UBA III Biologia Molecular Biologia Molecular 1º Ano 2012/2013.
Prof. Odir Dellagostin Disciplina de Biologia Molecular.
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Prof. Odir DellagostinDisciplina de Biologia Molecular
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RNARNA – Ácido ribonucléico– Ácido ribonucléico
- mRNA- mRNA
- tRNA- tRNA
- rRNA- rRNA
- hnRNA- hnRNA
- snRNA- snRNA
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Estrutura de um gene eucarioto
Sítio de PoliAPromotor Região Codificadora
hnRNAAAAAAAAAAA
mRNA
AAAAAAAAAA
Exon
Intron
DN
AR
NA
CAP
CAP
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Transcrição em eucariotos
Requerem proteínas auxiliares: fatores de transcrição
RNA pol I Nucleólo rRNA28S, 18S, 5,8S
Várias subunidades
50-70%
RNA pol II Nucleoplasma hnRNA (transcrito primário)
snRNA
Várias subunidades 20-40 %
RNA pol III Nucleoplasma rRNA 5S
tRNAs
Várias subunidades
10%
RNA pol Mitocondrial
Mitocôndria 01 subunidade
RNA pol de Cloroplastos
Cloroplasto Similar as bacterianas
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Estrutura de Promotores da RNA Pol II
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Tata Binding Protein
Promotores de genes transcritos pela RNApol II
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TFIIDTFIID = = TBP + 10 TAFs
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Proteínas necessárias para transcrição a partir de promotores reconhecidos pela RNA Pol II
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IntroduçãoTranscrito primárioTranscrito primário
Pré-RNAPré-RNA
Precursores de RNA Precursores de RNA (hnRNA)(hnRNA)
Processamento Processamento
RNAs funcionais (mRNA)RNAs funcionais (mRNA)
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Algumas informações sobre íntrons3,7 íntrons por kb de região codificadoraNo homem o número médio é de 5 íntrons
por gene94% dos genes contém íntronsO tamanho médio dos íntrons é de 125 pbO tamanho médio dos éxons é de 90 a
120 pb (30 a 40 aa)
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Splicing de íntrons de mRNA
Características de íntrons de mRNA
- Adenina localizada 20 a 50 nt da extremidade 3’ do íntron
- Região rica em pirimidinas na extremidade 3’ do íntron
- Regra GU-AG
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Íntrons na região codificadoraÍntrons na região codificadora
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SplicingSplicing- Spliceossomo: formado por proteínas e snRNPs
- Estrutura montada assim que o íntron é transcrito
- Reação em cascata direcionada pelo pareamento de bases
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Cis-splicingCis-splicing
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Trans-splicingTrans-splicing
- Ascaris lumbricoidesAscaris lumbricoides
- TripanossomasTripanossomas
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Splicing alternativoSplicing alternativo
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Splicing alternativoSplicing alternativo
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Transporte ativo para o citoplasmaTransporte ativo para o citoplasma
Spliceossomo – 3000 kDaSpliceossomo – 3000 kDa
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Erros no processo de splicingErros no processo de splicing
• Mecanismo de proteção contra RNAs incorretosMecanismo de proteção contra RNAs incorretos
Localização do códon de terminaçãoLocalização do códon de terminação
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4- Splicing de íntrons de tRNA4- Splicing de íntrons de tRNA
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A presença de íntrons nos genes eucarióticos, aparentemente,
representa um enorme desperdício celular
Então, por que a evolução nos presenteou com estas seqüências?
Mecanismo de proteção contra mutações? Diversidade: genomas e proteomas (splicing alternativo)? Regulação gênica?...
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Adição do CAPAdição do CAP
Fosfo-hidrolaseGuanilil-transferase
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Cauda poli ACauda poli A
Poli(A)-polimerase
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Processamento dos rRNAsProcessamento dos rRNAs
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Processamento de precursores de tRNA
tRNA maduro
Modificação das bases Processamento
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Modificação de nucleotídeosModificação de nucleotídeos
- rRNA e tRNA
- Metilação de bases, da ribose (C2)
- Catalizadas por várias enzimas