meio LB
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Descrição
O Agar Luria Bertani, Miller, é usado para cultivo e manutenção de linhagens recombinantes de
Escherichia coli para estudos genéticos e moleculares e pode ser usado para cultivo rotineiro de
microorganismos não exigentes.
Aplicação e uso:
O ágar Luria Bertani é preparado como descrito por Lennox (1) para cultivo e manutenção de
cepas recombinantes de Escherichia coli. O ágar Luria Bertani, Miller (2) é ligeiramente
diferente, pois possui o dobro da quantidade de Cloreto de Sódio. O meio é rico
nutricionalmente para o crescimento de culturas puras de cepas recombinantes. Linhagens
derivadas de Escherichia coli K12 são deficientes na síntese de vitamina B e são modificadas
por mutação específica para criar cepas auxotróficas que não são capazes de crescer em meios
Deficientes nutricionalmente. O hidrolisado enzimático de caseína fornece peptídeos e peptonas
enquanto as vitaminas do complexo B são fornecidas pelo extrato de levedura. O cloreto de
sódio fornece íons de sódio para o transporte de membrana e mantém o equilíbrio osmótico do
meio.
E. coli é cultivada até à fase log tardia em Meio LB. Alguns plasmídeo vectores para replicar
um número elevado de cópias, e não requerem amplificação seletiva. Alguns vetores não fazer
replicar de forma livremente, e precisam de ser amplificado de forma seletiva. Cloranfenicol
pode ser adicionado para inibir hospedeiro síntese e prevenir a replicação do cromossoma
bacteriano.
Nitrogênio, aminoácidos, e fontes de carbono são fornecidos por digestão enzimática da
caseína. Vitaminas e determinados oligoelementos são fornecidos pelo extrato de levedura. Os
íons de sódio para o transporte e equilíbrio osmótico são fornecida pelo cloreto de sódio. Agar é
o agente de solidificação.