Post on 30-Nov-2015
Dr. Carlos LojaHSE - SBAI - SOPERJDr. Carlos Loja
HSE - SBAI - SOPERJ
DiagnDiagnóóstico stico Laboratorial Laboratorial em Alergiaem Alergia
Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico “In Vivo”
Diagnóstico “In Vitro”
Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico “In Vivo”
Diagnóstico “In Vitro”
Diagnóstico com testes específicosDiagnDiagnóóstico com testes especstico com testes especííficosficos
Indicações principais:♦ Confirma o diagnóstico clínico♦ Diferencia patologias alérgicas de outras
patologias♦ Descobre novos alérgenos não suspeitados
anteriormente♦ Orienta o tratamento♦ Teste cutâneo isolado não é diagnóstico,
correlacionar com história clínica
Indicações principais:♦ Confirma o diagnóstico clínico♦ Diferencia patologias alérgicas de outras
patologias♦ Descobre novos alérgenos não suspeitados
anteriormente♦ Orienta o tratamento♦ Teste cutâneo isolado não é diagnóstico,
correlacionar com história clínica
Testes CutâneosTestes CutâneosClassificação♦Epicutâneo - Teste contato (Patch)
Ex.: hipersensibilidade imediata e tardia
♦Percutâneo - Prick / PunturaEx.: Hipersensibilidade imediata
♦Intracutâneo - IntradérmicoEx.: Hipersensibilidade imediata e
tardia
Classificação♦Epicutâneo - Teste contato (Patch)
Ex.: hipersensibilidade imediata e tardia
♦Percutâneo - Prick / PunturaEx.: Hipersensibilidade imediata
♦Intracutâneo - IntradérmicoEx.: Hipersensibilidade imediata e
tardia Turkeltaub PC - Rastogi SC, Baer H et al - JACI 1982; 70(5):342-52.
DiagnDiagnóóstico com Testes Especstico com Testes Especííficosficos
Teste Puntura (Prick)♦É o mais conveniente e convincente método
screening para detectar IgE-específica para diferentes alérgenos
♦É mais específico que o I. D. embora menos sensível
♦O teste I. D. deve ser considerado quando a história clínica de exposição é forte e o Prick teste é negativo
♦Deve-se utilizar extratos já padronizados se possível.
Teste Puntura (Prick)♦É o mais conveniente e convincente método
screening para detectar IgE-específica para diferentes alérgenos
♦É mais específico que o I. D. embora menos sensível
♦O teste I. D. deve ser considerado quando a história clínica de exposição é forte e o Prick teste é negativo
♦Deve-se utilizar extratos já padronizados se possível.
Testes CutâneosTestes Cutâneos
Turkeltaub PC, Rastogi SC, Baer H et al - JACI 1982; 70(5):342-52.Turkeltaub PC, Rastogi SC, Baer H et al - JACI 1982; 70(5):342-52.
Extratos para diagnósticoFDA - Unidades BAU (Bioequivalent Allergy Units)
Quantidade do extrato alergênico para fins diagnóstico, que causa resposta eritematosa, para teste I. D. igual ao somatório ortogonal do diâmetro de 50mm em um painel conhecido de indivíduos contrôles conhecidos.
Extratos para diagnósticoFDA - Unidades BAU (Bioequivalent Allergy Units)
Quantidade do extrato alergênico para fins diagnóstico, que causa resposta eritematosa, para teste I. D. igual ao somatório ortogonal do diâmetro de 50mm em um painel conhecido de indivíduos contrôles conhecidos.
Testes CutâneosTestes Cutâneos
Turkeltaub PC - Diagn Testing of Allerg Dis, Vol 15 N York; Nalcelbekker, 2000, 53.Turkeltaub PC - Diagn Testing of Allerg Dis, Vol 15 N York; Nalcelbekker, 2000, 53.
Reação imediataPápulaResultado da liberação de histamina pelos mastócitos e ligação com os receptores de histamina na microcirculação, resultando no aumento da permeabilidade dos vasos.EritemaResultado de vasodilatação neurogênicaObs.: Estes resultados são comparados ao contrôle negativo (diluente) e ao contrôle positivo (histamina padronizada).
Reação imediataPápulaResultado da liberação de histamina pelos mastócitos e ligação com os receptores de histamina na microcirculação, resultando no aumento da permeabilidade dos vasos.EritemaResultado de vasodilatação neurogênicaObs.: Estes resultados são comparados ao contrôle negativo (diluente) e ao contrôle positivo (histamina padronizada).
Testes Cutâneos Testes Cutâneos -- MultitesteMultiteste
Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial
IgE – Sensibilidade ao TesteIgE – Sensibilidade ao Teste
AceitávelAceitávelAceitável♦Inaláveis
Desnecessário(Falso +)
AceitávelAceitável♦Alimentos
DesnecessárioPreferênciaInadequado♦Reações sistêmicas♦Látex
PreferênciaInsuficienteComplementar com I. D.
♦Reações sistêmicas♦Veneno inseto♦Drogas
“In vivo”Intradérmico
(I. D.)
“In vivo”Prick (PK)
“In vitro”RAST
Antígenos
Symposium # 3704 - Lab. Meth. For Allerg - Specif. IgE Ab. Goth A. A. A. A. I. Meeting - Denver, CO – 2003.Robert G. Hamilton, PhD – Johns Hopkins Univ.
Symposium # 3704 - Lab. Meth. For Allerg - Specif. IgE Ab. Goth A. A. A. A. I. Meeting - Denver, CO – 2003.Robert G. Hamilton, PhD – Johns Hopkins Univ.
DiagnDiagnóóstico com Testes Especstico com Testes Especííficosficos
Considerações gerais♦Deve ser realizado por especialistas♦Pode ser realizado em qualquer idade♦Não aplicar o teste sem condições cutâneas
adequadas♦Suspender medicações, se possível, que
alteram o resultado♦Saber avaliar e tratar reações sistêmicas♦Ter medicações e instrumentos apropriados
para tal.
Considerações gerais♦Deve ser realizado por especialistas♦Pode ser realizado em qualquer idade♦Não aplicar o teste sem condições cutâneas
adequadas♦Suspender medicações, se possível, que
alteram o resultado♦Saber avaliar e tratar reações sistêmicas♦Ter medicações e instrumentos apropriados
para tal.
DiagnDiagnóóstico com Testes Especstico com Testes EspecííficosficosReações anafiláticas / anafilactóides raramente acontecem e estão relacionadas a:♦Teste intradérmico (ID), sem ser realizado o Prick
antes♦Alérgenos que causam anafilaxia
Ex.: crustáceos - amendoim - látex - drogas venenos de insetos
♦Número excessivo de testes em um mesmo momento
♦Utilização de medicações que possam facilitar tais reações indesejáveis
Reações anafiláticas / anafilactóides raramente acontecem e estão relacionadas a:♦Teste intradérmico (ID), sem ser realizado o Prick
antes♦Alérgenos que causam anafilaxia
Ex.: crustáceos - amendoim - látex - drogas venenos de insetos
♦Número excessivo de testes em um mesmo momento
♦Utilização de medicações que possam facilitar tais reações indesejáveis
♦ Os procedimentos realizados somente em locais onde hajam equipamentos para ressuscitação de emergência e pessoal treinado, sob supervisão direta do médico.
♦ Os procedimentos realizados somente em locais onde hajam equipamentos para ressuscitação de emergência e pessoal treinado, sob supervisão direta do médico.
♦ O paciente deve permanecer sob observação por 20 a 30 minutos após o procedimento.
♦ O paciente deve permanecer sob observação por 20 a 30 minutos após o procedimento.
♦ Pessoal preparado para: ajuste da dose dos alérgenos para minimizar reações; reconhecimento e tratamento das reações locais; reconhecimento e tratamento das reações sistêmicas e preparo em RCP básica (Ressuscitação Cardiopulmonar).
♦ Pessoal preparado para: ajuste da dose dos alérgenos para minimizar reações; reconhecimento e tratamento das reações locais; reconhecimento e tratamento das reações sistêmicas e preparo em RCP básica (Ressuscitação Cardiopulmonar).
RecomendaRecomendaçções para atendimento de ões para atendimento de reareaçções adversas Iões adversas I
RecomendaRecomendaçções para atendimento de ões para atendimento de reareaçções adversas IIões adversas II
♦ Procedimentos invasivos: laringoscopia direta, cardioversão, traqueotomia, injeção intracardíaca de medicamentos:
♦ Procedimentos invasivos: laringoscopia direta, cardioversão, traqueotomia, injeção intracardíaca de medicamentos:
♦ Após qualquer procedimento e estabilização do paciente, encaminha-lo imediatamente ao um serviço de atendimento de emergência.
♦ Após qualquer procedimento e estabilização do paciente, encaminha-lo imediatamente ao um serviço de atendimento de emergência.
♦ Pela raridade da necessidade desses procedimentos e o risco de serem efetuados em condições não-ideais, não é necessário que estejam imediatamente disponíveis.
♦ Pela raridade da necessidade desses procedimentos e o risco de serem efetuados em condições não-ideais, não é necessário que estejam imediatamente disponíveis.
1. Estetoscópio e esfigmomanômetro.2. Torniquetes, seringas, agulhas hipodérmicas
e agulhas de grosso calibre (14).3. Epinefrina aquosa ( HCl 1:1.000 ).4. Ambú e/ou oxigênio.5. Equipamento para fluidoterapia endovenosa.6. Material para intubação.7. Anti-histamínico injetável.8. Corticosteróides intravenosos.9. Agentes vasopressores.
1. Estetoscópio e esfigmomanômetro.2. Torniquetes, seringas, agulhas hipodérmicas
e agulhas de grosso calibre (14).3. Epinefrina aquosa ( HCl 1:1.000 ).4. Ambú e/ou oxigênio.5. Equipamento para fluidoterapia endovenosa.6. Material para intubação.7. Anti-histamínico injetável.8. Corticosteróides intravenosos.9. Agentes vasopressores.
Equipamentos recomendados para atendimento de reações adversasEquipamentos recomendados para Equipamentos recomendados para atendimento de reaatendimento de reaçções adversasões adversas
DiagnDiagnóóstico Laboratorialstico Laboratorial““In VivoIn Vivo””
Prick Prick TestTest
ObjetivosObjetivos
♦♦ AvaliaAvaliaçção de diferentesão de diferentes puntorespuntores
♦♦ AvaliaAvaliaçção de extratos padronizados e não ão de extratos padronizados e não padronizados de alpadronizados de aléérgenos inalrgenos inalááveisveis
Objetivos1. Comparar a reatividade por Prick Test de extratos alergênicos padronizados em Unidades de Massa ou Unidades Biológicas com os não padronizados, dosados em PNU/ml.
Objetivos1. Comparar a reatividade por Prick Test de extratos alergênicos padronizados em Unidades de Massa ou Unidades Biológicas com os não padronizados, dosados em PNU/ml.2. Comparar a reatividade por Prick Test com extratos padronizados em Unidades de Massa ou Unidades Biológicas, de três diferentes puntores: ALK Lancet (Dinamarca); Duotip (EUA) ePuntor ALKO (Brasil).
2. Comparar a reatividade por Prick Test com extratos padronizados em Unidades de Massa ou Unidades Biológicas, de três diferentes puntores: ALK Lancet (Dinamarca); Duotip (EUA) ePuntor ALKO (Brasil).
Avaliação do Prick TestAvaliaAvaliaçção do Prick ão do Prick TestTest
Critérios de inclusão:Pacientes de ambos os sexos, idades entre 10 e 65 anos, alérgicos aos aeroalérgenos.Critérios de exclusão:Pacientes sob uso de medicação anti-histamínica ou outra que possa interferir nas reações, não alérgicos, portadores de imunodeficiência ou infecções vigentes.
Critérios de inclusão:Pacientes de ambos os sexos, idades entre 10 e 65 anos, alérgicos aos aeroalérgenos.Critérios de exclusão:Pacientes sob uso de medicação anti-histamínica ou outra que possa interferir nas reações, não alérgicos, portadores de imunodeficiência ou infecções vigentes.
Avaliação do Prick TestAvaliaAvaliaçção do Prick ão do Prick TestTest
Critérios de leitura:Controles - 15 minutos Alérgenos - 20 minutos.
Reação positiva: pápula maior do que 3mm e maior do que a pápula do controle negativo – CN.Resultado pela medida em milímetros do diâmetro da pápula formada pelo teste.Os resultados obtidos são anotados no formulário do teste.
Critérios de leitura:Controles - 15 minutos Alérgenos - 20 minutos.
Reação positiva: pápula maior do que 3mm e maior do que a pápula do controle negativo – CN.Resultado pela medida em milímetros do diâmetro da pápula formada pelo teste.Os resultados obtidos são anotados no formulário do teste.
Avaliação do Prick TestAvaliaAvaliaçção do Prick ão do Prick TestTest
Análise da sensibilidade do Prick test com diferentes puntoresAnAnáálise da sensibilidade do Pricklise da sensibilidade do Prick test test com diferentescom diferentes puntorespuntores
0
2
4
6
8
0
2
4
6
8
ALK-LancetALK-Lancet DUOTIPDUOTIP ALKOALKO
p<0,01p<0,01
Prick test com diferentes puntoresHistamina Base 10 mg/ml
Prick test com diferentes puntoresHistamina Base 10 mg/ml
Pápu
la -
Øm
édio
mm
Pápu
la -
Øm
édio
mm
PuntoresPuntores
n=10n=10
Prick test com diferentes puntoresPrickPrick testtest com diferentescom diferentes puntorespuntores
0
2
4
6
8
10
0
2
4
6
8
10
Dermatophagoides pteronyssinusPrick test
Dermatophagoides pteronyssinusPrick test
Padronizado60 µg Der p 100 BU/ml
ALK-ABELLÓLt: UO945
Padronizado60 µg Der p 100 BU/ml
ALK-ABELLÓLt: UO945
Não Padronizado 50.000 PNU/mlFDA Allergenic
Lt: 04BB00050
Não Padronizado 50.000 PNU/mlFDA Allergenic
Lt: 04BB00050
Pápu
la-Ø
méd
iom
m
Pápu
la-Ø
méd
iom
m
n=10n=10
p<0,01
0
2
4
6
8
10
0
2
4
6
8
10
Blomia tropicalisPrick test
Blomia tropicalisPrick test
Padronizado100 BU/ml
ALK-ABELLÓLt: T2013
Padronizado100 BU/ml
ALK-ABELLÓLt: T2013
Não Padronizado 50.000 PNU/mlFDA Allergenic
Lt: 04BB0059
Não Padronizado 50.000 PNU/mlFDA Allergenic
Lt: 04BB0059
Pápu
la-Ø
méd
iom
m
Pápu
la-Ø
méd
iom
m
n=10n=10
p<0,01p<0,01
1. Cp
2. Cn
3. Dp
4. Bt
5. Gato
6. Cão
1. Cp
2. Cn
3. Dp
4. Bt
5. Gato
6. Cão
Prick test Padronizado (P) X Não Padronizado (NP)
Prick test Padronizado (P) X Não Padronizado (NP)
ALERGIADiagnóstico laboratorial
Teste “IN VITRO”♦ IgE Total♦ IgEEspecífica♦ IgG4 Específica♦ Histamina Liberada♦ Sulfitoleucotrieno Ag - Específico♦ Proteínas granulares dos eosinófilos♦ Triptase dos mastócitos ♦ Citoquinas do TH2
Teste “IN VITRO”♦ IgE Total♦ IgEEspecífica♦ IgG4 Específica♦ Histamina Liberada♦ Sulfitoleucotrieno Ag - Específico♦ Proteínas granulares dos eosinófilos♦ Triptase dos mastócitos ♦ Citoquinas do TH2
Sensibilidade =Positivo s verd adeiros
Positivos verd adeiro s + Nega tivos falsosX 1 0 0
E specif icidade =N egativos verdadeiros
N egativos verdadeiros + Pos itivos falsosX 1 0 0
E fic iência =Positivos verd adeiro s + Nega tivos verdad eiros
Total de p ositivos + To tal de negativosX 1 0 0
Índices de Performance Diagnóstica de um Teste
ALERGIADiagnóstico laboratorial
IgE sérica total♦ Não reflete a produção total♦ Não reflete a sua fixação nos receptores
específicos tissulares♦ Níveis elevados não são patognomônicos de
atopia♦ Há pacientes alérgicos com níveis normais♦ Há variações nestes níveis na dependência
de estímulos antigênicos♦ Modificações dos níveis pela imunoterapia♦ Cálculo para aplicação de anti-IgE
IgE sérica total♦ Não reflete a produção total♦ Não reflete a sua fixação nos receptores
específicos tissulares♦ Níveis elevados não são patognomônicos de
atopia♦ Há pacientes alérgicos com níveis normais♦ Há variações nestes níveis na dependência
de estímulos antigênicos♦ Modificações dos níveis pela imunoterapia♦ Cálculo para aplicação de anti-IgE
ALERGIADiagnóstico laboratorial
IgE sérica específica
♦ Inalantes
♦ Drogas
♦ Alimentos
♦ Venenos de insetos
♦ Substâncias ocupacionais
IgE sérica específica
♦ Inalantes
♦ Drogas
♦ Alimentos
♦ Venenos de insetos
♦ Substâncias ocupacionais
IgE Específica – CAP SystemIgE Específica – CAP SystemPharmacia
CAP System vs Prick TestCAP System vs Prick Test
IgE EspecíficaIgE Específica
ALERGIADiagnóstico laboratorial
Indicações para realizar o RAST
♦ Dermografismo importante
♦ Doença cutânea (D. A.)
♦ Não poder retirar anti-histaminico
♦ Reações atípicas para alimentos
Indicações para realizar o RAST
♦ Dermografismo importante
♦ Doença cutânea (D. A.)
♦ Não poder retirar anti-histaminico
♦ Reações atípicas para alimentos
Diagnóstico da Alergia AlimentarEspectro de patologias induzidas por alimentos
IgE mediadaIgE mediada
Não IgE mediadaNão IgE mediada
Mistura de IgE e Não IgE mediadaMistura de IgE e Não IgE mediada
Hipersensibilidade imediata (anafilaxia; Hipersensibilidade imediata (anafilaxia; dermatite atdermatite atóópica; urticpica; urticáária; asma)ria; asma)SSííndrome da alergia oralndrome da alergia oral
Esofagite Esofagite esonofesonofíílica lica alaléérgica rgica Gastrite Gastrite esonofesonofíílica lica alaléérgicargicaGastroenterite Gastroenterite esonofesonofíílica lica alaléérgicargica
Enterocolite Enterocolite proteica proteica alimentaralimentarProctite proteica Proctite proteica alimentaralimentarEnteropatia proteica Enteropatia proteica alimentaralimentarDoenDoençça cela celííacaaca
Sampson HA, Anderson JA – J Pediatr Gastro Nutrit 2000; 30:S87-94.
Testes Subjetivos na Alergia Alimentar “in vivo”
Testes Subjetivos na Alergia Alimentar “in vivo”
Diário da dieta: barato e chama a atenção do paciente do que está ingerindo. Desvantagens: pouca adesão.Dieta de eliminação: Não tem custo e é um modo de diagnóstico e tratamento. Desvantagens: Não pode ser usado em crises graves ou raras, susceptível a viés pelo paciente ou médico, é difícil se os suspeitos são numerosos e adesão duvidosa.
Diário da dieta: barato e chama a atenção do paciente do que está ingerindo. Desvantagens: pouca adesão.Dieta de eliminação: Não tem custo e é um modo de diagnóstico e tratamento. Desvantagens: Não pode ser usado em crises graves ou raras, susceptível a viés pelo paciente ou médico, é difícil se os suspeitos são numerosos e adesão duvidosa.
Testes Objetivos na Alergia Alimentar “in vivo”
Testes de puntura (Prick test):Extratos comerciaisPossíveis ocorrências:
Falta de disponibilidadeFalsos negativos ou positivos Alergeno só presente no alimentoInstabilidade do alérgeno (frutas e legumes)
Direcionamento para outras avaliações, e para o teste de provocação.
Testes de puntura (Prick test):Extratos comerciaisPossíveis ocorrências:
Falta de disponibilidadeFalsos negativos ou positivos Alergeno só presente no alimentoInstabilidade do alérgeno (frutas e legumes)
Direcionamento para outras avaliações, e para o teste de provocação.
Teste de Puntura na Alergia Alimentar “in vivo”
Vantagens: Simples, barato, resultados imediatos e seguro
Desvantagens: Reação sistêmica (remota) Dificultado por eczemas, dermografismo, etc.Alterado por certas medicações: Ex.: antihistamínicos, antidepressivos
tricíclicos, etc.
Vantagens: Simples, barato, resultados imediatos e seguro
Desvantagens: Reação sistêmica (remota) Dificultado por eczemas, dermografismo, etc.Alterado por certas medicações: Ex.: antihistamínicos, antidepressivos
tricíclicos, etc.
Performance do Prick Test vs DBPCFC
Sampson HA; Ho DG - – JACI 1997; 100:44-51.
RAST na alergia alimentarRAST na alergia alimentar
Vantagem: seguroDesvantagem:
Custo, Demora do resultado, Falta do alérgeno específico
Vantagem: seguroDesvantagem:
Custo, Demora do resultado, Falta do alérgeno específico
Testes Objetivos na Alergia Alimentar “in vitro”
CAP SystemCAP SystemImunocap:
Resultados em kUA/L de IgE específicaValores preditivos positivo e negativo de 90% e 95% para ovo, leite, amendoim e peixe Prevê reações futuras Valores confiáveis mesmo em pacientes não atópicos.
(JACI 100:444, 1998 e 107:891-6, 2001).
Imunocap:Resultados em kUA/L de IgE específicaValores preditivos positivo e negativo de 90% e 95% para ovo, leite, amendoim e peixe Prevê reações futuras Valores confiáveis mesmo em pacientes não atópicos.
(JACI 100:444, 1998 e 107:891-6, 2001).
Testes Objetivos na Alergia Alimentar “in vitro”
Performance do Cap Systemcom cutoff = 0,35 KUA/L (idade média= 5,2 anos)
Sampson HA; Ho DG – JACI, 1997; 100:44-51.
Outros marcadores na alergia alimentarOutros marcadores na alergia alimentarHistamina:
Metabolização rápida (pouca utilidade)Triptase:
Dosagem ideal: 1 a 2 horas após a ingestão ou 30-60 min após o inicio da reação. Diminui em 30-90 min. Beta-triptase armazenada nos grânulos é o marcador da ativação do mastócito. Tolera congelamento, mesmo em crises graves não se eleva muito.
Histamina:Metabolização rápida (pouca utilidade)
Triptase:Dosagem ideal: 1 a 2 horas após a ingestão ou 30-60 min após o inicio da reação. Diminui em 30-90 min. Beta-triptase armazenada nos grânulos é o marcador da ativação do mastócito. Tolera congelamento, mesmo em crises graves não se eleva muito.
Testes Objetivos na Alergia Alimentar “in vitro”
Sampson HA – JACI 1999; 103:981.
Diagnóstico da Alergia AlimentarVisão geral
Obrigado
Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial
Na prática da alergia clínica♦ Hemograma VHS♦ Proteína C reativa♦ Imunoglobulinas - IgG – A – M – E (total / específica)♦ Subclasses de IgGs. (Estudo funcional)♦ Estudo do complemento (CH50 – C3 – C4 – INHC1E)♦ Estudo da fagocitose (NBT)♦ Exame de urina♦ Estudo radiológico♦ Estudo imagem abdominal (Asplenia)♦ Testes cutâneos
♦Hipersensibilidade imediata♦Hipersensibilidade tardia
Na prática da alergia clínica♦ Hemograma VHS♦ Proteína C reativa♦ Imunoglobulinas - IgG – A – M – E (total / específica)♦ Subclasses de IgGs. (Estudo funcional)♦ Estudo do complemento (CH50 – C3 – C4 – INHC1E)♦ Estudo da fagocitose (NBT)♦ Exame de urina♦ Estudo radiológico♦ Estudo imagem abdominal (Asplenia)♦ Testes cutâneos
♦Hipersensibilidade imediata♦Hipersensibilidade tardia
Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial
Linfócitos - Testes Funcionais
Linfócito B♦ Dosagem de imunoglobulinas e subclasses ♦ Anticorpos naturais
(Ex.: Isohemaglutininas, heterófilos)♦ Resposta pós-vacinal
(Ex.: tétano, Pneumovax, etc)♦ Secreção de imunoglobulinas
(Ex.: Elispot) - Estuda citocina e imunoglobulina individual secretada pelo linfócito
Linfócitos - Testes Funcionais
Linfócito B♦ Dosagem de imunoglobulinas e subclasses ♦ Anticorpos naturais
(Ex.: Isohemaglutininas, heterófilos)♦ Resposta pós-vacinal
(Ex.: tétano, Pneumovax, etc)♦ Secreção de imunoglobulinas
(Ex.: Elispot) - Estuda citocina e imunoglobulina individual secretada pelo linfócito
Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial
Linfócitos - Testes Funcionais
Linfócito T – Que finalidade?
♦ Determinar competência em infecções recorrentes
♦Avaliar hipersensibilidades Tipo IV (CMI)
♦Monitorar efeitos supressivos de drogas ou
doenças (Ex.: HIV)
Linfócitos - Testes Funcionais
Linfócito T – Que finalidade?
♦ Determinar competência em infecções recorrentes
♦Avaliar hipersensibilidades Tipo IV (CMI)
♦Monitorar efeitos supressivos de drogas ou
doenças (Ex.: HIV)
Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial
Linfócitos - Testes FuncionaisLinfócito T - Testes “in vivo”
Testes cutâneos (DTH) - usados para:
♦Determinar se o paciente já teve contato prévio com a infecção ou vacinaçãoEx.: PPD
♦Determinar incapacidade (anergia) ou hipersensibilidade de resposta para antígenos de memória (Recall Ag)
(SK/DN, Candidina, Tricofitina, Tuberculina, etc)♦Avaliação para testes de contato - D. contato
(DNCB)
Linfócitos - Testes FuncionaisLinfócito T - Testes “in vivo”
Testes cutâneos (DTH) - usados para:
♦Determinar se o paciente já teve contato prévio com a infecção ou vacinaçãoEx.: PPD
♦Determinar incapacidade (anergia) ou hipersensibilidade de resposta para antígenos de memória (Recall Ag)
(SK/DN, Candidina, Tricofitina, Tuberculina, etc)♦Avaliação para testes de contato - D. contato
(DNCB)
Teste intradérmico
Hipersensibilidade Tardia
(Recall Ag.)
Teste intradérmico
Hipersensibilidade Tardia
(Recall Ag.)
Diagnóstico Laboratorial “in vivo”Diagnóstico Laboratorial “in vivo”
Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial
Linfócitos - Testes Funcionais
Linfócito T – “in vitro” e “ex- vivo”
Finalidades:
A - Avaliação das subpopulações
B - Avaliação da proliferação / ativação para
mitógenos e Ag. Memória (Recall Ag.)
Linfócitos - Testes Funcionais
Linfócito T – “in vitro” e “ex- vivo”
Finalidades:
A - Avaliação das subpopulações
B - Avaliação da proliferação / ativação para
mitógenos e Ag. Memória (Recall Ag.)
Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial
Linfócitos - Testes FuncionaisLinfócito T – “in vitro” e “ex- vivo”
Métodos Avançados:
♦Teste de proliferação linfocitária (LPA) com
incorporação da timidina tritiada
♦Citometria de fluxo para citocinas intra-celulares
Determina número e percentagem de células respondedoras
Linfócitos - Testes FuncionaisLinfócito T – “in vitro” e “ex- vivo”
Métodos Avançados:
♦Teste de proliferação linfocitária (LPA) com
incorporação da timidina tritiada
♦Citometria de fluxo para citocinas intra-celulares
Determina número e percentagem de células respondedoras
Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial
Linfócitos - Testes FuncionaisLinfócito T – “in vitro” e “ex- vivo”
Métodos Avançados:♦Monitorar ativação recente (Ex.: Cylex kit) –
Monitorização de imunosupressão de transplanteGeração de ATP
Linfócitos - Testes FuncionaisLinfócito T – “in vitro” e “ex- vivo”
Métodos Avançados:♦Monitorar ativação recente (Ex.: Cylex kit) –
Monitorização de imunosupressão de transplanteGeração de ATP
Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial
Linfócitos - Testes FuncionaisLinfócito T – “in vitro” e “ex- vivo”
Métodos Avançados:♦Medida “Ex-vivo” de produção de citocinas
Ex.: Quantiferon TB Test
Linfócitos - Testes FuncionaisLinfócito T – “in vitro” e “ex- vivo”
Métodos Avançados:♦Medida “Ex-vivo” de produção de citocinas
Ex.: Quantiferon TB Test
Diagnóstico LaboratorialDiagnóstico Laboratorial
Linfócitos - Testes Funcionais
Linfócito T – “in vitro” e “ex- vivo” - Métodos Avançados
♦ Elispot
♦ CTL por liberação de cromio (MHC – restrito)
♦Detecção de CTL por ensaio de tetramero
♦ Citotoxicidade NK e ADCC (MHC – não restrito)
Linfócitos - Testes Funcionais
Linfócito T – “in vitro” e “ex- vivo” - Métodos Avançados
♦ Elispot
♦ CTL por liberação de cromio (MHC – restrito)
♦Detecção de CTL por ensaio de tetramero
♦ Citotoxicidade NK e ADCC (MHC – não restrito)
Diagnóstico Laboratorial
Métodos celulares avançados:
♦Ausência de estandartização dos métodos
♦Estabilidade do sangue quando enviada para o laboratório especializado
♦Materiais de referência de difícil acesso
♦Outros?
Métodos celulares avançados:
♦Ausência de estandartização dos métodos
♦Estabilidade do sangue quando enviada para o laboratório especializado
♦Materiais de referência de difícil acesso
♦Outros?