Rev. Saúde públ., S.Paulo, 20(6) :475-80,1986

SERINGAS HIPODBRMICAS DESCARTÃVEIS VERSUS REUTILIZÃVEIS.ESTUDO DE POSSIVEIS EFEITOS SOBRE O VIRUS DA VACINA VIVA, ATENUADA

CONTRA O SARAMPO *

Edda de Rizzo * *Francisco Liauw Woe Fang * *Neuza Maria Frazatti Gallina * *Célia Sayoko Tak ata "Cosue Miyaki • *Ana M1I!iaAratangy Pluciennik • * •Augusta Sato • * * *Michel Marie Pra! * *Elizabeth Mieko Furusho Pral * *Inácio França Mendes < <

RIZZO, E. de et alo Seringas hipodérmicas descartáveis versus reutilizáveis, Estudo de possíveis efeitos. sobre o vírus da vacina viva, atenuadacontra o sarampo. Rev.Saúde públ., S.Paulo, 20:475-80,

1986. .

RESUMO: Objetivou-se verificar entre seringas hipodérmicas descartáveis e reutilizáveis qual inter-fere mais com o vírus vivo presente na vacina contra o sarampo. Vacinas pertencentes a dois lotes foramreconstltuídas com os dois tipos de seringas, de modo a formarem dois pools distintos, mantidos à tem-peratura de +2 a+80C e protegidos da luz. De cada lote foram realizadas, no mínimo, ,seis títulaçõesem paralelo, com amostragem a cada hora, de zero a seis horas após reconstituição. A análise estatísticados resultados obtidos nas titulações, feita pelo sistema de retas de regressão demonstrou que embora asvacinas manipuladas com ambos os tipos de seringas apresentassem um decréscimo de título estatistica-mente significativo com o decorrer das horas, ele foi bem mais acentuado para as vacinas reconstitufdascom seringas reutílízáveis. A menor interferência das descartáveis no título da vacina viva, atenuada contrao sarampo, demonstrou que a preconização e uso desse tipo de seringas pela Secretaria de Estado daSaúde de São Paulo é o ideal e recomendável, por preservar mais a vacina desde a reconstituição até suaadministração e, conseqüentemente, a sua eficácia na prevenção dessa infecção.

UNITERMOS: Vacina contra sarampo. Eficácia Seringas. Estudos comparativos.

INTRODUÇÃO

A vacinação contra o sarampo foi iniciada em1969 pela rede de centros de saúde da Secretaria deEstado da Saúde de São Paulo. À época, a seringacontendo o diluente e a agulha, ambas descartáveis,acompanhavam o frasco de vacina. Posteriormente,elas passaram a ser adquiridas separadamente. Na-quela ocasião, a utilização de material descartávelversus material reutilizável (vidro) na vacinação con-tra o sarampo foi muito discutida. Apesar das ten-tativas de levantamento de informações oficiaissobre a indicação de um ou outro/material, nenhu-ma documentação pode ser localizada. Existiamapenas orientações verbais que indicavam o uso dedescartáveis com9 preferenciais.

Recentemente, tendo em vista o alto investi-mento que tal material vem representando para aSecretaria, o questionamento sobre a utilização deseringas de vidro para a vacinação contra o sarampo,como se faz com as demais vacinas, foi retomado.O fato levou a uma série de consultas oficiais a or-ganismos nacionais e internacionais, tais comoMinistério da Saúde, Organização Mundial daSaúde (OMS), "Center for Disease Control" (CDe)e Organização Panamericana de Saúde (OPAS).

A OMS informou que a seringa de vidro é larga-mente usada na imunização contra o sarampo, quedesconhece qualquer efeito nocivo desse tipo de

< Realizado com auxílio financeiro do FESIMA - Fomento de Educação Sanitária e Imunização em Massa ContraDoenças Tranamissíveis (Proc, n9s 31/85 c 42/85) e do FEDIB - Fundo Especial de Despesas do Instituto Butantan .

• * Da Seção de Cultura de Tecidos e Controle do Serviço de Vírologia do Instituto Butantan - Av. Vital Brasil, 1500- 05504 - São Paulo, SP - Brasil.

«< Do FESIMA - Av. Dr. Arnaldo, 351 - 01245 - São Paulo, SP - Brasil.

< ••• Da Coordenadoria de Saúde da Comunidade - Av. São Luiz, 99 - 01046 - São Paulo, SP - Brasil.

475

srzzo é""de et alo Seringas hipodérmicas descartáveis versus reutilizáveis. Estudo de possíveis efeitos sobre o vírus I

vacina viva, atenuada contra o sarampo. Rev. Saúde públ., S. Paulo, 20: 475 -80, 1986.

material sobre a vacina e que a qualidade da águausada na lavagem da seringa não interfere com ovírus vacinal, desde que as "recomendações paraos procedimentos de esterilização sejam seguídos'";

ISegundo o CDC, a maior preocupação quanto

às seringas reutilizáveis usadas na vacinação contrao sarampo diz respeito ao uso de desinfetantes oudetergentes, os quais poderiam eventualmente dei-xar resíduos que inativariam o vírus. Consideratambém que água destilada seria ideal para a lava-gem das seringas mas que "água limpa, mas nãodestilada" também poderia ser usada, satisfatoria-mente t"

A OPAS referiu não haver inconveniência algumano uso do material reutilizável para a vacinação con-tra o sarampo desde que sua esterilização sejaadequada ***. •

Segundo informação do Ministério da Saúde ****,vários Estados brasileiros utilizam seringas devidro na vacinação contra o sarampo. Sugere aqueleMinistério que a lavagem seja feita com água e sabãoneutro e enxague posterior com água filtrada, erecomendou, ainda, que as seringas e agulhas paraesta vacina sejam separadas daquelas usadas para ou-tros imunobiológicos.

Considerando, por um lado, as informações re-cebidas dos vários organismos e o alto investimentonecessário à aquisição de material descartável e, poroutro, a falta de bibliografia que confirme as in-formações obtidas e as dificuldades operacionaisinerentes ao uso do material reutilizável, foi de-senvolvido um estudo comparativo entre seringasdescartáveis e reutilizáveis na administração davacina contra o sarampo.

A pesquisa teve por objetivo verificar o nível deinterferência do material com o qual as seringas sãofabricadas na potência da vacina, de modo a forne-cer subsídios para uma decisão sobre que tipo dematerial adquirir para aplicação da vacina viva,atenuada contra o sarampo.

MATERIAL E MfTODOS

Vacina viva, atenuada contra o sarampo - Foramutilizados dois lotes de vacinas (I e 11) produzidoscom vírus da cepa Biken OAM-70, apresentadas em

frascos brancos de cinco doses, dentro do prazo (validade (12 meses) e fomecidas pela Secretaria (Saúde do Estado de São Paulo.

Seringas - Seringas hipodérmicas (3 ml) de dotipos foram usadas em paralelo na reconstituiçâda vacina: descartáveis e reutilizáveis (vidro). Ap:cada teste de potência, as seringas reutilizáveis firam colocadas em recipiente plástico contendágua filtrada e enviadas ao Centro de Saúde Escoido Butantin "Dr. Samuel Bamsley Pessoa" para (procedimentos de lavagem e preparo, segundo pnconização da Secretaria da Saúdeê , Para a lavageifoi usado detergente Teepol a 1% e enxague de devezes em água filtrada e tratada com carvão ativadpara retirada de cloro. Após acondicionamento erpapel kraft, as seringas foram esterilizadas em autcclave sem dispositivo de secagem (câmara simples:

Reconstituiçõo da vacina - Para cada teste dotitulação, dois pools de vacina contra o sarampo foram preparados, um com seringas reutilizáveis I

outro com seringas descartáveis. As agulhas foransempre do tipo descartável. Cada pool correspondeiao conteúdo de quatro frascos de vacina de cíncrdoses, reconstituídos com o próprio diluente. Apóa reconstituição, os pools foram mantidos em geladeira, à temperatura de +2 a + 80C, protegidos diluz, pelo período de seis horas. De hora em horaamostras foram colhidas com pipetas sorológicapara serem submetidas aos testes de potência. Cperíodo de seis horas foi escolhido' por corresponder, em média, à jornada de vacinação dos centro:de saúde, embora a bula recomende que a vacineseja utilizada até oito horas após a reconstituição

Células - A linhagem de células Vero ("AfricanGreen Monkey"), mantida em Eagle MEM1 ,3, acrescido de 10"A, de soro de vitela, foi utilizada nostestes de potência. Após a inoculação, o soro foireduzido para 2%.

Titulação da vacina - As amostras de cada poolde vacinas, colhidas a cada hora, foram diluídas aodécimo e inoculadas em tubos de cultura de célulasVero. O período de adsorção do vírus foi de umahora a 36,50C. Cada teste teve a duração de 7 dias,com leituras do efeito citopatogênico feitas no 4~e 7? dias2,3.

* OMS - Comunicação pessoal do Dr, R.H. Henderson, Diretor do "Expanded Programme in Immunization", Geneve,, Switzerland - Cartas ref, EPI/I8/180/7, de 27/01/84 e de 18/05/84.

** CDC - Comunicação pessoal do Dr. Alan R. Hinman, Diretor da "Division of Immunization, Center for PreventionServices ", Atlanta, USA - Carta de 31/01/84; e do Dr. Harrison C. Stetler do "Medical Epidemiologist,Surveillance Investigations and Research Branch, Dívísion of Immunization, Center for Prevention Services",Atlanta, USA - Carta de 11/07/84. .

* * * Comunicação pessoal do Dr. Ciro de Quadros, Assessor Regional do PAI (Programa Ampliado de Imunizações)- Carta ref. HPM/EPI H 16/68/6 BRA, de 13/2/84.

* * * * Comunicação pessoal da Enfermeira Helena Rocha, do Ministério da Saúde.

476

'iúzzo E, de et alo Seringas hipodérmicas descartáveis versus reutilizáveis. Estudo de possíveis efeitos sobre o vírus davacina viva, atenuada contra o sarampo. Rev. Saúde públ., S. Paulo, 20: 475 -80,1986.

Vírus referência - Em todas as titulações foi uti-lizado vírus sarampo-referência preparado na Seçãode Cultura de Tecidos e Controle do Instituto Bu-tantan, a partir de amostra cedida pelo laboratórioRIT (Recherche et Industrie Thérapeutiques) daBélgica, liofilizado,

Cálculo dos titulas - Os títulos foram calculadospelo método de Reed e Müench+ e expressos emDICT50 (doses infectantes de cultura de teci-dos 50%).

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Os resultados obtidos nas seis titulações realiza-das de ° a 6 horas com vacinas do lote I, apósreconstituição com seringas reutilizáveis e seringasdescartáveis, constam nas Tabelas 1 e 2, respectiva-mente. As Tabelas 3 e 4 referem-se a sete titulaçõesfeitas com o lote 11, obedecendo aos mesmos inter-valos de tempo adotados para os dois tipos de serin-gas mencionados. Foi verificado que a potência ini-cial dos dois lotes de vacina em teste era diferente.

TABELA 1

Resultados das titulações da vacina viva, atenuada contra o sarampo (Lote 1),reconstituída com seringas reutilizáveis (DICT50/0,5 ml).

Horas pós reconstituiçãoTitulações

O 2 3 4 5 6

FI103,32 103,00 103,27 103,10 103,20 103,27 103,382.089 1.000 1.862 1.259 1.585 1.826 2.399

~,;, 103,54 103,50 103,45 103,27 103,43 103,50 103,002?

3.467 3.162 2.819 1.862 2.691 3.162 1.000

3?103,54 103,38 103,61 103,31 103,36 103,15 103,003.467 2.399 4.047 2.042 2.291 1.413 1.000

4~103,41 103,10 103,38 103,22 103,36 102,90 102,4'92.571 1.259 2.399 1.659 2.291 794 309

5?103,54 103,49 103,55 103,47 103,38 103,10 10 2,113.467 3.090 3.548 2.952 2.399 1.259 512

6?103,74 103,62 103,46 102,94 103,16 102,84 102,695.495 4.169 2.884 871 1.445 691 489

DICTSO: dose infectante de cultura de tecidos 50%Título mínimo da vacina : 1.000 DICTSO/O,5 m1

e os dados das Tabelas 3 e 4, a Figura 2. Verificou-seque, com o decorrer das horas, tanto as vacinas re-constituídas com seringas reutilizáveis (vidro)quanto aquelas reconstítuídas com descartáveisapresentaram queda de título, como normalmenteocorre com esse tipo de imunobiológico, dadas ascaracterísticas físico-químicas do vírus do sarampo.Entretanto, a perda de potência, observada comseringas de vidro foi mais acentuada.

Os coeficientes de correlação entre o título dasvacinas e o tempo decorrido apresentaram valorespróximos de r = - 1 para os dois tipos de seringas(reutilizáveis: r = -0,93 e r -0,88; descartáveis:r = -0,85 e r = -0,91).

477

A análise das Tabelas 1 e 3 mostrou que o títulodas vacinas de ambos os lotes, quando manipula-das com seringas de vidro, algumas vezes apresentou-se abaixo do valor mínimo de 1.000/mCT 50 pordose humana, na 5~ e 6~ horas pós reconstituição.Já com as vacinas processadas com seringas descar-táveis (Tabelas 2 e 4), apenas um resultado ne-gativo quanto à potência ocorreu, na 6~ hora(Tabela 2).

O sistema de retas de regressão foi escolhido paraa representação gráfica dos dados, por permitir me-lhor análise do comportamento dos dois tipos deseringas em prova. Desse modo, os dados dasTabelas I e 2 foram plotados resultando a Figural,

/1;1'1

RIZZO E-.-de et al. Seringas hipodérmicas descartáveis versus reutilizáveis. Estudo de possíveis efeitos sobre o vírus davacina viva, atenuada contra o sarampo. Rev. Saúde públ., S. Paulo, 20: 475 -80, 1986.

TABELA 2Resultados das titulações da vacina viva, atenuada contra o sarampo (Lote I),

reconstituída com seringas descartáveis (DICTso/0,5 ml).

floras pós reconstituiçãoTitulações

O 1 2 3 4 5 6

H-103,59 103,57 103,50 103,42 103,46 103,43 103,43

3.891 3.715 3.162 2.630 2.884 2.691 2.691

103,50 103,48 103,62 103,48.

103,54 103,74 103,272\1 ;

3.162 3.020 4.169 3.020 3.467 5.495 1.862

3~103,54 103,63 103,46 103,41 103,46 103,10 1~3,OO

3.467 4.266 2.884 2.571 2.884 1.259 1.000

4(1103,37 103,25 103,32 103,00 103,43 103,10 102,902.'345 1.778 2.089 1.000 2.691 1.259 794

5(1103,65 103,80 103,74 103,54 103,31 103,63 103,454.467 . 6.310 5.495 3.467 2.042 4.266 2.819

6(1103,58 103,74 103,64 103,56 103,31 103,00 103,333.8.02 5.495 4.365 3.631 ·2.042 1.000 2.l38

DICTSO:: dose infectante de cultura de tecidos 50%Título mínimo da vacina: 1.000 DICTso/O,5 ml

TABELA 3Resultados das titulações da vaéina viva, atenuada contra o sarampo (Lote 11),

reconstituída com seringas reutilizáveis (DICTso/O,5 ml).

Horas pós reconstituiçãoTitulações

O 2 3 4 5 6

1(1103,80 103,84 103,55 103,69 103,54 103,50 102,466.310 6.918 3.548 4.898 3.467 3.162 549

211103,80 103,80 103,54 103,54 103,50 103,54 103,46

6.310 6.310 3.467 3.467 3.162 3.467 2.884

311103,74 103,90 103,74 103,84 103,67 103,62 103,58

5.495 7.944 5.495 6.918 4;678 4.169 3.802

4(110.3,90 103,67 103,69 103,54 104,00 103,45 102,947.944 4.678 4.898 3.467 10.000 2.819 871

5(1·103,80 Í03,65 lÓ3,44 103,58 103,58 103,42 103,476.310 4.467 2.755 3.802 3.802 2.630 2.952

6(1103,84 103,84 103,54 103,62 103,61 103,43 103,366.918 6.918 3.467 4.169 4.074 2.691 2.291

7(1103,42 103,67 103,67 103,54 103,57 103,54 103,002.630 4.678 4.678 3.467 3.715 3.467 1.000

DICTSO: dose infectante de cultura de tecidos 50%Título mínimo da vacina : 1.000 DICTso/0,5 ml

478

~-~..-.-~..•...•_..,.-._-_.~._-~------

RIZZO E. de et alo Seringas hipodérmicas descartáveis versus reutilizáveis. Estudo de possíveis efeitos sobre o vírus davacina viva, atenuada contra o sarampo. Rev.Saúde públ., S.Paulo, 20: 475 -80, 1986.

6 106 Seringa Descartdvel

o Seringa Reutillzável

Ic=2.447011 =4,8585

59 ó Seringa Desrortóvel

o Seringa Reutilizdvel

Ic=2,4470'2=9.1556

B

7

l:r E 5

"'52Q 4x

~~ :39.E?I- 2

o

o

oFig.l

1 2 3 4 5 6HorosRetas de regressão da vacina viva, atenuada contrao sarampo (Lote I).

o

Os títulos médios das vacinas manipuladas comseringas descartáveis foram significativamente maisaltos do que aqueles observados com seringas devidro, visto que depois da aplicação do teste t de"Student" encontrou-se t1 = 4,858 para o lote I

. e t2 = 9,155 para o lote 11que são bem maiores doque o t crítico (tc = 2,447).

Fig. 2 - Retas de regressão da vacina viva. atenuada contrao sarampo (Lote li).

o 4 5 6 Horas2 3

TABELA 4Resultados das titulações da vacina viva, atenuada contra o sarampo (Lote 11),

reconstitu ídacom seringas descartáveís (DICT50/0,5 ml).

Horas pós reconstituíçãoTitulações

O 2 3 4 5 6

1~104,10 104,20 103,90 103,74 103,74 103,90 103,42

12.590 15.850 7.944 5.495 5.495 7.944 2.630

2\i104,00 103,92 103,69 103,74 103,66 103,57 103,5110.000 8.318 4.898 5.495 4.571 3.715 3.236

3\i104,10 104,10 103,80 104,00 104,00 103,90 103,7412.590 12.590 6.310 10.000 10.000 7.944 5.495

4\i104,00 104,00 104,00 104,00 104,00 103,69 103,1610.000 10.000 10.000 10.000 10.000 4.898 1.445

/ .5~

103,75 103,65 1(j3,90 103,90 104,00 103,74 103,67'~ 5.624 4.467 7.944 7.944 10.000 5.495 4.678

<~6~

103,90 104,00 104,00 104,00 103,74 103,90 103,63.'Z 7.944 10.000 10.000 10.000 5.495 7.944 4.266,:;

.,103,46 103,84 103,62 103,78 103,78 103,57 103,10'~

7~J1 2.884 6.918 4.169 6.026 6.026 3.715 1.259

. :'~ DICT50: dose infectante de cultura de tecidos 50%Título mínimo da vacina : 1.000 DICT50/0,5 ml

479

RIZZO E. de et alo Seringas hipodérmicas descartáveis versus reutilizáveis. Estudo de possíveis efeitos sobre o vírus davacina viva, atenuada contra o sarampo. Rev.Saúde públ., S.Paulo, 20: 475 -80, 1986.

A pesquisa demonstrou que nas condições de.realização do teste é empregando a vacina "atual-mente em uso na rede de vacinação do Estado deSão Paulo, as seringas reutilizáveis interferiram maisna potência do vírus vivo, atenuado contra o 'sa-rampo (Tabelas 1 e 3) do que as descartáveis. Assimé que, títulos de vírus abaixo do mínimo requeridopela OMS (1.000 DICTso por dose humana) ocor-reram com maior freqüência quando as vacinasforam reconstituídas com seringas de vidro. O fatode se ter observado, mesmo com seringas descartá-veis, alguns resultados abaixo e no limiar do mínimorequerido, na 5~ e 6~ horas, sugere um reestudo doprazo recomendado para a utilização das vacinas

reconstituídas, de vez que há centros de saúde noEstado de São Paulo que utilizam essas vacinas poroito horas.

AG RADECIMENTOS

Ao Prof. Dr. Bernardo Beigelman, do Departa-mento de Genética Médica da Universidade Estadualde Campinas (UNICAMP), pela orientação na análiseestatística dos resultados; à Dra. Ione Fujiki, do Su-primento 11 --;Setor Vacinas, pelo fornecimento doslotes de vacinas usados na pesquisa; a José Luís Ros-setto e José Antonio Padúla, pelo apoio técnico; àequipe do Centro de Saúde Escola do Butantan, pelacolaboração prestada.

RIZZO, E. .et alo [Disposable versus reusable hypodermic syrínges, Study of feasíble effects upon thevírus ofthe líve, attenuated measles vaccíne]. Rev.Saúde públ., S. Paulo, 20: 475-80, 1986.

ABSTRACT: The study was performed in the State of S.Paulo, SP, Brazil, with the purpose offinding out whether reusable (glass) and disposable hypodermic syrínges used for administration of liveattenuated measles vaccines would interfere with their vírus, At least six different experíments usingtwo distinct lots of vaccines were carried out. Each time, a lot was reconstituted with reusable and dis-posable syringes in parallel to form separate pools from which samples were collected hourly from zeroto the sixtieth hour after reconstitution for virus titration in monolayers of Vero cells, The straight lineregressíon system chosen for the analysis of the resulta demonstrated that .although vaccines recons-tituted with both types of syrínges presented a statistícally significative titer decrease as time went by,there was a more pronounced decrease for vaccines manipulated with the g1asssyringes, The fact that thedisposable syrínges affected the titer of the vírus present in the live, ilttenuated measles vaccine Iessconfirmed that the preconization and routine usage of this type of syringe by the Health Department ofthe State of S. Paulo, Brazil, ís ideal and híghly recommended because it preserves the vaccine fromreconstitution to administration better, and thus, its efficacy in preventing the infection.

UNITERMS: Measles vaccine. Effícacy. Syrínges, Comparative studies.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. EAGLE, H. Amino acid metabolism in mammaliancellcultures. Science, 130 :432-7,1959.

2. MENDES, I.F. et alo Avaliação das condições de esto-cagem de vacinas vivas, atenuadas contra o sarampo,em postos de vacinação credencíados e em centrosde saúde do Estado de São Paulo (Brasil), Rev, Saúdepúbl., S.Paulo, 19: 444-9,1985.

3. PRAL, M.M. et alo Potency control of live, attenuatedvaccinesagaínst measles used in children vaccinationsin the State ofSão Paulo. Rev.Inst.Med. trop. S.Paulo,24:491-5,1982.

480

4. REED, L.S. & MÜENCH, H. A símple method ofstimating fifty per cent end points, Amer. J. Hyg.,27 :493-7,1938.

5. SECRETARIA DE ESTADO DA SAúDE. Lavagem epreparo de material. In: Manual de procedimentosem vacinaçaõ. São Paulo, Imprensa do Estado de SãoPaulo, 1986. [no prelo].

Recebido para publicação em 13/05/1986Reapresentado em 07/08/1986Aprovado para publicação em 11/08/1986