SEMINÁRIO:

TRÁFEGO DE MEMBRANAS E ACIDIFICAÇÃO VESICULAR EM JUNÇÃO

NEUROMUSCULAR DE RÃ

Aluna: Luciana Ferreira Leite

Orientadora: Profª. Dra. Cristina Guatimosim Fonseca

Laboratório de Biologia da Neurotransmissão

ASPECTOS BÁSICOS DA NEUROTRANSMISSÃO

http://academic.wsc.edu/faculty/jatodd1/351/ch6outline.html

Ca++

ASPECTOS BÁSICOS DA NEUROTRANSMISSÃO

Abreu, B.J.

ASPECTOS BÁSICOS DA NEUROTRANSMISSÃO

http://www.standford.edu/group/Urchin/GIFS/exocyt.gifhttp://thalamus.wustl.edu/nonetlab/ResearchF/svcycle.html

ASPECTOS BÁSICOS DA NEUROTRANSMISSÃO

http://www.erin.utoronto.ca/~w3bio315/RME.htm

http://www.neuro.ki.se/molsyn/Brodin_home.html

?Cl-

ADP+Pi

2H+

ATP

Acetilcolina2H+

Acetilcolina

∆pH

∆Ψ

2H+

+ +++

---

-

7.4 6.8

TRANSPORTE DE ACETILCOLINA EM TRANSPORTE DE ACETILCOLINA EM VESÍCULAS SINÁPTICASVESÍCULAS SINÁPTICAS

∆∆μμH+ = H+ = ∆pH + ∆Ψ

Abreu, B.J. Adaptado de Ozkan & Ueda, 19982H+

VAChT

VH+-ATPase

+ Positivehead

Lypophilic tail

bridges

FM1-43 STAINING

Abreu, B.J.

FM1-43 STAINING

Marcação com estímulo elétrico de 20Hz por 10 min

FM1-43 STAINING

Marcação com estímulo elétrico de 20Hz por 10 min

FM1-43 DESTAINING

Abreu, B.J.

FM1-43 DESTAINING

Marcação com estímulo elétrico de 20Hz por 10 min

Desmarcação com estímulo elétrico de 20Hz por 10 min

A RECICLAGEM DE

VESÍCULAS COM

CONTEÚDO QUANTAL

REDUZIDO É NORMAL?

?Cl-

ADP+Pi

2H+

ATP

Acetilcolina2H+

Acetilcolina

∆pH

∆Ψ

2H+

+ +++

---

-

7.4 6.8∆∆μμH+ = H+ = ∆pH + ∆Ψ

Abreu, B.J. Adaptado de Ozkan & Ueda, 19982H+

VAChT

VH+-ATPase

NH4Cl: DEPLEÇÃO DO GRADIENTE ACÍDICO

RESULTADOS COM NH4Cl: MARCAÇÃO

Marcação Controle Marcação Teste

Comparação da Marcação de Controles e Testes(Cloreto de Amônio)

Flu

ore

scên

cia

0

50

100

150

200

250

ControleTeste(Cloreto de Amônio)

Controle: n = 46 spots/ 11 terminaçõesTeste: n = 26 spots/ 7 terminações

RESULTADOS COM NH4Cl: MARCAÇÃO

CONSIDERAÇÕES FINAIS:

Ciclo de Vesículas com conteúdo quantal reduzido

Perspectivas

?Cl-

ADP+Pi

2H+

ATP

Acetilcolina2H+

Acetilcolina

∆pH

∆Ψ

2H+

+ +++

---

-

7.4 6.8

VESAMICOL: INIBIÇÃO DO TRANSPORTE DE VESAMICOL: INIBIÇÃO DO TRANSPORTE DE ACETILCOLINAACETILCOLINA

∆∆μμH+ = H+ = ∆pH + ∆Ψ

Abreu, B.J. Adaptado de Ozkan & Ueda, 19982H+

VAChT

VH+-ATPase

OBRIGADA PELA

ATENÇÃO!