Post on 17-Apr-2015
MHC“Major Histocompatibility
Complex”&
Células Dendríticas
MHC
• Todas as espécies possuem um cluster de genes denominado MHC, cujos produtos são de importância para o reconhecimento intercelular e a descriminação self- nonself.
• Como já vimos que enquanto que um anticorpo pode reconhecer um antigénio na sua forma livre, as células T só o reconhecem quando associado a moléculas MHC: MHC influencia o reportório de resposta celular Thelper e T Citotóxico
MHC
Localização e função do MHC
• Self versus nonself– tecido transplantado histocompatível ou rejeitado se é
estranho
• Complexo HLA– MHC localizado no homem, no cromossoma 6 e nos
ratinhos no cromossoma 17 (H-2)
• Haplótipos e Polimorfismo– O set de alelos presentes numa dada região genética
(haplótipo)– Presença de multiplos alelos num locus genetico dentro
da espécie- diversidade MHC (polimorfismo)
MHC- peptidos self e non-self
Localização e função do MHC
• MHC Classe I– Os genes das moléculas MHC I codificam para
glicoproteinas expressa à superfície de quase todas as células nucleadas; a sua maior função é a apresentação de peptidos antigénicos a linfócitos TCD8+
• MHC Classe II– Os genes das moléculas MHC II codificam para
glicoproteinas expressas em APCs; a sua maior função é a apresentação de peptidos antigénicos a linfócitos TCD4+
• MHC Classe III– Estes genes codificam para várias proteinas com funções
diferentes no SI, incluindo componentes do sistema de complemento e moléculas envolvidas na inflamação
Estrutura do MHC Classe I• 3 domínios externos- a 1, 2 e 3• A cadeia alfa é polimórfica, com
cerca de 45 KDa.• Associada á cadeia polimórfica
está a 2 microglobulina com cerca de 12 KDa
• A 2 microglobulina é similar á região externa 3, mas não contem domínio transmembranar e não está covalentemente ligada
• O sitio de ligação-”binding” - do peptido está localizado no topo da superfície da molécula e “encaixa” um peptido com 8-10 aminoácidos
Estrutura do MHC Classe I
Domínios alfa 1 e 2 vistos de topo
• A interacção da 2 microglobulina e do peptido com a cadeia é essencial para a conformação molecular do MHC I
• Na ausência de 2 microglobulina as cadeias de MHC classe I não são expressas à superfície da célula (ex,ratinhos Ko 2 Microglobulina )
Estrutura do MHC Classe II
• 2 domínios alfa: 1 e 2 e 2 dominios beta: 1 e 2
• Todos os domínios alfa e beta são externos com uma âncora citoplasmática
• a porção distal da molécula classe II, formada por 1 e 1 forma o sítio de “binding” do peptido
Estruturas de MHC Classe II/I
Consideradas como membros da família das imunoglobulinas
MHCInteracção MHC-Péptido
MHCInteracção MHC-Péptido
• MHC Classe I MHC Classe II
• Domínio binding-peptido 1, 2 1, B1
• Natureza da ligação ao peptido fechado/flancos aberto/flancos
• Tamanho do peptido 8-10 a.a. 13-18 a.a.
• Resíduos envolvidos no binding nos flancos ao longo do pep.
• Conformação arco “hot-dog”
MHC e Resposta Imune
• Complexos de antigénios peptídicos e moléculas MHC são formados por degradação antigénica por 2 processos diferentes. As células que processam e apresentam os peptidos são as APCs
MHC e Resposta Imune
• 1- As moléculas MHC-restrictas provavelmente evoluiram para nos proteger de infecções virais: anticorpos são efectivos contra microorganismos livres, mas não com cél. Infectadas.
• 2- A resposta imune a um dado antigénio pode ser medida pela produção de Ig e de células Th ou Tc.
• 3- A regulação da expressão do MHC está entregue a factores de transcrição e citoquinas
MHC e Resposta Imune• Estudos em ratinhos demonstram que o haplotipo
MHC influencia a resposta imune e a capacidade de apresentação do antigénio; a variação nas sequências de aminoacidos (polimorfismo) ocorrem primariamente no sítio de “binding” do péptido
• A susceptibilidade a um grande número de doenças, predominantemente autoimunes, tem sido associada com certos alelos do MHC; o risco dessa susceptibilidade é determinado individualmente por factores hereditários e ambientais
Restrição MHC
• O reconhecimento do antigénio pela célula T requere que este seja apresentado á superfície de uma
molécula self-MHC.
• Este requerimento é chamado de restrição MHC, e na sua forma geral, as células TCD4+ são MHC
Classe II restritas e as células TCD8+ são MHC Classe I restritas
MHC II- Via exógena ou endocítica
MHC II- Via exógena ou endocítica
• Antigénios exógenos são internalizados por fagocitose e degradados por enzimas hidrolíticas dentro de compartimentos endocíticos; dentro do RER as quase formadas moleculas de MHC Classe II aínda possuem o sítio de ligação do peptido bloqueado por uma cadeia polipeptidica “invariante”, que é depois degradada deixando o fragmento CLIP ( class II- associated invariant chain peptide) no sítio de ligação do peptido.
• A reacção catalizada pela molecula HLA-DM permite aos antigénios peptidicos deslocar CLIP, sendo então o complexo peptido-MHC II transportado até á superfície da membrana plasmática
MHC I- Via endógena ou citosólica
MHC I- Via endógena ou citosólica
• Os antigénios endógenos são degradados em peptidos no citosol por um grande complexo enzimático denominado proteossomaproteossoma, que possui vários tipos de actividades; os peptidos resultantes são transportados para o lúmen do RER pela TAPTAP ( proteina heterodimérica ATP dependente).
• O “binding” do peptido estabiliza a associação entre a cadeia de classe I e a 2 microglobulina; o complexo classe I-peptido é transportado do RER, pelo complexo de Golgi até á membrana plasmática
MHC I- Via endógena ou citosólica
Proteínas Chaperons
MHC-Via endógena e exógena
APCs- Células Dendríticas
Características das DC
• Derivam de tecido mieloide ou linfoide e dispõem-se por todo o organismo como sentinelas (células Langerhan, foliculares,interdigitais periféricas, tímicas, etc...)
• Potentes APCs que expressam MHC Classe I e II
• Capacidade de apresentar antigénios a células T CD4+ e T CD8+
• Induzem rapidamente resposta imune após captura do antigénio na periferia e apresentação a células T no tecido linfóide
• Capazes de polarização de resposta T
Percurso das DC
Migração e Maturação de DC
IMATURAS
• Dendrites proeminentes
• Níveis baixos de MHC IIcitoplasmático
• Níveis baixos de moléculasco -estimulatórias e deadesão
• Elevada capacidadefagocítica
• Fraca estimulação dascélulas T
MADURAS
• Sem dendrites proeminentes
• Níveis elevados deexpressão de MHC I, II
• Níveis elevados demoléculas co-estimulatóriase de adesão
• Fraca capacidadefagocítica
• Forte estimulação dascélulas T
As células imaturas são altamentefagocíticas devido ao receptor DEC 205
O reconhecimento do antigénio podeocorrer via receptores Toll (+ NF-KB TNF-); receptores de complemento;receptores fagoc íticos (manose )
As células maduras não têm DEC 205 eexpressam B7.1, B7.2, MHC I e II, ICAM-1 e 2, LFA-1 e 3 e DCSIGN. LibertamCD-CK uma quimioquina que atraiespecificamente linfócitos T
A maturação traduz-se numamudança fenotipica CD86, CD40,MHC II, citoquinas , quimioquinas , ...
Células dendríticas- APC
DCs nos Centros Germinais
DCs nas Mucosas
Imunoterapia com DC
Imunoterapia Tumoral com DC