Leukemia Para seu futuro Por su futuro · O estado mutacional condiciona o prognóstico e o...
Transcript of Leukemia Para seu futuro Por su futuro · O estado mutacional condiciona o prognóstico e o...
• O estabelecimento do prognóstico,
tratamento e o monitoramento da LLC requer a
identificação de biomarcadores genéticos.
• Terapias altamente eficientes baseadas em anticorpos
monoclonais ou inibidores de tirosina quinase dependem
da presença ou ausência das deleções 17p e 11q.(3-5)
Leucemia linfocítica crônicaA leucemia linfocítica crônica (LLC) é a leucemia mais frequente em adultos nos países ocidentais.Constitui aproximadamente 30% das leucemias e afeta fundamentalmente a população em idade avançada. (1)
As alterações cromossômicas e genéticas típicas daLLC são principalmente CNVs e constituem potentesmarcadores prognósticos.(2)
O estado mutacional condiciona o prognóstico e o tratamento da LLC
• O estabelecimento do prognóstico,
tratamento e o monitoramento da LLC requer a
identificação de biomarcadores genéticos.
• Terapias altamente eficientes baseadas em anticorpos
monoclonais ou inibidores de tirosina quinase dependem
da presença ou ausência das deleções 17p e 11q.(3-5)
GRUPO DE RISCO
Alto
Intermediário
Muito baixo
27%
39%
17%
17%
51%
66% 37%
69%87%
78%
29%
57%
del(17p)-TP53 e/ou BIRC3
NOTCH1 e/ou SF3B1 e/oudel(11q23)
Del(13q14)
Cariótipo normal ou Trissomia 12Baixo
FREQUÊNCIA MUTAÇÃO Sobrevidaem 5 anos
Sobrevidaem 10 anos
Plataforma genómica para la identificación de biomarcadoresenlaleucemialinfáticacrónicaLeukemia
KaryoNIM®Leukemiamejora las técnicas convencionales.Ofrece una combinacióndelatecnologíadearrayCGHporoligonucleótiodosydesNparraydiseñadoporNIMGenetics.
•Análisis de CNVs en todo el genoma con una mayor sensibilidad
•Mayor precisión en la delimitaciónde CNVs
Detección de LOH* por disomía uniparental
*LOH: Lost of heterozygosity
Dirigido específicamente a los biomarcadores de LLC
aCGH sNps diseñopropio
Plataforma genómica para la identificación de biomarcadoresenlaleucemialinfáticacrónicaLeukemia
KaryoNIM®Leukemiamejora las técnicas convencionales.Ofrece una combinacióndelatecnologíadearrayCGHporoligonucleótiodosydesNparraydiseñadoporNIMGenetics.
•Análisis de CNVs en todo el genoma con una mayor sensibilidad
•Mayor precisión en la delimitaciónde CNVs
Detección de LOH* por disomía uniparental
*LOH: Lost of heterozygosity
Dirigido específicamente a los biomarcadores de LLC
aCGH sNps diseñopropio
Plataforma genômica para a identificação de biomarcadores na leucemia linfocítica crônica
KaryoNIM® Leukemia melhora as técnicas convencionais.Oferece uma combinação da tecnologia de array CGH por oligonucleotídeos e de SNP array desenhado pela NIMGenetics
aCGH SNPs Desenho Próprio• Análise de CNVs em todo o
genoma com maior sensibilidade• Maior precisão na delimitação de CNVs
*LOH: Lost of heterozygosity
Detecção de LOH* por dissomia uniparental
Direcionado específicamente aosbiomarcadores de LLC
ArrayCGH:definiendo el pronóstico de la LLCElaCGHeslatécnicadeelecciónparalaevaluacióndelaLLC:
Imágen de aCGH de una muestra de LLC con múltiples CNVs.
✓ informasobreelgenomacompleto
✓Mejoraelrendimientodeldiagnósticogenético El 70% de los casos con LLC presentan alteraciones visibles
por aCGH frente al 50% de los casos diagnósticados por FISH.
✓ sefacilitaeltransporteylamanipulacióndelamuestra El estado celular no es limitante, pues se realiza a partir
de ADN. No requiere cultivo celular.
ArrayCGH:definiendo el pronóstico de la LLCElaCGHeslatécnicadeelecciónparalaevaluacióndelaLLC:
Imágen de aCGH de una muestra de LLC con múltiples CNVs.
✓ informasobreelgenomacompleto
✓Mejoraelrendimientodeldiagnósticogenético El 70% de los casos con LLC presentan alteraciones visibles
por aCGH frente al 50% de los casos diagnósticados por FISH.
✓ sefacilitaeltransporteylamanipulacióndelamuestra El estado celular no es limitante, pues se realiza a partir
de ADN. No requiere cultivo celular.
Array CGH: definindo o prognóstico da LLC
Informa o genoma completo
Melhora o rendimento do diagnóstico genético 70% dos casos de LLC apresentam alterações visíveis pelo aCGH quando comparados aos 50% dos casos diagnosticados pela técnida de FISH.
Facilidades no transporte e na manipulação da amostraAs condições celulares não são limitantes, pois o exame é realizado a partir do DNA, sem a necessidade de cultura de células.
Imagem do aCGH de uma amostra de LLC com múltiplas CNVs.
O aCGH é a técnica de escolha para a avaliação da LLC:
Elarraydehibridacióngenómicacomparada(aCGH)eseltestgenéticomáseficientepara el diagnóstico de alteraciones cromosómicas de la LLC.(6-9)
NosEvEporFisH NosEvEporFisH
sisEvEporFisH
✓ Puede modificar un pronóstico La rutina de FISH no estudia el genoma completo,
sólo un grupo definido de alteraciones.
✓ Incrementa la resolución: •Define la CNV en toda su extensión • Identifica los genes implicados.
Del(6q) Dup(8q)
NosEvEporFisHDel(18q)
Del13q (DLE1-2/DLEU7)
O array por hibridação genômica comparativa (aCGH) é o teste genético mais eficiente para o diagnóstico de alterações cromossômicas da LLC. (6-9)
Pode modificar um prognósticoA técnica de FISH não estuda o genoma completo, apenas um grupo definido de alterações.
Aumenta a resolução:• Define a CNV em toda a sua extensão• Identifica os genes implicados.
FISH NÃO DETECTA FISH NÃO DETECTA
FISH NÃO DETECTA
FISH DETECTA
ArrayCGH180k+sNps informacióntécnicaLeukemia
CoBErTurACoMpLETAdELAsrEGioNEsCLÁsiCAspArAproNósTiCoENLLC
LoCus
CApACidAddEdETECCióN rEsoLuCióN
Trisomía del cromosoma 12
130 Kb 1 sonda/25.5 Kb
Deleción 11q23, incluyendo el gen ATM
Deleción 13q14, incluyendo la región DLEU
Deleción 17p13, incluyendo el gen TP53
oTrAsrEGioNEs/GENEsdEiNTErés CApACidAddEdETECCióN
GenesdeinterésenLLCAtM, BIRC2, BIRC3, IKZF1, KLHL6, MYB, MYD88, NOtCH1, POt1, SF3B1, tP53, XPO1
<17 Kb
regionesLoH 10 Mb
Genes incluidos en Cancer Consensus Cobertura completa
COBERTURA COMPLETA DAS REGIÕES
RELACIONADAS AO PROGNÓSTICO NA LLC
OUTRAS REGIÕES/GENES DE INTERESSE CAPACIDADE DE DETECÇÃO
LOCUS
CAPACIDADE DE DETECÇÃO RESOLUÇÃO
Informação técnica
Trissomia do cromossomo 12
Deleção 11q23, incluindo o gene ATM
Genes de interesse na LLCATM, BIRC2, BIRC3, IKZF1, KLHL6, MYB, MYD88, NOTCH1, POt1,SF3B1, TP53, XPO1
Regiões LOH
130 Kb 1 sonda/25.5 Kb
Genes incluídos no Câncer Consensus Cobertura completa
<17 Kb
10 Mb
Deleção 17p13, incluindo o gene TP53
Deleção 13q14, incluindo a região DLEU
Array CGH 180k + SNPs
ElmejoraCGHparalaevaluacióndelaLLC
Leukemia
✓MejoraladeteccióndeCNvsenlasregionesdeinteréspronóstico.
✓ Aportainformaciónrelevantesobre:
- los genes relacionados con LLC
- la clonalidad y la pérdida de heterocigosidad
✓ incrementodelarentabilidaddiagnósticaenun20%respectoaloscasosdetectadosporFisH.
✓ Facilitalamanipulacióndelamuestra,puesnorequierecultivocelular.
✓ pronósticomáscompleto:examinatodaslasregionesdelgenomafrentealasregionesincluidasenlarutinadeFisH.
✓Máximaprecisiónenladefinicióndelaalteraciónysuslímites,mostrandolosgenesimplicados,graciasasumayorresolución.(6-9)
✓ posibilitaalequipofacultativoeldiagnósticogenéticomásactualizadodelaLLC,acordeconlasguíasinternacionalesyloslaboratoriosmásavanzadosdelmundo.(10)
O melhor aCGH para a avaliação da LLC
✓ Melhora a detecção de CNVs nas regiões de interesse prognóstico.
✓ Traz informação relevante sobre:
- os genes relacionados com a LLC
- a clonalidade e a perda de heterozigosidade
✓ Aumento de 20% na rentabilidade diagnóstica comparado aos casos detectados por FISH.
✓ Facilita a manipulação da amostra, pois não requer cultura de células.
✓ Prognóstico mais completo: examina todas as regiões do genoma quando comparado às regiões analisadas por FISH.
✓ Máxima precisão na definição da alteração e seus limites, mostrando os genes implicados, graças a sua melhor resolução. (6-9)
✓ Proporciona à equipe médica o diagnóstico genético mais atualizado da LLC, de acordo com as normas internacionais e os laboratórios mais avançados do mundo. (10)
Condições e envio da amostra:
•Tipo da amostra: 3-5 mL de sangue ou medula óssea em EDTA. Envio em temperatura ambiente no prazo máximode 48 horas desde a coleta da amostra.•Amostra de DNA: 500 ng de DNA em uma concentração superior a 10 ng/μl em buffer low TE ou água. Envio em temperatura ambiente.•Documentos necessários: Pedido médico e consentimento informado•Prazo de entrega do resultado: 15 dias úteis
Bibliografia1: Dighiero G, Hamblin T. Chronic lymphocytic leukaemia. Lancet, 2008; 371: 1017–292: Eichhorst B, Dreyling M, et al. Chronic lymphocytic leukemia. ESMO Clinical Practice Guidelines for diagnosis, treatment and follow-up. Ann.
Oncol, 2011; 22 Suppl 6: 50–543: Rossi D, Rasi S, et al. Integrated mutational and cytogenetic analysis identifies new prognostic subgroups in chronic lymphocytic leukemia.
Blood, 2013;121 (8): 1403-14124: Wierda WG, Kipps TJ, et al. Blood 2011; 117:64505: Hillmen P, Skotnicki AB, et al. Alemtuzumab compared with chlorambucil as first-line therapy for chronic lymphocytic leukemia. J Clin Oncol 2007;
25:56166: Ferreira Bi, Garcia JF, et al. Comparative genome profiling across subtypes of low-grade B-cell lymphoma identifies type-specific and common
aberrations that target genes with a role in B-cell neoplasia. Haematologica, 2008; 93(5):670-97: Kolquist KA, Schultz RA, et al. Evaluation of chronic lymphocytic leukemia by oligonucleotide-based microarray analysis uncovers novel
aberrations not detected by FISH or cytogenetic analysis (2011). Mol Cytogenet, 2011; 16;4:258: Edelmann J, Holzmann K, et al. High-resolution genomic profiling of chronic lymphocytic leukemia reveals new recurrent genomic alterations.
Blood.2012;120(24):4783-949: Peterson JF, Aggarwal N, et al. Integration of microarray analysis into the clinical diagnosis of hematological malignancies: How much can we
improve cytogenetics testing? Oncotarget 2015; 6(22):18845-6210: Schoumans J, Suela J, et al. Guidelines for genomic array analysis in acquired haematological neoplastic disorders. Genes Chromosomes
Cancer, 2016; 55 (5): 480-91.
Abordajeintegraleneldiagnósticode la LLC•solucionesintegrales. NIMGenetics dispone de una
amplia cartera de pruebas de genética molecular para cubrir las necesidades de cada paciente. Incluye:
sondasNiMFisH,paralamonitorizacióndeLLC Catálogo único de sondas, caracterizadas por su alta
especificidad, precisión y luminosidad, así como su permanentemente actualización.
secuenciacióndeTp53 Nuestra NGS para TP53 está certificada por ERIC
(European Research Initiative on CLL).
•Líderesdeopiniónenoncología. Nuestro equipo acumula más de 200 artículos cientíifcos en revistas internacionales sobre genética y onco-hematología.
•Nuestros laboratorios siguen los controles de calidad de la EMQN (European Molecular Genetics Quality Network).
•Miembros acreditados por la Asociación Española de Genética Humana (AEGH).
•Los Informes de NIMGenetics están calificados como excelentes por líderes de opinión en oncología, genética clínica y otras especialidades.
Abordagem completa para o diagnóstico da LLC
• Soluções completas. A NIMGenetics dispõe de um amplo catálogo de exames em genética molecular para contemplar as necessidades de cada paciente. Inclui:
Sondas NIMFISH para o monitoramento da LLC
Catálogo único de sondas caracterizadas pela alta especificidade, precisão e fluorescência, assim como sua permanente atualização.
Sequenciamento do TP53
Nosso NGS para TP53 é certificada pelo ERIC (European Research Initiative on CLL).
• Líderes de opinião em oncologia. Nossa equipe possui mais de 200 artigos científicos em revistas internacionais sobre genética e onco-hematologia.
• Nossos laboratórios seguem os controles de qualidade da EMQN (European Molecular Genetics Quality Network).
• Membros acreditados pela Associação Espanhola de Genética Humana (AEGH).
• Os resultados das informações da NIMGenetics são qualificados como excelentes por líderes de opinião em oncologia, genética clínica e outras especialidades.
BRASILRua Elvira Ferraz, nº250, Cj. 211.
Itaim - São Paulo, SP.CEP: 04552-040
Tel. +55 11 3044 1813
MADRIDParque Científico de Madrid
Faraday, 7 (Campus de Cantoblanco)28049 Madrid
Tel.+34 91 804 77 60M. +34 672 060 393
MÉXICOGuanajuato 92, Of. 601, Col. Roma Norte
06700 Ciudad de MéxicoTel. +52 55 68232076
www.nimgenetics.com