Artigo científico

José Osvaldo Barbosa NetoAnestesiologista

INTRODUÇÃOA rede de modulação da dor no cérebro tem

papel ativo no controle das respostas espinhais à dor, de tal forma que a sua percepção é influenciada por estado de alerta, atenção e expectativa.

A experiência dolorosa se inicia desde a infância, e o estímulo nóxico ativa até os cérebros mais novos de recém-nascidos.

Existem evidências de que a saúde da criança e suas experiências dolorosas moldem a resposta à dor durante sua vida adulta.

INTRODUÇÃOConhecimento prévio

Microestimulação da Medula Ventral Rostral (MVR) é pró-nociceptiva até o 21º dia pós-natal, a partir do qual, passa a ser anti-nociceptiva.

Controle da dor feito pela MVR decorre da ação de opióides de ação central.

Opióides endógenos tem papel na sinaptogenese e no desenvolvimento cerebral, porem o sua importância no crescimento e desenvolvimento de vias dolorosas não é conhecido.

INTRODUÇÃOHipóteses

Dado o fato da MVR ser pró-nociceptiva até a 21º semana pós-natal, microinjeções de agonista μ-opióides neste núcleo ativaria a via de controle nociceptivo descendente, mas o efeito seria facilitatório.

Redes de opióides teriam papel trófico na maturação das vias supraespinhais de controle da dor e que a transição de facilitação para inibição depende de sinalização por opióides endógenos no cérebro imaturo.

MétodoMicroinjeção na MVR e estimulação elétrica.

Animais anestesiados com isofluranoCateter e eletrodos de estimulação bipolar foram inseridos

no cérebro do animal através de trepanação guiada por extereotaxia.

Injeção das soluções estudadas em um período de 5minEstimulação elétrica feita por pulso de 500 microssegundos a

10 Hz, e amplitudes variando de 5 à 200 µAEstudo dose-resposta foi feito antes e depois da intervenção.

Drogas utilizadas no estudo.

DAMGO 3, 10,e 30 ng µ-agonista

D[Ala]-deltorphin II, 30, 300, e 1000 ng

δ- agonista

Gabazine 10ng GABAA - antagonista

CTOP 100ng µ-antagonista

naloxone hydrochloride Antagonista opióide

MétodoEstudo Eletromiografico (EMG)

Animais anestesiados com isoflurano (anestesia leve).Eletrodo bipolar de agulha concêntrica foi inserido

no bíceps femoral lateral.Diferentes filamentos de Von Frey foram utilizados

seqüencialmente para identificar o limiar de retirada.Limiar de retirada foi determinado como o filamento

de Von Frey que produziu atividade de EMG 10% maior que a atividade basal.

Os animais foram dividos em grupos P21 e P40 e avaliados por EMG antes e depois de estimulação da MVR

Método

Excitabilidade reflexa espinhal

MétodoColocação de bomba osmótica de Naloxona.

Soluções: Hidrocloreto de Naloxona Metiodeto de Naloxona

Idade: P14, P21 e P28.

Infusão: Infusão de 1 µL por hora por 7 dias

Avaliação EMG antes e após estimulação da MVR.

Outro grupo com Morfina ou Solução salina em ratos com P7.Recebeu droga por 7 dias e aguardou até P21 para

avaliação.

MétodoAvaliação comportamental dos limiares

mecânicos de retirada.Aplicação de filamentos de Von Frey na pata.

O filamento que provoca duas respostas de retirada era considerado o limiar de retirada.

Injeção intra-peritoneal Injeção de hidrocloreto de naloxona (2 mg/kg),

metiodeto de naloxona (2 mg/kg), sulfato de morfina (2 mg/kg), CTOP (0.1 mg/kg), ou solução salina

Reavaliação após 30min.

MétodoImunohistoquímica

Imunohistoquímica para receptor µ-opioide foi feita em tecido cerebral de animais tratados com hidrocloreto de naloxona ou solução salina entre P21 e P28.

O número médio de células positivas para receptores na região da MRV por grupo foi calculado e comparado.

Reação de cadeia de polimeraseRNA foi retirado de ratos P21 e P40 e utilizados

para síntese de DNA. Primes para receptores µ-, κ-, e δ-opióides foram utilizados e um sistema baseado em verde foi utilizado para detecção.

MétodoEstatística

Testes t-student, ANOVA, Kruskal-Wallis

ResultadosAtivação de receptor µ-opióide na MVR

facilita o reflexo de retirada em ratos jovens e inibe em adultos.

ResultadosOs reflexos nociceptivos na pré-adolescencia

estão sob controle facilitatório tônico pelos receptores opióides, mediados em parte pela MVR.

ResultadosAtividade de opióides endógenos durante um

período crítico na pré-adolescencia é fundamental para maturação funcional do controle supra-espinhal inibitório de dor exercido pela MVR.

ResultadosImunohistoquímica

ResultadosPCR

ResultadosAdministração crônica de morfina no início

da vida acelera a maturação do controle inibitório exercido pela MVR.

Discussão Embora o conhecimento à respeito das vias neurais e sistema

de neurotransmissores que medeiam o controle inibitório de dor descendente tenha crescido, falta o entendimento de como estas vias se estabelecem no inicio da vida e como se dá seu amadurecimento ainda é escasso.

Os resultados deste trabalho apontam para um papel chave da rede de modulação da dor na maturação das vias de controle descendentes.

Devido o fato das células “On” serem responsáveis pela expressão de receptores µ, especula-se que esta sejam as células que sofrem modificação pela sinalização opióide.

O período pós-natal, seja em humanos ou animais, é caracterizado por baixo limiar para estímulos térmicos e mecânicos, assim como resposta inapropriada e exagerada à estímulos nóxicos.

DiscussãoImportância das vias descendentes no desenvolvimento

pós-natal. A presença de facilitação tônica surgindo da ativação

da MVR por opióides endógenos em animais jovens parece contribuir com a excitabilidade dos circuitos nociceptivos espinhais nestes animais.

O desenvolvimento das vias supraespinhais descendentes ocorre durante um período crítico relativamente tardio na vida pós-natal, durante a 4ª semana.

Neste período, sinalização feita por opióide é necessária para mudança facilitação para inibição na via descendente.

ConclusãoRatos pré-adolescentes tem um sistema de

controle tônico de dor descendente mediado por receptor µ-opióide que facilita transmissão de dor, ao invés de inibir.

Com amadurecimento do sistema, este torna-se inibitório.

O surgimento deste balanço facilitação/inibição depende de níveis normais de atividade opióide do SNC durante um período crítico.