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PERGUNTAS DE GENTICA

Que tipo de mutaes causa o 5-bromouracilo? Transies

Imprinting genmico regulao epigentica

Genes reprter genes que permitem detectar promotores

Enhancer cadeias de DNA no codificantes

RNA guias - RNA editing

FALSA: necessria hidrlise de GTP no final da traduo

Anel deslizante - processividade da enzima

FALSA: na cadeia de DNA as bases azotadas esto para fora

Mutaes que criam codo stop - nonsense

Chromossome walking refere -se a Isolamento de fragmentos de DNAadjacentes

Para a identificao de um gene com anticorpos - necessrio que ele esteja

clonado num vector de expresso

No opero do triptofano - ocorre atenuao quando os ribossomas sintetizam

completamente um pptido leader

FALSA: A enzima RecA participa no mismatch repair

Imunoglobulinas - variabilidade por causa dos arranjos do DNA

FALSA: oncogenes precisam de ter os dois alelos activados para causar

tumores

FALSA: basta um gene supressor de tumores defeituoso para causar cancro

Inverso DNA recombinao especfica entre sequncias repetidas

Transposes bacterianos regulao por molculas de RNA

FALSA: hepnavirus tem RNA de dupla hlice

Letalidade sinttica 2 mutaes que quando ocorrem ao mesmo tempo so

letais para o ser vivo

cII provoca a lisogenizao do fago lambda porque activa cI

Yeast two hybrid system detectar interaces entre protenas

Heteroduplex resulta do fenmeno de migrao dos ramos

Pergunta de RNA riboswitch e outra RNAi

PRTICA

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I. Pergunta sobre caractersticas dos plasmdeos (indicar a falsa) Tm grande peso

molecular

II. Alnea certa: 0,5 ml em 1 hora

III. 2 enzimas. A: 4, 3, 3 kb. B: 2.5 e 7.5 kb

a. Mapa de restrio: 2.5/1.5/3/3

b. Ligase unia o DNA (ficava circular) e depois usava-se novamente as enzimas de

retrio. Indicar os fragmentos obtidos: 1.5, 3 e 5.5 kb

IV. Pergunta escolha mltipla sobre o PCR: alnea sobre os oligonucletidos

V. Pergunta sobre trabalho de 2-AP. 2 estirpes mutadas no opero lacZ (original CTA)

no conseguem fazer metabolismo de lactose. So tratados com 2-AP (mutagneo),para tentar que ela reconverta os genes mutados para a forma original. Depois as

estirpes so colocadas num meio com lactose para ver se ocorreu mutao de volta ao

normal

a. Calcular a taxa de reverso para as 2 estirpes

ESTIRPE A: 2 colnias

ESTIRPE B: 35 colnias

Concentrao: 108 UFC/ml

Volume: 0.1 ml

A: 2/(108 x 0.1) = 2 x 10-7

B: 35/(108 x 0.1) = 3.5 x 10-6

b. GENE ORIGINAL: CTA

GENE POSSVEL PARA A: CGA (ou uma transverso equivalente)

GENE POSSVEL PARA B: CCA (ou uma transcrio equivalente)

2-AP s reverte transies. Como a estirpe B tem mais colnias, significa que

houve mais reverses, ou seja a estirpe B tem um gene que sofreu transio

em relao ao original. Estirpe A tem poucas colnias, isto significa que a 2-AP

no conseguiu reverter, logo o gene de A sofreu uma transverso (ou

adio/deleco de pares de bases, ) em relao ao gene original (NUNCA

UMA TRANSCRIO). As 2 colnias que aparecem foram devidas a mutaes

espontneas.

c. Taxa de resistncia rifampicina (antibitico) igual ou diferente nas 2

estirpes? igual. Estirpes so iguais excepto no gene que metaboliza a lactose(lacZ). Como os genes que conferem resistncia rifampicina no esto no

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gene lacZ, a probabilidade de ocorrer uma mutao espontnea que confira

resistncia ao antibitico igual nas 2 estirpes.

VI. Tem a ver com o trabalho prtico n 6 TRANSFORMAO DE CLULAS BACTERIANAS

COM DNA PLASMDICO(aconselho a ver o trabalho e os clculos efectuados na aula,

porque esta parte est incompleta)

a. Calcular a eficincia de transformao: 1.4 x 106

b. (Pergunta incompleta) Houve uns que foram colocados num meio com 1

antibitico (cresceram 700) e outros que foram colocados num meio com 2

antibiticos (cresceram 250). 700 corresponde ao nr total e 250 ao nmero de

transformados (que so resistentes ao s 2 antibiticos). Era para calcular uma

taxa: 250/700 = 36%