Testes de sensibilidade aos Testes de sensibilidade aos antimicrobianosantimicrobianos

AntibióticosMecanismos de resistência

Mutações no DNA bacteriano Aquisição de plasmídios contendo genes

de resistência Exemplos:1) Produção de -Lactamases2) Alterações ribossômicas3) Alterações de permeabilidade da membrana celular da

bactéria4) Bomba de efluxo

AntibiogramaFinalidade

Avaliar in vitro a interação fármaco x bactéria

• Determinando a sensibilidade• Concentração inibitória mínima

Orientar o Tratamento

Microbiologia ClínicaTeste de sensibilidade - Métodos

Kirby-Bauer: Difusão com disco (disco-difusão)

Diluição em caldo (macro ou micro) E-test Automação

Disco – difusão ou antibiogramaPrincípio

Qualitativo Baixo custo, Rapidez, Padronização e

interpretação fácil Flexibilidade na escolha dos Antimicrobianos 12 antimicrobianos por placa

Disco – difusão ou antibiogramaDisco – difusão ou antibiogramaInterpretação e relato dos Interpretação e relato dos resultadosresultados

Sensível: Dosagem habitual do antimicrobiano testado inibe o crescimento bacteriano

Intermediário: Concentrações maiores do que as usuais podem inibir o microrganismo

Resistente: Não é inibido

Princípio do MétodosDisco-difusão - Ágar Mueller Ágar Mueller HintonHinton

Discos de papel filtro Fatores de Influências: velocidade de difusão, ph 7,2 a 7,4, estocagem das placas, temperatura e quantidade de ágar, inóculo bacterianoPadrão de Turvação de Sulfato de Bário - Escala (0,5) de Macfarland15 minutos após a colocação dos discos são invertidas e incubadas Leitura dos halos 24 horas após incubação (Utilizar cepas padrão )

Princípio do MétodosDisco-difusão

mm

Leitura e interpretaçãoLeitura e interpretação

Macrodiluição em caldoCIM - dose mínima de antibiótico que, adicionada ao meio de cultura (líquido ou sólido), é capaz de inibir totalmente o crescimento de um inóculo padrão

11

Etest®Difusão

12

E-test - MIC

13

Interpretação do E-testInterpretação do E-test

Figura representativa de um E-Figura representativa de um E-TESTTEST

Poder bactericida do soro

Teste realizado para verificar o efeito antimicrobiano do soro de pacientes em uso de antimicrobiano a pelo menos 72 horas e com infecção grave

Detecção de beta-lactamase (ESBL)

KPC – Klebsiella pneumoniae carbapenemase

Vitek System

Cartão com 10 a 12 drogasIsolamento e adequação do inóculoPainéis de ATB com combinações pré estabelecidos