Análise de Aflatoxinas Paula K. 2014

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Análise de aflatoxinas em amendoim por CCD Profa. Paula da Silva Kujbida UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE Faculdade de Farmácia - Centro de Ciências da Saúde Departamento de Análises Clínicas e Toxicológicas Disciplina: Toxicologia (ACT 0049)

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Análise de aflatoxinas em amendoim por CCD

Profa. Paula da Silva Kujbida

UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTEFaculdade de Farmácia - Centro de Ciências da Saúde

Departamento de Análises Clínicas e Toxicológicas

Disciplina: Toxicologia (ACT 0049)

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Propriedades físico-químicas das Aflatoxinas:Propriedades físico-químicas das Aflatoxinas:

Fluorescência sob luz UV (366 nm) B1 e B2 → azul G1 e G2 → verde

Substâncias apolares

Estáveis a temperaturas acima de 100°C.

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Amostra: Amendoim/paçoca

Quais as etapas desenvolvidas?1ª extração/separação;

Purificação (clean up) para eliminação de interferentes;

2ª Extração (líquido-líquido);

Identificação (CCD).

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Amostra: Amendoim/paçoca

Fundamento do método As aflatoxinas são extraídas da matriz usada para análise com metanol e cloreto de potássio. Posteriormente é realizada a etapa de limpeza, com a precipitação de proteínas com agentes clarificantes (sulfato de cobre e celite). As aflatoxinas são re-extraídas com clorofórmio por extração líquido-líquido e separadas dos componentes do extrato por cromatografia em camada delgada. A detecção e quantificação das aflatoxinas são realizadas por análise visual sob luz ultravioleta (366 nm).

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Cromatografia em Camada Delgada (CCD)

(do grego χρώμα:chroma, corcor e γραφειν:"grafein", grafiagrafia)

Cromatografia em Camada delgada (CCD)

Fase estacionária placa com sílica gel

Fase móvelsolvente (capilaridade)

TÉCNICA DE ADSORÇÃO LÍQUIDO-SÓLIDO

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Cromatografia em Camada Delgada (CCD)Técnica que consiste na separação dos compostos de uma

mistura por migração diferencial sobre uma camada delgada de adsorvente retido sobre uma superfície plana.

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ressuspender com 500 µL de

clorofórmio

IDENTIFICAÇÃO DE AFLATOXINAS POR CCD

2ª aula

Leitura em UV

Corrida cromatográfica: cuba saturada com o

sistema solvente clorofórmio:acetona (9:1)

Solução padrão de AFB1: 1 µg/mL

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