AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE...

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UNIVERSIDADE ESTADUAL DA PARAIBA CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE- CCBS DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CURSO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE COAGULAÇÃO E SANGRIA EM INDIVÍDUOS ENVENENADOS POR SERPENTES EM CAMPINA GRANDE, PB. CAMPINA GRANDE 2014

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UNIVERSIDADE ESTADUAL DA PARAIBA

CENTRO DE CIEcircNCIAS BIOLOacuteGICAS E DA SAUacuteDE- CCBS

DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA

CURSO DE CIEcircNCIAS BIOLOacuteGICAS

AVALIACcedilAtildeO LEUCOCITAacuteRIA E PLAQUETAacuteRIA TEMPOS DE

COAGULACcedilAtildeO E SANGRIA EM INDIVIacuteDUOS ENVENENADOS POR

SERPENTES EM CAMPINA GRANDE PB

CAMPINA GRANDE

2014

ELAIacuteSE LEITE DA SILVA

AVALIACcedilAtildeO LEUCOCITAacuteRIA E PLAQUETAacuteRIA TEMPOS DE

COAGULACcedilAtildeO E SANGRIA EM INDIVIacuteDUOS ENVENENADOS POR

SERPENTES EM CAMPINA GRANDE PB

Trabalho de Conclusatildeo de Curso apresentado

ao Curso de Graduaccedilatildeo em Ciecircncias

Bioloacutegicas da Universidade Estadual da

Paraiacuteba em cumprimento agrave exigecircncia para

obtenccedilatildeo de grau de Licenciatura em Ciecircncias

Bioloacutegicas

Orientadora Drordf Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

CAMPINA GRANDE

2014

ELAISE LEITE DA SILVA

AVALIACcedilAtildeO LEUCOCITAacuteRIA E PLAQUETAacuteRIA TEMPOS DE

COAGULACcedilAtildeO E SANGRIA EM INDIVIacuteDUOS ENVENENADOS POR

SERPENTES EM CAMPINA GRANDE PB

Trabalho de Conclusatildeo de Curso apresentado

ao Curso de Graduaccedilatildeo em Ciecircncias

Bioloacutegicas da Universidade Estadual da

Paraiacuteba em cumprimento agrave exigecircncia para

obtenccedilatildeo de grau de Licenciatura em Ciecircncias

Bioloacutegicas

Aprovado em 24-04-2014

Dedico este trabalho aos meus pais Maria de Lourdes e Genival

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus por me permitir cursar o que eu sempre desejei e por ter me ajudado

durante todo este periacuteodo dentro da universidade Apesar das dificuldades surgidas e em meio

ao desacircnimo Deus sempre me deu forccedilas pra continuar

Sou muito agradecida aos meus pais (Lourdes e Genival) por estarem sempre ao meu

lado apoiando e me incentivando a buscar meus ideais pelo carinho compreensatildeo e confianccedila

que depositaram em mim A minha matildee principalmente que muitas vezes sentou ao meu lado

pra aprendermos juntas pela compreensatildeo nos momentos em que natildeo podia ajudaacute-la com o

trabalho de casa por sempre fazer de tudo para me oferecer o melhor Sou grata aos meus

irmatildeos Elaine Elieber Elaiacutesse Elacircnia Elisama pela amizade apoio compreensatildeo e ao meu

sobrinho Felipe por alegrar meus dias Ao meu primo Fernando pela ajuda e forccedila

Agradeccedilo a minha turma 20102 pelos bons e ruins momentos compartilhados de

alegrias de cumplicidade de stress momentos estes que sempre seratildeo lembrados e amizades

que com certeza nunca seratildeo esquecidas Agrave Kamila pela amizade por me escutar quando

precisei desabafar Bel sempre amiga que muitas vezes tambeacutem ouviu meus desabafos e

sempre esteve disposta a ajudar Agrave Carlinda pela amizade sempre nos dando forccedila e

confianccedila mostrando que tudo ia dar certo Agrave Cida pela simplicidade pela atenccedilatildeo pelas

palavras de acircnimo agrave Rita por ser quem eacute amiga carinhosa e por sempre me ligar nos

domingos pelas manhatildes me acordando pra estudar (rsrsr) Agrave Yasmin desastrada (rsrs) mas

sempre simpaacutetica e amiga Kleyde Mayara Boca sempre de bom humor tornando nossas

tardes mais alegres agrave Wallyson pela amizade e forccedila agrave Gustavo pela contribuiccedilatildeo para

realizaccedilatildeo deste trabalho Agradeccedilo a Ione e a Marielza pelos conselhos dados pela

confidecircncia pela sinceridade pela forccedila

Sou grata agrave equipe NEW LAB laboratoacuterio Dr Carlos e Dra Lille por nos abrir

espaccedilo para realizaccedilatildeo da pesquisa e aos teacutecnicos (Hellen Cristina Gilmara Samara Gerli

Neide Edicleacutecia Eacuterika Daniel) pela contribuiccedilatildeo para que este trabalho fosse concluiacutedo

pela amizade pela confianccedila depositada e pelos bons e maus momentos que pude

compartilhar Enfim sou grata a todos que contribuiacuteram pra que eu chegasse ateacute aqui

ldquoSe vocecirc chegou ateacute aqui entatildeo comece a glorificar foi o Senhor quem te sustentou e ateacute o

fim iraacute te sustentarrdquo (Leacuteo Jundi)

AVALIACcedilAtildeO LEUCOCITAacuteRIA E PLAQUETAacuteRIA TEMPOS DE

COAGULACcedilAtildeO E SANGRIA EM INDIVIacuteDUOS ENVENENADOS POR

SERPENTES EM CAMPINA GRANDE PB

RESUMO

Introduccedilatildeo Os Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de

sauacutede puacuteblica negligenciado (KASTURIRATNE et al 2008) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do ponto de

vista meacutedico (BRASIL 2010) As peccedilonhas destas serpentes causam diversos danos ao ser

humano KAMIGUTI et al(1986) O objetivo do presente trabalho eacute avaliar os paracircmetros

hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes atendidos no Hospital de

Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB Material e

meacutetodos Seringa tubos de ensaio papel filtro anticoagulante lanceta cronocircmetro

homogeneizador equipamento automatizado Counter 19 detergente agente hemolisante

soluccedilatildeo diluente e corante tipo Panoacutetico raacutepido I II e III lacircminas microscoacutepio oacuteptico Os

paracircmetros foram avaliados pelo meacutetodo de Duke para obter o tempo de sangria (TS) o

meacutetodo de Lee-white para obter o tempo de Coagulaccedilatildeo (TC) contagens de plaquetas e

leucoacutecitos foram feitas por meio de equipamento automatizado Resultados Foram

analisados um total de doze acidentes ofiacutedicos onde 73 dos acidentes foram causados por

serpentes do gecircnero Bothrops 16 pelo Crotalus e 11 do gecircnero Micrurus De acordo com

os resultados a maioria dos pacientes picados por serpentes do gecircnero Bothrops apresentaram

alteraccedilatildeo no tempo de coagulaccedilatildeo e na contagem de leucoacutecitos Jaacute os pacientes picados por

serpentes do gecircnero Crotalus apresentaram apenas a incoagulabilidade sanguiacutenea O paciente

picado por serpente do gecircnero Micrurus apresentou alteraccedilatildeo no nuacutemero de leucoacutecitos

Conclusatildeo As alteraccedilotildees hemostaacuteticas satildeo caracteriacutesticas laboratorialmente documentaacuteveis

nos acidentes ofiacutedicos Poreacutem novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno

ofiacutedico em humanos causados por serpentes endecircmicas da regiatildeo da Paraiacuteba podem melhorar

a terapecircutica diminuindo a reaccedilatildeo imunoloacutegica atraveacutes da produccedilatildeo de soroterapia mais

especiacutefica e eficiente

PALAVRAS-CHAVE Ofidismo hematologia soroterapia Campina Grande

EVALUATION LEUKOCYTE AND PLATELET CLOTTING TIMES

AND BLEEDING IN INDIVIDUALS POISONED BY SNAKES IN

CAMPINA GRANDE PB

ABSTRACT

Introduction Snakebites occur worldwide providing a neglected public health problem

(KASTURIRATNE et al 2008) In Brazil the main cause of snakebites are the snakes of the

genus Bothrops Crotalus Micrurus Lachesis respectively voted the most important

medical point of view ( BRASIL 2010) The venom of these snakes caused extensive

damage to human KAMIGUTI et al (1986) The objective of this study is to evaluate the

hematological parameters of individuals poisoned by snakes seen in Hospital Emergency and

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB Methods Syringe test tubes

filter paper anticoagulant Lancet stopwatch homogenizer automated equipment 19

Counter detergent Hemolyzing diluent solution and dye type Panoptic fast I II and III

blades optical microscope The parameters were assessed by the Duke method to get the

bleeding time (BT) The method for Lee- White clotting time (CT ) leukocyte and platelet

counts were performed by automated equipment Results A total of twelve snakebites

where 73 of accidents were caused by Bothrops Crotalus by 16 and 11 of the genus

Micrurus were analyzed According to the results the majority of patients bitten by Bothrops

showed abnormalities in coagulation time and leukocyte count Yet patients bitten by snakes

of the genus Crotalus showed only blood incoagulability The patient bitten by snake genus

Micrurus showed a change in the number of leukocytes Conclusion The laboratory

hemostatic abnormalities are documentary features in snakebites However further studies on

hematological effects of poison snake bite in humans caused by endemic snakes of Paraiacuteba

may improve therapeutic decreasing the immune response by producing more specific and

efficient serum therapy

KEYWORDS snakes hematology serum therapy Campina Grande

LISTA DE GRAacuteFICOS E TABELAS

Tabela 1 Gravidade dos acidentes ofiacutedicos e soroterapia recomendada17

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea 18

Graacutefico1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de

2012 a julho de 2013 25

Graacutefico 2Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 25

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops

nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes

do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos dos pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 30

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Micrurus 30

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 A) Fosseta loreal e B) Denticcedilatildeo proteroacuteglifa 15

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda 16

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas escamas Bothrops atrox 16

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico

Micrurus sp 18

SUMAacuteRIO

INTRODUCcedilAtildeO11

OBJETIVOS14

- Objetivos geral14

- Objetivo especifico14

REFERENCIAL TEOacuteRICO15

1- CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE

MEacuteDICO NO BRASIL15

2- TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO 17

3- HEMOSTASIA18

4- LEUCOacuteCITOS19

PROCEDIMETOS METODOLOacuteGICOS 21

-TIPO DE ESTUDO21

-LOCAL DE PESQUISA21

-POPULACcedilAtildeO E AMOSTRA 21

- INSTRUMENTOS DE COLETA DE DADOS 22

- MATERIAL E MEacuteTODOS 22

- PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISES DE DADOS 23

- ASPECTOS EacuteTICOS24

RESULTADOS25

DISCUSSAtildeO31

CONCLUSAtildeO 34

REFEREcircNCIAS35

ANEXOS42

11

INTRODUCcedilAtildeO

Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de sauacutede

puacuteblica negligenciado sendo relevante nas aacutereas rurais dos paiacuteses tropicais e

subtropicais em que satildeo mais frequumlentes e o acesso aos serviccedilos de sauacutede eacute bastante

limitado (KASTURIRATNE et al 2008) Mais de 29 mil acidentes por serpentes

peccedilonhentas satildeo registrados no Brasil a cada ano (SANTrsquoANNA et al 2012) com

letalidade de aproximadamente 045(BARRETO2010) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do

ponto de vista meacutedico (BRASIL 2010)

As serpentes do gecircnero Bothrops se distribuem por todo o territoacuterio brasileiro e satildeo

responsaacuteveis por 90 dos acidentes ofiacutedicos peccedilonhentos no paiacutes com cerca de 18 mil

acidentes por ano e letalidade de aproximadamente 03 (BRASIL2001) contando com

25 espeacutecies (LEAtildeO2012) Satildeo conhecidas popularmente como jararaca jararacuccedilu

urutu-cruzeiro caiccedilara comboia patrona surucucurana entre outros nomes (BRASIL

2001)

O gecircnero Crotalus se distribui em todo territoacuterio nacional habita os cerrados do

Brasil regiotildees aacuteridas e semiaacuteridas do Nordeste os campos e aacutereas abertas do Sul

Sudeste e Norte O gecircnero apresenta apenas uma uacutenica espeacutecie Crotalus durissus com

cinco subespeacutecies (MELGAREJO 2009) Satildeo conhecidas popularmente por cascavel

maracaacute boicininga maracamboacuteia cascavel quatro - ventas entre outras Os acidentes

crotaacutelicos satildeo responsaacuteveis por 77dos acidentes ofiacutedicos no paiacutes com 187 de

letalidade (BRASIL 2001)

O gecircnero Micrurus eacute distribuiacutedo por todo territoacuterio nacional com total de 18

espeacutecies Satildeo conhecidas por coral coral-verdadeira ou boicoraacute (BRASIL 2001) A

incidecircncia de acidentes causados por este gecircnero eacute de cerca de 05 por

ano(MELGAREJO2009)E o 4ordm e uacuteltimo gecircnero de importacircncia medica no Brasil eacute o

Lachesis este eacute responsaacutevel por 11 dos acidentes ofiacutedicos por ano no Brasil Habitam

aacutereas florestais como Amazocircnia Mata Atlacircntica e algumas matas uacutemidas do

Nordeste(BRASIL2003)

As peccedilonhas de serpentes satildeo misturas complexas de proteiacutenas que possuem uma

grande variedade de atividades bioloacutegicas com accedilotildees fisioloacutegicas neurotransmissoras e

12

hematoloacutegicas (CAPRONI 2009 SILVA 2009) Suas diferentes composiccedilotildees quiacutemicas

refletem em variaccedilotildees das propriedades bioloacutegicas toxicidade e caracteriacutesticas

farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas (SILVA 2009) Essas variaccedilotildees podem ser

influenciadas pelo haacutebito alimentar pelo tamanho e idade das serpentes ou pelo clima e

eacutepoca do ano (CABRAL 2011) A diversidade de componentes presentes nos venenos

ofiacutedicos apresenta uma uacutenica funccedilatildeo que eacute a de mobilizar a presa e que satildeo usadas

defensivamente contra o homem (KAMIGUTI et al1986 JENNINGS et al2005)

Em estudos feitos por Kamiguti et al(1986) foi observado coagulopatia em muitos

envenenamentos ofiacutedicos Incoagulabilidade sanguiacutenea hemorragia sistecircmica efeitos

colaterais sistecircmicos choque hemorragia intracraniana e pituitaacuteria insuficiecircncia renal

trombose e embolia pulmonar foram agraves principais manifestaccedilotildees apresentadas Uma seacuterie

de componentes presentes nos venenos ofiacutedicos pode ativar o sistema de coagulaccedilatildeo o que

natildeo iraacute necessariamente resultar em trombose Segundo (HUTTON et al 1993) venenos

proacute - coagulantes especialmente botroacutepicos ativam a cascata da coagulaccedilatildeo resultando no

consumo e depleccedilatildeo de fatores da coagulaccedilatildeo tornando o sangue incoagulaacutevel

contribuindo para o aumento da hemorragia A trombocitopenia pode ocorrer o que leva a

um aumento do sangramento (WHITE 2005) O consumo dos fatores da coagulaccedilatildeo reduz

o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas nas paredes dos

vasos (KAMIGUTI 1991) degradando a lamina basal e promovendo a sua ruptura

(MANDELBAUN 1976) ou produzindo lesatildeo direta nas ceacutelulas endoteliais

(GUTIEacuteRREZ 1980)

As principais atividades do veneno das serpentes do gecircnero Bothrops satildeo coagulante

hemorraacutegica e proteoliacutetica (PINHO2001) Os componentes que ativam os fatores da cascata

da coagulaccedilatildeo satildeo classificados em proacute-coagulantes que ativam o fator X ou o fator II da

cascata da coagulaccedilatildeo gerando trombina que hidrolisa o fibrinogecircnio em fibrina e o

componente trombina-siacutemile que hidrolisa fibrinogecircnio em fibrina sem a intervenccedilatildeo da

trombina (SANO-MARTINS 2003) Estes componentes variam de acordo com a espeacutecie da

serpente e suas atividades podem levar a alteraccedilotildees da funccedilatildeo plaquetaacuteria (BRASIL 2001)

Atraveacutes de hemorraginas causam lesatildeo endotelial sistecircmica e trombocitopenia aumenta a

atividade fibrinoliacutetica plasmaacutetica inibe a agregaccedilatildeo secreccedilatildeo e fosforilaccedilatildeo plaquetaacuteria o que

leva a alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea causando assim hemorragias (SANO-MARTINS

2003)

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 2: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

ELAIacuteSE LEITE DA SILVA

AVALIACcedilAtildeO LEUCOCITAacuteRIA E PLAQUETAacuteRIA TEMPOS DE

COAGULACcedilAtildeO E SANGRIA EM INDIVIacuteDUOS ENVENENADOS POR

SERPENTES EM CAMPINA GRANDE PB

Trabalho de Conclusatildeo de Curso apresentado

ao Curso de Graduaccedilatildeo em Ciecircncias

Bioloacutegicas da Universidade Estadual da

Paraiacuteba em cumprimento agrave exigecircncia para

obtenccedilatildeo de grau de Licenciatura em Ciecircncias

Bioloacutegicas

Orientadora Drordf Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

CAMPINA GRANDE

2014

ELAISE LEITE DA SILVA

AVALIACcedilAtildeO LEUCOCITAacuteRIA E PLAQUETAacuteRIA TEMPOS DE

COAGULACcedilAtildeO E SANGRIA EM INDIVIacuteDUOS ENVENENADOS POR

SERPENTES EM CAMPINA GRANDE PB

Trabalho de Conclusatildeo de Curso apresentado

ao Curso de Graduaccedilatildeo em Ciecircncias

Bioloacutegicas da Universidade Estadual da

Paraiacuteba em cumprimento agrave exigecircncia para

obtenccedilatildeo de grau de Licenciatura em Ciecircncias

Bioloacutegicas

Aprovado em 24-04-2014

Dedico este trabalho aos meus pais Maria de Lourdes e Genival

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus por me permitir cursar o que eu sempre desejei e por ter me ajudado

durante todo este periacuteodo dentro da universidade Apesar das dificuldades surgidas e em meio

ao desacircnimo Deus sempre me deu forccedilas pra continuar

Sou muito agradecida aos meus pais (Lourdes e Genival) por estarem sempre ao meu

lado apoiando e me incentivando a buscar meus ideais pelo carinho compreensatildeo e confianccedila

que depositaram em mim A minha matildee principalmente que muitas vezes sentou ao meu lado

pra aprendermos juntas pela compreensatildeo nos momentos em que natildeo podia ajudaacute-la com o

trabalho de casa por sempre fazer de tudo para me oferecer o melhor Sou grata aos meus

irmatildeos Elaine Elieber Elaiacutesse Elacircnia Elisama pela amizade apoio compreensatildeo e ao meu

sobrinho Felipe por alegrar meus dias Ao meu primo Fernando pela ajuda e forccedila

Agradeccedilo a minha turma 20102 pelos bons e ruins momentos compartilhados de

alegrias de cumplicidade de stress momentos estes que sempre seratildeo lembrados e amizades

que com certeza nunca seratildeo esquecidas Agrave Kamila pela amizade por me escutar quando

precisei desabafar Bel sempre amiga que muitas vezes tambeacutem ouviu meus desabafos e

sempre esteve disposta a ajudar Agrave Carlinda pela amizade sempre nos dando forccedila e

confianccedila mostrando que tudo ia dar certo Agrave Cida pela simplicidade pela atenccedilatildeo pelas

palavras de acircnimo agrave Rita por ser quem eacute amiga carinhosa e por sempre me ligar nos

domingos pelas manhatildes me acordando pra estudar (rsrsr) Agrave Yasmin desastrada (rsrs) mas

sempre simpaacutetica e amiga Kleyde Mayara Boca sempre de bom humor tornando nossas

tardes mais alegres agrave Wallyson pela amizade e forccedila agrave Gustavo pela contribuiccedilatildeo para

realizaccedilatildeo deste trabalho Agradeccedilo a Ione e a Marielza pelos conselhos dados pela

confidecircncia pela sinceridade pela forccedila

Sou grata agrave equipe NEW LAB laboratoacuterio Dr Carlos e Dra Lille por nos abrir

espaccedilo para realizaccedilatildeo da pesquisa e aos teacutecnicos (Hellen Cristina Gilmara Samara Gerli

Neide Edicleacutecia Eacuterika Daniel) pela contribuiccedilatildeo para que este trabalho fosse concluiacutedo

pela amizade pela confianccedila depositada e pelos bons e maus momentos que pude

compartilhar Enfim sou grata a todos que contribuiacuteram pra que eu chegasse ateacute aqui

ldquoSe vocecirc chegou ateacute aqui entatildeo comece a glorificar foi o Senhor quem te sustentou e ateacute o

fim iraacute te sustentarrdquo (Leacuteo Jundi)

AVALIACcedilAtildeO LEUCOCITAacuteRIA E PLAQUETAacuteRIA TEMPOS DE

COAGULACcedilAtildeO E SANGRIA EM INDIVIacuteDUOS ENVENENADOS POR

SERPENTES EM CAMPINA GRANDE PB

RESUMO

Introduccedilatildeo Os Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de

sauacutede puacuteblica negligenciado (KASTURIRATNE et al 2008) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do ponto de

vista meacutedico (BRASIL 2010) As peccedilonhas destas serpentes causam diversos danos ao ser

humano KAMIGUTI et al(1986) O objetivo do presente trabalho eacute avaliar os paracircmetros

hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes atendidos no Hospital de

Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB Material e

meacutetodos Seringa tubos de ensaio papel filtro anticoagulante lanceta cronocircmetro

homogeneizador equipamento automatizado Counter 19 detergente agente hemolisante

soluccedilatildeo diluente e corante tipo Panoacutetico raacutepido I II e III lacircminas microscoacutepio oacuteptico Os

paracircmetros foram avaliados pelo meacutetodo de Duke para obter o tempo de sangria (TS) o

meacutetodo de Lee-white para obter o tempo de Coagulaccedilatildeo (TC) contagens de plaquetas e

leucoacutecitos foram feitas por meio de equipamento automatizado Resultados Foram

analisados um total de doze acidentes ofiacutedicos onde 73 dos acidentes foram causados por

serpentes do gecircnero Bothrops 16 pelo Crotalus e 11 do gecircnero Micrurus De acordo com

os resultados a maioria dos pacientes picados por serpentes do gecircnero Bothrops apresentaram

alteraccedilatildeo no tempo de coagulaccedilatildeo e na contagem de leucoacutecitos Jaacute os pacientes picados por

serpentes do gecircnero Crotalus apresentaram apenas a incoagulabilidade sanguiacutenea O paciente

picado por serpente do gecircnero Micrurus apresentou alteraccedilatildeo no nuacutemero de leucoacutecitos

Conclusatildeo As alteraccedilotildees hemostaacuteticas satildeo caracteriacutesticas laboratorialmente documentaacuteveis

nos acidentes ofiacutedicos Poreacutem novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno

ofiacutedico em humanos causados por serpentes endecircmicas da regiatildeo da Paraiacuteba podem melhorar

a terapecircutica diminuindo a reaccedilatildeo imunoloacutegica atraveacutes da produccedilatildeo de soroterapia mais

especiacutefica e eficiente

PALAVRAS-CHAVE Ofidismo hematologia soroterapia Campina Grande

EVALUATION LEUKOCYTE AND PLATELET CLOTTING TIMES

AND BLEEDING IN INDIVIDUALS POISONED BY SNAKES IN

CAMPINA GRANDE PB

ABSTRACT

Introduction Snakebites occur worldwide providing a neglected public health problem

(KASTURIRATNE et al 2008) In Brazil the main cause of snakebites are the snakes of the

genus Bothrops Crotalus Micrurus Lachesis respectively voted the most important

medical point of view ( BRASIL 2010) The venom of these snakes caused extensive

damage to human KAMIGUTI et al (1986) The objective of this study is to evaluate the

hematological parameters of individuals poisoned by snakes seen in Hospital Emergency and

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB Methods Syringe test tubes

filter paper anticoagulant Lancet stopwatch homogenizer automated equipment 19

Counter detergent Hemolyzing diluent solution and dye type Panoptic fast I II and III

blades optical microscope The parameters were assessed by the Duke method to get the

bleeding time (BT) The method for Lee- White clotting time (CT ) leukocyte and platelet

counts were performed by automated equipment Results A total of twelve snakebites

where 73 of accidents were caused by Bothrops Crotalus by 16 and 11 of the genus

Micrurus were analyzed According to the results the majority of patients bitten by Bothrops

showed abnormalities in coagulation time and leukocyte count Yet patients bitten by snakes

of the genus Crotalus showed only blood incoagulability The patient bitten by snake genus

Micrurus showed a change in the number of leukocytes Conclusion The laboratory

hemostatic abnormalities are documentary features in snakebites However further studies on

hematological effects of poison snake bite in humans caused by endemic snakes of Paraiacuteba

may improve therapeutic decreasing the immune response by producing more specific and

efficient serum therapy

KEYWORDS snakes hematology serum therapy Campina Grande

LISTA DE GRAacuteFICOS E TABELAS

Tabela 1 Gravidade dos acidentes ofiacutedicos e soroterapia recomendada17

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea 18

Graacutefico1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de

2012 a julho de 2013 25

Graacutefico 2Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 25

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops

nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes

do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos dos pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 30

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Micrurus 30

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 A) Fosseta loreal e B) Denticcedilatildeo proteroacuteglifa 15

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda 16

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas escamas Bothrops atrox 16

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico

Micrurus sp 18

SUMAacuteRIO

INTRODUCcedilAtildeO11

OBJETIVOS14

- Objetivos geral14

- Objetivo especifico14

REFERENCIAL TEOacuteRICO15

1- CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE

MEacuteDICO NO BRASIL15

2- TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO 17

3- HEMOSTASIA18

4- LEUCOacuteCITOS19

PROCEDIMETOS METODOLOacuteGICOS 21

-TIPO DE ESTUDO21

-LOCAL DE PESQUISA21

-POPULACcedilAtildeO E AMOSTRA 21

- INSTRUMENTOS DE COLETA DE DADOS 22

- MATERIAL E MEacuteTODOS 22

- PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISES DE DADOS 23

- ASPECTOS EacuteTICOS24

RESULTADOS25

DISCUSSAtildeO31

CONCLUSAtildeO 34

REFEREcircNCIAS35

ANEXOS42

11

INTRODUCcedilAtildeO

Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de sauacutede

puacuteblica negligenciado sendo relevante nas aacutereas rurais dos paiacuteses tropicais e

subtropicais em que satildeo mais frequumlentes e o acesso aos serviccedilos de sauacutede eacute bastante

limitado (KASTURIRATNE et al 2008) Mais de 29 mil acidentes por serpentes

peccedilonhentas satildeo registrados no Brasil a cada ano (SANTrsquoANNA et al 2012) com

letalidade de aproximadamente 045(BARRETO2010) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do

ponto de vista meacutedico (BRASIL 2010)

As serpentes do gecircnero Bothrops se distribuem por todo o territoacuterio brasileiro e satildeo

responsaacuteveis por 90 dos acidentes ofiacutedicos peccedilonhentos no paiacutes com cerca de 18 mil

acidentes por ano e letalidade de aproximadamente 03 (BRASIL2001) contando com

25 espeacutecies (LEAtildeO2012) Satildeo conhecidas popularmente como jararaca jararacuccedilu

urutu-cruzeiro caiccedilara comboia patrona surucucurana entre outros nomes (BRASIL

2001)

O gecircnero Crotalus se distribui em todo territoacuterio nacional habita os cerrados do

Brasil regiotildees aacuteridas e semiaacuteridas do Nordeste os campos e aacutereas abertas do Sul

Sudeste e Norte O gecircnero apresenta apenas uma uacutenica espeacutecie Crotalus durissus com

cinco subespeacutecies (MELGAREJO 2009) Satildeo conhecidas popularmente por cascavel

maracaacute boicininga maracamboacuteia cascavel quatro - ventas entre outras Os acidentes

crotaacutelicos satildeo responsaacuteveis por 77dos acidentes ofiacutedicos no paiacutes com 187 de

letalidade (BRASIL 2001)

O gecircnero Micrurus eacute distribuiacutedo por todo territoacuterio nacional com total de 18

espeacutecies Satildeo conhecidas por coral coral-verdadeira ou boicoraacute (BRASIL 2001) A

incidecircncia de acidentes causados por este gecircnero eacute de cerca de 05 por

ano(MELGAREJO2009)E o 4ordm e uacuteltimo gecircnero de importacircncia medica no Brasil eacute o

Lachesis este eacute responsaacutevel por 11 dos acidentes ofiacutedicos por ano no Brasil Habitam

aacutereas florestais como Amazocircnia Mata Atlacircntica e algumas matas uacutemidas do

Nordeste(BRASIL2003)

As peccedilonhas de serpentes satildeo misturas complexas de proteiacutenas que possuem uma

grande variedade de atividades bioloacutegicas com accedilotildees fisioloacutegicas neurotransmissoras e

12

hematoloacutegicas (CAPRONI 2009 SILVA 2009) Suas diferentes composiccedilotildees quiacutemicas

refletem em variaccedilotildees das propriedades bioloacutegicas toxicidade e caracteriacutesticas

farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas (SILVA 2009) Essas variaccedilotildees podem ser

influenciadas pelo haacutebito alimentar pelo tamanho e idade das serpentes ou pelo clima e

eacutepoca do ano (CABRAL 2011) A diversidade de componentes presentes nos venenos

ofiacutedicos apresenta uma uacutenica funccedilatildeo que eacute a de mobilizar a presa e que satildeo usadas

defensivamente contra o homem (KAMIGUTI et al1986 JENNINGS et al2005)

Em estudos feitos por Kamiguti et al(1986) foi observado coagulopatia em muitos

envenenamentos ofiacutedicos Incoagulabilidade sanguiacutenea hemorragia sistecircmica efeitos

colaterais sistecircmicos choque hemorragia intracraniana e pituitaacuteria insuficiecircncia renal

trombose e embolia pulmonar foram agraves principais manifestaccedilotildees apresentadas Uma seacuterie

de componentes presentes nos venenos ofiacutedicos pode ativar o sistema de coagulaccedilatildeo o que

natildeo iraacute necessariamente resultar em trombose Segundo (HUTTON et al 1993) venenos

proacute - coagulantes especialmente botroacutepicos ativam a cascata da coagulaccedilatildeo resultando no

consumo e depleccedilatildeo de fatores da coagulaccedilatildeo tornando o sangue incoagulaacutevel

contribuindo para o aumento da hemorragia A trombocitopenia pode ocorrer o que leva a

um aumento do sangramento (WHITE 2005) O consumo dos fatores da coagulaccedilatildeo reduz

o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas nas paredes dos

vasos (KAMIGUTI 1991) degradando a lamina basal e promovendo a sua ruptura

(MANDELBAUN 1976) ou produzindo lesatildeo direta nas ceacutelulas endoteliais

(GUTIEacuteRREZ 1980)

As principais atividades do veneno das serpentes do gecircnero Bothrops satildeo coagulante

hemorraacutegica e proteoliacutetica (PINHO2001) Os componentes que ativam os fatores da cascata

da coagulaccedilatildeo satildeo classificados em proacute-coagulantes que ativam o fator X ou o fator II da

cascata da coagulaccedilatildeo gerando trombina que hidrolisa o fibrinogecircnio em fibrina e o

componente trombina-siacutemile que hidrolisa fibrinogecircnio em fibrina sem a intervenccedilatildeo da

trombina (SANO-MARTINS 2003) Estes componentes variam de acordo com a espeacutecie da

serpente e suas atividades podem levar a alteraccedilotildees da funccedilatildeo plaquetaacuteria (BRASIL 2001)

Atraveacutes de hemorraginas causam lesatildeo endotelial sistecircmica e trombocitopenia aumenta a

atividade fibrinoliacutetica plasmaacutetica inibe a agregaccedilatildeo secreccedilatildeo e fosforilaccedilatildeo plaquetaacuteria o que

leva a alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea causando assim hemorragias (SANO-MARTINS

2003)

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

REFEREcircNCIAS

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 3: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

ELAISE LEITE DA SILVA

AVALIACcedilAtildeO LEUCOCITAacuteRIA E PLAQUETAacuteRIA TEMPOS DE

COAGULACcedilAtildeO E SANGRIA EM INDIVIacuteDUOS ENVENENADOS POR

SERPENTES EM CAMPINA GRANDE PB

Trabalho de Conclusatildeo de Curso apresentado

ao Curso de Graduaccedilatildeo em Ciecircncias

Bioloacutegicas da Universidade Estadual da

Paraiacuteba em cumprimento agrave exigecircncia para

obtenccedilatildeo de grau de Licenciatura em Ciecircncias

Bioloacutegicas

Aprovado em 24-04-2014

Dedico este trabalho aos meus pais Maria de Lourdes e Genival

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus por me permitir cursar o que eu sempre desejei e por ter me ajudado

durante todo este periacuteodo dentro da universidade Apesar das dificuldades surgidas e em meio

ao desacircnimo Deus sempre me deu forccedilas pra continuar

Sou muito agradecida aos meus pais (Lourdes e Genival) por estarem sempre ao meu

lado apoiando e me incentivando a buscar meus ideais pelo carinho compreensatildeo e confianccedila

que depositaram em mim A minha matildee principalmente que muitas vezes sentou ao meu lado

pra aprendermos juntas pela compreensatildeo nos momentos em que natildeo podia ajudaacute-la com o

trabalho de casa por sempre fazer de tudo para me oferecer o melhor Sou grata aos meus

irmatildeos Elaine Elieber Elaiacutesse Elacircnia Elisama pela amizade apoio compreensatildeo e ao meu

sobrinho Felipe por alegrar meus dias Ao meu primo Fernando pela ajuda e forccedila

Agradeccedilo a minha turma 20102 pelos bons e ruins momentos compartilhados de

alegrias de cumplicidade de stress momentos estes que sempre seratildeo lembrados e amizades

que com certeza nunca seratildeo esquecidas Agrave Kamila pela amizade por me escutar quando

precisei desabafar Bel sempre amiga que muitas vezes tambeacutem ouviu meus desabafos e

sempre esteve disposta a ajudar Agrave Carlinda pela amizade sempre nos dando forccedila e

confianccedila mostrando que tudo ia dar certo Agrave Cida pela simplicidade pela atenccedilatildeo pelas

palavras de acircnimo agrave Rita por ser quem eacute amiga carinhosa e por sempre me ligar nos

domingos pelas manhatildes me acordando pra estudar (rsrsr) Agrave Yasmin desastrada (rsrs) mas

sempre simpaacutetica e amiga Kleyde Mayara Boca sempre de bom humor tornando nossas

tardes mais alegres agrave Wallyson pela amizade e forccedila agrave Gustavo pela contribuiccedilatildeo para

realizaccedilatildeo deste trabalho Agradeccedilo a Ione e a Marielza pelos conselhos dados pela

confidecircncia pela sinceridade pela forccedila

Sou grata agrave equipe NEW LAB laboratoacuterio Dr Carlos e Dra Lille por nos abrir

espaccedilo para realizaccedilatildeo da pesquisa e aos teacutecnicos (Hellen Cristina Gilmara Samara Gerli

Neide Edicleacutecia Eacuterika Daniel) pela contribuiccedilatildeo para que este trabalho fosse concluiacutedo

pela amizade pela confianccedila depositada e pelos bons e maus momentos que pude

compartilhar Enfim sou grata a todos que contribuiacuteram pra que eu chegasse ateacute aqui

ldquoSe vocecirc chegou ateacute aqui entatildeo comece a glorificar foi o Senhor quem te sustentou e ateacute o

fim iraacute te sustentarrdquo (Leacuteo Jundi)

AVALIACcedilAtildeO LEUCOCITAacuteRIA E PLAQUETAacuteRIA TEMPOS DE

COAGULACcedilAtildeO E SANGRIA EM INDIVIacuteDUOS ENVENENADOS POR

SERPENTES EM CAMPINA GRANDE PB

RESUMO

Introduccedilatildeo Os Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de

sauacutede puacuteblica negligenciado (KASTURIRATNE et al 2008) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do ponto de

vista meacutedico (BRASIL 2010) As peccedilonhas destas serpentes causam diversos danos ao ser

humano KAMIGUTI et al(1986) O objetivo do presente trabalho eacute avaliar os paracircmetros

hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes atendidos no Hospital de

Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB Material e

meacutetodos Seringa tubos de ensaio papel filtro anticoagulante lanceta cronocircmetro

homogeneizador equipamento automatizado Counter 19 detergente agente hemolisante

soluccedilatildeo diluente e corante tipo Panoacutetico raacutepido I II e III lacircminas microscoacutepio oacuteptico Os

paracircmetros foram avaliados pelo meacutetodo de Duke para obter o tempo de sangria (TS) o

meacutetodo de Lee-white para obter o tempo de Coagulaccedilatildeo (TC) contagens de plaquetas e

leucoacutecitos foram feitas por meio de equipamento automatizado Resultados Foram

analisados um total de doze acidentes ofiacutedicos onde 73 dos acidentes foram causados por

serpentes do gecircnero Bothrops 16 pelo Crotalus e 11 do gecircnero Micrurus De acordo com

os resultados a maioria dos pacientes picados por serpentes do gecircnero Bothrops apresentaram

alteraccedilatildeo no tempo de coagulaccedilatildeo e na contagem de leucoacutecitos Jaacute os pacientes picados por

serpentes do gecircnero Crotalus apresentaram apenas a incoagulabilidade sanguiacutenea O paciente

picado por serpente do gecircnero Micrurus apresentou alteraccedilatildeo no nuacutemero de leucoacutecitos

Conclusatildeo As alteraccedilotildees hemostaacuteticas satildeo caracteriacutesticas laboratorialmente documentaacuteveis

nos acidentes ofiacutedicos Poreacutem novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno

ofiacutedico em humanos causados por serpentes endecircmicas da regiatildeo da Paraiacuteba podem melhorar

a terapecircutica diminuindo a reaccedilatildeo imunoloacutegica atraveacutes da produccedilatildeo de soroterapia mais

especiacutefica e eficiente

PALAVRAS-CHAVE Ofidismo hematologia soroterapia Campina Grande

EVALUATION LEUKOCYTE AND PLATELET CLOTTING TIMES

AND BLEEDING IN INDIVIDUALS POISONED BY SNAKES IN

CAMPINA GRANDE PB

ABSTRACT

Introduction Snakebites occur worldwide providing a neglected public health problem

(KASTURIRATNE et al 2008) In Brazil the main cause of snakebites are the snakes of the

genus Bothrops Crotalus Micrurus Lachesis respectively voted the most important

medical point of view ( BRASIL 2010) The venom of these snakes caused extensive

damage to human KAMIGUTI et al (1986) The objective of this study is to evaluate the

hematological parameters of individuals poisoned by snakes seen in Hospital Emergency and

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB Methods Syringe test tubes

filter paper anticoagulant Lancet stopwatch homogenizer automated equipment 19

Counter detergent Hemolyzing diluent solution and dye type Panoptic fast I II and III

blades optical microscope The parameters were assessed by the Duke method to get the

bleeding time (BT) The method for Lee- White clotting time (CT ) leukocyte and platelet

counts were performed by automated equipment Results A total of twelve snakebites

where 73 of accidents were caused by Bothrops Crotalus by 16 and 11 of the genus

Micrurus were analyzed According to the results the majority of patients bitten by Bothrops

showed abnormalities in coagulation time and leukocyte count Yet patients bitten by snakes

of the genus Crotalus showed only blood incoagulability The patient bitten by snake genus

Micrurus showed a change in the number of leukocytes Conclusion The laboratory

hemostatic abnormalities are documentary features in snakebites However further studies on

hematological effects of poison snake bite in humans caused by endemic snakes of Paraiacuteba

may improve therapeutic decreasing the immune response by producing more specific and

efficient serum therapy

KEYWORDS snakes hematology serum therapy Campina Grande

LISTA DE GRAacuteFICOS E TABELAS

Tabela 1 Gravidade dos acidentes ofiacutedicos e soroterapia recomendada17

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea 18

Graacutefico1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de

2012 a julho de 2013 25

Graacutefico 2Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 25

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops

nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes

do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos dos pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 30

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Micrurus 30

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 A) Fosseta loreal e B) Denticcedilatildeo proteroacuteglifa 15

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda 16

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas escamas Bothrops atrox 16

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico

Micrurus sp 18

SUMAacuteRIO

INTRODUCcedilAtildeO11

OBJETIVOS14

- Objetivos geral14

- Objetivo especifico14

REFERENCIAL TEOacuteRICO15

1- CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE

MEacuteDICO NO BRASIL15

2- TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO 17

3- HEMOSTASIA18

4- LEUCOacuteCITOS19

PROCEDIMETOS METODOLOacuteGICOS 21

-TIPO DE ESTUDO21

-LOCAL DE PESQUISA21

-POPULACcedilAtildeO E AMOSTRA 21

- INSTRUMENTOS DE COLETA DE DADOS 22

- MATERIAL E MEacuteTODOS 22

- PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISES DE DADOS 23

- ASPECTOS EacuteTICOS24

RESULTADOS25

DISCUSSAtildeO31

CONCLUSAtildeO 34

REFEREcircNCIAS35

ANEXOS42

11

INTRODUCcedilAtildeO

Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de sauacutede

puacuteblica negligenciado sendo relevante nas aacutereas rurais dos paiacuteses tropicais e

subtropicais em que satildeo mais frequumlentes e o acesso aos serviccedilos de sauacutede eacute bastante

limitado (KASTURIRATNE et al 2008) Mais de 29 mil acidentes por serpentes

peccedilonhentas satildeo registrados no Brasil a cada ano (SANTrsquoANNA et al 2012) com

letalidade de aproximadamente 045(BARRETO2010) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do

ponto de vista meacutedico (BRASIL 2010)

As serpentes do gecircnero Bothrops se distribuem por todo o territoacuterio brasileiro e satildeo

responsaacuteveis por 90 dos acidentes ofiacutedicos peccedilonhentos no paiacutes com cerca de 18 mil

acidentes por ano e letalidade de aproximadamente 03 (BRASIL2001) contando com

25 espeacutecies (LEAtildeO2012) Satildeo conhecidas popularmente como jararaca jararacuccedilu

urutu-cruzeiro caiccedilara comboia patrona surucucurana entre outros nomes (BRASIL

2001)

O gecircnero Crotalus se distribui em todo territoacuterio nacional habita os cerrados do

Brasil regiotildees aacuteridas e semiaacuteridas do Nordeste os campos e aacutereas abertas do Sul

Sudeste e Norte O gecircnero apresenta apenas uma uacutenica espeacutecie Crotalus durissus com

cinco subespeacutecies (MELGAREJO 2009) Satildeo conhecidas popularmente por cascavel

maracaacute boicininga maracamboacuteia cascavel quatro - ventas entre outras Os acidentes

crotaacutelicos satildeo responsaacuteveis por 77dos acidentes ofiacutedicos no paiacutes com 187 de

letalidade (BRASIL 2001)

O gecircnero Micrurus eacute distribuiacutedo por todo territoacuterio nacional com total de 18

espeacutecies Satildeo conhecidas por coral coral-verdadeira ou boicoraacute (BRASIL 2001) A

incidecircncia de acidentes causados por este gecircnero eacute de cerca de 05 por

ano(MELGAREJO2009)E o 4ordm e uacuteltimo gecircnero de importacircncia medica no Brasil eacute o

Lachesis este eacute responsaacutevel por 11 dos acidentes ofiacutedicos por ano no Brasil Habitam

aacutereas florestais como Amazocircnia Mata Atlacircntica e algumas matas uacutemidas do

Nordeste(BRASIL2003)

As peccedilonhas de serpentes satildeo misturas complexas de proteiacutenas que possuem uma

grande variedade de atividades bioloacutegicas com accedilotildees fisioloacutegicas neurotransmissoras e

12

hematoloacutegicas (CAPRONI 2009 SILVA 2009) Suas diferentes composiccedilotildees quiacutemicas

refletem em variaccedilotildees das propriedades bioloacutegicas toxicidade e caracteriacutesticas

farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas (SILVA 2009) Essas variaccedilotildees podem ser

influenciadas pelo haacutebito alimentar pelo tamanho e idade das serpentes ou pelo clima e

eacutepoca do ano (CABRAL 2011) A diversidade de componentes presentes nos venenos

ofiacutedicos apresenta uma uacutenica funccedilatildeo que eacute a de mobilizar a presa e que satildeo usadas

defensivamente contra o homem (KAMIGUTI et al1986 JENNINGS et al2005)

Em estudos feitos por Kamiguti et al(1986) foi observado coagulopatia em muitos

envenenamentos ofiacutedicos Incoagulabilidade sanguiacutenea hemorragia sistecircmica efeitos

colaterais sistecircmicos choque hemorragia intracraniana e pituitaacuteria insuficiecircncia renal

trombose e embolia pulmonar foram agraves principais manifestaccedilotildees apresentadas Uma seacuterie

de componentes presentes nos venenos ofiacutedicos pode ativar o sistema de coagulaccedilatildeo o que

natildeo iraacute necessariamente resultar em trombose Segundo (HUTTON et al 1993) venenos

proacute - coagulantes especialmente botroacutepicos ativam a cascata da coagulaccedilatildeo resultando no

consumo e depleccedilatildeo de fatores da coagulaccedilatildeo tornando o sangue incoagulaacutevel

contribuindo para o aumento da hemorragia A trombocitopenia pode ocorrer o que leva a

um aumento do sangramento (WHITE 2005) O consumo dos fatores da coagulaccedilatildeo reduz

o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas nas paredes dos

vasos (KAMIGUTI 1991) degradando a lamina basal e promovendo a sua ruptura

(MANDELBAUN 1976) ou produzindo lesatildeo direta nas ceacutelulas endoteliais

(GUTIEacuteRREZ 1980)

As principais atividades do veneno das serpentes do gecircnero Bothrops satildeo coagulante

hemorraacutegica e proteoliacutetica (PINHO2001) Os componentes que ativam os fatores da cascata

da coagulaccedilatildeo satildeo classificados em proacute-coagulantes que ativam o fator X ou o fator II da

cascata da coagulaccedilatildeo gerando trombina que hidrolisa o fibrinogecircnio em fibrina e o

componente trombina-siacutemile que hidrolisa fibrinogecircnio em fibrina sem a intervenccedilatildeo da

trombina (SANO-MARTINS 2003) Estes componentes variam de acordo com a espeacutecie da

serpente e suas atividades podem levar a alteraccedilotildees da funccedilatildeo plaquetaacuteria (BRASIL 2001)

Atraveacutes de hemorraginas causam lesatildeo endotelial sistecircmica e trombocitopenia aumenta a

atividade fibrinoliacutetica plasmaacutetica inibe a agregaccedilatildeo secreccedilatildeo e fosforilaccedilatildeo plaquetaacuteria o que

leva a alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea causando assim hemorragias (SANO-MARTINS

2003)

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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65-WHITE J Snake venoms and coagulopathy Toxicon Oxford v 45 p 951-967 2005

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 4: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

Dedico este trabalho aos meus pais Maria de Lourdes e Genival

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus por me permitir cursar o que eu sempre desejei e por ter me ajudado

durante todo este periacuteodo dentro da universidade Apesar das dificuldades surgidas e em meio

ao desacircnimo Deus sempre me deu forccedilas pra continuar

Sou muito agradecida aos meus pais (Lourdes e Genival) por estarem sempre ao meu

lado apoiando e me incentivando a buscar meus ideais pelo carinho compreensatildeo e confianccedila

que depositaram em mim A minha matildee principalmente que muitas vezes sentou ao meu lado

pra aprendermos juntas pela compreensatildeo nos momentos em que natildeo podia ajudaacute-la com o

trabalho de casa por sempre fazer de tudo para me oferecer o melhor Sou grata aos meus

irmatildeos Elaine Elieber Elaiacutesse Elacircnia Elisama pela amizade apoio compreensatildeo e ao meu

sobrinho Felipe por alegrar meus dias Ao meu primo Fernando pela ajuda e forccedila

Agradeccedilo a minha turma 20102 pelos bons e ruins momentos compartilhados de

alegrias de cumplicidade de stress momentos estes que sempre seratildeo lembrados e amizades

que com certeza nunca seratildeo esquecidas Agrave Kamila pela amizade por me escutar quando

precisei desabafar Bel sempre amiga que muitas vezes tambeacutem ouviu meus desabafos e

sempre esteve disposta a ajudar Agrave Carlinda pela amizade sempre nos dando forccedila e

confianccedila mostrando que tudo ia dar certo Agrave Cida pela simplicidade pela atenccedilatildeo pelas

palavras de acircnimo agrave Rita por ser quem eacute amiga carinhosa e por sempre me ligar nos

domingos pelas manhatildes me acordando pra estudar (rsrsr) Agrave Yasmin desastrada (rsrs) mas

sempre simpaacutetica e amiga Kleyde Mayara Boca sempre de bom humor tornando nossas

tardes mais alegres agrave Wallyson pela amizade e forccedila agrave Gustavo pela contribuiccedilatildeo para

realizaccedilatildeo deste trabalho Agradeccedilo a Ione e a Marielza pelos conselhos dados pela

confidecircncia pela sinceridade pela forccedila

Sou grata agrave equipe NEW LAB laboratoacuterio Dr Carlos e Dra Lille por nos abrir

espaccedilo para realizaccedilatildeo da pesquisa e aos teacutecnicos (Hellen Cristina Gilmara Samara Gerli

Neide Edicleacutecia Eacuterika Daniel) pela contribuiccedilatildeo para que este trabalho fosse concluiacutedo

pela amizade pela confianccedila depositada e pelos bons e maus momentos que pude

compartilhar Enfim sou grata a todos que contribuiacuteram pra que eu chegasse ateacute aqui

ldquoSe vocecirc chegou ateacute aqui entatildeo comece a glorificar foi o Senhor quem te sustentou e ateacute o

fim iraacute te sustentarrdquo (Leacuteo Jundi)

AVALIACcedilAtildeO LEUCOCITAacuteRIA E PLAQUETAacuteRIA TEMPOS DE

COAGULACcedilAtildeO E SANGRIA EM INDIVIacuteDUOS ENVENENADOS POR

SERPENTES EM CAMPINA GRANDE PB

RESUMO

Introduccedilatildeo Os Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de

sauacutede puacuteblica negligenciado (KASTURIRATNE et al 2008) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do ponto de

vista meacutedico (BRASIL 2010) As peccedilonhas destas serpentes causam diversos danos ao ser

humano KAMIGUTI et al(1986) O objetivo do presente trabalho eacute avaliar os paracircmetros

hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes atendidos no Hospital de

Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB Material e

meacutetodos Seringa tubos de ensaio papel filtro anticoagulante lanceta cronocircmetro

homogeneizador equipamento automatizado Counter 19 detergente agente hemolisante

soluccedilatildeo diluente e corante tipo Panoacutetico raacutepido I II e III lacircminas microscoacutepio oacuteptico Os

paracircmetros foram avaliados pelo meacutetodo de Duke para obter o tempo de sangria (TS) o

meacutetodo de Lee-white para obter o tempo de Coagulaccedilatildeo (TC) contagens de plaquetas e

leucoacutecitos foram feitas por meio de equipamento automatizado Resultados Foram

analisados um total de doze acidentes ofiacutedicos onde 73 dos acidentes foram causados por

serpentes do gecircnero Bothrops 16 pelo Crotalus e 11 do gecircnero Micrurus De acordo com

os resultados a maioria dos pacientes picados por serpentes do gecircnero Bothrops apresentaram

alteraccedilatildeo no tempo de coagulaccedilatildeo e na contagem de leucoacutecitos Jaacute os pacientes picados por

serpentes do gecircnero Crotalus apresentaram apenas a incoagulabilidade sanguiacutenea O paciente

picado por serpente do gecircnero Micrurus apresentou alteraccedilatildeo no nuacutemero de leucoacutecitos

Conclusatildeo As alteraccedilotildees hemostaacuteticas satildeo caracteriacutesticas laboratorialmente documentaacuteveis

nos acidentes ofiacutedicos Poreacutem novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno

ofiacutedico em humanos causados por serpentes endecircmicas da regiatildeo da Paraiacuteba podem melhorar

a terapecircutica diminuindo a reaccedilatildeo imunoloacutegica atraveacutes da produccedilatildeo de soroterapia mais

especiacutefica e eficiente

PALAVRAS-CHAVE Ofidismo hematologia soroterapia Campina Grande

EVALUATION LEUKOCYTE AND PLATELET CLOTTING TIMES

AND BLEEDING IN INDIVIDUALS POISONED BY SNAKES IN

CAMPINA GRANDE PB

ABSTRACT

Introduction Snakebites occur worldwide providing a neglected public health problem

(KASTURIRATNE et al 2008) In Brazil the main cause of snakebites are the snakes of the

genus Bothrops Crotalus Micrurus Lachesis respectively voted the most important

medical point of view ( BRASIL 2010) The venom of these snakes caused extensive

damage to human KAMIGUTI et al (1986) The objective of this study is to evaluate the

hematological parameters of individuals poisoned by snakes seen in Hospital Emergency and

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB Methods Syringe test tubes

filter paper anticoagulant Lancet stopwatch homogenizer automated equipment 19

Counter detergent Hemolyzing diluent solution and dye type Panoptic fast I II and III

blades optical microscope The parameters were assessed by the Duke method to get the

bleeding time (BT) The method for Lee- White clotting time (CT ) leukocyte and platelet

counts were performed by automated equipment Results A total of twelve snakebites

where 73 of accidents were caused by Bothrops Crotalus by 16 and 11 of the genus

Micrurus were analyzed According to the results the majority of patients bitten by Bothrops

showed abnormalities in coagulation time and leukocyte count Yet patients bitten by snakes

of the genus Crotalus showed only blood incoagulability The patient bitten by snake genus

Micrurus showed a change in the number of leukocytes Conclusion The laboratory

hemostatic abnormalities are documentary features in snakebites However further studies on

hematological effects of poison snake bite in humans caused by endemic snakes of Paraiacuteba

may improve therapeutic decreasing the immune response by producing more specific and

efficient serum therapy

KEYWORDS snakes hematology serum therapy Campina Grande

LISTA DE GRAacuteFICOS E TABELAS

Tabela 1 Gravidade dos acidentes ofiacutedicos e soroterapia recomendada17

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea 18

Graacutefico1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de

2012 a julho de 2013 25

Graacutefico 2Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 25

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops

nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes

do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos dos pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 30

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Micrurus 30

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 A) Fosseta loreal e B) Denticcedilatildeo proteroacuteglifa 15

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda 16

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas escamas Bothrops atrox 16

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico

Micrurus sp 18

SUMAacuteRIO

INTRODUCcedilAtildeO11

OBJETIVOS14

- Objetivos geral14

- Objetivo especifico14

REFERENCIAL TEOacuteRICO15

1- CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE

MEacuteDICO NO BRASIL15

2- TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO 17

3- HEMOSTASIA18

4- LEUCOacuteCITOS19

PROCEDIMETOS METODOLOacuteGICOS 21

-TIPO DE ESTUDO21

-LOCAL DE PESQUISA21

-POPULACcedilAtildeO E AMOSTRA 21

- INSTRUMENTOS DE COLETA DE DADOS 22

- MATERIAL E MEacuteTODOS 22

- PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISES DE DADOS 23

- ASPECTOS EacuteTICOS24

RESULTADOS25

DISCUSSAtildeO31

CONCLUSAtildeO 34

REFEREcircNCIAS35

ANEXOS42

11

INTRODUCcedilAtildeO

Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de sauacutede

puacuteblica negligenciado sendo relevante nas aacutereas rurais dos paiacuteses tropicais e

subtropicais em que satildeo mais frequumlentes e o acesso aos serviccedilos de sauacutede eacute bastante

limitado (KASTURIRATNE et al 2008) Mais de 29 mil acidentes por serpentes

peccedilonhentas satildeo registrados no Brasil a cada ano (SANTrsquoANNA et al 2012) com

letalidade de aproximadamente 045(BARRETO2010) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do

ponto de vista meacutedico (BRASIL 2010)

As serpentes do gecircnero Bothrops se distribuem por todo o territoacuterio brasileiro e satildeo

responsaacuteveis por 90 dos acidentes ofiacutedicos peccedilonhentos no paiacutes com cerca de 18 mil

acidentes por ano e letalidade de aproximadamente 03 (BRASIL2001) contando com

25 espeacutecies (LEAtildeO2012) Satildeo conhecidas popularmente como jararaca jararacuccedilu

urutu-cruzeiro caiccedilara comboia patrona surucucurana entre outros nomes (BRASIL

2001)

O gecircnero Crotalus se distribui em todo territoacuterio nacional habita os cerrados do

Brasil regiotildees aacuteridas e semiaacuteridas do Nordeste os campos e aacutereas abertas do Sul

Sudeste e Norte O gecircnero apresenta apenas uma uacutenica espeacutecie Crotalus durissus com

cinco subespeacutecies (MELGAREJO 2009) Satildeo conhecidas popularmente por cascavel

maracaacute boicininga maracamboacuteia cascavel quatro - ventas entre outras Os acidentes

crotaacutelicos satildeo responsaacuteveis por 77dos acidentes ofiacutedicos no paiacutes com 187 de

letalidade (BRASIL 2001)

O gecircnero Micrurus eacute distribuiacutedo por todo territoacuterio nacional com total de 18

espeacutecies Satildeo conhecidas por coral coral-verdadeira ou boicoraacute (BRASIL 2001) A

incidecircncia de acidentes causados por este gecircnero eacute de cerca de 05 por

ano(MELGAREJO2009)E o 4ordm e uacuteltimo gecircnero de importacircncia medica no Brasil eacute o

Lachesis este eacute responsaacutevel por 11 dos acidentes ofiacutedicos por ano no Brasil Habitam

aacutereas florestais como Amazocircnia Mata Atlacircntica e algumas matas uacutemidas do

Nordeste(BRASIL2003)

As peccedilonhas de serpentes satildeo misturas complexas de proteiacutenas que possuem uma

grande variedade de atividades bioloacutegicas com accedilotildees fisioloacutegicas neurotransmissoras e

12

hematoloacutegicas (CAPRONI 2009 SILVA 2009) Suas diferentes composiccedilotildees quiacutemicas

refletem em variaccedilotildees das propriedades bioloacutegicas toxicidade e caracteriacutesticas

farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas (SILVA 2009) Essas variaccedilotildees podem ser

influenciadas pelo haacutebito alimentar pelo tamanho e idade das serpentes ou pelo clima e

eacutepoca do ano (CABRAL 2011) A diversidade de componentes presentes nos venenos

ofiacutedicos apresenta uma uacutenica funccedilatildeo que eacute a de mobilizar a presa e que satildeo usadas

defensivamente contra o homem (KAMIGUTI et al1986 JENNINGS et al2005)

Em estudos feitos por Kamiguti et al(1986) foi observado coagulopatia em muitos

envenenamentos ofiacutedicos Incoagulabilidade sanguiacutenea hemorragia sistecircmica efeitos

colaterais sistecircmicos choque hemorragia intracraniana e pituitaacuteria insuficiecircncia renal

trombose e embolia pulmonar foram agraves principais manifestaccedilotildees apresentadas Uma seacuterie

de componentes presentes nos venenos ofiacutedicos pode ativar o sistema de coagulaccedilatildeo o que

natildeo iraacute necessariamente resultar em trombose Segundo (HUTTON et al 1993) venenos

proacute - coagulantes especialmente botroacutepicos ativam a cascata da coagulaccedilatildeo resultando no

consumo e depleccedilatildeo de fatores da coagulaccedilatildeo tornando o sangue incoagulaacutevel

contribuindo para o aumento da hemorragia A trombocitopenia pode ocorrer o que leva a

um aumento do sangramento (WHITE 2005) O consumo dos fatores da coagulaccedilatildeo reduz

o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas nas paredes dos

vasos (KAMIGUTI 1991) degradando a lamina basal e promovendo a sua ruptura

(MANDELBAUN 1976) ou produzindo lesatildeo direta nas ceacutelulas endoteliais

(GUTIEacuteRREZ 1980)

As principais atividades do veneno das serpentes do gecircnero Bothrops satildeo coagulante

hemorraacutegica e proteoliacutetica (PINHO2001) Os componentes que ativam os fatores da cascata

da coagulaccedilatildeo satildeo classificados em proacute-coagulantes que ativam o fator X ou o fator II da

cascata da coagulaccedilatildeo gerando trombina que hidrolisa o fibrinogecircnio em fibrina e o

componente trombina-siacutemile que hidrolisa fibrinogecircnio em fibrina sem a intervenccedilatildeo da

trombina (SANO-MARTINS 2003) Estes componentes variam de acordo com a espeacutecie da

serpente e suas atividades podem levar a alteraccedilotildees da funccedilatildeo plaquetaacuteria (BRASIL 2001)

Atraveacutes de hemorraginas causam lesatildeo endotelial sistecircmica e trombocitopenia aumenta a

atividade fibrinoliacutetica plasmaacutetica inibe a agregaccedilatildeo secreccedilatildeo e fosforilaccedilatildeo plaquetaacuteria o que

leva a alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea causando assim hemorragias (SANO-MARTINS

2003)

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 5: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

AGRADECIMENTOS

Agradeccedilo a Deus por me permitir cursar o que eu sempre desejei e por ter me ajudado

durante todo este periacuteodo dentro da universidade Apesar das dificuldades surgidas e em meio

ao desacircnimo Deus sempre me deu forccedilas pra continuar

Sou muito agradecida aos meus pais (Lourdes e Genival) por estarem sempre ao meu

lado apoiando e me incentivando a buscar meus ideais pelo carinho compreensatildeo e confianccedila

que depositaram em mim A minha matildee principalmente que muitas vezes sentou ao meu lado

pra aprendermos juntas pela compreensatildeo nos momentos em que natildeo podia ajudaacute-la com o

trabalho de casa por sempre fazer de tudo para me oferecer o melhor Sou grata aos meus

irmatildeos Elaine Elieber Elaiacutesse Elacircnia Elisama pela amizade apoio compreensatildeo e ao meu

sobrinho Felipe por alegrar meus dias Ao meu primo Fernando pela ajuda e forccedila

Agradeccedilo a minha turma 20102 pelos bons e ruins momentos compartilhados de

alegrias de cumplicidade de stress momentos estes que sempre seratildeo lembrados e amizades

que com certeza nunca seratildeo esquecidas Agrave Kamila pela amizade por me escutar quando

precisei desabafar Bel sempre amiga que muitas vezes tambeacutem ouviu meus desabafos e

sempre esteve disposta a ajudar Agrave Carlinda pela amizade sempre nos dando forccedila e

confianccedila mostrando que tudo ia dar certo Agrave Cida pela simplicidade pela atenccedilatildeo pelas

palavras de acircnimo agrave Rita por ser quem eacute amiga carinhosa e por sempre me ligar nos

domingos pelas manhatildes me acordando pra estudar (rsrsr) Agrave Yasmin desastrada (rsrs) mas

sempre simpaacutetica e amiga Kleyde Mayara Boca sempre de bom humor tornando nossas

tardes mais alegres agrave Wallyson pela amizade e forccedila agrave Gustavo pela contribuiccedilatildeo para

realizaccedilatildeo deste trabalho Agradeccedilo a Ione e a Marielza pelos conselhos dados pela

confidecircncia pela sinceridade pela forccedila

Sou grata agrave equipe NEW LAB laboratoacuterio Dr Carlos e Dra Lille por nos abrir

espaccedilo para realizaccedilatildeo da pesquisa e aos teacutecnicos (Hellen Cristina Gilmara Samara Gerli

Neide Edicleacutecia Eacuterika Daniel) pela contribuiccedilatildeo para que este trabalho fosse concluiacutedo

pela amizade pela confianccedila depositada e pelos bons e maus momentos que pude

compartilhar Enfim sou grata a todos que contribuiacuteram pra que eu chegasse ateacute aqui

ldquoSe vocecirc chegou ateacute aqui entatildeo comece a glorificar foi o Senhor quem te sustentou e ateacute o

fim iraacute te sustentarrdquo (Leacuteo Jundi)

AVALIACcedilAtildeO LEUCOCITAacuteRIA E PLAQUETAacuteRIA TEMPOS DE

COAGULACcedilAtildeO E SANGRIA EM INDIVIacuteDUOS ENVENENADOS POR

SERPENTES EM CAMPINA GRANDE PB

RESUMO

Introduccedilatildeo Os Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de

sauacutede puacuteblica negligenciado (KASTURIRATNE et al 2008) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do ponto de

vista meacutedico (BRASIL 2010) As peccedilonhas destas serpentes causam diversos danos ao ser

humano KAMIGUTI et al(1986) O objetivo do presente trabalho eacute avaliar os paracircmetros

hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes atendidos no Hospital de

Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB Material e

meacutetodos Seringa tubos de ensaio papel filtro anticoagulante lanceta cronocircmetro

homogeneizador equipamento automatizado Counter 19 detergente agente hemolisante

soluccedilatildeo diluente e corante tipo Panoacutetico raacutepido I II e III lacircminas microscoacutepio oacuteptico Os

paracircmetros foram avaliados pelo meacutetodo de Duke para obter o tempo de sangria (TS) o

meacutetodo de Lee-white para obter o tempo de Coagulaccedilatildeo (TC) contagens de plaquetas e

leucoacutecitos foram feitas por meio de equipamento automatizado Resultados Foram

analisados um total de doze acidentes ofiacutedicos onde 73 dos acidentes foram causados por

serpentes do gecircnero Bothrops 16 pelo Crotalus e 11 do gecircnero Micrurus De acordo com

os resultados a maioria dos pacientes picados por serpentes do gecircnero Bothrops apresentaram

alteraccedilatildeo no tempo de coagulaccedilatildeo e na contagem de leucoacutecitos Jaacute os pacientes picados por

serpentes do gecircnero Crotalus apresentaram apenas a incoagulabilidade sanguiacutenea O paciente

picado por serpente do gecircnero Micrurus apresentou alteraccedilatildeo no nuacutemero de leucoacutecitos

Conclusatildeo As alteraccedilotildees hemostaacuteticas satildeo caracteriacutesticas laboratorialmente documentaacuteveis

nos acidentes ofiacutedicos Poreacutem novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno

ofiacutedico em humanos causados por serpentes endecircmicas da regiatildeo da Paraiacuteba podem melhorar

a terapecircutica diminuindo a reaccedilatildeo imunoloacutegica atraveacutes da produccedilatildeo de soroterapia mais

especiacutefica e eficiente

PALAVRAS-CHAVE Ofidismo hematologia soroterapia Campina Grande

EVALUATION LEUKOCYTE AND PLATELET CLOTTING TIMES

AND BLEEDING IN INDIVIDUALS POISONED BY SNAKES IN

CAMPINA GRANDE PB

ABSTRACT

Introduction Snakebites occur worldwide providing a neglected public health problem

(KASTURIRATNE et al 2008) In Brazil the main cause of snakebites are the snakes of the

genus Bothrops Crotalus Micrurus Lachesis respectively voted the most important

medical point of view ( BRASIL 2010) The venom of these snakes caused extensive

damage to human KAMIGUTI et al (1986) The objective of this study is to evaluate the

hematological parameters of individuals poisoned by snakes seen in Hospital Emergency and

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB Methods Syringe test tubes

filter paper anticoagulant Lancet stopwatch homogenizer automated equipment 19

Counter detergent Hemolyzing diluent solution and dye type Panoptic fast I II and III

blades optical microscope The parameters were assessed by the Duke method to get the

bleeding time (BT) The method for Lee- White clotting time (CT ) leukocyte and platelet

counts were performed by automated equipment Results A total of twelve snakebites

where 73 of accidents were caused by Bothrops Crotalus by 16 and 11 of the genus

Micrurus were analyzed According to the results the majority of patients bitten by Bothrops

showed abnormalities in coagulation time and leukocyte count Yet patients bitten by snakes

of the genus Crotalus showed only blood incoagulability The patient bitten by snake genus

Micrurus showed a change in the number of leukocytes Conclusion The laboratory

hemostatic abnormalities are documentary features in snakebites However further studies on

hematological effects of poison snake bite in humans caused by endemic snakes of Paraiacuteba

may improve therapeutic decreasing the immune response by producing more specific and

efficient serum therapy

KEYWORDS snakes hematology serum therapy Campina Grande

LISTA DE GRAacuteFICOS E TABELAS

Tabela 1 Gravidade dos acidentes ofiacutedicos e soroterapia recomendada17

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea 18

Graacutefico1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de

2012 a julho de 2013 25

Graacutefico 2Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 25

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops

nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes

do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos dos pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 30

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Micrurus 30

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 A) Fosseta loreal e B) Denticcedilatildeo proteroacuteglifa 15

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda 16

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas escamas Bothrops atrox 16

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico

Micrurus sp 18

SUMAacuteRIO

INTRODUCcedilAtildeO11

OBJETIVOS14

- Objetivos geral14

- Objetivo especifico14

REFERENCIAL TEOacuteRICO15

1- CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE

MEacuteDICO NO BRASIL15

2- TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO 17

3- HEMOSTASIA18

4- LEUCOacuteCITOS19

PROCEDIMETOS METODOLOacuteGICOS 21

-TIPO DE ESTUDO21

-LOCAL DE PESQUISA21

-POPULACcedilAtildeO E AMOSTRA 21

- INSTRUMENTOS DE COLETA DE DADOS 22

- MATERIAL E MEacuteTODOS 22

- PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISES DE DADOS 23

- ASPECTOS EacuteTICOS24

RESULTADOS25

DISCUSSAtildeO31

CONCLUSAtildeO 34

REFEREcircNCIAS35

ANEXOS42

11

INTRODUCcedilAtildeO

Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de sauacutede

puacuteblica negligenciado sendo relevante nas aacutereas rurais dos paiacuteses tropicais e

subtropicais em que satildeo mais frequumlentes e o acesso aos serviccedilos de sauacutede eacute bastante

limitado (KASTURIRATNE et al 2008) Mais de 29 mil acidentes por serpentes

peccedilonhentas satildeo registrados no Brasil a cada ano (SANTrsquoANNA et al 2012) com

letalidade de aproximadamente 045(BARRETO2010) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do

ponto de vista meacutedico (BRASIL 2010)

As serpentes do gecircnero Bothrops se distribuem por todo o territoacuterio brasileiro e satildeo

responsaacuteveis por 90 dos acidentes ofiacutedicos peccedilonhentos no paiacutes com cerca de 18 mil

acidentes por ano e letalidade de aproximadamente 03 (BRASIL2001) contando com

25 espeacutecies (LEAtildeO2012) Satildeo conhecidas popularmente como jararaca jararacuccedilu

urutu-cruzeiro caiccedilara comboia patrona surucucurana entre outros nomes (BRASIL

2001)

O gecircnero Crotalus se distribui em todo territoacuterio nacional habita os cerrados do

Brasil regiotildees aacuteridas e semiaacuteridas do Nordeste os campos e aacutereas abertas do Sul

Sudeste e Norte O gecircnero apresenta apenas uma uacutenica espeacutecie Crotalus durissus com

cinco subespeacutecies (MELGAREJO 2009) Satildeo conhecidas popularmente por cascavel

maracaacute boicininga maracamboacuteia cascavel quatro - ventas entre outras Os acidentes

crotaacutelicos satildeo responsaacuteveis por 77dos acidentes ofiacutedicos no paiacutes com 187 de

letalidade (BRASIL 2001)

O gecircnero Micrurus eacute distribuiacutedo por todo territoacuterio nacional com total de 18

espeacutecies Satildeo conhecidas por coral coral-verdadeira ou boicoraacute (BRASIL 2001) A

incidecircncia de acidentes causados por este gecircnero eacute de cerca de 05 por

ano(MELGAREJO2009)E o 4ordm e uacuteltimo gecircnero de importacircncia medica no Brasil eacute o

Lachesis este eacute responsaacutevel por 11 dos acidentes ofiacutedicos por ano no Brasil Habitam

aacutereas florestais como Amazocircnia Mata Atlacircntica e algumas matas uacutemidas do

Nordeste(BRASIL2003)

As peccedilonhas de serpentes satildeo misturas complexas de proteiacutenas que possuem uma

grande variedade de atividades bioloacutegicas com accedilotildees fisioloacutegicas neurotransmissoras e

12

hematoloacutegicas (CAPRONI 2009 SILVA 2009) Suas diferentes composiccedilotildees quiacutemicas

refletem em variaccedilotildees das propriedades bioloacutegicas toxicidade e caracteriacutesticas

farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas (SILVA 2009) Essas variaccedilotildees podem ser

influenciadas pelo haacutebito alimentar pelo tamanho e idade das serpentes ou pelo clima e

eacutepoca do ano (CABRAL 2011) A diversidade de componentes presentes nos venenos

ofiacutedicos apresenta uma uacutenica funccedilatildeo que eacute a de mobilizar a presa e que satildeo usadas

defensivamente contra o homem (KAMIGUTI et al1986 JENNINGS et al2005)

Em estudos feitos por Kamiguti et al(1986) foi observado coagulopatia em muitos

envenenamentos ofiacutedicos Incoagulabilidade sanguiacutenea hemorragia sistecircmica efeitos

colaterais sistecircmicos choque hemorragia intracraniana e pituitaacuteria insuficiecircncia renal

trombose e embolia pulmonar foram agraves principais manifestaccedilotildees apresentadas Uma seacuterie

de componentes presentes nos venenos ofiacutedicos pode ativar o sistema de coagulaccedilatildeo o que

natildeo iraacute necessariamente resultar em trombose Segundo (HUTTON et al 1993) venenos

proacute - coagulantes especialmente botroacutepicos ativam a cascata da coagulaccedilatildeo resultando no

consumo e depleccedilatildeo de fatores da coagulaccedilatildeo tornando o sangue incoagulaacutevel

contribuindo para o aumento da hemorragia A trombocitopenia pode ocorrer o que leva a

um aumento do sangramento (WHITE 2005) O consumo dos fatores da coagulaccedilatildeo reduz

o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas nas paredes dos

vasos (KAMIGUTI 1991) degradando a lamina basal e promovendo a sua ruptura

(MANDELBAUN 1976) ou produzindo lesatildeo direta nas ceacutelulas endoteliais

(GUTIEacuteRREZ 1980)

As principais atividades do veneno das serpentes do gecircnero Bothrops satildeo coagulante

hemorraacutegica e proteoliacutetica (PINHO2001) Os componentes que ativam os fatores da cascata

da coagulaccedilatildeo satildeo classificados em proacute-coagulantes que ativam o fator X ou o fator II da

cascata da coagulaccedilatildeo gerando trombina que hidrolisa o fibrinogecircnio em fibrina e o

componente trombina-siacutemile que hidrolisa fibrinogecircnio em fibrina sem a intervenccedilatildeo da

trombina (SANO-MARTINS 2003) Estes componentes variam de acordo com a espeacutecie da

serpente e suas atividades podem levar a alteraccedilotildees da funccedilatildeo plaquetaacuteria (BRASIL 2001)

Atraveacutes de hemorraginas causam lesatildeo endotelial sistecircmica e trombocitopenia aumenta a

atividade fibrinoliacutetica plasmaacutetica inibe a agregaccedilatildeo secreccedilatildeo e fosforilaccedilatildeo plaquetaacuteria o que

leva a alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea causando assim hemorragias (SANO-MARTINS

2003)

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 6: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

ldquoSe vocecirc chegou ateacute aqui entatildeo comece a glorificar foi o Senhor quem te sustentou e ateacute o

fim iraacute te sustentarrdquo (Leacuteo Jundi)

AVALIACcedilAtildeO LEUCOCITAacuteRIA E PLAQUETAacuteRIA TEMPOS DE

COAGULACcedilAtildeO E SANGRIA EM INDIVIacuteDUOS ENVENENADOS POR

SERPENTES EM CAMPINA GRANDE PB

RESUMO

Introduccedilatildeo Os Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de

sauacutede puacuteblica negligenciado (KASTURIRATNE et al 2008) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do ponto de

vista meacutedico (BRASIL 2010) As peccedilonhas destas serpentes causam diversos danos ao ser

humano KAMIGUTI et al(1986) O objetivo do presente trabalho eacute avaliar os paracircmetros

hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes atendidos no Hospital de

Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB Material e

meacutetodos Seringa tubos de ensaio papel filtro anticoagulante lanceta cronocircmetro

homogeneizador equipamento automatizado Counter 19 detergente agente hemolisante

soluccedilatildeo diluente e corante tipo Panoacutetico raacutepido I II e III lacircminas microscoacutepio oacuteptico Os

paracircmetros foram avaliados pelo meacutetodo de Duke para obter o tempo de sangria (TS) o

meacutetodo de Lee-white para obter o tempo de Coagulaccedilatildeo (TC) contagens de plaquetas e

leucoacutecitos foram feitas por meio de equipamento automatizado Resultados Foram

analisados um total de doze acidentes ofiacutedicos onde 73 dos acidentes foram causados por

serpentes do gecircnero Bothrops 16 pelo Crotalus e 11 do gecircnero Micrurus De acordo com

os resultados a maioria dos pacientes picados por serpentes do gecircnero Bothrops apresentaram

alteraccedilatildeo no tempo de coagulaccedilatildeo e na contagem de leucoacutecitos Jaacute os pacientes picados por

serpentes do gecircnero Crotalus apresentaram apenas a incoagulabilidade sanguiacutenea O paciente

picado por serpente do gecircnero Micrurus apresentou alteraccedilatildeo no nuacutemero de leucoacutecitos

Conclusatildeo As alteraccedilotildees hemostaacuteticas satildeo caracteriacutesticas laboratorialmente documentaacuteveis

nos acidentes ofiacutedicos Poreacutem novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno

ofiacutedico em humanos causados por serpentes endecircmicas da regiatildeo da Paraiacuteba podem melhorar

a terapecircutica diminuindo a reaccedilatildeo imunoloacutegica atraveacutes da produccedilatildeo de soroterapia mais

especiacutefica e eficiente

PALAVRAS-CHAVE Ofidismo hematologia soroterapia Campina Grande

EVALUATION LEUKOCYTE AND PLATELET CLOTTING TIMES

AND BLEEDING IN INDIVIDUALS POISONED BY SNAKES IN

CAMPINA GRANDE PB

ABSTRACT

Introduction Snakebites occur worldwide providing a neglected public health problem

(KASTURIRATNE et al 2008) In Brazil the main cause of snakebites are the snakes of the

genus Bothrops Crotalus Micrurus Lachesis respectively voted the most important

medical point of view ( BRASIL 2010) The venom of these snakes caused extensive

damage to human KAMIGUTI et al (1986) The objective of this study is to evaluate the

hematological parameters of individuals poisoned by snakes seen in Hospital Emergency and

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB Methods Syringe test tubes

filter paper anticoagulant Lancet stopwatch homogenizer automated equipment 19

Counter detergent Hemolyzing diluent solution and dye type Panoptic fast I II and III

blades optical microscope The parameters were assessed by the Duke method to get the

bleeding time (BT) The method for Lee- White clotting time (CT ) leukocyte and platelet

counts were performed by automated equipment Results A total of twelve snakebites

where 73 of accidents were caused by Bothrops Crotalus by 16 and 11 of the genus

Micrurus were analyzed According to the results the majority of patients bitten by Bothrops

showed abnormalities in coagulation time and leukocyte count Yet patients bitten by snakes

of the genus Crotalus showed only blood incoagulability The patient bitten by snake genus

Micrurus showed a change in the number of leukocytes Conclusion The laboratory

hemostatic abnormalities are documentary features in snakebites However further studies on

hematological effects of poison snake bite in humans caused by endemic snakes of Paraiacuteba

may improve therapeutic decreasing the immune response by producing more specific and

efficient serum therapy

KEYWORDS snakes hematology serum therapy Campina Grande

LISTA DE GRAacuteFICOS E TABELAS

Tabela 1 Gravidade dos acidentes ofiacutedicos e soroterapia recomendada17

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea 18

Graacutefico1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de

2012 a julho de 2013 25

Graacutefico 2Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 25

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops

nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes

do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos dos pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 30

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Micrurus 30

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 A) Fosseta loreal e B) Denticcedilatildeo proteroacuteglifa 15

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda 16

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas escamas Bothrops atrox 16

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico

Micrurus sp 18

SUMAacuteRIO

INTRODUCcedilAtildeO11

OBJETIVOS14

- Objetivos geral14

- Objetivo especifico14

REFERENCIAL TEOacuteRICO15

1- CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE

MEacuteDICO NO BRASIL15

2- TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO 17

3- HEMOSTASIA18

4- LEUCOacuteCITOS19

PROCEDIMETOS METODOLOacuteGICOS 21

-TIPO DE ESTUDO21

-LOCAL DE PESQUISA21

-POPULACcedilAtildeO E AMOSTRA 21

- INSTRUMENTOS DE COLETA DE DADOS 22

- MATERIAL E MEacuteTODOS 22

- PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISES DE DADOS 23

- ASPECTOS EacuteTICOS24

RESULTADOS25

DISCUSSAtildeO31

CONCLUSAtildeO 34

REFEREcircNCIAS35

ANEXOS42

11

INTRODUCcedilAtildeO

Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de sauacutede

puacuteblica negligenciado sendo relevante nas aacutereas rurais dos paiacuteses tropicais e

subtropicais em que satildeo mais frequumlentes e o acesso aos serviccedilos de sauacutede eacute bastante

limitado (KASTURIRATNE et al 2008) Mais de 29 mil acidentes por serpentes

peccedilonhentas satildeo registrados no Brasil a cada ano (SANTrsquoANNA et al 2012) com

letalidade de aproximadamente 045(BARRETO2010) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do

ponto de vista meacutedico (BRASIL 2010)

As serpentes do gecircnero Bothrops se distribuem por todo o territoacuterio brasileiro e satildeo

responsaacuteveis por 90 dos acidentes ofiacutedicos peccedilonhentos no paiacutes com cerca de 18 mil

acidentes por ano e letalidade de aproximadamente 03 (BRASIL2001) contando com

25 espeacutecies (LEAtildeO2012) Satildeo conhecidas popularmente como jararaca jararacuccedilu

urutu-cruzeiro caiccedilara comboia patrona surucucurana entre outros nomes (BRASIL

2001)

O gecircnero Crotalus se distribui em todo territoacuterio nacional habita os cerrados do

Brasil regiotildees aacuteridas e semiaacuteridas do Nordeste os campos e aacutereas abertas do Sul

Sudeste e Norte O gecircnero apresenta apenas uma uacutenica espeacutecie Crotalus durissus com

cinco subespeacutecies (MELGAREJO 2009) Satildeo conhecidas popularmente por cascavel

maracaacute boicininga maracamboacuteia cascavel quatro - ventas entre outras Os acidentes

crotaacutelicos satildeo responsaacuteveis por 77dos acidentes ofiacutedicos no paiacutes com 187 de

letalidade (BRASIL 2001)

O gecircnero Micrurus eacute distribuiacutedo por todo territoacuterio nacional com total de 18

espeacutecies Satildeo conhecidas por coral coral-verdadeira ou boicoraacute (BRASIL 2001) A

incidecircncia de acidentes causados por este gecircnero eacute de cerca de 05 por

ano(MELGAREJO2009)E o 4ordm e uacuteltimo gecircnero de importacircncia medica no Brasil eacute o

Lachesis este eacute responsaacutevel por 11 dos acidentes ofiacutedicos por ano no Brasil Habitam

aacutereas florestais como Amazocircnia Mata Atlacircntica e algumas matas uacutemidas do

Nordeste(BRASIL2003)

As peccedilonhas de serpentes satildeo misturas complexas de proteiacutenas que possuem uma

grande variedade de atividades bioloacutegicas com accedilotildees fisioloacutegicas neurotransmissoras e

12

hematoloacutegicas (CAPRONI 2009 SILVA 2009) Suas diferentes composiccedilotildees quiacutemicas

refletem em variaccedilotildees das propriedades bioloacutegicas toxicidade e caracteriacutesticas

farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas (SILVA 2009) Essas variaccedilotildees podem ser

influenciadas pelo haacutebito alimentar pelo tamanho e idade das serpentes ou pelo clima e

eacutepoca do ano (CABRAL 2011) A diversidade de componentes presentes nos venenos

ofiacutedicos apresenta uma uacutenica funccedilatildeo que eacute a de mobilizar a presa e que satildeo usadas

defensivamente contra o homem (KAMIGUTI et al1986 JENNINGS et al2005)

Em estudos feitos por Kamiguti et al(1986) foi observado coagulopatia em muitos

envenenamentos ofiacutedicos Incoagulabilidade sanguiacutenea hemorragia sistecircmica efeitos

colaterais sistecircmicos choque hemorragia intracraniana e pituitaacuteria insuficiecircncia renal

trombose e embolia pulmonar foram agraves principais manifestaccedilotildees apresentadas Uma seacuterie

de componentes presentes nos venenos ofiacutedicos pode ativar o sistema de coagulaccedilatildeo o que

natildeo iraacute necessariamente resultar em trombose Segundo (HUTTON et al 1993) venenos

proacute - coagulantes especialmente botroacutepicos ativam a cascata da coagulaccedilatildeo resultando no

consumo e depleccedilatildeo de fatores da coagulaccedilatildeo tornando o sangue incoagulaacutevel

contribuindo para o aumento da hemorragia A trombocitopenia pode ocorrer o que leva a

um aumento do sangramento (WHITE 2005) O consumo dos fatores da coagulaccedilatildeo reduz

o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas nas paredes dos

vasos (KAMIGUTI 1991) degradando a lamina basal e promovendo a sua ruptura

(MANDELBAUN 1976) ou produzindo lesatildeo direta nas ceacutelulas endoteliais

(GUTIEacuteRREZ 1980)

As principais atividades do veneno das serpentes do gecircnero Bothrops satildeo coagulante

hemorraacutegica e proteoliacutetica (PINHO2001) Os componentes que ativam os fatores da cascata

da coagulaccedilatildeo satildeo classificados em proacute-coagulantes que ativam o fator X ou o fator II da

cascata da coagulaccedilatildeo gerando trombina que hidrolisa o fibrinogecircnio em fibrina e o

componente trombina-siacutemile que hidrolisa fibrinogecircnio em fibrina sem a intervenccedilatildeo da

trombina (SANO-MARTINS 2003) Estes componentes variam de acordo com a espeacutecie da

serpente e suas atividades podem levar a alteraccedilotildees da funccedilatildeo plaquetaacuteria (BRASIL 2001)

Atraveacutes de hemorraginas causam lesatildeo endotelial sistecircmica e trombocitopenia aumenta a

atividade fibrinoliacutetica plasmaacutetica inibe a agregaccedilatildeo secreccedilatildeo e fosforilaccedilatildeo plaquetaacuteria o que

leva a alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea causando assim hemorragias (SANO-MARTINS

2003)

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 7: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

AVALIACcedilAtildeO LEUCOCITAacuteRIA E PLAQUETAacuteRIA TEMPOS DE

COAGULACcedilAtildeO E SANGRIA EM INDIVIacuteDUOS ENVENENADOS POR

SERPENTES EM CAMPINA GRANDE PB

RESUMO

Introduccedilatildeo Os Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de

sauacutede puacuteblica negligenciado (KASTURIRATNE et al 2008) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do ponto de

vista meacutedico (BRASIL 2010) As peccedilonhas destas serpentes causam diversos danos ao ser

humano KAMIGUTI et al(1986) O objetivo do presente trabalho eacute avaliar os paracircmetros

hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes atendidos no Hospital de

Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB Material e

meacutetodos Seringa tubos de ensaio papel filtro anticoagulante lanceta cronocircmetro

homogeneizador equipamento automatizado Counter 19 detergente agente hemolisante

soluccedilatildeo diluente e corante tipo Panoacutetico raacutepido I II e III lacircminas microscoacutepio oacuteptico Os

paracircmetros foram avaliados pelo meacutetodo de Duke para obter o tempo de sangria (TS) o

meacutetodo de Lee-white para obter o tempo de Coagulaccedilatildeo (TC) contagens de plaquetas e

leucoacutecitos foram feitas por meio de equipamento automatizado Resultados Foram

analisados um total de doze acidentes ofiacutedicos onde 73 dos acidentes foram causados por

serpentes do gecircnero Bothrops 16 pelo Crotalus e 11 do gecircnero Micrurus De acordo com

os resultados a maioria dos pacientes picados por serpentes do gecircnero Bothrops apresentaram

alteraccedilatildeo no tempo de coagulaccedilatildeo e na contagem de leucoacutecitos Jaacute os pacientes picados por

serpentes do gecircnero Crotalus apresentaram apenas a incoagulabilidade sanguiacutenea O paciente

picado por serpente do gecircnero Micrurus apresentou alteraccedilatildeo no nuacutemero de leucoacutecitos

Conclusatildeo As alteraccedilotildees hemostaacuteticas satildeo caracteriacutesticas laboratorialmente documentaacuteveis

nos acidentes ofiacutedicos Poreacutem novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno

ofiacutedico em humanos causados por serpentes endecircmicas da regiatildeo da Paraiacuteba podem melhorar

a terapecircutica diminuindo a reaccedilatildeo imunoloacutegica atraveacutes da produccedilatildeo de soroterapia mais

especiacutefica e eficiente

PALAVRAS-CHAVE Ofidismo hematologia soroterapia Campina Grande

EVALUATION LEUKOCYTE AND PLATELET CLOTTING TIMES

AND BLEEDING IN INDIVIDUALS POISONED BY SNAKES IN

CAMPINA GRANDE PB

ABSTRACT

Introduction Snakebites occur worldwide providing a neglected public health problem

(KASTURIRATNE et al 2008) In Brazil the main cause of snakebites are the snakes of the

genus Bothrops Crotalus Micrurus Lachesis respectively voted the most important

medical point of view ( BRASIL 2010) The venom of these snakes caused extensive

damage to human KAMIGUTI et al (1986) The objective of this study is to evaluate the

hematological parameters of individuals poisoned by snakes seen in Hospital Emergency and

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB Methods Syringe test tubes

filter paper anticoagulant Lancet stopwatch homogenizer automated equipment 19

Counter detergent Hemolyzing diluent solution and dye type Panoptic fast I II and III

blades optical microscope The parameters were assessed by the Duke method to get the

bleeding time (BT) The method for Lee- White clotting time (CT ) leukocyte and platelet

counts were performed by automated equipment Results A total of twelve snakebites

where 73 of accidents were caused by Bothrops Crotalus by 16 and 11 of the genus

Micrurus were analyzed According to the results the majority of patients bitten by Bothrops

showed abnormalities in coagulation time and leukocyte count Yet patients bitten by snakes

of the genus Crotalus showed only blood incoagulability The patient bitten by snake genus

Micrurus showed a change in the number of leukocytes Conclusion The laboratory

hemostatic abnormalities are documentary features in snakebites However further studies on

hematological effects of poison snake bite in humans caused by endemic snakes of Paraiacuteba

may improve therapeutic decreasing the immune response by producing more specific and

efficient serum therapy

KEYWORDS snakes hematology serum therapy Campina Grande

LISTA DE GRAacuteFICOS E TABELAS

Tabela 1 Gravidade dos acidentes ofiacutedicos e soroterapia recomendada17

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea 18

Graacutefico1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de

2012 a julho de 2013 25

Graacutefico 2Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 25

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops

nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes

do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos dos pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 30

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Micrurus 30

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 A) Fosseta loreal e B) Denticcedilatildeo proteroacuteglifa 15

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda 16

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas escamas Bothrops atrox 16

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico

Micrurus sp 18

SUMAacuteRIO

INTRODUCcedilAtildeO11

OBJETIVOS14

- Objetivos geral14

- Objetivo especifico14

REFERENCIAL TEOacuteRICO15

1- CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE

MEacuteDICO NO BRASIL15

2- TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO 17

3- HEMOSTASIA18

4- LEUCOacuteCITOS19

PROCEDIMETOS METODOLOacuteGICOS 21

-TIPO DE ESTUDO21

-LOCAL DE PESQUISA21

-POPULACcedilAtildeO E AMOSTRA 21

- INSTRUMENTOS DE COLETA DE DADOS 22

- MATERIAL E MEacuteTODOS 22

- PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISES DE DADOS 23

- ASPECTOS EacuteTICOS24

RESULTADOS25

DISCUSSAtildeO31

CONCLUSAtildeO 34

REFEREcircNCIAS35

ANEXOS42

11

INTRODUCcedilAtildeO

Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de sauacutede

puacuteblica negligenciado sendo relevante nas aacutereas rurais dos paiacuteses tropicais e

subtropicais em que satildeo mais frequumlentes e o acesso aos serviccedilos de sauacutede eacute bastante

limitado (KASTURIRATNE et al 2008) Mais de 29 mil acidentes por serpentes

peccedilonhentas satildeo registrados no Brasil a cada ano (SANTrsquoANNA et al 2012) com

letalidade de aproximadamente 045(BARRETO2010) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do

ponto de vista meacutedico (BRASIL 2010)

As serpentes do gecircnero Bothrops se distribuem por todo o territoacuterio brasileiro e satildeo

responsaacuteveis por 90 dos acidentes ofiacutedicos peccedilonhentos no paiacutes com cerca de 18 mil

acidentes por ano e letalidade de aproximadamente 03 (BRASIL2001) contando com

25 espeacutecies (LEAtildeO2012) Satildeo conhecidas popularmente como jararaca jararacuccedilu

urutu-cruzeiro caiccedilara comboia patrona surucucurana entre outros nomes (BRASIL

2001)

O gecircnero Crotalus se distribui em todo territoacuterio nacional habita os cerrados do

Brasil regiotildees aacuteridas e semiaacuteridas do Nordeste os campos e aacutereas abertas do Sul

Sudeste e Norte O gecircnero apresenta apenas uma uacutenica espeacutecie Crotalus durissus com

cinco subespeacutecies (MELGAREJO 2009) Satildeo conhecidas popularmente por cascavel

maracaacute boicininga maracamboacuteia cascavel quatro - ventas entre outras Os acidentes

crotaacutelicos satildeo responsaacuteveis por 77dos acidentes ofiacutedicos no paiacutes com 187 de

letalidade (BRASIL 2001)

O gecircnero Micrurus eacute distribuiacutedo por todo territoacuterio nacional com total de 18

espeacutecies Satildeo conhecidas por coral coral-verdadeira ou boicoraacute (BRASIL 2001) A

incidecircncia de acidentes causados por este gecircnero eacute de cerca de 05 por

ano(MELGAREJO2009)E o 4ordm e uacuteltimo gecircnero de importacircncia medica no Brasil eacute o

Lachesis este eacute responsaacutevel por 11 dos acidentes ofiacutedicos por ano no Brasil Habitam

aacutereas florestais como Amazocircnia Mata Atlacircntica e algumas matas uacutemidas do

Nordeste(BRASIL2003)

As peccedilonhas de serpentes satildeo misturas complexas de proteiacutenas que possuem uma

grande variedade de atividades bioloacutegicas com accedilotildees fisioloacutegicas neurotransmissoras e

12

hematoloacutegicas (CAPRONI 2009 SILVA 2009) Suas diferentes composiccedilotildees quiacutemicas

refletem em variaccedilotildees das propriedades bioloacutegicas toxicidade e caracteriacutesticas

farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas (SILVA 2009) Essas variaccedilotildees podem ser

influenciadas pelo haacutebito alimentar pelo tamanho e idade das serpentes ou pelo clima e

eacutepoca do ano (CABRAL 2011) A diversidade de componentes presentes nos venenos

ofiacutedicos apresenta uma uacutenica funccedilatildeo que eacute a de mobilizar a presa e que satildeo usadas

defensivamente contra o homem (KAMIGUTI et al1986 JENNINGS et al2005)

Em estudos feitos por Kamiguti et al(1986) foi observado coagulopatia em muitos

envenenamentos ofiacutedicos Incoagulabilidade sanguiacutenea hemorragia sistecircmica efeitos

colaterais sistecircmicos choque hemorragia intracraniana e pituitaacuteria insuficiecircncia renal

trombose e embolia pulmonar foram agraves principais manifestaccedilotildees apresentadas Uma seacuterie

de componentes presentes nos venenos ofiacutedicos pode ativar o sistema de coagulaccedilatildeo o que

natildeo iraacute necessariamente resultar em trombose Segundo (HUTTON et al 1993) venenos

proacute - coagulantes especialmente botroacutepicos ativam a cascata da coagulaccedilatildeo resultando no

consumo e depleccedilatildeo de fatores da coagulaccedilatildeo tornando o sangue incoagulaacutevel

contribuindo para o aumento da hemorragia A trombocitopenia pode ocorrer o que leva a

um aumento do sangramento (WHITE 2005) O consumo dos fatores da coagulaccedilatildeo reduz

o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas nas paredes dos

vasos (KAMIGUTI 1991) degradando a lamina basal e promovendo a sua ruptura

(MANDELBAUN 1976) ou produzindo lesatildeo direta nas ceacutelulas endoteliais

(GUTIEacuteRREZ 1980)

As principais atividades do veneno das serpentes do gecircnero Bothrops satildeo coagulante

hemorraacutegica e proteoliacutetica (PINHO2001) Os componentes que ativam os fatores da cascata

da coagulaccedilatildeo satildeo classificados em proacute-coagulantes que ativam o fator X ou o fator II da

cascata da coagulaccedilatildeo gerando trombina que hidrolisa o fibrinogecircnio em fibrina e o

componente trombina-siacutemile que hidrolisa fibrinogecircnio em fibrina sem a intervenccedilatildeo da

trombina (SANO-MARTINS 2003) Estes componentes variam de acordo com a espeacutecie da

serpente e suas atividades podem levar a alteraccedilotildees da funccedilatildeo plaquetaacuteria (BRASIL 2001)

Atraveacutes de hemorraginas causam lesatildeo endotelial sistecircmica e trombocitopenia aumenta a

atividade fibrinoliacutetica plasmaacutetica inibe a agregaccedilatildeo secreccedilatildeo e fosforilaccedilatildeo plaquetaacuteria o que

leva a alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea causando assim hemorragias (SANO-MARTINS

2003)

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 8: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

EVALUATION LEUKOCYTE AND PLATELET CLOTTING TIMES

AND BLEEDING IN INDIVIDUALS POISONED BY SNAKES IN

CAMPINA GRANDE PB

ABSTRACT

Introduction Snakebites occur worldwide providing a neglected public health problem

(KASTURIRATNE et al 2008) In Brazil the main cause of snakebites are the snakes of the

genus Bothrops Crotalus Micrurus Lachesis respectively voted the most important

medical point of view ( BRASIL 2010) The venom of these snakes caused extensive

damage to human KAMIGUTI et al (1986) The objective of this study is to evaluate the

hematological parameters of individuals poisoned by snakes seen in Hospital Emergency and

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB Methods Syringe test tubes

filter paper anticoagulant Lancet stopwatch homogenizer automated equipment 19

Counter detergent Hemolyzing diluent solution and dye type Panoptic fast I II and III

blades optical microscope The parameters were assessed by the Duke method to get the

bleeding time (BT) The method for Lee- White clotting time (CT ) leukocyte and platelet

counts were performed by automated equipment Results A total of twelve snakebites

where 73 of accidents were caused by Bothrops Crotalus by 16 and 11 of the genus

Micrurus were analyzed According to the results the majority of patients bitten by Bothrops

showed abnormalities in coagulation time and leukocyte count Yet patients bitten by snakes

of the genus Crotalus showed only blood incoagulability The patient bitten by snake genus

Micrurus showed a change in the number of leukocytes Conclusion The laboratory

hemostatic abnormalities are documentary features in snakebites However further studies on

hematological effects of poison snake bite in humans caused by endemic snakes of Paraiacuteba

may improve therapeutic decreasing the immune response by producing more specific and

efficient serum therapy

KEYWORDS snakes hematology serum therapy Campina Grande

LISTA DE GRAacuteFICOS E TABELAS

Tabela 1 Gravidade dos acidentes ofiacutedicos e soroterapia recomendada17

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea 18

Graacutefico1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de

2012 a julho de 2013 25

Graacutefico 2Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 25

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops

nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes

do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos dos pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 30

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Micrurus 30

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 A) Fosseta loreal e B) Denticcedilatildeo proteroacuteglifa 15

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda 16

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas escamas Bothrops atrox 16

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico

Micrurus sp 18

SUMAacuteRIO

INTRODUCcedilAtildeO11

OBJETIVOS14

- Objetivos geral14

- Objetivo especifico14

REFERENCIAL TEOacuteRICO15

1- CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE

MEacuteDICO NO BRASIL15

2- TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO 17

3- HEMOSTASIA18

4- LEUCOacuteCITOS19

PROCEDIMETOS METODOLOacuteGICOS 21

-TIPO DE ESTUDO21

-LOCAL DE PESQUISA21

-POPULACcedilAtildeO E AMOSTRA 21

- INSTRUMENTOS DE COLETA DE DADOS 22

- MATERIAL E MEacuteTODOS 22

- PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISES DE DADOS 23

- ASPECTOS EacuteTICOS24

RESULTADOS25

DISCUSSAtildeO31

CONCLUSAtildeO 34

REFEREcircNCIAS35

ANEXOS42

11

INTRODUCcedilAtildeO

Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de sauacutede

puacuteblica negligenciado sendo relevante nas aacutereas rurais dos paiacuteses tropicais e

subtropicais em que satildeo mais frequumlentes e o acesso aos serviccedilos de sauacutede eacute bastante

limitado (KASTURIRATNE et al 2008) Mais de 29 mil acidentes por serpentes

peccedilonhentas satildeo registrados no Brasil a cada ano (SANTrsquoANNA et al 2012) com

letalidade de aproximadamente 045(BARRETO2010) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do

ponto de vista meacutedico (BRASIL 2010)

As serpentes do gecircnero Bothrops se distribuem por todo o territoacuterio brasileiro e satildeo

responsaacuteveis por 90 dos acidentes ofiacutedicos peccedilonhentos no paiacutes com cerca de 18 mil

acidentes por ano e letalidade de aproximadamente 03 (BRASIL2001) contando com

25 espeacutecies (LEAtildeO2012) Satildeo conhecidas popularmente como jararaca jararacuccedilu

urutu-cruzeiro caiccedilara comboia patrona surucucurana entre outros nomes (BRASIL

2001)

O gecircnero Crotalus se distribui em todo territoacuterio nacional habita os cerrados do

Brasil regiotildees aacuteridas e semiaacuteridas do Nordeste os campos e aacutereas abertas do Sul

Sudeste e Norte O gecircnero apresenta apenas uma uacutenica espeacutecie Crotalus durissus com

cinco subespeacutecies (MELGAREJO 2009) Satildeo conhecidas popularmente por cascavel

maracaacute boicininga maracamboacuteia cascavel quatro - ventas entre outras Os acidentes

crotaacutelicos satildeo responsaacuteveis por 77dos acidentes ofiacutedicos no paiacutes com 187 de

letalidade (BRASIL 2001)

O gecircnero Micrurus eacute distribuiacutedo por todo territoacuterio nacional com total de 18

espeacutecies Satildeo conhecidas por coral coral-verdadeira ou boicoraacute (BRASIL 2001) A

incidecircncia de acidentes causados por este gecircnero eacute de cerca de 05 por

ano(MELGAREJO2009)E o 4ordm e uacuteltimo gecircnero de importacircncia medica no Brasil eacute o

Lachesis este eacute responsaacutevel por 11 dos acidentes ofiacutedicos por ano no Brasil Habitam

aacutereas florestais como Amazocircnia Mata Atlacircntica e algumas matas uacutemidas do

Nordeste(BRASIL2003)

As peccedilonhas de serpentes satildeo misturas complexas de proteiacutenas que possuem uma

grande variedade de atividades bioloacutegicas com accedilotildees fisioloacutegicas neurotransmissoras e

12

hematoloacutegicas (CAPRONI 2009 SILVA 2009) Suas diferentes composiccedilotildees quiacutemicas

refletem em variaccedilotildees das propriedades bioloacutegicas toxicidade e caracteriacutesticas

farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas (SILVA 2009) Essas variaccedilotildees podem ser

influenciadas pelo haacutebito alimentar pelo tamanho e idade das serpentes ou pelo clima e

eacutepoca do ano (CABRAL 2011) A diversidade de componentes presentes nos venenos

ofiacutedicos apresenta uma uacutenica funccedilatildeo que eacute a de mobilizar a presa e que satildeo usadas

defensivamente contra o homem (KAMIGUTI et al1986 JENNINGS et al2005)

Em estudos feitos por Kamiguti et al(1986) foi observado coagulopatia em muitos

envenenamentos ofiacutedicos Incoagulabilidade sanguiacutenea hemorragia sistecircmica efeitos

colaterais sistecircmicos choque hemorragia intracraniana e pituitaacuteria insuficiecircncia renal

trombose e embolia pulmonar foram agraves principais manifestaccedilotildees apresentadas Uma seacuterie

de componentes presentes nos venenos ofiacutedicos pode ativar o sistema de coagulaccedilatildeo o que

natildeo iraacute necessariamente resultar em trombose Segundo (HUTTON et al 1993) venenos

proacute - coagulantes especialmente botroacutepicos ativam a cascata da coagulaccedilatildeo resultando no

consumo e depleccedilatildeo de fatores da coagulaccedilatildeo tornando o sangue incoagulaacutevel

contribuindo para o aumento da hemorragia A trombocitopenia pode ocorrer o que leva a

um aumento do sangramento (WHITE 2005) O consumo dos fatores da coagulaccedilatildeo reduz

o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas nas paredes dos

vasos (KAMIGUTI 1991) degradando a lamina basal e promovendo a sua ruptura

(MANDELBAUN 1976) ou produzindo lesatildeo direta nas ceacutelulas endoteliais

(GUTIEacuteRREZ 1980)

As principais atividades do veneno das serpentes do gecircnero Bothrops satildeo coagulante

hemorraacutegica e proteoliacutetica (PINHO2001) Os componentes que ativam os fatores da cascata

da coagulaccedilatildeo satildeo classificados em proacute-coagulantes que ativam o fator X ou o fator II da

cascata da coagulaccedilatildeo gerando trombina que hidrolisa o fibrinogecircnio em fibrina e o

componente trombina-siacutemile que hidrolisa fibrinogecircnio em fibrina sem a intervenccedilatildeo da

trombina (SANO-MARTINS 2003) Estes componentes variam de acordo com a espeacutecie da

serpente e suas atividades podem levar a alteraccedilotildees da funccedilatildeo plaquetaacuteria (BRASIL 2001)

Atraveacutes de hemorraginas causam lesatildeo endotelial sistecircmica e trombocitopenia aumenta a

atividade fibrinoliacutetica plasmaacutetica inibe a agregaccedilatildeo secreccedilatildeo e fosforilaccedilatildeo plaquetaacuteria o que

leva a alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea causando assim hemorragias (SANO-MARTINS

2003)

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

REFEREcircNCIAS

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 9: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

LISTA DE GRAacuteFICOS E TABELAS

Tabela 1 Gravidade dos acidentes ofiacutedicos e soroterapia recomendada17

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea 18

Graacutefico1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de

2012 a julho de 2013 25

Graacutefico 2Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 25

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops

nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 1 2 e 3 26

Graacutefico5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes

do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos dos pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos 1 2 e 3 27

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

nos tempos 1 2 e 3 28

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 29

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos 1 2 e 3 30

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Micrurus 30

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 A) Fosseta loreal e B) Denticcedilatildeo proteroacuteglifa 15

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda 16

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas escamas Bothrops atrox 16

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico

Micrurus sp 18

SUMAacuteRIO

INTRODUCcedilAtildeO11

OBJETIVOS14

- Objetivos geral14

- Objetivo especifico14

REFERENCIAL TEOacuteRICO15

1- CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE

MEacuteDICO NO BRASIL15

2- TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO 17

3- HEMOSTASIA18

4- LEUCOacuteCITOS19

PROCEDIMETOS METODOLOacuteGICOS 21

-TIPO DE ESTUDO21

-LOCAL DE PESQUISA21

-POPULACcedilAtildeO E AMOSTRA 21

- INSTRUMENTOS DE COLETA DE DADOS 22

- MATERIAL E MEacuteTODOS 22

- PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISES DE DADOS 23

- ASPECTOS EacuteTICOS24

RESULTADOS25

DISCUSSAtildeO31

CONCLUSAtildeO 34

REFEREcircNCIAS35

ANEXOS42

11

INTRODUCcedilAtildeO

Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de sauacutede

puacuteblica negligenciado sendo relevante nas aacutereas rurais dos paiacuteses tropicais e

subtropicais em que satildeo mais frequumlentes e o acesso aos serviccedilos de sauacutede eacute bastante

limitado (KASTURIRATNE et al 2008) Mais de 29 mil acidentes por serpentes

peccedilonhentas satildeo registrados no Brasil a cada ano (SANTrsquoANNA et al 2012) com

letalidade de aproximadamente 045(BARRETO2010) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do

ponto de vista meacutedico (BRASIL 2010)

As serpentes do gecircnero Bothrops se distribuem por todo o territoacuterio brasileiro e satildeo

responsaacuteveis por 90 dos acidentes ofiacutedicos peccedilonhentos no paiacutes com cerca de 18 mil

acidentes por ano e letalidade de aproximadamente 03 (BRASIL2001) contando com

25 espeacutecies (LEAtildeO2012) Satildeo conhecidas popularmente como jararaca jararacuccedilu

urutu-cruzeiro caiccedilara comboia patrona surucucurana entre outros nomes (BRASIL

2001)

O gecircnero Crotalus se distribui em todo territoacuterio nacional habita os cerrados do

Brasil regiotildees aacuteridas e semiaacuteridas do Nordeste os campos e aacutereas abertas do Sul

Sudeste e Norte O gecircnero apresenta apenas uma uacutenica espeacutecie Crotalus durissus com

cinco subespeacutecies (MELGAREJO 2009) Satildeo conhecidas popularmente por cascavel

maracaacute boicininga maracamboacuteia cascavel quatro - ventas entre outras Os acidentes

crotaacutelicos satildeo responsaacuteveis por 77dos acidentes ofiacutedicos no paiacutes com 187 de

letalidade (BRASIL 2001)

O gecircnero Micrurus eacute distribuiacutedo por todo territoacuterio nacional com total de 18

espeacutecies Satildeo conhecidas por coral coral-verdadeira ou boicoraacute (BRASIL 2001) A

incidecircncia de acidentes causados por este gecircnero eacute de cerca de 05 por

ano(MELGAREJO2009)E o 4ordm e uacuteltimo gecircnero de importacircncia medica no Brasil eacute o

Lachesis este eacute responsaacutevel por 11 dos acidentes ofiacutedicos por ano no Brasil Habitam

aacutereas florestais como Amazocircnia Mata Atlacircntica e algumas matas uacutemidas do

Nordeste(BRASIL2003)

As peccedilonhas de serpentes satildeo misturas complexas de proteiacutenas que possuem uma

grande variedade de atividades bioloacutegicas com accedilotildees fisioloacutegicas neurotransmissoras e

12

hematoloacutegicas (CAPRONI 2009 SILVA 2009) Suas diferentes composiccedilotildees quiacutemicas

refletem em variaccedilotildees das propriedades bioloacutegicas toxicidade e caracteriacutesticas

farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas (SILVA 2009) Essas variaccedilotildees podem ser

influenciadas pelo haacutebito alimentar pelo tamanho e idade das serpentes ou pelo clima e

eacutepoca do ano (CABRAL 2011) A diversidade de componentes presentes nos venenos

ofiacutedicos apresenta uma uacutenica funccedilatildeo que eacute a de mobilizar a presa e que satildeo usadas

defensivamente contra o homem (KAMIGUTI et al1986 JENNINGS et al2005)

Em estudos feitos por Kamiguti et al(1986) foi observado coagulopatia em muitos

envenenamentos ofiacutedicos Incoagulabilidade sanguiacutenea hemorragia sistecircmica efeitos

colaterais sistecircmicos choque hemorragia intracraniana e pituitaacuteria insuficiecircncia renal

trombose e embolia pulmonar foram agraves principais manifestaccedilotildees apresentadas Uma seacuterie

de componentes presentes nos venenos ofiacutedicos pode ativar o sistema de coagulaccedilatildeo o que

natildeo iraacute necessariamente resultar em trombose Segundo (HUTTON et al 1993) venenos

proacute - coagulantes especialmente botroacutepicos ativam a cascata da coagulaccedilatildeo resultando no

consumo e depleccedilatildeo de fatores da coagulaccedilatildeo tornando o sangue incoagulaacutevel

contribuindo para o aumento da hemorragia A trombocitopenia pode ocorrer o que leva a

um aumento do sangramento (WHITE 2005) O consumo dos fatores da coagulaccedilatildeo reduz

o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas nas paredes dos

vasos (KAMIGUTI 1991) degradando a lamina basal e promovendo a sua ruptura

(MANDELBAUN 1976) ou produzindo lesatildeo direta nas ceacutelulas endoteliais

(GUTIEacuteRREZ 1980)

As principais atividades do veneno das serpentes do gecircnero Bothrops satildeo coagulante

hemorraacutegica e proteoliacutetica (PINHO2001) Os componentes que ativam os fatores da cascata

da coagulaccedilatildeo satildeo classificados em proacute-coagulantes que ativam o fator X ou o fator II da

cascata da coagulaccedilatildeo gerando trombina que hidrolisa o fibrinogecircnio em fibrina e o

componente trombina-siacutemile que hidrolisa fibrinogecircnio em fibrina sem a intervenccedilatildeo da

trombina (SANO-MARTINS 2003) Estes componentes variam de acordo com a espeacutecie da

serpente e suas atividades podem levar a alteraccedilotildees da funccedilatildeo plaquetaacuteria (BRASIL 2001)

Atraveacutes de hemorraginas causam lesatildeo endotelial sistecircmica e trombocitopenia aumenta a

atividade fibrinoliacutetica plasmaacutetica inibe a agregaccedilatildeo secreccedilatildeo e fosforilaccedilatildeo plaquetaacuteria o que

leva a alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea causando assim hemorragias (SANO-MARTINS

2003)

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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62- SILVA JR N J da BUCARETCHI F Mecanismo de accedilatildeo do Veneno Elapiacutedico e

Aspectos cliacutenicos dos acidentes In CARDOSO et al Animais peccedilonhentos no Brasil

Biologia Cliacutenica e Terapecircutica dos acidentes Satildeo Paulo SARVIER 2ordf ed 2009p116-124

63-SWENSON MJ Circulaccedilatildeo sanguiacutenea e sistema cardiovascular In Swenson MJ amp

Reece WO Dukes Fisiologia dos Animais Domeacutesticos 11 ed Guanabara Koogan Rio de

Janeiro 1996

41

64- TAMBOURGI D V Envenenamento por serpentes doenccedila negligenciada afetando

paiacuteses em desenvolvimento Anais da 62ordf Reuniatildeo Anual da SBPC-Natal - RN 2010

65-WHITE J Snake venoms and coagulopathy Toxicon Oxford v 45 p 951-967 2005

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 10: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por

serpentes do gecircnero Micrurus 30

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 A) Fosseta loreal e B) Denticcedilatildeo proteroacuteglifa 15

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda 16

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas escamas Bothrops atrox 16

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico

Micrurus sp 18

SUMAacuteRIO

INTRODUCcedilAtildeO11

OBJETIVOS14

- Objetivos geral14

- Objetivo especifico14

REFERENCIAL TEOacuteRICO15

1- CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE

MEacuteDICO NO BRASIL15

2- TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO 17

3- HEMOSTASIA18

4- LEUCOacuteCITOS19

PROCEDIMETOS METODOLOacuteGICOS 21

-TIPO DE ESTUDO21

-LOCAL DE PESQUISA21

-POPULACcedilAtildeO E AMOSTRA 21

- INSTRUMENTOS DE COLETA DE DADOS 22

- MATERIAL E MEacuteTODOS 22

- PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISES DE DADOS 23

- ASPECTOS EacuteTICOS24

RESULTADOS25

DISCUSSAtildeO31

CONCLUSAtildeO 34

REFEREcircNCIAS35

ANEXOS42

11

INTRODUCcedilAtildeO

Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de sauacutede

puacuteblica negligenciado sendo relevante nas aacutereas rurais dos paiacuteses tropicais e

subtropicais em que satildeo mais frequumlentes e o acesso aos serviccedilos de sauacutede eacute bastante

limitado (KASTURIRATNE et al 2008) Mais de 29 mil acidentes por serpentes

peccedilonhentas satildeo registrados no Brasil a cada ano (SANTrsquoANNA et al 2012) com

letalidade de aproximadamente 045(BARRETO2010) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do

ponto de vista meacutedico (BRASIL 2010)

As serpentes do gecircnero Bothrops se distribuem por todo o territoacuterio brasileiro e satildeo

responsaacuteveis por 90 dos acidentes ofiacutedicos peccedilonhentos no paiacutes com cerca de 18 mil

acidentes por ano e letalidade de aproximadamente 03 (BRASIL2001) contando com

25 espeacutecies (LEAtildeO2012) Satildeo conhecidas popularmente como jararaca jararacuccedilu

urutu-cruzeiro caiccedilara comboia patrona surucucurana entre outros nomes (BRASIL

2001)

O gecircnero Crotalus se distribui em todo territoacuterio nacional habita os cerrados do

Brasil regiotildees aacuteridas e semiaacuteridas do Nordeste os campos e aacutereas abertas do Sul

Sudeste e Norte O gecircnero apresenta apenas uma uacutenica espeacutecie Crotalus durissus com

cinco subespeacutecies (MELGAREJO 2009) Satildeo conhecidas popularmente por cascavel

maracaacute boicininga maracamboacuteia cascavel quatro - ventas entre outras Os acidentes

crotaacutelicos satildeo responsaacuteveis por 77dos acidentes ofiacutedicos no paiacutes com 187 de

letalidade (BRASIL 2001)

O gecircnero Micrurus eacute distribuiacutedo por todo territoacuterio nacional com total de 18

espeacutecies Satildeo conhecidas por coral coral-verdadeira ou boicoraacute (BRASIL 2001) A

incidecircncia de acidentes causados por este gecircnero eacute de cerca de 05 por

ano(MELGAREJO2009)E o 4ordm e uacuteltimo gecircnero de importacircncia medica no Brasil eacute o

Lachesis este eacute responsaacutevel por 11 dos acidentes ofiacutedicos por ano no Brasil Habitam

aacutereas florestais como Amazocircnia Mata Atlacircntica e algumas matas uacutemidas do

Nordeste(BRASIL2003)

As peccedilonhas de serpentes satildeo misturas complexas de proteiacutenas que possuem uma

grande variedade de atividades bioloacutegicas com accedilotildees fisioloacutegicas neurotransmissoras e

12

hematoloacutegicas (CAPRONI 2009 SILVA 2009) Suas diferentes composiccedilotildees quiacutemicas

refletem em variaccedilotildees das propriedades bioloacutegicas toxicidade e caracteriacutesticas

farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas (SILVA 2009) Essas variaccedilotildees podem ser

influenciadas pelo haacutebito alimentar pelo tamanho e idade das serpentes ou pelo clima e

eacutepoca do ano (CABRAL 2011) A diversidade de componentes presentes nos venenos

ofiacutedicos apresenta uma uacutenica funccedilatildeo que eacute a de mobilizar a presa e que satildeo usadas

defensivamente contra o homem (KAMIGUTI et al1986 JENNINGS et al2005)

Em estudos feitos por Kamiguti et al(1986) foi observado coagulopatia em muitos

envenenamentos ofiacutedicos Incoagulabilidade sanguiacutenea hemorragia sistecircmica efeitos

colaterais sistecircmicos choque hemorragia intracraniana e pituitaacuteria insuficiecircncia renal

trombose e embolia pulmonar foram agraves principais manifestaccedilotildees apresentadas Uma seacuterie

de componentes presentes nos venenos ofiacutedicos pode ativar o sistema de coagulaccedilatildeo o que

natildeo iraacute necessariamente resultar em trombose Segundo (HUTTON et al 1993) venenos

proacute - coagulantes especialmente botroacutepicos ativam a cascata da coagulaccedilatildeo resultando no

consumo e depleccedilatildeo de fatores da coagulaccedilatildeo tornando o sangue incoagulaacutevel

contribuindo para o aumento da hemorragia A trombocitopenia pode ocorrer o que leva a

um aumento do sangramento (WHITE 2005) O consumo dos fatores da coagulaccedilatildeo reduz

o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas nas paredes dos

vasos (KAMIGUTI 1991) degradando a lamina basal e promovendo a sua ruptura

(MANDELBAUN 1976) ou produzindo lesatildeo direta nas ceacutelulas endoteliais

(GUTIEacuteRREZ 1980)

As principais atividades do veneno das serpentes do gecircnero Bothrops satildeo coagulante

hemorraacutegica e proteoliacutetica (PINHO2001) Os componentes que ativam os fatores da cascata

da coagulaccedilatildeo satildeo classificados em proacute-coagulantes que ativam o fator X ou o fator II da

cascata da coagulaccedilatildeo gerando trombina que hidrolisa o fibrinogecircnio em fibrina e o

componente trombina-siacutemile que hidrolisa fibrinogecircnio em fibrina sem a intervenccedilatildeo da

trombina (SANO-MARTINS 2003) Estes componentes variam de acordo com a espeacutecie da

serpente e suas atividades podem levar a alteraccedilotildees da funccedilatildeo plaquetaacuteria (BRASIL 2001)

Atraveacutes de hemorraginas causam lesatildeo endotelial sistecircmica e trombocitopenia aumenta a

atividade fibrinoliacutetica plasmaacutetica inibe a agregaccedilatildeo secreccedilatildeo e fosforilaccedilatildeo plaquetaacuteria o que

leva a alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea causando assim hemorragias (SANO-MARTINS

2003)

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

REFEREcircNCIAS

1-APPP (Associaccedilatildeo Paranaense dos portadores de Parkinsonismo) 2012 Disponiacutevel em

httpwwwapppcombrbloghemograma-entenda-os-seus-resultados3026Acessado em

Marccedilo de 2014

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3- BARRETO BB Santos PLC Martins FJ Barbosa NR Ribeiro LC Leite ICG Vieira

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 11: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 A) Fosseta loreal e B) Denticcedilatildeo proteroacuteglifa 15

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda 16

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas escamas Bothrops atrox 16

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico

Micrurus sp 18

SUMAacuteRIO

INTRODUCcedilAtildeO11

OBJETIVOS14

- Objetivos geral14

- Objetivo especifico14

REFERENCIAL TEOacuteRICO15

1- CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE

MEacuteDICO NO BRASIL15

2- TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO 17

3- HEMOSTASIA18

4- LEUCOacuteCITOS19

PROCEDIMETOS METODOLOacuteGICOS 21

-TIPO DE ESTUDO21

-LOCAL DE PESQUISA21

-POPULACcedilAtildeO E AMOSTRA 21

- INSTRUMENTOS DE COLETA DE DADOS 22

- MATERIAL E MEacuteTODOS 22

- PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISES DE DADOS 23

- ASPECTOS EacuteTICOS24

RESULTADOS25

DISCUSSAtildeO31

CONCLUSAtildeO 34

REFEREcircNCIAS35

ANEXOS42

11

INTRODUCcedilAtildeO

Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de sauacutede

puacuteblica negligenciado sendo relevante nas aacutereas rurais dos paiacuteses tropicais e

subtropicais em que satildeo mais frequumlentes e o acesso aos serviccedilos de sauacutede eacute bastante

limitado (KASTURIRATNE et al 2008) Mais de 29 mil acidentes por serpentes

peccedilonhentas satildeo registrados no Brasil a cada ano (SANTrsquoANNA et al 2012) com

letalidade de aproximadamente 045(BARRETO2010) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do

ponto de vista meacutedico (BRASIL 2010)

As serpentes do gecircnero Bothrops se distribuem por todo o territoacuterio brasileiro e satildeo

responsaacuteveis por 90 dos acidentes ofiacutedicos peccedilonhentos no paiacutes com cerca de 18 mil

acidentes por ano e letalidade de aproximadamente 03 (BRASIL2001) contando com

25 espeacutecies (LEAtildeO2012) Satildeo conhecidas popularmente como jararaca jararacuccedilu

urutu-cruzeiro caiccedilara comboia patrona surucucurana entre outros nomes (BRASIL

2001)

O gecircnero Crotalus se distribui em todo territoacuterio nacional habita os cerrados do

Brasil regiotildees aacuteridas e semiaacuteridas do Nordeste os campos e aacutereas abertas do Sul

Sudeste e Norte O gecircnero apresenta apenas uma uacutenica espeacutecie Crotalus durissus com

cinco subespeacutecies (MELGAREJO 2009) Satildeo conhecidas popularmente por cascavel

maracaacute boicininga maracamboacuteia cascavel quatro - ventas entre outras Os acidentes

crotaacutelicos satildeo responsaacuteveis por 77dos acidentes ofiacutedicos no paiacutes com 187 de

letalidade (BRASIL 2001)

O gecircnero Micrurus eacute distribuiacutedo por todo territoacuterio nacional com total de 18

espeacutecies Satildeo conhecidas por coral coral-verdadeira ou boicoraacute (BRASIL 2001) A

incidecircncia de acidentes causados por este gecircnero eacute de cerca de 05 por

ano(MELGAREJO2009)E o 4ordm e uacuteltimo gecircnero de importacircncia medica no Brasil eacute o

Lachesis este eacute responsaacutevel por 11 dos acidentes ofiacutedicos por ano no Brasil Habitam

aacutereas florestais como Amazocircnia Mata Atlacircntica e algumas matas uacutemidas do

Nordeste(BRASIL2003)

As peccedilonhas de serpentes satildeo misturas complexas de proteiacutenas que possuem uma

grande variedade de atividades bioloacutegicas com accedilotildees fisioloacutegicas neurotransmissoras e

12

hematoloacutegicas (CAPRONI 2009 SILVA 2009) Suas diferentes composiccedilotildees quiacutemicas

refletem em variaccedilotildees das propriedades bioloacutegicas toxicidade e caracteriacutesticas

farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas (SILVA 2009) Essas variaccedilotildees podem ser

influenciadas pelo haacutebito alimentar pelo tamanho e idade das serpentes ou pelo clima e

eacutepoca do ano (CABRAL 2011) A diversidade de componentes presentes nos venenos

ofiacutedicos apresenta uma uacutenica funccedilatildeo que eacute a de mobilizar a presa e que satildeo usadas

defensivamente contra o homem (KAMIGUTI et al1986 JENNINGS et al2005)

Em estudos feitos por Kamiguti et al(1986) foi observado coagulopatia em muitos

envenenamentos ofiacutedicos Incoagulabilidade sanguiacutenea hemorragia sistecircmica efeitos

colaterais sistecircmicos choque hemorragia intracraniana e pituitaacuteria insuficiecircncia renal

trombose e embolia pulmonar foram agraves principais manifestaccedilotildees apresentadas Uma seacuterie

de componentes presentes nos venenos ofiacutedicos pode ativar o sistema de coagulaccedilatildeo o que

natildeo iraacute necessariamente resultar em trombose Segundo (HUTTON et al 1993) venenos

proacute - coagulantes especialmente botroacutepicos ativam a cascata da coagulaccedilatildeo resultando no

consumo e depleccedilatildeo de fatores da coagulaccedilatildeo tornando o sangue incoagulaacutevel

contribuindo para o aumento da hemorragia A trombocitopenia pode ocorrer o que leva a

um aumento do sangramento (WHITE 2005) O consumo dos fatores da coagulaccedilatildeo reduz

o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas nas paredes dos

vasos (KAMIGUTI 1991) degradando a lamina basal e promovendo a sua ruptura

(MANDELBAUN 1976) ou produzindo lesatildeo direta nas ceacutelulas endoteliais

(GUTIEacuteRREZ 1980)

As principais atividades do veneno das serpentes do gecircnero Bothrops satildeo coagulante

hemorraacutegica e proteoliacutetica (PINHO2001) Os componentes que ativam os fatores da cascata

da coagulaccedilatildeo satildeo classificados em proacute-coagulantes que ativam o fator X ou o fator II da

cascata da coagulaccedilatildeo gerando trombina que hidrolisa o fibrinogecircnio em fibrina e o

componente trombina-siacutemile que hidrolisa fibrinogecircnio em fibrina sem a intervenccedilatildeo da

trombina (SANO-MARTINS 2003) Estes componentes variam de acordo com a espeacutecie da

serpente e suas atividades podem levar a alteraccedilotildees da funccedilatildeo plaquetaacuteria (BRASIL 2001)

Atraveacutes de hemorraginas causam lesatildeo endotelial sistecircmica e trombocitopenia aumenta a

atividade fibrinoliacutetica plasmaacutetica inibe a agregaccedilatildeo secreccedilatildeo e fosforilaccedilatildeo plaquetaacuteria o que

leva a alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea causando assim hemorragias (SANO-MARTINS

2003)

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 12: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

SUMAacuteRIO

INTRODUCcedilAtildeO11

OBJETIVOS14

- Objetivos geral14

- Objetivo especifico14

REFERENCIAL TEOacuteRICO15

1- CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE

MEacuteDICO NO BRASIL15

2- TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO 17

3- HEMOSTASIA18

4- LEUCOacuteCITOS19

PROCEDIMETOS METODOLOacuteGICOS 21

-TIPO DE ESTUDO21

-LOCAL DE PESQUISA21

-POPULACcedilAtildeO E AMOSTRA 21

- INSTRUMENTOS DE COLETA DE DADOS 22

- MATERIAL E MEacuteTODOS 22

- PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISES DE DADOS 23

- ASPECTOS EacuteTICOS24

RESULTADOS25

DISCUSSAtildeO31

CONCLUSAtildeO 34

REFEREcircNCIAS35

ANEXOS42

11

INTRODUCcedilAtildeO

Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de sauacutede

puacuteblica negligenciado sendo relevante nas aacutereas rurais dos paiacuteses tropicais e

subtropicais em que satildeo mais frequumlentes e o acesso aos serviccedilos de sauacutede eacute bastante

limitado (KASTURIRATNE et al 2008) Mais de 29 mil acidentes por serpentes

peccedilonhentas satildeo registrados no Brasil a cada ano (SANTrsquoANNA et al 2012) com

letalidade de aproximadamente 045(BARRETO2010) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do

ponto de vista meacutedico (BRASIL 2010)

As serpentes do gecircnero Bothrops se distribuem por todo o territoacuterio brasileiro e satildeo

responsaacuteveis por 90 dos acidentes ofiacutedicos peccedilonhentos no paiacutes com cerca de 18 mil

acidentes por ano e letalidade de aproximadamente 03 (BRASIL2001) contando com

25 espeacutecies (LEAtildeO2012) Satildeo conhecidas popularmente como jararaca jararacuccedilu

urutu-cruzeiro caiccedilara comboia patrona surucucurana entre outros nomes (BRASIL

2001)

O gecircnero Crotalus se distribui em todo territoacuterio nacional habita os cerrados do

Brasil regiotildees aacuteridas e semiaacuteridas do Nordeste os campos e aacutereas abertas do Sul

Sudeste e Norte O gecircnero apresenta apenas uma uacutenica espeacutecie Crotalus durissus com

cinco subespeacutecies (MELGAREJO 2009) Satildeo conhecidas popularmente por cascavel

maracaacute boicininga maracamboacuteia cascavel quatro - ventas entre outras Os acidentes

crotaacutelicos satildeo responsaacuteveis por 77dos acidentes ofiacutedicos no paiacutes com 187 de

letalidade (BRASIL 2001)

O gecircnero Micrurus eacute distribuiacutedo por todo territoacuterio nacional com total de 18

espeacutecies Satildeo conhecidas por coral coral-verdadeira ou boicoraacute (BRASIL 2001) A

incidecircncia de acidentes causados por este gecircnero eacute de cerca de 05 por

ano(MELGAREJO2009)E o 4ordm e uacuteltimo gecircnero de importacircncia medica no Brasil eacute o

Lachesis este eacute responsaacutevel por 11 dos acidentes ofiacutedicos por ano no Brasil Habitam

aacutereas florestais como Amazocircnia Mata Atlacircntica e algumas matas uacutemidas do

Nordeste(BRASIL2003)

As peccedilonhas de serpentes satildeo misturas complexas de proteiacutenas que possuem uma

grande variedade de atividades bioloacutegicas com accedilotildees fisioloacutegicas neurotransmissoras e

12

hematoloacutegicas (CAPRONI 2009 SILVA 2009) Suas diferentes composiccedilotildees quiacutemicas

refletem em variaccedilotildees das propriedades bioloacutegicas toxicidade e caracteriacutesticas

farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas (SILVA 2009) Essas variaccedilotildees podem ser

influenciadas pelo haacutebito alimentar pelo tamanho e idade das serpentes ou pelo clima e

eacutepoca do ano (CABRAL 2011) A diversidade de componentes presentes nos venenos

ofiacutedicos apresenta uma uacutenica funccedilatildeo que eacute a de mobilizar a presa e que satildeo usadas

defensivamente contra o homem (KAMIGUTI et al1986 JENNINGS et al2005)

Em estudos feitos por Kamiguti et al(1986) foi observado coagulopatia em muitos

envenenamentos ofiacutedicos Incoagulabilidade sanguiacutenea hemorragia sistecircmica efeitos

colaterais sistecircmicos choque hemorragia intracraniana e pituitaacuteria insuficiecircncia renal

trombose e embolia pulmonar foram agraves principais manifestaccedilotildees apresentadas Uma seacuterie

de componentes presentes nos venenos ofiacutedicos pode ativar o sistema de coagulaccedilatildeo o que

natildeo iraacute necessariamente resultar em trombose Segundo (HUTTON et al 1993) venenos

proacute - coagulantes especialmente botroacutepicos ativam a cascata da coagulaccedilatildeo resultando no

consumo e depleccedilatildeo de fatores da coagulaccedilatildeo tornando o sangue incoagulaacutevel

contribuindo para o aumento da hemorragia A trombocitopenia pode ocorrer o que leva a

um aumento do sangramento (WHITE 2005) O consumo dos fatores da coagulaccedilatildeo reduz

o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas nas paredes dos

vasos (KAMIGUTI 1991) degradando a lamina basal e promovendo a sua ruptura

(MANDELBAUN 1976) ou produzindo lesatildeo direta nas ceacutelulas endoteliais

(GUTIEacuteRREZ 1980)

As principais atividades do veneno das serpentes do gecircnero Bothrops satildeo coagulante

hemorraacutegica e proteoliacutetica (PINHO2001) Os componentes que ativam os fatores da cascata

da coagulaccedilatildeo satildeo classificados em proacute-coagulantes que ativam o fator X ou o fator II da

cascata da coagulaccedilatildeo gerando trombina que hidrolisa o fibrinogecircnio em fibrina e o

componente trombina-siacutemile que hidrolisa fibrinogecircnio em fibrina sem a intervenccedilatildeo da

trombina (SANO-MARTINS 2003) Estes componentes variam de acordo com a espeacutecie da

serpente e suas atividades podem levar a alteraccedilotildees da funccedilatildeo plaquetaacuteria (BRASIL 2001)

Atraveacutes de hemorraginas causam lesatildeo endotelial sistecircmica e trombocitopenia aumenta a

atividade fibrinoliacutetica plasmaacutetica inibe a agregaccedilatildeo secreccedilatildeo e fosforilaccedilatildeo plaquetaacuteria o que

leva a alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea causando assim hemorragias (SANO-MARTINS

2003)

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

REFEREcircNCIAS

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 13: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

11

INTRODUCcedilAtildeO

Acidentes ofiacutedicos ocorrem em todo o mundo constituindo um problema de sauacutede

puacuteblica negligenciado sendo relevante nas aacutereas rurais dos paiacuteses tropicais e

subtropicais em que satildeo mais frequumlentes e o acesso aos serviccedilos de sauacutede eacute bastante

limitado (KASTURIRATNE et al 2008) Mais de 29 mil acidentes por serpentes

peccedilonhentas satildeo registrados no Brasil a cada ano (SANTrsquoANNA et al 2012) com

letalidade de aproximadamente 045(BARRETO2010) No Brasil os principais

causadores de acidentes ofiacutedicos satildeo as serpentes pertencentes aos gecircneros Bothrops

Crotalus Micrurus Lachesis respectivamente considerados os mais importantes do

ponto de vista meacutedico (BRASIL 2010)

As serpentes do gecircnero Bothrops se distribuem por todo o territoacuterio brasileiro e satildeo

responsaacuteveis por 90 dos acidentes ofiacutedicos peccedilonhentos no paiacutes com cerca de 18 mil

acidentes por ano e letalidade de aproximadamente 03 (BRASIL2001) contando com

25 espeacutecies (LEAtildeO2012) Satildeo conhecidas popularmente como jararaca jararacuccedilu

urutu-cruzeiro caiccedilara comboia patrona surucucurana entre outros nomes (BRASIL

2001)

O gecircnero Crotalus se distribui em todo territoacuterio nacional habita os cerrados do

Brasil regiotildees aacuteridas e semiaacuteridas do Nordeste os campos e aacutereas abertas do Sul

Sudeste e Norte O gecircnero apresenta apenas uma uacutenica espeacutecie Crotalus durissus com

cinco subespeacutecies (MELGAREJO 2009) Satildeo conhecidas popularmente por cascavel

maracaacute boicininga maracamboacuteia cascavel quatro - ventas entre outras Os acidentes

crotaacutelicos satildeo responsaacuteveis por 77dos acidentes ofiacutedicos no paiacutes com 187 de

letalidade (BRASIL 2001)

O gecircnero Micrurus eacute distribuiacutedo por todo territoacuterio nacional com total de 18

espeacutecies Satildeo conhecidas por coral coral-verdadeira ou boicoraacute (BRASIL 2001) A

incidecircncia de acidentes causados por este gecircnero eacute de cerca de 05 por

ano(MELGAREJO2009)E o 4ordm e uacuteltimo gecircnero de importacircncia medica no Brasil eacute o

Lachesis este eacute responsaacutevel por 11 dos acidentes ofiacutedicos por ano no Brasil Habitam

aacutereas florestais como Amazocircnia Mata Atlacircntica e algumas matas uacutemidas do

Nordeste(BRASIL2003)

As peccedilonhas de serpentes satildeo misturas complexas de proteiacutenas que possuem uma

grande variedade de atividades bioloacutegicas com accedilotildees fisioloacutegicas neurotransmissoras e

12

hematoloacutegicas (CAPRONI 2009 SILVA 2009) Suas diferentes composiccedilotildees quiacutemicas

refletem em variaccedilotildees das propriedades bioloacutegicas toxicidade e caracteriacutesticas

farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas (SILVA 2009) Essas variaccedilotildees podem ser

influenciadas pelo haacutebito alimentar pelo tamanho e idade das serpentes ou pelo clima e

eacutepoca do ano (CABRAL 2011) A diversidade de componentes presentes nos venenos

ofiacutedicos apresenta uma uacutenica funccedilatildeo que eacute a de mobilizar a presa e que satildeo usadas

defensivamente contra o homem (KAMIGUTI et al1986 JENNINGS et al2005)

Em estudos feitos por Kamiguti et al(1986) foi observado coagulopatia em muitos

envenenamentos ofiacutedicos Incoagulabilidade sanguiacutenea hemorragia sistecircmica efeitos

colaterais sistecircmicos choque hemorragia intracraniana e pituitaacuteria insuficiecircncia renal

trombose e embolia pulmonar foram agraves principais manifestaccedilotildees apresentadas Uma seacuterie

de componentes presentes nos venenos ofiacutedicos pode ativar o sistema de coagulaccedilatildeo o que

natildeo iraacute necessariamente resultar em trombose Segundo (HUTTON et al 1993) venenos

proacute - coagulantes especialmente botroacutepicos ativam a cascata da coagulaccedilatildeo resultando no

consumo e depleccedilatildeo de fatores da coagulaccedilatildeo tornando o sangue incoagulaacutevel

contribuindo para o aumento da hemorragia A trombocitopenia pode ocorrer o que leva a

um aumento do sangramento (WHITE 2005) O consumo dos fatores da coagulaccedilatildeo reduz

o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas nas paredes dos

vasos (KAMIGUTI 1991) degradando a lamina basal e promovendo a sua ruptura

(MANDELBAUN 1976) ou produzindo lesatildeo direta nas ceacutelulas endoteliais

(GUTIEacuteRREZ 1980)

As principais atividades do veneno das serpentes do gecircnero Bothrops satildeo coagulante

hemorraacutegica e proteoliacutetica (PINHO2001) Os componentes que ativam os fatores da cascata

da coagulaccedilatildeo satildeo classificados em proacute-coagulantes que ativam o fator X ou o fator II da

cascata da coagulaccedilatildeo gerando trombina que hidrolisa o fibrinogecircnio em fibrina e o

componente trombina-siacutemile que hidrolisa fibrinogecircnio em fibrina sem a intervenccedilatildeo da

trombina (SANO-MARTINS 2003) Estes componentes variam de acordo com a espeacutecie da

serpente e suas atividades podem levar a alteraccedilotildees da funccedilatildeo plaquetaacuteria (BRASIL 2001)

Atraveacutes de hemorraginas causam lesatildeo endotelial sistecircmica e trombocitopenia aumenta a

atividade fibrinoliacutetica plasmaacutetica inibe a agregaccedilatildeo secreccedilatildeo e fosforilaccedilatildeo plaquetaacuteria o que

leva a alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea causando assim hemorragias (SANO-MARTINS

2003)

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 14: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

12

hematoloacutegicas (CAPRONI 2009 SILVA 2009) Suas diferentes composiccedilotildees quiacutemicas

refletem em variaccedilotildees das propriedades bioloacutegicas toxicidade e caracteriacutesticas

farmacocineacuteticas e farmacodinacircmicas (SILVA 2009) Essas variaccedilotildees podem ser

influenciadas pelo haacutebito alimentar pelo tamanho e idade das serpentes ou pelo clima e

eacutepoca do ano (CABRAL 2011) A diversidade de componentes presentes nos venenos

ofiacutedicos apresenta uma uacutenica funccedilatildeo que eacute a de mobilizar a presa e que satildeo usadas

defensivamente contra o homem (KAMIGUTI et al1986 JENNINGS et al2005)

Em estudos feitos por Kamiguti et al(1986) foi observado coagulopatia em muitos

envenenamentos ofiacutedicos Incoagulabilidade sanguiacutenea hemorragia sistecircmica efeitos

colaterais sistecircmicos choque hemorragia intracraniana e pituitaacuteria insuficiecircncia renal

trombose e embolia pulmonar foram agraves principais manifestaccedilotildees apresentadas Uma seacuterie

de componentes presentes nos venenos ofiacutedicos pode ativar o sistema de coagulaccedilatildeo o que

natildeo iraacute necessariamente resultar em trombose Segundo (HUTTON et al 1993) venenos

proacute - coagulantes especialmente botroacutepicos ativam a cascata da coagulaccedilatildeo resultando no

consumo e depleccedilatildeo de fatores da coagulaccedilatildeo tornando o sangue incoagulaacutevel

contribuindo para o aumento da hemorragia A trombocitopenia pode ocorrer o que leva a

um aumento do sangramento (WHITE 2005) O consumo dos fatores da coagulaccedilatildeo reduz

o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas nas paredes dos

vasos (KAMIGUTI 1991) degradando a lamina basal e promovendo a sua ruptura

(MANDELBAUN 1976) ou produzindo lesatildeo direta nas ceacutelulas endoteliais

(GUTIEacuteRREZ 1980)

As principais atividades do veneno das serpentes do gecircnero Bothrops satildeo coagulante

hemorraacutegica e proteoliacutetica (PINHO2001) Os componentes que ativam os fatores da cascata

da coagulaccedilatildeo satildeo classificados em proacute-coagulantes que ativam o fator X ou o fator II da

cascata da coagulaccedilatildeo gerando trombina que hidrolisa o fibrinogecircnio em fibrina e o

componente trombina-siacutemile que hidrolisa fibrinogecircnio em fibrina sem a intervenccedilatildeo da

trombina (SANO-MARTINS 2003) Estes componentes variam de acordo com a espeacutecie da

serpente e suas atividades podem levar a alteraccedilotildees da funccedilatildeo plaquetaacuteria (BRASIL 2001)

Atraveacutes de hemorraginas causam lesatildeo endotelial sistecircmica e trombocitopenia aumenta a

atividade fibrinoliacutetica plasmaacutetica inibe a agregaccedilatildeo secreccedilatildeo e fosforilaccedilatildeo plaquetaacuteria o que

leva a alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea causando assim hemorragias (SANO-MARTINS

2003)

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 15: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

13

A crotoxina o principal componente toacutexico do veneno da cascavel apresenta fraca

atividade anticoagulante poreacutem desenvolve atividade agregante plaquetaacuteria juntamente com a

convulxina (HABERMANN 1978) Geralmente natildeo haacute reduccedilotildees do nuacutemero de plaquetas em

casos de acidentes crotaacutelicos e hemorragias satildeo discretas quando presentes (BRASIL 2001)

Em seus estudos JORGE (1992) observou que pacientes picados por Crotalus durissus

apresentaram alteraccedilotildees na coagulaccedilatildeo sanguiacutenea com consumo de fibrinogecircnio e fator V

aumento de produtos da degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnia sem alteraccedilotildees do nuacutemero de

plaquetas

O veneno laqueacutetico apresenta atividade coagulante proteoliacutetica e hemorraacutegica

Atividade tipo trombina que ativa o fibrinogecircnio levando a formaccedilatildeo de fibrina foi relatada

nos trabalhos de Sanchez (2000) bem como atividade ativadora de plasminogecircnio que chega

a plasmina acelerando o processo de destruiccedilatildeo do coaacutegulo e atividade inibidora de accedilatildeo

plaquetaacuteria

Quanto aos envenenamentos elapidicos ateacute os dias de hoje foi observada apenas

alteraccedilotildees neuroloacutegicas natildeo apresentando accedilatildeo coagulante desfibrinogenante hemorraacutegica

proteoliacutetica ou necrotizante (SANO-MARTINS 2003)

Na Paraiacuteba satildeo poucas as pesquisas desta natureza o que torna este estudo importante

para compreender os efeitos toacutexicos hematoloacutegicos desencadeados por venenos das serpentes

endecircmicas da Paraiacuteba jaacute que a composiccedilatildeo do veneno varia em razatildeo de vaacuterios fatores como

distribuiccedilatildeo geograacutefica idade da serpente alimentaccedilatildeo mesmo sendo de mesmo gecircnero e

espeacutecie (CHIPPAUX amp WILLIAMS 1991 SCHENBERG 1959 JIMENEZ-PORRAS

1964 GUTIEacuteRREZ et al 1990 KAMIGUTI amp HANADA 1985) podendo assim melhorar

a terapecircutica e diminuir a morbidade

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 16: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

14

OBJETIVOS

OBJETIVO GERAL

Avaliar os paracircmetros hematoloacutegicos dos indiviacuteduos envenenados por serpentes

atendidos no Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiacutez Gonzaga Fernandes-

Campina Grande-PB

OBJETIVO ESPECIacuteFICO

Avaliar se haacute alteraccedilatildeo do numero de plaquetas e leucoacutecitos nos indiviacuteduos

envenenados por serpentes associando ao tipo de envenenamento

Analisar os tempos de coagulaccedilatildeo e tempo de sangria dos indiviacuteduos envenenados por

serpentes associando ao tipo de envenenamento

Verificar atraveacutes dos resultados o efeito do soro antiofiacutedico 24hs apoacutes sua

administraccedilatildeo

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 17: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

15

REFERENCIAL TEOacuteRICO

1-CARACTERIacuteSTICAS MORFOLOacuteGICAS DAS SERPENTES DE INTERESSE MEacuteDICO

NO BRASIL

A identificaccedilatildeo da serpente causadora do acidente eacute de grande importacircncia para saber qual

soro antiofiacutedico seraacute administrado no tratamento sendo assim segue abaixo as principais

caracteriacutesticas morfoloacutegicas das serpentes de interesse meacutedico no Brasil que estatildeo

distribuiacutedas em 2 famiacutelias Viperidae e Elapidae

11- VIPERIDAE

Apresenta cerca de 250 espeacutecies distribuiacutedas pelo mundo representando o mais importante

grupo de serpentes para a sauacutede puacuteblica com grande nuacutemero de acidentes registrados

(MELGAREJO 2003) A fauna brasileira apresenta 5 gecircneros Bothrops Bothriopsis

Bothrocophias Crotalus Lachesis Sendo de interesse meacutedico apenas os gecircneros Bothrops

Crotalus Lachesis (SILVA2000)

As serpentes peccedilonhentas apresentam algumas caracteriacutesticas peculiares que as diferenciam

das serpentes natildeo peccedilonhentas Entre elas a presenccedila do oacutergatildeo sensorial termorreceptor a

fosseta loreal orifiacutecio localizado entre a narina e o olho (fig1-A) que estaacute presente nas

serpentes destes gecircneros Outra caracteriacutestica eacute a presenccedila de dentes moacuteveis e bem

desenvolvidos situados na porccedilatildeo anterior do maxilar denticcedilatildeo chamada de solenoacuteglifa

(fig1-B)(BRASIL2001)

Figura 1A) Fosseta loreal e B)Denticcedilatildeo proteroacuteglifa Fonte BRASIL 2001

A identificaccedilatildeo entre os gecircneros citados pode ser feita pelo tipo de cauda onde o gecircnero

Bothrops apresenta escamas subcaudais em pares o gecircnero Crotalus apresenta em sua cauda

A B

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

REFEREcircNCIAS

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 18: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

16

um apecircndice articulado o chocalho e por uacuteltimo o gecircnero Lachesis apresenta a cauda com as

uacuteltimas fileiras de subcaudais modificadas e ericcediladas terminando num espinho (fig2)

Figura 2 Identificaccedilatildeo das serpentes pelo tipo de cauda Fonte Manual de animais peccedilonhentos2001

A cabeccedila triangular recoberta por escamas pequenas tambeacutem eacute um fator morfoloacutegico que

permite identificar um viperiacutedeo (MELGAREJO 2003)

12- ELAPIDAE

A famiacutelia estaacute representada no Brasil pelos gecircneros Micrurus e Leptomicrurus conhecidas

como cobras corais Estas apresentam cabeccedila oval recobertas por grandes placas simeacutetricas

tem olhos pequenos e pretos apresentam denticcedilatildeo do tipo proteroacuteglifa (fig4) e natildeo

apresentam fosseta loreal O corpo eacute ciliacutendrico recoberto por escamas lisas com aneacuteis

completos em torno do corpo de cores vermelho amarelo branco e preto em arranjos

Figura 3 Cabeccedila triangular com pequenas

escamas Bothrops atrox Foto Paulo

Bernarde Fonte Disponiacutevel em

httpwwwherpetofaunacombr

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

REFEREcircNCIAS

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 19: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

17

caracteriacutesticos e cauda curta e roliccedila com exceccedilatildeo de espeacutecies de Leptomicrurus que satildeo

pretas sem aneacuteis e com manchas amareladas na regiatildeo ventral(MELGAREJO2003)

2-TIPO DE ENVENENAMENTO E TRATAMENTO RECOMENDADO

Em envenenamentos causados por serpentes do gecircnero Bothrops a soroterapia

indicada eacute o Soro Antibotroacutepico (SAB) Soro Anticrotaacutelico (SAC)ou o Soro

Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003)

Em casos de acidentes crotaacutelicos o tratamento indicado eacute o Soro Anticrotaacutelico

(SAC) ou Soro Antibotroacutepico - Crotaacutelico (SABC) (BRASIL 2003) Em acidentes

Elapiacutedicos eacute administrado o Soro Antielapiacutedico (SAE) e nos Laqueacuteticos o Soro

Antilaqueacutetico (SAL) ou Soro Antibotroacutepico - Laqueacutetico(SABL)

A tabela abaixo mostra a quantidade de ampolas recomendadas para cada tipo de

acidente de acordo com a gravidade

Tabela 1Gravidade do acidente ofiacutedico e soroterapia recomendada

Tipo de acidente Leve Moderado Grave Tipo de soro

Botroacutepico 2-4 ampolas 4-8 ampolas 12 ampolas SABSABCSABl

Crotaacutelico 5 ampolas 10 ampolas 20 ampolas SACSABC

Elapiacutedico 10 ampolas de

SAE

Laqueacutetico 10 a 20 ampolas

de SALSABL

Fonte Modificado de BRASIL2003

A

Figura 4 A) Cabeccedila oval olhos pequenos e pretos Micrurus sp e B) Corpo ciliacutendrico com escamas

lisas e aneacuteis completos em torno do corpo de cores vermelho branco e preto Micrurus sp Foto

Paulo Bernarde Fonte Disponiacutevel em httpwwwherpetofaunacombr

B

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

REFEREcircNCIAS

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 20: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

18

3-HEMOSTASIA

A Hemostasia eacute a manutenccedilatildeo da fluidez do sangue pelos vasos este processo

previne a perda de sangue em caso de lesatildeo vascular abrangendo o controle da

hemorragia e a dissoluccedilatildeo dos coaacutegulos (BASSI 2011) Neste processo estatildeo envolvidos

os vasos sanguiacuteneos as plaquetas os fatores da coagulaccedilatildeo e a fibrinoacutelise

Os vasos sanguiacuteneos satildeo revestidos em sua parte interna por uma camada celular o

endoteacutelio e logo abaixo uma camada rica em colaacutegeno em sua integridade o endoteacutelio

garante o perfeito funcionamento da hemostasia Quando um vaso eacute lesado o sistema

hemostaacutetico atua por meio de algumas reaccedilotildees para impedir o extravasamento de sangue

A vaso constriccedilatildeo eacute uma reaccedilatildeo que permite o estreitamento do vaso para que diminua a

quantidade de sangue no local lesado Em pequenos vasos quando as pontas cortadas se

tocarem estaratildeo selados mas se o vaso for maior a vaso constriccedilatildeo natildeo seraacute suficiente

para conter o sangramento Neste caso o colaacutegeno que fica abaixo do endoteacutelio estimula

a accedilatildeo das plaquetas para adesatildeo agrave ponta lesada do vaso formando projeccedilotildees espiculares

estas se tornam pegajosas e se unem umas agraves outras Este processo eacute chamado de

agregaccedilatildeo plaquetaacuteria O tampatildeo plaquetaacuterio formado interrompe o sangramento em

alguns casos o tampatildeo pode ser arrastado pela corrente sanguiacutenea e diluir-se Nesse caso

eacute necessaacuteria a formaccedilatildeo de um coaacutegulo sanguiacuteneo para estancar o sangramento e

completar a hemostasia (GUYTON amp HALL 2002)

A formaccedilatildeo do coaacutegulo envolve os fatores de coagulaccedilatildeo que satildeo proteiacutenas

circulantes do plasma com exceccedilatildeo do fator IV que eacute o mineral caacutelcio O coaacutegulo eacute

formado quando o fibrinogecircnio (glicoproteiacutena sintetizada no fiacutegado) eacute transformado em

fibrina (matriz proteica do coaacutegulo) Os fatores da coagulaccedilatildeo satildeo numerados na ordem

em que foram descobertos sendo de I a XIII Segue a lista dos fatores da coagulaccedilatildeo

Tabela 2 Fatores da coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

Fator Nome

Fator I Fibrinogecircnio

Fator II Protrombina

Fator III TromboplastinaFator tecidual

Fator IV Caacutelcio

Fator V Ativador protrombina

Fator VII Proconvertina

Fator VIII Fanti-hemofiacutelico

Fator IX Christmas

Fator X Stuart

Fator XI Antecedente tromboplastiacutenico do plasma

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 21: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

19

Fator XII Hageman

Fator XIII Estabilizador de fibrina

Fonte GUYTON amp HALL 2002

Estes fatores estatildeo sobre a forma inativa no plasma sanguiacuteneo e satildeo ativados

quando um vaso eacute lesado Para indicar sua forma ativada os fatores recebem a letra a

apoacutes a numeraccedilatildeo Por exemplo o fator V ativado eacute o fator Va (GUYTON amp HALL

2002)

Trecircs vias metaboacutelicas estatildeo envolvidas na formaccedilatildeo do coaacutegulo a via extriacutenseca a

via intriacutenseca e a via comumNa via Extriacutenseca o fator da coagulaccedilatildeo (fator III) natildeo

estaacute presente na circulaccedilatildeo sanguiacutenea sendo liberado apenas quando o vaso sanguiacuteneo eacute

lesado O fator III ativa o fator VII com o auxiacutelio do fator IV O fator VIIa participa da

ativaccedilatildeo do fator X a fator Xa Na via intriacutenseca os fatores de coagulaccedilatildeo estatildeo presentes

na circulaccedilatildeo sanguiacutenea A formaccedilatildeo do coaacutegulo pela via intriacutenseca inicia-se quando o

fator XII entra em contato com superfiacutecies como agulha seringa tubo de vidro sendo

assim ativado a fator XIIa E por uacuteltimo a ativaccedilatildeo do VIII a fator VIIIa A via comum eacute

ativada quando o fator X eacute ativado a fator Xaindependente de ser via extriacutenseca ou

intriacutenseca a reaccedilatildeo resultante da atuaccedilatildeo do fator Xa do fator IV e do fator Va faz com

que a trombina seja ativada pela protrombina posteriormente a trombina ativa o

fibrinogecircnio levando aacute formaccedilatildeo da fibrina Por fim o fator XIII a torna o coaacutegulo de

fibrina estaacutevel para conter uma hemorragia (GUYTON amp HALL 2002)

Para que continue a circulaccedilatildeo sanguiacutenea normal eacute necessaacuteria a remoccedilatildeo do coaacutegulo

sanguiacuteneo que depende da retraccedilatildeo do coaacutegulo e a degradaccedilatildeo da fibrina processo

chamado fibrinoacutelise (SWENSON 1996) A digestatildeo da fibrina eacute feita pela plasmina que

circula no plasma em sua forma inativa o plasminogecircnio A via fibrinoliacutetica apresenta

duas fases a geraccedilatildeo de plasmina a partir do plasminogecircnio e sua accedilatildeo proteoliacutetica sobre

a fibrina (BOZZINI 2004)

4-LEUCOacuteCITOS

Os leucoacutecitos ou gloacutebulos brancos satildeo ceacutelulas que atuam na defesa do organismo

quando ocorre invasatildeo de micro-organismos ou de outras substacircncias Estes migram atraveacutes

da parede dos vasos capilares e se agrupam ao local da infecccedilatildeo Alguns leucoacutecitos

destroem as partiacuteculas por fagocitose (HILDEBRAND e GOSLOW 2006)

Os gloacutebulos brancos apresentam diversos tipos celulares com diferenccedilas em suas

funccedilotildees e morfologia e satildeo divididos em granuloacutecitos (neutroacutefilo eosinoacutefilo e basoacutefilo) e

agranuloacutecitos (linfoacutecitos e monoacutecitos)

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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65-WHITE J Snake venoms and coagulopathy Toxicon Oxford v 45 p 951-967 2005

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 22: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

20

-Neutroacutefilos satildeo responsaacuteveis pela destruiccedilatildeo de micro-organismos por meio de fagocitose

nos locais de infecccedilatildeo logo apoacutes ocorre a morte celular do neutroacutefilo jaacute que natildeo realizam

siacutentese do material energeacutetico e das enzimas utilizadas (JAMRA e LORENZI 1983)

Existem dois tipos de neutroacutefilos os bastonetes (neutroacutefilos imaturos) e segmentados

(neutroacutefilos maturos) numa infecccedilatildeo aguda bacteriana o nuacutemero de bastonetes circulantes

no sangue eacute maior o que eacute chamado de neutrofilia com desvio agrave esquerda (MASUDA et

al2008)

-Eosinoacutefilos tem funccedilatildeo de fagocitar e destruir complexos de antiacutegenos com anticorpos

limitando o processo inflamatoacuterio (JUNQUEIRA e CARNEIRO 2004) Satildeo atraiacutedos

quando haacute liberaccedilatildeo de histamina (JAMRA e LORENZI 1983) e circulam por pouco

tempo na corrente sanguiacutenea

-Basoacutefilos Participam de processos aleacutergicos seus gracircnulos contem histamina que dilata e

permeabiliza os vasos sanguiacuteneos e heparina que previne a coagulaccedilatildeo do sangue

(HANSEL e DINTZIS 2007) A histamina eacute liberada no processo de degranulaccedilatildeo reaccedilatildeo

agrave estiacutemulos antigecircnicos ou de complexos antiacutegeno-anticorpo Para reduzir a degranulaccedilatildeo

os eosinoacutefilos inibem os basoacutefilos reduzindo assim os efeitos inflamatoacuterios da ativaccedilatildeo

antigecircnica ao niacutevel dos tecidos (BERNARD et al1989)

-Monoacutecitos Ceacutelulas encarregadas da defesa do organismo atraveacutes da fagocitose de

qualquer corpuacutesculo estranho para isto estes deixam a corrente sanguiacutenea migrando para os

tecidos passando a ser chamados de macroacutefagos (LORENZI 2003) Acumulam-se onde haacute

inflamaccedilatildeo aguda e manteacutem um estado inflamatoacuterio crocircnico (HANSEL e DINTZIS 2007)

-Linfoacutecitos Compotildeem o sistema imune Em infecccedilotildees agudas crocircnicas e em doenccedilas linfo

proliferativa haacute um aumento do nuacutemero destas ceacutelulas podendo diminuir bastante em casos

de distuacuterbios na sua produccedilatildeo ou em aumento da destruiccedilatildeo em casos de radiaccedilatildeo e

quimioterapia (HANSEL e DINTZIS 2007) Satildeo de grande importacircncia nas respostas

imunes especiacuteficas do corpo Um grupo diferente de linfoacutecitos satildeo os linfoacutecitos atiacutepicos

com morfologia diferenciada surgem em casos de infecccedilotildees por viacuterus como gripe dengue

catapora(APPP2012)

O aumento do numero de leucoacutecitos na corrente sanguiacutenea eacute chamado de

leucocitose e a diminuiccedilatildeo eacute chamado de leucocitopenia Os seus valores normais satildeo de

cinco a dez mil na corrente sanguiacutenea Em casos de acidentes ofiacutedicos pode haver aumento

no numero de leucoacutecitos apresentando neutrofilia com desvio a esquerda este aumento

geralmente eacute consequumlecircncia da accedilatildeo do veneno nos fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

causando assim uma resposta imune (SANO-MARTINS amp SANTORO 2009)

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 23: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

21

PROCEDIMENTOS METODOLOacuteGICOS

TIPO DE ESTUDO

O estudo eacute do tipo natildeo randomizado no qual o grupo estudado natildeo foi escolhido

aleatoriamente e foi desenvolvido em laboratoacuterio A pesquisa foi de caraacuteter quantitativo e

qualitativo - descritiva (meacutetodo misto) com investigaccedilotildees empiacutericas onde o conhecimento eacute

adquirido no cotidiano ou seja atraveacutes de accedilotildees natildeo planejadas

LOCAL DA PESQUISA

O municiacutepio de Campina Grande eacute uma das mais antigas localidades do Estado da

Paraiacuteba foi primitivamente uma aldeia de iacutendios Cariris Este municiacutepio estaacute localizado no

Agreste Paraibano a 120 km da capital do Estado Joatildeo Pessoa De acordo com o Instituto

Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Campina Grande possui uma aacuterea

territorial de 594 182 km2

e uma populaccedilatildeo de 385213 habitantes com trecircs distritos (Catoleacute

de Boa Vista Galante e Satildeo Joseacute da Mata) Assim permanecendo em divisatildeo territorial datada

de 2007 (IBGE 2013) Apresentando uma posiccedilatildeo geograacutefica privilegiada Campina Grande

tornou-se um importante poacutelo de convergecircncia com aproximadamente 232 municiacutepios natildeo soacute

da Paraiacuteba como tambeacutem de estados vizinhos

O municiacutepio de Campina Grande estaacute dividido em seis distritos sanitaacuterios A divisatildeo

em distritos eacute uma estrateacutegia de descentralizaccedilatildeo dos serviccedilos baacutesicos de sauacutede (COSTA

2010) Existem cerca de 20 hospitais no municiacutepio entre eles estaacute o Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes (HETDLGF-CG) que possui em sua estrutura um

laboratoacuterio onde as amostras deste estudo foram analisadas

POPULACcedilAcircO E AMOSTRA

A populaccedilatildeo do estudo foi formada por pacientes do Hospital de Emergecircncia e

Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes-Campina Grande-PB de ambos os sexos e diferentes

idades que foram acidentados por serpentes peccedilonhentas

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

REFEREcircNCIAS

1-APPP (Associaccedilatildeo Paranaense dos portadores de Parkinsonismo) 2012 Disponiacutevel em

httpwwwapppcombrbloghemograma-entenda-os-seus-resultados3026Acessado em

Marccedilo de 2014

2- AZEVEDO-MARQUES M M de HERING S E CUPO P Acidente crotaacutelico In

CARDOSO etal Animais peccedilonhentos no Brasil Biologia cliacutenica e terapecircutica dos

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3- BARRETO BB Santos PLC Martins FJ Barbosa NR Ribeiro LC Leite ICG Vieira

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 24: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

22

INSTRUMENTO DE COLETA DE DADOS

Para obtermos os resultados os pacientes foram submetidos a exames cliacutenicos

laboratoriais a cada intervalo de tempo antes da soroterapia (classificamos como tempo 1)

12h apoacutes a soroterapia (tempo 2) e 24hs apoacutes a soroterapia (tempo 3) num total de 3 coletas

MATERIAIS E MEacuteTODOS

Descriccedilatildeo dos exames laboratoriais de avaliaccedilatildeo dos pacientes

a)Tempo de coagulaccedilatildeo Foi utilizado o meacutetodo de Lee-White1913 que mede o tempo

necessaacuterio para que o sangue coagule ldquoin vitrordquo Para isto foram coletados trecircs mL de sangue

com o uso de uma seringa do braccedilo do paciente No momento em que o sangue entrou em

contato com a seringa o cronocircmetro foi disparado Foi colocado 1 mL de sangue em 3 tubos

sendo cada ml para cada tubo e levados imediatamente ao banho maria em 37 ordm C Apoacutes 3

minutos foi observado o tubo 1inclinando suavemente em seguida os tubos 2 e 3 a cada 30

segundos O tempo de coagulaccedilatildeo foi obtido pela meacutedia dos tempos encontrados nos 3 tubos

Seu valor normal eacute de 4 a 9 minutos (NEW LAB 2013)

b) Tempo de sangria O tempo de sangramento foi feito pelo meacutetodo de Duke (1910)

Foi feito assepsia do loacutebulo da orelha dos pacientes com um algodatildeo embebido em aacutelcool

com o auxiacutelio de uma lanceta especiacutefica e de um soacute golpe foi feita uma incisatildeo local com

cerca de 2 mm de profundidade e foi disparado o cronocircmetro A cada 30 segundos foi

recolhida cada gota de sangue em papel de filtro ateacute que a uacuteltima gota deixasse apenas um

sinal puntiforme no papel registrando assim o tempo de sangramento Seu valor normal eacute de

1 a 3 minutos (NEW LAB 2013)

c) Contagem de plaquetas e leucoacutecitos ndash Para realizaccedilatildeo da contagem foi coletado 5

mL de sangue dos pacientes e colocado em tubo de ensaio com 1 gota de

EDTA(anticoagulante) Logo apoacutes as amostras foram levadas ao Homogeneizador onde

passaram aproximadamente 2 minutos e em seguida foram colocadas no equipamento

automatizado Counter 19 fabricante Wiener Lab para a contagem dos respectivos

paracircmetros Para o funcionamento do equipamento foi utilizado alguns reagentes citados

posteriormente O valor normal de leucoacutecitos eacute de 5000 aacute 10000 enquanto que o valor

normal de plaquetas eacute de 140000 aacute 500000 Contagens diferenciais de leucoacutecitos foram

feitas manualmente Apoacutes a amostra sair do homogeneizador foi retirado uma gota de sangue

com a proacutepria tampa do tubo e colocado na lacircmina para fazer o esfregaccedilo depois de seca a

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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62- SILVA JR N J da BUCARETCHI F Mecanismo de accedilatildeo do Veneno Elapiacutedico e

Aspectos cliacutenicos dos acidentes In CARDOSO et al Animais peccedilonhentos no Brasil

Biologia Cliacutenica e Terapecircutica dos acidentes Satildeo Paulo SARVIER 2ordf ed 2009p116-124

63-SWENSON MJ Circulaccedilatildeo sanguiacutenea e sistema cardiovascular In Swenson MJ amp

Reece WO Dukes Fisiologia dos Animais Domeacutesticos 11 ed Guanabara Koogan Rio de

Janeiro 1996

41

64- TAMBOURGI D V Envenenamento por serpentes doenccedila negligenciada afetando

paiacuteses em desenvolvimento Anais da 62ordf Reuniatildeo Anual da SBPC-Natal - RN 2010

65-WHITE J Snake venoms and coagulopathy Toxicon Oxford v 45 p 951-967 2005

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 25: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

23

lacircmina foi corada em 3 diferentes corantes para que pudesse ser lida com o auxiacutelio do

microscoacutepio oacuteptico e feita assim a contagem diferencial dos leucoacutecitos

Reagentes

EDTA- (aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico) eacute o anticoagulante utilizado para exames

hematoloacutegicos ele preserva os componentes naturais do sangue sem alterar sua morfologia

Detergente- utilizado para lavar e umedecer a tubulaccedilatildeo dos Analisadores hematoloacutegicos

Agente hemolizante - para contagem diferencial de leucoacutecitos e determinaccedilatildeo de HGB em

analisadores diferenciais

Soluccedilatildeo diluente - para contagem e classificaccedilatildeo de ceacutelulas sanguiacuteneas nos analisadores

hematoloacutegicos (NEW LAB 2013)

Corantes

O Panoacutetico Raacutepido LB ndash que se baseia no princiacutepio de coloraccedilatildeo hematoloacutegica estabelecida

por Romanowsky atuando em 15 segundos Estes satildeo de trecircs tipos

Panoacutetico raacutepido nordm 1 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de triarilmetano a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 2 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de xantenos a 01

Panoacutetico raacutepido nordm 3 compotildee-se por uma soluccedilatildeo de tiazinas a 01

Trecircs recipientes (cuba de Coplin) foram preenchidos com as soluccedilotildees nordm 1 2 e 3

respectivamente as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm1(fixadora) mantendo-se um

movimento contiacutenuo de cima para baixo durante 5 segundos (5 imersotildees de 1 segundo cada)

depois de escorrer bem foram submergidas na soluccedilatildeo nordm2 com movimento contiacutenuo de cima

para baixo apoacutes escorrer mais uma vez as lacircminas foram submergidas na soluccedilatildeo nordm 3Foram

lavadas com aacutegua e depois foram lidas O valor normal de leucoacutecitos eacute de cinco a dez mil na

corrente sanguiacutenea

PROCESSAMENTO DE ANAacuteLISE DE DADOS

Os dados foram tabulados com o uso do Microsoft Excel 2010reg

e analisados por

estatiacutestica descritiva com base na verificaccedilatildeo de frequumlecircncia simples para a disposiccedilatildeo dos

dados em graacuteficos e tabelas Para avaliar os paracircmetros foram tomados os valores de

referecircncia do laboratoacuterio NEW LAB

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

REFEREcircNCIAS

1-APPP (Associaccedilatildeo Paranaense dos portadores de Parkinsonismo) 2012 Disponiacutevel em

httpwwwapppcombrbloghemograma-entenda-os-seus-resultados3026Acessado em

Marccedilo de 2014

2- AZEVEDO-MARQUES M M de HERING S E CUPO P Acidente crotaacutelico In

CARDOSO etal Animais peccedilonhentos no Brasil Biologia cliacutenica e terapecircutica dos

acidentes Satildeo Paulo Sarvier 2ordf ed2009 p 108-115

3- BARRETO BB Santos PLC Martins FJ Barbosa NR Ribeiro LC Leite ICG Vieira

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 26: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

24

ASPECTOS EacuteTICOS

Esta pesquisa foi avaliada e aprovada pelo Comitecirc de Eacutetica em Pesquisa da

Universidade Estadual da Paraiacuteba (CEP) protocolo nordm 00070133000-12 de acordo com a

Resoluccedilatildeo nordm196 do Conselho Nacional de Sauacutede sobre pesquisas envolvendo seres

humanos

Os pacientes envolvidos no presente trabalho assinaram Termo de Consentimento

Livre e Esclarecido (Anexos I e II) em total concordacircncia com as exigecircncias das mesmas Os

pacientes como tambeacutem os profissionais envolvidos nos atendimentos destes natildeo foram

identificados As amostras coletadas foram processadas no NEWLAB laboratoacuterio pertencente

ao Hospital de Emergecircncia e Trauma Dom Luiz Gonzaga Fernandes - Campina Grande- PB

sendo as coletas realizadas por profissionais treinados

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 27: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

25

RESULTADOS

No periacuteodo de 10 meses foram feitas analises laboratoriais em 12 pacientes sendo 916 do

sexo masculino e 84 do sexo feminino com idades entre 3 e 75 anos dos quais 9 foram

acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops 2 por serpentes do gecircnero Crotalus e apenas 1

por serpente do gecircnero Micrurus Nenhum acidente laqueacutetico foi notificado durante este

periacuteodo

Graacutefico 1 Nuacutemero de acidentes ofiacutedicos atendidos no HETDLGF no periacuteodo de setembro de 2012 agrave julho

de 2013

Foram analisados os paracircmetros hematoloacutegicos de 9 pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothropsonde obtivemos os seguintes resultados

Graacutefico 2 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos dos pacientes acidentados por serpente do gecircnero Bothrops nos tempos

12 e 3

Acidentes ofiacutedicos

Acidente Botroacutepico

Acidente Crotaacutelico

Acidente Elapiacutedico 73

16

11

Tempo 1 Tempo 2

Tempo 3

56

44 44

44 56 56

Leucoacutecitos

Leucoacutecitos normais Leucocitose

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

REFEREcircNCIAS

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 28: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

26

Graacutefico 3 Evoluccedilatildeo das plaquetas dos pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos tempos

1 2 e 3

Graacutefico 4 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Bothrops nos

tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 11 11 11 11 11

78 78 78

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

89 78

89

11

22

11

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 29: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

27

Graacutefico 5 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Bothrops nos tempos 12 e 3

Tabela 3 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Bothrops

PARAcircMETROS 1ordm TEMPO 2 ordm TEMPO 3 ordm TEMPO

Bastonetes 333 (39) acima do

normal

222 (29) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados 333 (39) acima do

normal

555 (59) acima do

normal

333 (39) acima do

normal

Eosinoacutefilos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo 111 (19) abaixo do

normal e 111 (19)

acima do normal

111(19) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

11 0 0

89 100 100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoagulaacutevel

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 30: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

28

Foram analisados apenas 2 (dois) pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus

Estes apresentaram as seguintes alteraccedilotildees hemostaacuteticas

Graacutefico 6 Evoluccedilatildeo dos leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Graacutefico 7 Evoluccedilatildeo das plaquetas de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos tempos

12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Leucoacutecitos

Leucocitos normais Leucocitose

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0 0 0 0 0 0

100 100 100

Plaquetas

Plaquetose Plaquetopenia Plaquetas normais

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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Janeiro 1996

41

64- TAMBOURGI D V Envenenamento por serpentes doenccedila negligenciada afetando

paiacuteses em desenvolvimento Anais da 62ordf Reuniatildeo Anual da SBPC-Natal - RN 2010

65-WHITE J Snake venoms and coagulopathy Toxicon Oxford v 45 p 951-967 2005

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 31: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

29

Graacutefico 8 Evoluccedilatildeo do tempo de sangria de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero Crotalus nos

tempos 12 e 3

Graacutefico 9 Evoluccedilatildeo do tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea de pacientes acidentados por serpentes do gecircnero

Crotalus nos tempos 12 e 3

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

100 100 100

0 0 0

Tempo de sangria

TS normal TS alterado

Tempo 1 Tempo 2 Tempo 3

0

50

0

100

50

100

Tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea

TC normal TC incoaacutegulavel

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

REFEREcircNCIAS

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 32: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

30

Tabela 4 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Crotalus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Eosinoacutefilos 50 (12) acima do

normal

Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo 50(12) acima do

normal

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Foi analisado apenas um (1) paciente acidentado por serpente do gecircnero Micrurus No tempo

1 o paciente apresentou leucocitopenia e no tempo 3 (24 hs apoacutes a soroterapia) apresentou

leucocitoseEm nenhum momento apresentou alteraccedilatildeo plaquetaacuteria Tambeacutem natildeo apresentou

alteraccedilatildeo no tempo de sangria e no tempo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea Quanto agrave contagem

diferencial de leucoacutecitos apresentou

Tabela 5 Alteraccedilotildees da contagem diferencial de leucoacutecitos de pacientes acidentados por serpentes do

gecircnero Micrurus

PARAcircMETROS TEMPO 1 TEMPO 2 TEMPO 3

Bastonetes Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Segmentados Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Acima do normal

Eosinoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Basoacutefilo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito tiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Abaixo do normal Nenhuma alteraccedilatildeo

Linfoacutecito atiacutepico Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

Monoacutecitos Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo Nenhuma alteraccedilatildeo

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 33: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

31

DISCUSSAtildeO

Os acidentes ofiacutedicos compreendem um importante agravo agrave sauacutede com uma

incidecircncia e distribuiccedilatildeo de gecircnero que variam de acordo com o lugar estudado Em nosso

estudo trabalhamos com uma amostra muito proacutexima a encontrada no paiacutes como um todo

com prevalecircncia do gecircnero Bothrops seguido pelos gecircneros Crotalus Micrurus e Lachesis

conforme relatado nos estudos de Feitosa (1997) Lemos (2009) e Oliveira (2011) Natildeo foram

evidenciados casos de acidentes laqueacuteticos Foram mais frequumlentemente observados ataques a

indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao sexo feminino que estaacute relacionada ao

trabalhador rural cujo trabalho eacute predominantemente desempenhado por indiviacuteduos do sexo

masculino

No presente estudo dos indiviacuteduos envenenados por serpentes do gecircnero Bothrops 44

(49) apresentaram leucocitose no tempo 1 isso se deve a accedilatildeo imune celular deflagrada

pelo veneno logo nos primeiros minutos apoacutes o envenenamento Esse dado eacute corroborado por

Lomonte et al (1993) que observou uma leve leucocitose ateacute 12 horas apoacutes envenenamento

experimental por Bothrops asper Os 56 indiviacuteduos restantes (59) permaneceram com os

niacuteveis leucocitaacuterios normais Provavelmente o objetivo do veneno natildeo seja os leucoacutecitos

mas sim os fatores de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea que quando afetados causam aumento

leucocitaacuterio Nos tempos 2 e 3 56 (59) dos pacientes apresentaram leucocitose Isso pode

ser explicado por uma resposta imune do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento o soro

antibotroacutepico (SAB) (GUTIERREZ et al1998)Aleacutem disso eacute importante considerar que o

SAB utilizado no Hospital em Campina Grande assim como em todo Brasil eacute uma mistura

de venenos de 5 espeacutecies do gecircnero Bothrops Bothrops jararaca Bothrops jararacuccedilu

Bothrops moojeni Bothrops neuwiedii e Bothrops alternatus(CARDOSO et al 2003)entre

as quais natildeo se inclui a espeacutecie endecircmica da regiatildeo da Paraiacuteba a Bothrops erytromelas

Importante ressaltar tambeacutem a variabilidade especiacutefica do veneno que pode ocorrer dentro

do mesmo gecircnero ou espeacutecie devido aacute alimentaccedilatildeo habitat idade e sexo dos animais

(CHIPPAUX e WILLIAMS 1991) Em relaccedilatildeo agraves alteraccedilotildees na contagem de plaquetas 78

dos pacientes (79) nos tempos 12 e 3 apresentaram contagens normais de plaquetas

diferente do que afirma Kamiguti (1991) quando diz que o consumo dos fatores da

coagulaccedilatildeo reduz o nuacutemero de plaquetas e induzem a accedilatildeo direta das toxinas hemorraacutegicas

nas paredes dos vasos Isto sugere que o veneno de Bothrops erytromellas natildeo causa alteraccedilatildeo

plaquetaacuteria Como este trabalho eacute o primeiro a estudar alteraccedilatildeo plaquetaacuteria em humanos

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 34: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

32

envenenados pela serpente Bothrops erythromelas fica o compromisso da realizaccedilatildeo de

maiores estudos para melhor elucidar esse dado

O veneno botroacutepico teve grande influencia sobre a funccedilatildeo das plaquetas mas natildeo

apresentou atividade sobre a contagem de plaquetas jaacute que 89 dos pacientes (79)

apresentaram TC incoagulaacutevel no tempo 1 e no tempo 2 e 3 ainda permaneceu incoagulaacutevel

O veneno botroacutepico ativa os fatores da cascata de coagulaccedilatildeo ocasionando consumo

de fibrinogecircnio e formaccedilatildeo de fibrina intravascular induzindo com frequecircncia

incoagulabilidade sanguiacutenea (CARDOSO et al2003) LUNA et al (2010) isolaram uma

banda proteacuteica referente a hemorraginas que natildeo foi neutralizada pelo SAB mesmo apoacutes 24

horas do tratamento Esse dado pode explicar o sangue incoagulaacutevel em nossos resultados

mesmo apoacutes o tratamento Apesar da Incoagulabilidade sanguiacutenea causada pelo consumo de

fibrinogecircnio o TC incoagulaacutevel natildeo constitui causa primaria para o sangramento

(KAMIGUTI e SANO MARTINS 1995) Sendo assim o tempo de sangria apresentou-se

normal em 89 dos pacientes antes e apoacutes a soroterapia A accedilatildeo hemorraacutegica eacute atribuiacuteda a

componentes especiacuteficos chamados de hemorraginas que lesam a membrana basal do

endoteacutelio vascular e satildeo inibidoras da agregaccedilatildeo plaquetaacuteria (KAMIGUTI et al 1994

CARDOSO et al 2003 SANO-MARTINS amp SANTORO2003)As metaloproteases

presentes nos venenos botroacutepicos satildeo incapazes de induzir sangramento

sistecircmico(GUTIERREZ et al1995) o que tambeacutem justifica o tempo de sangria normal na

maioria dos pacientes durante os trecircs tempos

Na contagem diferencial de leucoacutecitos 333 (39) dos pacientes apresentaram

neutrofilia com desvio agrave esquerda Geralmente esse desvio a esquerda eacute consequumlecircncia de

infecccedilatildeo bacteriana Muitos indiviacuteduos por questotildees de costumes fazem torniquetes cortam o

local da picada colocam folhas poacute de cafeacute ou outros contaminantes (BRASIL 2003) Esses

costumes podem ter levado a infecccedilatildeo bacteriana O numero de segmentados esteve alto no

tempo 1 em 333 (39) dos pacientes e no tempo 3 em 333 (39) dos pacientes em

resposta aacutes infecccedilotildees bacterianas

Nos acidentes crotaacutelicos os pacientes natildeo apresentaram em nenhum momento

alteraccedilotildees no tempo de sangria nas plaquetas e nos leucoacutecitos segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) o hemograma pode apresentar leucocitose discreta agrave custa de

segmentados com desvio para a esquerda e plaquetas normais em nuacutemeros poreacutem com

alteraccedilotildees na sua agregaccedilatildeo Estes indiviacuteduos apresentaram apenas Incoagulabilidade

sanguiacutenea em 100(22) dos pacientes antes da soroterapia o que corrobora com os estudos

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 35: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

33

de Kamiguti (1989 e 1995) onde foi observado consumo de fibrinogecircnio sendo esta accedilatildeo

atribuiacuteda a presenccedila de componente tipo trombina capaz de prolongar ou ateacute mesmo tornar o

sangue incoagulaacutevel No tempo3 o sangue permaneceu incoagulaacutevel Segundo AZEVEDO-

MARQUES et al (2009) casos como este podem ser explicado pelo fato de que o tratamento

natildeo tenha sido suficiente jaacute que a soroterapia normaliza o TC em 12 a 24 hs apoacutes a

administraccedilatildeo do soro ou pela existecircncia de alguma patologia anterior do pacienteSegundo

Jorge(1992) o veneno crotaacutelico pode consumir fibrinogecircnio e Fator V aumentando os

produtos de degradaccedilatildeo de fibrina e fibrinogecircnio porem sem causar alteraccedilotildees do numero de

plaquetasDistuacuterbios hemorraacutegicos natildeo satildeo frequumlentes mas podem ser observados em

envenenamento gravegeralmente restritos as gengivas (gengivorragia)(JORGE 1992 SANO-

MARTINS amp SANTORO2009 )Diferentemente do veneno botroacutepico o veneno crotaacutelico

natildeo apresenta accedilatildeo proteoliacutetica portanto edemas inflamaccedilatildeo e dor no local da picada satildeo

incomuns(BRASIL2001) Sendo assim a alteraccedilatildeo na contagem diferencial de leucoacutecitos

pode ter sido de alguma patologia diferenciada dos pacientes tendo em vista que foram

apenas 2 pacientes o que estatisticamente natildeo eacute indicado

Houve apenas um acidente elapiacutedico que apresentou leucocitopenia no tempo 1 e

leucocitose no tempo 3 Segundo SANCHEZ (1992) o veneno elapiacutedico induz

predominantemente alteraccedilotildees neuroloacutegicas pela atividade neurotoacutexica preacute e poacutes sinaacuteptica do

veneno na junccedilatildeo neuromuscular natildeo se observam hemorragias locais (SILVA JR amp

BUCARETCHI 2009)e nem accedilatildeo coagulante ou proteoliacutetica Sendo assim o baixo numero

de leucoacutecitos no paciente representa patologia diferente que natildeo tem relaccedilatildeo ao

envenenamento e a leucocitose apresentada no tempo 3 pode ter sido uma resposta imune

do indiviacuteduo ao proacuteprio tratamento ou ateacute mesmo pelo fato de que o soro anti-elapiacutedico

produzido no Brasil eacute uma mistura de venenos de 2 espeacutecies de Micrurus portanto natildeo se

sabe ao certo a eficaacutecia desse antiveneno sobre as toxinas presentes nos venenos de todas as

espeacutecies e subespeacutecies de corais verdadeiras do Brasil (SILVA JR amp BUCARETCHI2009)

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

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Toxicon 1998 36(11)1529-38

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20- GUTIERREZ J M ROMERO M DIAZC BORKOWG OVADIAM Isolation and

characterization of a metalloproteinase with weak hemorrhagic activity from the venom of the

snake Bothrops asper (terciopelo)Toxicon19953319-29

21- GUYTON AC amp HALL J E 2002 Tratado de Fisiologia Meacutedica 10 ed Guanabara

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22- HABERMANN E BREITHAUPT H The crotoxin complexan example of biochemical

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65-WHITE J Snake venoms and coagulopathy Toxicon Oxford v 45 p 951-967 2005

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 36: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

34

CONCLUSAtildeO

A prevalecircncia dos acidentes ofiacutedicos em Campina Grande estaacute condizente com o perfil

encontrado no Brasil onde a maioria dos acidentes eacute causada por serpentes do gecircnero

Bothrops E a maior frequumlecircncia eacute em indiviacuteduos do sexo masculino em relaccedilatildeo ao feminino

As analises mostraram que o veneno botroacutepico causa alteraccedilotildees hemostaacuteticas significativas

nos pacientes acometidos por serpentes do gecircnero Bothrops causa principalmente

incoagulabilidade sanguiacutenea que natildeo constitui causa primaria para o sangramento impede a

agregaccedilatildeo plaquetaria porem natildeo altera o numero de plaquetas O SAB utilizado natildeo

neutraliza totalmente os efeitos do veneno no sistema hemostaacutetico

O tempo de sangria (TS) natildeo eacute indicado para avaliar a recuperaccedilatildeo ou agravamento do estado

do paciente em caso de acidentes ofiacutedicos tendo em vista que nos trecircs tipos de acidentes

houve prevalecircncia de TS normal

Satildeo necessaacuterios outros estudos sobre os acidentes crotaacutelicos e elapidicos para poder chegar a

uma conclusatildeo quanto aos efeitos do veneno sobre o sistema hemostaacutetico

Os resultados deste trabalho reforccedilam a importacircncia de se conhecer as alteraccedilotildees hemostaacuteticas

deflagradas pelos venenos ofiacutedicos em humanos uma vez que eacute evidente que o mecanismo

hemostaacutetico apresenta uma grande suscetibilidade aos mesmos principalmente ao veneno

botroacutepico por sua raacutepida accedilatildeo na ativaccedilatildeo dos fatores da coagulaccedilatildeo com o consequumlente

consumo de fibrinogecircnio circulante causando incoagulabilidade sanguiacutenea

Novos estudos sobre os efeitos hematoloacutegicos do veneno ofiacutedico em humanos causados por

serpentes endecircmicas da regiatildeo da PB podem melhorar a terapecircutica diminuindo aacute reaccedilatildeo

imunoloacutegica com a produccedilatildeo de soros antiofiacutedicos mais especiacuteficos e eficientes

35

REFEREcircNCIAS

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6-BOZZINI CE amp MOLINAS F 2004 Hemostasia In Houssay AB Cirgolani HE

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8-BRASIL Ministeacuterio da Sauacutede Secretaria de Vigilacircncia em Sauacutede Departamento de

Vigilacircncia Epidemioloacutegica Doenccedilas infecciosas e parasitaacuterias guia de bolso 8ordf ed Brasiacutelia

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httpwwwtelessaudeamorgbrcmsmodulesnewsarticlephpstoryid=86Acessado em

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9-BRASIL Ministeacuterio da Sauacutede FNS Ofidismo in Manual de Diagnoacutestico e Tratamento de

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11- CAPRONI P(2009) Accedilatildeo da Bothropstoxina-1 do veneno total de Bothrops jararacussu

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Energeacuteticas e Nucleares Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo

12-CARDOSODF YAMAGUCHIIK SILVA AMM Produccedilatildeo de soros antitoxinas e

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14- COSTA D B Acidentes ofiacutedicos em Campina Grande dados epidemioloacutegicos

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15- DUKE WW The relation of bloods platelet to hemorrhagic disease description of a

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29-JENNINGS B SPEARMAN W SHEPHHARDE A novel 25 kDa protein from the

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33- KAMIGUTI A S et al Properties of fibrinogen cleaved by Jararhagin a

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born Bothrops jararaca venom Toxicon 198523580

35- KAMIGUTI AS Alterations of the blood coagulation system after accidental human

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2041986

36- KAMIGUTI A S CARDOSO J L Haemostatic changes caused by the venoms of

South American snakes Toxicon 1989 27 (9) 955-63

37- KAMIGUTI A S Coagulopathy and hemorrage in human victims of Bothrops jararaca

envenoming in Brazil Toxicon Oxford v 28 p 961 - 9721991

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11 2008

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em abril de 2014

46- MANDELBAUN F R Isolamento e caracterizaccedilatildeo de dois fatores hemorraacutegicos do

veneno de Bothrops jararaca 1976 Tese (Doutorado) Satildeo Paulo Escola Paulista de

Medicina 1976

47- MASUDA M O et al Disciplina Corpo Humano e Sauacutede Uma Visatildeo Integrada -

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peccedilonhentos no BrasilBiologiacliacutenica e Terapecircutica dos acidentesSatildeo Paulo Sarvier 2ordf

ed2009p42-70

49- NEWLAB Laboratoacuterio de anaacutelises cliacutenicas2013

50- NIEWIAROWSKI S KIRBY E P STOCKER K Thrombocytin- a novel platelet

activating enzyme from Bothrops atrox venom Thromb res 1977 10 863-9

51- OLIVEIRA H F A LEITE R S COSTA C F Aspectos cliacutenico-epidemioloacutegicos de

acidentes com serpentes peccedilonhentas no municiacutepio de Cuiteacute Brasil Gazeta Meacutedica da Bahia

v 81 p 14-19 2011

52- PINHO F M O PEREIRA ID Ofidismo Rev Assoc Med Bras [online] 2001 vol

47 n1 pp 24-29 ISSN 0104-4230 Disponiacutevel em httpdxdoiorg101590S0104-

42302001000100026 Acessado em Fevereiro de 2014

53- ROSENFELD G 1971 Symptomatology pathology and treatment of snake bites in

South America In Bucherl W Buckeley EE (Eds) Venomous Animals and Their

Venoms Academic Press New York pp 345ndash384

40

54- SANCHEZ et alBiological activities of venoms from South American Snakes Toxicon

1992 3095-103

55- SANCHEZ EF et alIsolation of a proteinase with plasminogen-activating activity from

Lachesis muta muta (bushmaster) snake venom ArchBiochem Biophys 378(1)131-41

2000

56- SANO-MARTINS I S SANTOROM L Distuacuterbios Hemostaacuteticos em Envenenamentos

por Animais Peccedilonhentos no BrasilIn Animais peccedilonhentos no BrasilBiologiacliacutenica e

Terapecircutica dos Acidentes Sarvier 2ordf ed Satildeo Paulo 2009

57- SANTrsquoANNA SS GREGO KF PUORTO G ANTONIAZZI MM JARED C

CANDIDO D NANNI P KNYSAKI MORAESR P WENF HMALAQUEC M S

Animais Venenosos serpentes anfiacutebios aranhas escorpiotildees e insetos1ordfed Satildeo

PauloInstituto Butantan2012p27

58- SCHENBERG SGeographical pattern of crotamine distribution in the same rattlesnake

subspeciesSciense 1959 129 1361-3

59-SECRETAacuteRIA DA SAUacuteDE Disponiacutevel em

httpwwwsesaprgovbrmodulesconteudoconteudophpconteudo=396 Acessado em

fevereiro de 2014

60- SILVA VX Revisatildeo sistemaacutetica do complexo Bothrops neuwied (Serpentes Viperidae

Crotalinae) 2 volumes[Tese de doutorado]Universidade de Satildeo Paulo2000

61- SILVA GJ Estudo dos efeitos do veneno de Crotalus durissus terrificus sobre o

metabolismo e estresse oxidativo em fiacutegado de ratos 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado) - Setor de

Ciecircncias Bioloacutegicas Universidade Federal do Paranaacute Curitiba 2009

62- SILVA JR N J da BUCARETCHI F Mecanismo de accedilatildeo do Veneno Elapiacutedico e

Aspectos cliacutenicos dos acidentes In CARDOSO et al Animais peccedilonhentos no Brasil

Biologia Cliacutenica e Terapecircutica dos acidentes Satildeo Paulo SARVIER 2ordf ed 2009p116-124

63-SWENSON MJ Circulaccedilatildeo sanguiacutenea e sistema cardiovascular In Swenson MJ amp

Reece WO Dukes Fisiologia dos Animais Domeacutesticos 11 ed Guanabara Koogan Rio de

Janeiro 1996

41

64- TAMBOURGI D V Envenenamento por serpentes doenccedila negligenciada afetando

paiacuteses em desenvolvimento Anais da 62ordf Reuniatildeo Anual da SBPC-Natal - RN 2010

65-WHITE J Snake venoms and coagulopathy Toxicon Oxford v 45 p 951-967 2005

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 37: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

35

REFEREcircNCIAS

1-APPP (Associaccedilatildeo Paranaense dos portadores de Parkinsonismo) 2012 Disponiacutevel em

httpwwwapppcombrbloghemograma-entenda-os-seus-resultados3026Acessado em

Marccedilo de 2014

2- AZEVEDO-MARQUES M M de HERING S E CUPO P Acidente crotaacutelico In

CARDOSO etal Animais peccedilonhentos no Brasil Biologia cliacutenica e terapecircutica dos

acidentes Satildeo Paulo Sarvier 2ordf ed2009 p 108-115

3- BARRETO BB Santos PLC Martins FJ Barbosa NR Ribeiro LC Leite ICG Vieira

RCPA Perfil epidemioloacutegico dos acidentes ofiacutedicos no municiacutepio de Juiz de Fora ndash MG no

periacuteodo de 2002-2007 Rev APS Juiz de Fora 201013(2)190-5 Disponiacutevel

emhttpwwwredalycorgarticulooaid=92924959002 Acessado em fevereiro de 2014

4- BASSISCConhecendo a HemostasiaRibeiratildeo Preto2011Disponiacutevel em

httpeadhemocentrofmrpuspbrjoomlaindexphpnoticiasadoteempauta523-conhecendo-

a-hemostasia Acessado em janeiro de 2014

5- BERNARD etal (1989)Manual de Hematologia3ordf ednSantos Satildeo Paulo

6-BOZZINI CE amp MOLINAS F 2004 Hemostasia In Houssay AB Cirgolani HE

Fisiologia Humana de Houssay 7 ed Artmed Porto Alegre

7- BRASIL Ministeacuterio da Sauacutede Manual de Diagnoacutestico e Tratamento de Acidentes por

Animais Peccedilonhentos 3ordf ediccedilatildeo revisada Brasiacutelia FUNASA (FUNASA) MS 2003

8-BRASIL Ministeacuterio da Sauacutede Secretaria de Vigilacircncia em Sauacutede Departamento de

Vigilacircncia Epidemioloacutegica Doenccedilas infecciosas e parasitaacuterias guia de bolso 8ordf ed Brasiacutelia

DF Ministeacuterio da Sauacutede 2010p444-448 Disponivel em

httpwwwtelessaudeamorgbrcmsmodulesnewsarticlephpstoryid=86Acessado em

dezembro de 2013

9-BRASIL Ministeacuterio da Sauacutede FNS Ofidismo in Manual de Diagnoacutestico e Tratamento de

Acidentes por Animais Peccedilonhentos 2ordfed- Brasiacutelia 2001 p9-36

36

10- CABRAL F A M (2011) Estudo dos potenciais terapecircuticos do veneno as serpente

Bothrops jararaca 26f Monografia (Graduaccedilatildeo) ndash Consoacutecio Setentrional de Educaccedilatildeo agrave

distacircncia Universidade de Brasiacutelia Brasiacutelia

11- CAPRONI P(2009) Accedilatildeo da Bothropstoxina-1 do veneno total de Bothrops jararacussu

irradiados sobre o sistema imune 60f Dissertaccedilatildeo (Mestrado) - Instituto de Pesquisas

Energeacuteticas e Nucleares Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo

12-CARDOSODF YAMAGUCHIIK SILVA AMM Produccedilatildeo de soros antitoxinas e

perspectivas de Modernizaccedilatildeo por teacutecnicas de Biologia Molecular In Animais peccedilonhentos

no Brasil Biologia Cliacutenica e Terapecircutica dos acidentes Satildeo PauloSARVIER 2003p367-

389

13- CHIPPAUX J P WILLIAMS V WHITE J Snake venom variability methods of

study results and interpretation Toxicon 1991291279-303

14- COSTA D B Acidentes ofiacutedicos em Campina Grande dados epidemioloacutegicos

bioloacutegicos laboratoriais e cliacutenicos Manuscrito 2012

15- DUKE WW The relation of bloods platelet to hemorrhagic disease description of a

method for determining the bleeding time and coagulation time and report of 3 cases of

hemorrhagic disease 1910 551185-1192

16- FEITOSA R F G MELO I M L A MONTEIRO H S A Epidemiologia dos

acidentes por serpentes peccedilonhentas no estado do Cearaacute Brasil Revista da Sociedade

Brasileira de Medicina Tropical v 30 p 295-301 1997

17- GUTIEacuteRREZ J M BOLANtildeOS R A Mionecrosis hemorragia y oedema inducidos por

el veneno de Bothrops asper en ratoacuten blanco Toxicon Oxford v 18 p 603-610 1980

18- GUTIERREZJ M et al Ontogenetic changes in the venom of the snake Lachesis muta

stenophrys (bushmaster) from Costa Rica Toxicon 199028(4)419-26

19- GUTIERREZ JM LEON G ROJAS G LOMONTE B RUCAVADO A CHAVES

F Neutralization of local tissue damage induced by Bothrops asper (terciopelo) snake venom

Toxicon 1998 36(11)1529-38

37

20- GUTIERREZ J M ROMERO M DIAZC BORKOWG OVADIAM Isolation and

characterization of a metalloproteinase with weak hemorrhagic activity from the venom of the

snake Bothrops asper (terciopelo)Toxicon19953319-29

21- GUYTON AC amp HALL J E 2002 Tratado de Fisiologia Meacutedica 10 ed Guanabara

Koogan Rio de Janeiro

22- HABERMANN E BREITHAUPT H The crotoxin complexan example of biochemical

and pharmacological protein complementation Toxicon 1978 16(1)19-30

23- HANSEL DE DINTZIS RZ(2007) Fundamentos de Rubin- Patologia1ordf ed

Guanabara KooganRio de Janeiro

24- HILDEBRAND M GOSLOW G(2006)Anaacutelise da estrutura dos vertebrados2ordfed

Atheneu Satildeo Paulo

25- HOGE A R ROMANO-HOGE S A R W LSinopse das serpentes peccedilonhentas do

Brasil Memoacuterias do Instituto Butantan Satildeo Paulo v 42 - 43 p 373 - 496 1978 ndash 1979

26- HUTTON R A WARRELL D A Action of snake venom components on the

haemostatic system Blood Reviews Oxford v 7 p 176-89 1993

27- Instituto Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Disponiacutevel em

httpwwwibgegovbrcidadesatpainelpainelphpcodmun=250400ampsearch=paraiba|campin

a-grandehistorico Acessado em janeiro de 2014

28- JAMRA M LORENZI T F (1983)Leucoacutecitos leucemias e linfomasGuanabara

Koogan Rio de Janeiro

29-JENNINGS B SPEARMAN W SHEPHHARDE A novel 25 kDa protein from the

venom of Bitis arietans with similarity to C-type lectins causes fibrinogen-dependent platelet

agglutinationToxicon Oxford v46p687-982005

30-JIMENEZ-PORRAS J M Intraspecific variations in composition of venom of the

jumping viper Bothrops nummifera Toxicon 19642 187-95

31-JORGE M T RIBEIROL A Epidemiologia e quadro cliacutenico do acidente por cascavel

sul-americana (Crotalus durissus) Rev Inst Med Trop Satildeo Paulo 199234(4)347-54

38

32-JUNQUEIRA LCARNEIROJ(2004)Histologia Baacutesica10ordf ed Guanabara Koogan Rio

de Janeiro

33- KAMIGUTI A S et al Properties of fibrinogen cleaved by Jararhagin a

metalloproteinase from the venom of Bothrops jararaca Thromb Haemost1994 72(2) 244-9

34- KAMIGUTIAS HANADAS Study of the coagulante and proteolytic activities of new

born Bothrops jararaca venom Toxicon 198523580

35- KAMIGUTI AS Alterations of the blood coagulation system after accidental human

inoculation by Bothrops jararaca venom Braz J Med Biol Res Rio de Janeirov19p199-

2041986

36- KAMIGUTI A S CARDOSO J L Haemostatic changes caused by the venoms of

South American snakes Toxicon 1989 27 (9) 955-63

37- KAMIGUTI A S Coagulopathy and hemorrage in human victims of Bothrops jararaca

envenoming in Brazil Toxicon Oxford v 28 p 961 - 9721991

38- KAMIGUTI AS SANO-MARTINSI S South american snake venoms affecting

haemostasis J Toxicol-Toxin Reviews 199514 359-74

39- KASTURIRATNE A et al The Global Burden of Snakebite A Literature Analysis and

Modelling Based on Regional Estimates of Envenoming and Deaths PLoS Medicine p 5 -

11 2008

40- LEAtildeO S M (2012) Histoacuteria natural modelagem de distribuiccedilatildeo e conservaccedilatildeo de

Bothrops itapetiningae Boulenger 1907 (Serpentes Viperidae Crotalinae) espeacutecie endecircmica

do Cerrado Dissertaccedilatildeo de Mestrado em Ciecircncias Florestais Publicaccedilatildeo do Departamento de

Engenharia Florestal Universidade de Brasiacutelia DF 122p

41- LEE RI WHITE PD A clinical study of the coagulation time of blood American

Journal of Medical Sciences 145 495-503 1913

42-LEMOS J C Epidemiologia dos acidentes ofiacutedicos notificados pelo Centro de

Assistecircncia Toxicoloacutegica de Campina Grande (CEATOX-CG) Paraiacuteba Revista Brasileira de

Epidemiologia v 12 2009

39

43-LOMONTE B A Tarkowski amp LA Hanson 1993 Host response to Bothrops

asper snake venom analysis of edema formation inflammatory cells and cytokine release in a

mouse model Inflammation 17 93-105

44- LORENZI TF(2003)Manual de Hematologia-Propedecircutica e Cliacutenica3ordf ed Medsi

45- LUNA KPO et al Humoral immune response of patients bitten by the snake Bothrops

erythromelas Rev Soc Bras Med Trop [online] 2010 vol43 n6 pp 731-732 ISSN

0037-8682 Disponiacutevel em httpdxdoiorg101590S0037-86822010000600027 Acessado

em abril de 2014

46- MANDELBAUN F R Isolamento e caracterizaccedilatildeo de dois fatores hemorraacutegicos do

veneno de Bothrops jararaca 1976 Tese (Doutorado) Satildeo Paulo Escola Paulista de

Medicina 1976

47- MASUDA M O et al Disciplina Corpo Humano e Sauacutede Uma Visatildeo Integrada -

Moacutedulo 1 2008

48- MELGAREJO A R Serpentes peccedilonhentas do Brasil In CARDOSO et al Animais

peccedilonhentos no BrasilBiologiacliacutenica e Terapecircutica dos acidentesSatildeo Paulo Sarvier 2ordf

ed2009p42-70

49- NEWLAB Laboratoacuterio de anaacutelises cliacutenicas2013

50- NIEWIAROWSKI S KIRBY E P STOCKER K Thrombocytin- a novel platelet

activating enzyme from Bothrops atrox venom Thromb res 1977 10 863-9

51- OLIVEIRA H F A LEITE R S COSTA C F Aspectos cliacutenico-epidemioloacutegicos de

acidentes com serpentes peccedilonhentas no municiacutepio de Cuiteacute Brasil Gazeta Meacutedica da Bahia

v 81 p 14-19 2011

52- PINHO F M O PEREIRA ID Ofidismo Rev Assoc Med Bras [online] 2001 vol

47 n1 pp 24-29 ISSN 0104-4230 Disponiacutevel em httpdxdoiorg101590S0104-

42302001000100026 Acessado em Fevereiro de 2014

53- ROSENFELD G 1971 Symptomatology pathology and treatment of snake bites in

South America In Bucherl W Buckeley EE (Eds) Venomous Animals and Their

Venoms Academic Press New York pp 345ndash384

40

54- SANCHEZ et alBiological activities of venoms from South American Snakes Toxicon

1992 3095-103

55- SANCHEZ EF et alIsolation of a proteinase with plasminogen-activating activity from

Lachesis muta muta (bushmaster) snake venom ArchBiochem Biophys 378(1)131-41

2000

56- SANO-MARTINS I S SANTOROM L Distuacuterbios Hemostaacuteticos em Envenenamentos

por Animais Peccedilonhentos no BrasilIn Animais peccedilonhentos no BrasilBiologiacliacutenica e

Terapecircutica dos Acidentes Sarvier 2ordf ed Satildeo Paulo 2009

57- SANTrsquoANNA SS GREGO KF PUORTO G ANTONIAZZI MM JARED C

CANDIDO D NANNI P KNYSAKI MORAESR P WENF HMALAQUEC M S

Animais Venenosos serpentes anfiacutebios aranhas escorpiotildees e insetos1ordfed Satildeo

PauloInstituto Butantan2012p27

58- SCHENBERG SGeographical pattern of crotamine distribution in the same rattlesnake

subspeciesSciense 1959 129 1361-3

59-SECRETAacuteRIA DA SAUacuteDE Disponiacutevel em

httpwwwsesaprgovbrmodulesconteudoconteudophpconteudo=396 Acessado em

fevereiro de 2014

60- SILVA VX Revisatildeo sistemaacutetica do complexo Bothrops neuwied (Serpentes Viperidae

Crotalinae) 2 volumes[Tese de doutorado]Universidade de Satildeo Paulo2000

61- SILVA GJ Estudo dos efeitos do veneno de Crotalus durissus terrificus sobre o

metabolismo e estresse oxidativo em fiacutegado de ratos 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado) - Setor de

Ciecircncias Bioloacutegicas Universidade Federal do Paranaacute Curitiba 2009

62- SILVA JR N J da BUCARETCHI F Mecanismo de accedilatildeo do Veneno Elapiacutedico e

Aspectos cliacutenicos dos acidentes In CARDOSO et al Animais peccedilonhentos no Brasil

Biologia Cliacutenica e Terapecircutica dos acidentes Satildeo Paulo SARVIER 2ordf ed 2009p116-124

63-SWENSON MJ Circulaccedilatildeo sanguiacutenea e sistema cardiovascular In Swenson MJ amp

Reece WO Dukes Fisiologia dos Animais Domeacutesticos 11 ed Guanabara Koogan Rio de

Janeiro 1996

41

64- TAMBOURGI D V Envenenamento por serpentes doenccedila negligenciada afetando

paiacuteses em desenvolvimento Anais da 62ordf Reuniatildeo Anual da SBPC-Natal - RN 2010

65-WHITE J Snake venoms and coagulopathy Toxicon Oxford v 45 p 951-967 2005

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 38: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

36

10- CABRAL F A M (2011) Estudo dos potenciais terapecircuticos do veneno as serpente

Bothrops jararaca 26f Monografia (Graduaccedilatildeo) ndash Consoacutecio Setentrional de Educaccedilatildeo agrave

distacircncia Universidade de Brasiacutelia Brasiacutelia

11- CAPRONI P(2009) Accedilatildeo da Bothropstoxina-1 do veneno total de Bothrops jararacussu

irradiados sobre o sistema imune 60f Dissertaccedilatildeo (Mestrado) - Instituto de Pesquisas

Energeacuteticas e Nucleares Universidade de Satildeo Paulo Satildeo Paulo

12-CARDOSODF YAMAGUCHIIK SILVA AMM Produccedilatildeo de soros antitoxinas e

perspectivas de Modernizaccedilatildeo por teacutecnicas de Biologia Molecular In Animais peccedilonhentos

no Brasil Biologia Cliacutenica e Terapecircutica dos acidentes Satildeo PauloSARVIER 2003p367-

389

13- CHIPPAUX J P WILLIAMS V WHITE J Snake venom variability methods of

study results and interpretation Toxicon 1991291279-303

14- COSTA D B Acidentes ofiacutedicos em Campina Grande dados epidemioloacutegicos

bioloacutegicos laboratoriais e cliacutenicos Manuscrito 2012

15- DUKE WW The relation of bloods platelet to hemorrhagic disease description of a

method for determining the bleeding time and coagulation time and report of 3 cases of

hemorrhagic disease 1910 551185-1192

16- FEITOSA R F G MELO I M L A MONTEIRO H S A Epidemiologia dos

acidentes por serpentes peccedilonhentas no estado do Cearaacute Brasil Revista da Sociedade

Brasileira de Medicina Tropical v 30 p 295-301 1997

17- GUTIEacuteRREZ J M BOLANtildeOS R A Mionecrosis hemorragia y oedema inducidos por

el veneno de Bothrops asper en ratoacuten blanco Toxicon Oxford v 18 p 603-610 1980

18- GUTIERREZJ M et al Ontogenetic changes in the venom of the snake Lachesis muta

stenophrys (bushmaster) from Costa Rica Toxicon 199028(4)419-26

19- GUTIERREZ JM LEON G ROJAS G LOMONTE B RUCAVADO A CHAVES

F Neutralization of local tissue damage induced by Bothrops asper (terciopelo) snake venom

Toxicon 1998 36(11)1529-38

37

20- GUTIERREZ J M ROMERO M DIAZC BORKOWG OVADIAM Isolation and

characterization of a metalloproteinase with weak hemorrhagic activity from the venom of the

snake Bothrops asper (terciopelo)Toxicon19953319-29

21- GUYTON AC amp HALL J E 2002 Tratado de Fisiologia Meacutedica 10 ed Guanabara

Koogan Rio de Janeiro

22- HABERMANN E BREITHAUPT H The crotoxin complexan example of biochemical

and pharmacological protein complementation Toxicon 1978 16(1)19-30

23- HANSEL DE DINTZIS RZ(2007) Fundamentos de Rubin- Patologia1ordf ed

Guanabara KooganRio de Janeiro

24- HILDEBRAND M GOSLOW G(2006)Anaacutelise da estrutura dos vertebrados2ordfed

Atheneu Satildeo Paulo

25- HOGE A R ROMANO-HOGE S A R W LSinopse das serpentes peccedilonhentas do

Brasil Memoacuterias do Instituto Butantan Satildeo Paulo v 42 - 43 p 373 - 496 1978 ndash 1979

26- HUTTON R A WARRELL D A Action of snake venom components on the

haemostatic system Blood Reviews Oxford v 7 p 176-89 1993

27- Instituto Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Disponiacutevel em

httpwwwibgegovbrcidadesatpainelpainelphpcodmun=250400ampsearch=paraiba|campin

a-grandehistorico Acessado em janeiro de 2014

28- JAMRA M LORENZI T F (1983)Leucoacutecitos leucemias e linfomasGuanabara

Koogan Rio de Janeiro

29-JENNINGS B SPEARMAN W SHEPHHARDE A novel 25 kDa protein from the

venom of Bitis arietans with similarity to C-type lectins causes fibrinogen-dependent platelet

agglutinationToxicon Oxford v46p687-982005

30-JIMENEZ-PORRAS J M Intraspecific variations in composition of venom of the

jumping viper Bothrops nummifera Toxicon 19642 187-95

31-JORGE M T RIBEIROL A Epidemiologia e quadro cliacutenico do acidente por cascavel

sul-americana (Crotalus durissus) Rev Inst Med Trop Satildeo Paulo 199234(4)347-54

38

32-JUNQUEIRA LCARNEIROJ(2004)Histologia Baacutesica10ordf ed Guanabara Koogan Rio

de Janeiro

33- KAMIGUTI A S et al Properties of fibrinogen cleaved by Jararhagin a

metalloproteinase from the venom of Bothrops jararaca Thromb Haemost1994 72(2) 244-9

34- KAMIGUTIAS HANADAS Study of the coagulante and proteolytic activities of new

born Bothrops jararaca venom Toxicon 198523580

35- KAMIGUTI AS Alterations of the blood coagulation system after accidental human

inoculation by Bothrops jararaca venom Braz J Med Biol Res Rio de Janeirov19p199-

2041986

36- KAMIGUTI A S CARDOSO J L Haemostatic changes caused by the venoms of

South American snakes Toxicon 1989 27 (9) 955-63

37- KAMIGUTI A S Coagulopathy and hemorrage in human victims of Bothrops jararaca

envenoming in Brazil Toxicon Oxford v 28 p 961 - 9721991

38- KAMIGUTI AS SANO-MARTINSI S South american snake venoms affecting

haemostasis J Toxicol-Toxin Reviews 199514 359-74

39- KASTURIRATNE A et al The Global Burden of Snakebite A Literature Analysis and

Modelling Based on Regional Estimates of Envenoming and Deaths PLoS Medicine p 5 -

11 2008

40- LEAtildeO S M (2012) Histoacuteria natural modelagem de distribuiccedilatildeo e conservaccedilatildeo de

Bothrops itapetiningae Boulenger 1907 (Serpentes Viperidae Crotalinae) espeacutecie endecircmica

do Cerrado Dissertaccedilatildeo de Mestrado em Ciecircncias Florestais Publicaccedilatildeo do Departamento de

Engenharia Florestal Universidade de Brasiacutelia DF 122p

41- LEE RI WHITE PD A clinical study of the coagulation time of blood American

Journal of Medical Sciences 145 495-503 1913

42-LEMOS J C Epidemiologia dos acidentes ofiacutedicos notificados pelo Centro de

Assistecircncia Toxicoloacutegica de Campina Grande (CEATOX-CG) Paraiacuteba Revista Brasileira de

Epidemiologia v 12 2009

39

43-LOMONTE B A Tarkowski amp LA Hanson 1993 Host response to Bothrops

asper snake venom analysis of edema formation inflammatory cells and cytokine release in a

mouse model Inflammation 17 93-105

44- LORENZI TF(2003)Manual de Hematologia-Propedecircutica e Cliacutenica3ordf ed Medsi

45- LUNA KPO et al Humoral immune response of patients bitten by the snake Bothrops

erythromelas Rev Soc Bras Med Trop [online] 2010 vol43 n6 pp 731-732 ISSN

0037-8682 Disponiacutevel em httpdxdoiorg101590S0037-86822010000600027 Acessado

em abril de 2014

46- MANDELBAUN F R Isolamento e caracterizaccedilatildeo de dois fatores hemorraacutegicos do

veneno de Bothrops jararaca 1976 Tese (Doutorado) Satildeo Paulo Escola Paulista de

Medicina 1976

47- MASUDA M O et al Disciplina Corpo Humano e Sauacutede Uma Visatildeo Integrada -

Moacutedulo 1 2008

48- MELGAREJO A R Serpentes peccedilonhentas do Brasil In CARDOSO et al Animais

peccedilonhentos no BrasilBiologiacliacutenica e Terapecircutica dos acidentesSatildeo Paulo Sarvier 2ordf

ed2009p42-70

49- NEWLAB Laboratoacuterio de anaacutelises cliacutenicas2013

50- NIEWIAROWSKI S KIRBY E P STOCKER K Thrombocytin- a novel platelet

activating enzyme from Bothrops atrox venom Thromb res 1977 10 863-9

51- OLIVEIRA H F A LEITE R S COSTA C F Aspectos cliacutenico-epidemioloacutegicos de

acidentes com serpentes peccedilonhentas no municiacutepio de Cuiteacute Brasil Gazeta Meacutedica da Bahia

v 81 p 14-19 2011

52- PINHO F M O PEREIRA ID Ofidismo Rev Assoc Med Bras [online] 2001 vol

47 n1 pp 24-29 ISSN 0104-4230 Disponiacutevel em httpdxdoiorg101590S0104-

42302001000100026 Acessado em Fevereiro de 2014

53- ROSENFELD G 1971 Symptomatology pathology and treatment of snake bites in

South America In Bucherl W Buckeley EE (Eds) Venomous Animals and Their

Venoms Academic Press New York pp 345ndash384

40

54- SANCHEZ et alBiological activities of venoms from South American Snakes Toxicon

1992 3095-103

55- SANCHEZ EF et alIsolation of a proteinase with plasminogen-activating activity from

Lachesis muta muta (bushmaster) snake venom ArchBiochem Biophys 378(1)131-41

2000

56- SANO-MARTINS I S SANTOROM L Distuacuterbios Hemostaacuteticos em Envenenamentos

por Animais Peccedilonhentos no BrasilIn Animais peccedilonhentos no BrasilBiologiacliacutenica e

Terapecircutica dos Acidentes Sarvier 2ordf ed Satildeo Paulo 2009

57- SANTrsquoANNA SS GREGO KF PUORTO G ANTONIAZZI MM JARED C

CANDIDO D NANNI P KNYSAKI MORAESR P WENF HMALAQUEC M S

Animais Venenosos serpentes anfiacutebios aranhas escorpiotildees e insetos1ordfed Satildeo

PauloInstituto Butantan2012p27

58- SCHENBERG SGeographical pattern of crotamine distribution in the same rattlesnake

subspeciesSciense 1959 129 1361-3

59-SECRETAacuteRIA DA SAUacuteDE Disponiacutevel em

httpwwwsesaprgovbrmodulesconteudoconteudophpconteudo=396 Acessado em

fevereiro de 2014

60- SILVA VX Revisatildeo sistemaacutetica do complexo Bothrops neuwied (Serpentes Viperidae

Crotalinae) 2 volumes[Tese de doutorado]Universidade de Satildeo Paulo2000

61- SILVA GJ Estudo dos efeitos do veneno de Crotalus durissus terrificus sobre o

metabolismo e estresse oxidativo em fiacutegado de ratos 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado) - Setor de

Ciecircncias Bioloacutegicas Universidade Federal do Paranaacute Curitiba 2009

62- SILVA JR N J da BUCARETCHI F Mecanismo de accedilatildeo do Veneno Elapiacutedico e

Aspectos cliacutenicos dos acidentes In CARDOSO et al Animais peccedilonhentos no Brasil

Biologia Cliacutenica e Terapecircutica dos acidentes Satildeo Paulo SARVIER 2ordf ed 2009p116-124

63-SWENSON MJ Circulaccedilatildeo sanguiacutenea e sistema cardiovascular In Swenson MJ amp

Reece WO Dukes Fisiologia dos Animais Domeacutesticos 11 ed Guanabara Koogan Rio de

Janeiro 1996

41

64- TAMBOURGI D V Envenenamento por serpentes doenccedila negligenciada afetando

paiacuteses em desenvolvimento Anais da 62ordf Reuniatildeo Anual da SBPC-Natal - RN 2010

65-WHITE J Snake venoms and coagulopathy Toxicon Oxford v 45 p 951-967 2005

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 39: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

37

20- GUTIERREZ J M ROMERO M DIAZC BORKOWG OVADIAM Isolation and

characterization of a metalloproteinase with weak hemorrhagic activity from the venom of the

snake Bothrops asper (terciopelo)Toxicon19953319-29

21- GUYTON AC amp HALL J E 2002 Tratado de Fisiologia Meacutedica 10 ed Guanabara

Koogan Rio de Janeiro

22- HABERMANN E BREITHAUPT H The crotoxin complexan example of biochemical

and pharmacological protein complementation Toxicon 1978 16(1)19-30

23- HANSEL DE DINTZIS RZ(2007) Fundamentos de Rubin- Patologia1ordf ed

Guanabara KooganRio de Janeiro

24- HILDEBRAND M GOSLOW G(2006)Anaacutelise da estrutura dos vertebrados2ordfed

Atheneu Satildeo Paulo

25- HOGE A R ROMANO-HOGE S A R W LSinopse das serpentes peccedilonhentas do

Brasil Memoacuterias do Instituto Butantan Satildeo Paulo v 42 - 43 p 373 - 496 1978 ndash 1979

26- HUTTON R A WARRELL D A Action of snake venom components on the

haemostatic system Blood Reviews Oxford v 7 p 176-89 1993

27- Instituto Brasileiro de Geografia e Estatiacutestica (IBGE 2013) Disponiacutevel em

httpwwwibgegovbrcidadesatpainelpainelphpcodmun=250400ampsearch=paraiba|campin

a-grandehistorico Acessado em janeiro de 2014

28- JAMRA M LORENZI T F (1983)Leucoacutecitos leucemias e linfomasGuanabara

Koogan Rio de Janeiro

29-JENNINGS B SPEARMAN W SHEPHHARDE A novel 25 kDa protein from the

venom of Bitis arietans with similarity to C-type lectins causes fibrinogen-dependent platelet

agglutinationToxicon Oxford v46p687-982005

30-JIMENEZ-PORRAS J M Intraspecific variations in composition of venom of the

jumping viper Bothrops nummifera Toxicon 19642 187-95

31-JORGE M T RIBEIROL A Epidemiologia e quadro cliacutenico do acidente por cascavel

sul-americana (Crotalus durissus) Rev Inst Med Trop Satildeo Paulo 199234(4)347-54

38

32-JUNQUEIRA LCARNEIROJ(2004)Histologia Baacutesica10ordf ed Guanabara Koogan Rio

de Janeiro

33- KAMIGUTI A S et al Properties of fibrinogen cleaved by Jararhagin a

metalloproteinase from the venom of Bothrops jararaca Thromb Haemost1994 72(2) 244-9

34- KAMIGUTIAS HANADAS Study of the coagulante and proteolytic activities of new

born Bothrops jararaca venom Toxicon 198523580

35- KAMIGUTI AS Alterations of the blood coagulation system after accidental human

inoculation by Bothrops jararaca venom Braz J Med Biol Res Rio de Janeirov19p199-

2041986

36- KAMIGUTI A S CARDOSO J L Haemostatic changes caused by the venoms of

South American snakes Toxicon 1989 27 (9) 955-63

37- KAMIGUTI A S Coagulopathy and hemorrage in human victims of Bothrops jararaca

envenoming in Brazil Toxicon Oxford v 28 p 961 - 9721991

38- KAMIGUTI AS SANO-MARTINSI S South american snake venoms affecting

haemostasis J Toxicol-Toxin Reviews 199514 359-74

39- KASTURIRATNE A et al The Global Burden of Snakebite A Literature Analysis and

Modelling Based on Regional Estimates of Envenoming and Deaths PLoS Medicine p 5 -

11 2008

40- LEAtildeO S M (2012) Histoacuteria natural modelagem de distribuiccedilatildeo e conservaccedilatildeo de

Bothrops itapetiningae Boulenger 1907 (Serpentes Viperidae Crotalinae) espeacutecie endecircmica

do Cerrado Dissertaccedilatildeo de Mestrado em Ciecircncias Florestais Publicaccedilatildeo do Departamento de

Engenharia Florestal Universidade de Brasiacutelia DF 122p

41- LEE RI WHITE PD A clinical study of the coagulation time of blood American

Journal of Medical Sciences 145 495-503 1913

42-LEMOS J C Epidemiologia dos acidentes ofiacutedicos notificados pelo Centro de

Assistecircncia Toxicoloacutegica de Campina Grande (CEATOX-CG) Paraiacuteba Revista Brasileira de

Epidemiologia v 12 2009

39

43-LOMONTE B A Tarkowski amp LA Hanson 1993 Host response to Bothrops

asper snake venom analysis of edema formation inflammatory cells and cytokine release in a

mouse model Inflammation 17 93-105

44- LORENZI TF(2003)Manual de Hematologia-Propedecircutica e Cliacutenica3ordf ed Medsi

45- LUNA KPO et al Humoral immune response of patients bitten by the snake Bothrops

erythromelas Rev Soc Bras Med Trop [online] 2010 vol43 n6 pp 731-732 ISSN

0037-8682 Disponiacutevel em httpdxdoiorg101590S0037-86822010000600027 Acessado

em abril de 2014

46- MANDELBAUN F R Isolamento e caracterizaccedilatildeo de dois fatores hemorraacutegicos do

veneno de Bothrops jararaca 1976 Tese (Doutorado) Satildeo Paulo Escola Paulista de

Medicina 1976

47- MASUDA M O et al Disciplina Corpo Humano e Sauacutede Uma Visatildeo Integrada -

Moacutedulo 1 2008

48- MELGAREJO A R Serpentes peccedilonhentas do Brasil In CARDOSO et al Animais

peccedilonhentos no BrasilBiologiacliacutenica e Terapecircutica dos acidentesSatildeo Paulo Sarvier 2ordf

ed2009p42-70

49- NEWLAB Laboratoacuterio de anaacutelises cliacutenicas2013

50- NIEWIAROWSKI S KIRBY E P STOCKER K Thrombocytin- a novel platelet

activating enzyme from Bothrops atrox venom Thromb res 1977 10 863-9

51- OLIVEIRA H F A LEITE R S COSTA C F Aspectos cliacutenico-epidemioloacutegicos de

acidentes com serpentes peccedilonhentas no municiacutepio de Cuiteacute Brasil Gazeta Meacutedica da Bahia

v 81 p 14-19 2011

52- PINHO F M O PEREIRA ID Ofidismo Rev Assoc Med Bras [online] 2001 vol

47 n1 pp 24-29 ISSN 0104-4230 Disponiacutevel em httpdxdoiorg101590S0104-

42302001000100026 Acessado em Fevereiro de 2014

53- ROSENFELD G 1971 Symptomatology pathology and treatment of snake bites in

South America In Bucherl W Buckeley EE (Eds) Venomous Animals and Their

Venoms Academic Press New York pp 345ndash384

40

54- SANCHEZ et alBiological activities of venoms from South American Snakes Toxicon

1992 3095-103

55- SANCHEZ EF et alIsolation of a proteinase with plasminogen-activating activity from

Lachesis muta muta (bushmaster) snake venom ArchBiochem Biophys 378(1)131-41

2000

56- SANO-MARTINS I S SANTOROM L Distuacuterbios Hemostaacuteticos em Envenenamentos

por Animais Peccedilonhentos no BrasilIn Animais peccedilonhentos no BrasilBiologiacliacutenica e

Terapecircutica dos Acidentes Sarvier 2ordf ed Satildeo Paulo 2009

57- SANTrsquoANNA SS GREGO KF PUORTO G ANTONIAZZI MM JARED C

CANDIDO D NANNI P KNYSAKI MORAESR P WENF HMALAQUEC M S

Animais Venenosos serpentes anfiacutebios aranhas escorpiotildees e insetos1ordfed Satildeo

PauloInstituto Butantan2012p27

58- SCHENBERG SGeographical pattern of crotamine distribution in the same rattlesnake

subspeciesSciense 1959 129 1361-3

59-SECRETAacuteRIA DA SAUacuteDE Disponiacutevel em

httpwwwsesaprgovbrmodulesconteudoconteudophpconteudo=396 Acessado em

fevereiro de 2014

60- SILVA VX Revisatildeo sistemaacutetica do complexo Bothrops neuwied (Serpentes Viperidae

Crotalinae) 2 volumes[Tese de doutorado]Universidade de Satildeo Paulo2000

61- SILVA GJ Estudo dos efeitos do veneno de Crotalus durissus terrificus sobre o

metabolismo e estresse oxidativo em fiacutegado de ratos 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado) - Setor de

Ciecircncias Bioloacutegicas Universidade Federal do Paranaacute Curitiba 2009

62- SILVA JR N J da BUCARETCHI F Mecanismo de accedilatildeo do Veneno Elapiacutedico e

Aspectos cliacutenicos dos acidentes In CARDOSO et al Animais peccedilonhentos no Brasil

Biologia Cliacutenica e Terapecircutica dos acidentes Satildeo Paulo SARVIER 2ordf ed 2009p116-124

63-SWENSON MJ Circulaccedilatildeo sanguiacutenea e sistema cardiovascular In Swenson MJ amp

Reece WO Dukes Fisiologia dos Animais Domeacutesticos 11 ed Guanabara Koogan Rio de

Janeiro 1996

41

64- TAMBOURGI D V Envenenamento por serpentes doenccedila negligenciada afetando

paiacuteses em desenvolvimento Anais da 62ordf Reuniatildeo Anual da SBPC-Natal - RN 2010

65-WHITE J Snake venoms and coagulopathy Toxicon Oxford v 45 p 951-967 2005

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 40: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

38

32-JUNQUEIRA LCARNEIROJ(2004)Histologia Baacutesica10ordf ed Guanabara Koogan Rio

de Janeiro

33- KAMIGUTI A S et al Properties of fibrinogen cleaved by Jararhagin a

metalloproteinase from the venom of Bothrops jararaca Thromb Haemost1994 72(2) 244-9

34- KAMIGUTIAS HANADAS Study of the coagulante and proteolytic activities of new

born Bothrops jararaca venom Toxicon 198523580

35- KAMIGUTI AS Alterations of the blood coagulation system after accidental human

inoculation by Bothrops jararaca venom Braz J Med Biol Res Rio de Janeirov19p199-

2041986

36- KAMIGUTI A S CARDOSO J L Haemostatic changes caused by the venoms of

South American snakes Toxicon 1989 27 (9) 955-63

37- KAMIGUTI A S Coagulopathy and hemorrage in human victims of Bothrops jararaca

envenoming in Brazil Toxicon Oxford v 28 p 961 - 9721991

38- KAMIGUTI AS SANO-MARTINSI S South american snake venoms affecting

haemostasis J Toxicol-Toxin Reviews 199514 359-74

39- KASTURIRATNE A et al The Global Burden of Snakebite A Literature Analysis and

Modelling Based on Regional Estimates of Envenoming and Deaths PLoS Medicine p 5 -

11 2008

40- LEAtildeO S M (2012) Histoacuteria natural modelagem de distribuiccedilatildeo e conservaccedilatildeo de

Bothrops itapetiningae Boulenger 1907 (Serpentes Viperidae Crotalinae) espeacutecie endecircmica

do Cerrado Dissertaccedilatildeo de Mestrado em Ciecircncias Florestais Publicaccedilatildeo do Departamento de

Engenharia Florestal Universidade de Brasiacutelia DF 122p

41- LEE RI WHITE PD A clinical study of the coagulation time of blood American

Journal of Medical Sciences 145 495-503 1913

42-LEMOS J C Epidemiologia dos acidentes ofiacutedicos notificados pelo Centro de

Assistecircncia Toxicoloacutegica de Campina Grande (CEATOX-CG) Paraiacuteba Revista Brasileira de

Epidemiologia v 12 2009

39

43-LOMONTE B A Tarkowski amp LA Hanson 1993 Host response to Bothrops

asper snake venom analysis of edema formation inflammatory cells and cytokine release in a

mouse model Inflammation 17 93-105

44- LORENZI TF(2003)Manual de Hematologia-Propedecircutica e Cliacutenica3ordf ed Medsi

45- LUNA KPO et al Humoral immune response of patients bitten by the snake Bothrops

erythromelas Rev Soc Bras Med Trop [online] 2010 vol43 n6 pp 731-732 ISSN

0037-8682 Disponiacutevel em httpdxdoiorg101590S0037-86822010000600027 Acessado

em abril de 2014

46- MANDELBAUN F R Isolamento e caracterizaccedilatildeo de dois fatores hemorraacutegicos do

veneno de Bothrops jararaca 1976 Tese (Doutorado) Satildeo Paulo Escola Paulista de

Medicina 1976

47- MASUDA M O et al Disciplina Corpo Humano e Sauacutede Uma Visatildeo Integrada -

Moacutedulo 1 2008

48- MELGAREJO A R Serpentes peccedilonhentas do Brasil In CARDOSO et al Animais

peccedilonhentos no BrasilBiologiacliacutenica e Terapecircutica dos acidentesSatildeo Paulo Sarvier 2ordf

ed2009p42-70

49- NEWLAB Laboratoacuterio de anaacutelises cliacutenicas2013

50- NIEWIAROWSKI S KIRBY E P STOCKER K Thrombocytin- a novel platelet

activating enzyme from Bothrops atrox venom Thromb res 1977 10 863-9

51- OLIVEIRA H F A LEITE R S COSTA C F Aspectos cliacutenico-epidemioloacutegicos de

acidentes com serpentes peccedilonhentas no municiacutepio de Cuiteacute Brasil Gazeta Meacutedica da Bahia

v 81 p 14-19 2011

52- PINHO F M O PEREIRA ID Ofidismo Rev Assoc Med Bras [online] 2001 vol

47 n1 pp 24-29 ISSN 0104-4230 Disponiacutevel em httpdxdoiorg101590S0104-

42302001000100026 Acessado em Fevereiro de 2014

53- ROSENFELD G 1971 Symptomatology pathology and treatment of snake bites in

South America In Bucherl W Buckeley EE (Eds) Venomous Animals and Their

Venoms Academic Press New York pp 345ndash384

40

54- SANCHEZ et alBiological activities of venoms from South American Snakes Toxicon

1992 3095-103

55- SANCHEZ EF et alIsolation of a proteinase with plasminogen-activating activity from

Lachesis muta muta (bushmaster) snake venom ArchBiochem Biophys 378(1)131-41

2000

56- SANO-MARTINS I S SANTOROM L Distuacuterbios Hemostaacuteticos em Envenenamentos

por Animais Peccedilonhentos no BrasilIn Animais peccedilonhentos no BrasilBiologiacliacutenica e

Terapecircutica dos Acidentes Sarvier 2ordf ed Satildeo Paulo 2009

57- SANTrsquoANNA SS GREGO KF PUORTO G ANTONIAZZI MM JARED C

CANDIDO D NANNI P KNYSAKI MORAESR P WENF HMALAQUEC M S

Animais Venenosos serpentes anfiacutebios aranhas escorpiotildees e insetos1ordfed Satildeo

PauloInstituto Butantan2012p27

58- SCHENBERG SGeographical pattern of crotamine distribution in the same rattlesnake

subspeciesSciense 1959 129 1361-3

59-SECRETAacuteRIA DA SAUacuteDE Disponiacutevel em

httpwwwsesaprgovbrmodulesconteudoconteudophpconteudo=396 Acessado em

fevereiro de 2014

60- SILVA VX Revisatildeo sistemaacutetica do complexo Bothrops neuwied (Serpentes Viperidae

Crotalinae) 2 volumes[Tese de doutorado]Universidade de Satildeo Paulo2000

61- SILVA GJ Estudo dos efeitos do veneno de Crotalus durissus terrificus sobre o

metabolismo e estresse oxidativo em fiacutegado de ratos 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado) - Setor de

Ciecircncias Bioloacutegicas Universidade Federal do Paranaacute Curitiba 2009

62- SILVA JR N J da BUCARETCHI F Mecanismo de accedilatildeo do Veneno Elapiacutedico e

Aspectos cliacutenicos dos acidentes In CARDOSO et al Animais peccedilonhentos no Brasil

Biologia Cliacutenica e Terapecircutica dos acidentes Satildeo Paulo SARVIER 2ordf ed 2009p116-124

63-SWENSON MJ Circulaccedilatildeo sanguiacutenea e sistema cardiovascular In Swenson MJ amp

Reece WO Dukes Fisiologia dos Animais Domeacutesticos 11 ed Guanabara Koogan Rio de

Janeiro 1996

41

64- TAMBOURGI D V Envenenamento por serpentes doenccedila negligenciada afetando

paiacuteses em desenvolvimento Anais da 62ordf Reuniatildeo Anual da SBPC-Natal - RN 2010

65-WHITE J Snake venoms and coagulopathy Toxicon Oxford v 45 p 951-967 2005

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 41: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

39

43-LOMONTE B A Tarkowski amp LA Hanson 1993 Host response to Bothrops

asper snake venom analysis of edema formation inflammatory cells and cytokine release in a

mouse model Inflammation 17 93-105

44- LORENZI TF(2003)Manual de Hematologia-Propedecircutica e Cliacutenica3ordf ed Medsi

45- LUNA KPO et al Humoral immune response of patients bitten by the snake Bothrops

erythromelas Rev Soc Bras Med Trop [online] 2010 vol43 n6 pp 731-732 ISSN

0037-8682 Disponiacutevel em httpdxdoiorg101590S0037-86822010000600027 Acessado

em abril de 2014

46- MANDELBAUN F R Isolamento e caracterizaccedilatildeo de dois fatores hemorraacutegicos do

veneno de Bothrops jararaca 1976 Tese (Doutorado) Satildeo Paulo Escola Paulista de

Medicina 1976

47- MASUDA M O et al Disciplina Corpo Humano e Sauacutede Uma Visatildeo Integrada -

Moacutedulo 1 2008

48- MELGAREJO A R Serpentes peccedilonhentas do Brasil In CARDOSO et al Animais

peccedilonhentos no BrasilBiologiacliacutenica e Terapecircutica dos acidentesSatildeo Paulo Sarvier 2ordf

ed2009p42-70

49- NEWLAB Laboratoacuterio de anaacutelises cliacutenicas2013

50- NIEWIAROWSKI S KIRBY E P STOCKER K Thrombocytin- a novel platelet

activating enzyme from Bothrops atrox venom Thromb res 1977 10 863-9

51- OLIVEIRA H F A LEITE R S COSTA C F Aspectos cliacutenico-epidemioloacutegicos de

acidentes com serpentes peccedilonhentas no municiacutepio de Cuiteacute Brasil Gazeta Meacutedica da Bahia

v 81 p 14-19 2011

52- PINHO F M O PEREIRA ID Ofidismo Rev Assoc Med Bras [online] 2001 vol

47 n1 pp 24-29 ISSN 0104-4230 Disponiacutevel em httpdxdoiorg101590S0104-

42302001000100026 Acessado em Fevereiro de 2014

53- ROSENFELD G 1971 Symptomatology pathology and treatment of snake bites in

South America In Bucherl W Buckeley EE (Eds) Venomous Animals and Their

Venoms Academic Press New York pp 345ndash384

40

54- SANCHEZ et alBiological activities of venoms from South American Snakes Toxicon

1992 3095-103

55- SANCHEZ EF et alIsolation of a proteinase with plasminogen-activating activity from

Lachesis muta muta (bushmaster) snake venom ArchBiochem Biophys 378(1)131-41

2000

56- SANO-MARTINS I S SANTOROM L Distuacuterbios Hemostaacuteticos em Envenenamentos

por Animais Peccedilonhentos no BrasilIn Animais peccedilonhentos no BrasilBiologiacliacutenica e

Terapecircutica dos Acidentes Sarvier 2ordf ed Satildeo Paulo 2009

57- SANTrsquoANNA SS GREGO KF PUORTO G ANTONIAZZI MM JARED C

CANDIDO D NANNI P KNYSAKI MORAESR P WENF HMALAQUEC M S

Animais Venenosos serpentes anfiacutebios aranhas escorpiotildees e insetos1ordfed Satildeo

PauloInstituto Butantan2012p27

58- SCHENBERG SGeographical pattern of crotamine distribution in the same rattlesnake

subspeciesSciense 1959 129 1361-3

59-SECRETAacuteRIA DA SAUacuteDE Disponiacutevel em

httpwwwsesaprgovbrmodulesconteudoconteudophpconteudo=396 Acessado em

fevereiro de 2014

60- SILVA VX Revisatildeo sistemaacutetica do complexo Bothrops neuwied (Serpentes Viperidae

Crotalinae) 2 volumes[Tese de doutorado]Universidade de Satildeo Paulo2000

61- SILVA GJ Estudo dos efeitos do veneno de Crotalus durissus terrificus sobre o

metabolismo e estresse oxidativo em fiacutegado de ratos 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado) - Setor de

Ciecircncias Bioloacutegicas Universidade Federal do Paranaacute Curitiba 2009

62- SILVA JR N J da BUCARETCHI F Mecanismo de accedilatildeo do Veneno Elapiacutedico e

Aspectos cliacutenicos dos acidentes In CARDOSO et al Animais peccedilonhentos no Brasil

Biologia Cliacutenica e Terapecircutica dos acidentes Satildeo Paulo SARVIER 2ordf ed 2009p116-124

63-SWENSON MJ Circulaccedilatildeo sanguiacutenea e sistema cardiovascular In Swenson MJ amp

Reece WO Dukes Fisiologia dos Animais Domeacutesticos 11 ed Guanabara Koogan Rio de

Janeiro 1996

41

64- TAMBOURGI D V Envenenamento por serpentes doenccedila negligenciada afetando

paiacuteses em desenvolvimento Anais da 62ordf Reuniatildeo Anual da SBPC-Natal - RN 2010

65-WHITE J Snake venoms and coagulopathy Toxicon Oxford v 45 p 951-967 2005

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 42: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

40

54- SANCHEZ et alBiological activities of venoms from South American Snakes Toxicon

1992 3095-103

55- SANCHEZ EF et alIsolation of a proteinase with plasminogen-activating activity from

Lachesis muta muta (bushmaster) snake venom ArchBiochem Biophys 378(1)131-41

2000

56- SANO-MARTINS I S SANTOROM L Distuacuterbios Hemostaacuteticos em Envenenamentos

por Animais Peccedilonhentos no BrasilIn Animais peccedilonhentos no BrasilBiologiacliacutenica e

Terapecircutica dos Acidentes Sarvier 2ordf ed Satildeo Paulo 2009

57- SANTrsquoANNA SS GREGO KF PUORTO G ANTONIAZZI MM JARED C

CANDIDO D NANNI P KNYSAKI MORAESR P WENF HMALAQUEC M S

Animais Venenosos serpentes anfiacutebios aranhas escorpiotildees e insetos1ordfed Satildeo

PauloInstituto Butantan2012p27

58- SCHENBERG SGeographical pattern of crotamine distribution in the same rattlesnake

subspeciesSciense 1959 129 1361-3

59-SECRETAacuteRIA DA SAUacuteDE Disponiacutevel em

httpwwwsesaprgovbrmodulesconteudoconteudophpconteudo=396 Acessado em

fevereiro de 2014

60- SILVA VX Revisatildeo sistemaacutetica do complexo Bothrops neuwied (Serpentes Viperidae

Crotalinae) 2 volumes[Tese de doutorado]Universidade de Satildeo Paulo2000

61- SILVA GJ Estudo dos efeitos do veneno de Crotalus durissus terrificus sobre o

metabolismo e estresse oxidativo em fiacutegado de ratos 52f Dissertaccedilatildeo (Mestrado) - Setor de

Ciecircncias Bioloacutegicas Universidade Federal do Paranaacute Curitiba 2009

62- SILVA JR N J da BUCARETCHI F Mecanismo de accedilatildeo do Veneno Elapiacutedico e

Aspectos cliacutenicos dos acidentes In CARDOSO et al Animais peccedilonhentos no Brasil

Biologia Cliacutenica e Terapecircutica dos acidentes Satildeo Paulo SARVIER 2ordf ed 2009p116-124

63-SWENSON MJ Circulaccedilatildeo sanguiacutenea e sistema cardiovascular In Swenson MJ amp

Reece WO Dukes Fisiologia dos Animais Domeacutesticos 11 ed Guanabara Koogan Rio de

Janeiro 1996

41

64- TAMBOURGI D V Envenenamento por serpentes doenccedila negligenciada afetando

paiacuteses em desenvolvimento Anais da 62ordf Reuniatildeo Anual da SBPC-Natal - RN 2010

65-WHITE J Snake venoms and coagulopathy Toxicon Oxford v 45 p 951-967 2005

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 43: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

41

64- TAMBOURGI D V Envenenamento por serpentes doenccedila negligenciada afetando

paiacuteses em desenvolvimento Anais da 62ordf Reuniatildeo Anual da SBPC-Natal - RN 2010

65-WHITE J Snake venoms and coagulopathy Toxicon Oxford v 45 p 951-967 2005

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 44: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

ANEXOS

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 45: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

ANEXO I

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

(OBSERVACcedilAtildeO para o caso de pessoas maiores de 18 anos e natildeo inclusas no grupo de

vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos me disponho a

participar da Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e

sangria em indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

O trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao voluntaacuterio soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para coleta de sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou

desconforto ao voluntaacuterio

- Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares cumprindo as exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do

Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

- O voluntaacuterio poderaacute se recusar a participar ou retirar seu consentimento a qualquer momento

da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o

mesmo

- Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

- Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da equipe

cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

- Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

- Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma podendo

discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute impresso em duas vias e

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

Page 46: AVALIAÇÃO LEUCOCITÁRIA E PLAQUETÁRIA, TEMPOS DE …dspace.bc.uepb.edu.br/jspui/bitstream/123456789/3995/1/PDF... · elaise leite da silva avaliaÇÃo leucocitÁria e plaquetÁria,

uma delas ficaraacute em minha posse

- Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

_______________________

Assinatura do pesquisador responsaacutevel

________________________

Assinatura do Participante

Assinatura Dactiloscoacutepica

Participante da pesquisa

-

ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

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ANEXO II

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO-TCLE

OBS (menor de 18 anos ou mesmo outra categoria inclusa no grupo de vulneraacuteveis)

Pelo presente Termo de Consentimento Livre e Esclarecido eu

________________________________ em pleno exerciacutecio dos meus direitos autorizo a

participaccedilatildeo do ___________________________________________________de ____anos

na a Pesquisa Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB

Declaro ser esclarecido e estar de acordo com os seguintes pontos

o trabalho Avaliaccedilatildeo leucocitaacuteria e plaquetaacuteria tempos de coagulaccedilatildeo e sangria em

indiviacuteduos envenenados por serpentes em campina grande PB teraacute como objetivo geral

arrolar indiviacuteduos envenenados pelas serpentes de interesse meacutedico na Paraiacuteba atendidos no

Hospital de Emergecircncia e Trauma de Campina Grande - PB com o intuito de avaliar a

variaccedilatildeo nos paracircmetros hematoloacutegicos apresentados por esses indiviacuteduos apoacutes

envenenamento ofiacutedico e tratamento

Ao responsaacutevel legal pelo (a) menor de idade soacute caberaacute a autorizaccedilatildeo para que haja coleta de

sangue e natildeo haveraacute nenhum risco ou desconforto ao voluntaacuterio

Ao pesquisador caberaacute o desenvolvimento da pesquisa de forma confidencial revelando os

resultados ao meacutedico indiviacuteduo eou familiares se assim o desejarem cumprindo as

exigecircncias da Resoluccedilatildeo 19696 do Conselho Nacional de SauacutedeMinisteacuterio da Sauacutede

O Responsaacutevel legal do menor participante da pesquisa poderaacute se recusar a participar ou

retirar seu consentimento a qualquer momento da realizaccedilatildeo do trabalho ora proposto natildeo

havendo qualquer penalizaccedilatildeo ou prejuiacutezo para o mesmo

Seraacute garantido o sigilo dos resultados obtidos neste trabalho assegurando assim a privacidade

dos participantes em manter tais resultados em caraacuteter confidencial

Natildeo haveraacute qualquer despesa ou ocircnus financeiro aos participantes voluntaacuterios deste projeto

cientiacutefico e natildeo haveraacute qualquer procedimento que possa incorrer em danos fiacutesicos ou

financeiros ao voluntaacuterio e portanto natildeo haveria necessidade de indenizaccedilatildeo por parte da

equipe cientiacutefica eou da Instituiccedilatildeo responsaacutevel

Qualquer duacutevida ou solicitaccedilatildeo de esclarecimentos o participante poderaacute contatar a equipe

cientiacutefica no nuacutemero (083) xxxx-xxxx com Karla Patriacutecia de Oliveira Luna

Ao final da pesquisa se for do meu interesse terei livre acesso ao conteuacutedo da mesma

podendo discutir os dados com o pesquisador vale salientar que este documento seraacute

impresso em duas vias e uma delas ficaraacute em minha posse

Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

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Desta forma uma vez tendo lido e entendido tais esclarecimentos e por estar de pleno acordo

com o teor do mesmo dato e assino este termo de consentimento livre e esclarecido

Assinatura do Pesquisador Responsaacutevel _____________________________

Assinatura do responsaacutevel legal pelo menor ________________________________

Assinatura do menor de idade_______________________

Assinatura Dactiloscoacutepica

Responsaacutevel legal

-

ANEXO III

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ANEXO III