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Universidade Federal de PelotasCentro de Biotecnologia

Graduao em Biotecnologia

SOLUES TAMPO

Aula prticaTcnicas Instrumentais

2011/1

http://www.ufpel.edu.br/cenbiothttp://www.ufpel.edu.br/

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Solues Tampo

Solues tampo, soluo tamponada ousimplesmente tampo, so solues queatenuam a variao dos valores de pH (cidoou bsico), mantendo-o aproximadamenteconstante, mesmo com adio de pequenas

quantidades de cidos ou bases.

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So geralmente formadas por um cido fraco eum sal formado pela reao desse cido com umabase forte, ou, ento, por uma base fraca e umsal formado pela reao dessa base com um

cido forte. Elas so preparadas dissolvendo-se os solutos em

gua.

Exemplos: cido actico-acetato (tampo acetato),cido carbnico-bicarbonato (tampo bicarbonato),fosfato bicido-fosfato monocido (tampo fosfato)

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Solues Tampo

Todo o sistema ou processo que dependa do pH,est associado a um TAMPO.

Ex.: sistemas biolgicos sangue, sistemasenzimticos;

reaes qumicas reaes de precipitao,

reaes eletrdicas; biotecnologia lavagem de clulas, quebrar o

DNA, eletroforese.

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O tamponamento resulta do EQUILBRIO dasduas reaes reversveis que ocorrem numasoluo aquosa de um doador e um receptorde prtons, ambos em concentraesprximas da igualdade.

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Tampo biolgico plasma sanguneo cido fraco: cido carbnico H2CO3

Sal : bicarbonato HCO3

Excesso de H: desloca o equilbrio para a

esquerda

H2CO3 = H + HCO3

Excesso de OH: desloca o equilbrio para a

direita

OH + H2CO3 = H2O + HCO3

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sistemas de tamponamento dependem de:

Ka (constante de dissociao): tendnciacaracterstica de cada cido para perder o seuprton em soluo aquosa;

[ ] de cido e base;

pH

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A Equao de Henderson-Hasselbalch utilizada para calcular o pH de uma soluotampo, a partir do pKa (a constante de

dissociao do cido) e de concentraes doequlibro cido-base, do cido ou baseconjugada.

pH = pKa + log [receptor de prtons] [doador de prtons]

http://pt.wikipedia.org/wiki/PHhttp://pt.wikipedia.org/wiki/Solu%C3%A7%C3%A3o_tamp%C3%A3ohttp://pt.wikipedia.org/wiki/Solu%C3%A7%C3%A3o_tamp%C3%A3ohttp://pt.wikipedia.org/wiki/PKahttp://pt.wikipedia.org/wiki/PKahttp://pt.wikipedia.org/wiki/Constante_de_acidezhttp://pt.wikipedia.org/wiki/Constante_de_acidezhttp://pt.wikipedia.org/wiki/Constante_de_acidezhttp://pt.wikipedia.org/wiki/Constante_de_acidezhttp://pt.wikipedia.org/wiki/PKahttp://pt.wikipedia.org/wiki/PKahttp://pt.wikipedia.org/wiki/Solu%C3%A7%C3%A3o_tamp%C3%A3ohttp://pt.wikipedia.org/wiki/Solu%C3%A7%C3%A3o_tamp%C3%A3ohttp://pt.wikipedia.org/wiki/PH

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Quando a [doador de prtons] = [receptor deprtons] = poder tamponante mximo dasoluo tampo onde ocorrem as menoresvariaes de pH pela adio de H ou OH, e o

pH = pKa

pH = pKa + log 1,0 = pKa + 0 = pKa

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Soluo tampo preparo: Material e equipamentos

PESAGEM

balana

Papel de pesagem;Esptulas;

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MISTURA

Proveta;

Bquer;

Agitador magntico e bailarina;

gua destilada;

pHmetro;

Frasco

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DICAS

1. Adicionar o slido pesado ao frasco contendo80% do lquido, medido em proveta;

2. Ligar o agitador magntico depois de colocaro bquer contendo a soluo e a bailarina;

3. Verificar o volume em proveta ou balovolumtrico, e completar at 90% do volume;

4. Medir o pH devolver a soluo para obquer;

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Soluo tampo PBS 10X

NaCl 80g

KCl 2g

Na2HPO4 14,4g

KH2PO4 2,4g

gua qsp 1000ml

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Bibliografia

Lehninger, A. L. et al, PRINCPIOS DE BIOQUMICA,Sarvier Editora de Livros Mdicos LTDA, 1995, SoPaulo.

Barker, Kathy, NA BANCADA: MANUAL DEINICIAO CIENTFICA EM LABORATRIOS DEPESQUISAS BIOMDICAS, Artmed, 2002, PortoAlegre.