Teratogenicidade Cardíaca em ratos com

Fenilcetonúria Maternal: Definindo parâmetros

fenotípicos e influências de fundo genético

Jéssica Lima Conceição

Graduanda de Ciências Biológicas- UFMA

Membro da Liga Acadêmica de Genética Médica- UFMA

Introdução Malformações cardiovasculares (CVMS) são defeitos

congênitos comuns, que ocorrem em uma taxa de 5-8/1000

nascidos vivos e respondem por ¼ de todos os defeitos

congênitos.

Fatores genéticos e ambientais

Trissomia 21

Síndrome de Turner

Distúrbios de um único gene (GATA4, Nkx2.5, NOTCH1)

Exposição pré-natal ao Etanol

Diabetes Materna

Fenilcetonúria Maternal (MPKU)

O que é Fenilcetonúria?

Erro inato do metabolismo

Ocorre 1 em a cada 10.000 - 15.000 nascidos vivos

Herança autossómica recessiva

Fenilalanina Tirosina

Fenilalanina Tirosina

PHA

PHA

Fenillactato

Fenilacetato

Fenilapiruvato

Nádia. et al. 2000

Classificação das deficiências de

fenilalanina hidróxilase segundo a

atividade enzimática

FORMA ATIVIDADE ENZIMÁTICA

FAL SANGUÍNEA TRATAMENTO

FNC clássica <1 %

>20 mg/dl SIM

FNC leve 1-3 %

10-20 mg/dl SIM

Hiperfenilalaninemia permanente

> 3%

<10 mg/dl NÃO

Trefz FK. et al.1985

PKU-Maternal

• Retardo do crescimento

• Microcefalia

• Dismorfias

• Deficiência intelectual

• CVM

CVM - MPKU 7- 15%

Coarctação da aorta (COA)

Tetralogia de Fallot (TOF)

Defeitos no septo Ventricular (VSD)

Síndrome do coração esquerdo hipoplásico (SHCE)

Diagnóstico:

Clínico - triagem neonatal.

Laboratorial – fluorimetria ,espectrometria

de massa.

Trefz FK. et al.1985

Quadro clínico

Atraso global do desenvolvimento

Neuropsicomotor

deficiência mental

comportamento agitado ou padrão autista

convulsões

odor característico na urina

Trefz FK. et al.1985

Objetivo

Delinear parâmetros críticos em que a

fenilalanina é um teratogénico cardiovascular

e estudar os efeitos de fundo genético.

Materiais e Métodos

Mouse BTBR Pah enu2

Mouse C57B/L6J

Mouse C3H/HeJ

Fêmeas homozigotas

mutantes para Pah enu2

1-Dosagem Experimental de Fenilalanina – Quatro grupos de tratamento para investigar o nível

crítico materno:

controle (<360 μM)

baixa (de 360-600 μM)

médio (600-900 μM)

elevado (> 900 μM)

Níveis de Phe foram obtidos no início do estudo, E5.5, E10.5, E15.5 e no sacrifício.

Fêmeas homozigóticos mutantes de C57B/L6J Pah enu2 e C3H/HeJ Pahenu2 linhagens congênitas

Ração deficiente de Phe

e suplementação 0,7 g /L

Phe na água para manter

os níveis de Phe no soro

materno <360 μM

2-Exposição Temporária a Fenilalanina

Ração deficiente de Phe e

suplementação 0,7 g /L Phe na água

para manter os níveis de Phe no soro

materno <360 μM

Foram expostos a uma dieta rica em

Phe por períodos escalonados ao

longo de dias E7.5-E15.5

Um dia sem ingestão Phe (ração e água

deficiente Phe).

As fêmeas foram sacrificados em E18.5

e fetos dissecados. Os níveis Phe

Maternal foram coletados, 48 horas e

24 horas após a exposição.

Análise da Fenilalanina Níveis de Phe

-Amostras de sangue submandibular

-Amostras de sangue cardíaco

Espectrometria de

massa em tandem

Analisador de

aminoácidos

As amostras foram processadas no Laboratório de

Bioquímica do Hospital Infantil Nationwide

Resultados

BTBR- Defeito do septo

ventricular (VSD), dupla

via de saída do ventrículo

direito(DORV), Artéria do

Arco aórtico (AAA).

C3H- Esteriose da válvula

aórtica (AVS), hipertrofia

sub-ventricular (VH).

BL6- Interrupção do arco

aórtico (IAA), arco

aórtico a direita (RAA).

Discussões

• 1) cardiovascular associado MPKU defeitos ocorrem de um modo dependente da dose, de acordo com os níveis de Phe maternos.

• 2) O tempo de exposição por Phe corresponde ao padrão humano.

• 3) a base genética influencia a incidência e fenótipo de defeitos cardiovasculares MPKU associados.

• Semelhante ao humano, perda de gravidez, quando níveis de Phe no soro materno são altos.

• Com base em estudos anteriores, previa-se o fundo genético C3H/HeJ que demonstraria um aumento na incidência de CVMs, mas não podíamos prever o resultado para o C57BL / 6.

OBRIGADA