Análise de Aflatoxinas Paula K. 2014
-
Upload
daniely-rego -
Category
Documents
-
view
218 -
download
3
description
Transcript of Análise de Aflatoxinas Paula K. 2014
Análise de aflatoxinas em amendoim por CCD
Profa. Paula da Silva Kujbida
UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTEFaculdade de Farmácia - Centro de Ciências da Saúde
Departamento de Análises Clínicas e Toxicológicas
Disciplina: Toxicologia (ACT 0049)
Propriedades físico-químicas das Aflatoxinas:Propriedades físico-químicas das Aflatoxinas:
Fluorescência sob luz UV (366 nm) B1 e B2 → azul G1 e G2 → verde
Substâncias apolares
Estáveis a temperaturas acima de 100°C.
Análise de aflatoxinas em amendoim por CCD
Amostra: Amendoim/paçoca
Quais as etapas desenvolvidas?1ª extração/separação;
Purificação (clean up) para eliminação de interferentes;
2ª Extração (líquido-líquido);
Identificação (CCD).
Análise de aflatoxinas em amendoim por CCD
Amostra: Amendoim/paçoca
Fundamento do método As aflatoxinas são extraídas da matriz usada para análise com metanol e cloreto de potássio. Posteriormente é realizada a etapa de limpeza, com a precipitação de proteínas com agentes clarificantes (sulfato de cobre e celite). As aflatoxinas são re-extraídas com clorofórmio por extração líquido-líquido e separadas dos componentes do extrato por cromatografia em camada delgada. A detecção e quantificação das aflatoxinas são realizadas por análise visual sob luz ultravioleta (366 nm).
Análise de aflatoxinas em amendoim por CCD
Cromatografia em Camada Delgada (CCD)
(do grego χρώμα:chroma, corcor e γραφειν:"grafein", grafiagrafia)
Cromatografia em Camada delgada (CCD)
Fase estacionária placa com sílica gel
Fase móvelsolvente (capilaridade)
TÉCNICA DE ADSORÇÃO LÍQUIDO-SÓLIDO
Análise de aflatoxinas em amendoim por CCD
Cromatografia em Camada Delgada (CCD)Técnica que consiste na separação dos compostos de uma
mistura por migração diferencial sobre uma camada delgada de adsorvente retido sobre uma superfície plana.
ressuspender com 500 µL de
clorofórmio
IDENTIFICAÇÃO DE AFLATOXINAS POR CCD
2ª aula
Leitura em UV
Corrida cromatográfica: cuba saturada com o
sistema solvente clorofórmio:acetona (9:1)
Solução padrão de AFB1: 1 µg/mL
Análise de aflatoxinas em amendoim por CCD