Relatório aula prática 9Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos (ANTIBIOGRAMA)

Objetivo:Testar a sensibilidade de bactérias à agentes antimicrobianos.

Material utilizado: 2 placas de meio de cultura contendo ágar Müller-Hinton; swabs de algodão; discos de papel filtro com antibióticos (tetraciclina, neomicina, cloranfenicol,

ampicilina, ácido nalidíxico); suspensão de micro-organismos (E. Coli, S. Aureus).

Metodologia:

1º Momento:

Procedimento:Na primeira foram separadas as duas placas com meio de cultura ágar Müller-Hinton.

Após, foram pegos swabs de algodão e saturados em suspensão bacteriana, uma contendo E. coli, e outra S. aureus. Esta suspensão foi espelhada uniformemente, uma em cada placa.

Após este procedimento, foram distribuídos cinco discos de antibióticos, um para cada antibiótico, sobre o meio de cultura.

Em seguida, as placas foram colocadas na estufa, em temperatura entre 25-37° para incubar.

2° Momento:

Leitura e interpretação:Na segunda aula as placas foram retiradas da estufa, e pode-se verificar a formação de halos ao redor de alguns discos antimicrobianos.

Após a verificação de halos foi realizada uma medição de diâmetro dos mesmos.

No meio de cultura com E. coli, a Tetraciclina apresentou um halo de 20mm, a Ampicilina um halo de 20mm e a Neomicina um halo de 10mm.Não houve formação de halos para o Ácido Nalidíxico e para Tetraciclina. (Anexo I, figura 1)

No meio de cultura com S. aureus, o Ácido Nalidíxico apresentou um halo de 12mm. Quanto aos demais antibióticos, não houve formação de halos. (Anexo I, figura 2)

Resultados:A bactéria E. coli, apresentou resistência quanto ao Ácido Nalidíxico, Cloranfenicol e a Neomicina, e sensibilidade quanto à Tetraciclina e Ampicilina.

A bactéria S. aureus, apresentou resistência em relação a todos os antibióticos.

Anexo I: Imagens

Fig. 1 Formação de halos em meio de cultura comE. coli. Halos de 20mm para Tetraciclina e Ampicilinae halo de 10mm para Neomicina.

Fig. 2

Formação de halo em meio de cultura comS. aureus.Halo de 12mm para Ácido Nalidíxico.

Anexo II: TABELA PADRÃO PARA INTERPRETAÇÃO DE HALOS DE INIBIÇÃO (*). ANTIBACTERIANOS PARA ORGANISMOS GRAM-POSITIVOS E NEGATIVOS.

ZONA DE INIBIÇÃO EM mm

ANTIBACTERIANO

Símbolo Concentração Resistente Intermediário Sensível

Amicacina AM 30 mcg 14 ou menos 15 - 16 17 ou mais

Ampicilina ao testar microrganismos Gram-negativos e Enterococos

AP 10 mcg 11 ou menos 12 - 13 14 ou mais

Ampicilina ao testar estafilococos e microrganismos sensíveis a penicilina

AP 10 mcg 20 ou menos 21 - 28 29 ou mais

Ampicilina ao testar Haemophilus sp

AP 10 mcg 19 ou menos - 20 ou mais

Bacitracina BC 10 unid. 8 ou menos 9 - 12 13 ou mais

Carbenicilina ao testar Proteus sp e E. coli

CR 100 mcg 17 ou menos 18 - 22 23 ou mais

Carbenicilina ao testar P. aeruginosa

CR 100 mcg 13 ou menos 14 - 16 17 ou mais

Cefoxitina CT 30 mcg 14 ou menos 15 - 17 18 ou mais

Cefalotina CF 30 mcg 14 ou menos 15 - 17 18 ou mais

Cloranfenicol CO 30 mcg 12 ou menos 13 - 17 18 ou

ZONA DE INIBIÇÃO EM mm

ANTIBACTERIANO

Símbolo Concentração Resistente Intermediário Sensível

mais

Clindamicina CI 20 mcg 14 ou menos 15 - 16 17 ou mais

Colistina CL 10 mcg 8 ou menos 9 - 10 11 ou mais

Eritromicina EI 15 mcg 18 ou menos 14 - 17 18 ou mais

Estreptomicina ET 10 mcg 11 ou menos 12 - 14 15 ou mais

Gentamicina GN 10 mcg 12 ou menos 13 - 14 15 ou mais

Kanamicina KN 80 mcg 13 ou menos 14 - 17 18 ou mais

Nalidixico, ácido NA 30 mcg 13 ou menos 14 - 18 19 ou mais

Neomicina NO 30 mcg 12 ou menos 13 - 16 17 ou mais

Nitrofurantoina NT 300 mcg 14 ou menos 15 - 16 17 ou mais

Novobiocina NV 30 mcg 17 ou menos 18 - 21 22 ou mais

Oxacilina ao testar estafilococos

OX 5 mcg 19 ou menos 20 - 22 23 ou mais

Penicilina G ao testar estafilococos

PN 10 unid. 20 ou menos 21 - 28 29 ou

ZONA DE INIBIÇÃO EM mm

ANTIBACTERIANO

Símbolo Concentração Resistente Intermediário Sensível

mais

Penicilina G ao testar outros microrganismos

PN 10 unid. 11 ou menos 12 - 21 22 ou mais

Polimixina PL 300 unid. 8 ou menos 9 - 11 12 ou mais

Sisomicina SS 10 mcg 14 ou menos 15 - 17 18 ou mais

Sulfonamidas SF 300 mcg 12 ou menos 13 - 16 17 ou mais

Sulfatrim(sulfametoxazol Trimetoprim)

ST 25 mcg 10 ou menos 11 - 15 16 ou mais

Tetraciclina TT 30 mcg 14 ou menos 15 - 18 19 ou mais

Tobramicina TB 10 mcg 12 ou menos 13 - 14 15 ou mais

Vancomicina VC 30 mcg 9 ou menos 10 - 11 12 ou mais

(*) ADAPTADO DO NCCLS.