UNIVERSIDADE ESTADUAL DO CEARÁ FACULDADE DE VETERINÁRIA BIOTECNOLOGIA DA REPRODUÇÃO ANIMAL

Criopreservação do sêmen

Vicente José de F. Freitas Laboratório de Fisiologia e Controle da Reprodução www.uece.br/lfcr

Plano de Aula

• Apresentar os conceitos e importância da realização da

técnica.

• Apresentar os diferentes tipos de conservação do sêmen

com manipulação da temperatura.

• Apresentar considerações finais sobre o tema

Conceitos • A criopreservação do sêmen busca a suspensão do

metabolismo espermático e a manutenção de suas características por um período de tempo prolongado.

• O sucesso da criopreservação do sêmen depende da m a n u t e n ç ã o d o p o t e n c i a l f e c u n d a n t e d o s espermatozoides, os quais devem apresentar integridade e funcionalidade das diferentes estruturas celulares.

Conceitos A p ó s a c r i o p r e s e r v a ç ã o , o s espermatozoides devem manter a integridade... a) do flagelo: garantir produção de ATP e motilidade, b) do núcleo: manter estável o armazenamento de DNA. c) do acrossomo: manter o poder fecundante e d) da superfície do segmento equatorial: ocorrer a ligação com o oócito.

Tipos de criopreservação do sêmen • Resfriamento:

•  Temperaturas entre 4 a 15º C •  Tempo de conservação curto: cerca de 48 h.

• Congelação: •  Realizar curva de descida da temperatura. •  Temperatura de -35º C. •  Conservação em nitrogênio líquido: -196º C. •  Tempo de conservação: indefinido.

Resfriamento do sêmen • Etapas:

•  Colheita, •  Avaliação, •  Diluição/Extensão, •  Resfriamento, •  Conservação.

• Desvantagens: •  Curto período de manutenção da viabilidade do sêmen. •  Perda das principais características da criopreservação:

•  Vencer tempo e espaço.

Congelação do sêmen • Etapas:

•  Colheita, •  Avaliação, •  1ª Diluição/Extensão, •  Resfriamento, •  2ª Diluição/Extensão (uso de crioprotetores eficientes). •  Congelação. •  Conservação.

• Observações: •  Uso de crioprotetores visando minimizar os danos causados pelo

choque frio, formação de cristais de gelo e desidratação celular.

Crioprotetores • Classificação:

•  Penetrantes e não penetrantes. •  De acordo com a capacidade em atravessar a membrana

plasmática.

• Penetrantes: •  Moléculas pequenas. •  Glicerol, etilenoglicol, propilenoglicol, propanodiol, dimetilsulfóxido

(DMSO).

• Não penetrantes: •  Proteínas (gema de ovo, leite desnatado). •  Açucares (frutose, glicose). •  Polímeros sintéticos (polivinilpirrolidona).

Diferenças entre espécies • De acordo com a espécie utilizada serão encontradas

diferenças na composição dos diluidores/extensores e tipo de crioprotetor.

Considerações • O método de criopreservação escolhido dependerá do

uso do sêmen (manutenção curta ou longa).

• A congelação, devido suas vantagens é de longe o método mais recomendado.

• Diferenças entre a fisiologia seminal das espécies podem interferir no tipo de crioprotetor utilizado.