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III SIMPÓSIO ESTADUAL DE INFECÇÃO HOSPITALAR EXPERIÊNCIA DO INSTITUTO ADOLFO LUTZ NA INVESTIGAÇÃO DE SURTOS TÂNIA MARA IBELLI VAZ Instituto Adolfo Lutz

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III SIMPÓSIO ESTADUAL DE INFECÇÃO HOSPITALAR

EXPERIÊNCIA DO INSTITUTO ADOLFO LUTZ NA INVESTIGAÇÃO DE SURTOS

TÂNIA MARA IBELLI VAZ

Instituto Adolfo Lutz

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• GRAM POSITIVOS – Cocos / bacilos

BACTÉRIAS DE IMPORTÂNCIA EM INFECÇÃO HOSPITALAR

• GRAM NEGATIVOS – Cocos / bacilos

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BACILOS GRAM NEGATIVOS (BGN)

Importância em infecção hospitalar

- ENTEROBACTÉRIAS

- BGN NÃO FERMENTADOR

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Família Enterobacteriaceae

Classificação: Gêneros (42)

Espécies (centenas)

• Enteropatógenos clássicos (diarréias)

• Infecção hospitalar - espécies importantes

• Outras espécies - raras em material clínico

• Espécies que não são isoladas em material clínico

Patógenosoportunistas

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Enteropatógenos clássicos (diarréias)

• Salmonella

• Shigella

• E.coli diarreiogênica (EPEC,ETEC,EHEC,EAEC, DAEC)

• Y. enterocolitica

FAMÍLIA Enterobacteriaceae

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Escherichia coli

Klebsiella pneumoniae

Klebsiella oxytoca

Proteus mirabilis

Enterobacter spp

Salmonella (sorotipos)

Serratia marcescens

Citrobacter spp

Providencia spp

FAMÍLIA Enterobacteriaceae

Infecção hospitalar

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Meio IAL(Pessoa e Silva)

Identificação presuntiva

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PRINCIPAIS GÊNEROS

Pseudomonas, Burkholderia, Stenotrophomonas,Ralstonia,

Brevundimonas, Comamonas e Acidovorax

Acinetobacter , Moraxella, Shewanella, Chryseobacterium

Achromobacter, Alcaligenes,Agrobacterium, Ochrobactrum

Outros BGN NF

BGN NÃO FERMENTADOR

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Principais espécies de BGN Não Fermentador

Pseudomonas aeruginosa infecções graves e fatais

Acinetobacter baumannii

Burkholderia cepacia

Stenotrophomonas maltophilia

Chryseobacterium meningosepticum infecções graves e fatais

Achromobacter xylosoxidans

Achromobacter piechaudii

Ochrobactrum anthropi

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Conjunto de características morfológicas e metabólicas

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-Utilizados por muitos laboratórios clínicos

- Permitem a identificação dos microrganismos em nível de espécie.

- Resultados rápidos

• SISTEMAS COMERCIAIS E AUTOMATIZADOS

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- Laboratórios de Referência

- Espécies não identificadas

- Espécies atípicas e raras

• SISTEMAS CONVENCIONAIS Testes bioquímicos

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Clínica

Falsos surtos

Não identificação do surto (BGN NF)

Permite a detecção de espécies raras e atípicas

como causa de surtos

IDENTIFICAÇÃO DA ESPÉCIE

Pode ser a primeira pista da ocorrência de um surto

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MÉTODOS DE TIPAGEM

Identificação de uma cepa particular em uma espécie

• Escolha do método – depende da espécie

- MÉTODOS FENOTÍPICOS

- MÉTODOS GENOTÍPICOS

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MÉTODOS FENOTÍPICOS

ANTIBIOGRAMA SOROTIPAGEM

FAGOTIPAGEM

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-RIBOTIPAGEM

-PULSED FIELD GEL ELECTROPHORESIS (PFGE)

-PERFIL PLASMIDIAL

-RAPD (Randomly amplified polymorphic DNA)

MÉTODOS MOLECULARES:

PCR

PFGE

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Enterobacter cloacae e Enterobacter agglomerans

Surto de bacteriemia – solução de nutrição parenteral

73 amostras – 3 laboratórios IAL (VE)57 E.cloacae / 7 – sangue16 E.agglomerans / 2 sangue

E.Cloacae (sangue e soluções)

Biotipo 26Sorotipos O3Ribotipo E1B1Perfil de S: CX CF AP GN

Outros tipos foram encontrados em algumas bolsasONT, O19, O14

E.Agglomerans

Ribotipo E6B6S - a todas as drogas

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Enterobacter cloacae e Enterobacter agglomerans

Surto de bacteriemia – solução de nutrição parenteral

E.Cloacae E.agglomerans

Ribotipos BamHI

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

Kb

6.3

3.2

Ec O3

Perfil plasmídial Ribotipagem EcoRI e BamHI

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Surto Infecção Hospitalar

Kluyvera sp

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

Kb

6.3

3.2

1.5

4,5,6,7, Kluyvera sp

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Surto de bacteriemia por Pseudomonas aeruginosa em uma unidade de hemodiálise

Hemocultura de 11 pacientes .........P.aeruginosa (4)

Água – P.aeruginosa e/ ou B. cepacia

Sorotipos PiocinotiposRibotipos

Amostras dos pacientes e uma da água de hemodiálise:

O15 P10 AP CF CL CO CX TT E1B1

Outras amostras de água : O4 O7,8 O10 O11

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Surto de Klebsiella pneumoniae ESBL +

berçário

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

PFGE

KB

1,15 Padrão de massa molecular, 5- 11,13,14 -(KI)