Post on 17-Apr-2015
Determinação de Determinação de cloroacetaldeído em plasma cloroacetaldeído em plasma por HPLC com detecção por por HPLC com detecção por
fluorescênciafluorescência
ClOCl Cl
Cl n
ClPVC
Cl
Angiosarcoma hepático
O cloreto de vinila é um importante precursor químico usado na indústria de plástico PVC (embalagens, tubulações, cartões de crédito, interior de automóveis, etc.)
Guengerich, F.P. (1992) Chem. Res. Toxicol., 5, 2-5.
XP450
haleto de vinila
XO
halooxirano
N
N
O
NH2
O
dR
+
- X-
N
N
O
NH2
dR - H+
- H2ON
N
O
N
dR
3,N4--dCyd
XO
haloacetaldeído
N
N
O
NH2
dR
N
N
O
NH
X
OH
dR
- X-
N
N
O
NH
OH
dR
- H2O
N
N
O
N
dR
+- H+
N
N
O
N
dR
3,N4--dCyd
dR= 2’-desoxirribose
NN
NN
O
N
dR
N2,3--dGuo
NN
NN
N
dR
1,N6--dAdo
NN
NN
O
N
1,N2--dGuo
dR
N
N
O
N
dR
3,N4--dCyd
Carcinógenos
Cloreto de vinilaCl
H
H
H
Carbamato de etila (uretano)
CH3 O
O
NH2
P450CH2 O
O
NH2
Carbamato de vinila
dR= 2’-desoxirribose
Pandya, G.A. e Moriya, M (1996) Biochemistry, 35, 11487 - 11492; Moriya, M. et al. (1994) Biochemistry, 91, 11899 – 11903.
dR= 2’-desoxirribose
GTransição
TransversãoT e C
TTransição
TransversãoAN
N
O
N
dR
3,N4-dC
NN
NN
N
dR
1,N6-dA
Singer, B. et al. (1987) Carcinogenesis, 8, 745 - 747; Cheng e, K.C. et al. (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, 9974 - 9978. Langouët, S. et al. (1997), Biochemistry, 36, 6069 – 6079 e. (1998), Biochemistry, 37, 5184 - 5193.
dR= 2’-desoxirribose
ATransição
ATransição
TransversãoT
NN
NN
O
N
dR
N2,3--dGuo
NN
NN
O
N
1,N2--dGuo
dR
Bartsch, H. et al. (1994) Drug Metabol. Rev., 26, 349 - 371.
• Ativação do protooncogene Ki-ras
por substituições:
GC AT na base 2 do codon 13 ou
GC TA na base 2 do codon 12
Angiosarcoma hepático
Humano
Cloreto de vinila
Cl
H
H
H+
Análises ToxicológicasAnálises Toxicológicas
Necessidade de uso de ferramentas da Química Analítica (métodos específicos, precisos e suficientemente sensíveis) para a avaliação qualitativa e/ou quantitativa do toxicante.
Detecção de algum parâmetro relacionado à Detecção de algum parâmetro relacionado à exposição ao toxicante em substratos tais exposição ao toxicante em substratos tais como fluidos e/ou tecidos orgânicos com o como fluidos e/ou tecidos orgânicos com o objetivo de diagnosticar as intoxicações.objetivo de diagnosticar as intoxicações.
Desafios em Toxicologia Desafios em Toxicologia AnalíticaAnalítica
Substância de interesse é conhecida ?Substância de interesse é conhecida ?
Amostra a ser analisada : matriz Amostra a ser analisada : matriz complexa na qual a substância de complexa na qual a substância de interesse pode estar presente.interesse pode estar presente.
Métodos que permitam a separação entre a substância de interesse e a matriz na qual ela se encontra dissolvida precisam ser utilizados.
Desafios em Toxicologia Desafios em Toxicologia AnalíticaAnalítica
Métodos de Preparo da Métodos de Preparo da AmostraAmostra
Aquecimento da amostra - Aquecimento da amostra - “Headspace”“Headspace”
Técnicas de digestãoTécnicas de digestão Extração líquido - líquidoExtração líquido - líquido Extração de fase - sólidaExtração de fase - sólida Microextração de fase - sólidaMicroextração de fase - sólida DerivatizaçãoDerivatização
Métodos de AnáliseMétodos de Análise
Permitem a detecção, identificação e, na Permitem a detecção, identificação e, na maioria das vezes, a quantificação da maioria das vezes, a quantificação da substância de interesse.substância de interesse.
Métodos de AnáliseMétodos de Análise
Espectrofotometria Espectrofotometria ((UV/VISUV/VIS))
Espectrometria de Absorção Espectrometria de Absorção AtômicaAtômica
Cromatografia em Camada DelgadaCromatografia em Camada Delgada
Cromatografia Gasosa - FID, ECD, Cromatografia Gasosa - FID, ECD, MSMS
HPLC - UV/VIS, Fluorescência, MSHPLC - UV/VIS, Fluorescência, MS
Cromatografia em fluido supercríticoCromatografia em fluido supercrítico
Eletroforese CapilarEletroforese Capilar
Substâncias Orgânicas Pouco ou Substâncias Orgânicas Pouco ou Não Voláteis Não Voláteis
Cromatografia em camada delgada ou HPLC
Homogeneização, diluição, desproteinização.
Extração líquido-líquido ou extração de fase sólida.
Análise por cromatografia em camada delgada e/ou HPLC acoplado a um detector UV, de fluorescência e/ou um espectrômetro de massa (ionização por electrospray).
Cromatografia Líquida de Alta Cromatografia Líquida de Alta Eficiência Eficiência