Microscopia

PROF. ROMMEL BARRETO

Mestre em Morfologia (UFRJ)

PreparaPrepara ççãoão das das lâminaslâminas histolhistol óógicasgicas

RemoRemoççãoão dos dos fragmentosfragmentos de de óórgãosrgãos

Fixação

Desidratação (Álcool etílico)Concentração crescente (70%, 80%, 90% e 100%)

Clareamento ou diafanização

Impregnação e inclusão Micrótomo (± 7 Mm)

•• PescagemPescagem

Xilol (retirar o excesso de parafina)

Hidratação (Álcool etílico)(Concentração crescente 100%, 90%, 80%, 70%)

•• COLORACOLORAÇÇÃO:ÃO:•• CorantesCorantes ––--

HematoxilinaHematoxilina (B(BÁÁSICO) SICO) EosinaEosina((ÁÁCIDO)CIDO)

(corante azulado) (corante (corante azulado) (corante rosado) rosado) BASOFILIABASOFILIA

ACIDOFILIAACIDOFILIA (N(Núúcleo) cleo) (Citoplasma)(Citoplasma)

Tricrômico de Gomori - Cora tecidoconjuntivo (Verde).

Orceína cora fibras elásticas (marrom).

Impregnação pela prata(Impregna fibras reticulares).

Montagem da lâmina com lamínula eentelan.Observar ao microscópio óptico.

Micrótomo:

1 = ocular 2 = objetivas e revólver 3 = platina 4 = charriot5 = macrométrico 6 = micrométrico 7 = diafragma no condensador 8 = condensador 9 = botão do condensador

10 = dois parafusos centralizadores do condensador 11 = fonte de luz 12 = controle de iluminação 13 = diafragma de campo (alavanca no lado esquerdo do microscópio) 14 = dois parafusos de ajuste da lâmpada (esquerdo e direito) 15 = focalizadora da lâmpada (alavanca no lado direito do microscópio - não visível no fotografia)

Microscópio de luz

Histologia Histologia PREPARAPREPARA ÇÇÃO DE TECIDOS PARA EXAME MICROSCÃO DE TECIDOS PARA EXAME MICROSC ÓÓPICOPICO

Histologia Histologia PREPARAPREPARA ÇÇÃO DE TECIDOS PARA EXAME MICROSCÃO DE TECIDOS PARA EXAME MICROSC ÓÓPICOPICO

1000X

400000 X

Histologia Histologia PREPARAPREPARAÇÇÃO DE TECIDOS PARAÃO DE TECIDOS PARA

EXAME MICROSCEXAME MICROSCÓÓPICOPICO

•• FRACIONAMENTO CELULARFRACIONAMENTO CELULAR•• Organelas e outros componentes das Organelas e outros componentes das

ccéélulas e tecidos podem ser purificados e lulas e tecidos podem ser purificados e isolados por meio de uma tisolados por meio de uma téécnica chamada cnica chamada fracionamento celular.fracionamento celular.

•• O coeficiente de sedimentaO coeficiente de sedimentaçção de uma ão de uma partpartíícula depende de seu tamanho, forma, cula depende de seu tamanho, forma, densidade e viscosidade do meio em que densidade e viscosidade do meio em que estestáá suspensa.suspensa.

•• HISTOQUHISTOQUÍÍMICA E CITOQUMICA E CITOQUÍÍMICAMICA

•• Os termos Os termos histoquhistoqu íímicamica e e citoqucitoqu íímicamica são usados para são usados para indicar mindicar méétodos que identificam e todos que identificam e localizam substânciaslocalizam substâncias tanto tanto em em cortes histolcortes histolóógicos como emgicos como em ccéélulas cultivadaslulas cultivadas. V. Váários rios procedimentos são usados para obter este tipo de informaprocedimentos são usados para obter este tipo de informaçção, ão, a maioria deles baseados em reaa maioria deles baseados em reaçções quões quíímicas especmicas especííficas ou ficas ou em interaem interaçções de alta afinidade entre molões de alta afinidade entre molééculas.culas.

Histologia Histologia PREPARAPREPARA ÇÇÃO DE TECIDOS PARA EXAME MICROSCÃO DE TECIDOS PARA EXAME MICROSC ÓÓPICOPICO

Histologia Histologia Revisão de Citologia Revisão de Citologia

►Seres vivos :

Nível químico: Átomos � Moléculas Nível Celular : Células � Tecidos Nível Orgânico : Tecidos � Órgãos Nível Sistêmico : Órgãos � Sistemas Nível de Organismo : Sistemas � Ser Humano

Histologia Histologia Revisão de Citologia Revisão de Citologia

Células

Tecidos

Órgãos & Sistemas

Histologia Histologia Revisão de Citologia Revisão de Citologia

Histologia Histologia Revisão de Citologia Revisão de Citologia

•• PRINCIPAIS CONSTITUINTES DAS CPRINCIPAIS CONSTITUINTES DAS CÉÉLULASLULAS

•• As cAs céélulas eucariontes apresentam duas partes fundamentais: o lulas eucariontes apresentam duas partes fundamentais: o citoplasmacitoplasma e o e o nnúúcleocleo , corados pela , corados pela hamatoxilinahamatoxilina--eosinaeosina. Nesses . Nesses preparados o preparados o citoplasma aparece rcitoplasma aparece róóseoseo e o e o nnúúcleo fortemente tingido cleo fortemente tingido em azulem azul--escuro.escuro.

Histologia Histologia Revisão de Citologia Revisão de Citologia

•• Membrana PlasmMembrana Plasm ááticatica•• As membranas celulares são compostas, principalmente, por As membranas celulares são compostas, principalmente, por duas duas

camadascamadas de molde molééculas de culas de fosfolipfosfolipíídiosdios, com seus grupamentos não, com seus grupamentos não--polares (hidrofpolares (hidrofóóbicos) voltados para o centro da membrana. Os bicos) voltados para o centro da membrana. Os grupamentos polares (hidrofgrupamentos polares (hidrofíílicos) desses liplicos) desses lipíídios ficam nas duas dios ficam nas duas superfsuperfíícies da membrana.cies da membrana.

Histologia Histologia Revisão de Citologia Revisão de Citologia

•• Membrana PlasmMembrana Plasm áática tica –– junjun çção celular ão celular

Histologia Histologia Revisão de Citologia Revisão de Citologia

•• Membrana PlasmMembrana Plasm áática tica –– microvilosidadesmicrovilosidades

Histologia Histologia Revisão de Citologia Revisão de Citologia

ExocitoseFagocitose

Histologia Histologia

Revisão de CitologiaRevisão de Citologia ““ Energia Energia ““

Histologia Histologia

Revisão de CitologiaRevisão de Citologia ““ Ciclo de Krebs Ciclo de Krebs ““

Histologia Histologia Revisão de Citologia Revisão de Citologia

�� MitocondriaMitocondria

Histologia Histologia Revisão de Citologia Revisão de Citologia

�� Sistema de Sistema de EndomembranasEndomembranas√√ RetRetíículo Endoplasmculo Endoplasm áático Rugoso tico Rugoso √√ RetRetíículo Endoplasmculo Endoplasm áático Liso tico Liso √√ Aparelho / Complexo de Aparelho / Complexo de GolgiGolgi√√ LisossomoLisossomo

Histologia Histologia Revisão de CitologiaRevisão de Citologia

Histologia Histologia Revisão de CitologiaRevisão de Citologia

Histologia Histologia Revisão de CitologiaRevisão de Citologia

► O Núcleo CelularO núcleo é o centro de controle de todas as atividades celulares porque contém, nos cromossomos, todo o genoma (DNA) da célula, exceto apenas o pequeno genoma das mitocôndrias.► NucléolosOs nucléolos são as fábricas para produção de ribossomos.

Histologia Histologia Revisão de CitologiaRevisão de Citologia

Projeto GenomaAdenina, Timina, Citosina e Guanina, que se agrupam em pares e integram o DNA.Há cerca de 3,5 bilhões desses pares no corpo humano e, aproximadamente, 100 mil genes.

Histologia Histologia Revisão de CitologiaRevisão de Citologia

DNA descoberto por Watson e Crick em 1954

Histologia Histologia Revisão de CitologiaRevisão de Citologia

Histologia Histologia Revisão de CitologiaRevisão de Citologia

► DIVISÃO CELULAR

√ MITOSE É a divisão celular onde as células “ filhas “ , apresentam o mesmo número de cromossomos , que a célula “ mãe “

√ A MITOSE é responsável pela evolução , substituição e reparação dos órgãos e sistemas

√ MEIOSE É a divisão celular onde as células “ filhas “ , apresentam a metade do número de cromossomos , que a célula “ mãe “

√ A MEIOSE é responsável pela formação dos Gametas : Sptz e o Óvulo.