Bioreguladores em pós-colheita (2009)

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APLICA APLICA Ç Ç ÃO DE BIORREGULADORES EM ÃO DE BIORREGULADORES EM P P Ó Ó S S - - COLHEITA DE FRUTAS E HORTALI COLHEITA DE FRUTAS E HORTALI Ç Ç AS AS Prof. Ricardo Alfredo Kluge Prof. Ricardo Alfredo Kluge Dep. Dep. Ciências Ciências Biol Biol ó ó gicas gicas ESALQ/USP ESALQ/USP [email protected] [email protected]

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APLICAÇÃO DE BIORREGULADORES EM PÓS-COLHEITA DE FRUTAS E HORTALIÇASAPLICAAPLICAÇÇÃO DE BIORREGULADORES EM ÃO DE BIORREGULADORES EM

PPÓÓSS--COLHEITA DE FRUTAS E HORTALICOLHEITA DE FRUTAS E HORTALIÇÇASAS

Prof. Ricardo Alfredo KlugeProf. Ricardo Alfredo Kluge

Dep. Dep. CiênciasCiências BiolBiolóógicasgicas –– ESALQ/USPESALQ/USP

[email protected]@esalq.usp.br

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BIORREGULADORES VEGETAISBIORREGULADORES VEGETAISBIORREGULADORES VEGETAIS

São compostos de ocorrência natural ou sintéticos, os quais em baixas concentrações, promove, inibe ou modifica processos morfológicos e fisiológicos do

vegetal.

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Principais Principais BiorreguladoresBiorreguladores vegetaisvegetais

Hidrazida maléicaBrassinoesteróidesÁcido salicílicoJasmonatosPoliaminas1-metilciclopropeno

Auxinas

Giberelinas

Citocininas

Ácido abscísico

Etileno

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• Deve haver aumento da concentração do biorregulador no tecido vegetal

• síntese • transportado de outras partes• aplicação

• O tecido tem que ter sensibilidade ao biorregulador (receptores)

• Levar em consideração o um balanço hormonal

MECANISMO DE AÇÃO DOS BIORREGULADORES

MECANISMO DE AMECANISMO DE AÇÇÃO DOS ÃO DOS BIORREGULADORESBIORREGULADORES

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ETILENO

C = CH

H

H

HC2H4

- Hormônio vegetal gasoso, sendo ativo a 0,005 ppm

- Considerado o hormônio do amadurecimento

- Está envolvido com estresses

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0

20

40

60

80

100

Varia

ção

rela

tiva

(%)

Divisão celular Alongamento celular Climatérico

Maturação Amadurecimento Senescência

Intensidade

respiratória

Crescimento

do fruto

EtilenoAuxina

Ácido abscísico

Giberelina

Citocinina

0

20

40

60

80

100

Varia

ção

rela

tiva

(%)

Divisão celular Alongamento celular Climatérico

Maturação Amadurecimento Senescência

Intensidade respiratória

Crescimento do fruto

EtilenoAuxina

Ácidoabscísico

Giberelina

Citocinina

ALTERAÇÕES HORMONAIS DURANTE O AMADURECIMENTO DE FRUTOS CLIMATÉRICOS

ALTERAALTERAÇÇÕES HORMONAIS DURANTE O AMADURECIMENTO ÕES HORMONAIS DURANTE O AMADURECIMENTO DE FRUTOS CLIMATDE FRUTOS CLIMATÉÉRICOSRICOS

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metionina

S-adenosilmetionina(SAM)

Ácido 1-aminociclopropano

1-carboxílico(ACC)

Etileno

Ciclo da metionina(Yang)

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SISTEMAS DE PRODUÇÃO DE ETILENO

• Sistema 1 (pré-climatérico): – Todos os frutos possuem– Baixa produção de etileno– Pouca atividade da ACC sintase (pouco ACC formado)

• Sistema 2 (climatérico):– Alguns frutos possuem (frutos climatéricos)– Alta produção de etileno (autocatálise)– Alta atividade da ACC sintase (mais ACC formado)

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Membrana do

retículo endoplasmático

Núcleo

Novo mRNA

Síntese de proteína

MODO DE AÇÃO CELULAR DO ETILENO

1- Ligação ao síto

Receptores(ETR1, ETR2, ERS1, ERS2, EIN4)

Ribossomo

C2H4

2 –Transdução(EIN2, CTR1, EIN3)

3- Alteração na expressão gênica

4 –Transcrição(ERF1, EIN3)

5 -Tradução

Sinal

Genes de amadurecimento e síntese de etileno

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EFEITOS DO ETILENO

• Aumenta expressão gênica de enzimas do amadurecimento: – Clorofilase– Celulase– Poligalacturonase (PG)– Pectinametilesterase (PME)– Fenilalanina amônio-liase (PAL)– ACC oxidase– Piruvato dehidrogenase

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PRODUÇÃO DE ETILENO POR PRODUTOS HORTÍCOLAS

Classe μl C2H4 /kg/h à20oC

Produto

Muito baixo 0.01-0.1 Cereja, citros, uva,morango, hortaliças

folhosas, raízes,batata, flores cortadas

Baixo 0.1-1.0 Pepino, quiabo,pimentão, caqui,

abacaxiModerado 1.0-10.0 Banana, figo, melão

honeydew, manga,tomate

Alto 10-100 Maçã, damasco,abacate, melão

cantaloupe, necterina,mamão, pêssego, pêra,

ameixaMuito alto >100 Kiwi, cherimóia,

maracujá

Classe μl C2H4 /kg/h à20oC

Produto

Muito baixo 0.01-0.1 Cereja, citros, uva,morango, hortaliças

folhosas, raízes,batata, flores cortadas

Baixo 0.1-1.0 Pepino, quiabo,pimentão, caqui,

abacaxiModerado 1.0-10.0 Banana, figo, melão

honeydew, manga,tomate

Alto 10-100 Maçã, damasco,abacate, melão

cantaloupe, necterina,mamão, pêssego, pêra,

ameixaMuito alto >100 Kiwi, cherimóia,

maracujá

Classe μl C2H4 /kg/h à20oC

Produto

Muito baixo 0.01-0.1 Cereja, citros, uva,morango, hortaliças

folhosas, raízes,batata, flores cortadas

Baixo 0.1-1.0 Pepino, quiabo,pimentão, caqui,

abacaxiModerado 1.0-10.0 Banana, figo, melão

honeydew, manga,tomate

Alto 10-100 Maçã, damasco,abacate, melão

cantaloupe, necterina,mamão, pêssego, pêra,

ameixaMuito alto >100 Kiwi, cherimóia,

maracujá

Kader (1992)

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0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

Etile

no (μ

L kg

-1h-1

)

Etileno

CO2

0

50

100

150

200

250

0 2 4 6 8 10 12 14

Dias após a colheita

Ativ

idad

e da

cel

ulas

e(u

nida

des/

mg

prot

eína

)

0

2

4

6

8

10

12

Firm

eza

da p

olpa

(Kg)

Celulase

FirmezaTa

xa re

spira

tória

(mg

CO

2kg

-1h-1

)Produção de etileno, respiração, atividade da celulase e firmeza de polpa de abacate (Seymour & Tucker, 1993)

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0,0

0,5

1,0

1,5

2,0

2,5

Verde Verde-maduro

Breaker Rosa Laranja Vermelho

Estádios de maturação

Firm

eza

(kg)

0

10

20

30

40

50

60

Lico

peno

(μg/

g)

0,0

5,0

10,0

15,0

20,0

25,0

30,0

Verde Verde-maduro

Breaker Rosa Laranja Vermelho

Estádios de maturação

Etile

no (n

L/h/

g)

0

5

10

15

20

25

30

CO 2

(ml/h

/kg)

firmezalicopeno

etileno

CO2

Alterações na firmeza, coloração, respiração e produção de etileno em

tomate

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EFEITOS DESEJÁVEIS DO ETILENO

EFEITOS DESEJÁVEIS DO ETILENO

• Promove e uniformiza o amadurecimento – banana, tomate, manga

• Estimula a abscisão (facilita a colheita)

• Induz brotações em batata-semente e outros propágulos

• Desverdescimento dos citros

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Limão Siciliano recém-colhido

Limão Siciliano tratado com etileno

Jacomino et al. (2002)

Aplicação do etileno: DESVERDECIMENTO DE CITROS

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Aplicação do etileno: DESVERDECIMENTO DE CITROS

Foto: Irv Eaks

Ethylene (ppm)

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Aceleração da maturação de tomate

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Aceleração da maturação de pêra

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MÉTODOS DE TRATAMENTOS COM ETILENO

• Adição de etileno em câmara– Azetil, Etil-5

• Geradores de etileno – Alax, Frutalax

C2H5OH – H2O C2H4

• Liberadores de etileno – Ethephon: ácido 2-cloroetilfosfônico

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colheita

Distribuição

Máximo sabor

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Duração da climatização em dias

Dia 4 5 6 7 8 10

------------------------------Temperatura (oC)------------------------------

Primeiro* 20-21 19 18 18 16,5-17 14,5

Segundo 20 19 18 18 16,5-17 14,5

Terceiro 19 19 18 16,5-17 15,5 14,5

Quarto 15,5 19 18 16,5-17 15,5 14,5

Quinto 13-13,5 15,5 14,5-15,5 15,5 14,5

Sexto 13-13,5 14,5 15,5 14,5

Sétimo 13-13,5 14,5 14,5

Oitavo 13-13,5 14,5

Nono 14,5

Décimo 13-13,5

Deve-se fazer a aplicação do gás ativador do amadurecimento (etileno ⇒ 1000ppm ou 1L por metro cúbico ou mistura nitrogênio/etileno 20000ppm ou 20L por metro cúbico)

CLIMATIZAÇÃO DE BANANA

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Concentração de ethephon (mg/litro)

Dias para alcançar o estádio de “ponta verde”

0 19*

250 12*

500 9*

1000 6**

2000 6**

* Amadurecimento irregular** Amadurecimento uniforme

Efeito de diferentes concentrações de Ethrel (ácido 2-cloroetilfosfônico) no amadurecimento de bananas ‘Nanicão’ a 20oC.

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COMPARAÇÃO DA EFETIVIDADE DO ETILENO COM OUTROS

HIDROCARBONETOS

Composto Atividade relativa Etileno 1 Propileno 2.370 Monóxido de C 2.900 Acetileno 12.500 Butano 140.000

C2H4

C3H6

CO

C2H2

C4H10

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• Amarelecimento de produtos hortícolas (hortaliças folhosas e flores)

• Formação de compostos amargos e tóxicos (ex.: isocumarina)

• Abscisão (folhas e flores)• Brotamento (cebola, batata)

EFEITOS INDESEJÁVEIS DO ETILENO

EFEITOS INDESEJÁVEIS DO ETILENO

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+ O2

MetioninaS-adenosiltransferase

Metionina

SAM

ACC

Etileno

ACC sintase

ACC oxidase

+ síntese de etileno

Amadurecimento, injúrias mecânicas, danos de frio, auxinas, etileno

REGULAÇÃO DA PRODUÇÃO DE ETILENO REGULAREGULAÇÇÃO DA PRODUÃO DA PRODUÇÇÃO DE ETILENO ÃO DE ETILENO

AmadurecimentoInjúrias

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AminoetoxivinilglicinaÁcido aminooxiacético

- Síntese de etileno

AnaerobioseCobalto (Co+2)Ácido salicílicoTemperatura > 35oCCO2 alto

+ O2

MetioninaS-adenosiltransferase

Metionina

SAM

ACC

Etileno

ACC sintase

ACC oxidase

+ síntese de etileno

Amadurecimento, injúrias mecânicas, danos de frio, auxinas, etileno

REGULAÇÃO DA PRODUÇÃO DE ETILENO REGULAREGULAÇÇÃO DA PRODUÃO DA PRODUÇÇÃO DE ETILENO ÃO DE ETILENO

AmadurecimentoInjúrias

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C2H4

BLOQUEIO DO SÍTIO DE LIGAÇÃO

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1-MCP = 1-metilciclopropeno

- Bloqueador da ação do etileno

-retarda o amadurecimento de frutos e senescência de flores cortadas

C4H6C2H4

1-MCP

receptorCH3

- SmartFreshTM (0,14% i.a. 1-MCP)

1,6g = 1 μL L-1 de 1-MCP

BLOQUEIO DO SÍTIO RECEPTOR DO ETILENO COM 1-MCP

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verde1/2 maduro

Sem 1-MCPSem 1-MCP

240ppb 1-MCP 240ppb 1-MCP

4 dias a 25oC

Jacomino & Kluge (2000)

Page 33: Bioreguladores em      pós-colheita (2009)

7 dias a 24oC

Kluge et al. (2002)

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Kluge et al. (2003)

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Mamões ‘Golden’ (1-MCP - 7 dias a 10ºC)

+ 3 dias a 24ºC

1-MCP Controle1-MCP + etileno

Etileno

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Bloqueio da ação do etileno: MELANCIA

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Rhizopus

50

55

60

65

70

75

0 200 400 600 800 1000

1-MCP concentration (ppb)

Tim

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10%

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(h

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0

1

2

3

4

5

6

7

PA

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(O

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90nm

/h/m

g pr

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n)

Time to 10% disease severity PAL activity Jiang et al. (2001)

Hor

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aBloqueio da ação do etileno: MORANGO

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Page 39: Bioreguladores em      pós-colheita (2009)

GIBERELINAAlto nível em frutos e hortaliças jovens: retarda a senescência

Aplicação de ácido giberélico

Retarda desverdecimentode limão e tomate

Retarda amadurecimento de banana e manga

Diminui atividade da α-amilase, PG, PME,

celulase

Previne a degradação da clorofila

Reduz escurecimento da polpa em ameixa

Diminui atividade da PAL e PPO

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-9,0

-8,0

-7,0

-6,0

-5,0

-4,0

-3,0

-2,0

-1,0

0,00 10 20 40 80 160

Índi

ce d

e co

rÁcido giberélico (mg.L-1)

verde

Amarelo

Lima ácida Tahiti

Fonte: Spósito et al. (2000)

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CITOCININA• Retarda a degradação de clorofila

• Pode retardar a senescência de hortaliças de folhas

ÁCIDO ABSCÍSICO• Nível de ABA é constante durante a maturação

• ABA aumenta durante o amadurecimento e senescência

• Aplicação de ABA acelera o amadurecimento

POLIAMINAS• Putrescina, espermidina e espermina

• Efeitos antagônicos ao etileno

• Poliaminas e etileno possuem um precursor em comum: SAM

• Estão envolvidas na prevenção da degradação da membrana (controle de injúrias pelo frio)

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JASMONATOS• ácido jasmônico e metil jasmonato

• A aplicação estimula a produção de etileno

• Acelera degradação da clorofila e síntese de carotenóides

• Mecanismo de defesa contra estresses

ÁCIDO SALICÍLICO• Inibidor da síntese de etileno (ACC etileno)

• Biossíntese a partir do ácido cinâmico(Metabolismo secundário)

• Ácido acetilsalicílico (preservação de flores)

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Obrigado!

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