasito na

presenccedila de anticorpos especiacuteficos Sua maior desvantagem eacute a necessidade

de um microscoacutepio equipado para fluorescecircncia com epi-iluminaccedilatildeo para

visualizar os parasitos fluorescentes (VITALIANO 2007)

No entanto apesar dos diversos testes soroloacutegicos jaacute disponiacuteveis o

diagnoacutestico da toxoplasmose aviaacuteria ainda natildeo estaacute bem estabelecido uma vez

que muitos autores apresentam resultados divergentes em relaccedilatildeo ao meacutetodo

ideal para detecccedilatildeo de anticorpos presentes nos soros das aves fato esse que

pode estar ligado a diversos fatores como variabilidade quanto as proteiacutenas

antigecircnicas variaccedilatildeo na sensibilidade dos reagentes devido a transportes ou

estocagem inadequadas diferenccedila de qualidade entre os fabricantes dos Kits

comerciais ou entre Kits de diferentes lotes entre outros (SANTOS 2012)

Estudos de soroprevalecircncia podem vir a contribuir a esclarecer em ateacute

que ponto o consumo ou manuseamento de carne de aves de capoeira incluindo

a carne de Anseriformes contribui para infecccedilotildees humanas

No estado do Paraacute norte do Brasil culturalmente tem-se o haacutebito de

ingerir carne de pato como uma iguaria tiacutepica regional sendo consumida por

diferentes camadas socioeconocircmicas da populaccedilatildeo Dado essas caracteriacutesticas

e considerando a alta taxa regional da toxoplasmose os animais de corte para

consumo humano se constituem como uma potencial fonte de infecccedilatildeo e que

conforme Silva et al (2013) se faz necessaacuteria a investigaccedilatildeo da prevalecircncia da

infecccedilatildeo por T gondii nos animais de produccedilatildeo

Desse modo como forma de contribuiccedilatildeo cientifica a esta questatildeo seraacute

realizado um estudo soroepidemioloacutegico para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo

pelo T gondii em pato domeacutestico (Cairina moschata) abatidos e colocados agrave

venda nas feiras puacuteblicas destinados ao consumo da populaccedilatildeo no municiacutepio de

Beleacutem-PA

Devido a importacircncia dos animais de produccedilatildeo na epidemiologia da

toxoplasmose como potenciais hospedeiros e a falta de informaccedilotildees a respeito

da soroprevalecircncia em patos vendidos em feiras livres do municiacutepio de Beleacutem-

PA espera-se com os resultados deste estudo contribuir para o conhecimento

31

da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

a neonatal screening program preliminary results Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical v 45 n 1 2012 p122-124 BICHARA C N C POacuteVOA M M LEAtildeO R N Q LAINSON R CARMO E L Toxoplasmose In LEAtildeO R N Q Medicina Tropical e Infectologia na Amazocircnia Beleacutem Samauna Editorial 2013 p1317-1354 BOacuteIA M N CARVALHO-COSTA F A SODREacute F C PINTO G M T AMENDOEI M R R Seroprevalence of toxoplasma gondii infection among indian people living in Iauareteacute Satildeo Gabriel da Cachoeira Amazonas Brazil Revista do instituto Medicina tropical de Satildeo Paulo v 50 n 1 2008 p17-20 CARMO E L SILVA M C M XAVIER U A M COSTA BO POacuteVOA M M Inqueacuterito soroloacutegico de toxoplasmose em candidatos a transplante renal no Hospital Ofir Loyola Beleacutem Paraacute Brasil Revista Panamericana de Infectologia v 6 n 4 2004 p15-17 CARMO E L VIANA G M R FIGUEREDO J E BICHARA C N C POacuteVOA M M Determinaccedilatildeo do perfil soroloacutegico de toxoplasmose em um grupo de pacientes febris residentes no municiacutepio de Santana Amapaacute Revista Panamericana de Infectologia v 12 n 1 2010a p28-30 CARMO E L POacuteVOA M M MONTEIRO N S MARINHO R R NASCIMENTO J M FREITAS S N BICHARA C N C Surto de toxoplasmose humana no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Revista Pan-Amazocircnica de Sauacutede v1 2010b p61-66 CAVALCANTE G T AGUIAR D M CAMARGO L M A LABRUNA M B ANDRADE H F MEIRELES L R DUBEY J P THULLIEZ P DIAS R A GENNARI S M Seroprevalence of Toxoplasma gondii Antibodies in Humans From Rural Western Amazon Brazil Journal of Parasitology 92(3) 2006 p647-649

CONG W HUANG S ZHOU D XUL M WUL S YAN C ZHAO Q SONG H ZHU X First report of Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in northwest China Parasites amp Vectors 5110 2012 p1-4 COSTA A M Toxoplasmose animal e humana no Parque Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi Beleacutem Paraacute Brasil 2000 99f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Universidade Federal do Paraacute Museu Paraense Emiacutelio Goeldi Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuaacuteria Beleacutem 2000 DELGADO P M PEREA N S DELGADO J P M GARCIA C B MALHEIROS A F DAVILA C R G Detection of infection with Toxoplasma gondii in manatees (Trichechus inunguis) of the peruvian amazona Acta Bioloacutegica Colombiana v 18 n 1 2013 p211- 216

33

DUBEY J P A review of toxoplasmosis in wild birds Veterinary Parasitology v106 2002 p121-153 DUBEY J P Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus) prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses Public Helath v57 n1 2010b p60-73 DUBEY J P GRAHAM D H DAHL E HILALIC M EL-GHAYSHC A SREEKUMARA C KWOKA O C H SHENA S K LEHMANN T Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii from chickens and ducks from Egypt Veterinary Parasitology 114 2003 p89-95 DUBEY JP SUNDAR N GENNARI SM MINERVINO AH FARIAS NA RUAS JL SANTOS TR CAVALCANTE GT KWOK OC SU C Biologic and genetic comparison of Toxoplasma gondii isolates in free-range chickens from the northern Paraacute state and the southern state Rio Grande do Sul Brazil revealed highly diverse and distinct parasite populations Veterinary parasitology v 143 n2 2007 p182-188 EL-MASSEY A MAHDY O A EL-GHAYSH A DUBEY JP Prevalence of Toxoplasma gondii antibodies in sera of turkeys chickens and ducks from Egypt Journal of Parasitology 86 2000 p627ndash628 GRANATO C F H JUNIOR I J P Diagnoacutestico Laboratorial da Toxoplasmose In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 p127-135 FERREIRA M U HIRAMOTO R M AURELIANO D P SILVA-NUNES M SILVA N S MALAFRONTE R S MUNIZ P T A Community-based Survey of Human Toxoplasmosis in Rural Amazonia Seroprevalence Seroconversion Rate and Associated Risk Factors The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene v 81 n 1 2009 p 171ndash176 FERRARONI J J REED S G SPEER C A Prevalence of Toxoplasma Antibodies in Humans and Various Animals in the Amazon Proceedings of The Helminthological Society of Washington v47 n1 1980 p148-140 FREITAS J A OLIVEIRA J P RAMOS O S ISHIZUKA M M Frequecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em suiacutenos abatidos sem inspeccedilatildeo em Beleacutem Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia v61 n5 2009 p1230-1232 FRENKEL J K BERMUDEZ J E V Toxoplasmose In VERONESI R FOCACCIO R 4ed Tratado de Infectologia Satildeo Paulo Editora Atheneu 2009 p1793-1809 GARDNER I A GREINER M DUBEY J P Statistical evaluation of test accuracy studies for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health 2010 57 82-94

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GOIS F D ALMEIDA E C J FARIAS FILHO R V SILVA FILHA O L Estudo preliminar sobre o dimorfismo sexual do pato cinza do catoleacute (Cairina moschata) Actas Iberoamericanas de Conservacioacuten Animal v 2 2012 p95-98 HARFOUSH M TAHOON A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol v40 n2 2010 p295-02 HILL D E DUBEY J P Toxoplasma gondii prevalence in farm animals in the United States International Journal for Parasitology n 43 2013 p107ndash113 IBGE - Instituto Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica Cidades Disponiacutevel em lthttpwwwcidadesibgegovbrxtrasperfilphplang=ampcodmun=150140ampsearch=para|belem|infograficos-informacoes-completasgt Acesso em 21 de fev 2015 JONES J L DUBEY J P Epidemiologia da Toxoplasmose In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P117-126 KAWAZOE U Toxoplasma gondii In NEVES D P MELO A L LINARDI P M VITOR R W A Parasitologia Humana 11ed Satildeo Paulo Editora Atheneu 2005 p163-172 KIM K WEISS L M Toxoplasma the next 100 years Microbes and Infection v 10 2008 p978-984 MAKSIMOVA P BUSCHTOumlNSA S HERRMANNA D C CONRATHSA F J GOumlRLICHB K TENTER A M DUBEY J P NAGEL-KOHLD U THOMS B BOumlTCHER L KUumlHNE M SCHARES G Serological survey and risk factors for Toxoplasma gondii in domestic ducks and geese in Lower Saxony Germany Veterinary Parasitology v182 2011 p140-149 MEIRELES L R Estudos das Fontes de Infecccedilatildeo da Toxoplasmose humana em diferentes localidades do estado de Satildeo Paulo 2001 141f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) - USP 2001 MILLAR P R ALVES F M X TEIXEIRA V Q VICENTE R T MENEZES E M SOBREIRO L G PEREIRA V L A P AMENDOEIRA M R R Occurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 32 n3 2012 p 231-236

MINERVINO A H CASSINELLI A B LIMA J T SOARES HS MALHEIROS A F MARCILI A GENNARI S M Prevalence of Anti-Neospora caninum and Anti-Toxoplasma gondii Antibodies in Dogs From Two Different Indigenous Communities in the Brazilian Amazon Region Journal of Parasitology v 98 n 6 2012 p1276-1278

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MONTANtildeO P Y CRUZ M A ULLMANN L S LANGONI H BIONDO A W Contato com gatos um fator de risco para a toxoplasmose congecircnita Cliacutenica Veterinaacuteria n 86 p 78-84 2010 NETO O J S Perfil soroepidemioloacutegico e detecccedilatildeo molecular de toxoplasma gondii em gallus gallus e columba livia da Regiatildeo Metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes 2013 89f Tese (Ciecircncia Animal) - Universidade Federal de Goiaacutes 2013 PUVANESUARAN V R NOORDIN R VENUGOPAL BALAKRISHNAN V Isolation and Genotyping of Toxoplasma gondii from Free-Range Ducks in Malaysia AVIAN DISEASES 57 2013 p128ndash132 SANTOS M C F Frequecircncias da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipira e frangos de corte em regiotildees dos Estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba 2012 82f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em ciecircncias bioloacutegicas) ndash Universidade Federal do Rio Grande do Norte Centro de Biociecircncias 2012 SANTOS P S ALBUQUERQUE G R SILVA V M F MARTIN A R MARVULO MFV SOUZA S L P RAGOZO AMA NASCIMENTO CC GENNARI S M DUBEY J P SILVA J C R Seroprevalence of Toxoplasma gondii in free-living Amazon River dolphins (Inia geoffrensis) from central Amazon Brazil Veterinary Parasitology v 183 n 1-2 2011 p 171-173 SILVA A V H LANGONI L The detection of Toxoplasma gondii by comparing cytology histopathology bioassay in mice and the polymerase chain reaction (PCR) Veterinary Parasitology v 97 p 191-198 2001 SILVA J B FONSECA A H ANDRADE S J T SILVA A G M OLIVEIRA C M C BARBOSA J D Prevalecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em buacutefalos (Bubalus bubalis) no Estado do Paraacute Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 33 n 5 2013 p581-585 ROBERT-GANGNEUX F DARDEacute M L Epidemiology of and diagnostic strategies for toxoplasmosis Clinical Microbiology Reviews v25 n2 2012 p264-296 TENTER A M HECKEROTH A R WEISS L M Toxoplasma gondii from animals to humans International Journal for Parasitology v30 n 12-13 2000 p1217-1258 TENTER A M Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Memoacuterias do Instituto Oswaldo Cruz v 104 2009 p364-369 VITALIANO S N Infecccedilatildeo experimental em carcaraacutes (Caracara plancus MILLER J F 1777) com Toxoplasma gondii (Amostra ME49) 2007 65f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Medicina Veterinaria) ndash Faculdade de Ciecircncias Agraacuterias e Veterinaacuterias Unesp Jaboticabal

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VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

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33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

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51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

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Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

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36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

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37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

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moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

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Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

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APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

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da importacircncia do consumo da carne de pato na epidemiologia da toxoplasmose

em Beleacutem-PA

OBJETIVOS Geral

Determinar a soroprevalecircncia da toxoplasmose em patos de corte (Cairina

moschata) vendidos em feiras livres em Beleacutem-PA

Especiacuteficos

Caracterizar o perfil soroloacutegico IgG Anti-T gondii em patos de corte

vendidos em feira livres

Mapear geograficamente a possiacutevel origem destes animais

Observar que medidas poderiam ser obtidas como de intervenccedilatildeo para

reduzir a transmissatildeo da toxoplasmose atraveacutes do manuseio e ingestatildeo de carne

de patos de corte (Cairina moschata) vendidos em feiras livres

12 REFEREcircNCIAS DA INTRODUCcedilAtildeO GERAL ANDRZEJENSKA I LINDER F BORTOLIERO A L T gondii antibodies in the stork Ciconia ciconia Veterinary Research v 117 n7-8 p274-275 2004 BARBOSA H S MUNO R M MOURA M A O Ciclo Evolutivo In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P33-45 BARBOSA S A A Pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii pelo teste de aglutinaccedilatildeo modificada em frangos de corte abatido para consumo 2007 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Centro de Ciecircncias Agraacuterias Universidade Federal do Paraacute Beleacutem 2007 BAacuteRTOVAacute E DVORAKOVAacute H BARTAacute J SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Susceptibility of the domestic duck (Anas platyrhynchos) to experimental infection with Toxoplasma gondii oocysts Avian Pathology v33 n2 2004 p153-157 BAacuteRTOVAacute E SEDLAacuteK K LITERAacuteK I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic birds from the Czech Republic Avian Pathol 38 2009 p317ndash320 BICHARA C N C CANTO G A C TOSTES C L FREITAS J J S CARMO E L POacuteVOA M M SILVEIRA E C Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Beleacutem State of Paraacute Northern Brazil determined by

32

a neonatal screening program preliminary results Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical v 45 n 1 2012 p122-124 BICHARA C N C POacuteVOA M M LEAtildeO R N Q LAINSON R CARMO E L Toxoplasmose In LEAtildeO R N Q Medicina Tropical e Infectologia na Amazocircnia Beleacutem Samauna Editorial 2013 p1317-1354 BOacuteIA M N CARVALHO-COSTA F A SODREacute F C PINTO G M T AMENDOEI M R R Seroprevalence of toxoplasma gondii infection among indian people living in Iauareteacute Satildeo Gabriel da Cachoeira Amazonas Brazil Revista do instituto Medicina tropical de Satildeo Paulo v 50 n 1 2008 p17-20 CARMO E L SILVA M C M XAVIER U A M COSTA BO POacuteVOA M M Inqueacuterito soroloacutegico de toxoplasmose em candidatos a transplante renal no Hospital Ofir Loyola Beleacutem Paraacute Brasil Revista Panamericana de Infectologia v 6 n 4 2004 p15-17 CARMO E L VIANA G M R FIGUEREDO J E BICHARA C N C POacuteVOA M M Determinaccedilatildeo do perfil soroloacutegico de toxoplasmose em um grupo de pacientes febris residentes no municiacutepio de Santana Amapaacute Revista Panamericana de Infectologia v 12 n 1 2010a p28-30 CARMO E L POacuteVOA M M MONTEIRO N S MARINHO R R NASCIMENTO J M FREITAS S N BICHARA C N C Surto de toxoplasmose humana no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Revista Pan-Amazocircnica de Sauacutede v1 2010b p61-66 CAVALCANTE G T AGUIAR D M CAMARGO L M A LABRUNA M B ANDRADE H F MEIRELES L R DUBEY J P THULLIEZ P DIAS R A GENNARI S M Seroprevalence of Toxoplasma gondii Antibodies in Humans From Rural Western Amazon Brazil Journal of Parasitology 92(3) 2006 p647-649

CONG W HUANG S ZHOU D XUL M WUL S YAN C ZHAO Q SONG H ZHU X First report of Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in northwest China Parasites amp Vectors 5110 2012 p1-4 COSTA A M Toxoplasmose animal e humana no Parque Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi Beleacutem Paraacute Brasil 2000 99f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Universidade Federal do Paraacute Museu Paraense Emiacutelio Goeldi Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuaacuteria Beleacutem 2000 DELGADO P M PEREA N S DELGADO J P M GARCIA C B MALHEIROS A F DAVILA C R G Detection of infection with Toxoplasma gondii in manatees (Trichechus inunguis) of the peruvian amazona Acta Bioloacutegica Colombiana v 18 n 1 2013 p211- 216

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DUBEY J P A review of toxoplasmosis in wild birds Veterinary Parasitology v106 2002 p121-153 DUBEY J P Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus) prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses Public Helath v57 n1 2010b p60-73 DUBEY J P GRAHAM D H DAHL E HILALIC M EL-GHAYSHC A SREEKUMARA C KWOKA O C H SHENA S K LEHMANN T Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii from chickens and ducks from Egypt Veterinary Parasitology 114 2003 p89-95 DUBEY JP SUNDAR N GENNARI SM MINERVINO AH FARIAS NA RUAS JL SANTOS TR CAVALCANTE GT KWOK OC SU C Biologic and genetic comparison of Toxoplasma gondii isolates in free-range chickens from the northern Paraacute state and the southern state Rio Grande do Sul Brazil revealed highly diverse and distinct parasite populations Veterinary parasitology v 143 n2 2007 p182-188 EL-MASSEY A MAHDY O A EL-GHAYSH A DUBEY JP Prevalence of Toxoplasma gondii antibodies in sera of turkeys chickens and ducks from Egypt Journal of Parasitology 86 2000 p627ndash628 GRANATO C F H JUNIOR I J P Diagnoacutestico Laboratorial da Toxoplasmose In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 p127-135 FERREIRA M U HIRAMOTO R M AURELIANO D P SILVA-NUNES M SILVA N S MALAFRONTE R S MUNIZ P T A Community-based Survey of Human Toxoplasmosis in Rural Amazonia Seroprevalence Seroconversion Rate and Associated Risk Factors The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene v 81 n 1 2009 p 171ndash176 FERRARONI J J REED S G SPEER C A Prevalence of Toxoplasma Antibodies in Humans and Various Animals in the Amazon Proceedings of The Helminthological Society of Washington v47 n1 1980 p148-140 FREITAS J A OLIVEIRA J P RAMOS O S ISHIZUKA M M Frequecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em suiacutenos abatidos sem inspeccedilatildeo em Beleacutem Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia v61 n5 2009 p1230-1232 FRENKEL J K BERMUDEZ J E V Toxoplasmose In VERONESI R FOCACCIO R 4ed Tratado de Infectologia Satildeo Paulo Editora Atheneu 2009 p1793-1809 GARDNER I A GREINER M DUBEY J P Statistical evaluation of test accuracy studies for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health 2010 57 82-94

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GOIS F D ALMEIDA E C J FARIAS FILHO R V SILVA FILHA O L Estudo preliminar sobre o dimorfismo sexual do pato cinza do catoleacute (Cairina moschata) Actas Iberoamericanas de Conservacioacuten Animal v 2 2012 p95-98 HARFOUSH M TAHOON A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol v40 n2 2010 p295-02 HILL D E DUBEY J P Toxoplasma gondii prevalence in farm animals in the United States International Journal for Parasitology n 43 2013 p107ndash113 IBGE - Instituto Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica Cidades Disponiacutevel em lthttpwwwcidadesibgegovbrxtrasperfilphplang=ampcodmun=150140ampsearch=para|belem|infograficos-informacoes-completasgt Acesso em 21 de fev 2015 JONES J L DUBEY J P Epidemiologia da Toxoplasmose In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P117-126 KAWAZOE U Toxoplasma gondii In NEVES D P MELO A L LINARDI P M VITOR R W A Parasitologia Humana 11ed Satildeo Paulo Editora Atheneu 2005 p163-172 KIM K WEISS L M Toxoplasma the next 100 years Microbes and Infection v 10 2008 p978-984 MAKSIMOVA P BUSCHTOumlNSA S HERRMANNA D C CONRATHSA F J GOumlRLICHB K TENTER A M DUBEY J P NAGEL-KOHLD U THOMS B BOumlTCHER L KUumlHNE M SCHARES G Serological survey and risk factors for Toxoplasma gondii in domestic ducks and geese in Lower Saxony Germany Veterinary Parasitology v182 2011 p140-149 MEIRELES L R Estudos das Fontes de Infecccedilatildeo da Toxoplasmose humana em diferentes localidades do estado de Satildeo Paulo 2001 141f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) - USP 2001 MILLAR P R ALVES F M X TEIXEIRA V Q VICENTE R T MENEZES E M SOBREIRO L G PEREIRA V L A P AMENDOEIRA M R R Occurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 32 n3 2012 p 231-236

MINERVINO A H CASSINELLI A B LIMA J T SOARES HS MALHEIROS A F MARCILI A GENNARI S M Prevalence of Anti-Neospora caninum and Anti-Toxoplasma gondii Antibodies in Dogs From Two Different Indigenous Communities in the Brazilian Amazon Region Journal of Parasitology v 98 n 6 2012 p1276-1278

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MONTANtildeO P Y CRUZ M A ULLMANN L S LANGONI H BIONDO A W Contato com gatos um fator de risco para a toxoplasmose congecircnita Cliacutenica Veterinaacuteria n 86 p 78-84 2010 NETO O J S Perfil soroepidemioloacutegico e detecccedilatildeo molecular de toxoplasma gondii em gallus gallus e columba livia da Regiatildeo Metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes 2013 89f Tese (Ciecircncia Animal) - Universidade Federal de Goiaacutes 2013 PUVANESUARAN V R NOORDIN R VENUGOPAL BALAKRISHNAN V Isolation and Genotyping of Toxoplasma gondii from Free-Range Ducks in Malaysia AVIAN DISEASES 57 2013 p128ndash132 SANTOS M C F Frequecircncias da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipira e frangos de corte em regiotildees dos Estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba 2012 82f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em ciecircncias bioloacutegicas) ndash Universidade Federal do Rio Grande do Norte Centro de Biociecircncias 2012 SANTOS P S ALBUQUERQUE G R SILVA V M F MARTIN A R MARVULO MFV SOUZA S L P RAGOZO AMA NASCIMENTO CC GENNARI S M DUBEY J P SILVA J C R Seroprevalence of Toxoplasma gondii in free-living Amazon River dolphins (Inia geoffrensis) from central Amazon Brazil Veterinary Parasitology v 183 n 1-2 2011 p 171-173 SILVA A V H LANGONI L The detection of Toxoplasma gondii by comparing cytology histopathology bioassay in mice and the polymerase chain reaction (PCR) Veterinary Parasitology v 97 p 191-198 2001 SILVA J B FONSECA A H ANDRADE S J T SILVA A G M OLIVEIRA C M C BARBOSA J D Prevalecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em buacutefalos (Bubalus bubalis) no Estado do Paraacute Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 33 n 5 2013 p581-585 ROBERT-GANGNEUX F DARDEacute M L Epidemiology of and diagnostic strategies for toxoplasmosis Clinical Microbiology Reviews v25 n2 2012 p264-296 TENTER A M HECKEROTH A R WEISS L M Toxoplasma gondii from animals to humans International Journal for Parasitology v30 n 12-13 2000 p1217-1258 TENTER A M Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Memoacuterias do Instituto Oswaldo Cruz v 104 2009 p364-369 VITALIANO S N Infecccedilatildeo experimental em carcaraacutes (Caracara plancus MILLER J F 1777) com Toxoplasma gondii (Amostra ME49) 2007 65f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Medicina Veterinaria) ndash Faculdade de Ciecircncias Agraacuterias e Veterinaacuterias Unesp Jaboticabal

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VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

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2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

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ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

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semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

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52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

32

a neonatal screening program preliminary results Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical v 45 n 1 2012 p122-124 BICHARA C N C POacuteVOA M M LEAtildeO R N Q LAINSON R CARMO E L Toxoplasmose In LEAtildeO R N Q Medicina Tropical e Infectologia na Amazocircnia Beleacutem Samauna Editorial 2013 p1317-1354 BOacuteIA M N CARVALHO-COSTA F A SODREacute F C PINTO G M T AMENDOEI M R R Seroprevalence of toxoplasma gondii infection among indian people living in Iauareteacute Satildeo Gabriel da Cachoeira Amazonas Brazil Revista do instituto Medicina tropical de Satildeo Paulo v 50 n 1 2008 p17-20 CARMO E L SILVA M C M XAVIER U A M COSTA BO POacuteVOA M M Inqueacuterito soroloacutegico de toxoplasmose em candidatos a transplante renal no Hospital Ofir Loyola Beleacutem Paraacute Brasil Revista Panamericana de Infectologia v 6 n 4 2004 p15-17 CARMO E L VIANA G M R FIGUEREDO J E BICHARA C N C POacuteVOA M M Determinaccedilatildeo do perfil soroloacutegico de toxoplasmose em um grupo de pacientes febris residentes no municiacutepio de Santana Amapaacute Revista Panamericana de Infectologia v 12 n 1 2010a p28-30 CARMO E L POacuteVOA M M MONTEIRO N S MARINHO R R NASCIMENTO J M FREITAS S N BICHARA C N C Surto de toxoplasmose humana no Distrito de Monte Dourado Municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Revista Pan-Amazocircnica de Sauacutede v1 2010b p61-66 CAVALCANTE G T AGUIAR D M CAMARGO L M A LABRUNA M B ANDRADE H F MEIRELES L R DUBEY J P THULLIEZ P DIAS R A GENNARI S M Seroprevalence of Toxoplasma gondii Antibodies in Humans From Rural Western Amazon Brazil Journal of Parasitology 92(3) 2006 p647-649

CONG W HUANG S ZHOU D XUL M WUL S YAN C ZHAO Q SONG H ZHU X First report of Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in northwest China Parasites amp Vectors 5110 2012 p1-4 COSTA A M Toxoplasmose animal e humana no Parque Zoobotacircnico do Museu Paraense Emiacutelio Goeldi Beleacutem Paraacute Brasil 2000 99f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncia Animal) - Universidade Federal do Paraacute Museu Paraense Emiacutelio Goeldi Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuaacuteria Beleacutem 2000 DELGADO P M PEREA N S DELGADO J P M GARCIA C B MALHEIROS A F DAVILA C R G Detection of infection with Toxoplasma gondii in manatees (Trichechus inunguis) of the peruvian amazona Acta Bioloacutegica Colombiana v 18 n 1 2013 p211- 216

33

DUBEY J P A review of toxoplasmosis in wild birds Veterinary Parasitology v106 2002 p121-153 DUBEY J P Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus) prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses Public Helath v57 n1 2010b p60-73 DUBEY J P GRAHAM D H DAHL E HILALIC M EL-GHAYSHC A SREEKUMARA C KWOKA O C H SHENA S K LEHMANN T Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii from chickens and ducks from Egypt Veterinary Parasitology 114 2003 p89-95 DUBEY JP SUNDAR N GENNARI SM MINERVINO AH FARIAS NA RUAS JL SANTOS TR CAVALCANTE GT KWOK OC SU C Biologic and genetic comparison of Toxoplasma gondii isolates in free-range chickens from the northern Paraacute state and the southern state Rio Grande do Sul Brazil revealed highly diverse and distinct parasite populations Veterinary parasitology v 143 n2 2007 p182-188 EL-MASSEY A MAHDY O A EL-GHAYSH A DUBEY JP Prevalence of Toxoplasma gondii antibodies in sera of turkeys chickens and ducks from Egypt Journal of Parasitology 86 2000 p627ndash628 GRANATO C F H JUNIOR I J P Diagnoacutestico Laboratorial da Toxoplasmose In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 p127-135 FERREIRA M U HIRAMOTO R M AURELIANO D P SILVA-NUNES M SILVA N S MALAFRONTE R S MUNIZ P T A Community-based Survey of Human Toxoplasmosis in Rural Amazonia Seroprevalence Seroconversion Rate and Associated Risk Factors The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene v 81 n 1 2009 p 171ndash176 FERRARONI J J REED S G SPEER C A Prevalence of Toxoplasma Antibodies in Humans and Various Animals in the Amazon Proceedings of The Helminthological Society of Washington v47 n1 1980 p148-140 FREITAS J A OLIVEIRA J P RAMOS O S ISHIZUKA M M Frequecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em suiacutenos abatidos sem inspeccedilatildeo em Beleacutem Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia v61 n5 2009 p1230-1232 FRENKEL J K BERMUDEZ J E V Toxoplasmose In VERONESI R FOCACCIO R 4ed Tratado de Infectologia Satildeo Paulo Editora Atheneu 2009 p1793-1809 GARDNER I A GREINER M DUBEY J P Statistical evaluation of test accuracy studies for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health 2010 57 82-94

34

GOIS F D ALMEIDA E C J FARIAS FILHO R V SILVA FILHA O L Estudo preliminar sobre o dimorfismo sexual do pato cinza do catoleacute (Cairina moschata) Actas Iberoamericanas de Conservacioacuten Animal v 2 2012 p95-98 HARFOUSH M TAHOON A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol v40 n2 2010 p295-02 HILL D E DUBEY J P Toxoplasma gondii prevalence in farm animals in the United States International Journal for Parasitology n 43 2013 p107ndash113 IBGE - Instituto Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica Cidades Disponiacutevel em lthttpwwwcidadesibgegovbrxtrasperfilphplang=ampcodmun=150140ampsearch=para|belem|infograficos-informacoes-completasgt Acesso em 21 de fev 2015 JONES J L DUBEY J P Epidemiologia da Toxoplasmose In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P117-126 KAWAZOE U Toxoplasma gondii In NEVES D P MELO A L LINARDI P M VITOR R W A Parasitologia Humana 11ed Satildeo Paulo Editora Atheneu 2005 p163-172 KIM K WEISS L M Toxoplasma the next 100 years Microbes and Infection v 10 2008 p978-984 MAKSIMOVA P BUSCHTOumlNSA S HERRMANNA D C CONRATHSA F J GOumlRLICHB K TENTER A M DUBEY J P NAGEL-KOHLD U THOMS B BOumlTCHER L KUumlHNE M SCHARES G Serological survey and risk factors for Toxoplasma gondii in domestic ducks and geese in Lower Saxony Germany Veterinary Parasitology v182 2011 p140-149 MEIRELES L R Estudos das Fontes de Infecccedilatildeo da Toxoplasmose humana em diferentes localidades do estado de Satildeo Paulo 2001 141f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) - USP 2001 MILLAR P R ALVES F M X TEIXEIRA V Q VICENTE R T MENEZES E M SOBREIRO L G PEREIRA V L A P AMENDOEIRA M R R Occurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 32 n3 2012 p 231-236

MINERVINO A H CASSINELLI A B LIMA J T SOARES HS MALHEIROS A F MARCILI A GENNARI S M Prevalence of Anti-Neospora caninum and Anti-Toxoplasma gondii Antibodies in Dogs From Two Different Indigenous Communities in the Brazilian Amazon Region Journal of Parasitology v 98 n 6 2012 p1276-1278

35

MONTANtildeO P Y CRUZ M A ULLMANN L S LANGONI H BIONDO A W Contato com gatos um fator de risco para a toxoplasmose congecircnita Cliacutenica Veterinaacuteria n 86 p 78-84 2010 NETO O J S Perfil soroepidemioloacutegico e detecccedilatildeo molecular de toxoplasma gondii em gallus gallus e columba livia da Regiatildeo Metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes 2013 89f Tese (Ciecircncia Animal) - Universidade Federal de Goiaacutes 2013 PUVANESUARAN V R NOORDIN R VENUGOPAL BALAKRISHNAN V Isolation and Genotyping of Toxoplasma gondii from Free-Range Ducks in Malaysia AVIAN DISEASES 57 2013 p128ndash132 SANTOS M C F Frequecircncias da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipira e frangos de corte em regiotildees dos Estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba 2012 82f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em ciecircncias bioloacutegicas) ndash Universidade Federal do Rio Grande do Norte Centro de Biociecircncias 2012 SANTOS P S ALBUQUERQUE G R SILVA V M F MARTIN A R MARVULO MFV SOUZA S L P RAGOZO AMA NASCIMENTO CC GENNARI S M DUBEY J P SILVA J C R Seroprevalence of Toxoplasma gondii in free-living Amazon River dolphins (Inia geoffrensis) from central Amazon Brazil Veterinary Parasitology v 183 n 1-2 2011 p 171-173 SILVA A V H LANGONI L The detection of Toxoplasma gondii by comparing cytology histopathology bioassay in mice and the polymerase chain reaction (PCR) Veterinary Parasitology v 97 p 191-198 2001 SILVA J B FONSECA A H ANDRADE S J T SILVA A G M OLIVEIRA C M C BARBOSA J D Prevalecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em buacutefalos (Bubalus bubalis) no Estado do Paraacute Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 33 n 5 2013 p581-585 ROBERT-GANGNEUX F DARDEacute M L Epidemiology of and diagnostic strategies for toxoplasmosis Clinical Microbiology Reviews v25 n2 2012 p264-296 TENTER A M HECKEROTH A R WEISS L M Toxoplasma gondii from animals to humans International Journal for Parasitology v30 n 12-13 2000 p1217-1258 TENTER A M Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Memoacuterias do Instituto Oswaldo Cruz v 104 2009 p364-369 VITALIANO S N Infecccedilatildeo experimental em carcaraacutes (Caracara plancus MILLER J F 1777) com Toxoplasma gondii (Amostra ME49) 2007 65f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Medicina Veterinaria) ndash Faculdade de Ciecircncias Agraacuterias e Veterinaacuterias Unesp Jaboticabal

36

VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

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52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

33

DUBEY J P A review of toxoplasmosis in wild birds Veterinary Parasitology v106 2002 p121-153 DUBEY J P Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus) prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses Public Helath v57 n1 2010b p60-73 DUBEY J P GRAHAM D H DAHL E HILALIC M EL-GHAYSHC A SREEKUMARA C KWOKA O C H SHENA S K LEHMANN T Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii from chickens and ducks from Egypt Veterinary Parasitology 114 2003 p89-95 DUBEY JP SUNDAR N GENNARI SM MINERVINO AH FARIAS NA RUAS JL SANTOS TR CAVALCANTE GT KWOK OC SU C Biologic and genetic comparison of Toxoplasma gondii isolates in free-range chickens from the northern Paraacute state and the southern state Rio Grande do Sul Brazil revealed highly diverse and distinct parasite populations Veterinary parasitology v 143 n2 2007 p182-188 EL-MASSEY A MAHDY O A EL-GHAYSH A DUBEY JP Prevalence of Toxoplasma gondii antibodies in sera of turkeys chickens and ducks from Egypt Journal of Parasitology 86 2000 p627ndash628 GRANATO C F H JUNIOR I J P Diagnoacutestico Laboratorial da Toxoplasmose In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 p127-135 FERREIRA M U HIRAMOTO R M AURELIANO D P SILVA-NUNES M SILVA N S MALAFRONTE R S MUNIZ P T A Community-based Survey of Human Toxoplasmosis in Rural Amazonia Seroprevalence Seroconversion Rate and Associated Risk Factors The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene v 81 n 1 2009 p 171ndash176 FERRARONI J J REED S G SPEER C A Prevalence of Toxoplasma Antibodies in Humans and Various Animals in the Amazon Proceedings of The Helminthological Society of Washington v47 n1 1980 p148-140 FREITAS J A OLIVEIRA J P RAMOS O S ISHIZUKA M M Frequecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em suiacutenos abatidos sem inspeccedilatildeo em Beleacutem Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia v61 n5 2009 p1230-1232 FRENKEL J K BERMUDEZ J E V Toxoplasmose In VERONESI R FOCACCIO R 4ed Tratado de Infectologia Satildeo Paulo Editora Atheneu 2009 p1793-1809 GARDNER I A GREINER M DUBEY J P Statistical evaluation of test accuracy studies for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health 2010 57 82-94

34

GOIS F D ALMEIDA E C J FARIAS FILHO R V SILVA FILHA O L Estudo preliminar sobre o dimorfismo sexual do pato cinza do catoleacute (Cairina moschata) Actas Iberoamericanas de Conservacioacuten Animal v 2 2012 p95-98 HARFOUSH M TAHOON A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol v40 n2 2010 p295-02 HILL D E DUBEY J P Toxoplasma gondii prevalence in farm animals in the United States International Journal for Parasitology n 43 2013 p107ndash113 IBGE - Instituto Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica Cidades Disponiacutevel em lthttpwwwcidadesibgegovbrxtrasperfilphplang=ampcodmun=150140ampsearch=para|belem|infograficos-informacoes-completasgt Acesso em 21 de fev 2015 JONES J L DUBEY J P Epidemiologia da Toxoplasmose In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P117-126 KAWAZOE U Toxoplasma gondii In NEVES D P MELO A L LINARDI P M VITOR R W A Parasitologia Humana 11ed Satildeo Paulo Editora Atheneu 2005 p163-172 KIM K WEISS L M Toxoplasma the next 100 years Microbes and Infection v 10 2008 p978-984 MAKSIMOVA P BUSCHTOumlNSA S HERRMANNA D C CONRATHSA F J GOumlRLICHB K TENTER A M DUBEY J P NAGEL-KOHLD U THOMS B BOumlTCHER L KUumlHNE M SCHARES G Serological survey and risk factors for Toxoplasma gondii in domestic ducks and geese in Lower Saxony Germany Veterinary Parasitology v182 2011 p140-149 MEIRELES L R Estudos das Fontes de Infecccedilatildeo da Toxoplasmose humana em diferentes localidades do estado de Satildeo Paulo 2001 141f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) - USP 2001 MILLAR P R ALVES F M X TEIXEIRA V Q VICENTE R T MENEZES E M SOBREIRO L G PEREIRA V L A P AMENDOEIRA M R R Occurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 32 n3 2012 p 231-236

MINERVINO A H CASSINELLI A B LIMA J T SOARES HS MALHEIROS A F MARCILI A GENNARI S M Prevalence of Anti-Neospora caninum and Anti-Toxoplasma gondii Antibodies in Dogs From Two Different Indigenous Communities in the Brazilian Amazon Region Journal of Parasitology v 98 n 6 2012 p1276-1278

35

MONTANtildeO P Y CRUZ M A ULLMANN L S LANGONI H BIONDO A W Contato com gatos um fator de risco para a toxoplasmose congecircnita Cliacutenica Veterinaacuteria n 86 p 78-84 2010 NETO O J S Perfil soroepidemioloacutegico e detecccedilatildeo molecular de toxoplasma gondii em gallus gallus e columba livia da Regiatildeo Metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes 2013 89f Tese (Ciecircncia Animal) - Universidade Federal de Goiaacutes 2013 PUVANESUARAN V R NOORDIN R VENUGOPAL BALAKRISHNAN V Isolation and Genotyping of Toxoplasma gondii from Free-Range Ducks in Malaysia AVIAN DISEASES 57 2013 p128ndash132 SANTOS M C F Frequecircncias da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipira e frangos de corte em regiotildees dos Estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba 2012 82f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em ciecircncias bioloacutegicas) ndash Universidade Federal do Rio Grande do Norte Centro de Biociecircncias 2012 SANTOS P S ALBUQUERQUE G R SILVA V M F MARTIN A R MARVULO MFV SOUZA S L P RAGOZO AMA NASCIMENTO CC GENNARI S M DUBEY J P SILVA J C R Seroprevalence of Toxoplasma gondii in free-living Amazon River dolphins (Inia geoffrensis) from central Amazon Brazil Veterinary Parasitology v 183 n 1-2 2011 p 171-173 SILVA A V H LANGONI L The detection of Toxoplasma gondii by comparing cytology histopathology bioassay in mice and the polymerase chain reaction (PCR) Veterinary Parasitology v 97 p 191-198 2001 SILVA J B FONSECA A H ANDRADE S J T SILVA A G M OLIVEIRA C M C BARBOSA J D Prevalecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em buacutefalos (Bubalus bubalis) no Estado do Paraacute Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 33 n 5 2013 p581-585 ROBERT-GANGNEUX F DARDEacute M L Epidemiology of and diagnostic strategies for toxoplasmosis Clinical Microbiology Reviews v25 n2 2012 p264-296 TENTER A M HECKEROTH A R WEISS L M Toxoplasma gondii from animals to humans International Journal for Parasitology v30 n 12-13 2000 p1217-1258 TENTER A M Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Memoacuterias do Instituto Oswaldo Cruz v 104 2009 p364-369 VITALIANO S N Infecccedilatildeo experimental em carcaraacutes (Caracara plancus MILLER J F 1777) com Toxoplasma gondii (Amostra ME49) 2007 65f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Medicina Veterinaria) ndash Faculdade de Ciecircncias Agraacuterias e Veterinaacuterias Unesp Jaboticabal

36

VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

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15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

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32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

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2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

34

GOIS F D ALMEIDA E C J FARIAS FILHO R V SILVA FILHA O L Estudo preliminar sobre o dimorfismo sexual do pato cinza do catoleacute (Cairina moschata) Actas Iberoamericanas de Conservacioacuten Animal v 2 2012 p95-98 HARFOUSH M TAHOON A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol v40 n2 2010 p295-02 HILL D E DUBEY J P Toxoplasma gondii prevalence in farm animals in the United States International Journal for Parasitology n 43 2013 p107ndash113 IBGE - Instituto Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica Cidades Disponiacutevel em lthttpwwwcidadesibgegovbrxtrasperfilphplang=ampcodmun=150140ampsearch=para|belem|infograficos-informacoes-completasgt Acesso em 21 de fev 2015 JONES J L DUBEY J P Epidemiologia da Toxoplasmose In SOUZA W JUNIOR R B Toxoplasmose amp Toxoplasma gondii Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2014 P117-126 KAWAZOE U Toxoplasma gondii In NEVES D P MELO A L LINARDI P M VITOR R W A Parasitologia Humana 11ed Satildeo Paulo Editora Atheneu 2005 p163-172 KIM K WEISS L M Toxoplasma the next 100 years Microbes and Infection v 10 2008 p978-984 MAKSIMOVA P BUSCHTOumlNSA S HERRMANNA D C CONRATHSA F J GOumlRLICHB K TENTER A M DUBEY J P NAGEL-KOHLD U THOMS B BOumlTCHER L KUumlHNE M SCHARES G Serological survey and risk factors for Toxoplasma gondii in domestic ducks and geese in Lower Saxony Germany Veterinary Parasitology v182 2011 p140-149 MEIRELES L R Estudos das Fontes de Infecccedilatildeo da Toxoplasmose humana em diferentes localidades do estado de Satildeo Paulo 2001 141f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Ciecircncias) - USP 2001 MILLAR P R ALVES F M X TEIXEIRA V Q VICENTE R T MENEZES E M SOBREIRO L G PEREIRA V L A P AMENDOEIRA M R R Occurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 32 n3 2012 p 231-236

MINERVINO A H CASSINELLI A B LIMA J T SOARES HS MALHEIROS A F MARCILI A GENNARI S M Prevalence of Anti-Neospora caninum and Anti-Toxoplasma gondii Antibodies in Dogs From Two Different Indigenous Communities in the Brazilian Amazon Region Journal of Parasitology v 98 n 6 2012 p1276-1278

35

MONTANtildeO P Y CRUZ M A ULLMANN L S LANGONI H BIONDO A W Contato com gatos um fator de risco para a toxoplasmose congecircnita Cliacutenica Veterinaacuteria n 86 p 78-84 2010 NETO O J S Perfil soroepidemioloacutegico e detecccedilatildeo molecular de toxoplasma gondii em gallus gallus e columba livia da Regiatildeo Metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes 2013 89f Tese (Ciecircncia Animal) - Universidade Federal de Goiaacutes 2013 PUVANESUARAN V R NOORDIN R VENUGOPAL BALAKRISHNAN V Isolation and Genotyping of Toxoplasma gondii from Free-Range Ducks in Malaysia AVIAN DISEASES 57 2013 p128ndash132 SANTOS M C F Frequecircncias da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipira e frangos de corte em regiotildees dos Estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba 2012 82f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em ciecircncias bioloacutegicas) ndash Universidade Federal do Rio Grande do Norte Centro de Biociecircncias 2012 SANTOS P S ALBUQUERQUE G R SILVA V M F MARTIN A R MARVULO MFV SOUZA S L P RAGOZO AMA NASCIMENTO CC GENNARI S M DUBEY J P SILVA J C R Seroprevalence of Toxoplasma gondii in free-living Amazon River dolphins (Inia geoffrensis) from central Amazon Brazil Veterinary Parasitology v 183 n 1-2 2011 p 171-173 SILVA A V H LANGONI L The detection of Toxoplasma gondii by comparing cytology histopathology bioassay in mice and the polymerase chain reaction (PCR) Veterinary Parasitology v 97 p 191-198 2001 SILVA J B FONSECA A H ANDRADE S J T SILVA A G M OLIVEIRA C M C BARBOSA J D Prevalecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em buacutefalos (Bubalus bubalis) no Estado do Paraacute Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 33 n 5 2013 p581-585 ROBERT-GANGNEUX F DARDEacute M L Epidemiology of and diagnostic strategies for toxoplasmosis Clinical Microbiology Reviews v25 n2 2012 p264-296 TENTER A M HECKEROTH A R WEISS L M Toxoplasma gondii from animals to humans International Journal for Parasitology v30 n 12-13 2000 p1217-1258 TENTER A M Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Memoacuterias do Instituto Oswaldo Cruz v 104 2009 p364-369 VITALIANO S N Infecccedilatildeo experimental em carcaraacutes (Caracara plancus MILLER J F 1777) com Toxoplasma gondii (Amostra ME49) 2007 65f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Medicina Veterinaria) ndash Faculdade de Ciecircncias Agraacuterias e Veterinaacuterias Unesp Jaboticabal

36

VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

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4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

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6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

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48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

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and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

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MONTANtildeO P Y CRUZ M A ULLMANN L S LANGONI H BIONDO A W Contato com gatos um fator de risco para a toxoplasmose congecircnita Cliacutenica Veterinaacuteria n 86 p 78-84 2010 NETO O J S Perfil soroepidemioloacutegico e detecccedilatildeo molecular de toxoplasma gondii em gallus gallus e columba livia da Regiatildeo Metropolitana de Goiacircnia Goiaacutes 2013 89f Tese (Ciecircncia Animal) - Universidade Federal de Goiaacutes 2013 PUVANESUARAN V R NOORDIN R VENUGOPAL BALAKRISHNAN V Isolation and Genotyping of Toxoplasma gondii from Free-Range Ducks in Malaysia AVIAN DISEASES 57 2013 p128ndash132 SANTOS M C F Frequecircncias da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipira e frangos de corte em regiotildees dos Estados do Rio Grande do Norte e Paraiacuteba 2012 82f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em ciecircncias bioloacutegicas) ndash Universidade Federal do Rio Grande do Norte Centro de Biociecircncias 2012 SANTOS P S ALBUQUERQUE G R SILVA V M F MARTIN A R MARVULO MFV SOUZA S L P RAGOZO AMA NASCIMENTO CC GENNARI S M DUBEY J P SILVA J C R Seroprevalence of Toxoplasma gondii in free-living Amazon River dolphins (Inia geoffrensis) from central Amazon Brazil Veterinary Parasitology v 183 n 1-2 2011 p 171-173 SILVA A V H LANGONI L The detection of Toxoplasma gondii by comparing cytology histopathology bioassay in mice and the polymerase chain reaction (PCR) Veterinary Parasitology v 97 p 191-198 2001 SILVA J B FONSECA A H ANDRADE S J T SILVA A G M OLIVEIRA C M C BARBOSA J D Prevalecircncia de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em buacutefalos (Bubalus bubalis) no Estado do Paraacute Pesquisa Veterinaacuteria Brasileira v 33 n 5 2013 p581-585 ROBERT-GANGNEUX F DARDEacute M L Epidemiology of and diagnostic strategies for toxoplasmosis Clinical Microbiology Reviews v25 n2 2012 p264-296 TENTER A M HECKEROTH A R WEISS L M Toxoplasma gondii from animals to humans International Journal for Parasitology v30 n 12-13 2000 p1217-1258 TENTER A M Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Memoacuterias do Instituto Oswaldo Cruz v 104 2009 p364-369 VITALIANO S N Infecccedilatildeo experimental em carcaraacutes (Caracara plancus MILLER J F 1777) com Toxoplasma gondii (Amostra ME49) 2007 65f Dissertaccedilatildeo (Mestrado em Medicina Veterinaria) ndash Faculdade de Ciecircncias Agraacuterias e Veterinaacuterias Unesp Jaboticabal

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VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

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2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

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ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

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semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

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4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

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11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

36

VITALIANO S N Isolamento e caracterizaccedilatildeo bioloacutegica e genotiacutepica de Toxoplasma gondii em animais selvagens do Brasil 2012 101 f Tese (Doutorado em Ciecircncias) ndash Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo YAN C YUE C L YUAN Z G HE Y YIN C C LIN R Q DUBEY J P ZHU X Q Toxoplasma gondii infection in domestic ducks free-range and caged chickens in southern China Veterinary Parasitology v165 2009 p337-340 YANG N MU M LI H LONG M HE J Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern China Parasites amp Vectors v5 n237 2012 p337-340

37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

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30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

37

2 ARTIGO

FREQUEcircNCIA DE ANTICORPOS ANTI-TOXOPLASMA GONDII EM PATOS (CAIRINA MOSCHATA) ABATIDOS NO MUNICIacutePIO DE BELEacuteM PARAacute

BRASIL

Formatado de acordo com as normas da revista ndash Revista Veterinaacuteria e Zootecnia

RESUMO

A infecccedilatildeo causada pelo Toxoplasma gondii eacute uma importante zoonose que possui ampla

distribuiccedilatildeo mundial O T gondii eacute capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e

mamiacuteferos incluindo o homem A soroprevalecircncia da toxoplasmose eacute bastante variada

sendo considerada elevada no Brasil Na regiatildeo Amazocircnica os iacutendices da prevalecircncia em

humanos e animais em geral tendem a ser elevados reflexo das condiccedilotildees ambientais e

epidemioloacutegicas desta regiatildeo as quais favorecem a disseminaccedilatildeo do parasito No estado

do Paraacute o consumo de aves eacute alto em especial os frangos Outro grupo de aves os patos

(Cairina moschata) tambeacutem tem relevacircncia na culinaacuteria local restrita a determinados

periacuteodos do ano Esses animais satildeo criados em localidades rurais principalmente sob o

sistema de semi-confinamento ou livres nas aacutereas de criaccedilatildeo Este estudo teve como

objetivo determinar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii em patos domeacutesticos

encaminhados para abate no municiacutepio de Beleacutem-PA Foram avaliados 172 patos de

ambos os sexos procedentes de trecircs municiacutepios produtores desses animais (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo) submetidos agrave sistemas de criaccedilatildeo semi-intensiva

ou extensiva Amostras de soro dessas aves foram analisadas pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) qualitativa e semiquantitativa para anticorpos anti-T

gondii utilizando como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A frequecircncia obtida de

anticorpos anti-T gondii foi de 1628 (28172) Natildeo houve diferenccedila estatiacutestica quanto

ao sexo das aves no entanto foi observada diferenccedila entre os trecircs municiacutepios e os

sistemas as quais as aves foram criadas sendo presente e maior o risco de infecccedilatildeo entre

as aves criadas em Santa Izabel do Paraacute de modo semi-intensivo e em Capitatildeo Poccedilo

extensivamente Este foi o primeiro registro da frequecircncia de toxoplasmose em patos no

estado do Paraacute que apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para toxoplasmose em humanos

e outros animais aleacutem de indicar a contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram criadas com

oocistos de T gondii principalmente nos municiacutepios de Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo

Poccedilo

Palavras-chave Toxoplasma gondii soroprevalecircncia HAI patos Amazocircnia

FREQUENCY OF ANTI-TOXOPLASMA GONDII ANTIBODIES IN

DUCKS (CAIRINA MOSCHATA) SLAUGHTERED IN BELEacuteM CITY

STATE OF PARAacute BRAZIL

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

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Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

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6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

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Universidade Federal do Paraacute 2001

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66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

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Universidade Federal do Paraacute 2011

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11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

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12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

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49

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desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

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14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

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Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

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21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

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and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

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China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

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northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

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28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

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30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

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2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

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Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

38

ABSTRACT

The infection caused by Toxoplasma gondii is an important zoonosis which has extensive

worldwide distribution T gondii is able to infect various species of birds and mammals

including man The seroprevalence of toxoplasmosis is quite varied and is considered

high in Brazil In the Amazon region the rates of prevalence in humans and animals in

general tend to be high reflecting the environmental and epidemiological conditions of

the region which favor the spread of the parasite In Para state poultry consumption is

high especially chickens Another group of birds the ducks (Cairina moschata) also has

relevance in the local cuisine restricted to certain times of the year These animals are

created in rural areas mainly in the system of semi-confinement or free in the areas of

creation This study aimed to determine the frequency of infection by T gondii in

domestic ducks sent for slaughter in the city of Belem-PA We evaluated 172 ducks of

both genres coming from three producers municipalities of these animals (Castanhal

Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo) submitted to semi-intensive or extensive farming

systems Serum samples from these birds were analyzed by indirect hemagglutination

method (HAI) qualitative and semiquantitative for anti-T gondii using a cut off dilution

of 116 The frequency obtained from anti-T gondii was 1628 (28172) There was no

statistical difference related to the genre of birds however differences were observed

among the three cities and the systems which the birds were created being present and

the greater the risk of infection among birds raised in Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo

Poccedilo semi intensive and extensively mode This was the first record of the frequency of

toxoplasmosis in ducks in Paraacute state which despite being below regional standards

demonstrates the risk of meat from these animals use as a source of infection for

toxoplasmosis in humans and other animals as well as indicating contamination of the

environment where they were created with oocysts of T gondii mainly in the

municipalities of Santa Izabel do Paraacute and Capitatildeo Poccedilo

Keywords Toxoplasma gondii seroprevalence HAI ducks Amazon Region

FRECUENCIA DE ANTICUERPOS ANTI TOXOPLASMA GONDII EN

PATOS (CAIRINA MOSCHATA) DERRIBADOS EN LA CIUDAD DE

BELEacuteM PARAacute BRASIL

RESUMEN

La infeccioacuten causada por Toxoplasma gondii es una zoonosis importante que tiene una

amplia distribucioacuten en todo el mundo El T gondii es capaz de infectar a varias especies

de aves y mamiacuteferos incluyendo el hombre El suero prevalencia de la toxoplasmosis es

muy variado y se considera alta en Brasil En la regioacuten amazoacutenica las tasas de prevalencia

en los seres humanos y animales en general tienden a ser altos lo que refleja las

condiciones ambientales y epidemioloacutegicas de la regioacuten que favorecen la propagacioacuten

del paraacutesito En el estado de Paraacute el consumo de aves en el muy grande especialmente

pollos Otro grupo de las aves los patos (Cairina moschata) tambieacuten tiene relevancia en

la gastronomiacutea local restringido a ciertas eacutepocas del antildeo Estos animales son creados en

las zonas rurales principalmente en el sistema de semi-confinamiento o libres en las aacutereas

de la creacioacuten Este estudio tuvo como objetivo determinar la frecuencia de la infeccioacuten

por T gondii en los patos domeacutesticos enviados para el abate en la ciudad de Beleacutem-PA

Se evaluaron 172 patos de ambos sexos procedentes de tres municipios productores de

estos animales (Castanhal Santa Izabel do Paraacute y Capitatildeo Poccedilo) sometidos a sistemas

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

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em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

39

semi-intensivos o extensivos de cultivo Las muestras de suero de estas aves se analizaron

por el meacutetodo de hemaglutinacioacuten indirecta (HAI) cualitativa y semi cuantitativa para

anti-T gondii utilizando una dilucioacuten de corte de 116 La frecuencia obtenida a partir de

anti-T gondii fue 1628 (28172) No hubo diferencia estadiacutestica en el sexo de las aves

sin embargo se observaron diferencias entre los tres municipios y los sistemas que se

crearon los paacutejaros estando presente y mayor es el riesgo de infeccioacuten entre las aves

criadas en Santa Isabel do Paraacute de modo semi intensivo y en Capitatildeo Poccedilo ampliamente

Este fue el primer registro de la frecuencia de la toxoplasmosis en patos en el estado de

Paraacute que a pesar de estar por debajo de los estaacutendares regionales demuestra el riesgo de

la carne de estos animales que se usan como fuente de infeccioacuten para la toxoplasmosis en

humanos y otros animales asiacute como una indicacioacuten de la contaminacioacuten en el entorno

donde fueron crearon con oocistes de T gondii principalmente en los municipios de

Santa Isabel do Paraacute y en Capitatildeo Poccedilo

Palabras clave Toxoplasma gondii suero prevalencia HAI patos Amazoniacutea

INTRODUCcedilAtildeO A toxoplasmose infecccedilatildeo causada pelo protozoaacuterio intracelular Toxoplasma gondii

eacute zoonose de grande relevacircncia e de ampla distribuiccedilatildeo em todo o mundo O T gondii eacute

capaz de infectar diferentes espeacutecies de aves e mamiacuteferos incluindo o homem (12) Na

cadeia epidemioloacutegica da toxoplasmose os feliacutedeos satildeo os uacutenicos animais que excretam

as formas infectantes do parasito os oocistos no meio ambiente onde sofreratildeo processo

de esporulaccedilatildeo podendo contaminar o solo reservatoacuterios de aacutegua pastagem de animais

hortas e outros alimentos os quais servem como fonte de infecccedilatildeo para humanos e

animais O consumo de carnes ou viacutesceras mal cozidas contendo cistos teciduais do

parasito eacute tambeacutem outra importante via de infecccedilatildeo tanto para homem quanto para outras

espeacutecies carniacutevoras principalmente os gatos (23)

Apesar de ser uma infecccedilatildeo mundialmente difundida a prevalecircncia da toxoplasmose

pode variar entre diferentes regiotildees inclusive dentro de um mesmo paiacutes Poreacutem em geral

eacute mais elevada nas regiotildees tropicais e subtropicais de clima uacutemido e com baixa altitude

que oferecem melhores condiccedilotildees de sobrevivecircncia aos oocistos que podem permanecer

viaacuteveis e infectantes no solo prolongadamente (45)

De um modo geral este agravo evolui de modo assintomaacutetico e autolimitado contudo

dependendo da condiccedilatildeo imunoloacutegica do hospedeiro da virulecircncia da cepa circulante e

da quantidade do inoacuteculo parasitaacuterio pode se manifestar com quadros leves e ateacute de meacutedia

e alta gravidade com comprometimento sistecircmico possibilidade de acometimento ocular

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

40

e neuroloacutegico principalmente em conceptos infectados pela via congecircnita e em

indiviacuteduos imunossuprimidos (6)

A elevada prevalecircncia da toxoplasmose na regiatildeo Amazocircnica com iacutendices em geral

variando de 55 a 70 entre os humanos deve-se agraves condiccedilotildees ambientais e climaacuteticas

bem como agraves caracteriacutesticas higiecircnico-sanitaacuterias e alimentares as quais a populaccedilatildeo estaacute

exposta fatores que reunidos possibilitam importante disseminaccedilatildeo do T gondii

Observa-se elevado consumo de carne principalmente de origem bovina suiacutena e de aves

domeacutesticas e os estudos epidemioloacutegicos regionais tecircm demonstrado que a ingestatildeo

eventual de carne mal cozida pode estar associada com a soropositividade elevada para

anticorpos anti-T gondii na populaccedilatildeo (7 8 9 10)

Na regiatildeo metropolitana de Beleacutem entre as aves domeacutesticas eacute muito comum o

consumo de frangos principalmente os animais de corte criados de forma intensiva em

aviacutecolas da regiatildeo No entanto a importacircncia desses animais em relaccedilatildeo agrave transmissatildeo do

T gondii eacute limitada possivelmente pelas caracteriacutesticas do sistema de criaccedilatildeo e forma

como a carne desses animais eacute consumida normalmente bem cozida (11) Por outro lado

na regiatildeo eacute comum o consumo de frangos criados sem confinamento e de forma artesanal

Nestas aves a frequecircncia de soropositividade eacute alta um indicativo da importante

densidade de oocistos do parasito contaminando o solo onde esses animais satildeo mantidos

o que os torna fontes de infecccedilatildeo humana e de animais carniacutevoros pela possibilidade do

consumo deste tipo de carne eou viacutesceras de forma crua ou mal cozida contendo cistos

do parasito (9)

De acordo com os haacutebitos culturais da populaccedilatildeo nesta regiatildeo eacute comum tambeacutem o

consumo de outro grupo de aves domeacutesticas de produccedilatildeo o pato (Cairina moschata) Ao

contraacuterio do que eacute observado nos frangos de corte disponibilizados para consumo em

Beleacutem os patos encaminhados para abate em geral satildeo criados em condiccedilotildees de semi-

confinamento ou mesmo livre em criaccedilotildees com caracteriacutesticas artesanais Em ambas as

situaccedilotildees devido a falta de incentivo para fomento de projetos de produccedilatildeo dessas aves

na regiatildeo e pela limitadas condiccedilotildees financeiras dos pequenos produtores esses patos

normalmente satildeo mantidos em ambientes com condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas e com

acesso agrave outros animais domeacutesticos principalmente os gatos aumentando dessa forma o

risco de infecccedilatildeo pelo T gondii Essa criaccedilatildeo eacute feita na aacuterea rural principalmente no

nordeste do estado do Paraacute sendo os animais posteriormente encaminhados para abate e

venda em pequenos accedilougues localizados nas feiras-livres das aacutereas urbanas da regiatildeo

metropolitana de Beleacutem (11 12)

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

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15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

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18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

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26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

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30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

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32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

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2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

41

Pela importacircncia do consumo da carne de pato (Cairina moschata) na culinaacuteria

regional e pela alta prevalecircncia de toxoplasmose humana e de outros animais domeacutesticos

na regiatildeo foi realizado um estudo para estimar a frequecircncia da infecccedilatildeo pelo T gondii

em patos domeacutesticos encaminhados para abate na cidade de Beleacutem Paraacute

MATERIAL E MEacuteTODOS Aacuterea de estudo

O estudo foi realizado em uma das principais feiras da cidade de Beleacutem (01deg 26

48 S 48deg 28 08 O) que concentra accedilougues de abates de patos domeacutesticos oriundos de

criadouros da aacuterea rural de trecircs municiacutepios do nordeste do estado do Paraacute (Castanhal -

01deg 17 49 S 47deg 55 19 O Santa Izabel do Paraacute - 01deg 17 55 S 48deg 09 38 O e Capitatildeo

Poccedilo - 01deg 44 47 S 47deg 03 34 O) selecionados por estarem regularmente sob inspeccedilatildeo

sanitaacuteria dos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo

Coleta de Material

Durante as visitas realizadas aos accedilougues definidos como pontos de coleta de

sangue foi utilizado uma ficha protocolar padronizada para obter informaccedilotildees das

variaacuteveis como sexo da ave (macho ou fecircmea) municiacutepio de procedecircncia e sistema de

criaccedilatildeo este classificado como de forma extensiva na qual os animais satildeo criados soltos

e semi-intensiva os quais satildeo provenientes de granjas onde existe um confinamento

parcial das aves

Elegeu-se para coleta de sangue das aves somente os accedilougues onde o abate era

realizado no momento da comercializaccedilatildeo Na plataforma de abate procedeu-se assepsia

da regiatildeo do pescoccedilo das aves e imediatamente apoacutes a secccedilatildeo da veia jugular foi coletado

aproximadamente 5 mL de sangue em tubos sem anticoagulante previamente

identificados com os respectivos registros Apoacutes a coleta de cada ave era tambeacutem

realizada a assepsia da faca utilizada

Apoacutes a coleta as amostras de sangue permaneceram sob refrigeraccedilatildeo em caixa de

isopor com gelo reciclaacutevel ateacute o posterior encaminhamento para o Laboratoacuterio de

Toxoplasmose do Instituto Evandro ChagasSVSMS onde foram centrifugadas (600 x g

ndash 10 minutos) para separaccedilatildeo do soro que foram acondicionados em microtubos plaacutesticos

(1-2 mLtubo) e mantidos sob congelamento (-20degC) ateacute a realizaccedilatildeo dos testes

soroloacutegicos para detecccedilatildeo de anticorpos IgG anti-T gondii

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

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52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

42

Meacutetodo Soroloacutegico

As amostras de soro foram testadas para pesquisa de anticorpos totais anti-T

gondii pelo teste de hemaglutinaccedilatildeo indireta utilizando um kit comercial (Toxo

Hemateste INLAB-Diagnostica) Os testes obedeceram duas etapas 1 Triagem das

amostras pelo meacutetodo qualitativo para definiccedilatildeo das que tinha anticorpos IgG Anti-

Tgondii 2 Quantificaccedilatildeo de anticorpos das amostras que apresentaram positividade

Ambos os meacutetodos foram realizados conforme recomendaccedilotildees do fabricante

Aliacutequotas de 60 microL de cada amostra de soro foram inativadas em banho maria

(56ordmC-30 minutos) Em placas de microtitulaccedilatildeo cada amostra foi diluiacuteda inicialmente na

proporccedilatildeo de 116 em seguida transferidos para uma placa de aglutinaccedilatildeo (fundo em

ldquoVrdquo) (25 microLpoccedilo) onde tambeacutem foram colocados a suspensatildeo de hemaacutecias

sensibilizadas com antiacutegeno de T gondii (25 microLpoccedilo) Foram consideradas reagentes as

amostras que aglutinaram as hemaacutecias formando uma rede ou malha semitransparente

cobrindo o fundo de cada poccedilo da placa Quando tal aglutinaccedilatildeo natildeo ocorria e as hemaacutecias

se depositavam no fundo dos poccedilos formando um botatildeo as amostras foram consideradas

natildeo reagentes

As amostras reagentes foram seriadamente diluiacutedas (116 a 1512) sendo que o

tiacutetulo de cada amostra foi o que apresentou aglutinaccedilatildeo em sua maior diluiccedilatildeo

Em decorrecircncia da inexistecircncia de trabalhos anteriores usando tal metodologia

nesse grupo de aves foi utilizado como ponto de corte a diluiccedilatildeo de 116 A cada teste

realizado serviram como controles os soros referecircncias (negativo e positivo)

disponibilizados pelo kit e amostras de soro de frangos sabidamente reagentes e natildeo

reagentes

Anaacutelise Estatiacutestica

A frequecircncia de anticorpos seacutericos obtida foi analisada em conjunto com as

variaacuteveis investigadas (procedecircncia sistema de criaccedilatildeo e sexo) utilizando o teste G de

Williamns teste de qui quadrado de Pearson e o teste Exato de Fischer Foi realizado

tambeacutem o caacutelculo da razatildeo de chances (Odds ratio) Adotou-se o niacutevel de significacircncia

de 5 e para realizaccedilatildeo dos testes foi utilizado o programa Biostat 50 (13)

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

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6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

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7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

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Universidade Federal do Paraacute 2001

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Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

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9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

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Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

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11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

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13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

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animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

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15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

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from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

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21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

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22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

43

RESULTADOS

Entre agosto de 2015 e janeiro de 2016 foram coletadas amostras de soro de 172

patos encaminhados para abate em Beleacutem sendo 149 machos e 23 fecircmeas As amostras

foram procedentes de trecircs diferentes municiacutepios do Estado assim distribuiacutedos 97 de

Santa Izabel (5640) 47 de Castanhal (2733) 25 de Capitatildeo Poccedilo (1453) e 3

(174) com procedecircncia natildeo informada

Das 172 amostras 28 (1628) foram reagentes para anticorpos IgG anti-T

gondii com tiacutetulos variando de 16 a 128 A distribuiccedilatildeo das aves soropositivas de acordo

com as suas procedecircncias e tiacutetulos de anticorpos estatildeo apresentados na tabela 1

Tabela 1 Distribuiccedilatildeo da frequecircncia de soropositividade (Cairina moschata) para

infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii em patos abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-

PA de acordo com a procedecircncia e tiacutetulos de anticorpos detectados pelo meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta

Procedecircncia Amostras Nordm + () Tiacutetulos

116 132 164 1128

Castanhal 47 - - - - -

Santa Izabel 97 22

(1279)

12 09 01 -

Capitatildeo Poccedilo 25 6 (349) - 03 02 01

NI 3 - - - - -

Total 172 28

(1628)

12 12 03 01

Nordm+ Nuacutemero de soropositivos NI Natildeo informado

Em relaccedilatildeo a procedecircncia observou-se maior frequecircncia de positividade entre as

aves criadas nos municiacutepios de Santa Izabel e Capitatildeo Poccedilo natildeo sendo detectado

nenhuma ave soropositiva entre as oriundas de Castanhal A diferenccedila observada entre os

municiacutepios foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Quanto ao sistema de criaccedilatildeo das aves a frequecircncia de positividade foi maior entre

aquelas criadas em condiccedilotildees de confinamento parcial (semi-intensiva) A diferenccedila

observada em ter os dois sistemas foi estatisticamente significativa (tabela 2)

Jaacute em relaccedilatildeo ao sexo a frequecircncia de soropositividade foi maior entre os machos

poreacutem natildeo houve diferenccedila significante entre os gecircneros (tabela 2)

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

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6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

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48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

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13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

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14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

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15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

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Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

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China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

44

Tabela 2 Frequecircncias absoluta e relativa de reagentes e natildeo reagentes ao meacutetodo de

hemaglutinaccedilatildeo indireta para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii em patos

domeacutesticos (Cairina moschata) abatidos em accedilougues de feira livre Beleacutem-PA segundo

as variaacuteveis epidemioloacutegicas

Hemaglutinaccedilatildeo Indireta para

T gondii

Positivos Negativos Estatiacutesticas

Variaacutevel N N Valor de

P

OR (IC95)

Origem

Castanhal 0 000 47 10000

lt 000011

1

Santa Izabel 22 2268 75 7732 141 (18 ndash

1080)

Capitatildeo Poccedilo 6 2400 19 7600 152 (18 ndash

1344)

Sistema de

criaccedilatildeo

Extensivo 6 833 66 9167 002312 32 (12 ndash 84)

Semi-intensivo 22 2268 75 7732

Sexo

Macho 25 1678 124 8322 077113 13 (04 ndash 49)

Fecircmea 3 1304 20 8696 Obs 1Teste G de Williamns 2Teste de 2 de Pearson 3Teste Exato de Fischer

N Frequecircncia absoluta OR Odds ratio IC intervalo de confianccedila

DISCUSSAtildeO

Entre os animais de produccedilatildeo as aves domeacutesticas satildeo consideradas importantes

hospedeiros na epidemiologia da toxoplasmose Aves em especial as criadas livres de

forma extensiva quando soropositivas podem atuar como fonte de infecccedilatildeo para animais

que coabitam o mesmo local principalmente os gatos e eventualmente o proacuteprio homem

Aleacutem disso podem servir como indicadores de contaminaccedilatildeo ambiental com oocistos de

T gondii devido a suas caracteriacutesticas alimentares que se daacute diretamente no solo (314

15)

A maior parte dos estudos nesse grupo de animais tem sido direcionado aos

galinaacuteceos (Gallus domesticus) (16) sendo ainda limitadas as investigaccedilotildees em outras

espeacutecies de aves como os patos domeacutesticos Diante dessa realidade o presente estudo

foi desenvolvido em um grupo de patos domeacutesticos da espeacutecie Cairina moschata criados

na zona rural e abatidos em feiras livres de Beleacutem estado do Paraacute onde a infecccedilatildeo pelo

T gondii apresenta alta prevalecircncia em humanos e animais (79)

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

45

Utilizando a teacutecnica de hemaglutinaccedilatildeo indireta (HAI) a frequecircncia de positivos

obtida foi de 163 considerada baixa para os padrotildees regionais se comparada agrave

observada em outras espeacutecies de animais domeacutesticos (8 17 18) e agrave obtida em

investigaccedilatildeo claacutessica em um grupo de patos oriundos da cidade de Manaus-AM (400)

que utilizou o mesmo meacutetodo poreacutem com menor nuacutemero de animais apenas quatro aves

(19)

Em relaccedilatildeo a investigaccedilotildees realizadas em outras partes do mundo esta taxa foi

superior agraves observadas principalmente em diferentes localidades da Europa Aacutesia e

Aacutefrica que variou de 57 a 154 (20 21 21 23 24 25 26) tendo ficado abaixo da

taxa encontrada na Polocircnia (212) (27) sendo que neste o nuacutemero de aves avaliadas foi

bem menor (33 animais) que o trabalhado na presente investigaccedilatildeo (172 animais) Eacute

importante ressaltar que em todas essas investigaccedilotildees foram utilizados outros meacutetodos

soroloacutegicos como o meacutetodo de aglutinaccedilatildeo modificada e reaccedilatildeo de imunofluorescecircncia

indireta que tem como fonte antigecircnica antiacutegenos de superfiacutecie de taquizoiacutetos de T

gondii Esses meacutetodos apresentam paracircmetros de sensibilidade eou especificidade

superiores ao meacutetodo HAI que utiliza partiacuteculas antigecircnicas do parasito adsorvidas agraves

hemaacutecias (28 29 30) Tais caracteriacutesticas podem ocasionar resultados falso-negativos

Neste trabalho natildeo houve a possibilidade de comparaccedilatildeo entre a HAI e outros meacutetodos

empregados frequentemente para detecccedilatildeo de anticorpos anti-T gondii Conforme a

literatura apenas um estudo em patos domeacutesticos de uma localidade no Egito foi

realizado empregando a mesma teacutecnica aqui utilizada sendo a soroprevalecircncia observada

de 554 (31)

Algumas variaacuteveis como a procedecircncia das aves sistema de criaccedilatildeo e o sexo

foram analisadas em relaccedilatildeo agrave soropositividade observada Quanto a procedecircncia dos trecircs

municiacutepios que encaminharam aves para abate (Santa Izabel do Paraacute Capitatildeo Poccedilo e

Castanhal) as quais eram criadas em aacutereas rurais com caracteriacutesticas ambientais bastante

semelhantes observou-se diferenccedila significativa entre eles inclusive natildeo sendo

registrado aves soropositivas em Castanhal Poreacutem essa diferenccedila natildeo era esperada jaacute

que aspectos ecoloacutegicos e geograacuteficos de aacutereas rurais em geral podem favorecer a

infecccedilatildeo pelo T gondii (31) No entanto eacute importante salientar que as caracteriacutesticas de

criaccedilatildeo apesar de natildeo serem consideradas ideais eram mais adequadas em Castanhal do

que nos outros municiacutepios onde a exposiccedilatildeo dessas aves com possiacuteveis fatores de risco

era mais provaacutevel principalmente no que tange a presenccedila de gatos nos arredores um

fator plausiacutevel jaacute evidenciado em estudos com frangos (32)

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

46

A possiacutevel influecircncia da forma como essas aves satildeo criadas na frequecircncia de

anticorpos obtida eacute corroborada na anaacutelise feita em relaccedilatildeo ao sistema de criaccedilatildeo das

mesmas No presente estudo observou-se diferenccedila significativa entre as aves mantidas

sob confinamento parcial (criaccedilatildeo semi-intensiva) e sem confinamento (criaccedilatildeo

extensiva) sendo que neste uacuteltimo o risco de infecccedilatildeo das aves foi aproximadamente trecircs

vezes maior Estudos em aves de corte inclusive na regiatildeo metropolitana de Beleacutem

mostram que animais mantidos sob criaccedilatildeo intensiva em ambientes com alimentaccedilatildeo

controlada e isolados quanto ao contato com insetos roedores e gatos o risco de infecccedilatildeo

eacute quase nulo (1134) Contudo em sistemas de criaccedilatildeo extensiva esse risco eacute muito maior

fato observado por outros autores investigando frangos criados livres e dessa forma

expostos a fatores de risco como solo eou aacutegua contaminada com oocistos (14 33 35)

No entanto essas consideraccedilotildees devem ser cuidadosamente interpretadas visto que

observou-se positividade em animais oriundos de granjas com sistema semi-intensivo de

criaccedilatildeo Nestas granjas percebeu-se exposiccedilatildeo dos patos a fatores de risco para a

infecccedilatildeo tanto nas aacutereas onde eles permaneciam soltos quanto nos locais onde eram

confinados em determinados periacuteodos Nestes locais por serem desprotegidos ou

apresentarem condiccedilotildees sanitaacuterias limitadas os animais poderiam estar em contato

eventual com insetos e mesmo gatos aumentando as chances de infecccedilatildeo pelo T gondii

Corroborando tal possibilidade Kijlstra et al (2004) (36) relataram que em

algumas localidades da Europa onde animais de produccedilatildeo incluindo as aves que ateacute

entatildeo eram criados em confinamento total e sob rigorosas condiccedilotildees sanitaacuterias aos

poucos vem sendo submetidos agrave condiccedilotildees de semi-confinamento Dessa forma esses

animais acabam entrando em contato com formas infectantes do parasito tornando-se

fontes de infecccedilatildeo para humanos e outros animais

Outro aspecto a ser considerado e que pode influenciar na variaccedilatildeo da positividade

dessas aves seriam as condiccedilotildees climaacuteticas favorecendo a infecccedilatildeo dessas aves na regiatildeo

sejam elas criadas livres ou semi-confinadas Estudo feito por Yang et al (2012) (23) que

analisou a soropositividade para toxoplasmose em patos de criaccedilatildeo livres e confinados

na China revelaram natildeo ter diferenccedila significativa de positividade entre os patos de

criaccedilatildeo livre e enclausurados Neste caso os autores mencionaram que o clima frio e seco

da regiatildeo estudada natildeo favorecia a sobrevivecircncia de oocistos de T gondii por longos

periacuteodos no solo

Em relaccedilatildeo ao sexo dos patos investigados apesar de ligeiro predomiacutenio de patos

machos soropositivos natildeo houve diferenccedila significativa entre ambos os sexos Deve-se

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

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Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

47

ressaltar no entanto que houve um predomiacutenio de animais machos neste estudo isto se

deve ao fato de essas aves (Cairina moschata) por apresentarem dimorfismo sexual

quanto ao seu tamanho com os machos sendo maiores que as fecircmeas satildeo os mais visados

para o corte por fornecerem maior quantidade de carne (37)

A baixa prevalecircncia observada e a forma como a carne desses animais eacute

consumida em geral bem cozida pode ser um indicativo de que natildeo ocorra relaccedilatildeo do

consumo destas aves com as altas taxas de prevalecircncia de toxoplasmose observada na

populaccedilatildeo paraense Contudo viacutesceras cruas desses animais podem ser importantes

fontes de infecccedilatildeo para outros animais domeacutesticos principalmente os gatos

CONCLUSOtildeES

O presente estudo eacute o primeiro registro a respeito da frequecircncia de reagentes para

a infecccedilatildeo toxoplaacutesmica em patos (Cairina moschata) no estado do Paraacute e o segundo na

Amazocircnia A frequecircncia de positividade obtida em um grupo de animais abatidos e

comercializados nas feiras de Beleacutem-PA foi de 1628 e esteve associada com o manejo

de criaccedilatildeo sendo maior o risco de infecccedilatildeo entre as aves criadas extensivamente e com

os seus municiacutepios de origem sendo Santa Izabel do Paraacute e Capitatildeo Poccedilo os locais onde

foram observadas aves soropositivas

Esta frequumlecircncia apesar de estar abaixo dos padrotildees regionais demonstra o risco do

consumo da carne desses animais como fonte de infecccedilatildeo para Toxoplasma em humanos

e outros animais Aleacutem disso eacute um indicativo da contaminaccedilatildeo do ambiente onde foram

criadas com oocistos de T gondii Assim sugere-se a expansatildeo dessa investigaccedilatildeo para

outras aacutereas de criaccedilatildeo no estado do Paraacute incluindo a avaliaccedilatildeo soroloacutegica com outras

metodologias e o possiacutevel isolamento e caracterizaccedilatildeo de cepas de T gondii nos tecidos

desses animais visando o melhor entendimento do papel dessas aves na epidemiologia

da toxoplasmose na regiatildeo

Agradecimentos

Aos proprietaacuterios dos accedilougues e produtores de patos que concordaram em

colaborar com o estudo A CAPES pela bolsa de poacutes graduaccedilatildeo (mestrado) concedida

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

48

REFEREcircNCIAS

1 Jones JL Dubey JP Foodborne toxoplasmosisClin Infect Dis 2012 55(6) 845-

51

2 Tenter AM Toxoplasma gondii in animals used for human consumption Mem

Inst Oswaldo Cruz 2009 104(2) 364-9

3 Dubey JP Jones JL Toxoplasma gondii infection in humans and animals in the

United States Int J Parasitol 2008 38 1257-78

4 Robert-Gangneux F Dardeacute ML Epidemiology of and diagnostic strategies for

toxoplasmosis Clin Microbiol Rev 2012 25(2) 264-96

5 Flegr J Prandota J Sovickovaacute M Israili ZH Toxoplasmosis-a global threat

Correlation of latent toxoplasmosis with specific disease burden in a set of 88

countries PLoS One 2014 9(3)e90203 1-22

6 Weiss LM Dubey JP Toxoplasmosis A history of clinical observations Int J

Parasitol 2009 39(8) 895-01

7 Bichara CNC Perfil soroepidemioloacutegico da toxoplasmose humana na Aacuterea

Metropolitana de BeleacutemPA ndash A experiecircncia do Serviccedilo de Parasitologia do

Instituto Evandro Chagas [Dissertaccedilatildeo] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2001

8 Carmo EL Poacutevoa MM Monteiro NS Marinho RR Nascimento JM Freitas SN

Bichara CNC Surto de toxoplasmose humana no distrito de Monte Dourado

municiacutepio de Almeirim Paraacute Brasil Rev Pan-Amazocircnica Sauacutede 2010 1(1) 61-

66

9 Carmo EL Aspectos epidemioloacutegicos da toxoplasmose na regiatildeo metropolitana

de Beleacutem Paraacute Brasil [Tese] Beleacutem Instituto de Ciecircncias Bioloacutegicas

Universidade Federal do Paraacute 2011

10 Vitaliano SN Mendonccedila GM Sandres FA Camargo JS Tarso P Basano AS et

al Epidemiological aspects of Toxoplasma gondii infection in riverside

communities in the Southern Brazilian Amazon Rev Soc Bras Med Trop 2015

48(3) 301-6

11 Barbosa SAA Nishi S freitas JA Pesquisa de anticorpos anti-T gondii em

frangos de corte abatidos para consumo Bioloacutegico 2015 77(1)7-9

12 Barbosa FBC Falesi IC Modernizaccedilatildeo da agricultura e desenvolvimento do Paraacute

Beleacutem 2011 [cited 2016 mar 02] Available from

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

49

httpwwwipadescombrpublicacoesmodernizacao-da-agricultura-

desenvolvimento-do-parapdf

13 Ayres M Ayres Jr M Ayres DL Santos DL BioEstat 50-Aplicaccedilotildees estatiacutesticas

nas aacutereas das ciecircncias bioloacutegicas e meacutedicas Beleacutem-Pa Sociedade Ciacutevil

Mamirauaacute 2007

14 Millar PR Sobreiro LG Bonna ICF Amendoeira MRR A importacircncia dos

animais de produccedilatildeo na infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii no Brasil Semina 2008

29(3) 693-06

15 Beltrame MAV Pena HFJ Tona NC Linoa AJB Gennari SM Dubey JP Pereira

FEL Seroprevalnce and isolation of Toxoplasma gondii from free-range chickens

from Espiacuterito Santo state southeastern Brazil Vet Parasitol 2012 188 225-30

16 Dubey JP Toxoplasma gondii infections in chickens (Gallus domesticus)

prevalence clinical disease diagnosis and public health significance Zoonoses

Public Helath 2010 57(1) 60-73

17 Dubey JP Gennari SM Labruna MB Camargo LM Vianna MC Marcel PL

Lehmann T Characterization of Toxoplasma gondii isolates in free-range

chickens from Amazon Brazil J Parasitol 2006 92(1) 36-40

18 Minervino AH Cassinelli AB Lima JT Soares HS Malheiros AF Marcili A

Gennari SM Prevalence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii

in dogs from two different indigenous communities in the Brazilian Amazon

Region J Parasitol 2012 98(6) 1276-8

19 Ferraroni JJ Marzochi MCA Prevalecircncia da infecccedilatildeo pelo Toxoplasma gondii

em animais domeacutesticos silvestres e grupamentos humanos da Amazocircnia Mem

Inst Oswaldo Cruz 1980 75(1-2) 99-09

20 Zia-Ali N Fazaeli A Khoramizadeh M Ajzenberg D Dardeacute M Keshavarz-

Valian H Isolation and molecular characterization of Toxoplasma gondii strains

from different hosts in Iran Parasitol Res 2007 101(1) 111-5

21 Baacutertovaacute E Sedlaacutek K Literaacutek I Serologic survey for toxoplasmosis in domestic

birds from the Czech Republic Avian Pathol 2009 38(4) 317-320

22 Maksimov P Buschtoumlns S Herrmann DC Conraths FJ Goumlrlich K Tenter AM et

al Serological survey and risk factors fro Toxoplasma gondii in domestic ducks

and geese in Lower Saxony Germany Vet Parasitol 2011 182(2-4) 140-9

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

50

23 Yang N Mu M Li H Long M He J Seroprevalence of Toxoplasma gondii

infection in slaughtered chickens ducks and geese in Shenyang northeastern

China Parasite Vector 2012 5 237

24 Puvanesuaran VR Noordin R Balakrishnan V Isolations and genotyping of

Toxoplasma gondii fom free-range ducks in Malaysia 2013 57(1) 128-32

25 Cong W Huang S Zhou D Xu M Wu S Yan C et al First report of

Toxoplasma gondii infection in market-sold adult chickens ducks and pigeons in

northwest China Parasite Vector 2012 5 110

26 Zhao G Song Z Wang S Hassan IA Wang W Cheng F Yang X A

seroepidemiological survey of toxoplasma gondii infection in free-range and

caged Ducks ins Southwest China Isr J Vet Med 2015 70(4) 41-5

27 Sroka J Woacutejcik-Fatla A Szymanska J Zajac V Wolinski J The occurrence of

Toxoplasma gondii infection in people and animals from rural environment of

Lublin Region ndash Estimate of potential role of water as a source of infection Ann

Agric Environ Med 2010 17 125-132

28 Silva AV Silva RC Zamprogna TO Lucas TM Toxoplasma gondii em suiacutenos

com ecircnfase na contribuiccedilatildeo brasileira Sci Med (Porto Alegre) 2010 20(1) 120-

30

29 Dubey JP Toxoplasmosis of Animals and Humans Boca Raton Florida USA

CRC Press 2010

30 Gardner IA Greiner M Dubey JP Statistical evaluation of test accuracy studies

for Toxoplasma gondii in food animal intermediate hosts Zoonoses Public Health

2010 57 82-94

31 Harfoush M Tahoon A Seroprevalence of Toxoplasma gondii antibodies in

domestic ducks free-range chickens turkeys and rabbits in Kafr El-Sheikh

Governorate Egypt J Egypt Soc Parasitol 2010 40(2) 295-02

32 Afonso E Germain E Poulle M Ruette S Devillard S Ludovic S et al

Environmental determinants of spatial and temporal variations in the transmission

of toxoplasma gondii in its definitive hosts Int J Parasitol Parasites Wildl 2013

2 278-85

33 Millar PR Alves FMX Teixeira VQ Vicente RT Menezes EM Sobreiro LG et

al Ocuurrence of infection with Toxoplasma gondii and factors associated with

transmission in broiler chickens and laying hens in different raising systems Pesq

Vet Bras 2012 32(3) 231-6

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

wwwuepabrpaginaspcambientais

51

34 Santos MCF Frequecircncia da infecccedilatildeo por Toxoplasma gondii em galinhas caipiras

e frangos de corte em regiotildees dos estados do Rio Grande do Norte e Paraiba

[Dissertaccedilatildeo] Centro de Biociecircncias Universidade Federal do Rio Grande do

Norte 2012

35 Oliveira LN Costa Juacutenior LM Melo CF Ramos Silva JC Bevilaqua CM

Azevedo SS et al J Parasitol 2009 95(1) 235-7

36 Kijlstra A Meerburg BG Mul MF Animal-friendly production systems may

cause re-emergence of Toxoplasma gondii NJAS 2004 52(2) 119-32

37 Oguntunji AO Ayorinde KL Sexual size dimorphism and sex determination by

morphometric measurements in locally adapted muscovy duck (Cairina

moschata) in Nigeria Acta Agric Slov 2009 235-7

52

3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

53

ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

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3 CONCLUSAtildeO GERAL

O presente estudo detectou atraveacutes do teste soroloacutegico de HAI a presenccedila

de anticorpos anti-T gondii em amostras de soro provenientes da espeacutecie de

pato do mato Cairina moschata constatando a existecircncia de infecccedilatildeo desta ave

na regiatildeo com 1628 (28172) de reatividade na titulaccedilatildeo de 116

Estas aves satildeo procedentes de aacutereas rurais tendo destaque neste estudo

3 municiacutepios Capitatildeo Poccedilo Castanhal e Santa Izabel

Provavelmente o consumo da carne de pato Cairina moschata natildeo tem

impacto na prevalecircncia da toxoplasmose na aacuterea estudada pois seu consumo e

o modo de preparo geralmente tem importante cocccedilatildeo

Ainda assim como medida profilaacutetica quanto ao risco potencial de

infecccedilatildeo por T gondii pelo consumo de carne de pato julga-se que accedilotildees de

Vigilacircncia Sanitaacuteria devem ser mantidas tanto no local de abate mas sobretudo

nos locais de criaccedilatildeo reduzir a chance do contato destas aves com oocistos de

felinos que se encontrem nos arredores dos locais de confinamento

Sugere-se ainda adoccedilatildeo de medidas de higiene e uso de equipamentos

de proteccedilatildeo tanto de profissionais quanto de consumidores durante o processo

de evisceraccedilatildeo e manuseio da carne para reduzir o risco de infecccedilatildeo nesta

etapa

A escassez de estudos sobre o Cairina moschata registrado na literatura

e a ausecircncia de pesquisas sobre a infecccedilatildeo de toxoplasmose nesta espeacutecie de

ave mostram a necessidade de mais estudos

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ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

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ANEXOS

ANEXO A

54

ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

56

APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

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ANEXO B

Normas da Revista veterinaacuteria e zootecnia

Diretrizes para Autores

Artigos Cientiacutefico

Devem ser estruturados de acordo com os seguintes itens 1 Paacutegina de rosto com Tiacutetulo do trabalho em portuguecircs em inglecircs e em espanhol fonte Times New Roman tamanho 12 com espaccedilamento simples em negrito e centralizado em letra maiuacutescula Quando necessaacuterio indicar a entidade financiadora da pesquisa como primeira chamada de rodapeacute Em caso de envolvimento de seres humanos ou animais de experimentaccedilatildeo encaminhar o parecer da Comissatildeo de Eacutetica ou equivalente assinalando no trabalho antes das referecircncias a data de aprovaccedilatildeo 2 Paacutegina com resumo abstract e resumen Tanto o resumo como o abstract e o resumen devem ser seguidos do tiacutetulo do trabalho no respectivo idioma e conter no maacuteximo 400 palavras cada um com informaccedilotildees referentes agrave introduccedilatildeo metodologia resultados e conclusotildees O texto deve ser justificado e digitado em paraacutegrafo uacutenico e espaccedilo simples comeccedilando por RESUMO O abstract e o resumen devem ser traduccedilatildeo fiel do resumo Independente da liacutengua em que o artigo for apresentado deveraacute conter o resumo em portuguecircs inglecircs e espanhol Devem conter no maacuteximo cinco palavras-chave keywords e palabras clave que identifiquem o conteuacutedo do texto 3 A estrutura do artigo deveraacute conter Introduccedilatildeo Deve ser clara objetiva e relacionada ao problema investigado e agrave literatura pertinente bem como aos objetivos da pesquisa A introduccedilatildeo estabelece os objetivos do trabalho Material e Meacutetodos Deve oferecer informaccedilotildees de reprodutibilidade da pesquisa de forma clara e concisa como variaacuteveis populaccedilatildeo amostra equipamentos e meacutetodos utilizados inclusive os estatiacutesticos Resultados Apresentaccedilatildeo dos resultados obtidos que devem ser descritos sem interpretaccedilotildees e comparaccedilotildees Poderaacute ser sob a forma de tabelas no maacuteximo de cinco ordenadas em algarismos araacutebicos e encabeccediladas pelo tiacutetulo de acordo com as normas de apresentaccedilatildeo tabular da ABNTWBR 60232000 da Associaccedilatildeo Brasileira de Normas Teacutecnicas identificadas no texto como Tabela sob a forma de figuras nos casos de graacuteficos fotografias desenhos mapas etc ordenadas em algarismos araacutebicos ateacute no maacuteximo de seis e citadas no texto como Figura Discussatildeo Deve ser entendida como a interpretaccedilatildeo dos resultados confrontando com a literatura pertinente apresentada na introduccedilatildeo Se julgar conveniente os resultados e a discussatildeo poderatildeo ser apresentados conjuntamente

55

Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

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APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

Universidade do Estado do Paraacute Centro de Ciecircncias Naturais e Tecnologia

Programa de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Ciecircncias Ambientais ndash Mestrado Tv Eneacuteas Pinheiro 2626 Marco Beleacutem-PA CEP 66095-100

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Conclusotildees Eacute a siacutentese final fundamentada nos resultados e na discussatildeo Referecircncias Devem ser apresentadas de acordo com as normas Vancouver (httpwwwicmjeorg) Deveratildeo ser editorados em Microsoft Word for Windows para ediccedilatildeo de textos Excel (qualquer versatildeo) para graacuteficos formato JPEG ou GIF (imagem) para fotografias desenhos e mapas formato A4 (210 x 297 cm) em espaccedilo simples mantendo margens de 25 cm nas laterais no topo e peacute de cada paacutegina fonte Times New Roman tamanho 12 e numeraccedilatildeo consecutiva das paacuteginas em algarismos araacutebicos a partir da folha de identificaccedilatildeo Deveratildeo tambeacutem apresentar numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina Ilustraccedilotildees e legendas devem ser apresentadas no decorrer do texto Natildeo seratildeo fornecidas separatas Os artigos estaratildeo disponiacuteveis no formato PDF no endereccedilo eletrocircnico da revista Para as demais seccedilotildees da revista satildeo vaacutelidas as normas anteriores Natildeo devem exceder a 15 paacuteginas Abreviaturas natildeo usuais devem ser empregadas apoacutes escritas por extenso na primeira utilizaccedilatildeo

Condiccedilotildees para submissatildeo

Como parte do processo de submissatildeo os autores satildeo obrigados a verificar a conformidade da submissatildeo em relaccedilatildeo a todos os itens listados a seguir As submissotildees que natildeo estiverem de acordo com as normas seratildeo devolvidas aos autores

1 A contribuiccedilatildeo eacute original e ineacutedita e natildeo estaacute sendo avaliada para publicaccedilatildeo por outra revista caso contraacuterio deve-se justificar em Comentaacuterios ao Editorrdquo

2 Os arquivos para submissatildeo estatildeo em formato Microsoft Word com numeraccedilatildeo nas linhas reiniciando a contagem a cada nova paacutegina

3 URLs para as referecircncias foram informadas quando necessaacuterio 4 O texto estaacute em espaccedilo simples usa uma fonte de 12-pontos emprega

itaacutelico em vez de sublinhado (exceto em endereccedilos URL) as figuras e tabelas estatildeo inseridas no texto natildeo no final do documento como anexos

5 O texto segue os padrotildees de estilo e requisitos bibliograacuteficos descritos em Diretrizes para Autores na seccedilatildeo Sobre a Revista

6 A identificaccedilatildeo de autoria do trabalho foi removida do arquivo e da opccedilatildeo Propriedades no Word garantindo desta forma o criteacuterio de sigilo da revista conforme instruccedilotildees disponiacuteveis em Assegurando a Avaliaccedilatildeo Cega por Pares O nome dos autores e suas filiaccedilotildees estatildeo devidamente preenchidos em metadadosrdquo

Declaraccedilatildeo de direito autoral

Pelo presente instrumento concedemos os direitos autorais referente ao trabalho submetido para a possiacutevel publicaccedilatildeo na Revista Veterinaacuteria e Zootecnia da Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia da UNESP - Botucatu ndash SP

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APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

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APENDICE 1

FICHA DE REGISTRO ANIMAL

NUacuteMERO DA AMOSTRA DATA DA COLETA LOCAL 1 Pato ( ) Sim ( ) Natildeo 2 Espeacutecie________________

3 Abatido no momento da coleta ( ) Sim ( ) Natildeo 4 Foi possiacutevel obter informaccedilotildees da procedecircncia ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo em Beleacutem ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo no Paraacute fora de Beleacutem ( ) Sim Onde____________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo de outro estado ( ) Sim Onde___________ ( ) Natildeo Criaccedilatildeo industrial (Granja) ( ) Sim ( ) Natildeo Criaccedilatildeo caseira ( ) Sim ( ) Natildeo 5 Sorologia IgG Anti-T gondii ( ) Positiva ( ) Negativa

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